本试验利用HRM分析技术对上一章节所开发的SNP 和InDel标记进行筛选和验证，以获得与抗炭疽菌叶枯病基因 R gls位点紧密连锁的SNP 及InDel标记，对抗病基因进行精细定位，缩小抗性基因位点的区域范围选择青岛农业大学苹果试验基地 （山东省胶州市） 2009 年种植的，经过人工离体接种鉴定的 ‘金冠’ב富士’ 的F1 杂交群体207株实生树为材料用于验证 SNP、InDel标记及进行抗炭疽菌叶枯病基因的精细定位将筛选的多态性标记在重组个体上的基因型表现与重组个体的抗病表型进行统一分析，对抗炭疽菌叶枯病基因 R gls位点进行精细定位，缩小抗性基因位点的范围。为后续的候选基因筛选及图位克隆提供准确的信息。从与抗炭疽菌叶枯病基因紧密连锁的分子标记中挑选出4 个有代表性意义的分子标记SSR标记S0405127，S0304673，SNP 标记 SNP4236，InDel标记InDel4254作为鉴定标记。这 4 个分子标记鉴定结果的准确率均达到90%以上，可以应用于田间栽培品种、品系、种质资源以及杂种后代幼苗对炭疽菌叶枯病抗性的鉴定 （表5-3）。

由RSV引起的水稻条纹叶枯病最早于1897年在日本关东发现，后在朝鲜、乌克兰均有发生。1962年我国在江苏、浙江首先发现RSV。RSV由介体灰飞虱（Laodelphax striatellus Fallen）传播，灰飞虱的带毒虫量是水稻条纹叶枯病发生流行的主要影响因子。因此，建立一种快速灵敏检测灰飞虱带毒率的方法对于预测水稻条纹叶枯病的流行及病害防治十分必要。目前国内外用于检测灰飞虱带毒率的方法主要有ELISA、RT-PCR和Northern杂交等。为此，我们利用斑点免疫结合（DIBA）检测RSV的方法对浙江部分市县的灰飞虱进行了水稻条纹叶枯病毒带毒率测定，并与采用生物法测定的灰飞虱传毒率进行了比较。以上结论初步明确了浙江嘉兴、湖州两地越冬代灰飞虱体内水稻条纹叶枯病带毒率与传毒率之间的关系，为两种检测方法数值转换和病害预测提供科学依据，但其他世代灰飞虱带毒率与传毒率之比是否与此一致尚有待进一步研究。

经叶枯酞处理过的水稻较未处理的水稻因细菌病害而造成的损害要小得多。叶枯酞能减慢病菌的繁殖速度，延长其生活周期，甚至在细菌从植株上分离后叶枯酞亦能有一定时间的残效。应用技术 资料报道，可以防治麦类的叶部病害，如叶枯病、叶锈病、颖枯病、褐斑病、白粉病等，茎叶喷雾，用25%悬浮剂66.8ml/亩对水40～50kg喷雾。单用时，对斑点病、霉腐病、立枯病、叶枯病、条斑病、胡麻斑病和颖枯病有良好的防治效果，与萎锈灵或多菌灵混用，对腥黑穗病和黑粉病有极佳防治效果。防治对象 资料报道，可以防治水稻苗期叶瘟病、胡麻斑病、白叶枯病等，用30%乳油1 000倍药液浸种6小时，浸种时常加搅拌，捞出再浸种催芽、播种，药液可连续使用2次；防治水稻稻瘟病、胡麻斑病、白叶枯病、叶枯唑 bismerthiazol其他名称 叶青双、噻枯唑、叶枯宁。理化性质 纯品为白色长方柱状结晶或浅黄色疏松细粉，溶于二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、吡啶、乙醇和甲醇等有机溶剂，微溶于水。

病菌可通过幼株的茎和根侵染或直接侵染叶片，在幼苗或较老的植株上形成病斑，早期侵染可引起幼苗枯死；后期侵染表现矮化、萎凋或不同程度的叶枯，其上具有灰色或淡黄色条斑，在某些杂交种或自交系上偶尔出现淡红色、波纹状或不规则的边缘和沿着叶脉有或无暗绿色至黑色水渍状的多角形病斑玉米细菌性叶枯病于1949年在美国的中部和南部玉米带发生，目前已遍布世界许多国家。玉米细菌性叶枯病初在玉米植株喇叭口的新叶上产生水浸状线条状病斑，病斑逐渐变褐色，有时为灰色或白色，在某些品种上病斑边缘成红色。在成熟叶片上病斑伸长，抽雄后的植株叶片罕见有新病斑。图1-189 叶片初期病斑图1-190 叶片中期病斑图1-191 叶片后期病斑玉米细菌性叶枯病的致病菌为燕麦假单胞杆菌（Pseudomonas avenaeManns；异名：Pseudomonas alboprecipitans病菌尚可侵染燕麦引起晕枯病。该病害仅发生于缺钾的土壤。受风吹造成叶片伤口可促进侵染发病。参照玉米细菌性枯萎病的防治措施。

