SNP （单核苷酸多态性） 主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的 DNA 序列多态性，包含单个碱基的转换、颠换等。InDel是指插入/缺失 （Insertion/Deletion） 基因组中小片段的插入和缺失序列，个体重测序中特指1～50 bp 的小片段插入和缺失。在生物的进化进程中，生物全基因组水平上积累了大量的微小变异，主要包括SNP 和InDel。这些微小变异的变异程度决定了物种之间在表型和生理结构等方面的差异，为新物种的形成提供了最原始的动力，是物种多样性的本质体现。SNP 标记是基因组DNA序列中分布最广泛的一类标记，植物基因组中平均每数百bp就存在着一个SNP （Huang et al.，2010；Qi et al.，2013）。InDel标记也是一种重要的遗传标记，已被广泛应用于图位克隆、基因定位、动植物遗传多样性的鉴定、分子标记辅助育种等领域（Jander et al.，2002；Schnabel et al.，2005；王岩等，2009；王明军等，2010）。随着高通量测序技术的快速发展，利用全基因组重测序（whole genome re-sequencing，WGR） 技术结合混合分组分析法（bulked segregate analysis，BSA） 可高效检测出通过双亲杂交建立的后代群体中导致表型变异的 QTL和突变位点 （Abe et al.，2012；Takagi et al.，2013），并且可以识别大量的 SNP 和 InDel 位点，从而进行SNP 及InDel标记的开发，获得基因区间的SNP 及InDel标记。本研究利用WGR技术及 BSA法相结合，获取与抗炭疽菌叶枯病基因相关的SNP 和InDel位点，并通过对△ （SNP-index） 图谱分析，快速锁定抗病区域，再通过ANNOVAR软件分析，提取注释信息，筛选出候选的抗病基因。并利用实时荧光定量 PCR （qRT-PCR） 技术对候选基因经过炭疽叶枯病病原菌侵染后的不同时间段基因表达量的变化进行分析，寻找响应炭疽叶枯病病原菌侵染的抗病相关基因并对其进行详细的功能分析，以期揭示苹果抗炭疽菌叶枯病的分子机制。用于全基因组重测序的材料为 ‘金冠’ ‘富士’ 及第三章中经过抗病鉴定的 ‘金冠’ב富士’ 的 F1 代群体中极端抗炭疽菌叶枯病的20个单株和极端感炭疽菌叶枯病的20 个单株。取其嫩叶3～5 片，液氮速冻，置于-70℃冰箱保存，用于提取DNA。用于qRT-PCR 分析的材料为 ‘富士’ 和 ‘金冠’ 带嫩叶的一年生健壮新梢各30 枝，用于室内人工离体接种。接种方法同第二章，分别于接种后0 h、12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h七个时间点采集叶片，液氮速冻后，用于提取RNA，检测基因表达。参考Doyle和Doyle （1987） 及 Cullings （1992） 提取基因组DNA的CTAB法，并加以改进，详见第三章。利用1%琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 的纯度和完整性。条带单一、清晰明亮、无降解、无污染的DNA样品作为合格样品用于后续研究。运用NanoPhotometer ? 分光光度计 （IMPLEN，CA，USA） 对DNA的纯度进行检测。DNA经过 Qubit ? DNA Assay Kit in Qubit ? 2.0 Flu-rometer （Life Technologies，CA，USA） 进行浓度的精确定量。将DNA浓度调整为100 ng/μl。苹果嫩叶总RNA的提取方法如下。（1） 将500 μl裂解液RLT Buffer、50 μl PLANTaid、5 μl β-巯基乙醇，依次加入灭菌的1.5 ml离心管中，混匀，待用。（2） 将冻存于-70℃下的苹果嫩叶0.2 g置于预冷的研钵中，加少量液氮快速研磨成细粉状后转入上述待用的的离心管内 （样品容易褐化，动作要迅速，并保证液氮挥发完全）。（3） 56℃温育5～10 min，期间不断剧烈震荡混匀，以保证充分裂解。（4） 12000 r/min 离心10 min，将离心管缓慢从离心机中取出，将上清液转到新离心管中 （吸取上清液时一定要缓慢，尽量不要吸到底部沉淀）。（5） 较精确估计上清液体积，加入 0.5 倍体积的无水乙醇，盖盖，上下颠倒混匀，此时可能会出现沉淀，但是不影响提取的过程。（6） 将混合物 （每次上样应小于800 μl，可分两次加入） 加入吸附柱中，12000 r/min离心60 s，弃废液。（7） 在吸附柱中加700 μl去蛋白液 RW1，室温下放置5 min （可稍延长时间，去除吸附柱上的蛋白污染），12000 r/min 离心30 s，弃废液。（8） 在吸附柱中加入 500 μl 漂洗液 RW （加过无水乙醇），12000 r/min离心 30 s，弃废液。再加入 500 μl 漂洗液 RW，重复1遍。（9） 将吸附柱放回空收集管中，12000 r/min空离心2 min，尽量除去吸附柱中残留的漂洗液。（10） 将吸附柱放入一个 RNase free 离心管中，在吸附膜上加40 μl RNase-free water （最好事先在 70～90℃中水浴加热），室温放置2 min，12000 r/min 离心1 min，如需RNA浓度较高，可重复离心1次。（11） 取4 μl RNA加入6×RNA Loading Buffer，用1%琼脂糖凝胶电泳检测RNA提取的质量与纯度，并估测提取浓度。（12） 将检测质量好的RNA放入-70℃下保存备用。参照 PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser （Perfect Real Time） 试剂盒 （TaKaRa）。具体操作步骤如下 （全程冰上操作）。（1） 基因组 DNA 的去除。在 0.2 ml 灭菌的离心管中依次加入1 μg 总 RNA，2 μl 5×gDNA Eraser Buffer，1 μl gDNA Eraser，用RNase-Free水补足10 μl，42℃，2 min （或者室温5 min）；4℃。（2） 反转录反应。在0.2 ml灭菌的离心管中依次加入10 μl步骤1的反应液，1 μl PrimerScript RT Enzyme Mix I，1 μl RT Primer Mix，4 μl 5×PrimerScript Buffer 2 （for Real Time），用 RNase Free 水补足20 μl。37℃，15 min；85℃，5 s；4℃。（3） 质量检测。用 β-actin 基因的引物对反转录的 cDNA 进行PCR扩增，并用1%的琼脂糖电泳检测，选取质量好的样品在-20℃下保存备用。将 ‘金冠’ב富士’ 的F1 代群体中选取出的 20 个极端抗病的单株和20个极端感病的单株DNA等量混合构建成两个表型池。检验合格的4 份 DNA 样品每份取1.5 μg进行基因文库的构建。通过Covaris破碎机将DNA样品随机打断成长度为350 bp的片段。采用TruSeq Library Construction Kit 进行建库，严格使用说明书推荐的试剂和耗材。DNA 片段经末端修复、加 ployA 尾、加测序接头、纯化、PCR扩增等步骤完成整个文库制备。构建好的文库通过 illumina HiSeqTM PE150进行测序 （附图4-1）。文库构建完成后，先使用 Qubit 2.0 进行初步定量，稀释文库至1 ng/μl，随后使用Agilent 2100对文库的插入片段 （insert size） 进行检测，符合预期后，使用Q-PCR 方法对文库的有效浓度进行准确定量 （文库有效浓度＞2 nM），以保证文库质量。4个文库检验合格后，把不同文库按照有效浓度及目标下机数据量的需求pooling后进行 Illumina HiSeq TM PE 150 测序。围绕350 bp的片段进行双末端 125 bp 测序。表型差异的两个亲本测序深度为10 X，抗感池测序深度为20 X。信息分析的主要步骤如下 （附图4-2）。步骤一：对下机得到的原始测序数据 （Raw data） 进行质控得到有效测序数据 （Clean data）。步骤二：将Clean data比对到参考基因组上。步骤三：根据比对结果，进行 SNP、InDel 的检测，分析 SNP、InDel的分布情况并进行注释。步骤四：对子代SNP 频率差异进行分析。步骤五：根据分析结果对目标性状区域进行定位。步骤六：确定候选基因。测序得到的原始测序序列 （Sequenced Reads或者 raw reads），里面含有带接头的、低质量的 reads。为了保证信息分析质量，必须对raw reads过滤，得到有效测序序列 （clean reads），后续分析都基于clean reads。数据处理的步骤如下。一是去除带接头 （adapter） 的reads pair。二是当单端测序read中含有的N的含量超过该条read长度比例的10%时，需要去除此对paired reads。三是当单端测序read中含有的低质量 （Q≤5） 碱基数超过该条read长度比例的 50%时，需要去除此对paired reads。有效测序数据通过 BWA （http：//bio-bwa.sourceforge.net/） 软件 （Li and Durbin，2009） 与 ‘金冠’ 苹果的基因组 （ https：//www.rosaceae.org/data/download） 进行比对，确定reads在基因组上的位置。比对结果使用 SAMTOOLS （ http：//samtools.sourceforge.net/）软件进行SNP-calling （Li and Durbin，2009），发掘 reads 与参考序列以及 reads 之间的 SNP 位点，利用 SAMtools 软件中的 “rmdup” 指令去除序列文件中的重复。人们采用GATK3.3软件 （McKenna et al.，2010） 的UnifiedGeno-typer模块进行多个样本 SNP 和 InDel的检测，使用 VariantFiltration进行过滤，SNP 的过滤参数为：cluster Window Size 4，filter Expression“QD＜4.0 ‖ FS＞60.0 ‖ MQ＜40.0”，G filter “GQ＜20”。InDel的过滤参数为：cluster Window Size 4，filter Expression “QD＜4.0 ‖ FS＞200.0 ‖ ReadPosRankSum＜-20.0 ‖ InbreedingCoeff＜-0.8”。利用ANNOVAR软件 （Wang et al.，2010） 对 SNP 和 InDel 检测结果进行注释。SNP 频率的统计：SNP 频率是指所检测到的总的SNP 数与参考基因组序列的总长度的比值，是衡量一个物种变异程度和多态性的指标。转换颠换率的统计：分别统计发生转换和颠换的SNP 数目。子代 SNP 的频率 （Takagi et al.，2013），即 SNP-index，是与SNP 位点的测序深度相关的参数，是指某个位点含有 SNP 的 reads数与测到该位点的总 reads数的比值。以参考基因组作为参照，分析计算两个子代在每个 SNP 位点的 SNP-index。SNP-index计算方法如附图4-3所示。若该参数为0，则代表所有测到的reads都来自作为参考基因组的亲本，即 ‘金冠’。参数为1则代表所有的reads都来自另一个亲本，即 ‘富士’。参数为0.5，代表此混池中的 SNP 来自两个亲本的频率一致。为减少测序错误和比对错误造成的影响，对计算出 SNP-index后的亲本多态性位点进行过滤，过滤标准如下。（1） 两个子代中 SNP-index 都小于0.3，并且 SNP 深度都小于7的位点，过滤掉。（2） 一个子代SNP-index缺失的位点，过滤掉。计算△ （SNP-index），即两个子代 SNP-index 作差：△ （SNP-index）=SNP-index2 （极端抗病性状）-SNP-index1 （极端感病性状）。为直观反映△ （SNP-index） 在染色体上的分布情况，对其在染色体上的分布进行作图。默认选择1 Mb 为窗口，1 kb 为步长。进行1000次置换检验，选取95%置信水平作为筛选的阈值。为了不忽略掉微效QTL的影响，在全基因组范围内挑选两个子代在SNP-index差异显著的SNP 位点，即挑选子代2 （极端抗病性状） SNP-index大于0.7，且子代1 （极端感病性状） SNP-index小于0.3的位点，并与亲本 ‘富士’ 为纯合及亲本 ‘金冠’ 为杂合的位点取交集，做为候选的基因位点。提取ANNOVAR的注释结果，优先挑选使基因获得终止密码子的变异 （stop loss） 或者使基因失去终止密码子的变异 （stop gain） 或者非同义突变 （missense） 或可变剪接的位点（Splicing） 所在的基因作为候选基因。从网站 https：//www.rosaceae.org/gb/gbrowse/malus_x_domestica/下载候选基因的 mRNA，从基因编码区核苷酸序列的近3’端位置设计引物，PCR产物长度在150～250 bp，引物序列见表4-1，内参基因为β-actin基因。荧光定量 PCR 在罗氏 LightCycler 480 系统上进行，反应体系配制按 SYBR Green PCR Master Mix 说明书进行操作，具体如下：10.0 μl SYBR Premix Ex Taq Ⅱ （2×），0.8 μl正反向引物，2.0 μl cDNA，去离子水补足20 μl。反应程序为95℃ 预变性5 min，95℃ 10 s变性，55℃ 10 s退火，72℃ 10 s延伸，扩增45 个循环。循环结束后进行熔解曲线分析：95℃ 15 s，60℃ 20 s，然后缓慢升温至95℃。基因的相对表达量用公式：F=2-ΔΔCt，ΔΔCt=（待测组目的基因 Ct值-待测组内参基因 Ct值）-（对照组目的基因 Ct值-对照组内参基因Ct值）。Illumina HiSeqTM PE150 测序平台，四个样本共产生 47.115 G的测序原始数据 （Raw data），通过对原始数据中的接头序列，低质量碱基以及未测出的碱基 （用 N 表示） 进行过滤后，得到有效数据 （Clean data） 46.974 G，各样本的 Raw data 在 7774.247～17017.174 Mb，Clean date 在7751.990～16969.215 Mb，过滤后获得的有效数据比率在99.64%～99.72%，碱基错配率低于0.05%。测序质量 Q20 ≥ 95.08%、Q30 ≥ 88.97%，GC 含量在 39.04%～39.16%。这表明所有样本的数据量充足，测序质量很高，GC 分布正常，建库测序成功，保证了后续数据分析的准确性 （表4-1）。样本原始数据/bp有效数据/bp有效率/%错误率/%Q20/%Q30/%GC含量/%富士7774246500775199010099.710.0395.4389.6339.16金冠7900566600787192650099.640.0395.5589.8839.05BR（基因抗池）170171739001696921590099.720.0395.4489.6239.04BS（基因感池）144234894001438116750099.710.0495.0888.9739.15表4-1 测序数据质量概况将四个样品的有效数据与已经发布的金冠苹果参考基因组序列（https：//www.rosaceae.org/data） 进行比对，计算出比对到参考基因组 （参考基因组大小为609314018 bp） 上的 reads条数、测序深度及碱基覆盖率。结果表明，四个样品的比对率均在87%以上，两个亲本的测序深度达到15×以上，抗感池样品的测序深度达到 30×以上。在参考基因组中至少有1个碱基覆盖的位点占基因组的比例达到95%以上，至少有 4 个碱基覆盖的位点占基因组的比例 “富士” 为88.3%，“金冠” 为91.26%，其他两样品达到96%以上。这进一步的说明，本试验测序的数据质量很高，可用于后续的变异检测及相关分析 （表4-2）。样本比对到reference上的reads条数①有效测序数据的reads总条数比对率/%②平均测序深度/x③参考基因组中至少有1个碱基覆盖的位点占基因组的百分比/%参考基因组至少有4个碱基覆盖的位点占基因组的百分比/%富士455966535167993488.2315.9595.9588.3金冠459536665247951087.5615.6798.0991.26BR（基因抗池）10045340711312810688.834.4298.896.67BS（基因感池）8962925610163794888.1830.8898.7896.44表4-2 测序深度及覆盖度统计通过全基因组重测序技术共获得3399950个 SNP 位点，苹果参考基因组总长度为 609314018 bp，据此计算出 SNP 出现的频率为3399950/609314018=0.56%。