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报告一 甜瓜生物学特性
出版时间:2015甜瓜根系较发达,主根入土深度可达60厘米左右,密集根群分布在15~28厘米的范围内,因而具有一定的耐旱能力。甜瓜根系生长较快,易于木栓化,故适宜护根育苗(营养钵育苗)和护根栽培。甜瓜的茎中空,有刺毛,节间较短,侧芽容易萌发,分枝性较强。甜瓜虽主蔓各节都能发生子蔓,但其强健程度、结实早晚各不相同,生产上子蔓、孙蔓选留数量,摘心早晚,因品种、种植方式、密度、整枝方式及留瓜数而定。叶近圆形或肾形,叶柄被端有次毛。叶的寿命及功能受本身营养状况的影响,水肥条件好、日照充足、营养面积合理,叶的寿命长;反之易早衰。花冠黄色,雄花丛生,雌花多为单生,雌雄同株,雌花子房下位。雄花在主蔓上第二至五节开始发生,大多数品种主蔓上雌花发生较晚,而侧蔓1~2节就着生雌花。在栽培学上可以摘心以促进侧蔓的形成,提早结果。开花、授粉受环境条件的影响较大,在条件不适宜的情况下,授粉受精不良,造成落花落果,生产上多使用生长激素以提高坐果率。果实的形状、大小、色泽以品种而异,一般500克左右,大的1000克以上。果实的表面光滑或有沟棱,果肉厚2厘米左右,颜色有白、绿、桔黄三类。在各种环境条件中,土壤水分对果实的发育影响最大,所以果实形成期,科学合理的浇水十分重要。种子比黄瓜种子小,千粒重一般15~20克。播种前的温汤浸种、药剂处理等可较好的预防苗期病害。甜瓜植株一生大致分为三个时期:苗期、营养器官生长期和结果期,各时期长短因品种和栽培方式略有差异。厚皮甜瓜果实发育所需时间较薄皮甜瓜长,整个生长期前者需110天以上,后者需80~100天。1 苗期 种子萌发播种,到5片真叶形成,约35天。2 营养器官生长期 5片真叶到第一结实花开放,约20天。3 结果期 第一结实花开放到果实成熟,55~65天。此期又可分为开花结果期、果实膨大期、果实成熟期。4 开花结果期 第一结实花开放到果实开始膨大,约15天。5 果实膨大期 果实开始膨大到停止膨大,约25天。6 果实成熟期 果实停止膨大到果实成熟,15~25天。1 温度 喜温,整个发育期25~35℃。发芽期:厚皮类型25~35℃,薄皮类型25~30℃,15℃以下不发芽。幼苗生长期:20~25℃。果实发育期:30~35℃,13℃以下生长停滞。要求较大的昼夜温差,果实发育期应达到12~15℃。2 光照 喜光,光照弱影响产量品质。生长期要求10~12小时的光照时间。日照时数短,生长瘦弱,光合产物减少,坐果困难,果实生长缓慢,含糖风味降低。日照时间达14~15小时,侧蔓发生早,茎蔓生长快,开花坐果提前,果实生长迅速,单果重增加,品质优良。所以保护地秋冬茬栽培不如冬春茬品质好。3 水分 不同生育期需土壤水分不同。发芽期:需水量高。开花坐果期60%~70%,适中;果实膨大期80%~85%;果实成熟期55%。空气湿度:要求较低的空气湿度,适宜空气湿度50%~60%。土壤湿度适宜时,可忍受30%~40%甚至更低的空气湿度。空气湿度长期在80%以上,影响光合等代谢活动,容易诱发病害。4 土壤及矿物质营养 根系发达,吸收能力强,对土壤要求不严格。厚皮甜瓜根系更强大,具有一定抗旱力,耐盐碱。土层深厚,有机质丰富,肥沃通气良好的壤土或沙质壤土,高产优质。 -
报告六、有害生物综合防控
出版时间:2015有害生物综合防控技术体系的构架详见下图:有害生物综合防控技术体系麦田杂草综合防治主要采取以下措施:(1)农业措施:结合田间农事操作,有目的地创造有利于小麦生长而不利于杂草发生的条件。①清选种子:雀麦等杂草种子往往随小麦收获混杂在麦种中。因此对小麦进行机械筛选或清水选种,不仅能够清除麦种中的病粒、杂粒,而且也会达到筛除杂草种子,杜绝杂草再次进入麦田的目的。②轮作倒茬:看麦娘、野燕麦等发生严重的地块可以与油菜、豌豆等作物轮作。当这些作物成熟时杂草种子一般尚未成熟,及时收割和耕翻整地就会有效减轻第二年杂草发生的数量。③合理密植:合理密植能够降低田间空隙度,从而减少杂草生长空间。