葡萄细菌性病害

葡萄细菌性病害

在我国已发现的细菌性病害只有葡萄根癌病。世界上还有皮尔斯氏病、细菌性疫病等细菌性病害。

第一节 葡萄根癌病

葡萄根癌病是由根癌土壤杆菌引起的一种世界性病害。此菌寄主范围广，可侵染93科331属643种植物，为害多种果树、林木、花卉，甚至瓜类，在生产上造成非常大的损失。我国受害较重的树种有桃树、樱桃、葡萄、梨、苹果、李子等果树。

一、症状

植物被根癌病菌侵染后，在植物的根部(有时在茎部，所以也称冠瘿病)形成大小不一的肿瘤，初期幼嫩，后期木质化，严重时整个主根变成一个大瘤子。病树树势弱，生长迟缓，产量减少，寿命缩短。重茬苗圃发病率在20%～100%不等，有的甚至造成毁园。

葡萄根癌菌是系统侵染，不但在靠近土壤的根部、靠近地面的的枝蔓出现症状，还能在枝蔓和主根的任何位置发现病症。但主要在主蔓上，呈现瘤状病症(彩图8-1-1至彩图8-1-6)。

二、病原

根癌病病菌是土壤杆菌属(Agrobactium spp.)的细菌。十几年之前，土壤杆菌属的细菌是根据致病性划分种：没有致病性的是放射土壤杆菌(A.radiobacter)；引起根癌病的是根癌土壤杆菌(A.tumefaciens)；引起发根的是发根土壤杆菌(A.rhizogenes)。引起根癌病的根癌土壤杆菌(A.tumefaciens)根据生理生化性状，分为三个生物型：Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型。引起葡萄根癌病的主要是生物Ⅲ型。

1990年之后，Ophel&Kerr、Sawada、Bouzar等改变了原来种的分类方法，把生物型上升为种，由致病性所带的质粒作为定种的依据：把生物Ⅲ型的根癌土壤杆菌定名为葡萄土壤杆菌(A.vitis)；生物Ⅰ型的根癌土壤杆菌定名为根癌土壤杆菌(A.tumefaciens)；生物Ⅱ型的根癌土壤杆菌定名为发根土壤杆菌(A.rhizogenes)。细菌细胞中带Ti质粒就导致根癌；带Ri质粒就引起发根；不带致病质粒就没有致病性，以区别各种。

三、发病规律

病原菌附着在寄主细胞上，受伤植物所合成的细胞代谢物活化Vir(毒力)基因，激活的Vir基因能加工和转移Ti质粒中的一个片段T-DNA，转移到植物细胞的T-DNA整合到植物染色体组，并稳定维持。转移和整合的T-DNA，含有编码合成两种生长剂(生长素和细胞分裂素)的基因，还含有一类群氨基酸衍生物(冠瘿碱，opine)的基因，影响植物激素的合成，导致植物肿瘤的发生。

根癌土壤杆菌(A.tumefaciens)是局部侵染；葡萄土壤杆菌(A.vitis)是系统侵染。

四、防治技术

根据根癌病的侵染特点和致病机制，当发现根癌症状时，就证明T-DNA已经转移到植物的染色体上，这时使用杀菌剂杀灭病原细菌，已无法抑制植物细胞的增生，也无法使肿瘤症状消失。因此根癌病的防治策略必须要预防为主。具体防治方法如下。

（一）解决土壤带菌问题

土壤消毒是非常有效的方法，但成本比较高。可以使用甲基溴(溴甲烷)熏蒸等措施进行土壤消毒。

（二）加强苗木检疫和种条、种苗的消毒

对于没有根癌病的地区和田块，苗木引进要经过严格检验检疫，不要从有根癌病的地方或苗圃引进苗木，并且在种植前进行消毒。消毒的方法为100倍硫酸铜水，加热到52～54℃，浸泡苗木5分钟；或用52～54℃的清水浸泡苗木5分钟，然后用80%水胆矾石膏200倍液涮苗木，使苗木的根、枝蔓均匀着药。苗木处理后，再栽种。

