Study on the Diversity of Plum Anthracnose Fungal Pathogen Isolated in Wuhan
Study on the Diversity of Plum Anthracnose Fungal Pathogen Isolated in Wuhan
梅树炭疽病是梅树上的主要病害，在武汉地区，从4～10月份都有发生。从梅雨季节开始炭疽病开始大流行。2006～2007年8月调查，武汉地区的梅树炭疽病发病率高达97%以上。笔者从东湖梅园采集炭疽病标本。用常规组织分离法对病组织进行了分离，再进行单孢分离；采用柯赫氏法则给予回接鉴定，确认为炭疽病的病原。所有菌株均在PDA平板上于25℃下培养，并于PDA试管斜面上4 ℃保存。
共分离获得22个菌株，研究发现这些菌株在菌落形态、色素分泌、产孢、孢子形态等存在显著的差异。可将这些菌株分成7种类型，其中Ⅰ型菌株：菌丝颜色为白色到灰黄色，菌丝生长较稀疏易产拟菌核和大量橘红色分生孢子团，分生孢子12.5～15μm×4.5～5.5μm；Ⅱ型菌株：菌丝颜色为灰黄色，菌落扩展速度最慢，易产生菌核不易产生分生孢子团，分生孢13.8～16μm×5～7.5μm；Ⅲ型菌株：菌丝颜色为白色较为稀疏，菌落扩展较慢，能产生大量的拟菌核和分生孢子团，菌核较Ⅰ型小且多，分生孢子15～20μm×5～6.3μm；Ⅳ型菌株：菌丝颜色为墨绿色，菌丝生长茂盛，菌落扩展最快，较少产拟菌核和分生孢子团，分生孢子12.5～13.8μm×3.8～5.5μm；Ⅴ型菌株：菌丝颜色为中间墨绿色边缘白色，菌丝生长致密气生菌丝少，菌落扩展较快，易产生大量的拟菌核但不产生分生孢子团，菌核较Ⅲ型菌核小且多，分生孢子10.5～12.5μm×3.8～5μm；Ⅵ型菌株：菌丝颜色为纯白色，菌丝生长茂密厚实，菌落扩展较快，不易产生拟菌核和分生孢子团，分生孢子18.7～22.1μm×7～10.5μm；Ⅶ菌株：菌落颜色为白色，菌丝生长密实，较Ⅵ型气生菌丝少，菌落易扇变，也不易产生拟菌核和分生孢子团，分生孢子13.8～15μm×5～7.5μm。
将这7种类型菌株分别在梅树及樱树、桃树、梨树、苹果树、杏树和山楂等蔷薇科果树上的致病力进行了比较。结果表明这7种类型的菌株在这些植物上致病力存在显著的差异。其中：Ⅰ型菌株M17对上述植物的致病力最强，刺伤接种后在这些植物叶片上均能形成典型的病斑，病斑的大小因接种植物不同而略有差异，如在梅花、梨树、桃树、樱树、杏树、山楂和苹果等植物叶片上形成的病斑大小分别为：（2.7±0.2）cm、（2.5±0.2）cm、（2.3±0.2）cm、（2.1±0.2）cm、（1.9±0.2）cm、（1.9±0.2）cm和（1.3±0.2）cm；但在不刺伤的条件下，菌株M17仅能在樱树、梨树、桃树、山楂树等叶片上形成病斑。Ⅲ型菌株M11-1的致病力最弱，仅能在刺伤叶片上形成较小的病斑，如在梅花、桃树、苹果、樱树、杏树、梨树和山楂等植物叶片上形成的病斑大小分别为：（0.73±0.2）cm、（0.36±0.2）cm、（0.32±0.2）cm、（0.30±0.2）cm、（0.65±0.2）cm、（0.5±0.2）cm和（0.45±0.2）cm。所有上述菌株对吉祥草、高粱、大叶黄杨、黄瓜和豇豆等植物均不致病。
利用引物对PITS1和PITS4扩增这些菌株的ITS DNA片段，连接至T-载体后，转化
