甜瓜为一年生草本植物，按其生态形分为薄皮甜瓜和厚皮甜瓜。济宁市种植薄皮甜瓜具有悠久的历史，但大面积集中栽培还是在近些年随着农业产业结构的调整而发展，目前仅在任城区、金乡县、鱼台县西部、嘉祥县南部保护地种植面积就达5万余亩，成为山东省最大的薄皮甜瓜种植基地。随着种植时间的延长和种植面积的不断扩大，甜瓜病害不断加重，特别是苗期病害，由于甜瓜多采用大棚育苗，育苗时间一般在1月下旬，常常遭遇低温，棚内温湿度不宜控制，病害容易发生，经常因防治不当，苗床大量死苗或移栽后造成大量死亡，若控制不力，将会对甜瓜的发展带来严重危害。几年来笔者针对为害较大的甜瓜苗期病害的发生及防治进行了试验研究，目的在于了解、掌握该类病害的发病特点和防治方法，进行经济有效的防治。已有国内外学者对该类病害进行了研究，特别是对露地栽培条件下的发生与防治研究较多[1～4]，而对保护地苗床期的发病特点和防治方法却少见报道。1.1.1 症状 发病初期，出土幼苗茎基部出现水烫状病斑，继而病斑逐渐加深为淡黄褐色，同时绕茎扩展，病部缢缩呈细线状，幼苗因失去支撑而折倒，刚折倒的病苗子叶短期内仍为绿色。发病严重时，种子未萌发或刚发芽时，即受病菌侵害，造成烂种、烂芽。湿度大时，成片幼苗猝倒，在病苗或病芽附近常密生白色棉絮状菌丝。1.1.2 病原菌 该病原菌为真菌Pythium aphanidermatum（Eds.）Fitsp.属鞭毛菌亚门，为瓜果腐霉菌。此外，甜瓜疫霉（P.melonis Katsura）和辣椒疫霉（Phytophthora capsici Leonian）等也可引起蔬菜幼苗猝倒病。1.1.3 传播途径和发病条件 病菌以菌丝体、卵孢子等随病残体在土壤中越冬，并可长期存活。遇有适宜条件，卵孢子萌发产生孢子囊，以游动孢子或直接长出芽管侵入寄主。田间病菌主要随水的移动、飞溅等进行传播蔓延。湿度大时，病苗上产生孢子囊和流动孢子，进行重复传染。低温高湿是猝倒病发生的必要条件。这是因为低温高湿不利于幼苗生长，但病菌仍能活动。一般猝倒病适宜地温为10℃左右。所以猝倒病多发生在早春育苗床上，尤其当幼苗期遇连阴天，光照不足，出现低温高湿环境，极易发生猝倒病。有的苗床开始发病时，是从棚顶滴水处的个别幼苗上先表现病症，几天后以此为中心，向周围蔓延扩展。该病也是甜瓜苗期的一种重要病害。据笔者几年调查，新苗床30%以上，老苗床50%以上可发现该病害。特别是老苗床，如不注意温湿度管理和及时防治，整个苗床可在几天基本死光，为害很大。是所有甜瓜种植区均能形成为害的一种病害。1.2.1 症状 刚出土的幼苗即可受害，以中后期发病为多。发病初期，病苗茎基部变褐，产生椭圆形病斑，叶片白天萎蔫，早晚尚可恢复。随病情发展，病斑渐凹陷、扩大，绕茎一周，叶片萎蔫不能复原，最后病部收缩干枯，病苗枯萎死亡。但病苗不呈猝倒状，病部有同心轮纹及淡褐色蛛网状菌丝。这一特点是本病与猝倒病相区别的主要特征。1.2.2 病原菌 该病原菌为真菌Rhizoctonia solani Kuhn.属半知菌亚门，为立枯丝核菌。该菌不产生孢子，主要以菌丝传播和繁殖。菌丝从无色变为黄褐色。病菌可产生菌核，菌核近球形或无定形，无色、浅褐色至黑褐色。有性阶段Pellicularia filamentosa（Pat.）Rogers.为丝核薄膜革菌。1.2.3 传播途径和发病条件 病菌以菌丝体和菌核在土中越冬，能存活2～3年。菌丝能直接侵入寄主，通过水流及带菌的堆肥传播为害。病菌生长适温为24℃。播种过密，间苗不及时，温度过高，易诱发此病。1.3.1 症状 该病害为一种生理性病害。幼苗出土后不长新根或不定根，幼根表面开始为锈褐色，尔后腐烂。沤根后地上部子叶或真叶呈黄绿或乳黄色，叶缘开始枯焦，严重的整叶皱缩枯焦，生长极为缓慢。在子叶期出现沤根，子叶即枯焦。在真叶期发生沤根，真叶就会出现枯焦。1.3.2 病因及发生条件 主要是苗床地温12℃以下持续时间较长，地势低洼、土壤黏重加之浇水过量或遇阴雨天气，苗床地温过低，致使幼苗根部呼吸作用减弱，活性降低。如此持续时间较长就会发生沤根。甜瓜育苗应选择土壤松而不散、黏而不硬、通气透水性良好、保肥保水力强的壤土新地或轮作3～5年的无病地育苗，大棚苗床必须选用无病土育苗。如用连作地或病地土壤，则苗床需深翻或用药剂消毒，常用50%福美双可湿性粉剂与40%五氯硝基苯粉剂消毒，或50%多菌灵可湿性粉剂，每平方米苗床8～10g，与20～30kg细干土拌匀成药土，待苗床所浇底水渗下后，取1/3药土作垫土铺底，种子播下后再将其余2/3药土覆在种子上，播后保持床面湿润；或将以上药土制成营养钵，再播种育苗。应用该方法进行防治，两年平均防治效果达到88.63%，实践证明这是一种经济有效的防治方法，可以兼治甜瓜猝倒病和甜瓜立枯病。加强苗床管理应以促进幼苗健壮生长，提高地温、降低苗床湿度为中心。为给幼苗创造良好生长条件，增强抗病能力，育苗前选用土质肥沃，不积水的苗床，施足优质腐熟有机肥，采用营养土育苗；提供使用无土育苗基质进行育苗。播种前浇足底水，出苗后尽量不浇水或少浇水，播种要均匀，密度不宜过大，防止床土过湿。出苗后，如果后，如果苗床出现过湿情况，可用小锄划锄或撒施干草木灰，以降低湿度；早春采用大棚育苗，必须做好增温保温工作。为了有效增加苗床温度，可结合实际情况，选用地热线育苗或火坑育苗，以缩短苗期时间。苗床还要尽量多地增加光照，并且苗床的通风、降湿，尤其在连续阴天、光照不足时更要抓住时机通风降湿；苗床要早分苗，使苗健壮，提高抗病力。出苗后如有少量病苗时应立即挖除，移出苗床处理，并选择下列杀菌剂在病苗及全苗床喷雾防治：以猝倒病为主时使用72.2%普力克水剂400～600倍液，72%克露可湿性粉剂500～600倍液，70%百得富可湿性粉剂600倍液，64%杀毒矾可湿性粉剂500倍液，50%多菌灵悬浮剂500倍液，75%百菌清可湿性粉剂600倍液；以立枯病为主时使用20%甲基立枯磷乳油800倍液，70%甲基托布津800倍液，70%敌克松原粉1000倍液，50%福美双可湿性粉剂500倍液，64%杀毒矾可湿性粉剂500倍液，50%多菌灵悬浮剂500倍液，75%百菌清可湿性粉剂600倍液，每平方米苗床喷淋药液2～3L，视病情发展情况，间隔7～10天再喷一次；在瓜苗移栽定植前选择广谱性杀菌剂如百菌清、杀毒矾、代森锰锌、多菌灵等再喷雾一次，带药移栽定植。选用土壤疏松，透气、透水性好的田园土，施足优质腐熟有机肥或生物肥，采用营养土育苗，提倡使用无土育苗基质进行育苗，播种前浇足底水，出苗后尽量不浇水或少浇水，播种密度不宜过大，出苗后如果出现苗床过湿，可采用小锄划锄或撒施干草木灰，以降低湿度，白天温度控制在20～25℃，夜间15℃，最低应在12℃以上，如果苗床出现沤根，应立即控制浇水，采取各种降湿升温措施。除划锄或撒施干草木灰以外，还可用生石灰降湿除潮。方法是：选新烧制的生石灰，分散放入苗床小拱棚内，充分吸潮后，进行更换，但注意生石灰不能与瓜苗直接接触。

本文以甘蓝型油菜一个抗病毒品种和一个感病毒品种为试材，利用转基因手段进行了油菜抗病毒病相关研究。利用乙烯、甲基茉莉酸、水杨酸类似物苯丙噻重氮3种化学物质诱导处理油菜叶片，提取处理前后各材料的RNA，标记探针后与拟南芥芯片进行杂交，通过对基因表达谱的分析，获得与抗病性相关的基因，从中选择3个与病毒抗性相关的基因BNP5、BNP7和BNP10。其中BNP7和BNP10为全长序列，BNP5 5'端部分序列缺失，通过5'-RACE的方法获得该基因全长序列，分别构建3个植物过表达载体pGA5、pGA7和pGA10和3个RNAi载体pGR5、pGR7和pGR10（过表达和RNAi载体均带有除草剂抗性基因bar）。采用本实验室发明的高通量花蕾原位转化法分别对所选材料进行转化。转基因当代植株收获的种子播种以后，幼苗期喷施除草剂进行筛选，并经PCR鉴定，存活幼苗80%以上为阳性植株。目前正在进行阳性植株T1代幼苗病毒抗性鉴定及相关的后续实验。

桑叶是家蚕的唯一饲料，桑树是蚕丝产业的物质基础。桑树生长在各种不同气候和地貌的生态环境，桑树萎缩病是蚕桑生产最严重的病害之一，主要有黄化型、萎缩型和花叶型3种类型，分布于中国、日本、韩国、格鲁吉亚、越南等蚕桑生产国，特别是中国和日本受害最为严重。桑树萎缩病在我国主要蚕桑区江浙、湖广及北方的山东、陕西等省均有分布，对蚕桑生产造成严重甚至毁灭性的危害，且防治比较困难。本研究对山东省发生的症状为萎缩型的桑萎缩病，采用PCR技术对其16S rDNA、延伸因子和核糖体蛋白基因片段进行扩增和直接测序，并且与已知的植原体各组中代表的植原体序列进行同源性比较，确定了该分离物的亚组分类地位。现将研究结果报道如下。表现萎缩型症状的发病桑树材料采自山东省宁阳市。克隆载体pMD18-T、PCR产物回收试剂盒、限制性内切酶及其他酶类等分子生物学试剂产品均购自TaKaRa公司。提取方法参照漆艳香等[1]的方法进行，总DNA于-20℃保存备用。植原体16S rDNA基因扩增采用Lee等[2]报道的通用引物R16mF2/R16mR1，植原体延伸因子基因的引物对fTufu/rTufu序列及核糖体蛋白（rp）基因的引物对rpF1/rpR1序列分别根据Schneider等[3]和Lim等[4]文献设计合成（Table 1）。以提取得病组织总DNA为模板进行PCR扩增。NamePrImersequenceTm(℃)ReferencesR16mF25′-CATGCAAGTCGAACGGA-3′60[3]R16mR15′-CTTAACCCCAATCATCGAC-3′60[3]fTufu5′-CCTGAAGAAAGAGAACGTGG-3′50[4]rTufu5′-CGCAAATAGAATTGAGGACG-3′50[4]rpF15′-GGACATAAGTTAGGTGAATTT-3′55[5]rpR15′-ACGATATTTAGTTCTTTTTGG-3′55[5]Table 1 Primers used in this research to amplify three genePCR产物采用1%琼脂糖凝胶电泳检测，并用PCR纯化试剂盒进行纯化回收。PCR产物回收后与pMD18-T连接，连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，挑取筛选平板上的白色菌落培养，提取质粒，经PCR和酶切鉴定为阳性的重组质粒送上海英骏生物技术有限公司测序。