转换 （T/C、C/T） 和颠换 （T/G、T/A、C/A、C/G） 发生频率 （附图 4-4） 的统计结果显示，T/C 和C/T转换发生的频率分别为 32.5%和 34.1%，T/G、T/A、C/A和C/G颠换发生的频率分别为 9.2%、9.4%、9.4%、5.4%。转换/颠换率为2.0。利用测序获得的有效数据，比对苹果参考基因组序列，经 ANN-OVAR软件分析共得到 SNP 位点 3399950个，InDel 位点 573040个，SNP 位点位于内含子上的465317个，位于外显子上的436309个，其中同义变异 210404个，非同义变异 220539个，InDel 位点位于内含子上的 108996个，位于外显子上的 19957个，其中插入或缺失3 或 3 的整数倍的碱基，不改变蛋白质的编码框的有 6928个。这表明绝大部分变异位于非编码区，或不会导致基因编码的改变，这有利于维持植物体正常的生长发育，保证品种特性的稳定遗传 （表4-3）。类别SNP数量基因上游184156获得终止密码子4837失去终止密码子529外显子同义变异210404非同义变220539内含子465317剪接位点2196基因下游177312基因上游/基因下游12750基因间区2105122转换2265734颠换1134216转换/颠换/%1.997合计3399950表4-3 SNP及InDel检测及注释类别InDel数量基因上游51816获得终止密码子376失去终止密码子68Frameshiftdeletion①7330外显子Frameshiftinsertion5255Non-frameshiftdeletion②3843Non-frameshiftinsertion3085内含子108996剪接位点598基因下游44305基因上游/基因下游3896基因间区342800插入262868缺失310172合计573040表4-3 SNP及InDel检测及注释（续）-1△ （SNP-index）=SNP-index B （极端抗病性状）-SNP-index A （极端感病性状）。进行1000次置换检验，选取95%置信水平作为筛选的阈值。一般情况下，在苹果 F1 群体中，由于每个位点的碱基均来源于双亲中的一个，所以在基因组中大部分区域的 SNP-index都在0.5附近。如果某个SNP 位点与抗性相关，那么在该处的 SNP-index就会显著偏离0.5，△ （SNP-index） 就会显著大于此处的阈值。从抗感池中△SNP-index值在染色体上的分布可以看出，在第15 条染色体2～5 Mb区间内△SNP-index值显著的大于阈值，预示着该区域内可能存在着与抗炭疽菌叶枯病基因相关的位点 （附图4-5）。这与第三章SSR标记所确定的抗性基因所在的区域吻合。在全基因组范围内挑选在两个子代池中 SNP-index 差异显著的SNP 位点，即挑选在抗池中 SNP-index 大于 0.7，在感池中 SNP-index小于0.3，△ （SNP-index） 大于 0.5 的 SNP 位点，并与亲本‘富士’ 为纯合，亲本 ‘金冠’ 为杂合的位点取交集，共得到258 个候选的多态性标记位点 （表4-4）。这258 个 SNP 位点中位于基因上游1 kb的19个，基因下游1 kb 的12 个，位于基因上游1 kb 区域，同时也在另一基因的下游1 kb区域的2 个，位于基因间区的173 个。位于外显子上非同义变异的13 个，同义变异7 个，位于内含子上的31个。其中位于第15条染色体上的有123 个，占整个候选 SNP 位点的47.7%。类别SNP数量基因上游19获得终止密码子0失去终止密码子0外显子同义变异7非同义变13内含子31剪接位点1基因下游12基因上游/基因下游2基因间区173转换161颠换97转换/颠换/%1.659合计258表4-4 候选多态性标记位点的注释提取ANNOVAR的注释结果，优先挑选能引起基因获得终止密码子、失去终止密码子的变异，或者非同义突变，或者可变剪接的位点所在的基因作为候选基因。经筛选后得到33 个 SNP 位点及所对应的29个候选基因 （表4-5）。这些SNP 位点中发生转换的 （G/A、C/T、T/C、A/G） 共 16 个，占 48.5%，发生颠换的 （G/C、C/G、G/T、A/C、A/T、T/G、T/A、C/A） 共17 个占51.5%，其中有21 个位于第15条染色体上。基因ID类型染色体SNP位点参考基因组碱基型Ref突变碱基型AltMDP0000294705nonsynonymous24029182TCMDP0000311597upstream26560007TCMDP0000335197upstream238255166CTMDP0000481284nonsynonymous511687941TCMDP0000266783nonsynonymous516570950ACMDP0000223383upstream814935907CTMDP0000203531upstream918259400TGMDP0000265695upstream919790733GAMDP0000224187nonsynonymous1034991229ATMDP0000226279upstream1123158805AGMDP0000480608upstream123704417TGMDP0000504610upstream1229472316TCMDP0000292279upstream151396770CTMDP0000686092nonsynonymous153955717AGMDP0000686092nonsynonymous153955724AGMDP0000686092nonsynonymous153955738TAMDP0000205432nonsynonymous154094431TAMDP0000120033upstream154236293AGMDP0000864010nonsynonymous154257246GAMDP0000945764nonsynonymous154336468CAMDP0000149107splicing154970310CTMDP0000609131upstream156771435CAMDP0000169753upstream157074724ACMDP0000296372upstream157704309CT表4-5 候选基因ID基因ID类型染色体SNP位点参考基因组碱基型Ref突变碱基型AltMDP0000199827upstream157710714TAMDP0000194508nonsynonymous157757532GAMDP0000320004upstream158084422ATMDP0000320004upstream158084636TCMDP0000320004upstream158084637ACMDP0000148808upstream158365795GTMDP0000133266upstream1533862275AGMDP0000157213nonsynonymous1549031042CGMDP0000169687nonsynonymous1552444208TC表4-5 候选基因ID（续）-1结合 SSR标记定位及全基因组重测序中对△ （SNP-index） 值分析的结果，从这29 个候选基因中筛选出位于第15 条染色体3.9～4.9 Mb距离内的5个基因 MDP0000686092、 MDP0000205432、MDP0000120033、 MDP0000864010、 MDP0000945764 做为抗炭疽菌叶枯病的最终候选基因。通过对5个候选基因进行 GO 功能富集分析发现，5 个候选基因中有3个功能未知。基因 MDP0000120033 具有核酸绑定功能，锌离子结合分子功能，参与 RNA 剪切生物过程，调节基因产物的表达。蛋白结构上具有CCHC型结构域的锌指结构，是丝氨酸精氨酸富集剪接因子。进一步同源比对该基因为 SR基因家族 RSZ亚家族基因，与拟南芥AtRSZ21蛋白的序列一致性达到60%，与花生AdRSZ21蛋白的序列一致性达到79%。基因 MDP0000864010 具有辅酶绑定功能，蛋白结构上具有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 （磷酸盐） NAD （P） 绑定区域，属于NAD依赖差向异构酶/脱氢酶家族，进一步的同源性比对，该蛋白与鼠李糖生物合成酶 1 （rhamnose biosynthetic enzyme 1，RHM1） 有较高同源性 （表 4-6）。候选基因编码的氨基酸序列见附录五。基因ID基因功能注释MDP0000686092功能未知蛋白MDP0000205432功能未知蛋白质。MDP0000120033核酸绑定功能，锌离子结合分子功能，参与RNA剪切生物过程，调节基因产物的表达。具有锌指结构，CCHC型结构域，丝氨酸精氨酸富集剪接因子。MDP0000864010辅酶绑定功能，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（磷酸盐）NAD（P）绑定区域，NAD依赖差向异构酶/脱氢酶家族，可能与鼠李糖生物合成酶1有关。MDP0000945764功能未知蛋白表4-6 抗炭疽菌叶枯病候选基因的功能注释利用TMHMM2.0软件对候选基因进行跨膜结构分析，基因MDP0000686092和MDP0000120033具有跨膜结构。基因MDP0000686092具有1个跨膜区，基因MDP0000120033具有3个跨膜区，位置分别在153～172、187～209、214～236的区域内（附图4-6）。引物名称引物序列MDP0000686092基因荧光定量PCR引物P1-FP1-RF：5′-CAGGCTGGAGCGAAGTTTA-3′R：5′-CCTTTCTGTGATGGCATTGTT-3′MDP0000205432基因荧光定量PCR引物P2-FP2-RF：5′-GAAAAGCCAGCACCAGAAAC-3′R：5′-CGTATTCGTGGGGTTATAGAGC-3′MDP0000120033基因荧光定量PCR引物P3-FP3-RF：5′-TCTGGGAATGCTGCTAAAACTC-3′R：5′-GCAGGGCAGTAGTGAAGCAC-3′MDP0000864010基因荧光定量PCR引物P4-FP4-RF：5′-CGTGACCAATCGCCTAATA-3′R：5′-GGACGTGAGTGCCGTAGAC-3表4-7 荧光定量PCR引物引物名称引物序列MDP0000945764基因荧光定量PCR引物P5-FP5-RF：5′-TTTGCCAGCCTGTCAGAAGT-3′R：5′-AGTTGTAGAGGGAGGAGGAAGA-3′β-actin基因荧光定量PCR引物P6-FP6-RF：5′-CACTGCTTCTATGACTGGTTTTGA-3′R：5′-CTGGCATATACTCTGGAGGCTT-3′表4-7 荧光定量PCR引物（续）-1对接种炭疽菌叶枯病病菌后 0 h、12 h、24 h、36 h、48 h、60 h、72 h的 ‘富士’ 和 ‘金冠’ 枝条进行采样，提取 RNA，反转录成cDNA后，对5个候选基因的表达进行实时荧光定量分析。结果显示，5个基因均不同程度响应病原菌侵染 （附图4-7、 表4-7）。除了基因MDP0000864010在 ‘富士’ 叶片中的表达量表现为下调外，其余 4个基因均为上调表达。在 ‘富士’ 叶片中，基因 MDP0000205432、MDP0000120033和MDP0000945764 的表达量在接种后 24 h 均达到最高值，48 h降到最低值，然后又缓慢提高。在 ‘金冠’ 叶片中的表现不同于 ‘富士’，三个基因表达量的最高值出现在36 h，但最低值同样出现在48 h，这说明在这3个基因在抗病植株中对病原菌的应答要早于感病植株。尽管基因 MDP0000686092 和 MDP0000945764 在‘富士’ 和 ‘金冠’ 叶片中也均表现为上调表达，但是在 ‘金冠’ 叶片中的表达变化更为显著，基因 MDP0000945764 在 ‘金冠’ 叶片中的表达量达到最高值时为接种前的60 倍，而在 ‘富士’ 中的提高量为接种前的10倍。以上结果说明，5个候选基因均受炭疽菌叶枯病病菌的诱导，是苹果炭疽菌叶枯病抗病相关基因。SNP 标记的开发主要依赖于含有大量测序序列的数据库。通过全基因组测序，不仅可以获得大量的 SNP 标记，还可以了解到 SNP 标记在整个基因组中的分布情况，有利于我们进一步了解不同物种的生物学特性，以及利用标记进行不同需求的生物学研究。在葡萄的基因组测序中发现，SNP 位点的密度高达7%（Jaillon et al.，2007）；2010发表的金冠苹果全基因组序列中，SNP 标记的频率约为 4.4 kD/SM，即227 bp/SNP （Velasco et al.，2010）；梨的全基因组序列中共检测到3402159个 SNP 位点，约占基因组序列的 1.02%（Wu et al.，2013）；柑橘中得到的 SNP 位点数量为106 万个 （Xu et al.，2013）。对于有参基因组，通过全基因组重测序手段进行大量 SNP 标记开发，也是研究不同品种间差异的有效途径之一。通过对6 个玉米自交系的进行全基因组重测序，在非重复序列区域内共获得了 1272134个SNP 标记 （Lai et al.，2010）；对葡萄的230个基因片段重测序，数据统计结果显示，每64 个碱基中就存在着一个 SNP 位点 （Lijavetzky et al.，2007）；在水稻中，水稻籼稻恢复系 7302R 通过全基因组重测序，检测到307627个SNP 位点，其中有30239个位于mRNA序列中（Li et al.，2012b）；通过对苹果品种 ‘金冠’ 和 ‘红玉’ 进行全基因组重测序，在 ‘金冠’ 中得到了 2222816个 SNP 位点，在 ‘红玉’中得到了 4950346 个 SNP 位点，密度分别为 293 bp/SNP 和210 bp/SNP （孙瑞，2015）。SNP 变异从理论上来看主要包括转换、缺失、颠换和插入四种形式，但实际上发生的只有两种，即转换和颠换，二者之比为2∶1。并且SNP 在CG序列上出现的最为频繁，而且多是 C 转换为 T，主要原因为CG中的胞嘧啶常被甲基化，而后自发脱氨基形成胸腺嘧啶 T （Johnson and Told，2000；Mullikin et al.，2000）。从本实验中对 SNP转换/颠换频率统计结果来看，转换/颠换比为2.0，发生转换的频率为66.6%，发生颠换的频率为 33.4%，C/T 转换发生的频率最高为34.1%。这与前人研究的结论相符。通过重测序技术可以获得海量SNP 标记，利用这些标记构建高密度遗传连锁图谱为不同群体的进化分析，不同性状基因的遗传定位，分子标记辅助育种等提供有效信息。‘M.27’בM.116’ 的高密度遗传图谱是由306个SSR标记和2272个 SNP 标记组成，图谱密度达到了每 0.5 cM 一个标记 （Antanaviciute et al.，2012）。Khan 等（2012） 利用2875个分子标记构建了苹果的整合遗传图谱，其中包含了2033个 SNP 标记和 843 个 SSR 标记，总长为 1991.38 cM。Clark等 （2014） 利用3个不同的F1 杂交群体和SNP 芯片分型技术构建了包含1091个 SNP 标记的苹果品种 ‘Honeycrisp’ 的整合遗传图谱，标记间的平均距离为1.36 cM。基于高通量基因组重测序技术能够更加准确、全面的对测序物种进行全基因组水平上的位点进行评估，可以精确的完成单核苷酸多态性位点的检测，分子标记的开发，遗传图谱的构建，不同群体间的进化分析，与表型变异相关基因的挖掘以及快速定位等等。本研究通过运用全基因组重测序的方法对有着明显抗感性状分离的 ‘金冠’ 和 ‘富士’ 及其由 F1 代极端表型个体组成的抗感池进行全基因组范围内的遗传变异检测，共筛选得到 SNP位点3399950个，InDel位点573040个。通过对△SNP-index图谱的分析发现，在第15条染色体的2～5 Mb的区间内，△SNP-index显著的大于阈值，存在着明显的连锁不平衡，意味着该区域可能存在着抗炭疽菌叶枯病基因位点。这一结果与SSR标记所定位的抗炭疽菌叶枯病基因位点位置相吻合。SNP 广泛分布于基因组DNA中，且数量巨大。因为任何碱基均有可能发生变异，因此SNP 既有可能出现在基因的编码区，也有可能在基因的非编码区，或者两个基因之间的序列上。