研究苹果对炭疽菌叶枯病的抗性遗传规律，对筛选与炭疽菌叶枯病抗性基因连锁的分子标记，利用分子标记辅助育种有着极其重要的意义。4个杂交组合的F1 单株进行了苹果炭疽菌叶枯病的抗性鉴定，以期揭示苹果炭疽菌叶枯病的抗性遗传规律，为发掘与抗性基因紧密连锁的分子标记，开展苹果抗炭疽菌叶枯病分子育种奠定基础。这充分显示不同品种 （系） 对苹果炭疽菌叶枯病的抗性差异明显，遗传性对苹果炭疽菌叶枯病的抗性起着主导作用，同时也证实了上述品种 （系） 可以作为苹果炭疽叶枯病遗传规律研究的典型材料。综合上述研究结果，可以确定苹果对炭疽菌叶枯病的抗性由隐性单基因控制。综合不同杂交组合的亲本及后代对苹果炭疽菌叶枯病抗性的表型性状分析结果，可以假设本试验群体中，对苹果炭疽菌叶枯病表现为抗病的植株基因型为rr，感病植株为 RR或 Rr，并由此推测出供试亲本品种 （系） ‘

培育抗病品种是一种经济有效的手段，成为解决苹果炭疽菌叶枯病的首选。引物序列如表3-1中所示，因为这两个标记已被报道位于苹果15号连锁群上 （Liebhard et al.，2002），所以将苹果炭疽菌叶枯病抗性基因 （命名为Rgls） 位点定位于15号连锁群上。据统计，大约有163426个 SSR 位点公布在苹果17条染色体上 （关玲等，2011）。这有可能是由于当前的苹果基因组重叠群序列产生装配错误，也有可能是苹果基因组中染色体结构的变异造成的。本研究首次开展了与抗炭疽病叶枯病基因 R gls位点紧密连锁的分子标记的筛选，并构建了第一张与抗性基因 R gls位点紧密连锁的分子标记遗传图谱。

苹果是我国种植面积最大的水果，目前全国苹果种植面积达190万hm2以上，产量达2110万t，居世界前列[1]。近几年来，苹果腐烂病在我国尤其是冀北地区，连续多年中偏重到大发生，已成为对苹果生产影响最大的病害，严重制约着我国苹果产业的健康发展。苹果腐烂病又称串皮湿、臭皮病、烂皮病，是一种发生范围广、为害程度重、损失极大的苹果树病害，全国各苹果产地均有发生，尤其是近10多年来在全国各地蔓延较迅速。苹果腐烂病的病原物是苹果黑腐皮壳，属子囊菌亚门真菌。苹果腐烂病菌是一种寄生性很弱的兼性寄生菌，具杀生寄生性。健身栽培是目前生产无公害苹果最有效、最根本、最安全、最经济的手段，也是防治苹果腐烂病的最重要手段。

苹果嫩叶总RNA的提取方法如下。（1） 将500 μl裂解液RLT Buffer、50 μl PLANTaid、5 μl β-巯基乙醇，依次加入灭菌的1.5 ml离心管中，混匀，待用。（2） 将冻存于-70℃下的苹果嫩叶0.2 g置于预冷的研钵中，加少量液氮快速研磨成细粉状后转入上述待用的的离心管内 （样品容易褐化，动作要迅速，并保证液氮挥发完全）。一般情况下，在苹果 F1 群体中，由于每个位点的碱基均来源于双亲中的一个，所以在基因组中大部分区域的 SNP-index都在0.5附近。以上结果说明，5个候选基因均受炭疽菌叶枯病病菌的诱导，是苹果炭疽菌叶枯病抗病相关基因。SNP 标记的开发主要依赖于含有大量测序序列的数据库。Khan 等（2012） 利用2875个分子标记构建了苹果的整合遗传图谱，其中包含了2033个 SNP 标记和 843 个 SSR 标记，总长为 1991.38 cM。

苹果根系一年有3次生长高峰。土壤含水量达到田间持水量的60%～80%最适合苹果根系生长。苹果的芽按性质分为叶芽、花芽两种。苹果的花芽为混合芽。叶芽萌发要求的平均温度为10℃左右。苹果是异花授粉植物，大部分品种自花不能结实。苹果一般有4次落花落果。第一次在末花期，称为落花。原因是未能受精的花。防治轮纹病、炭疽病，每隔15d左右喷药1次，重点在雨后喷药。斑点落叶病病叶率30%～50%时，喷布多抗菌素或异菌脲。同时采前20d全园喷布生物源制剂或低毒残留农药，如1%中生菌素或百菌清或27%铜高尚悬浮剂，用于防治苹果轮纹病和炭疽病。树干绑草把诱集叶螨。果实除袋后在树冠下铺设反光膜，同时进行摘叶、转果。检查并处理苹果小吉丁虫及天牛。拣拾苹果轮纹病和炭疽病的病果。(4)落叶后，清理果园落叶、枯枝、病果。土壤封冻前全园灌防冻水。(1)根据生产任务及天气条件进行全园冬季修剪。

苹果腐烂病病果苹果腐烂病树干症状（3）化学防治：及时刮除病斑。在春季和秋季刮除病斑，并涂药杀菌，以防复发。在苹果生长期间，可人工灭杀卷叶中的幼虫，减轻其为害。苹果小卷叶蛾幼虫苹果小卷叶蛾成虫（3）物理防治：果园内可设置糖醋液、杀虫灯，诱杀成虫。（4）生物防治：①性诱捕技术。甲基托布津800倍液用捕食螨防螨类，要慎用杀虫杀螨剂5月下旬至6月上旬螨类、蚜虫、卷叶蛾类1.8%阿维菌素2000倍液+2.5%高效氯氟氰菊酯2000倍液或25%灭幼脲1500倍液6月中下旬食心虫类、轮纹病、炭疽病斑点落叶病4.5%高效氯氰菊酯1500倍液+80%代森锰锌800倍液果实膨大期7月螨类、卷叶蛾类2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐2000倍液+15%哒螨灵1500倍液波尔多液使用要间隔7天以上8月螨类、炭疽病①喷施1次波尔多液；②1.8%阿维菌素2000倍液+80%炭疽福美700倍液果实成熟期9月至10月炭疽病、黑星病、轮纹病①2.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐2000倍液+70%甲基硫菌灵800倍液；②80%

目前，我国共有25个省（区）生产苹果，但苹果产区主要集中在渤海湾、西北黄土高原、黄河故道和西南冷凉高地等四大产区，其中黄土高原和渤海湾地区是我国苹果的优生区，并以陕西省和山东省的苹果面积与产量最大。本产区以南到淮河、秦岭以北，东起连云港，经徐州、郑州，西至宝鸡，是中国新兴的一条最长的苹果栽培带。该区苹果种植面积较大，但苹果表面果锈较重，同时由于夏季高温和温差小，因而果实品质一般。我国西北、东北和华北地区苹果落叶在11月份，西南地区在12月份。是指苹果从秋季自然落叶后至春季萌芽止。风、海拔对苹果栽培也有影响。在大风地区，苹果易出现偏冠、落花落果重的现象，因此栽培时必须营造防护林。海拔高度的差异，造成气温、光照等一系列因子的变化，从而影响苹果生长发育及品质形成。涉及苹果无公害生产的标准有：NY/T 5012—2001《无公害食品 苹果生产技术规程》；NY/T 5013—2001《无公害食品 苹果产地环境条件》等。