将所得DNA 序列输入GenBank进行Blast检索，采用DNAMAN和MEGA3.1软件对所得到的核苷酸序列与GenBank中收录的相应基因的核苷酸序列进行比对分析，并构建系统进化树。以带有桑萎缩病原（Mulberry dwarf-Ningyang，MDNY）的发病桑树病组织总DNA为模板，16S rDNA引物经直接PCR扩增，得到长度为1.5kb的片段，延伸因子基因引物经PCR扩增，得到长度为0.8kb的片段，PCR扩增核糖体蛋白基因，得到长度为1.2kb的片段，与预期的结果一致，表明该病组织中存在植原体。对含有目标外源片断的重组质粒进行序列测定，扩增得到16S rDNA基因片断为1431bp；延伸因子基因片断为842bp，共编码280个氨基酸；核糖体蛋白基因片断为1249bp，DNAMAN软件分析表明该序列包括部分rps19和全部rp122和rps3基因。将MDNY的16S rDNA序列与GenBank中22个植原体分离物16S rDNA的核苷酸序列进行比对和构建系统进化树，该分离物与植原体的16S rI组处于同一个分支，与16S rI-B和16S rI-D亚组同源性最高。该分离物MDNY的延伸因子基因序列与GenBank中植原体16S rI组的7个亚组分离物延伸因子基因的核苷酸序列进行比对和构建系统进化树（Figure 1）。从系统进化树中可以看出，该分离物MDNY与16S rI-B和16S rI-D亚组处于同一分支，同源性最高，与16S rDNA的结果一致。Figure 1 Phylogenetic tree of MDNY based on the elongation factor gene sequences using neighbor-joining in MEGA3.1该分离物MDNY的核糖体蛋白基因（rp）序列与GenBank中植原体16S rI组的6个亚组分离物核糖体蛋白基因的核苷酸序列进行比对并构建系统发育树（Figure 2），从系统进化树中可以看出，该分离物与16S rI-D 的Paulownia witches-broom处于同一分支，同源性最高，确定了该分离物的亚组分类地位。Figure 2 Phylogenetic tree of MDNY based on the rIbosomal protein gene sequences using neighbor-joining in MEGA3.1夏志松等对桑黄化性萎缩病病原体16S rRNA基因序列进行了分析[5]，而刘清神等对广州桑萎缩病植原体进行检测时确定所检测的桑树植原体属于16S rI组[6]，没有确定桑萎缩植原体的亚组分类地位。本研究对分离物MDNY的16S rDNA和延伸因子基因构建系统发育树，确定该分离物与16S rI-B和16S rI-D的同源性最高。通过核糖体蛋白基因构建系统发育树表明该分离物MDNY属于16S rI-D亚组，进一步明确了其亚组分类地位。20世纪80年代至今，由于分子生物学技术，特别是分子克隆和PCR技术的应用大大加快了包括植原体在内的细菌系统学研究进展。目前植原体的分类16S rDNA是一种非常有效的手段，但对于16S rDNA类群内的进一步划分，用16S rDNA类群作为分类标准显得过于保守，延伸因子和核蛋白基因序列可以作为系统学研究的依据。Schneider等[7]对STOL类群和AY类群的16S rRNA和延伸因子基因进行序列分析，利用延伸因子基因比16SrRNA序列建立的遗传距离要远。Lee等[8]对植原体各亚组的16S rRNA和核糖体蛋白基因进行了分析，证明16S rRNA和核糖体蛋白基因序列分析可以作为植原体鉴定和分类的依据。本试验以16S rDNA基因，延伸因子基因及核糖体蛋白基因作为分类依据，在亚组水平明确了桑树萎缩病的分类地位，为今后研究桑树萎缩病植原体的来源、进化关系及其致病的分子机理提供了理论依据。

The term"programmed cell death"(PCD)is used to describe cell death that results from the activation of a cell suicide pathway that is encoded by the genome of the dying cell[1].So PCD is an important physiological mechanism for selective cell elimination during development or following damage in multicellular organisms[2].Characteristic morphological changes associated with PCD include cytoplasmic shrinking,chromatin condensation and nuclear DNA fragmentation[3].In plants,PCD is also an indispensable facet of development,defence response and architecture,which shares some characteristic features with animal apoptosis[4].Plant PCD is involved in anther,megagametophyte and vascular tissue development as well as in senescene,pollination,and sex determination[5].It is also employed as a controlled response to different biotic and abiotic stimuli[6,7].The hypersensitive response(HR)during the incompatible plant-pathogen interaction may be the most typical defence-related PCD process in plants[8].The PCD can be induced at the site of pathogen invasion as an attempt to isolate the pathogen and prevent it spreading to non-infected parts of the plant.Besides HR,plant also respond to a variety of externally added inducer by initiating PCD.These include elicitors(N-acetylchitooligosaccharides,chitosan)[9,10],signaling moleculars(hydrogen oxide, nitric oxide)[11,12] and environmental extremes(temperature stress,UV radition)[13,14].Chitosan and its fragments,the natural component of the fungi cell wall,have been shown to act as potent elicitor signals in several plant system.These include the induction of jasmonate synthesis[15],enhancement of cell wall lignification and phytoalexin production as well as to induce salicylic acid and PR proteins[16,17].In the present study,the events leading to the death of cultured tobacco cells treated with various doses of oligochitosan have been investigated.It is thus shown that oligochitosan can induce programmed cell death features in cultured tobacco cells including cell shrinkage,chromatin condensation,suggest the death process may be programmed.Oligochitosan with 85%N-deacetylation and polymerization degree from 2 to 10 was self-prepared by enzymatic hydrolysis method,solubilized(50mg/ml)in deionized water.Suspension cultures of tobacco(Samsun NN)were grown in Murashige and Skoog(MS)medium supplemented with 3%sucrose,0.5μg/ml 2,4-D.The culture were incubated with rotation(120rpm)at 25℃ with 16-hour photoperiod,on a 14 day growth cycle(10%v/v inoculum).After 12 days in culture,the cells were harvested,resuspended in fresh culture medium.All procedures were done under aseptic conditions.Oligochitosan