总的来说，位于基因内编码区的SNP 比较少，且该部分的 SNP 有可能会直接影响产物蛋白质的结构或基因表达水平，因此位于编码区 SNP 的研究更受关注。本试验对可能引起基因获得终止密码子、失去终止密码子、非同义突变、可变剪接的变异位点进行重点筛选，将其所在的基因作为候选基因。通过筛选共得到33个候选SNP 位点和29个候选基因。结合第三章SSR标记对炭疽叶枯病抗性基因的定位，最终锁定了 5 个候选基因： MDP0000686092、 MDP0000205432、 MDP0000120033、 MDP0000864010、MDP0000945764。锌指结构是一类在很多蛋白中存在的具有指状结构的模体，是具有识别特定碱基序列的一种转录因子结构。锌指的典型功能是作为互作的组件与核酸、蛋白质和小分子等多种物质相结合，参与多种细胞过程，如DNA的复制与修复、RNA 转录与翻译、物质代谢与信号转导、细胞的增殖与凋亡等 （Krishna et al，2003）。可变剪切 （Alternative splicing，AS） 是重要的转录后调控机制，在动物中对其在不同的生理以及病程条件下的可变剪切的调控作用研究的较多 （Garcia-Blanco et al.，2004；Nilsen and Graveley，2010）。据报道在拟南芥中超过 42%的外显子基因存在可变剪切现象（Filichkin et al.，2010）。在植物可变剪切数据库中有很大比例的 AS参与逆境响应基因的表达，这进一步强调了可变剪切在逆境响应中的重要作用 （Wang and Brendel，2006；Duque，2011）。在生物胁迫中，有许多试验证明AS参与植物的抵抗和防御机制。例如，在一些 R 基因中如番茄的N 基因，拟南芥的SNC1、 RPS4基因，发现可变剪切的存在 （Dinesh-Kumar and Baker，2000；Zhang and Gassmann，2003）。SR蛋白，丝氨酸/精氨酸富集剪切蛋白 （serine/arginine-rich proteins，SR protein） 是RNA绑定蛋白家族中功能和结构高度保守的一类因子，参与可变剪切过程。例如， AtSR30在高盐碱以及过氧逆境中被上调表达 （Tanabe et al.，2007）。SR在不同的环境条件下的表达量的差异说明了SR蛋白在逆境响应中的调控作用。基因MDP0000120033具有核酸绑定，锌离子结合分子功能，参与 RNA 剪切生物过程，调节基因产物的表达。具有CCHC型锌指结构和丝氨酸/精氨酸富集剪接因子，属于SR 基因家族 RSZ 亚家族基因。丝裂原活化蛋白激酶 MPK6 和MPK3在植物的防御反应中起着重要作用，而拟南芥基因 AtRSZ21 在体外试验中被发现能够被MPK6/MPK3磷酸化 （Feilner et al.，2005），这就意味着 AtRSZ21 也可能参与了植物的防御应答。Kumar 和 Kirti （2012） 报道了花生的一个属于 SR 亚家族基因 RSZ 蛋白基因AdRSZ21，在植物的超敏反应和抗逆反应中起着重要的作用。NAD依赖差向异构酶/脱氢酶家族是真菌病原体镰刀菌致病机制中的一个关键酶 （Srivastava et al.，2014）。细胞壁是植物细胞进行正常的生命活动不可缺少的重要组成部分。其不但在维持细胞形态、细胞间黏结、细胞壁的强度和调控细胞伸长等方面起着重要的作用，还参与了细胞的分化、抗病、细胞识别及信号传导等一系列生理、生化过程。细胞壁主要成分包含纤维素、半纤维素、果胶和少量的结构蛋白等。基因MDP0000864010属于依赖差向异构酶/脱氢酶家族，并且与鼠李糖合成酶Ⅰ （ RHMⅠ） 有较高的同源性。可能参与合成鼠李糖，而鼠李糖是细胞壁果胶多聚糖的重要组分之一。所以该候选基因有可能在细胞的组成层面增加个体的抗性。基因的相对表达量分析也表明，五个基因都不同程度的响应了病菌的诱导，是与抗炭疽菌叶枯病相关的候选基因。但是其参与抗病的机理和途径仍不清楚，深入的研究将继续展开。

大蒜（Allium sativum L.）为百合科葱属草本植物，别名胡蒜（崔豹《古今注》）、葫（《名医别录》）等，原产中亚，栽培历史悠久。味辛，性温；入脾、胃、肺经；有行滞气、暖脾胃、消癥积、解毒、杀虫之功效。近几年来，随着大蒜的市场需求越来越大，在湖北省当阳、广水等地已经开始大规模种植，并成为当地农业增效、农民增收的支柱产业。但随着种植面积的不断扩大，加上大蒜品种单一，为病害的发生创造了有利条件。2005～2007年在湖北省当阳市大蒜生产基地调查发现，大蒜白斑病发生十分严重，植株发病率在95%以上，均产损失超过2/3，部分田块绝收，严重影响了大蒜的产量与品质。大蒜白斑病主要为害叶片。叶片最初受侵染后，上部出现许多卵圆形或圆形小白斑，部分白斑湿度大时会演变成紫斑，后期叶片变枯黄。2006年4月从湖北省当阳市采集典型大蒜病叶，经分离、鉴定得到大蒜白斑病菌（Stemphylium solani），对其生物学特性进行研究。结果表明，在PSA培养基上，该菌菌丝在5～35℃均可生长，最适生长温度为20～30℃；pH值在4～10均能生长，最适pH值为6～8。在查彼克液体培养基中，病菌能利用多种碳、氮源，其中以淀粉为最佳碳源，谷氨酸为最佳氮源。菌丝的致死温度为55℃，10min。对9种供试杀菌剂采用菌丝生长速率法进行室内药剂筛选，研究表明，40%福星乳油对菌丝生长抑制效果最好，而75%百菌清可湿性粉剂对其抑制效果最差。

桃果实风味优美，营养丰富，具特殊香味，为夏秋季市场上的主要鲜销果品，是我国主要果树之一。适应性强，栽培容易，结果早，易丰产。桃为落叶小乔木。根系属浅根性，生长迅速，伤后恢复能力强。芽具有早熟性，萌发力强，在主梢迅速生长的同时，其上侧芽能相继萌发抽生二次梢、三次梢。但在二次梢、三次梢上，无芽的盲节很多。桃的成枝力也较强，且分枝角常较大，故干性弱，层性不明显，中心主干易早期自然消失。不同品种间分枝角度不同，形成开张、半开张和较直立的不同树姿。隐芽少而寿命短，其自然更新能力常不如其他树种。桃花芽容易形成，进入结果期早。树冠中长、中、短各类枝条均易成为结果枝，花芽为纯花芽。大部分桃品种能自花结实，异花授粉能提高结实率。果实发育可分快—慢—快3个时期。其中第二期为硬核期，品种间差异较大，早熟品种仅7～10d，常使胚发育不全，或形成软核。生理落果分前后两期。前期落果在花后3～4周内发生，主要是由于受精不完全所引起。后期落果是受精幼果的脱落，主要发生在硬核期开始的前后。此期正处于植株的养分转换期，落果与碳水化合物及氮素的供应不足有关，干旱也能促进脱落。但是，如果此期供应的氮素和水分过多，引起新梢徒长，器官间对养分的竞争加剧，则同样会导致落果。桃属喜温性的温带果树树种，适宜的年平均温度南方品种群为12～17℃，北方品种群为8～14℃。冬季通过休眠阶段时需要一定时期的相对低温，一般需0～7.2℃的低温750h以上，低温时数不足，休眠不能顺利通过，常引起萌芽开花推迟且不整齐，甚至出现花芽枯死脱落的现象。花期要求10℃以上的气温，如花期遇气温降至-11～-3℃时，花器就容易受到寒害或冻害。桃性喜干燥和良好的光照。耐旱性极强，不耐涝，适宜于排水良好的壤土或沙壤土上生长。光照充足，则树势健壮，枝条充实，花芽形成良好；光照不足时，内膛枝条多易枯死，致结果部位很快外移。桃的栽培品种很多，我国有1000个左右。依成熟期可分为极早熟、早熟、中熟、晚熟和极晚熟五类；依果肉色泽可分为黄肉桃和白肉桃；依用途可分为鲜食、加工、兼用品种以及观花用的观赏桃等；依果实特征可分为普通桃、油桃、蟠桃三大类型。春艳、仓方早生、大久保、莱州仙桃、寒露蜜、冬雪蜜桃、春美、春蜜、北农早艳、北农晚艳、红冠、新川中岛、朱砂红、雨花露、冈山早生、砂子早生、北农2号等优良品种。丽春、超红珠、春光、华光、瑞光1号、瑞光2号、瑞光3号、瑞光5号、中油16、中油14、中油13、518、五月火、曙光、艳光、早美光、潍坊1号、阿姆肯、中农金辉、中农金硕、早红艳、双喜红、早红珠、早红霞、早丰甜、丽格兰特等优良品种。早露蟠桃、新红早蟠桃、早蜜蟠桃、碧霞蟠桃、蟠桃皇后、瑞蟠2号、瑞蟠4号、瑞蟠13号、瑞蟠14号、中农蟠桃10号、仲秋蟠桃、白芒蟠桃、撒花红蟠桃、陈圃蟠桃和油蟠桃品种红油蟠1号、红油蟠2号、红油蟠3号、玫瑰红等优良品种。生产上桃树育苗多用嫁接繁殖。砧木普遍用毛桃或山桃。进行矮化栽培时，可用毛樱桃、郁李作为桃的矮化砧。接穗以选用复芽或带有复芽的枝段为最佳。种子秋播或春播都可以。秋播出苗整齐，出苗早，幼苗生长快而健壮，且可省去种子沙藏手续，一般在晚秋至初冬土壤结冻前进行。春播种子需经沙藏层积处理，毛桃需100～120d，然后在种子萌动前播入土中。沙藏天数不足时影响发芽率。每667m2需种子75～120kg，可育苗8000～10000株。也有先在苗床中集约播种育苗，而后再行移栽的。桃秋季生长停止较苹果和梨为早，砧木生长速度也快，芽接时期早于苹果和梨，长江流域一般多在7—8月进行。如能提前至6月中旬以前芽接，成活后并采用折砧或两次剪砧的方法，可在当年成苗出圃。具体嫁接方法，过去采用T形芽接法为多，近年多用嵌芽接法。夏秋来不及芽接或芽接未活的砧木苗，可用枝接法补接。枝接一般采用切接法。长江流域在秋季9—10月及翌年春萌芽前均可进行，淮北地区宜掌握在春季桃芽萌发之前。注意保持好接口和接穗剪口的湿度，是提高成活率的关键。桃树对土壤要求不严，一般土壤均可建园。盐碱土应先行改良，否则易患缺铁性黄叶病。土壤黏重的丘陵坡地应开沟建园，避免土壤下层积水。老园地重茬植桃，常导致树体生长不良、枝干流胶、叶片失绿、新根褐变等，严重时造成成片死树，建园时应予避免。品种方面要因地制宜。城市近郊可多选软溶质的品种，早熟品种的比例也可大一些。城市远郊及山区适宜发展较耐储运的硬肉桃或硬溶质的品种。当果园中栽植不产生花粉或花粉少并缺乏生活力的一些品种时，一定要配植授粉品种。即使是自花能结实的品种，选用几个品种相互配植，也能提高结实率和产量。不同成熟期的品种还可避免劳力过分集中和延长鲜果的供应时期。栽植密度根据品种生长势、土壤肥瘠和管理条件而定。一般平地株行距4～5m，山地株行距(3～4)m×(4～5)m。桃枝伸展速度快，特别在高温多湿地区不宜过分密植，否则前期虽可获得高产，后期树冠交接后产量即锐减。有管理经验的地区，密度可大一些。桃树根系呼吸作用旺盛，正常生长要求土壤有较高的含氧量。除秋冬落叶前后结合施用基肥进行深翻外，生长期间宜经常中耕松土，保持树盘范围内的土壤通气性良好。遇有滞水、积水现象应及时排除，不使根系受渍。桃树比较耐瘠薄。幼树期需肥量少，施氮过多易引起徒长，延迟结果。进入盛果期后，随产量增加和新梢的生长需肥量渐多。综合各地桃园对氮、磷、钾三要素的吸收的比例，大体为10∶(3～4)∶(6～16)。每生产100kg的桃果，三要素的吸收量分别为0.5kg、0.2kg和0.6～0.7kg。具体施肥量最好以历年产量变化及树体生长势作为主要依据。叶分析的适量标准值，据原北京农业大学测定，三要素分别为：2.8%～4.0%(N),0.15%～0.29%(P2O5)和1.5%～2.7%(K2O)。具体施肥要求如下：第一次为基肥，以有机肥为主，适当配合化肥，特别是磷肥，结合晚秋深耕施入，施肥量占全年总量的50%～70%。第二次为壮果肥，以氮肥为主，结合磷、钾肥,在定果后施用。第三次在果实急速膨大前施入，以速效磷、钾肥为主，结合施用氮肥，主要对中、晚熟品种，可促进果实肥大，提高品质，并可促进花芽分化。此外，有条件时，在8—9月中、晚熟品种收获后，以氮肥为主施用一次补肥，有利于枝梢充实和提高树体内贮藏营养的水平。必要时还应注意补充微量元素。桃树需水量虽少，但发生伏旱时仍应进行必要的灌溉。夏季炎热季节灌溉需掌握在夜间到清晨土温下降后，以免影响根系生长，并宜速灌速排，不使多余水分在土壤中滞留。正常管理条件下，桃多数品种的结实率较高，任其自然结实，果实变小，品质变劣，并削弱树势。生产上应疏果两次，最后定果不迟于硬核期结束。留果数量主要根据树体负载量，并参考历年产量、树龄、树势及当年天气情况等而定。具体疏果时可按(0.8～1.5)∶1的枝果比标准留果，或按长果枝留果3～5个,中果枝1～3个，短果枝和花束状果枝留1个或不留，二次枝留1～2个的标准掌握。先疏除萎黄果、小果、病虫果、畸形果和并生果，然后再根据留存果实的数量疏除朝天果，附近无叶果及形状较短圆的果实。

苗木是果树生产的基础。苗木的质量直接影响果树的结果时期、果实的品质及产量、果树的适应性及抵抗病虫害的能力，影响经济收益。凡用种子繁殖的苗木都称为实生苗。实生苗繁殖简单、繁殖系数高，多数是用于培育嫁接苗的砧木，是果树嫁接育苗的基础。1.苹果(1)海棠果。抗旱、抗寒、抗涝，耐盐碱，嫁接亲和力强。（2）山丁子。抗寒、抗旱，耐瘠薄，但不耐盐碱，抗旱力不如海棠果。（3）楸子。抗旱、抗寒、抗涝，耐盐碱，对苹果绵蚜和根头癌病有抵抗能力。（4）新疆野苹果。抗旱、抗寒，耐盐碱，生长迅速，树体高大。2.常用矮化砧木（1）红花（沙果）。类型较多，结果早。（2）GM256。矮化中间砧木，抗寒，结果早。（3）M26。从英国引进的矮化砧木，固堤性好，抗白粉病、抗寒、抗旱性差，结果早，果个大。（4）MM106。从英国引进的半矮化砧木，抗根绵蚜、固堤性好，耐瘠薄，抗寒，可以进行硬枝扦插，结果早。3.梨（1）杜梨。平原地区梨的主要砧木，根系发达，耐旱，耐盐碱，嫁接亲和力强，结果早，丰产，寿命长。适应辽宁、内蒙古、河北、山东等地。（2）秋子梨。东北、华北地区的主要砧木，抗寒性极强，抗腐烂病，不抗盐碱，丰产，寿命长。（3）麻梨。西北地区常用砧木，抗寒、抗旱，抗盐碱，生长势强。4.葡萄（1）山葡萄。极具抗寒力，嫁接亲和力好，扦插较难生根。（2）贝达。抗寒，结果早，嫁接亲和力好，扦插易生根。5.桃（1）山桃。适于较干旱的山地，如东北、华北、西北。抗寒、抗旱，抗盐碱，较耐贫瘠，嫁接亲和力强。（2）毛桃。应用广泛的砧木。比较抗旱、耐寒，耐盐碱，嫁接亲和力强，生长快，结果早。（3）毛樱桃。抗寒力强、抗旱，嫁接亲和力较强，有矮化作用，结果早。6.李（1）山桃。耐盐碱、耐瘠薄，抗旱、抗寒，与中国李嫁接亲和力强。（2）毛樱桃。抗寒、抗旱，结果早，有矮化作用。7.杏杏与中国李嫁接容易成活，有的品种不完全亲和，结果早，但抗涝性差。（1）山杏。适应东北、华北、西北地区，主要是抗寒、抗旱，耐瘠薄，嫁接亲和力好。（2）山桃。较抗寒、抗旱，与杏嫁接亲和力好。8.樱桃（1）山樱桃。较抗寒，生长旺盛，嫁接亲和力好。（2）中国樱桃。包括毛樱桃、莱阳矮樱桃和毛把酸3个类型。适应性较广，抗寒，耐旱能力弱，结果早，嫁接亲和力强。9.柿柿的主要砧木为君迁子。适应性强，较抗寒，抗旱，耐盐碱，与柿嫁接亲和力好。1.种子的采集一般在母本园内，也可在野生母林中选择品种纯正、无病虫害、充分成熟、籽粒饱满、无混杂的种子进行采集。采收后要根据果实特点取种，果肉无利用价值的，多采用堆沤取种；果肉有利用价值的，结合加工过程取种。但需要注意的是，堆沤取种的堆温应保持25～30℃，加工过程取种防止高温(45℃以上)、强酸、强碱或机械损伤，破坏种子生命力。2.种子的储藏方法（1）干藏法。分为普通干藏法和密封干藏法两种。生产用种子采用干藏法。普通干藏法是指将经过干燥处理的种子，如苹果、梨、桃、山楂、枣、柿等装入麻袋、布袋等，然后放入通风、干燥、经过消毒的室内储藏。密封干藏法用于保护一些珍贵种子，是指将种子干燥到安全含水量以后，装入容器并放入适量吸湿剂，密封，在低温条件下储藏。容器一般是已消毒的玻璃瓶、铅桶或铁桶等。（2）湿藏法。是指将种子，如板栗、柑橘、樱桃等储藏在室温环境条件下，在储藏期间使种子保持湿润状态。此方法常与层积处理同时进行。1.种子质量检验种子净度是指被检测样品中完整无缺、形状发育正常的种子重量占被测样品总重量的百分比。净度是测定种子播种质量的重要指标之一，是科学确定播种量的主要依据。种子净度越高，说明种子质量越高，其公式为种子总重量包括纯净种子、废种子和其他杂物。2.种子生活力测定（1）染色法。常用染色剂有靛蓝胭脂红、氯化三苯基四氮唑、5%红墨水等。将一定数量的种子浸入清水中12～24h,种皮变柔软后，剥去种皮，置于靛蓝染色剂或红墨水中1～2h，最后用清水漂洗。子叶和种胚不着色者或稍有浅斑者为好种子，着色者则为失去生活力的种子。若用氯化三苯基四氮唑染色，结果则正好相反。（2）发芽法。将一定数量的种子置于衬有滤纸、湿纱布或清洁河沙的容器中，于20～25℃下催芽3～5d。依据发芽的数量鉴别种子的质量。层积处理是解除种子休眠的一种方法，即将种子埋在湿沙中，温度为1～10℃，经过1～3个月的低温处理就能有效地解除种子休眠。种子层积、主要果树砧木种子层积日数及播种量分别见图2-1和表2-1。