（三）减少伤口和保护伤口

根癌菌是以伤口作为唯一的侵染途径，而且是以同样的致病机理使植物发病，因此，减少伤口和保护伤口是最好的防治方法。

尽量减少伤口：对于葡萄来讲，减少冻害是最主要的方面。防止早期落叶(后期病害的防治)，保障枝条的充分成熟和营养的充分贮藏是减少冻害的基础；做好冬季的防寒措施是减少冻害的辅助条件。此外，栽培上要尽量减少伤口。

保护伤口：为伤口提供化学保护，可以使用化学制剂也可以使用生物制剂。

（四）抗性品种的应用

利用抗性品种和抗性砧木，是防治根癌病的很好的思路，但是，目前还没有发现抗性很好的品种或砧木。

（五）药剂防治

许多人探讨用化学药剂防治植物根癌病，但没有发现有效的化学药剂防治(除土壤处理)方法，原因是药剂的持续时间短或成本高等原因，从而不能在生产上广泛应用。

（六）生物防治

20世纪70年代，澳大利亚的A.Kerr发现一株放射土壤杆菌(A.radiobacter 84)对桃树根癌病有抑制作用，从此为根癌病的防治提供了一条有效的途径，并在澳大利亚制成商品制剂。可以用于葡萄根癌病防治的放射土壤杆菌有：

F2/5：1985年南非Staphorst从葡萄根癌病组织中分离获得，不致病，原名是A.radiobacter(放射土壤杆菌)，生物Ⅲ型，新名称应为属A.vitis，产生农杆菌素。

J73：1986年南非Webster从李树根癌中分离到，本身是病原菌，但对葡萄不致病，且能通过产生农杆菌素抑制葡萄根癌病的发生，原名是A.radiobacter，生物Ⅰ型，新名称应为属A.tumefaciens。目前J73已消除了Ti质粒而无致病性。

HLB-2：1986年陈晓英等从山东啤酒花根癌中分离获得，无致病性，原名是A.radiobacter，生物Ⅰ型，新名称应为属A.tumefaciens，能产生农杆菌素。

MI15：1986年游积峰等从内蒙古葡萄根癌病组织中分离获得，原名是A.radiobacter，生物Ⅰ型，新名称应为属A.tumefaciens。

E26：1990年梁亚杰等从葡萄根癌病组织分离，原名是A.radiobacter，生物Ⅲ型，新名称应为A.vitis，无致病性，能产生农杆菌素。

据中国农业大学植保学院的试验，生防菌株E26对来自葡萄的12株生物Ⅲ型根癌菌(A.vitis)全部具有抑制作用，而且对生物Ⅰ型和生物Ⅱ型的部分根癌菌也有很好的抑制作用，是一个很有潜力的生防菌。

中国农业大学植保学院把E26菌株制作成抗根癌菌剂Ⅱ号湿粉剂，用于葡萄根癌病的防治。处理时间：栽种或移植前，浸沾根部，使菌剂附在植株体表即可。使用方法：将菌剂加1～2倍水后调匀蘸根。注意事项：防止日晒；蘸根后立即覆土，防止干燥；避免与强酸或强碱等接触。

第二节 葡萄皮尔斯病

葡萄皮尔斯病在我国还没有发现，在此介绍一下，请大家参考和注意。如果我国没有这些病害，希望通过检疫措施和大家的努力，把这些病害拒之门外。

皮尔斯病又被称为热斑病，1884年美国首次发现葡萄皮尔斯病，在加利福尼亚州曾有4次大流行，先后毁灭了数十万亩葡萄园，其中洛杉矶就有5～7年生的葡萄几乎全部死亡，对几个州的葡萄酒行业造成严重危害。该病普遍发生于美洲冬季暖和的地区，包括美国加利福尼亚州到佛罗里达州的广大地区，曾经毁灭过很多葡萄园。目前除美国、墨西哥和中南美洲的一些国家外，在欧洲(如法国等)一些国家也有报道。