used were sterilized by filtration through a millpore filter(0.22μm).Intracellular H2O2production was measured using 2′,7′-dichlorofluorescin diacetate( DCFH-DA) as a probe.The cells were stained for 5 min with 2.5uM and then viewed under a fluorescence microscope with an excitation wavelength of 480nm.Cell viability was evaluated as described elsewhere[18],Briefly,cells in suspension culture were deprived of culture medium and incubated for 15min with 0.05%trypan blue.After several washings with deionized water to remove the excess of the dye,dye bound to dead cells was solubilized in 50%methanol/ 1%SDS and quantified spectrophotometrically by measuring the absorbance at 595nm.Hoechst 33342(HO)and Propidium Iodide(PI)was used to detect cellular change.After different times of treatment,the cells were incubated in the dark with 5μg/ml HO and 5μg/ml PI at room temperature for 30min and 15min respectively,then observed under fluorescent microscopy by using an excitation wavelength of 350nm and 570nm.Oligochitosan dose-dependently inhibited the growth of suspension-cultured cells of tobacco(Figure 1).Growth inhibition was estimated by determining the fresh weight of the cultures after 7 days of exposured to increasing concentrations of oligochitosan.In order to determine whether the antiproliferation effect of oligochitosan in tobacco suspension cultures was due to growth arrest or cell death,we analysed cell viability.Administration of 5～200μg/ml oligochitosan to tobacco cells for 6h and 24h caused cell death,as measured by trypan blue staining.The degree of cell death rose with the increase in elicitor concentration and length of treatment.The highest value was observed with 200μg/ml oligochitosan for 24h(about 55.6%),where as 50μg/ml caused about 30.6%cell death after the same time of elicitor incubation.5μg/ml is similar to control tobacco cell cultures exhibited about 5.3%of trypan blue stained cells(Fig-ure 2).Figure 1 Oligochitosan inhibits tobacco cells proliferation.Tobacco suspension(1g/100ml liquid medium),were treated with the indicated concentrations of oligochitosan, after 7 days of treatment, cell proliferation was determined by measuring the fresh weight.Figure 2 Effect of oligochitosan on viability of tobacco cells. Exponential growing cells(1g/100ml liquid medium),were treated with the indicated concentrations of oligochitosan, after 6h (closed bar) and 24h (open bar) treatment.The 100% value corresponds to heat treatment (30min 100℃).Data are means ±SD of three independent experiments.To further determine the nature of the cell death induced by oligochitosan,we analyzed the occurrence of the main PCD hallmarks recognized for plant cells such as morphological changes,nuclear morphology,and DNA fragmentation,focusing our attention on the concentration of 50μg/ml.Under light microscopy control cells showed a well defined structure with round nuclei, while oligochitosan-treated cells were found to undergo various progressive morphological changes.Cells treated for 24h with 50μg/ml,oligochitosan showed a cell disorganization with a gradual condensation of the cytoplasm and a consequent detaching of the plasma membrane from the cell wall(Figure 3 E).Different degrees of cell disorganization were found coexist,indicating a different sensitivityto the elicitor molecule in an asynchronized cell population.Treatment with 200μg/ml led to highly collapsed cells after 24h.Figure 3 Chromatin condensation and cytoplasm shrinkage induced by oligochitosan for 24h in tobacco cells. Aliquiots of both control (A,C) and oligochitosan-induced(B,D,E) cells were collected ,stained with Hoechst 33342(A,B) and Propidium Iodide(B,D),analyzed by fluorescence microscopy, or stained with trypan blue(E), and visualized under light microscopy. Pictures represent typical examples.To further investigate the cellular changes induced by oligochitosan a double staining of cells with HO/PI dyes were carried out.This staining allows the simultaneous detection of the early stages of apoptotic cells(HO+ and PI- nuclei)and of late apoptotic(HO+ and PI+ nuclei)or necrotic cells(mainly HO- and PI+ nuclei).As showen in Figure 3, Nuclei of tobacco control cells exhibited a large central nucleolus surrounded by uniformly stained chromatin,whereas the chromatin had a granular appearance with