图2-1 种子层积处理过程名称采收时间层积天数（天）每千克粒数（万粒）播种量（kg/hm2）山丁子9—10月30～9015.00～22.0015.0～22.5海棠果9—10月40～554.00～6.0015.0～22.5楸子9—10月40～604.00～6.0015.0～22.5沙果7—8月60～804.4815.0～34.0杜梨9—10月60～802.80～7.0015～37.5山桃、毛桃7—8月80～100（0.04～0.06）/（0.02～0.04）450～750杏6—7月90～1000.03～0.04400～600枣9月60～1000.2～0.26112.5～150山楂8—11月200～3001.3～1.8112.5～225山葡萄8月90～1102.6～3.022.5～37.5板栗9—10月100～1600.01～0.031500～2625表2-1 主要果树砧木种子层积日数及播种量一般要进行土地平整，捡除植物残体，作畦，施肥。土壤要求富含熟化的有机质，禁用盐碱土和生土。每亩(1亩≈667m2，15亩=1公顷，全书同)施用腐熟有机肥4500kg左右，然后进行翻耕、浇水。还要进行土壤消毒，主要目的是消灭土壤中残存的病菌，常用的药剂有硫酸亚铁(黑矾)、五氯硝基苯混合剂。土壤灭虫的常用药剂有西维因和辛硫磷。根据种子特性和当地的土壤、气候条件决定采用春播还是秋播。我国北部地区多为春播，春播时期一般为3月中旬至4月中旬。秋播时期一般为10月下旬至11月中旬，在土壤结冻前完成。播种方法有撒播、条播和点播三种。山桃、桃等大颗粒种子一般采用点播。如播种后覆盖地膜苗木生长健壮、整齐，田间管理方便。山丁子、海棠、杜梨等小颗粒种子一般用条播。为了确保出苗，播种后应覆盖地膜，出苗后进行间苗移栽，保障行内苗木的株距一致。这种播种方式的用种量较大。将植株的一段枝或芽接到另一植株的枝干或根上，使之愈合形成一个新植株的过程称为嫁接，这样得到的苗木称为嫁接苗。嫁接原理是嫁接后砧穗紧密结合，形成层部分形成愈伤组织，使二者生长在一起成为一个有机统一体。嫁接亲和力，嫁接技术，温湿度、光照、空气等环境条件，嫁接时间，嫁接方法及砧木和接穗的质量都直接影响嫁接苗的成活。春、夏、秋季均可进行室外嫁接，冬季一般在室内嫁接。落叶果树的枝接一般以春季(3—4月)嫁接为主，芽接主要在夏季(5—6月)、秋季(8—9月)进行。生产上用的嫁接方法主要为芽接和枝接。芽接是用一个芽片做接穗的嫁接方法，枝接是将带有一个或数个芽的枝条做接穗的嫁接方法。芽接适于在生长季节进行，具有操作简单、速度快、容易愈合、成活率高的特点。这里介绍两种常用芽接方法，即“T”字芽接和嵌芽接。1.“T”字芽接“T”字芽接(图2-2)是果树孕育苗中应用最多的一种方法，要求砧木和接穗皮层均易剥离，只能在离皮期进行。图2-2　“T”字芽接先削接芽，在芽的上方0.5cm处横向环切，深达木质部，然后从芽的下方1.5cm处向上斜削一刀，与芽上横刀口相交，掰下芽片(不带木质)。然后，在砧木距地5cm处选取光滑部位，切一个“T”字形口，插入接芽，用塑料条绑紧。此方法适用于苹果、梨、桃、山楂等树种。2.嵌芽接嵌芽接(图2-3)是果树育苗中普遍采用的方法，特别是对皮层较薄的树种较为适用。先在接穗芽的下方，距芽0.5cm左右向下斜削一刀，深达接穗直径的1/3左右，再从芽上1.5cm左右向下斜削一刀，与芽下切口相接，取下一盾形带木质芽片。在砧木上选择一个光滑位置，削一个与接芽同样形状、稍长于或等于芽片的切口。此方法适用于柿、樱桃、板栗、李、杏等树种。图2-3 嵌芽接除上述两种常用芽接方法以外，还有套管芽接和方块形芽接等方法。枝接可分为硬枝嫁接和绿枝嫁接。硬枝嫁接多在春季旺盛生长前进行，绿枝嫁接在生长季进行。下面介绍枝接常用的三种方法，即劈接、切接和腹接。1.劈接劈接(图2-4)适用于砧木较粗或与接穗等粗的枝接。先将接穗削成楔形，两个削面长度为3cm左右，保留一两个好芽，砧木在距地面5～8cm处剪断。削面一定要平直、光滑，横断面要平滑。图2-4 劈接2.切接切接(图2-5)适用于砧木较粗的嫁接，与劈接相似。图2-5 切接3.腹接腹接(图2-6)一般用于春季苗圃补接。图2-6 腹芽接嫁接方法是先把穗削成楔形，切口一面较长，长约3.5cm,嫁接时靠里侧。另一面切口较短，长约3cm,嫁接时靠外侧。插入接穗，将砧木和接穗的形成层对齐，且将接穗大削面上部稍微露出砧木横切口。将果树部分营养器官插入土壤(基质)中，使其生根、萌芽、抽枝，成为新的植株的方法称为扦插。用这种方法繁殖的苗木叫扦插苗。扦插可在露地进行，也可在保护地进行。扦插根据材料不同可分为枝插和根插。枝插根据生长季节分为硬枝扦插和嫩枝扦插，见图2-7。图2-7 枝插硬枝扦插是指用充分木质化的一年生枝条作插条的扦插方法。生产中常用此方法的季节以春季为主，以葡萄应用最为广泛。（1）在晚秋或初冬结合冬剪进行插条的采集。（2）插条要求芽饱满、无病虫害。（3）插条采回后剪成50cm左右的枝段，每50～100枝为一捆，标明品种，进行沟藏或窖藏，见图2-8。（4）第二年春插时将插条剪成15cm左右的枝段（含2～3个饱满芽）。（5）当土温稳定在10℃以上时即可扦插。图2-8 插条储藏嫩枝扦插又名绿枝扦插，是指利用带叶的当年生半木质化的新梢在生长期进行扦插的方法。（1）嫩枝扦插主要在生长季进行，过晚影响新梢成熟。（2）扦插成活与空气和土壤湿度有关，把采后的插条剪成15cm左右的枝段，保留新梢上部1～2片叶。根插是指用根段进行扦插的方法。根段以0.3～1.5cm为宜，剪成5～10cm,上口平剪，下口斜剪。可冬藏春插，也可春季随剪随插。压条繁殖是指在枝蔓不与母株分离的情况下，将枝蔓压入土中，使其压入部分生根，再与母株分离形成独立植株。常用的压条方法有水平压条、直立压条、空中压条、曲枝压条。1.水平压条水平压条(图2-9)又称连续压条，是指将要繁殖的枝条截去过长部分，春季时在树旁挖掘约5cm浅沟，将枝条水平压入浅沟内，用枝杈固定，使其生根和发梢，随着新梢的伸长加深覆土，及时抹去枝条基部强旺萌蘖，秋后剪离分植。葡萄、苹果矮化砧、紫藤、蔓越橘、蔓性蔷薇等常用此法繁殖。图2-9 水平压条2.直立压条直立压条(图2-10)是指早春萌芽前，对母株进行平茬或截干，促其萌发多个新梢，待新梢长到30cm以上时，进行一次培土，随着新梢的增高再进行第二次培土。两次总高度为30cm。一段时间后新梢基部产生不定根。由此可以采用新梢基部环剥或者环割方法，促其生根，于休眠期切离母体。图2-10 直立压条3.空中压条空中压条(图2-11)是指选择健壮的1～3年生枝条，在其基部5～6cm处纵刻伤或环剥，伤口处涂抹生根调节剂或生根粉，再用塑料薄膜卷成筒状或者用竹筒套在刻伤部位，将塑料袋的下端绑紧，把疏松、肥沃的土壤或者苔藓蛭石等保鲜材料装入袋中，适量浇水，将上端绑紧。以后进行检查、浇水，一般2～3个月即可长出大量新根。图2-11 空中压条4.曲枝压条曲枝压条(图2-12)又称低压法。凡枝条柔软的花木，如葡萄、无花果、山莓、夹竹桃、桂花、迎春、茉莉等可采用曲枝压条。它是指将植株基部的枝条弯成弧形，将圆弧部分埋入土中，再将土压实或埋土上压一块砖头或石块，以免枝条生根前弹出土外。埋入土中的部分也要刻伤或作环状剥皮，充分生根后剪离母株。图2-12 曲枝压条分株繁殖是指利用植株的营养器官进行分离或分割成若干个独立生存植株的方法。常用分株方法有根蘖分株、匍匐茎分株、根状茎分株。1.根蘖分株根蘖分株是指利用树种易发生根蘖的特性，于成龄果园，春季或秋季在树冠外围挖沟断根，将树体部分1～2cm的根水平切断后填回土壤，切离母体的水平根即可萌生新梢。秋后将新的根蘖苗刨出，进行集中培养，即可培育出合格的果苗或砧木苗。北方果树中的枣、山楂、山丁子、海棠、杜梨等易发生根蘖。2.匍匐茎分株匍匍茎分株是指当前草莓生产中的主要方法之一，可建立专一的良种繁育苗圃。苗种栽植按株距15～20cm、行距30～60cm定植。疏掉母株所有花序，促进匍匐茎生成。苗圃地要及时松土、浇水，匍匐茎生根之后及时压土。一般母株年龄不宜超过3年，3年后进行更新，另换地重建母本园。3.根状茎分株草莓浆果采收后，当地上部有新叶抽出、地下部分有新根生长时，整株挖出，将1～2年生的根状茎分枝逐个分离成为单株，即可定植。组织培养是指通过无菌操作，将植物体的器官、组织或细胞接种于人工配制的培养基上，在一定的温度和光照条件下，使之生长发育为完整植株的方法。组织培养的材料包括器官、愈伤组织、细胞、原生质体或胚胎。果树上主要利用组织培养繁殖无病毒苗。确切地说，“无病毒”只防治了一些对果树生长结果为害较大的主要病毒病，并非绝对的无病毒，习惯上称这样的苗木为无病毒苗。对苗木生产基地进行功能分区，其目的在于合理利用圃地面积，便于生产管理和作业实施，提高生产效益。首先要进行实地测量，将生产用地和辅助用地按一定比例描绘在图纸上，要标明各育苗区的所用设施的平面轮廓。同时要注明生产用地中各种植区的面积、培育的果树苗木种类及数量等，同时要考虑苗木的移栽、检验、假植、包装、贮藏和运输等相关环节的安排。首先要做好调研工作，准确把握苗木生产基地自身的栽培技术水平、种源、设备、人力、物力、财力、自身的产品质量、在市场中的地位等背景资料；要依据当地的土壤状况、气候变化规律和农业经济发展水平等条件，因地制宜地发展适销对路的果树苗木，并确定适宜的生产方式。其次要根据资金周转、土地状况及当地果树发展需求、种类、数量等进行统筹规划，合理安排。1.制订合理的生产计划包括生产进度安排、时间安排以及一系列技术规范与要求等，并要考虑主要的生产程序和生产过程中可能存在的不利因素等。2.生产计划的执行和实施生产计划制订后，关键是执行和组织实施。要把计划和任务层层落实，同时要求苗木生产基地各基层单位要做好各个环节的作业计划，并要掌握计划执行的进度，确保苗木生产各个环节的顺利进行，按时、按质、按量完成苗木生产任务，提高苗圃的生产经营水平和经济效益。3.做好生产记录苗木生产过程中应有专人负责作生产记录，要及时准确记录各个环节和主要生产过程，有助于积累经验，为下周期生产奠定良好基础。记录主要包括如下内容。(1)栽培过程记录。包括各项操作过程记录和环境因素记录。①操作过程记录。主要记录如种子处理、播种、间苗、移栽、嫁接、接后管理等各个环节的具体时间、操作要点、生产效果、劳动力预算等。②环境因素记录。包括生产地点的温度、光照、水分、土壤、基质、病虫害发生等情况，特别是保护地设施育苗中环境因素如何调节等。(2)产品成长记录。主要记录果树苗木的生长表现和物候特征，如苗高、胸径、萌芽、抽枝等生长状况记录。至少每周或半月评估一次苗木生长发育情况，并做好详细记录。(3)产出和投入记录。指投入和产出(收入)的记录。通过产投记录分析，可发现、评估并纠正生产中的失误，并可严格实施苗圃经营的程序。营销策划是指巧妙的设计和策略。其基本思路是将企业现有的经营要素按新的思路重新组合，实现新的经营目标的营销活动。营销策划的构成要素主要有如下内容。1.明确目标企业或苗木生产单位要设定战略性、明确性或方向性目标。2.丰富信息要有丰富的信息资源，可通过网络、广告、展会等形式，收集和积累相关的信息资料。尽量做到别人不知我们知、别人无法利用我们可利用、别人没有意识到我们却有超前意识。3.创意和理念创意和理念是营销策划的灵魂，创意的水平决定着企业策划的质量和营销的前景。要始终体现发展企业的思想和核心理念。4.控制意识在落实企业的创意和理念过程中，要客观分析企业当前所面临的困难和条件，控制好苗木从生产到销售的各个环节，保证企业的创意和效益能如期实现。销售渠道是指果树苗木产品从生产到消费者手中所经过的渠道。1.直接销售直接销售是从苗圃将自己生产的果树苗木直接出售给生产用户，其间不经过任何中间商，实行产销合一的经营方式。2.间接销售是在销售渠道中有中间商参与，商品所有权至少要转移两次或两次以上。其优点是有利于开拓市场，且苗木生产基地不从事产品经销，能集中人力、物力和财力组织好产品生产。其缺点是销售渠道较长，商品流转时间长，对果树苗木来说，势必要增加流通费用，提高苗木价格，易造成产销脱节。促销是指苗木生产基地通过各种手段或方法，向消费者宣传本单位果树苗木产品的种类、品种、价格、服务等，有助于树立良好的企业形象和文化，促使消费者产生购买的动机和行为。苗木促销的方法主要有：参加各地举办的苗木展览会、苗木信息研讨会等；利用网络或电话等做好广告宣传；优化售前、售中和售后服务。苗木产品的定价，有其科学性和艺术性。合理的定价方法和合适的价格是苗木生产单位在激烈的市场竞争中立于不败之地的关键之一。通常苗木的价格是根据其生产成本和预先设定的目标利润及税率等因素决定的，计算公式为：果树苗木的销售价格一般采用市场价，买卖双方可以自由协商制定，同时还受到市场供需情况、买卖双方的心理、苗木质量、购买能力等因素的影响，所以苗木生产或经营单位在市场营销活动中，可灵活运用价格策略，合理制定自身产品的价格，以取得较大的经济利益。技术管理是指对苗木生产、包装、贮存等各项技术的科学组织与管理。加强技术管理有利于建立良好的生产秩序，提高本单位或行业的技术水平，扩大苗木种类和品种，提高苗木产量和品质，节约能耗，降低产品成本等。1.建立健全技术管理体系技术管理体系包括技术规范和技术规程，这是进行技术管理、安全管理和质量管理的依据和基础，是标准化生产的重要内容。(1)技术规范。是对各类苗木的质量、规格及其检验方法等作出的技术规定，是企业单位和个人在生产经营活动中行动统一的技术准则，可分为国家标准、地区标准、部门标准及企业标准。(2)制定技术规程的目的。技术规程是为了保证达到技术规范，对生产过程、操作方法以及工具设备的使用、维修、技术安全等方面所做的技术规定，苗圃可以根据自身的具体条件，自行制定和执行。2.注意事项制定技术规范和技术规程应注意以下三方面。(1)要以国家对果树苗木生产的规定和政策、技术标准为依据，同时要因地制宜地结合当地特点和地区操作方法、操作习惯等。(2)要对国内外先进技术的成就和经验结合自身和现有条件加以合理利用，防止盲目拔高或降低标准。(3)要广泛征求多方意见，并结合生产实践多次试行、总结修改后方可批准执行。在执行过程中应随着技术经济的发展及时进行修订，使之不断完善，确保技术规范、规程既严格又可操作性强。生产实践中果树苗木行业的质量管理主要有以下方面。(1)要依据国家标准和行业标准执行果树苗木产品质量检验，进行质量调查分析评价，建立质量保证体系。其次要建立并执行各项质量管理制度。企业或生产单位要实行质量责任制，要设专人负责质量管理工作。(2)要进行全面质量教育，帮助企业领导、技术人员和员工树立质量意识，要开展技术培训、技术考核、技术竞赛等各种有利于提高企业效益和长久发展的活动，鼓励职工钻研技术，提高技术水平。(3)要实行综合质量管理，把好各个生产阶段和每一个环节的技术质量关。做好质量信息反馈工作，积极听取消费者意见，及时反馈市场信息，改进和完善企业质量管理制度。1.科技情报工作的主要内容及时搜集、整理、检索、储存国内外本行业或相关行业的科技资料、信息，为生产、科研、技术改革提供有价值的资料及信息。2.果树苗圃技术档案工作是对苗圃生产和经营活动真实记录的整理与保管。目的是通过不断地记录、整理分析苗圃的使用、苗木生长发育、育苗技术措施的实施情况和人力、物力、财力的投入及综合效果等，掌握苗木生产规律，总结苗木生产技术经验，不断探索苗圃经营管理的合理可行的科学方法，不断提高苗圃的生产经营和管理水平。