一、症状

病株在早春发芽晚，新梢生长缓慢，矮化、不结实或结实少，枝条最初出现的8片叶，叶脉绿色，沿叶脉皱缩，稍变畸形，以后再长出的叶片不再显示症状，只是在生长的中后期(晚夏)才出现局部灼烧的症状。灼烧一般沿叶脉发生，后逐渐变黄褐，灼烧区大小不定，呈带状从边缘向叶柄扩展。秋天病叶提早脱落，枝条上只留下叶柄。在叶片显症之后，枝条上的果实便停止生长，并凋萎、干枯，或提前着色，但不是真正的成熟。枝条成熟不一致，颜色斑驳，未成熟的易受冻枯死。根部早期生长正常，严重时枯死，直至根茎部干枯死亡。该病对葡萄植株是致命病害。病株可以在几个月内死亡，也可以存活几年，一般幼树得病后，重者会造成当年死亡。

二、病原

历史上皮尔斯病的病原被认为是病毒，因为应用常规培养基不能培养，通过嫁接和昆虫传播；有人把它当作类立克次体细菌（Rickettsia-like bacteria）或类立克次体（Rickettsia-like organism）。直到1978年M.J.Davis等第一次在培养基上分离培养成功后，才证实是一种难以培养的细菌Xylella fastidiosa Wells et al.。菌体短杆状，单生，细胞膜外有明显的波纹状细胞壁，对青霉素表现敏感。大小为（1～4）微米×（0.25～0.5）微米，革兰氏阴性，不游动，无鞭毛，过氧化氢酶阳性，严格好氧，非发酵，非嗜盐，无色素沉积。在特殊培养基如BCYE、JD-3等上可以生长，菌落有两种形态：一种为凸起到稍凸起，光滑，乳白色，边缘粗糙或全缘；另一种为纽扣状，边缘具细波状纹。适温26～28℃，适宜酸碱度pH值6.5～6.9。

三、发病规律

皮尔斯病病原体主要在葡萄和其他寄主内越冬。该病菌的寄主范围非常广泛，有28种以上，除了为害葡萄属植物外，还能侵染豆科、禾本科、蔷薇科等一年生和多年生的木本植物和野生杂草等。该病可由葡萄的繁殖材料传播，也可由吸食木质部养分的害虫所传播，主要是各种叶蝉和沫蝉。这些昆虫通过吸食病株木质部和其他寄主上的汁液，在病、健树之间相互传染。但在韧皮部吸食的一些叶蝉偶然刺入木质部组织不能传播细菌，有研究表明，当病株内病原体浓度高时，菌体集聚，使葡萄树产生侵填体和树胶，堵塞树干维管束组织，限制了水分的输导或因病菌产生毒素而引起此类症状的出现。在美国西部，病菌是从葡萄园外围植被传入的，葡萄植株之间不传播。相反，在美国东部，得病葡萄是侵染源。

昆虫介体是流行的最主要因素。昆虫介体吸食带病植株后，经过2小时左右的循回期，就能够传病；若虫和成虫具有同等的传病能力。介体在野生寄主越冬，第二年传到葡萄上，成为重要的侵染源。

四、检验和防治方法

（一）检验方法

检验方法比较多。①用酸化甲醇处理成熟的木质部的切面，病株木质部被染成红色。②真空抽取葡萄枝蔓的滤液，离心后，利用相差显微镜检查。③直接或间接免疫荧光法等。④分离培养，接种验证等。

（二）防治方法

（1）严格检疫。防止皮尔斯病传播，最关键是要禁止从疫区引进苗木。苗木要经过温水消毒，在45℃热水浸约3小时，50℃热水20分钟可消灭皮尔斯病的病原菌（Xylella fastidiosa）。

（2）搞好园内卫生。要经常清洁葡萄园，铲除杂草，消灭传毒媒介和寄主植物侵染源。

（3）防治媒介昆虫。在叶蝉和沫蝉等昆虫集中活动时期喷施80%敌敌畏2000倍液进行防治。

（4）选用抗病品种。品种之间具有显著的抗性差异。常发重病园，应注意选栽抗病品种，此方法已成为美国和美洲热带区防治皮尔斯病的有效手段。

（5）药剂防治。施用四环素、青霉素（40万单位）5000倍液及其他抗菌素，对减轻病害的危害具有一定的作用。