lobated nuclei in cells after oligochitosan treatment,resembling those observed during apoptosis in animals cells.Taken together the present data are suggestive of the induction by 50μg/ml oligochitosan of a cell death pathway showing some PCD-like features recognized for animal apoptosis.In the light of the crucial role played by ROS in PCD,we investigated production of ROS in oligochitosan-induced suspension-cultured tobacco cells by monitoring H2O2 production.Generation of H2O2,measured by following the fluorescence of the dye 2′,7′-dichlorofluorescin produced from the cell-permeable non-fluorescent probe 2′,7′-dichlorofluorescin diacetate( DCFH-DA)in the presence of H2O2.Fluorescence occurred in the majority of cells immediately after oligochitosan treatment,as shown in Figure 4,whereas production of ROS in control cells was negligible.Figure 4 Production of H2O2 in tobacco cells induced by oligochitosan. The cells were stained with DCFH-DA.and H2O2 production was visualized by fluorescent microscopy as described in "Materials and Methods." Pictures represent typical examples.Plant cells can activate their intrinsically programmed cell death when respond to a variety of extracellular stimulus.This process may be related with plant resistance[1].Oligochitosan has been shown to be a potent elicitor,in this paper tobacco suspension cell cultures treated with exogenous oligochitosan showed some programmed cell death features including cell shrinkage,chromatin condensation,suggest the death process may be programmed.By contrast to the degradation of DNA to nucleosomal fragments observed in several plant PCD process,no detectable DNA ladder was observed in tobacco cells undergoing cell death in the considered time interval.Anna and his coworkers found that chitosan can induce programmed cell death in soybeans,and they do not observe DNA ladder either[10].Nevertheless,the lack of apoptotic bodies in plants is not surprising,if their fuction is to facilitate phagocytosis of their contents by neighboring cells.There is no way for typical apoptotic bodies to pass through the cell wall[19].Plants have an arsenal against the invasion of a broad array of environmental microorganisms.These include preexisting structure and chemical barriers as well as induced-defenses.Plants can combined different kinds of weapons to deal with enemies.Although PCD is a kind of death,it is still an active defense-related process which under plants control.Tobacco cells treated by oligochitosan produce ROS.This phenomenon has been reported already for cells subject both to pathogen attack or to abiotic stress[21,22].Oligochitosan may trigger the death program,which involve the alter of cellular redox homeostasis.It should be noted that in the cascade of events leading to cell death,the cellular level of ROS is critical.A threshold level of ROS is required to activate the signal transduction pathway that result in PCD,but at high doses,the process is subverted and death occurs rapidly by necrosis[23].These data are suggestive of the induction of PCD pathway depending on the amounts of ROS accumulated in given cells.On the whole our data suggest that tobacco cell suspension can trigger cell death program shared features with animal apoptosis when responded to oligochitosan,and it may be a kind of plant defense mechanism.

稻曲病Usitilaginoidea vriens是影响水稻产量及品质的重要穗部病害。稻曲病厚垣孢子可以侵染水稻，引起稻粒发病[1，2]。陈永坚[2]用室内越冬的厚垣抱子接种水稻种子、芽鞘、苗期叶片、秧苗根系，穗苞均可引起稻曲病的发生，说明稻曲病很有可能在种子萌发或插秧时已侵染水稻，水稻生长后期穗部发病，是一种系统性侵染病害。也有研究认为稻曲病不是系统侵染的病害[3，4]。为进一步明确稻曲病的侵染方式问题，有必要用更严谨的试验加以研究，为稻曲病的防治及抗源筛选提供的理论指导。于2007年8月1日在湖北省宜昌市远安县莲花镇进行套袋试验。莲花镇海拔510m，峡谷地貌，7、8月份日平均温度低于30℃，8月份降雨量超过212mm，是稻曲病的重要疫区，田间累积了大量的厚垣孢子。供试水稻品种为“粤优938”，在水稻圆杆拔节期，用40cm×10cm的纸袋套住单株水稻，以避免田间厚垣孢子的自然侵染，套袋共计68穗，于水稻乳熟期回收套袋稻穗并逐一检查稻曲病的发病情况。1.2.1 供试菌源 将4℃保存的2006年中稻“粤优938”上采集的稻曲球粉碎后，用2%的蔗糖溶液配置为厚垣孢子悬浮液A，置于28℃的培养箱（LRH-250型，广东省医疗器械厂）中保存24h备用；将2007年采集的早稻“金优402”上的稻曲球，粉碎后用2%的蔗糖溶液配置为厚垣孢子的悬浮液B，过滤后加入少量土温-20，在涡漩振荡器上振荡5分钟，在28℃条件下保存24h。以上厚垣孢子悬浮液在100×显微镜下一个视野内有约1000个厚垣孢子。1.2.2 供试水稻 2007年5月9日将水稻种子“粤优938”在自然日光下暴晒8h后用杀菌剂浸泡72h，然后置于培养皿（φ=9cm）内在28℃培养箱（LRH-250型，广东省医疗器械厂）中催芽，72h后播种育苗，2007年6月8号移栽插秧。1.2.3 方法 试验地点位于湖北省农科院网室内，网室周边农田环境中没有稻曲病疫情发生。试验用土壤经200℃电热鼓风干燥箱（HN101-1型，南通沪南科学仪器有限公司）灭菌1h后，分装入瓷盆（φ=25cm，h=32cm）中备用，瓷盆置于聚乙烯薄膜棚（长×宽×高=4×3×1.5m）内，棚顶敞开，用遮阳黑网覆盖。供试水稻做作以下处理：1）种子带菌：经消毒后的种子催芽时用少量厚垣孢子液A浸泡，2007年6月8日移栽入装有无菌土的瓷盆中。