砂糖橘、春甜橘、金柑、明柳甜橘、茂谷柑、W·默科特结果早，投产快，产量高，特别是砂糖橘、春甜橘，种后第5年每667平方米产量可达3000～5000千克。要获得高产优质，除了高标准建园、加强病虫害防治以外，种植后的田间管理措施特别是树冠管理技术是否科学、合理、及时、到位，就成为柑橘能否持续获得高产高效的极其重要的因素。因此，必须加强对结果树树冠的管理，通过科学的整形修剪、合理的肥水管理，培养通风透光良好、结果母枝多而健壮的丰产树形，通过保花保果技术的应用达到多结果、年年结果的目的，最终实现丰产、稳产、优质、高效的目的。砂糖橘、春甜橘、明柳甜橘、W·默科特主要以秋梢为结果母枝(图4-1),金柑、滑皮金柑则以春梢和少部分夏秋梢为结果母枝(图4-2)。因此，如何培养数量充足、充实健壮的秋梢或春梢作为结果母枝就十分关键，其数量和质量关系到翌年的产量和质量。要根据树龄、树势、挂果量培养好结果树各个阶段量足质优的结果母枝。一般要求青年结果树培养100～200条、长度20～30厘米；成年结果树和老年结果树培养200～300条、长度15～25厘米，叶片浓绿、健壮充实、无病虫害的结果母枝。图4-1 砂糖橘的秋梢结果母枝图4-2 金柑的春梢结果母枝放秋梢时间要根据树龄、树势、结果量、立地条件和气候条件来决定。砂糖橘、春甜橘以秋梢为结果母枝，如放梢太迟，秋梢不充实，影响花芽分化与结果；放秋梢过早，容易促发冬梢，影响翌年的花量。所以，对砂糖橘、春甜橘、明柳甜橘、茂谷柑、W·默科特来说，结果多、树势弱的缺水的山地果园，适宜在大暑至立秋前放秋梢；对结果少、树势旺盛、水田栽培或灌溉条件好的果园，则可在立秋后至处暑前放秋梢。金柑、滑皮金柑则以重点培养充实的春梢为结果母枝，在春梢萌芽前及时完成修剪、施肥、淋水等工作。图4-3 短剪徒长枝第一，在放梢前15～20天，对树冠中上部丛状密生枝、旺长枝、徒长枝、落花落果枝、弱枝进行短剪或疏剪(图4-3至图4-5)，促发更多健壮秋梢抽出。对结果多的树，应疏去部分皮厚、粗糙、过大、品质低劣和畸形的果实。同时，剪除病虫枝、枯枝，减少养分消耗，促发秋梢。第二，在金柑、滑皮金柑采果后要及时进行修剪，重点对树冠中上部的结果枝、落果枝、徒长枝、弱枝进行适当的短截，促发健壮的春梢，确保当年结果母枝的数量和质量。图4-4 砂糖橘丛状枝枝条多而密图4-5 短剪后的丛状枝砂糖橘、春甜橘、明柳甜橘、W ·默科特、金柑、滑皮金柑结果早，产量高，对肥水的要求较高，如果肥水管理跟不上，就容易造成树体营养失调，树势衰退，产量下降，砂糖橘、春甜橘、明柳甜橘、W·默科特还容易出现大小年现象。因此，应因地制宜，合理施肥。土壤施肥要根据品种、树龄、树势、产量、肥料、季节、天气、土壤等不同情况进行，才能最大限度地发挥肥料的效用，确保丰产、稳产、优质。原则上采取追肥、化肥浅施，基肥、有机肥深施。(1)深翻改土，增施有机肥。每年冬季的12月至翌年1月采果后或夏季的6—7月，沿树冠滴水线下挖长80～100厘米，宽、深各40～50厘米的长方形坑，施肥量约为全年的40%左右，肥料以有机肥为主，配合商品肥。以株结果50千克的产量计算，每株施入绿肥、杂草、腐熟农家肥等有机肥20～30千克，复合肥1～1.5千克，磷肥1千克，饼肥1～2千克，熟石灰1～1.5千克，肥料与土要尽量拌匀施下，避免肥料过于集中造成伤根。深施重肥的位置需逐年轮换，保证土壤疏松肥沃，树体有足够的养分，为丰产、稳产、优质打下基础。(2)萌芽促花肥。柑橘生长、开花结果周期长，生长量大，消耗养分多，而土壤养分有限，所以应及时通过追施肥料补充营养。可在春梢萌芽前10～15天，在树冠滴水线附近开深10～15厘米的环状沟，每株施入0.3～0.75千克尿素、0.5～1千克复合肥，加腐熟的麸水或沼气液30～40千克，施后回土。(3)稳果肥。春梢生长、开花坐果与幼果发育使树体养分大量消耗，而且新梢生长与花果之间还相互争夺养分，导致落花落果。因此，要及时施稳果肥以减少落花落果，促进新梢转绿，提高坐果率。可在谢花2/3左右时，开浅沟每株施入尿素0.3千克、复合肥0.5千克、硫酸钾0.2千克，加施腐熟猪牛栏粪水或沼液30千克。(4)壮果促梢肥。在秋梢抽发前10～15天，沿树冠滴水线附近挖10～15厘米深的浅沟，每株施入尿素0.3千克、复合肥0.5～1千克、腐熟花生麸2～3千克。此次施肥最好同时加腐熟花生麸水30～40千克。目的是保证树体有足够养分，促进果实膨大和秋梢抽发，为翌年开花结果创造条件。(5)采果肥。施采果肥的目的是恢复树势，为翌年开花结果做准备。一般在采果前后进行，树冠盖膜后往往不方便施肥，因此，为了既方便又能及时将肥料施下，可将采果肥提前至11月份、树冠盖膜前施完。肥料以农家肥和有机肥为主，结合商品肥料，按株产50千克计算，每株施农家肥20～30千克、饼肥2～3千克、复合肥1～1.5千克、石灰0.5～1千克。各次追肥的具体施肥种类与施肥量，需根据品种、树龄、树势、产量、土质、气候等情况灵活掌握。大部分叶面肥可与农药结合使用，从而减少劳力、节约开支，但使用时要注意农药及叶面肥使用的注意事项，以免降低药效和肥效。叶面肥最适宜在新梢期和幼果期使用，阴天或下午3时以后喷洒效果更好，具体的叶面肥种类、使用时期与浓度详见本章第四节。水分是柑橘生长发育不可缺少的重要条件。俗话说:收多收少在于肥，有收无收在于水。缺水会使植株萎蔫枯死，而土壤水分过多或湿度过大，则会造成烂根或发病落叶，导致植株衰退甚至死亡。因此，加强水分管理，对柑橘早结、丰产、稳产、优质具有重要的意义。在生产上，如果阴天叶片出现轻微萎蔫症状，或在高温干旱天气条件下卷曲的叶片在傍晚不能及时恢复正常，就要及时淋水，保证树体对水分的需要。柑橘在春梢萌动期及开花期(2—4月)、果实膨大期(5—10月)对土壤含水量十分敏感。当土壤含水量沙土<5%、壤土<15%、黏土<20%时，就要及时淋水。一般砂糖橘、春甜橘裂果期在9月上旬至11月上旬，这个时期如遇到连续干旱，那么每隔15天左右应淋水1次，保持土壤水分均衡，防止因缺水而影响果实膨大，并防止久旱下大雨导致裂果。同时，在秋冬季节利用果园生草，树盘覆盖，保持土壤湿润。一般柑橘在秋、冬季及秋梢老熟后要适当控水:一是防止水分过多，不利于花芽分化；二是抑制抽发晚秋梢和冬梢，使树体更好地积累养分；三是为了提高果实的含糖量，增进果实的风味，同时提高果实耐贮性，在果实采收前1个月内也要适当控制水分，保持土壤适当干旱。果实采收前的10～15天需完全停止灌水，以降低土壤含水量，提高果实品质。长期干旱会使土壤水分大量减少，导致柑橘植株缺水，叶片褪绿、卷缩，果实生长发育停止，严重时引起落叶、落果，枝叶干枯等，甚至出现植株死亡现象。反之，柑橘受涝时间过长或果园低洼长期浸水，植株容易发生根系腐烂、叶片黄化、枯枝等。因此，旱季要注意防旱，雨季注意防涝。主要措施有:第一，建园时搞好果园供水、排水系统，做到能灌能排；第二，改良土壤，每年通过深翻压绿肥，增加土壤肥力，改善土壤团粒结构，提高抗旱性，使土壤水分能排能蓄；第三，在干旱前和大雨过后，及时中耕松土，使空气进入土壤孔隙，可降低土温，减少水分蒸发；第四，在树盘覆盖稻草、杂草或反光薄膜(图4-6)，减少水分蒸发，降低土壤温度；第五，果园生草栽培(图4-7)，除树盘杂草要铲除外，株间、行间非恶性杂草宜保留，或人工种植白花草等。图4-6 树盘覆盖稻草图4-7 果园生草栽培影响柑橘落花落果的原因很多，如长期低温阴雨、缺乏光照、高温、栽培管理不当、树势衰弱、养分供应不足、树势生长过旺、砧木不当、新梢过多与花果争夺养分、病虫害严重等都会导致落花落果。因此，如何把保花保果各项技术措施及时做好非常重要。主要的保花保果技术如下。主要作用是壮蕾、壮花及提高花的质量，提高坐果率，柑橘从花芽分化开始到新梢萌芽至开花结果，树体消耗了大量的营养。特别是采用避雨避寒栽培技术后，砂糖橘、明柳甜橘、W ·默科特、夏橙、春甜橘、金柑留树挂果时间长，更要及时补充足够的养分，才能保证树体正常生长和开花结果。因此，在春梢萌芽前15天左右，沿树冠滴水线附近开环沟施1次花前肥。特别是对衰弱树，要加强肥水管理，增强树势。在现蕾期和谢花后，人工抹芽控梢，把部分营养春梢和谢花后无果的营养枝抹去，可减少落蕾落花。同时，在6月中下旬前，对结果树萌发的早夏梢全部抹除，以减少大量的养分消耗，防止大量落果。在花蕾期、谢花期和幼果期分别进行根外追肥，能及时补充养分，减少落花落果。在花蕾期喷施0.2%～0.3%尿素液+0.2%磷酸二氢钾+0.1%硼砂或速乐硼1000倍液，每隔10～15天1次，连喷2次。谢花后可喷1次0.3%～0.4%复合肥液加含微量元素的叶面肥。也可在花蕾期、生理落果期喷施600倍果叶康3～4次。春季雨水多，开花后花瓣和花丝容易黏附在子房和花托上，造成小果腐烂而落果。因此，可在开花期间每隔5～7天定期摇花，把凋谢的花瓣摇落。人工抹梢成本高，采用药物控梢见效快、效果好。在夏梢期喷杀梢素、控梢素能有效杀死已萌发的夏梢，抑制夏梢生长。但在使用时要严格控制浓度，切忌浓度过高，同时不能与叶面肥、农药混合使用，以免产生药害。在柑橘开花、生理落果期，根据品种的不同，特别是对无核的品种，适当喷施植物生长调节剂，能有效减少落花落果，提高坐果率。出现异常天气时，更要注重生长调节剂的应用。(1)植物生长调节剂的种类。生产上应用较多的主要是赤霉素(920)、芸苔素内酯、细胞分裂素、复硝酚钠(爱多收)、防落素(B9)、2，4-D等。(2)植物生长调节剂的使用。在使用前必须了解植物生长调节剂的有效成分和使用方法，然后根据落花落果和天气等情况使用。如春季低温阴雨，天气异常，为提高花的质量和壮蕾壮花，在现蕾期至谢花期间，宜用芸苔素内酯、细胞分裂素、复硝酚钠等；谢花后至第二次生理落果期落果最为严重，此时应喷施赤霉素、防落素、2,4-D,效果明显，喷时要对果面、果梗、蜜盘均匀喷洒。赤霉素有粉剂和水剂2种，粉剂为无色结晶粉末、不溶于水，要先用少许酒精或高度白酒溶解后使用，水剂则按指定浓度使用即可。(3)植物生长调节剂使用浓度及次数。使用植物生长调节剂要严格控制浓度和次数，不能随意增加或减少，当浓度超过100毫克/升时，易产生药害。生产上有的果农滥用药物，把4、5种植物生长调节剂加入几种叶面肥混合喷施，有的则从现蕾开始至幼果膨大期间，每10～15天喷1次，持续2～3个月喷植物生长调节剂加叶面肥，多达5～6次，这种做法既浪费，又达不到应有的效果。如用赤霉素每克加水10～15升或2,4-D每克加水50～80升，连续使用多次。多种植物生长调节剂加叶面肥混合使用，容易刺激果皮变粗、变厚。正确的使用方法是:赤霉素每克加水30～50升、2,4-D每克加水200～300升，5%芸苔素内酯与细胞分裂素用1000倍液，复硝酚钠用3000倍液，使用2～3次为宜。植物生长调节剂最多同时用2种，不能超出3种，叶面肥加1～2种即可。

果树为多年生植物，栽植后要在固定的地方生长几年或数十年。因此，建立果园必须从长远和全局考虑，因地制宜、合理布局、认真选址、精心设计，才能达到优质高产的目的，获得良好的经济效益。建立果园必须坚持因地制宜、相对集中、有所侧重的原则。要依据当地气候条件、消费群体的要求和消费能力、科技发展水平和未来的发展趋势等因素综合考察分析，确定种树、品种和栽培的规模及设备、设施的配备。必须围绕品种的良种化、管理的科学化、生产的机械化、排灌的水利化、土壤的良土化、栽植的矮密化、寿命的短期化来进行。园址选择的原则有以下几个。利用土层深厚、土质肥沃、水土流失少的平地、丘陵、山地栽培果树，还可达到粮果双丰收的目的。风沙荒地、岗坡地也可建园，但沙荒地有机质含量少，保水保肥力差，建园时应采取防风固沙、种植绿肥等措施，改良不利条件。黏重土的地块排水不良、通气性差，既不利根系生长也不宜建园。另外，盐碱化较重的地块一般不宜建园，若需建园必须先改良土壤。根据当地气候、土壤、雨量、市场需求条件，充分发挥当地的自然优势和品种的优良性状，因地制宜栽植适宜本地区的果树品种。建园要选择交通方便的地方，利于运输生产资料和果品。水源要充足，利于灌溉。果园地点确定后，先进行测量，画出地界。然后确定果园范围、防护林、道路、排灌系统和建筑物的区划。为利于劳动作业，小区的地形以长方形为好。用道路规划果园的小区，一般主路宽5～7m,支路宽3～5m;根据风的来向，确定主林带、副林带；建筑物主要包括贮藏室、包装场、管理用房等相应的配置配套设施。经过对果园进行选择、区划设计规划后，选择适宜的果树品种及其配置，合理的栽植密度和栽植方式成为增加产量、提高经济效益的重要因素。选择适宜当地气候、土壤环境条件的树种和品种，首选当地名、优、特新果品。晚熟品种应与早熟品种搭配，如葡萄和草莓搭配。在坡地建园栽植时，坡地上部土层较薄，可栽植耐贫瘠的树种，如杏、山楂。在缓坡土层深厚的地方，可栽植梨、苹果。在山的下坡可栽植抗寒力强的树种，抗寒力弱的树种可栽植在中、上坡。不同的地区及不同品种的栽植时期不同，北方落叶果树多在落叶后至萌芽前栽植。冬季较为温暖的北部地区，萌芽前春植或落叶后栽植均可，秋植有利于伤口愈合、促进新根生长。冬季寒冷的地区，秋植易于受冻或抽条，春栽效果好。冬季温暖的南方地区，落叶果树秋植或春植为宜。各种果树树种都有适宜的栽植密度，生产上常用栽植密度见表3-1。果树种植株数×行距（m×m）每公顷株数（株）苹果（3～4）×（4～5）500～834梨（1.5～2）×3（矮化砧）333～500山楂（3～5）×（4～6）500～834李（3～4）×（4～5）500～834杏（3～5）×（4～6）333～500葡萄（1～1.5）×（5～6）1111～2000表3-1 常用果树栽植密度(1)长方形栽植。当前生产中应用最广的栽植方式。特点是行距大于株距，通风透光好，适于密植，便于机械化作业，耕作管理方便。栽植株树的公式为：（2）正方形栽植。特点是行株距相等，各株相连成正方形。通风良好，耕作管理方便。但在进入结果期后树冠易于郁闭，不利于进行机械操作和管理。（3）三角形栽植。分为等腰三角形和非等腰三角形栽植，将果树栽植在三角形的顶点上，各行交错栽植，不便于管理，通风透光差。生产中应用较少。（4）带状栽植。一般两行为一带，行距1m左右，带距5m左右。葡萄生产和密植栽培应用较多。（5）等高栽植。适于梯田、撩壕采用。1.土壤准备根据不同类型的土壤进行改良，一般地应深翻施肥、平整土地，沙地建防护林，山地做好梯田或撩壕。2.苗木准备根据因地制宜的原则选好树种和品种，剪掉发霉、折断的部分，一边修剪一边定植。最好栽前浸水，栽时用泥浆蘸根，提高成活率。3.挖坑定植北方应在上年秋季土壤结冻前挖好坑，施足基肥。一般栽植坑深宽不小于1m,表土与底土分开。坑的中心为定植点。将果树苗木主根垂直栽于坑中央，使根系自然舒展，将土壤与肥料混拌均匀后填入坑内踩实。根茎部露出地面，浇足定根水，定植后修剪树形以减少蒸腾。1.幼树树盘管理树盘是指树冠垂直投影范围，根系分布集中。树盘内的土壤可采用清耕或者清耕覆盖法管理。在秋季上冻前刨一遍树盘，刨土深度为10～15cm。2.果园间作管理幼龄果园树小、根狭，有较大的行间距可以进行间作。实行果蔬、果粮、果药、果薯、果苗间作，既可抑制杂草生长，又可增加收入。果树进入盛果期即应停止间作。果园土壤管理分为以下三种形式。1.清耕法果园要勤耕、勤锄，使土壤保持疏松和无杂草状态。在秋季深耕，春夏季进行多次中耕，使土壤保持疏松通气。短期内可显著地增加土壤有机态氮素，起到除草、保肥、保水作用。但不宜长期使用此法。2.生草法除树盘外，在果树行间播种禾本科、豆科等草种的土壤管理方法叫生草法。其优点是增加了土壤有机质和土壤肥力，改善了土壤理化性状，减少了土壤冲刷，对果实的成熟和提高品质有促进作用。缺点是长期生草易使表层土板结，影响通气，与果树争夺水分和养分。3.清耕覆盖法在果树需肥、水较多的生长前期保持清耕，而在雨季种植覆盖作物，待作物长到一定高度后翻入土壤作绿肥，这种方法叫清耕覆盖法。这种方法兼具清耕法与生草法的优点，减轻了二者的缺点。例如，前期清耕可熟化土壤，保持水分和养分；后期播种间作物，吸收利用土壤中过多的水、肥，有利于果实成熟，增进品质，并可防止水土流失，增加有机质。如果果园间作的作物选择恰当，可以以短养长、充分利用土地、增加收入。可加速土壤熟化，提高土壤肥力，控制杂草生长和防止水土流失。（1）一般在桃幼龄期提倡间作，定植后1～2年，全年均可间作。成龄果园只在秋冬季间作比较合适，但全园封园时不宜间作。（2）间作物宜选择根系浅、枝干矮、生长期短、耗肥量少、无或少共同病虫害的作物。（1）豆科类作物。主要有花生、大豆、绿豆等。豆科类作物根系具有固氮作用。（2）薯类。主要有甘薯和马铃薯。（3）蔬菜。主要是一些果菜类、块茎类和叶菜类蔬菜，藤蔓蔬菜不适宜。（4）药用植物。如党参、沙参等。1.不适宜作物（1）高秆类作物：如小麦、玉米、高粱等。（2）藤蔓作物：如瓜类、豇豆等。2.不适宜模式果果间作：在同一块地中，若有两种或两种以上的果树，不同果树种类间有许多病虫害互相传染，同时其年周期中各生育期又不相同，给生产管理带来不便。1.基肥施肥时期基肥以有机肥为主，它是能较长时间供给果树多种养分的基础肥料，如厩肥、堆肥、腐植酸类肥料、土杂肥及绿肥等。基肥的施用一般以秋施为主，多在8月下旬至11月上旬进行。又以有机肥为主(3000～5000kg/667m2)，混合以全年需氮总量60%的氮肥、80%～100%的磷肥、70%～80%的钾肥，施肥方法有全园撒施、条沟施、环状沟施、放射状沟施等。秋季正值根系第二次生长高峰，伤根容易愈合，可促发新根，使肥料有充分的时间分解，部分肥料吸收后能增加树体内养分积累，提高树体的越冬能力和抗寒性。2.追肥施肥时期追肥在生长季根据果林各个生长发育阶段施用。追肥是以基肥为基础，依据树体生长发育不同时期对肥料需求的特点和营养元素的需求，追施速效肥来满足果树生长发育的需要。追肥既是供给当年壮树、高产、优质的肥料，又为来年生长结果打下基础，是果树生产中不可缺少的技术环节。追肥的次数和时期与气候、土质、树龄有关，一般一年进行2～3次。（1）花前肥。又叫萌芽肥，在花芽开始萌发时追肥，以满足开花坐果和发芽抽梢所需肥料。一般每株追施尿素100～150g。（2）花后肥。又叫稳果肥，在落花后坐果期施用，满足幼果需要，促进新梢生长，扩大叶面积，提高光合效能，减少生理落果。一般每株追施尿素100～200g。（3）壮果肥。又叫夏肥，在幼果停止脱落即核硬化前进行。一般每株施人畜粪15～30kg。（4）采前肥。重点针对结果多的晚熟品种，主要解决大量结果造成树体营养亏缺和花芽分化的矛盾，尤以晚熟品种后期追肥更为重要。还可以使落叶果树延长叶片寿命和衰老期，加深叶色，提高光合作用效能，有利于树芽充实及增长树体营养积累，提高树体营养水平。1.土壤施肥土壤施肥是应用最普遍的施肥方法，具体方法包括以下几个。（1）放射沟施肥。以树干为中心，距树干1m左右，由内向外、由浅入深地挖放射状沟后施入覆土。隔年更换施肥部位，适用于盛果期大树。（2）条状施肥。在果树间、株间或隔行开沟施肥，挖横向或纵向长条沟，坡地只能顺等高线横向挖沟。（3）全园施肥。将肥料均匀地撒在地面上，综合耕刨翻入土中，此法可与放射状施肥隔年更换，效果更好。