(2)人工拔除:年前苗期与年后返青期进行中耕,可以有效清除杂草。对于雀麦等发生严重的麦田,应在杂草开花结籽前进行2次人工拔除。(3)化学除草:根据杂草种类与发生程度,选用合适药剂,在适当时期进行化学除草。小麦白粉病综合防治措施包括:(1)选用抗病、丰产优质品种;(2)合理密植,控制群体密度,避免形成通风不利的郁闭环境;(3)控制氮肥,增施磷钾肥;(4)适当药剂防治。当田间病株率达50%时或在孕穗末,植株上三叶病叶率达10%~20%时,开展药剂防治。药剂防治可选用三唑酮、丙环唑等。花生病虫害综合防治,必须在选用优良品种、实行平衡施肥、适期适深播种、合理密植基础上,抓好一拌三喷。药剂拌种:用30毫升60%吡虫啉悬浮种衣剂和10毫升75%萎·双可湿性粉剂与12.5千克花生种子搅拌均匀,晾干后播种,可防治苗期病虫,促一次播种、一次全苗。生长期喷雾:花生生长期根据田间病虫害发生特点,一般要喷药3次。第一次喷雾:花生齐苗后,亩用寡雄腐霉5克与0.136%赤·吲乙·芸苔可湿性粉剂3克,对水30千克喷雾,可防治花生根腐病、茎腐病、病毒病,促苗壮。第二次喷雾:花生初花期,亩用寡雄腐霉5克、天达2116(花生豆类专用)50克和22%噻虫·高氯氟微囊悬浮—悬浮剂10毫升,对水30千克喷雾,可防治花生网斑病、病毒病、棉铃虫、蚜虫,使植株健壮、抗倒伏。第三次喷雾:花生荚果、膨大期,亩用寡雄腐霉10克,加天达2116(花生豆类专用)75克,对水50千克喷雾,可防治花生叶斑病和后期早衰。花生综合防治辣椒疫病应采取以下措施:(1)选用无病新土育苗或床上进行消毒。(2)加强田间管理。注意通风透光,防止湿度过大。选择晴天的上午浇水,浇水后提温降湿,避免高温高湿。及时拔除病株并清除出棚室集中处理。(3)药剂防治。定植后可喷80%代森锰锌可湿性粉剂加以保护,15天一次。发病初期可喷50%烯酰吗啉可湿性粉剂等药剂进行防治。综合防治保护地蔬菜灰霉病应采取以下措施:(1)生产中及时清除病原菌是防治灰霉病的有效措施,操作时要身带塑料袋,发现有病果、病花时,立即用塑料袋套上后再摘除,并封闭袋口,带出室外深埋,严防病菌随风或农事操作传播。(2)栽培西葫芦、茄子时,坐果后须及时摘除开败的花冠,可以有效地防治灰霉病发生。坐果后及时摘除花冠(3)在化学防治上可选用啶酰菌胺、嘧霉胺或腐霉利等药剂,低温等恶劣环境条件下可与天达2116一起喷施,增强植株抗逆性。特别注意要轮换用药,以防止产生抗药性,提高防治效果。综合防治油菜菌核病应采取以下措施:(1)选用抗(耐)性品种;(2)减少初侵染源:包括种子处理、病株残体处理、深耕培土、土壤消毒等;(3)改善生态环境、抑制病害扩展蔓延:可以采取重施茎苗肥、早施茎苔肥、开沟防浸、摘除老叶病叶、调整播栽期等;(4)药剂防治:可以选用25%咪酰胺乳油、50%多菌灵可湿性粉剂、50%腐霉利可湿性粉剂等进行防治。甜菜夜蛾主要为害白菜、萝卜、甘蓝、菜花等多种蔬菜。一般7—8月为严重为害期。防治甜菜夜蛾应采取以下综合防控措施:(1)农耕灭蛹:春季除草灭低龄幼虫,减少后期虫源。(2)灯光诱蛾:大面积生产可以利用甜菜夜蛾的趋光性,利用黑光灯诱杀成虫,每盏灯可以防治30亩地。根据诱蛾情况,判断发蛾高峰,推算产卵高峰,确定防治1~2龄幼虫的关键时期。(3)性诱剂诱杀甜菜夜蛾:在蔬菜生长点上方10~20厘米处,每亩装5~6个性诱捕器,可以有效诱杀甜菜夜蛾成虫。性诱剂诱杀甜菜夜蛾(4)药剂防治:在甜菜夜蛾卵孵化盛期至1~2龄幼虫高峰期,可以用5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐水分散粒剂等药剂对水喷雾防治。大蒜的主要病害有紫斑病、叶枯病、锈病等。其综合防治技术是:(1)精选蒜种:尽可能采用脱毒蒜、抗病蒜、无病虫健壮蒜种,播前精选蒜种,并进行药剂拌种,可用20毫升600克/升吡虫啉悬浮种衣剂对水100毫升拌7.5千克蒜种。