2）根部带菌：年6月8日插秧时，用清水洗净秧苗根部，在厚垣孢子液A中浸泡8h后移栽入装有无菌土的瓷盆中。3）穗期接种：2007年9月4日下午6时，将处于破口或杨花初期的水稻用手提猴头喷雾器在穗部喷雾接种厚垣孢子液B，喷雾后用聚乙烯薄膜将稻穗封闭保湿48h。4）不做任何接种处理。以上每处理2个瓷盆，每瓷盆内3兜水稻，分蘖后期每瓷盆内水稻有30～40株。水稻生长期正常管理，同时在水稻孕穗期以后，每天喷水两次，保持环境的湿度，同时观察记录稻曲病的发病情况。田间套袋试验结果：在水稻乳熟期回收的68个套袋稻穗中发病稻穗有38个，病穗率为55.9%，按照唐春生[5]的病情分级标准，病情指数为24.58。网室盆栽试验结果：在水稻灌浆初期，浸根处理的水稻首先发病，稻粒内外颖壳接缝处出现白色的菌丝团，逐渐长成白色球状物，形成稻曲球，4d后露出黄色的厚垣孢子，厚垣孢子颜色由鲜黄色逐渐转暗。浸根处理发病一个星期后种子带菌及喷雾接种处理都开始出现稻曲球。种子带菌、根部带菌及破口期喷雾接种带菌的病穗率分别为：25.0%、1.6%、5.8%。王国良[1]认为稻曲病厚垣孢子主要在水稻破口前1～4天至破口时从水稻柱头侵入引起发病。本次田间套袋试验中，在水稻圆秆拔节期用纸袋隔离了田间厚垣孢子的自然侵染，但后期调查病穗率仍高达55.88%，说明稻曲病厚垣孢子在水稻生长早期可能已被上年累积在田间的厚垣孢子侵染。在网室试验中对土壤及种子都进行了严格消毒，土壤中无自然存在的稻曲病厚垣孢子；试验中对照没有发病排除了种子自身带菌的情况。在水稻育秧及移栽以后的生长阶段都实施了隔离措施，避免了未知自然侵染对结果的干扰。试验中无论是水稻营养生长期还是生殖生长期接种，在水稻生长后期都出现了稻曲病粒，而且试验结果以厚垣孢子接种水稻种子的发病率最高，进一步说明了厚垣孢子在水稻生长早期侵染的可能性。试验中接种水稻种子所用的厚垣孢子源于2006年的中稻稻曲病粒，穗部接种菌源是2007年早稻病粒，说明上茬水稻上的稻曲病厚垣孢子可能是田间的重要侵染源。以上两试验结果表明稻曲病厚垣孢子侵染水稻的方式至少包括两种：1）系统侵染：土壤中或依附于种子表面的厚垣孢子，在水稻种子萌发初期侵入水稻胚内或在插秧时侵染水稻根部，灌浆期出现穗部病症；2）局部侵染：在水稻孕穗期，直接侵染穗部，灌浆期发病，而且以系统侵染为主要侵染方式。因此郭荣华等根据水稻穗部接种的结果及王国良的试验结论认为稻曲病不是系统侵染病害值得商榷。王疏等[6]用Nested PCR方法成功检测出水稻生殖生长期稻曲病在植株茎秆、穗部的分布特征，为研究稻曲病的侵染提供了分子生物学方法。故对于本次试验中水稻材料，可以用分子生物学手段检测水稻不同生长期稻曲病菌在水稻根部、茎秆、叶片及穗部的分布情况从而进一步明确稻曲病的侵染方式。

利用4个抗感杂交组合 （‘富士’ב金冠’ ‘金冠’ב富士’‘嘎拉’ב富士’ ‘富士’בQF-2’） 进行了苹果炭疽菌叶枯病抗性鉴定和遗传分析。结果表明，4 个群体中抗、感植株的分离比分别符合1∶1、1∶1、0∶1和1∶0的理论比值，初步推测苹果抗炭疽菌叶枯病性状受隐性单基因控制，抗病基因型为 rr，感病基因型为 RR和Rr。由此推测供试杂交群体的亲本品种 （系） ‘富士’ ‘金冠’‘嘎拉’ ‘QF-2’ 的基因型分别为rr、Rr、RR和rr。利用207株 ‘金冠’ב富士’ 的杂交后代为试材，构建了抗感基因池用于BSA分析。从HiDRAS和GenBank网站上下载了300 对均匀覆盖苹果染色体组的 SSR 引物，通过在亲本及抗感池中的初步筛选，将产生多态性条带的引物进行群体验证，获得了两个位于苹果15号连锁群上与抗病性状相关的分子标记 CH01d08 和 CH05g05。通过MapMarker 4.0 软件分析，将这两个标记定位于Rgls基因两侧，重组率分别为7.3%和 23.2%。依据苹果基因组 CH01d08 和 CH05g05 标记之间的序列，自行设计了276对SSR引物。经过亲本及抗感池的初步筛选及群体验证，最终筛选出 9 对与 R gls基因位点连锁的分子标记。将表型抗性鉴定结果与标记基因型数据相结合采用 JoinMap ver.4.0软件，完成了SSR标记与Rgls基因位点的连锁图谱。这11个标记覆盖了49.2 cM的遗传距离，最近的标记为 S0405127 遗传距离为 0.5 cM。Rgls基因位点两侧最近的两个标记 S0304673 和 S0405127 之间的物理距离为500kb。以‘金冠’和‘富士’及‘金冠’ב富士’的F1代群体中20株极端抗和20株极端感炭疽菌叶枯病的单株为材料，利用全基因组重测序（whole genome re-sequencing，WGR）技术，结合混合分组分析法（bulked szegregate analysis，BSA）共开发SNP位点3399950个，InDel位点573040个，SNP位点位于内含子上的465317个，位于外显子上的13029个，其中同义变异7330个，InDel位点位于内含子上的108996个，位于外显子上的19957个，其中插入或缺失3或3的整数倍的碱基，不改变蛋白质的编码框的有6928个。在全基因组范围内共得到33个候选的SNP位点及所对应的29个候选基因。通过对△（SNP-index）的筛选，将抗性基因位点快速定位于苹果第15条染色体的2～5Mb的区域内，结合SSR标记定位结果，最终锁定18个SNP位点、30个InDel位点，以及5个候选基因。通过对5个候选基因在接种病原菌后不同时间点的表达量差异及生物信息学分析，结果显示，基因MDP0000686092、MDP0000205432、MDP0000120033为功能未知蛋白，基因MDP0000945764具有CCHC型锌指结构，是丝氨酸/精氨酸富集剪接因子，具有核酸绑定、锌离子结合分子功能，参与RNA剪切生物过程，调节基因产物的表达。基因MDP0000864010具有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（磷酸盐）NAD（P）绑定区域，属于NAD依赖差向异构酶/脱氢酶家族，具有辅酶绑定功能，可能与鼠李糖生物合成酶1有关。通过qRT-PCR验证，5个候选基因均不同程度的响应炭疽叶枯病病原菌的诱导，是苹果炭疽叶枯病抗病相关基因。通过高分辨熔解曲线 （HRM） 分析技术对SNP 及InDel标记进行验证。对SNP 及InDel引物在亲本和抗感基因池中进行初步筛选，将出现不同分型的引物在分离群体上进行验证，获得了6个SNP 及5 个InDel标记与Rgls基因位点紧密连锁。从中挑选了10 个标记对所检验出的重组个体进行了分析，将 Rgls基因位点定位于标记 InDel4199 和SNP4257之间，范围缩小为58 kb以内。以青岛农业大学苹果试验基地 （山东省胶州市） 栽培的50 个田间栽培品种和品系为试材，利用四个紧密连锁的分子标记 S0405127、S0304673、SNP4236和InDel4254验证了分子标记的可靠性。结果表明，SSR标记 S0405127，S0304673，SNP 标记 SNP4236，InDel标记InDel4254鉴定的准确率分别为 90.0%，94.0%，98.0%，96.0%，其鉴定结果的准确率均达到90%以上，可以应用于田间栽培品种、品系、种质资源以及杂种后代幼苗对炭疽菌叶枯病抗性的鉴定。一是通过对4个杂交组合的F1 群体及4个亲本进行苹果炭疽菌叶枯病抗性鉴定和遗传分析，推断出苹果抗炭疽菌叶枯病性状受隐性单基因控制，抗病基因型为rr，感病基因型为RR和Rr。二是通过300对均匀覆盖苹果染色体组的SSR引物和自行设计的276对SSR引物在亲本及抗感池中进行筛选，得到的多态性标记经作图群体验证，共获得了11个与Rgls基因位点连锁的分子标记，将抗病基因定位于苹果第15条染色体上，并完成了SSR标记与Rgls基因位点连锁图谱的构建。将 Rgls基因位点定位在 SSR 标记 S0304673 和S0405127之间，物理距离为500 kb，与最近的标记 S0405127 的遗传距离仅为0.5 cM。三是开发了与抗炭疽菌基因相关的 SNP 标记和 Indel标记，并对部分SNP 及 InDel 标记进行了验证，将 R gls基因位点进行精细定位，将抗病基因的范围进一步缩小至58 kb，并获得了14 个与抗病相关的候选基因。

柿是我国主要果树树种之一，柿树具有寿命长、产量高、收益大、易管理的优点，发展柿树生产对增加农民收入、调整农业产业结构方面具有重要的意义。柿树嫁接后5～6年开始结果，15年后进入盛果期，经济寿命在100年以上。丰产园3～4年开始结果，5～6年进入盛果期。柿根系分布取决于砧木。君迁子作砧木，根系发达，分枝力强，细根多。根系大多分布在10～40cm深土层中；垂直根深达3m以上，水平分布为冠径的2～3倍。柿根系单宁含量多，受伤后难愈合，发根困难，应注意保护根系。根系春季开始生长晚于地上部，一般地上部展叶时开始生长。柿枝条分为营养枝、结果枝和结果母枝。结果母枝是指着生混合花芽的枝条；结果枝是指由混合花芽抽生的枝条，大多由结果母枝的顶芽及其以下1～3个侧芽发出，再往下的侧芽的抽生为营养枝。营养枝是不能开花结果的枝，其上着生叶片进行光合作用制造有机营养物质，其一般短而弱。柿结果枝第3～7节叶腋间着生花蕾，开花结果，着生花的各节没有叶芽，开花结果后成为盲节。柿在平均温度12℃以上时萌芽。新梢生长以春季为主，成年树一般只抽生春梢，生长量较小，幼龄树和生长势旺的树可生长2～3次梢。柿树顶端优势和层性都比较明显，但新梢生长初期先端有下垂性，枯顶后不再下垂。柿树芽分叶芽和花芽两种。花芽为混合花芽。叶芽较瘦小，着生于1年生枝的中下部，萌发后抽生营养枝。花芽较肥大，位于1年生枝的顶部1～3节，萌发后抽生结果枝。柿树枝条顶芽为伪顶芽。枝条基部有两个鳞片覆盖的副芽，常不萌发而成为潜伏芽，其寿命较长。柿树的花芽分化在新梢停止生长后1个月，大约在6月中旬，当新梢侧芽内雏梢具有8～9片叶原始体时，自基部第3节开始向上，在雏梢叶腋间连续分化花的原始体。每个混合花芽一般分化3～5朵花。柿树的花有雌花、雄花、两性花三种类型。一般栽培品种仅生雌花，单生于结果枝第3～7节叶腋间，雄蕊退化，可单性结实。雄花1～3朵聚生于弱枝或结果枝下部，呈吊钟状。