适用于施肥量大的成龄果园和密植果园。（4）环状施肥。在树冠外围稍远处挖环状施肥沟，将肥料与土充分混合，施入沟内，覆土填平。适用于幼年树。2.根外施肥根外施肥又称叶面喷肥，简单易行，用肥量小，发挥作用快，可及时满足果树的急需。喷时将肥料配成低浓度液体，喷施到叶、新梢或果实上，注意叶的正反两面都要喷到，喷雾要细匀，多在无风晴天进行。根外施肥常用的肥料种类和浓度见表3-2。种类浓度种类浓度尿素0.3～0.5硝酸钾0.5硝酸铵0.1～0.3硼砂0.1～0.25硫酸铵0.1～0.3硼酸0.1～0.5磷酸铵0.1～0.5硫酸亚铁0.1～0.4腐熟人尿5～10硫酸锌0.1～0.5过磷酸钙1～3柠檬酸铁0.1～0.2氧化钾0.3钼酸铵0.3草木灰1～5硫酸铜0.01～0.02磷酸二氢钾0.2～0.3硫酸镁0.1～0.2表3-2 根外施肥常用的肥料种类和浓度果园灌水是根据果树不同物候期对水的需求进行的，新梢迅速生长、果实膨胀发育时需水量大。应根据土壤墒情灌溉，随旱随灌，随涝随排。(1)萌芽水。在萌发开花期，使土壤水分充足，对新梢生长、促进开花坐果有积极的作用，为当年丰产打下良好的基础。春季干旱地区，此期灌水更为重要。（2）花后水。此期常为果树的需水临界期，对水分的需要量很大。浇一次透水能减少落花落果，提高坐果率，促进果实膨大。因此，此期自然降雨不足的地区必须灌水。（3）催果水。在果实迅速膨大期。此期也是花芽大量分化期，及时灌水既可促进果实肥大，又促进花芽分化，为连年丰产创造条件。（4）封冻水。秋冬干旱地区采果后，灌水可使土壤中储备足够的水分，有助于肥料的分解，有利于果树第二年春季的生长。寒地果树在土壤封冻前灌一次水，对树体越冬和第二年春季的生长极为有利。1.地面灌水是传统的方法，在生产中应用最普遍，投资少，简便易行。不足是耗水量大，水资源浪费严重。2.设施灌溉通过灌溉设备进行灌水，是现代先进的灌水方法，具有省水、省工、保土、保肥、受栽培环境影响小等特点。影响其发展的因素主要是投资大。在果树管理生产中，整形修剪是一项十分重要且较难掌握的技术。该项技术措施的运用是根据果树的生物学特性、自然环境条件、经济条件、栽培制度和管理技术水平进行操作的。1.提早结果,延长结果寿命通过修剪加速树冠形成，有利于早结果。采用开张角度、轻剪等修剪措施可促进果树成花早结。合理的整形修剪,保持合适的主从关系，培养牢固的树冠骨架。通过修剪可延长树体的结果年限。2.提高产量，克服大小年通过合理整形，促进果树立体结果。通过修剪调节生长势，促进或抑制花芽形成，调节生长枝与结果枝的比例，控制花芽数量等，都可以协调生长与结果，克服大小年，提高产量。3.改善树体通风透光,提高果实品质通过修剪，剪除病虫枝、密生枝、重叠交叉枝等，使树冠枝条分布合理,通风及光照良好，可增进果实着色和风味,合理的结果量，可增大果形，提高品质。同时可减少病虫害。4.提高工作效率，降低成本通过修剪控制树冠高度、大小等,有利于果园的多项管理工作，如打药、施肥灌水、采摘等的进行,提高劳动效率，降低生产成本、减少消耗。整形的基本原则是“因树修剪，随枝作形，有形不死，无形不乱”。整形中要做到“长远规划，全面安排,平衡树势，主从分明”。既要重视树形基本骨架的建造，又要根据具体情况随枝就势诱导成形；既重视早结、早丰产，又要重视树体骨架的牢固性和后期丰产，做到整形结果两不误。修剪的原则是“以轻为主，轻重结合，因树制宜”。这就是说，修剪量和修剪程度总的要轻，尤其是在盛果期以前,应做到“抑强扶弱，正确促控,合理用光,枝组健壮,高产优质”。轻剪固然有利于生长，缓和树势和结果，但为了骨架的建造，又必须对部分延长枝和辅养枝进行适当控制。轻重结合的具体运用，能有效地促进幼树向初果期、初果期向盛果期的转化,也有利于复壮树势,延长结果年限。1.树种、品种的特性不同树种品种的生长结果习性不同，其整形修剪方法也不同。必须根据果树的生长结果特性，因势利导，进行修剪，才能取得良好效果。如以短果枝结果为主的果树(梨、苹果、李等)，应长放以培养短果枝；以长果枝结果的果树(桃、柿等)，应短截来培养长果枝。对成枝力强的，应多疏少截。2.环境条件和栽培技术对同一树种和品种来说,环境条件和栽培技术不同则生长结果也不同。因此，整形修剪时必须考虑当地气候、土肥水条件、栽植密度、砧木种类、树体生长状况及机械管理等情况。如在生长季节长，高温多雨，或地势平坦，土层深厚，肥水充足的地方,果树生长旺，枝多冠大,宜采用大型树冠,定干可高些,修剪要轻。栽培水平高,应轻剪多留花芽。3.修剪反应修剪反应是合理修剪的重要依据。修剪前要了解去年修剪后枝条生长情况和树体的表现,弄清修剪反应后才可能进行正确的修剪。4.经济效益果树修剪还要考虑是否节省劳力，要尽可能地简易省工，降低消耗,提高经济效益。根据果树的生长发育规律,从果园的群体结构出发,培养良好的丰产优质的树体结构。总结各地整形经验和当前发展趋势,结合树种和品种特性，因地制宜确定丰产优质、便于管理的树形。现将生产上常用的主要树形介绍如下(图3-1和图3-2)。图3-1 果树主要树形示意图（1）图3-2 果树主要树形示意图（2）1.有中心干形适用于干性强的树种和品种，如苹果、梨、柿、板栗、核桃等。树形特点：保留中心干，主枝分布较多。常用的有：主干形、疏散分层形(主干疏层形)、多中心干形、十字形、圆柱形、纺锤灌木形等。2.无中心干形适用于对光照要求高，干性较弱的树种和品种，如核果类、柑橘等。树形特点：无中心干，主枝少,分布较集中，树冠矮。常用的有：自然圆头形、自然开心形、多主枝自然形、主枝开心圆头形、丛状形等。3.篱架形常用于蔓性果树、苹果和梨的矮化栽培。主要树形有：双层棚篱架形、棕榈叶形、斜脉形等。4.树篱形常用于矮化栽培。特点是:树冠株间相接,呈绿篱状,行间较宽,有利于光照和果园操作。根据单株树体结构，可分为自然树篱形、扁纺锤形、自然扇形等。5.无骨干形超密栽植时便于机械化操作的树形。全树只有一个枝组，没有骨干枝，栽后一二年就可收获大量果实。1.休眠期修剪休眠期修剪又称冬季修剪，落叶果树从秋季落叶后至春季萌芽前，常绿果树从秋冬果实采收后至春季萌芽前进行的修剪。落叶果树一般在休眠期间，一二年生枝梢内营养物质含量较少,此时修剪养分损失较少。常绿果树冬剪时期宜在春梢抽生前进行，因此时叶片中的氮、磷、钾含量较低，可减少养分损失。2.生长期修剪生长期修剪又称夏季修剪,是指从春季萌芽至落叶果树秋冬落叶前或常绿果树晚秋梢停长前进行的修剪。生长期修剪可缓和树势,改善光照条件,促进开花结果。根据修剪内容和目的，可按果树年周期内不同物候期进行,如在萌芽后进行抹芽;在开花结果期可进行摘心、疏花疏果、疏梢等。1.短截短截是剪掉一年生枝条的一部分。短截可分为轻短截、中短截、重短截、极重短截等。(1)轻短截。剪去枝条的1/4～1/3。目的是削弱枝条的顶端优势，截后易形成较多的中、短枝,单枝生长较弱，但总生长量大，母枝加粗生长快，能缓和生长势，利于花芽分化。(2)中短截。剪去枝条的1/3～1/2。截后多形成较多中、长枝，生长势强，枝条加粗生长快，有利于树冠延伸及恢复枝条生长势。一般多用于延长枝上和复壮枝势。(3)重短截。剪去枝条的2/3～3/4。截后对局部刺激大，萌发的侧枝少，但生长较旺，多用于缩小树体,培养枝组，改造徒长枝和竞争枝。(4)极重短截。只保留基部1～3个不饱满芽,其余的剪掉。截后萌发1～3个弱枝，多用于处理竞争枝，降低枝位，或用于短枝型修剪。2.疏枝疏枝又称疏剪，将枝条从基部全部剪掉称为疏枝。对剪口上部的枝条有削弱作用，而对剪口下的枝条有一定的促进作用。它对剪口附近母枝上的腋芽没有明显的刺激作用，也不会增加母枝上的分枝数，只能使分枝数减少。疏剪主要是疏去内膛过密枝，以减少树冠内枝条的数量，调节枝条均匀分布，为树冠创造良好的通风、透光条件，减少病虫害，避免树冠内部光腿现象，减少全树芽数，防止新梢抽生过多而消耗过多营养，利于花芽分化，此外应疏除竞争枝、徒长枝、根蘖枝、枯枝、病虫枝等。3.回缩回缩又称缩剪,剪去多年生枝条的一部分称为回缩。修剪量大，对树体刺激大。它可降低顶端优势的位置,改善光照条件,使多年生枝基部更新复壮。在缩剪时常常因伤口影响下枝长势,需暂时留适当的保护桩;待母枝长粗后，再把桩疏掉。4.缓放缓放又称长放、甩放。对一年生枝条不剪任其生长称为缓放。枝条缓放后，下部易发生中、短枝,停止生长早，利于花芽形成。缓放用于中庸枝、平生枝、斜生枝效果更好。对于幼树的骨干枝的延长枝或背生枝、徒长枝不能缓放。弱树也不宜多用缓放。5.摘心在生长季摘去新梢的顶端幼嫩部分称为摘心。可抑制其继续生长，促使枝条木质化,促进分枝，同时削弱了顶端优势，有利于树冠形成。新梢旺盛生长期摘心可促生二次枝,有利于扩大树冠,对幼树可促其分枝,加快分枝级数,提早结果。葡萄花前花后摘心，可提高坐果率和促进果实膨大。6.抹芽、疏梢抹去嫩芽称为抹芽或除萌,疏除过密的新梢称为疏梢。常用于柑橘、葡萄、桃、老树更新除萌蘖等。可选优去劣，节约养分,改善光照，提高留用枝的质量,促进枝梢生长。7.刻伤包括目伤和纵伤。用刀横割枝条的皮层，深达木质部称刻伤。在枝芽上方刻伤,可以促进其生长;在其下方刻伤可以控制其生长,促进花芽形成,提高坐果率和充实枝条生长。其目的是调节骨干枝的长势和增加枝梢数量(图3-3)。图3-3 刻伤及其应用8.扭梢、拿枝和曲枝扭梢是将旺梢向下扭曲或将其基部旋转扭伤。拿枝用手对旺梢自基部到顶部捋捋，伤及木质部，响而不折。扭梢和拿枝都可阻碍养分运输，缓和生长，提高萌芽率，促进中短枝和花芽形成，提高坐果率和促进果实生长。曲枝是改变枝条生长方向、空间位置，缓和枝条生长势的方法。是将直立的枝条，引向水平和其他方向的空间，可以加大枝条角度，扩大树冠，改善光照，充分利用空间。曲枝能抑制枝条生长，促进花芽分化。曲枝后，应及时抹芽，以防枝下部抽生直立旺枝(图3-4)。图3-4 扭梢9.环剥环剥是将枝干韧皮部剥去一环。主要是阻止了韧皮部的运输，使被剥枝条从上向下运输受阻，从而调节了被剥部以上枝条的生长，减缓了生长势，利于成花。具有类似作用的还有环割、绞缢、环状倒贴皮、大扒皮等。环剥的时间通常在春末夏初，新梢停止生长前后，已有一定的叶面积形成时进行,可有利于花芽分化;为促进基部萌发抽枝，则在萌动前高位环剥，使基部隐芽萌发。环剥的程度是指环剥的宽度及深度。其宽度常以环剥处枝条直径的1/10的宽度。太宽，则不能愈合而至死亡，太窄，起不到削弱生长势的作用。而深度则以除去韧皮部不能伤及木质部为宜，如伤及木质部，严重时会使环剥处以上整个枝条枯死。进行环剥后，为了提高被剥枝梢上部枝叶中含氮量,应进行多次根外追肥。追肥以氮为主，可以提高其效果,并可防止叶片发黄和提早落叶。(1)调节枝条角度。通过选留斜生枝、剪口芽留下芽、里芽外蹬、拉枝、拿枝、扭梢等方法加大枝条角度；反之,可减小枝条角度。(2)调节花芽量。采用长放、拉枝、环剥、扭梢、轻短截、摘心等修剪方法可以增加花芽量；采用重短截、中短截、疏剪花芽等可减少花芽量。(3)调节树体生长势。对于树势强的应冬轻夏重，延迟冬剪，采用长放、拉枝、扭梢、摘心等缓和生长势的修剪方法，多疏少截,去强留弱、去直留斜、多留果枝,抑制生长；反之,对于树势弱的可增强树势。花果管理，是指直接对花和果实进行管理的技术措施。其内容包括生长期中的花、果管理技术和果实采收及采后处理技术。花果管理是果树现代化栽培中重要的技术措施。采用适宜的花果管理措施，是果树连年丰产、稳产、优质的保证。本任务将以稳产优质为中心，重点讲述保花保果和疏花疏果技术。坐果率是产量构成的重要因素。提高坐果率，尤其是在花量少的年份提高坐果率，使有限的花得到充分的利用，在保证果树丰产稳产上具有极其重要的意义。绝大多数果树的自然花朵坐果率很低。例如，苹果、梨的最终花朵坐果率为15%左右，桃、杏为5%～10%，柑橘类为1%～4%;枣最低，仅有0.13%～0.4%。因此，即使是在花量较多的月份，如不采取保花保果措施，也常会出现“满树花，半树果”的情况。提高坐果率的措施如下。（1）树体的营养水平，特别是贮藏营养水平对花芽质量有很大影响。许多落叶果树的花粉和胚囊是在萌芽前后形成的，此时树体叶幕尚未形成，光合产物很少，花芽的发育及开花坐果主要依赖于贮藏营养。贮藏营养水平的高低，直接影响果树花芽形成的质量、胚囊寿命及有效授粉期的长短等。因此，凡是能增加果树贮藏营养的措施，如秋季促使树体及时停止生长、尽量延长叶片寿命和光合作用的时间等都可采取。（2）合理调整养分分配方向。果树花量过大、坐果期新梢生长过旺等都会消耗贮藏的养分，从而降低坐果率。采用花期摘心、环剥、疏花等措施，能使养分分配向有利于坐果的方面转化，对提高坐果率具有显著的效果。（3）对贮藏养分不足的树，在早春施速效肥，如在花期喷施尿素、硼酸、磷酸二氢钾等，也是提高坐果率的有效措施。(1)人工辅助授粉。借助人工辅助授粉可提高果树坐果率。果树花期遇到阴雨、大风、低温天气、蜜蜂等昆虫活动受阻，或因果园品种单一、授粉品种不足，或花期不遇等都影响自然授粉。即使在正常的环境和气候条件下，进行人工辅助授粉，对于促进果个增大、端正果形及提高品质等方面仍具有显著效果。因此，在苹果、梨、橙、柚、荔枝等果树上，人工辅助授粉已成为一项常规技术措施。授粉用的花粉应在授粉前(2～3d)采集。选择授粉品种亲和力强、花粉量大而生活力高的品种，于大蕾期(气球期)采花蕾，以人工或机具搓揉花朵、过筛，收集花药，摊放在通风避光处阴干，温度维持在20～25℃,相对湿度为60%～80%,一般经24～48h,花药即裂开，此时收集花粉，干燥后将其放入玻璃瓶中，并在低温、避光、干燥条件下保存备用。需长期保存时，应将花粉充分干燥，封于玻璃瓶或塑料袋内，避光保存在0～4℃的干燥环境中，最好放于有干燥剂的干燥器中存放。授粉是在初花期开始，并随花期的进程及时授粉的。授粉方法有人工点授、机械喷粉、液体授粉等。人工点授是指用授粉工具将花粉直接点放在柱头上的授粉技术。人工点授在整个花期中至少应进行2～3遍，每个花序只授1～2朵花或间隔花序授粉，而对坐果率低的树种、品种或花量少的年份，应多花、多次授粉。机械授粉是借助喷粉机器于花期喷撒花粉的辅助授粉技术。具体方法是在花粉中加入100～300倍的滑石粉或淀粉，混匀后装入农用喷粉器，均匀喷撒在花器上。如果只进行一次喷粉，则应在盛花期进行。填充剂易吸水，造成花粉破裂，因此应现用现混合，混合后应在4h内喷完。液体授粉是指将花粉制成花粉混合液进行喷雾授粉。一般是将花粉配成5%～10%的蔗糖溶液，用喷雾器于盛花期喷洒花的柱头，蔗糖溶液可防止花粉在溶液中破裂。为增加花粉活力，可在溶液中加0.1%的硼酸或硼砂。硼酸或硼砂在用前再混入。因混后2～4h花粉便可以发芽，为此溶液配好后应在2h内喷完。(2)果园放蜂。果园放蜂是一种很好的授粉方法。果树花期时在果园内放养一定量的蜜蜂，通过蜜蜂传粉实现辅助授粉的技术。对于虫媒花果树(如苹果、梨、桃等)，在果园内放养蜜蜂是我国常用的辅助授粉方法。一般每0.3～0.5hm2放一箱蜂，即可达到良好的效果。果园放蜂应注意：蜂箱要在开花前3～5d搬到果园中，以保证蜜蜂顺利适应新环境，在盛花期到来时能够正常出箱活动；在果园放蜂期间，切忌喷施农药，以防蜜蜂受毒害；当花期遇阴雨、大风或低温天气时，蜜蜂不出箱活动，会影响授粉效果，应配合人工辅助授粉。施用某些植物生长调节剂，可以提高果树坐果率。目前应用较多的有赤霉素、萘乙酸、脲等。在应用生长调节剂时要注意，不同的调节剂，或同一种调节剂在不同树种上使用，其作用差别很大，第一次使用新的生长调节剂时必须进行小面积试验，以免造成损失。花期是果树对气候条件最敏感的时期，如遇恶劣天气，往往会造成大幅度减产。在果园种植防风林是改善果园小气候的有效措施。此外，通过早春灌水，可推迟果树开花的时间，躲过晚霜的为害，减少损失。果实套袋、树冠上用塑料薄膜覆盖等措施可提高坐果率。疏花疏果是及时疏除过量花果，保证合理留果量，以保持树势稳定，实现稳产、高产、优质的一项技术措施。果树开花坐果过量，会消耗大量贮藏营养，加剧幼果之间的竞争，导致大量落花落果；果实过多还会造成营养生长不良，光合产物供不应求，影响果实正常发育，降低果实品质，削弱树势，降低抵抗逆境的能力。理论上讲，疏花疏果进行得越早，节约贮藏养分就越多，对树体及果实生长也越有利。但在实际生产中，应根据花量、气候、树种、品种及疏除方法等具体情况来确定疏除时期，以保证足够的坐果为原则，适时进行疏花疏果。疏花疏果分为人工疏花疏果和化学疏花疏果两种。(1)人工疏花疏果。人工疏花疏果是目前生产上常用的方法。优点是能够准确掌握疏除程度，选择性强，留果均匀，可调整果实分布。缺点是费时费工，增加生产成本，不能在短时期完成。人工疏花疏果一般在了解成花规律和结果习性的基础上进行，为了节约贮藏营养，减少“花而不实”，以早疏为宜，“疏果不如疏花，疏花不如疏花芽”，所以人工疏花疏果一般分三步进行。第一步，疏花芽。即在冬剪时，对花芽形成过量的树进行重剪，着重疏除弱花枝、过密花枝，回缩串花枝，对中、长果枝破除顶花芽；在萌动后至开花前，再根据花量进行花前复剪，调整花枝和叶芽枝的比例。第二步，疏花。在花序伸出至花期，疏除过多的花序和花序中不易坐优质果的次生花。疏花一般是按间距疏除过多、过密的瘦弱花序，保留一定间距的健壮花序；对坐果率高的树种和品种可以进一步对保留的健壮花序只保留1～2个健壮花蕾，疏去其余花蕾。第三步，疏果，在落花后至生理落果结束之前，疏除过多的幼果。依据树体负载量指标，人工调整果实在树冠内的留量和分布的技术措施，是疏花疏果的最后程序。定果的依据是树体的负载量，即依据负载量指标(枝果比、叶果比、距离法、干周及干截面积法等)，确定单株留果量，以树定产。(2)化学疏花疏果。化学疏花疏果是在花期或幼果期喷洒化学疏除剂，使一部分花或幼果不能结实而脱落的方法。优点是省时省工、成本低、疏除及时等。缺点是因疏除效果受诸多因素的影响，或疏除不足，或疏除过量，从而致使这项技术的实际应用有一定的局限性。化学疏花疏果分为化学疏花和化学疏果。化学疏花常用药剂有二硝基邻甲苯酚及其盐类、石硫合剂等。化学疏果常用药剂有西维因、萘乙酸和萘乙酰胺、敌百虫、乙烯利等。