湿度高时病部产生较稀疏白色至灰紫色霉层。花梗染病亦产生近长椭圆形病斑，易从病部折断枯死。（2）药剂防治：同葫芦科蔬菜霜霉病防治方法。霜霉病为害葱叶（1）主要为害作物：该病在葱、蒜、韭类蔬菜上均有发生。如果病斑围绕叶或花梗扩大，可使之从病斑处折断。紫斑病为害葱叶紫斑病为害蒜叶（3）药剂防治：可选用50%异菌脲可湿性粉剂1500倍液、80%代森锰锌可湿性粉剂800倍液、10%苯醚甲环唑可湿性粉剂5000～6000倍液对水喷雾。（2）症状：主要为害叶和花梗。为害病叶多从下部叶片叶尖开始发病扩展。病斑初为白色小圆点，扩大后呈不规则形或椭圆形，为灰白色或灰褐色，病部生黑色霉状物，严重时病叶枯死。叶枯病为害蒜叶（1）主要为害作物：该病在葱、蒜、韭类蔬菜上均有发生。（2）症状：此病主要为害叶片，初在叶片中上部产生灰白色小点，以后发展呈白色坏死斑，椭圆至近梭形，多个病斑逐渐连接成片至扭曲枯死。

● 药剂防治：发病初期喷淋20%甲基立枯磷1 200倍液或50%根病克600倍液或敌克松或绿亨一号1 000倍液。病斑的扩展受叶脉限制呈三角形，病斑边缘明显，潮湿时叶背长出灰黑色霉层，发病严重时多个病斑连接成片，全叶变为黄褐色干枯收缩而死亡。（2）发病特点 以成蚜及若蚜在叶背种嫩茎上吸食作物汁液，瓜苗嫩叶及生长点被害后，叶片卷缩，瓜苗萎蔫，甚至整株枯死老叶受害，提前枯落，缩短结瓜期，造成减产，此外还能传播病毒病。3.番茄青枯病（1）症状 属细菌引起的维管束病害，病株中午萎蔫、傍晚恢复，2～3天后枯死，植株仍为青色，可见维管束变黑褐色，髓部变为褐色腐烂，用手挤压有白色黏液溢出。高温高湿利于发病。，最后干缩成僵果，病叶有明显轮纹。

一般在阴雨天后骤晴时，出现叶烧病的植株容易形成果肉恶变瓜。此外，坐瓜后的植株感染黄瓜绿斑花叶病毒也会引起果实的异常呼吸而发生果肉恶变。（9）病毒病或炭疽病生产严重；在果实发育中后期，如果发生绿斑病也会使瓜瓤软化甚至产生异味。此外，如果植株发生绵腐病、疫病、日灼病等亦可导致瓜瓤变色、变质甚至失去食用价值。西瓜受冻后，轻者子叶、真叶边缘发白（图3-8），造成短暂的生长停顿和缓苗；稍重者叶缘卷曲，逐渐干枯，生长点受冻后停止生长，造成较长时间的缓苗，甚至僵苗，严重受冻时，整株成片的秧蔓冻死，生理失水后，叶片变成黑色触杀性除草剂，如百草枯，喷到西瓜叶片会造成叶片灰白色或灰褐色斑（图3-10）；内吸性除草剂，如草甘膦，药液飘移到西瓜植株上，引起新叶落黄，花蕾干枯（图3-11）；马拉松药害在叶片上形成白斑，丙环唑药害抑制嫩梢生长图3-10 百草枯药害状图3-11 草甘膦低温残留造成的药害状西瓜在土壤封闭除草或西瓜苗期施用除草剂不当，或使用灭生性除草剂时飘移都会发生药害；使用一些对西瓜敏感的杀虫剂、杀菌剂而产生药害；大棚西瓜栽培时熏蒸产生药害

植原体主要依靠叶蝉等从韧皮部取食的半翅目昆虫传播，也可由菟丝子和嫁接等传播，能够引起植物丛枝、黄化、簇生、矮化、顶枯等症状[1]。我国已报道的植原体病害约有70多种，造成了巨大的经济损失[2]。表现丛枝、黄化、小叶和顶枯症状的绣线菊样品采自山东省青州市；表现叶片畸形、丛枝、顶枯症状的玫瑰样品采自山东省平阴县玫瑰研究所；克隆载体pMD18-T、PCR产物回收试剂盒、限制性内切酶及其他酶类等分子生物学试剂产品均购自感病绣线菊植株表现为节间短缩，部分枝条丛生，叶片黄化、变小畸形、顶部嫩梢枯死，植株矮化。我们采集了表现丛枝、顶枯症状的玫瑰和表现丛枝症状的泡桐，经PCR检测表明其病原为植原体。与2001年和2003年Kaminska M等[14，15]感病玫瑰表现畸形和顶枯不同的是，在本研究中的感病玫瑰表现出丛枝和顶枯的症状。