柿树在展叶后30～40d,日均温达17℃以上时开花，花期3～12d,大多数品种为6d。柿果实是由子房发育而成的浆果。果实发育过程分为3个明显的阶段:第一阶段为开花后60d以内，幼果迅速膨大，最后基本定形；第二阶段自花后60d至着色，果实停长后或间歇性膨大；第三阶段从果实着色至采收，果实又明显增大。柿的落花落果包括落蕾、落花和落果。开花前落蕾，落花在5月上中旬，部分花脱落。幼果形成后有落果现象，以后2～3周较重，6月中旬以后落果减轻，8月上中旬至成熟落果很少。柿树喜温耐寒。在年平均温度10.0～21.5℃,绝对最低温度不低于-20℃的地区均可栽培，但以年平均气温13～19℃最为适宜。并且甜柿耐寒力比涩柿弱，要求生长期(4—11月)平均气温在17℃以上。冬季低于-15℃时易发生冻害。柿树耐湿抗旱。在年降水量500～700mm、光照充足地方，生长发育良好，丰产优质。由于柿树根系分布深广，故较耐旱，一般在年降水量450mm以上地方，不需灌溉，但在开花坐果期，发生干旱，易造成大量落花落果。柿树喜光，但也较耐阴。一般在光照充足地方，柿树生长发育好，果实品质优良。对于甜柿要求4—10月日照时数在1400h以上。柿树对土壤要求不严，山区、丘陵、平地、河滩均能生长。但以土层深1m、土壤pH值6.0～7.5、含盐量0.3%以下、地下水位在1.5m以下，保水排水良好的壤土和黏壤土为宜。柿树开花前疏花蕾。保留结果枝发育最大，开放最早的花蕾，其余疏除。始果期幼树主侧枝上花蕾全部疏除。甜柿品种果园放蜂或人工辅助授粉；花期喷0.1%硼砂+300mg/kg赤霉素；或用0.3%尿素+0.1%硼砂+0.5%磷酸二氢钾，以提高坐果率。花后35～40d早期生理落果后疏果。首先疏除病虫果、伤果、畸形果、迟花果及易日灼果，保留不受日光直射的侧生果或下垂果，保留个大、整齐、深绿色，萼片大而完整的果实。保留1枝1～2个果，或15～18片叶留1个果。叶片在5片以下的小枝和主侧枝延长枝上不留果。根据柿果用途适期采收。榨取柿漆用果实在单宁含量最高的8月下旬采收；涩柿鲜食品种在果实由绿变黄尚未变红色时采收；制柿饼用果实在果皮黄色减褪呈橘红色时采收；软柿(烘柿)鲜食，在充分成熟、呈现固有色泽而未软化时采收；甜柿品种在充分成熟、完全脱涩、果皮由黄变红色、果肉尚未软化时采收。采收采用折枝法或摘果法。折枝法是用手、夹杆或挠钩将果实连同果枝上中部一同折下。摘果法是用手或采果器将柿果逐个摘下。二者交替使用。采收时轻拿轻放，采后及时剪去果柄，并在分级时将萼片摘去。

病菌能侵染嫩叶、嫩梢、花蕾、花梗和幼果，产生褐色至黑色的斑点，斑点周围常有黄色晕圈。较小叶龄病斑如针头状黑点，无黄色晕圈；较大叶龄病斑较大，黄色晕圈明显，并常沿着维管束扩散、沿叶脉扩展，形成类似带尾须的病斑。病叶、病果极易脱落。枝梢发病时，大部分嫩叶感病后脱落，随后整个枝梢枯死，严重时还会蔓延到大枝上，造成死树。重发病果园，当年春梢叶片可全部落光，只剩下上一年梢上的少数叶片，地面可见落叶一层。潮湿时病斑上有墨绿色霉层，为病原菌的菌丝和孢子(图8-1至图8-4)。图8-1 贡柑嫩梢柑橘褐斑病症状（1）图8-2 贡柑嫩梢柑橘褐斑病症状（2）图8-3 贡柑嫩梢柑橘褐斑病症状（3）图8-4 贡柑受害严重树（1）清园后树冠喷0.8～1.0波美度的石硫合剂。（2）在新梢长至3～5cm时及幼果期及时喷药保护，药剂可选用25%吡唑醚菌酯乳油1000～1500倍液、25%吡唑醚菌酯·代森联可湿性粉剂1000～1500倍液、25%嘧菌酯悬浮剂1000倍液、10%苯醚甲环唑可湿性粉剂800倍液、80%乙蒜素乳油1000倍液、80%代森锰锌可湿性粉剂600倍液、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂600倍液。花期遇连续阴雨，花瓣上先出现水渍状小圆点，随后迅速扩大为黄褐色的病斑，引起花瓣腐烂，其上长出灰黄色霉层。若天气干燥，则呈淡褐色干腐。腐烂的花瓣若落在幼叶、嫩枝和幼果上，就可使其发病。嫩叶上的病斑，在潮湿天气时呈水渍状软腐；干燥时呈淡黄褐色，半透明。小枝受害后常枯萎。幼果受害易脱落，若不落，病斑则会木栓化，或稍隆起，呈形状不规则的花斑果(图8-5、图8-6)。图8-5 柑橘灰霉病果实症状图8-6 柑橘灰霉病花症状（1）栽培管理。冬季结合清园，剪除病枝、病叶，将其带出果园集中烧毁。花期遇雨，则进行摇花。花期发病，早上趁露水未干时摘除病花，以减少侵染源。（2）药剂防治。开花前喷1～2次药预防，可用400g/L嘧霉胺悬浮剂1000～1500倍液。在被害枝干上长出的子实体，如同贴着膏药一般，故称柑橘膏药病。白色膏药病的子实体表面较平滑，乳白色或灰白色，在条件适宜时，边缘常扩展新的菌膜，严重时菌膜包围枝条。褐色膏药病的子实体表面呈厚丝绒状，略隆起，通常呈栗褐色，周缘有狭窄的灰白色带。两种病菌的子实体，后期常龟裂，易剥离(图8-7、图8-8)。图8-7 白色膏药病发病症状（1）图8-8 白色膏药病发病症状（2）（1）栽培管理。加强管理，结合修剪，清除带病枝条和过密枝条，使柑橘园通风透光，减少发病。（2）药剂防治。在蚧壳虫幼蚧孵化盛期和末期，以及蚜虫发生期及时喷施药剂进行防治；用刀刮除病部子实体后，涂抹3～5波美度的石硫合剂，亦可用10%波尔多液涂刷病部子实体1～2次。病树往往大部分枝条同时发病，病枝不发或少发新梢。新梢上部分叶片黄化，继而老叶失去光泽，主脉、侧脉附近明显黄化，叶片褪色后不久逐渐脱落，部分仅叶身脱落，叶柄仍留在枝上。落叶后从腋芽长出的新梢弱而直立，叶小，色灰淡，主脉黄化，开花特别多。根系是细根先腐烂，然后大根逐渐腐烂。地上部许多小枝相继枯死，病树逐渐衰退，有的病树则在初期症状出现几个月后，突然萎蔫枯死，叶片干挂树上，此类型为急性衰退病(图8-9、图8-10)。图8-9 植株衰退病毒后表现的明脉症状图8-10 衰退病毒后表现的茎陷点症状（1）严格检疫，防止病毒传入。（2）种植无病毒苗木，不用带病接穗繁殖。（3）选择抗病砧木，如酸橘、江西红橘、枳、枳橙、红橘、粗柠檬和檫檬等作砧木。（4）加强栽培管理，注意防治蚜虫。最典型的症状是以枳或枳橙作砧木的柑橘树，感染了柑橘碎叶病毒后，嫁接部位出现褶折黄环，接穗基部肿大，地上部黄化、落叶，植株生长衰弱、矮化，结果很少，甚至枯死。在抗病、耐病砧木上无症状。在腊斯克枳橙上叶片表现黄色透明斑点，呈圆形或不规则形，叶片边缘缺损，叶片畸形且叶脉透明。在茎上首先出现水溃状的纵向条沟，后变成黄白色条斑，稍凹陷，剥开嫁接口的树皮，接穗与砧木的木质之间有一圈缢缩线，受强风等外力的作用，砧木与接穗之间容易断裂，裂面整齐。以枳橙、厚皮柠檬作接穗发病后，新叶上呈现黄斑和叶缘缺损扭曲。有时条斑联合成斑块，枝条弯曲。严重时，植株矮化(图8-11、图8-12)。图8-11 病树接穗基部肿大图8-12 病树嫁接（1）建立无病苗圃，培育无病苗木。从田间选取健康的优良单株，经指示植物腊斯克枳橙检测，证明不带柑橘碎叶病毒后，方可作为接穗无病母树。也可选取健康的优良单株嫁接苗，在30～44℃环境中处理40天以上，在生长点切取0.2mm微芽进行茎尖嫁接，即可获得无柑橘碎叶病毒的繁殖材料。（2）采用抗病、耐病砧木。避免用枳作砧木，可采用枸头橙、酸橘、红橘等作砧木。（3）更换砧木。凡感染碎叶病毒而出现黄化、生长衰弱的幼龄树，可以靠接2～3株抗病砧木，一年后树势便可以得到恢复，且获得一定产量。主要为害叶片、新梢和果实，尤其易侵染幼嫩组织。叶片染病，初生蜡黄色油渍状小斑点，后渐扩大，形成灰白色至暗褐色圆锥状疮痂，后病斑木质化凸起，叶背突出，叶面凹陷，病斑不穿透叶片，散生或连片，病害发生严重时叶片扭曲、畸形。新梢染病，与叶片症状相似，枝梢与正常枝相比较为短小，有扭曲状。幼果染病，果面密生茶褐色小斑，后扩大在果皮上形成黄褐色圆锥形，木质化的瘤状突起(图8-13、图8-14)。近成熟果实发病，病斑小不明显。合理修剪、整枝，增强通透性，降低湿度；控制肥水，促使新梢抽发整齐；结合修剪和清园，彻底剪除树上残枝、残叶；并清除园内落叶，集中烧毁。对外来苗木实行严格检疫或50%多菌灵可湿性粉剂800倍液浸30min。图8-13 柑橘疮痂病为害果实初期症状图8-14 柑橘疮痂病为害果实后期症状可为害地上部的各个部位。叶片受害症状分叶斑型及叶枯型两种。叶斑型(图8-15至图8-17):症状多出现在成长叶片、老叶边缘或近边缘处，病斑近圆形，稍凹陷，中央灰白色，边缘褐色至深褐色；潮湿时可在病斑上出现许多朱红色带黏性的小液点，干燥时为黑色小粒点，排列成同心轮状或呈散生。叶枯型(图8-18):症状多从叶尖开始，初期病斑呈暗绿色，渐变为黄褐色，叶卷曲，常大量脱落。枝梢症状分为两种:急性型:发生于连续阴雨时刚抽出的嫩梢，似开水烫伤状，后生橘红色小液点。慢性型:多自叶柄基部腋芽处发生，病斑椭圆形淡黄色，后扩大为长梭形，一周后变灰白枯死，上生黑色小点。幼果初期症状为暗绿色凹陷不规则病斑，后扩大至全果，湿度大时，出现白色霉层及红色小点，后变成黑色僵果。成熟果发病，一般从果蒂部开始，初期为淡褐色，以后变为褐色凹陷而腐烂。泪痕型:受害果实的果皮表面有许多条如眼泪一样的红褐色小凸点组成的病斑。也可为害柚子，症状同上。图8-15 柑橘炭疽病为害叶片叶斑型症状图8-16 柑橘炭疽病为害叶片叶斑型叶背症状图8-17 柑橘炭疽病为害叶片叶斑型叶缘受害症状加强橘园管理，重视深翻改土；增施有机肥，防止偏施氮肥，适当增施磷、钾肥；雨后排水；及时清除病残体，集中烧毁或深埋，以减少菌源；修去树冠上衰弱枝、交叉枝、扫帚枝。图8-18 柑橘炭疽病为害叶片叶枯型症状冬季清园时喷施1次0.8～1波美度石硫合剂，同时可兼治其他病害。在病害发生前期，可喷施下列药剂:65%代森锌可湿性粉剂600～800倍液；50%代森铵水剂800～1000倍液。在春、夏、秋梢及嫩叶期、幼果期各喷药1次，可喷施下列药剂:25%嘧菌酯悬浮剂800～1250倍液；80%福美锌·福美双可湿性粉剂800～1000倍液。枝、叶、花、果及根部均可显症，尤以夏、秋梢症状最明显。发病初期，部分新梢叶片黄化，树冠顶部新梢先黄化(图8-19)，逐渐向下发展，经1～2年后全株发病，3～4年后失去经济价值。叶肉变厚、硬化、叶表无光泽，叶脉肿大，有些肿大的叶脉背面破裂，似缺硼状(图8-20、图8-21)。病树开花早而多，花瓣较短小，肥厚，淡黄色，无光泽。