玉米矮花叶病（Maize Dwarf Mosaic）和玉米粗缩病（Maize Rough Dwarf）是近十几年来为害我国玉米生产的两种主要病毒病害[1]。自20世纪90年代以来，玉米矮花叶病、粗缩病在山西流行严重[1，2，5]，给玉米生产带来很大损失，特别是1994～2000年连续严重发生的玉米矮花叶病和粗缩病，使山西省运城、临汾等地的晚播玉米颗粒无收，夏玉米因病害减产30%以上[2]。1998年全省发病面积45万hm2，占玉米种植面积的52%，全省损失粮食5亿多kg[3]。大面积种植感病品种是病害流行的重要原因。改良山西省常用玉米自交系和杂交种对病毒病的抗性，已成为玉米生产和育种单位急待解决的问题[3，7]。国内外研究表明：不同的玉米自交系和杂交种对玉米病毒病的抗性有明显差异[4]。选育和种植抗病品种是防治玉米矮花叶病和粗缩病最经济有效的措施[3，6，7]。本研究皆在通过田间自然发病初选，人工接种，病圃重复鉴定，筛选出对两种玉米病毒病具有抗性的种质资源。为有效地开展玉米抗病毒病育种提供参考依据。供试玉米种质资源材料共915份，其中常用玉米自交系276份，杂交种及新组合181份，热带改良新选系458份。热带改良新选系由本所种质改良课题组提供，其余的玉米资源由省内有关育种单位和种子公司提供。1.2.1 田间自然发病鉴定初选 田间自然发病鉴定初选：2001年和2002年对全部材料分2年在山西省玉米病毒病发生严重的地区运城、临汾和太谷3个点同时进行。每份材料种植2行，每行50株，行长15m，株行距0.3m×0.65m。以自然发病为主，授粉1～2周后调查病株率，发病率在15%以上的视为不抗病。对这批材料将不进行抗病复选。1.2.2 人工接种重复鉴定复选 2003～2004年，对经过田间初选的抗病材料同时进行矮花叶病人工接种和粗缩病自然重复鉴定。病圃设在山西省农业科学院小麦研究所实验场（临汾市区），历年发病较重的固定地块。供试材料田间顺序排列，每份材料种植2行，每行25株，行长7.5m，株行距0.3m×0.6m。玉米矮花叶病人工接种方法：采用蚜虫接种法，设自交系黄早4（R），Mo17（S）为抗、感对照种。玉米粗缩病重复鉴定方法：采用田间自然接种法，鉴定圃四周全部种植冬麦，利用灰飞虱发生规律，调节玉米播期（5月中旬）使幼苗与成虫羽化高峰期吻合，以达到传毒最佳效果，设自交系沈137（R），478（S）为抗、感对照品种。玉米授粉半个月后调查病情。玉米矮花叶病病株分级标准参照吴全安的方法[11]。即：0级全株无症状；1级，植株上部叶片1%～3%显症，有褪绿斑花叶；2级，植株中部叶片，1%～30%显症，植株略矮；3级，植株严重发病，2/3的叶片呈现花斑条纹，果穗弯小或不结实。病情指数按以下公式计算：依据病情指数划分抗病类型，0～5.0高抗（HR）；5.1～15.0抗病（R）；15.1～30.0中抗（MR）；30.0以上感病（S）。玉米粗缩病病害分级标准参照陈巽珍分级标准[8]，即：0级，健株，全株无症状；1级，比健株矮1/5，雄穗轴稍短；2级，比健株矮1/2，顶部略丛生，果穗长度为健株的1/2；3级，株高为健株的1/3，顶部叶小，上冲，穗小多畸形；4级，苗株死亡或极矮小，顶叶上冲丛生，绝收。病情指数计算公式同前。依据病情指数，划分抗病类型，0～5.0高抗（HR）；5.1～20.0抗（R）；20.1～40.0感（S）；40.1以上高感（HS）。2001～2002年，对915份玉米自交系和杂交种在重病区进了田间自然发病鉴定初选，淘汰了感病材料208份。2002～2004年，对初选的912份材料（自交系537份，杂交种142个），进行了矮花叶病、粗缩病人工接种，病圃重复鉴定。鉴定筛选结果见表1、表2和表3。种质类型Germplasmtype鉴定数量No高抗highResistant抗Resistant感Susceptible高感HighsusceptibleNo%No%No%No%自交系Inbredlines734253.411816.125334.533846.0杂交种Hybrids181168.96938.15832.03821.0合计Total915414.518720.431134.037641.1Table 1 Results of indentification for resistance of maize inbred lines and hybrids to SCMV-MDB种质类型Germplasmtype鉴定数量No高抗highResistant抗Resistant感Susceptible高感HighsusceptibleNo%No%No%No%自交系Inbredlines734334.512917.634547.022730.9杂交种Hybrids1812916.05128.26636.53619.9合计Total915626.817919.641144.926328.7Table 2 Results of indentification for resistance of Maize inbred lines and hybrids to MRDV种质类型Germplasmtype鉴定数量No双高抗双抗DoublehighNoResistant%DoubleNoResistant%自交系Inbredlines73470.967510.2杂交种Hybrids18195.05027.6合计Total915161.7512613.8Table 3 Results of indentification for resistance of Maize inbred lines and hybrids to SCMV-MDB and MRDV表1表明经过人工接病鉴定：筛选出抗矮花叶病自交系118份，占自交系鉴定总数的16.1%，杂交组合69个，占杂交种鉴定总数的38.1%，优良高抗病自交系有25份，占自交系鉴定总数的3.4%，它们是：选9、齐31、93选2、假B734、选78、选7、选141、选127、选301、选145、选151、选250、5081、改84-2、改99-1、改100-1、改113-1、改100-2、改474-1、改418-1、改377、改403、改426、沈137、99-5。表现为高抗病的杂交种有16个，占杂交种鉴定总数的8.9%，它们是：长单39、长单40、忻抗7号、太早单18号、98-1×5081、并单3号、齐319×98-3、并单4号、422×齐35、B734×93选2、H9-21×临京11-2、农大108、忻玉106、忻单108、晋单36、鲁单50。表2结果表明：供鉴定材料中，抗粗缩病自交系有129份，占自交系鉴定总数的17.6%；杂交种50份，占杂交种鉴定总数的27.6%；高抗病自交系有33份，占自交系鉴定总数的4.5%。它们是：选29、选41、选114、选125、选214、齐31、齐35、93选2、假B734、选331、选78、选184、选159、R选3、选50、选59、选2-2、选11-1、选46-2、选121-1、选132-1、选155-1、R10-2、R49-1、选90-3、海选36、改357-1、改474-1、改418、改408、改427、98-2、98-3。高抗病杂交种29个，占杂交种鉴定总数的16.0%，它们是：B734×93选2、422×齐35、并单4号、陕单971、新陕单1号、鉴35、齐31×98-3、并单3号、陕高农5号、临油1号、忻玉106、长单40、屯9902、同单4号、同早5号、春早单3号、运早1号、FL2、晋玉681、早利26、京单958、太早单20、太早单21、早玉2号、早玉4号、LD981、运单14、H9-2×临京11-2、H9-2×临京11-3。通过表3可以看出：被鉴定材料中，对两种病毒病同时都表现为抗病的自交系有75份，占自交系鉴定总数的11.6%，如：选41、选125、选214、齐35、选331选159、选50、选7、选141、选31、选211、选87、选14、选217、选301、选186、选102、选145、选151、选153、选250、改2-2、改11-1、改132-1、改155-1、R49-1、选90-3、海选36、改15-2、改16-2、改29-2、改50-2、改99-1、改100-1、改102-2、改111-2、改113-1、改116-1、改125-1、改134-2、改170-2、改357-1、改474-1、改418、改408、改427、改377、改403、改426、改404、改476、改406、改407、改416、改419-1、改420、改422、改430、改432、改433、改440等。双抗杂交种51个，占杂交种鉴定总数的29.8%，如：陕单971、新陕资1号、鉴35、陕单931、98-1×5081、4-18、临油1号、忻玉106、选66×308-2、忻5344、忻玉105、长单39、屯单9901、屯9902、屯9906、京玉8号、春早单1号、春早3号、太单早18、太单23、太单32、早利26、协玉2号、运单13号、晋玉681、晋玉751、科试7号、沈单10号、早玉3号、早玉2号、并单1号、太早单20、高油115、忻玉9704、忻抗13、LD981、DH3801、强盛17、并单2号、同单36号等。对两种病毒病同时都表现为高抗的材料共16份，占鉴定总数的1.96%，其中双高抗自交系有选29、齐31、93选2、假B734、选78、改474-1、改418，共7份，占自交系鉴定总数的1.1%。双高抗病杂交种有B734×93选2、422×齐35、并单4号、齐31×98-3、并单3号、陕高农5号、长单40号、H9-21×临京11-2、忻玉106，共计9个，占杂交种鉴定总数的5.3%。杂交种抗矮花叶病的比例为38.1%，自交系的为16.1%；杂交种抗粗缩病的比例为28.2%，自交系的为17.6%；杂交种同时抗这两种病毒病的比例为27.6%，自交系的为10.2%；杂交种同时高抗这两种病毒病的比例为5.0%，自交系的为0.96%；通过对杂交种和自交系材料抗病性比较，可以看出杂交种抗病的比例远高于自交系的。从表4看出被鉴定热带亚热带玉米改良自交系中，对两种病毒病同时都表现为抗病的有59份，占热带改良系鉴定总数的12.9%；对两种病毒病同时都表现为高抗的有5份，占热带改良系鉴定总数的1.1%。而国内温带自交系对两种病毒病同时都表现为抗病的有16份，占国内温带自交系鉴定总数的5.8%；对两种病毒病同时都表现为高抗的仅2份，占国内温带自交系鉴定总数的0.7%。从而可以看出热带亚热带玉米改良自交系抗病比例远远大于国内温带系。种质类型Germplasmtype鉴定数量No双高抗双抗DoublehighNoResistant%DoubleNoResistant%自交系Inbredlines73470.967510.2热带改良系Tropicalinbredlines45851.15912.9国内温带系Chinatemperate'sinbredlines27620.7165.8Table 4 Results of indentification for resistance of Tropical and China temperate's inbred lines to SCMV-MDB and MRDV采用蚜虫接种法，重病区病圃自然发病重复鉴定法，4年来，对816份不同类型玉米种质资源进行了玉米矮花叶病、粗缩病的抗病性鉴定。筛选出同时抗两种病毒病的自交材料75份，杂交种51个；双高抗病优良自交系7份；双高抗病杂交种9个；为玉米抗病毒病育种提供了一批抗病材料，为玉米生产上应用抗病品种提供了科学依据。在鉴定材料中双抗病材料所占比例较小，同时高抗两种病毒病的材料所占比例更小，鉴定材料的抗病性与其来源关系密切，不同的种质材料对两种玉米病毒病的抗病性有明显差异，杂交种和杂交组合的抗病性比例明显优于自交系；不同来源自交系的抗病性差异更大。利用热带、亚热带玉米种质改良的新选自交系，抗病比例远远高于没有热带血缘的常规系，这说明热带、亚热带玉米种质资源中有优良的抗病毒病基因，是改良我国温带玉米种质病毒病抗性的很有利用前景的抗源种质。本研究采用的矮花叶病蚜虫接种法，是我国多年来传统接种的方法，虽然由于养蚜、饲毒等工作量较大，但不失为一种可靠性强的接种方法。粗缩病的抗性鉴定方法国内现在一直采用田间自然发病鉴定方法，试验选择了利于病毒病发生的试验环境，把鉴定点设在山西省发病严重的地块进行，并进行了重复鉴定，使鉴定结果有了更强的可靠性。

【症状】 柑橘大实蝇，又名柑橘大果实蝇，幼虫称为柑蛆、蝇蛆。主要为害甜橙、酸橙、红橘、温州蜜柑等。成虫产卵于柑橘幼果中，幼虫孵化后在果实内部穿食瓤瓣，导致果实出现未熟先黄、黄中带红现象被害果实严重腐烂，提前脱落，完全失去食用价值，严重影响柑橘产量和品质。柑橘大实蝇为害引起落果【形态特征】 成虫体长10～13mm，翅展约21mm，全体呈淡黄褐色，复眼金绿色。老熟幼虫体长15～19mm，乳白色圆锥形，前端尖细，后端粗壮。【发生规律】 一年发生1代，以蛹在土中越冬。成虫于4月下旬开始羽化出土，5月为盛期，产卵盛期为6月中旬至7 月上旬。柑橘大实蝇雄虫柑橘大实蝇雌虫【防治方法】 （1） 农业防治：①果实套袋。②在8月下旬至11月，随时摘除产卵痕迹明显的青果、被幼虫蛀害 “着色不正常” 的黄果，彻底捡拾掉落的虫果，并对这些果实进行集中处理。（2） 物理生物防治：成虫羽化开始后进行诱杀，如用频振式杀虫灯、糖醋液、性引诱剂等诱杀成虫。（3） 化学防治：关键要在成虫出土和幼虫入土时进行地面喷药。药剂有65%辛硫磷1000～2000倍液、20%灭扫利、20%灭杀菊酯或25%溴氰菊酯2000～3000倍液等。被害果实内的幼虫柑橘大实蝇蛹【症状】 柑橘小实蝇，又名黄苍蝇、果蛆等，主要为害柑橘、桃、李等果树。以幼虫蛀食果肉为害，导致果实腐烂、脱落，为害极其严重，防治不及时常造成绝收。【形态特征】 成虫头部黄色或黄褐色，肩胛、背侧胛完全黄色。卵乳白色，长约1mm，宽约0.1mm；3 龄老熟幼虫长7～11mm；蛹椭圆形，长4～5mm，宽1.5～2.5mm，淡黄色。【发生规律】 一年发生3～5 代，以蛹越冬。发生不整齐，同一时期各种虫态并存。柑橘小实蝇幼虫柑橘小实蝇成虫【防治方法】 （1） 农业防治：及早摘除被害的果实并捡净落地的虫果，集中深埋；果实初熟前进行果实套袋；冬季清园挖蛹，减少虫源；加强预测预报，建立统一防治措施。（2） 化学防治：在幼虫脱果入土盛期和成虫羽化盛期地面喷洒50%辛硫磷800～1000倍液；主要为害期树冠喷洒90%晶体敌百虫或50%马拉硫磷乳油800～1000倍液。树冠喷药防治成虫。在5—11月成虫盛发期，用1%水解蛋白加90%晶体敌百虫600倍液；或用90%晶体敌百虫1000倍液加3%红糖；或用20%灭扫利1000倍加3%的红糖制成毒饵，喷布果园及周围杂树树冠。10天喷1次，连喷3～4次，连续防治2～3年。【症状】 杨梅果蝇是杨梅的主要害虫之一，在杨梅果园及其周边环境中都有发生，且分布较广泛。以雌果蝇产卵于成熟的杨梅果实乳柱上，孵化后的幼虫 （蛆） 蛀食为害。引起受害果实凸凹不平、霉变和落果，影响品质、产量和贮藏性，严重时绝收。杨梅果蝇繁殖力强，有时呈暴发性为害。【形态特征】 杨梅果蝇体形较小，一般体长约2.5mm。卵长约0.5mm，呈白色椭圆形，具有绒毛膜和卵黄膜。幼虫白色，头尖尾钝。【发生规律】 杨梅果蝇在田间世代重叠，不易划分代数，无严格越冬过程。果蝇发生盛期在6月中下旬 （果实成熟期） 和7月中下旬 （果实采收后），6月中下旬的发生为害会造成经济损失。清晨和黄昏为成虫的日活动高峰期。【防治方法】 （1） 农业防治：①加强果园水肥管理和修剪，增强树势，确保果园通风透光。②及时清理果园，尤其是落地果、腐烂的杂物及发酵物等，以减少虫源。（2） 化学防治：①药液诱杀。在杨梅落花后，用敌百虫、香蕉、蜂蜜、食醋按10∶10∶6∶3的比例，配制成诱杀液，每亩投放10份。②药剂喷施落地果。在成熟期前 （即5月中旬） 用低毒低残留的1.8%阿维菌素喷洒落地果，喷后及时清理。杨梅果实受害症状杨梅果蝇幼虫【症状】 桃蛀螟，俗称蛀心虫、食心虫。主要以幼虫为害桃树、梨、石榴、枇杷等的果实。