根部症状主要表现为腐烂，其严重程度与地上枝梢相对称(图8-22)。果实受害，畸形，着色不均，常表现为“红鼻子”果。也可为害柚子，症状同上。图8-19 柑橘黄龙病为害新梢症状图8-20 柑橘黄龙病为害叶片初期症状加强检疫。杜绝病苗、病穗传入无病区和新建的橘园。对幼龄树，在生长季节的4—8月，每月施1次稀薄水肥，年施肥4～6次。对结果树，每年要施好萌芽肥、稳果肥、壮果肥和采果肥。同时，也要科学地进行水分管理，要保证水分及时、适量供应。图8-21 柑橘黄龙病为害叶片后期症状图8-22 柑橘黄龙病为害后期症状播种前砧木种子用50～52℃热水预浸5min，再用55～56℃温水浸泡50min。接穗选自无病毒的高产优质母树，用1000mg/kg盐酸四环素液浸泡2h，取出后用清水洗净再嫁接。在嫩梢抽发期对病树进行治疗。重病树立即挖除；轻病树，可在主干基部钻孔，深达主干直径的2/3，从孔口注射药液，每株成年树注射1000mg/kg盐酸四环素液2～5L。主要为害叶片、果实和枝梢。叶片染病，初在叶背产生黄色或暗黄绿色油渍状小斑点，后叶面隆起，呈米黄色海绵状物；后隆起部破碎呈木栓状或病部凹陷，形成褶皱；后期病斑淡褐色，中央灰白色，并在病健部交界处形成一圈褐色釉光；凹陷部常破裂呈放射状(图8-23、图8-24)。果实染病，与叶片上症状相似(图8-25、图8-26);病斑只限于在果皮上，发生严重时会引起早期落果。枝梢染病，初生圆形水渍状小点，暗绿色，后扩大灰褐色，木栓化，形成大而深的裂口，最后数个病斑融合形成黄褐色不规则形大斑，边缘明显。图8-23 柑橘溃疡病为害叶片症状加强栽培管理。不偏施氮肥，增施钾肥；控制橘园肥水，保证夏、秋梢抽发整齐。结合冬季清园，彻底清除树上与树下的残枝、残果或落地枝叶，集中烧毁或深埋；控制夏梢，抹除早秋梢，适时放梢；及时防治害虫。图8-24 柑橘溃疡病为害叶片背面症状图8-25 柑橘溃疡病为害果实初期症状图8-26 柑橘溃疡病为害果实后期症状培育无病苗木，在无病区设置苗圃，所用苗木、接穗进行消毒，可用72%农用链霉素可溶性粉剂1000倍液加1%酒精浸30～60min，或用0.3%硫酸亚铁浸泡10min。冬季清园时或春季萌芽前喷45%晶体石硫合剂50～70倍液。春季开花前及落花后的10天、30天、50天，夏、秋梢期在嫩梢展叶和叶片转绿时，各喷药1次。可用药剂有:72%农用硫酸链霉素可湿性粉剂3000～4500倍液；20%噻菌铜胶悬剂300～500倍液；20%乙酸铜水分散粒剂800～1200倍液。主要为害柑橘成熟叶片，有时也可为害果实和小枝，常见有两种症状。一种是黄斑型:发病初期在叶背生1个或数个油浸状小黄斑（图8-27)，随叶片长大，病斑逐渐变成黄褐色或暗褐色，形成疮痂状黄色斑块。另一种是褐色小圆斑型（图8-28）：初在叶面产生赤褐色略凸起小病斑，后稍扩大，中部略凹陷，变为灰褐色圆形至椭圆形斑，后期病部中央变成灰白色，边缘黑褐色略凸起，在灰白色病斑上可见密生的黑色小粒点，即病原菌的子实体。果实受害，果面产生褐色的斑点，后逐渐扩大，至整个果面。也可为害柚子，症状同上。图8-27 柑橘黄斑病为害叶片黄斑型初期症状图8-28 柑橘黄磁病为害叶片症状（褐色小圆斑型，正面）加强橘园管理，增施有机肥，及时松土、排水，增强树势，提高抗病力。及时清除地面的落叶，集中深埋或烧毁。第1次喷药可结合疮痂病防治，在落花后，喷施下列药剂:50%多菌灵可湿性粉剂600～800倍液；80%代森锰锌可湿性粉剂600～800倍液；70%甲基硫菌灵可湿性粉剂800～1000倍液；77%氢氧化铜可湿性粉剂800～1000倍液；65%代森锌可湿性粉剂500～600倍液；70%丙森锌可湿性粉剂600～800倍液等，间隔15～20天喷1次，连喷2～3次。主要为害果实，症状分黑星型和黑斑型两类。黑星型(图8-29):病斑圆形，红褐色，后期病斑边缘略隆起，呈红褐色至黑色，中部略凹陷，为灰褐色，常长出黑色粒状的分生孢子器。果上病斑达数十个时，可引起落果。黑斑型(图8-30):初期斑点为淡黄色或橙黄色，以后扩大形成不规则的黑色大病斑，中央部分有许多黑色小粒点。病害严重的果实，表面大部分可以被许多互相联合的病斑所覆盖。叶片上的病斑与果实上的相似。也可为害柚子，症状同上。图8-29 柑橘黑星病病果黑星型图8-30 柑橘黑星病病果黑斑型加强橘园栽培管理。采用配方施肥技术，调节氮、磷、钾比例；低洼积水地注意排水；修剪时，去除过密枝叶，增强树体通透性，提高抗病力；清除初侵染源，秋末冬初结合修剪，剪除病枝、病叶，并清除地上落叶、落果，集中销毁，同时喷洒1～2波美度石硫合剂，铲除初侵染源。柑橘落花后，开始喷洒下列药剂:50%多菌灵可湿性粉剂800～1000倍液；80%代森锰锌可湿性粉剂500～800倍液。症状青霉病多发生于储藏前期。病果初期呈现水溃状黄褐色圆形病班。2～3天后长出白色霉状物，随后病部中央产生青(蓝)色粉状霉层。病部边缘整齐明显。腐烂速度较慢，全果腐烂约需15天。病果有发霉气味，不会黏附在包装纸或箱子上。病原特征分生孢子梗无色，直立，顶端2～5个分枝，呈扫帚状。小梗瓶状，顶端渐尖细。分生孢子念珠状串生，单胞无色，近球形，(3.1～6.2)μm×(2.9～6.0)μm(图8-31、图8-32)。图8-31 青霉病病果图8-32 柑橘青霉病初期病果(1)不要在雨后或晨露未干时进行采收。从采收开始就应避免机械损伤。(2)拟储藏的果实采下时应立即用50%万利得乳油2000～2500倍液、25%戴唑霉乳油1000～1500倍液、45%扑霉灵乳油2000倍液等浸泡1min。症状多发生于储藏后期。病果初期症状与青霉病的相同。孢子丛绿色。病部边缘不整齐，不明显。腐烂速度较快，全果腐烂约需7天。病果具芳香气味，黏附在包装纸或箱子上(图8-33、图8-34)。图8-33 绿霉病病果图8-34 柑橘绿霉病后期病果同柑橘青霉病。橘树染病后致枝叶凋萎或整株枯死。枝干染病，有流胶和干枯两种类型。流胶型:病部初期呈灰褐色水渍状，组织松软，皮层具细小裂缝，后期流有褐色胶液，边缘皮层干枯或坏死翘起，致木质部裸露。干枯型:皮层初呈红褐色、干枯稍凹陷，有裂缝、皮层不易脱落，病健部相接处具明显隆起界线，流胶不明显。果实染病，表面散生黑褐色硬质凸起小点，有的很多密集成片，呈砂皮状(图8-35、图8-36)，果心腐烂比果皮快，当果皮1/3～1/2腐烂时，果心已全部腐烂，故又称“穿心烂”。也可为害柚子，症状同上。图8-35 柑橘树脂病为害果实初期症状加强管理，主要是防冻、防涝、避免日灼及各种伤口，以减少病菌侵染。剪除病枝，收集落叶，集中烧毁或深埋。图8-36 柑橘树脂病为害果实后期症状可于春芽萌发期喷1次0.8∶0.8∶100等量式波尔多液，喷洒时注意主干及大枝部分。认真刮除病枝或病干上病皮，病部伤口涂抹下列药剂:36%甲基硫菌灵悬浮剂100倍液；25%甲霜灵可湿性粉剂100～200倍液；80%三乙膦酸铝可湿性粉剂100倍液。若施药后再用无色透明乙烯薄膜包扎伤口，防效更佳。主要为害根颈部，地上部也可受害。根颈部染病(图8-37)，初期病部褐色，湿腐，具酒糟气味，流有胶液。后期如天气干燥，病部常干裂，条件适宜时，病斑迅速扩展，严重的环绕整个树干，致橘树死亡。果实发病时，先为圆形的淡褐色病斑，后渐变为褐色水渍状软腐，长出白色菌丝(图8-38)，有腐臭味，病健部明显，干燥时病斑干韧。图8-37 脚腐病症状图8-38 柑橘脚腐病为害果实症状选用抗病砧木是防治此病的根本措施。嫁接时，适当提高嫁接口位置，不宜定植太深。加强管理，低洼积水地注意排水，合理修剪，增强通透性，避免间作高秆作物。发现病树，及时将腐烂皮层刮除，并刮掉病部周围健全组织0.5～1cm，然后于切口处涂抹下列药剂:10%等量式波尔多液；2%～3%硫酸铜液；80%三乙膦酸铝可湿性粉剂100～200倍液；25%甲霜灵可湿性粉剂400～500倍液。主要为害叶片、枝梢及果实，初期仅在病部生一层暗褐色小霉点，后期逐渐扩大，直至形成绒毛状黑色或暗褐色霉层，并散生黑色小点，即病菌的闭囊壳或分生孢子器(图8-39、图8-40)。图8-39 柑橘煤烟病为害叶片前期症状及时防治蚧壳虫、粉虱、蚜虫等刺吸式口器害虫，加强橘园管理。图8-40 柑橘煤烟病为害叶片后期症状发病初期，喷施下列药剂:40%g菌丹可湿性粉剂400倍液;0.5∶1：100倍式波尔多液；90%机油乳剂200倍液；50%多菌灵可湿性粉剂600～800倍液。主要为害果实。果面近脐部变黄，似成熟果，后病部变褐，呈水溃状，不断扩大，呈不规则状，四周紫褐色，中央色淡，湿度大时，病部表面长出白色气生菌丝，后转为墨绿色，致果瓣腐烂，果心空隙长出墨绿色绒状霉菌，严重的果皮开裂。幼果染病，多发生在果蒂部，后经果柄向枝上蔓延，造成枝条干枯，致幼果变黑或成僵果早落(图8-41、图8-42)。图8-41 柑橘黑腐病为害果实初期症状图8-42 柑橘黑腐病为害果实后期症状加强橘园管理，在花前、采果后增施有机肥，做好排水工作，雨后排涝，干旱时及时浇水，保证水分均匀供应。及时剪除过密枝条和枯枝，及时防虫，以减少人为伤口和虫伤。发病初期，可喷施下列药剂:75%百菌清可湿性粉剂600～800倍液；70%代森猛锌可湿性粉剂500～600倍液；40%克菌丹可湿性粉剂400～500倍液。新梢少或部分小枝枯死，叶片小或叶脉附近绿色叶肉黄化，似缺锌状，病树树势弱但开花多，落花落果严重。枝条纤细，丛生，树冠矮化。砧木部分树皮纵向开裂，翅起延至根部，皮层剥落，木质部外露呈黑色(图8-43、图8-44)。图8-43 枳壳站木皮层纵裂图8-44 靠接枳壳砧木皮层纵裂操作前后用5%～20%漂白粉或25%福尔马林溶液加2%～5%氢氧化钠溶液或5%次氯酸钠浸洗嫁接刀、枝剪、果剪等工具和手1～2s，进行消毒，以防接触传染。果实染病后，出现橘黄色圆形斑。病斑在短时间内迅速扩大，使全果软腐，病部变软，果皮易脱落。后期出现白色黏状物，为气生菌丝及分生孢子，整个果实出水腐烂并发生酸败臭味(图8-45、图8-46)。图8-45 柑橘酸腐病为害果实的症状图8-46 酸腐病病果表面的白色霜霉层（左）和烂柿子状病果（右）参照柑橘青霉病与绿霉病的防治方法，及时清除烂果与流出的汁液。地衣是一类菌藻共生物，呈青灰色或灰绿色的叶状体组织附生于果树的枝干上，呈圆形膏药状紧贴于枝干树皮上，不易剥离，青灰色或灰绿色(图8-47、图8-48)。