幼虫孵化后多从果蒂或果与叶、果与果相接处蛀入果心。被害果内和果外都有大量虫粪和黄褐色胶液。【形态特征】 幼虫体长15～25mm，暗红色，头部深褐色，前胸背板褐色，各节体都有灰褐色斑。【发生规律】 越冬代成虫于5月上旬发生，成虫夜间产卵于果实上，两果相接处产卵较多。卵7天左右孵化成幼虫，蛀果为害。南方地区一年发生4～5代，为害果树的一般为第一、第二代幼虫。9月下旬，老熟幼虫爬到树皮缝隙或树洞等处结茧越冬。受害果实堆积大量虫粪和黄褐色胶液桃蛀螟幼虫【防治方法】 （1） 农业防治：①冬季清园，刮除老翘皮，清除越冬茧。生长季及时摘除被害果，集中处理，秋季采果前在树干上绑草把诱集越冬幼虫集中杀灭。②合理剪枝和疏果，避免枝叶郁闭和果与果相互密接。③幼果期套袋保护。（2） 物理防治：利用黑光灯、糖醋液、性诱剂诱杀成虫。（3） 化学防治：在各代成虫产卵期喷洒30%乙酰甲胺磷乳剂500倍液，或用50%杀螟松乳剂1000倍液，或用90%晶体敌百虫1000倍液，或用20%速灭杀丁乳油或用20%杀灭菊酯乳剂3000液，或用2.5%溴氰菊酯5000倍液等。李受桃蛀螟为害症状【症状】 桃小食心虫为害桃、梨、李、杏、枣等果树。主要以幼虫蛀果为害，导致果实畸形，果内虫道纵横，并充满大量虫粪。【形态特征】 幼虫体长13～16mm，头黄褐色，前胸盾黄褐色至深褐色，臀板黄褐色或粉红色，其他部分桃红色。桃小食心虫幼虫桃小食心虫蛀入口【发生规律】 湖南地区一般1年发生3代，以老熟幼虫在土中结茧越冬。越冬幼虫主要分布在树干周围1米以内。翌年4月开始破茧出土。第一代幼虫盛发期在7月下旬至8月上中旬，第二代幼虫盛发期在8月中下旬至9月上旬。【防治方法】 （1） 农业防治：①越冬幼虫出土前，用宽幅地膜覆盖在树盘地面上，防止越冬代成虫飞出产卵。②绑草绳诱杀：在越冬幼虫出土前，用草绳在树干基部缠绑2～3圈，诱集出土幼虫入内化蛹，定期检查捕杀。③套袋：幼果期即套袋保护。④摘除虫果：每 10 天摘一次虫果，杀灭果内幼虫。（2） 物理防治：果园安置黑光灯或利用性诱剂诱杀成虫。（3） 化学防治：①撒毒土防治：在桃小食心虫幼虫出土高峰前，每亩用15%乐斯本颗粒剂2千克与细土25～50千克充分混合，均匀地撒在树干下地面，整平。②在产卵盛期及幼虫孵化初期进行药剂防治，可用的药剂有48%乐斯本乳油1000～1500倍液、50%杀螟松乳油1000倍液、20%杀灭菊酯乳油2000～4000倍液、2.5%氟氯菊酯 （天王星） 乳油1500倍液等。葡萄瘿蚊上只发生1代。品种之间受害程度有差异，郑州早红、巨峰、龙眼受害较重，保尔加尔、葡萄园皇后、玫瑰香次之。主要发生在吉林、辽宁、山东、陕西、山西。【生活习性】 成虫白天活动、飞行力不强成虫产卵较集中，产卵果穗上的果实多数都着卵，葡萄架的中部果穗落卵较多。【为害症状】 以幼虫在葡萄果心蛀食，并排粪其中，致使果粒不能正常生长，畸形，不能食用。【防治方法】（1） 2.5%高效氯氟氰菊酯水乳剂 （中等毒） 使用40～50毫升/亩喷雾。使用的安全间隔期为7天，一季作物最多施用次数2次。（2） 5%甲维·高氯氟水乳剂 （中等毒） 使用8～12克/亩喷雾。使用安全间隔期为7天，每季作物最多可以使用3次。（3） 3%甲维·啶虫脒微乳剂 （低毒） 使用40～50克/亩喷雾。使用安全间隔期为7天，每季作物最多使用2次。【症状】 柑橘凤蝶主要以幼虫为害柑橘新梢、叶片，造成叶片残缺不全。严重时，被害的叶片只存叶脉，嫩枝光秃，伤口易感染溃疡病。【形态特征】 柑橘凤蝶幼虫体长4～5cm，黄绿色，后胸背两侧有眼斑；1龄幼虫黑色，刺毛多；2～4龄幼虫黑褐色，有白色斜带纹，虫体似鸟粪。卵近球形，直径1.2～1.5mm，初黄色后变深黄，孵化前紫灰至黑色。【发生规律】 湖南地区一年发生4～5代，以蛹在叶背或枝条上越冬，翌年5月上中旬羽化为成虫。白天活动，吸食花蜜补充营养后交尾产卵，卵散产于枝梢嫩叶上。卵经3～7天孵化为幼虫，幼虫共5龄。幼虫老熟后吐丝固定尾端，系住身体附着在枝条上化蛹。3—11月，田间均可发现成虫飞翔。【防治方法】 （1） 农业防治：人工捕杀幼虫和蛹。（2） 生物防治：保护和引放天敌。为保护天敌可将蛹放在纱笼里置于园内，寄主蜂羽化后飞出再行寄生。（3） 化学防治。可用每克300亿孢子青虫菌粉剂1000～2000倍液、40%敌·马乳油1500倍液、40%菊·杀乳油1000～1500倍液、90%晶体敌百虫800～1000倍液、10%溴·马乳油2000倍液、50%杀螟松或45%马拉硫磷乳油1000～1500倍液，于幼虫期喷洒。凤蝶幼虫凤蝶为害的叶片凤蝶的卵【症状】 柑橘潜叶蛾，又名潜叶虫、绘图虫、鬼画符、橘潜蛾。主要以幼虫潜入嫩叶和果实的表皮下取食，蛀成弯曲的隧道，使叶片不能正常生长。为害严重时，所有新叶卷曲成筒状，破坏光合作用，导致叶片早落，树冠生长受阻，其伤口易感染病害。【形态特征】 成虫体长仅有2mm，翅展5mm左右。卵扁圆形，长0.3～0.4mm，白色，透明。幼虫体扁平，纺锤形，黄绿色。蛹扁平纺锤形，长3mm左右，初为淡黄色，后变深褐色。幼虫在叶片上取食，蛀成弯曲的隧道柑橘潜叶蛾为害秋梢症状【发生规律】 一年发生9～10代，以老熟幼虫和蛹在柑橘的秋梢或冬梢上过冬。以7—9月夏秋梢抽发期为害最严重。【防治方法】 （1） 农业防治：杜绝虫源，防止传入；结合冬季修剪，剪除被害枝叶并烧毁。（2） 化学防治：成虫羽化期和低龄幼虫期是防治最佳时期，防治成虫可在傍晚进行，防治幼虫宜在晴天午后用药。可喷施10%二氯苯醚菊酯2000～3000倍液、2.5%溴氰菊酯2500倍液、25%杀虫双水剂500倍液 （杀虫和杀卵效果均好）、25%西维因可湿性粉剂500～1000倍液、5%吡虫啉乳油1500倍液。每隔7～10 天喷1 次，连续喷3～4次。【症状】 桃天蛾又称枣桃六点天蛾，我国南北均有分布。主要为害桃、樱桃、李、杏、苹果、梨等果树，主要以幼虫为害叶片，可将叶片吃成孔洞或缺刻，甚至吃光，仅剩下叶柄，严重影响果树树势和果实产量。【形态特征】 老熟幼虫体长约80mm，绿色或黄褐色，体表密生黄白色颗粒；头部三角形，青绿色；第四节后每节气门上方有黄色斜条纹，尾角较长，斜向后方，生于第八腹节背面。【发生规律】 该虫在南方一般发生3 代，以蛹在土壤中越冬，5～6月羽化开始为害，为害期可持续到10月。10月后老熟幼虫陆续入土化蛹越冬，入土深度在10cm以内。【防治方法】 （1） 农业防治：冬季翻耕树盘挖蛹；捕捉幼虫。为害轻微时，可根据树下虫粪搜寻幼虫，捕杀。（2） 物理防治：用黑光灯诱杀成虫。（3） 化学防治：以幼虫期防治为佳。常用药剂：90%晶体敌百虫1500倍液或80%敌百虫1000倍液、20%杀灭菊酯乳油3000倍液、10%安绿宝乳油3000倍液。发生严重时，可在3龄幼虫之前喷洒25%天达灭幼脲3 号1500倍液、2%阿维菌素2000倍液1～2次。桃天蛾幼虫桃天蛾为害桃叶【症状】 蓑蛾，又名袋蛾，分布遍及全国，其中以长江及其以南各省受害较重。主要为害柑橘、桃、杨梅、葡萄、柿子、枇杷、石榴、核桃等果树，是多食性的食叶害虫，主要以幼虫为害。低龄幼虫咬食叶肉，形成不规则半透明斑；高龄幼虫取食叶片形成不规则孔洞。严重时局部叶片全部被吃光，甚至引起果树死亡。【形态特征】 幼虫用丝、枝叶碎屑和其他残屑构成长 6～15cm的袋状外壳，并在其中化蛹。雄蛾体粗大，有翅；雌蛾蛆形，无翅，留在袋内交配和产卵。大蓑蛾护囊大蓑蛾幼虫【发生规律】 一年发生1～2代，以老熟幼虫在护囊内越冬，翌年4—5月间成蛹、羽化。幼虫6月上旬孵化，一般7—9月是幼虫为害高峰期；10月开始封闭囊口越冬。夏季高温干旱的年份为害较严重。【防治方法】 （1） 农业防治：结合整形修剪，及时人工摘除虫囊，集中消灭。（2） 物理生物防治：①用黑光灯或性激素诱杀雄成虫。②喷洒每克含100亿个孢子的青虫菌1000倍液。（3） 化学防治：在幼虫孵化盛期和幼龄期，喷布5%高效氯氟菊酯乳油或2.5%功夫乳油2000～3000倍液，90%敌百虫1000倍液，50%马拉松乳剂1000倍液。喷药时要充分润湿护囊，喷药时间以傍晚最好。【症状】 叶蝉为同翅目叶蝉科昆虫的通称，多为害叶片。以成虫、若虫吸汁为害，被害叶初现黄白色斑点，渐扩成片，严重时全叶苍白早落。【形态特征】 成虫体长2～15mm，后足胫节有棱脊，棱背上有3～4列刺状毛，这是叶蝉最显著的识别特征。【发生规律】 一年发生4～6代，以成虫在落叶、杂草或低矮绿色植物中越冬；翌春桃、李、杏发芽后出蛰为害。6月虫口数量增加，8—9月最多且为害严重，秋后以末代成虫越冬。成虫、若虫喜白天活动，在叶背刺吸汁液或栖息。成虫善跳，可借风力扩散，旬均温15～25℃适宜其生长发育，28℃以上及连阴雨天气虫口密度下降。叶蝉为害猕猴桃叶片症状小绿叶蝉成虫【防治方法】 （1） 农业防治：冬季清园，消灭越冬成虫。（2） 化学防治：掌握在越冬代成虫迁入后，各代若虫孵化盛期及时喷洒20%叶蝉散 （灭扑威） 乳油800倍液、25%速灭威可湿性粉剂600～800倍液、20%害扑威乳油400倍液、50%马拉硫磷乳油1500～2000倍液、20%菊马乳油2000倍液、2.5%敌杀死或功夫乳油4000～5000倍液、50%抗蚜威超微可湿性粉剂3000～4000倍液、10%吡虫啉可湿性粉剂2500倍液、20%扑虱灵乳油1000倍液，各种药剂最好轮换使用，每种连续使用次数不要超过3次。【症状】 梨木虱是中国梨树主要害虫之一。以成虫、若虫刺吸叶、芽、嫩枝梢汁液为害，同时分泌黏液，诱生煤污病等病害，造成早期落叶，同时污染果实，严重影响梨的产量和品质。梨木虱幼虫【形态特征】 冬型成虫黑褐色，夏型成虫黄绿色至淡黄色；卵一端稍尖具有细柄。越冬成虫早春产卵黄色，夏季卵均为乳白色。若虫，体扁椭圆形。初孵若虫淡黄色，夏季各代若虫体色随虫体变化由乳白色变为绿色，老若虫绿色。【发生规律】 在我国南方一年发生5～6代，以受精雌成虫在梨园的树皮缝、落叶下、杂草丛中越冬。在梨花芽膨大期开始出蛰为害，6—7月为害最严重，因各代重叠交错，全年均可为害。梨木虱幼虫为害梨叶症状【防治方法】 （1） 农业防治：彻底清园，冬季刮掉老树皮；清除园内杂草、落叶。（2） 化学防治：①2月中旬越冬成虫出蛰盛期喷药，可选用1.8%爱福丁乳油2000～3000倍液，5%阿维虫清5000倍液等。②在第一代若虫发生期 （约谢花3/4时）用10%吡虫啉2000倍液+灭扫利2000倍液液喷雾。③5—9月喷施10%吡虫啉2000倍液+1.8%阿维菌素3000倍液+百磷3号1300倍液+0.1%洗衣粉，防效显著。葡萄十星叶甲以成、幼虫食芽、叶成孔洞或缺刻，残留1层绒毛和叶脉，严重的可把叶片吃光，残留主脉。【形态特征】 成虫体长约12mm，椭圆形，土黄色。头小隐于前胸下；复眼黑色；触角淡黄色丝状，末端3节及第4节端部黑褐色；前胸背板及鞘翅上布有细刻点，鞘翅宽大，共有黑色圆斑10个略成3横列。足淡黄色，前足小，中、后足大。后胸及第1～4腹节的腹板两侧各具近圆形黑点个。卵椭圆形，长约1mm，表面具不规则小突起，初草绿色，后变黄褐色。幼虫体长12～15mm，长椭圆形略扁，土黄色。头小、胸足3对较小，除前胸及尾节外，各节背面均具两横列黑斑，中、后胸每列各4个，腹部前列4个，后列6个。除尾节外，各节两侧具3 个肉质突起，顶端黑褐色。蛹金黄色，体长9～12mm，腹部两侧具齿状突起。【生活史及习性】 长江以北年生l代，江西2代，少数1代，云南2代，均以卵在根际附近的土中或落叶下越冬，南方有以成虫在各种缝隙中越冬者。越冬卵于4月中旬孵化，5月下旬化蛹，6月中旬羽化，8月上旬产卵，8月中旬孵化，9月上旬化蛹，9月下旬羽化，交配及产卵。以卵越冬，月成虫死亡。以成虫越冬的于3月下旬至4月上旬开始活动，并交配产卵。【防治方法】（1） 秋末及时清除葡萄园枯枝落叶和杂草，及时烧毁或深埋，消灭越冬卵。（2） 振落捕杀成、幼虫，尤其要注意捕杀群集在下部叶片上的小幼虫。（3） 必要时，喷洒5%氯氰菊酯乳油3000倍液、2.5%功夫乳油3000倍液、30%桃小灵乳油2500倍液、10%天王星乳油6000～8000倍液。【症状】 桃红颈天牛主要为害桃、杏、李、梅、樱桃等果树。主要以幼虫在树干蛀隧道，造成树干中空，皮层脱离，树势衰弱，以致枯死。在树干的蛀孔外及地面上常大量堆积红褐色粪屑。【形态特征】 成虫体长28～37mm，黑色、有光泽。前胸背板棕红色或黑色，背有4个瘤状突起，两侧各有一刺突。雄虫体小、触角长。卵长6～7mm，乳白色，形似大米粒。幼虫体长50mm左右。小幼虫乳白色，大幼虫黄白色。前胸背板扁平、长方形，前缘黄褐色，后缘色淡。【发生规律】 一般2～3年发生1代，以幼虫越冬。南方各省于5月下旬出现成虫。6月出现幼虫为害，幼虫期维持23个月。除短暂的越冬休眠外，幼虫期内持续蛀害。桃红颈天牛成虫树干蛀孔外有粪屑【防治方法】 （1） 农业防治：5—7月的雨后晴天中午在主枝或主干上捕杀成虫。经常检查树干，发现有新鲜虫粪排出，用小刀在幼虫为害部位顺树干纵划2～3刀杀死幼虫。（2） 化学防治：5—8月喷50%杀螟松乳油800倍液，捕杀成虫。对蛀干幼虫，用药物毒杀，将虫孔内粪便清除干净后用80%敌敌畏乳剂或50%马拉硫磷乳油等加水50倍液，用铗子裹着小棉球，蘸上药物，塞入虫孔；或用磷化铝片剂分成小粒后塞入虫孔，再用湿泥土堵封虫孔。【症状】 星天牛别名柑橘星天牛。全国大部分省份均有分布，普遍发生，局部地区为害严重，影响树势生长，甚至导致全株枯死。该虫以幼虫蛀害树干基部和主根 （树干下常有成堆虫粪），严重影响到树体的生长发育。成虫咬食嫩枝皮层，形成枯梢，也啃食叶片成缺刻状。【形态特征】 成虫：漆黑色，略带金属光泽，体长2～4cm。头部和腹面被银灰色和蓝灰色细毛。前胸背板中瘤明显，两侧具尖锐粗大的侧刺突。幼虫老熟时体长4～6cm，乳白色，圆筒形。星天牛成虫星天牛幼虫【发生规律】 2年完成1代，以幼虫在木质部坑道内越冬。翌年3月间开始活动，4月幼虫老熟化蛹。5月上旬开始羽化，5月末至6月初为成虫出孔高峰期。从5月下旬至7月下旬均有成虫活动。卵期9～15天，6月中旬孵化，孵化高峰在7月中、下旬。9月末绝大部分幼虫转而沿原坑道向下移动，至蛀入孔再另蛀新坑道向下部蛀害，11月开始越冬。【防治方法】 （1） 农业防治：树干涂白，拒避天牛成虫产卵。于5月上旬用涂白剂 （石灰∶硫黄∶水=16∶2∶40） 和少量皮胶混合后涂于树主干上。人工捕杀成虫，锤杀卵及初孵幼虫。（2） 化学防治：在幼虫蛀入木质部之前，在主干受害部位用刀划若干条纵伤口，涂以50%敌敌畏柴油溶液 （1∶9），药量以略有药液下淌为宜。若在幼虫蛀入木质部之后，要先将排粪孔处的虫粪和蛀屑清理干净，再塞入磷化铝片、丸等，并用泥封死蛀孔及排粪孔。梨小食心虫【为害症状】 梨小食心虫在各地果园均有发生，为害梨、桃、李、杏，严重影响果品质量和产量，主要以幼虫蛀食新梢和果实。一代幼虫多为害新梢，使新梢萎蔫下垂、干枯。二、三代幼虫为害果实可直达果心，常在果实表面留有小圆孔或小黑斑。【形态特征】 末龄幼虫体长10～13mm。头部黄褐色，其他部分淡黄白色或粉红色。蛹体长6～7mm，纺锤形，黄褐色，腹部背面有两排短刺，排列整齐。【发生规律】 梨小食心虫一年可发生3～4代。以老熟幼虫在梨树和桃树的老翘皮下、根颈部、杈丫等处结茧越冬，翌年4月上旬开始化蛹，4月下旬羽化，为害期一般在4—9月。【防治方法】 （1） 农业防治：①冬季刮除老翘皮，集中烧毁。秋季在越冬幼虫脱果前，在树干或主枝基部绑草，诱集幼虫越冬，冬前解下烧毁。②及时清理虫果、虫梢，集中深埋。（2） 物理生物防治：①黑光灯诱杀成虫；②糖醋液诱杀；③在卵发生初期，释放松毛虫赤眼蜂，每5 天放一次，共放5 次，每亩每次放蜂量为2.5万头左右。（3） 化学防治：发现有幼虫蛀果时，50%杀螟松1000倍液、20%杀灭菊酯2000～3000倍液喷雾，均有良好的防治效果。梨小食心虫幼虫梨小食心虫幼虫为害嫩梢柑橘花蕾蛆【为害症状】 柑橘花蕾蛆，又名橘蕾瘿蚊、花蛆等。成虫在柑橘花蕾上产卵，孵出的幼虫蛀害花蕾，导致花蕾膨大、变短，花瓣变形，不能正常发育及开花结果，最后花朵脱落。柑橘花蕾蛆为害花蕾状【形态特征】 雌成虫体长1.5～1.8mm，暗黄褐色，周身密被黑褐色柔软细毛。头扁圆、复眼黑色。前翅膜质透明被细毛，在强光下有金属闪光。幼虫长纺锤形、橙黄色；蛹黄褐色、纺锤形，长约1.6mm；卵长椭圆形、无色透明，长约0.16mm。放大镜下的柑橘花蕾蛆【发生规律】 在湖南一年发生1代，越冬幼虫3月中下旬化蛹。3月下旬柑橘现蕾发白时，为成虫羽化出土盛期。【防治方法】 （1） 农业防治：每年的2月底至3月初对树冠附近的浅土层进行浅耕。在成虫出土前地面用地膜覆盖，阻止成虫出土羽化与上树产卵。摘除受害的花蕾，集中烧毁。（2） 化学防治：成虫出土时进行地面喷药，是阻止花蕾蛆上树为害最有效的办法，喷药时间为花蕾顶端开始露白前的3～5天，可用的药剂有：20%速灭杀丁乳油3000～5000倍液、2.5%敌杀死乳油或20%杀灭菊酯3000～4000倍液、90%敌百虫或80%敌敌畏800～1000倍液等喷洒地面，7～10天1次，连喷2次。幼虫入土前摘除受害花蕾煮沸或深埋，冬春翻耕园土杀灭部分幼虫。