图8-47 地衣病为害枝干症状图8-48 壳状地衣加强栽培管理，采果后，清洁果园，及时修剪整枝，增强园内通风透光，降低果园湿度；科学施用肥料，增强果树长势。适度药剂防治:采用挑治法和刮疗法。于春季雨后，用竹片或削刀刮除枝干上的地衣和苔藓，然后用药治疗。刮除下来的地衣和苔藓必须收集烧毁。用10%～15%的石灰水涂刷。或用下列药剂喷施:30%氧氯化铜悬浮剂500倍液；1%～1.5%硫酸亚铁溶液；1∶1：100等量式波尔多液。主要发生在春梢上，夏秋梢因高温不表现症状。病树春梢新芽弓形。梢黄，向外侧反转，节间缩短，丛生状。叶小，凹凸皱缩状，下卷呈船形。低温时症状明显，较暖时，叶尖缩短，生长停止，成匙形。树冠萎缩，发病后期果实小，果皮粗厚，品质差(图8-49、图8-50)。图8-49 蜜柑船形叶症状图8-50 蜜柑匙形叶症状（1）种植无病苗木。（2）及时砍伐病树，在树周围开深沟以防止病情蔓延。（3）加强水肥管理，增强树势。（4）枝剪、嫁接刀等在使用前，用20%漂白粉液（或10倍漂白粉液）或1%次氯酸钠液进行消毒。病斑可发生在果面任何部位，初为淡褐色小斑，后病斑迅速扩展成圆形暗褐色水渍状软腐，有腐臭味，病果很快脱落。高温高湿时病部长出白色菌丝，干旱时病斑干韧。有时叶片亦受害，病斑呈水溃状，似开水烫伤，病、健部交界不明显，病斑近圆形或不规则形，初期颜色较浅，随后迅速转变为浅褐色至深褐色，易误诊为急性炭疽。病菌为害柑橘主干基部则引起皮层腐烂，称为“脚腐病”(图8-51、图8-52)。图8-51 疫菌褐腐病病叶图8-52 疫菌褐腐病病果（只侵染白皮层，不烂及果肉）(1)栽培管理。加强栽培管理，平衡施肥；雨季及时开沟排水，降低果园湿度；冬季清园，修剪过密及分枝过低的枝条，剪除病虫枝，清除病果，并将其集中烧毁，保持地面光洁和果园通风透光。(2)药剂防治。及时在全园喷药防治，重点对树冠中下部、内膛和地面喷药，每隔5～7天喷1次，连喷2～3次。药剂可选用70%甲霜灵锰锌可湿性粉剂800～1000倍液。主要为害嫩叶、新梢和幼果。在嫩叶的正面、背面和新梢表面呈现一层白色粉状物。病叶组织开始呈水渍状，后逐渐褪绿，最后呈黄色。病叶多为畸形、扭曲状。病部由叶柄传播到新梢，致使整条新梢和嫩叶被白色粉状物覆盖。严重时引起大量落叶、落果，新梢枯死(图8-53、图8-54)。图8-53 柑橘白粉病病枝、病叶图8-54 白粉病为害叶片在春梢萌芽前，喷洒药剂，可选用99%矿物油乳油200倍液、45%晶体石硫合剂150倍液、80%代森锰锌可湿性粉剂400～500倍液等。在容易发病的新梢期喷洒药剂，可选用25%三唑酮可湿性粉剂800～1000倍液。主要为害柑橘主干，其次在主枝，小枝上也可发生。初发病时，皮层出现红褐色小点，疏松变软，水渍状，并开裂和流胶。之后病斑扩大，且病斑不定形，病部皮层变褐色，流胶增多。感染至木质部后，除引起流胶症状外，病树常出现枯枝，叶片黄化脱落，树势弱，产量低，病树果实小，提前转黄，味酸，严重时引起植株木质部坏死，导致整株树死亡，甚至摧毁整个果园(图8-55、图8-56)。图8-55 柑橘流胶病树干症状（1）图8-56 柑橘流胶病树干症状（2）（1）栽培管理。合理修剪，多施有机肥，增强树势；雨季注意果园及时排水；减少树体机械伤口和其他病虫害的发生；冬季树干涂白。（2）药剂防治。晴天刮除病斑腐烂部分，刮除时采取浅刮深刻（即将病部的粗皮刮去，再纵切裂口数条，深达木质部，刮至健处韧皮部）的方法，待刮除部位风干水分后涂抹药剂，可选用70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、80%代森锰锌可湿性粉剂、25%吡唑醚菌酯乳油、25%吡唑醚菌酯·代森联可湿性粉剂、25%嘧菌酯悬浮剂、10%苯醚甲环唑可湿性粉剂、80%乙蒜素乳油等，将药剂稀释至30～50倍液使用，各药剂于发病期涂抹2～3次，间隔30天涂1次。因发病时期不同，可出现3种症状类型。（1）感染刚出土或尚未出土的幼芽，使病芽在土中变褐腐烂，形成芽腐。（2）幼苗顶部叶片染病，产生圆形或不定形淡褐色病斑，并迅速蔓延，叶片枯死，形成枯顶病株。（3）苗木靠近土表的基部缢缩，变褐色腐烂，叶片凋萎不落，苗木不倒伏，形成青枯病株，此为典型症状（图8-57、图8-58）。图8-57 柑橘苗木立枯病病株图8-58 柑橘苗木立枯病症状药剂防治。幼苗发病初期，立即用1%硫酸亚铁或70%敌克松500倍液施于苗木根颈部。如苗床较干，则配成液剂施用于苗木根颈部.施用之后随即用清水喷洗苗木，以防茎、叶部分受药害。如发现茎、叶腐烂型立枯病，要立即喷波尔多液［硫酸铜、石灰、水的比例为1∶1：（120～170）］，每隔10～15天喷1次。25%吡唑醚菌酯乳油2000倍液有良好的治疗作用，发病前用50%啶酰菌胺水分散粒剂1500倍液可起到预防作用。发病期可用80%代森锰锌600倍液、30%氧氯化铜悬浮剂300～400倍液。每5天喷1次，连续喷3次。该病主要为害柑橘幼苗的嫩叶、顶芽和嫩梢。苗木顶芽或嫩梢感病后，最初出现水渍状小斑点，后变成暗绿色或褐色病斑，天气潮湿时，病斑向四周扩展，直至嫩梢基部，使整条新梢或整株幼苗变为褐色而枯死。在潮湿天气下，新鲜的病部出现散生较薄的白色霉层，此为病原菌的孢子囊、孢子囊梗和菌丝体。根部在苗木枯死前无明显腐烂症状(图8-59、图8-60)。图8-59 柑橘苗疫病症状（1）图8-60 柑橘苗疫病症状（2）（1）选择抗病砧木。选择红橘、枳壳等对疫病抗性较强的实生苗作砧木。（2）苗圃地选择。选择地势高、土质疏松、排灌方便的新地或作高畦栽培。（3）加强管理。育苗前整地要精细，施足腐熟的有机肥；苗期雨天要注意排水，及时挖除病苗或剪除零星受害叶片，清除病源中心，并喷药控制蔓延。（4）药剂防治。发现少数病苗时，及时剪除病部，将其集中烧毁并立即喷施农药1次，以后每隔10～14天再喷1次，共喷2～3次。有效的药剂有58%瑞毒霉锰锌可湿性粉剂600～800倍液、64%恶霜·锰锌可湿性粉剂500～600倍液、90%三乙膦酸铝可湿性粉剂500倍液、0.5%波尔多液、80%代森锰锌可湿性粉剂600倍液、50%烯酰吗啉可湿性粉剂1500倍液、50%啶酰菌胺水分散粒剂1500倍液等。根结线虫侵害果树根部，使根组织过度生长，形成大小不等的根瘤。根瘤大多数发生在细根上，感染严重时又会产生次生根瘤，并出现大量小根，根系盘结成须根团。新生根瘤乳白色，后期变成黄褐色至黑褐色，腐烂坏死。果树受害后，枝短梢弱，叶片变小，生长衰退，成年树开花多，结果少。受害严重时，叶色发黄，叶缘卷曲，似缺水状，最后可造成叶片干枯脱落，直至全株凋萎死亡(图8-61、图8-62)。图8-61 柑橘根结线虫为害 根系症状（1）图8-62 柑橘根结线虫为害根 系症状（2）（1）加强苗木检疫。外来苗木必须经过检疫，防止病苗传入无病区。（2）培育无病苗木。选用无病原的土地育苗。（3）苗木处理。对带病苗木用48℃热水浸根15min，可杀死病原线虫。（4）药剂防治。成年病树每株用1.5%阿维菌素颗粒剂150～200g或10%噻唑磷颗粒剂150～200g，在树盘外围开环状沟施入，也可每株用10.5%阿维·噻唑磷颗粒剂150～200g树盘撒施或2亿活孢子/g淡紫拟青霉粉剂25～33g在树盘外围开环状沟施入。柑橘根线虫侵害根部，受害根部没有明显的根瘤，须根比正常根粗大，表面不平，严重时小根粗短、畸形，易碎裂，无光泽。由于柑橘根线虫的穿刺，组织坏死呈黑色。严重受害时，可使皮层和中柱分离。柑橘受害后，叶片逐渐发黄或呈青铜色，严重受害时造成叶片脱落，小枝枯萎。有些病树整株落叶，有些病树仅1/2或1～2个枝条落叶，病树一般不枯死(图8-63、图8-64)。图8-63 根线虫病（1）图8-64 根线虫病（2）同柑橘根结线虫病防治方法。为害树干时，初期表现为黄绿色小点，后逐渐扩大成绿色斑块，直至包被整个树干。为害叶片时，先在中脉、叶尖和边缘处出现黄色小点，黄色小点逐步连成一片，最后形成一层绿色苔斑，俗称“青苔”。为害果实时，一般在果蒂附近先出现黄色小点，后逐步向其他部位蔓延，最后在果实表面形成一层绿色污斑，生产上常称其为“绿斑病”。该病主要在树冠的中下部发生，严重时整株受害，对树体光合作用及果实外观和品质造成严重影响(图8-65、图8-66)。图8-65 柑橘虚幻球藻为害的枝干图8-66 柑橘虚幻球藻为害的果实（1）栽培管理。加强果园管理，增强树势；注意果园排水，降低果园湿度；合理修剪，增强果园通风透光性，以减轻发病程度。（2）药剂防治。发病果园在冬季清园时，用45%代森铵水剂300倍液喷施；在柑橘生长季节，发病果园用80%乙蒜素乳油1000～1500倍液或50%氯溴异氰尿酸可溶性粉剂600～800倍液均匀喷雾，每隔10天左右喷1次，连喷2次。在贮藏期间，果实多从果蒂或近果蒂处开始发病，初期呈浅褐色水渍状，之后扩大，病部边缘呈波纹状，深褐色。由于果实内部较果皮腐烂快，当病斑扩大到果皮的1/3～2/3时，果心已经全部腐烂。病部表面大多会散生黑褐色的小粒点(图8-67、图8-68)。图8-67 褐色蒂腐病病果环绕果蒂呈水渍状图8-68 褐色蒂腐病病果内部白色菌丝（1）加强栽培管理，增强树势。（2）精细采收，尽量减少和避免机械损伤。（3）采果前2～4周，用50～100mg/L的2，4-D溶液喷湿果实。（4）果实采摘后3天内，用70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1000倍液，或25%咪鲜胺乳油500～1000倍液等浸果1～2min，晾干后贮藏。（5）贮藏前剔除病果、伤果。（6）在5 ℃左右的温度条件下贮藏果实。果实发病多自蒂部或近蒂部伤口开始。病部呈褐色病斑，之后蔓延全果。病斑可随瓤瓣排列而蔓延，使果面形成深褐色带纹，由蒂部直达脐部。病果表面常溢出琥珀色黏液。在高湿条件下，病果表面长出气生菌丝，起初呈污灰色，后渐变成淡黑色；在干燥条件下，则成黑色僵果。感病果实内部腐烂，并长出污灰色菌丝，瓤瓣、果皮最后变黑色。在菌丝中也产生黑色点粒(图8-69、图8-70)。图8-69 黑腐病病果心腐型图8-70 黑腐病病果内部症状枝干发病常从小枝顶端开始，迅速向下蔓延，或在小枝与树干的其他部位发病。病部红褐色，树皮开裂、流胶，严重时引起枝干枯死，病部密生黑色小粒点。参考柑橘褐色蒂腐病的防治方法。