(2)药剂防治:①大蒜紫斑病,可在发病初期用1×106孢子/克寡雄腐霉2.5克或50%啶酰菌胺可湿性粉剂10克,对水15千克后,再加入25毫升天达2116进行喷雾防控,每10~15天1次,连续喷洒2次;②大蒜叶枯病,可在发病初期用25%嘧菌酯可湿性粉剂1500倍液、10%苯醚甲环唑水分散粒剂1500倍、寡雄腐霉6000倍液;③大蒜锈病,可在发病初期用三唑酮乳油1500倍液、10%苯醚甲环唑水分散粒剂1500倍、80%金乙嘧·晴菌唑可湿性粉剂2500倍、40%氟硅唑乳油4000倍液喷雾防治,每7~10天1次,连喷2~3次。综合防治黄瓜霜霉病应采取以下措施:(1)选用抗病新品种。如津春2号、津杂2-4号、中农12或中农16等。(2)加强栽培管理。采用高垄地膜覆盖技术,膜下浇水,减少浇水次数。加强通风,降低空气湿度。增施磷钾肥,提高植株的抗病能力。结瓜后及时摘掉下部老黄叶。根外喷施0.2%磷酸二氢钾,提高叶片生理抗病能力。(3)高温闷棚。选择晴天上午,关闭大棚温室门窗,使棚室内的温度升到45℃,最高不超过48℃。持续2小时后适当通风,使棚室温度逐渐下降,恢复正常温度。注意闭棚前一天必须浇水。(4)药剂防治。对于保护地黄瓜,发病初期可选用20%百菌清烟剂、80%代森锰锌可湿性粉剂或寡雄腐霉等药剂进行防治。对于露地栽培黄瓜,可选用50%烯酰吗啉水分散粒剂、65%代森锰锌水分散粒剂、70%丙森锌可湿性粉剂等药剂进行防治。综合防治黄瓜黄化病应采取以下措施:(1)选择化瓜率低的品种进行种植。(2)加强田间管理,控制夜间温度,不要过高,以减少呼吸消耗。及时采收下部瓜,避免与上部瓜争夺养分,引起上部瓜化瓜。(3)多施底肥有机肥,及时中耕松土,必要时轻浇水后再追肥松土,提高地温,促进根系生长发育。(4)因地上部分营养不足出现化瓜,还可适当喷施叶面肥。保护地黄瓜综合防控保护地黄瓜菌核病应采取以下措施:(1)播种前进行种子消毒,50℃温水浸种10分钟。(2)加强田间管理,整地前彻底清除植株病残体,深翻土壤,深度要求达到25厘米,将菌核埋入深层土壤。重病棚室,可采用高温闷棚方法处理土壤。(3)棚室内出现子囊盘时,可采用药剂喷雾法防治,如50%啶酰菌胺水分散粒剂、50%腐霉·多菌灵可湿性粉剂、25%多菌灵可湿性粉剂、33%多·酮可湿性粉剂、255克/升异菌脲悬浮剂和25%咪鲜胺乳油等。综合防治草莓红蜘蛛应采取以下措施:(1)农业措施。清除田间杂草,加强水肥管理,使植株生长健壮,可减轻为害。(2)生物防治。在红蜘蛛虫口密度高峰期,释放捕食螨。(3)化学防治。乙螨唑5000~7000倍,1.8%阿维菌素乳油3000倍、噻螨酮3000~5000倍、克螨特2000~3000倍液防治,隔7天1次,交替使用,连续喷3次。综合防治大棚草莓炭疽病应采取以下措施:(1)选用抗病品种。(2)栽培措施。避免连作,尽可能实施轮作。合理密植,不偏施氮肥,增施有机肥和磷、钾肥,培育健壮植株,提高植株抗病力。白天天气晴时,加大通风力度,降低大棚内的温、湿度。注意清园。及时摘除病叶、病茎、枯老叶等带病残体,并集中烧毁,减少传播。(3)化学防治。在大棚发病初期,防治可用50%咪鲜胺可湿性粉剂700倍液、40%褔美锌可湿性粉剂500倍液、80%福·福锌800倍液。以上药剂交替使用,同时喷药时要均匀,药液量要喷足,棚架上最好也要喷到,以提高防治效果。综合防控草莓蚜虫可采取以下措施:(1)农业措施。及时摘除草莓老叶、病叶,消除温室周边杂草;在通风位置设置防虫网。(2)物理防治。在温室内设黄板诱杀。从定植期开始使用,每栋温室用10~20块,挂置高度略高于草莓植株10~20厘米,诱杀有翅蚜虫,定期更换。(3)化学防治。10%吡虫啉可湿性粉剂1000倍,1.8%阿维菌素乳油3000倍,5%啶虫脒乳油1500倍药剂等交替使用,混合使用时掌握好浓度,注意农药安全间隔期,以免产生抗药性和药害。注意:喷雾防治,要避开草莓开花期,保护好温室内蜜蜂。综合防治草莓白粉病可采取以下措施:(1)加强温湿度控制,采用地膜覆盖加滴灌技术,覆膜时要求垄、沟全覆到,以最大限度降低温室中的空气湿度,防止早上棚内起雾及棚膜顶部结露;中午温度高时适时通风,阴天也要坚持适当通风。(2)加强田间管理,勤摘老叶、病叶和病果,当天的病残体要及时清出温室,减少侵染源,后期一定要及时摘除过多叶和小果、病果,可以有效抑制病害的高发;注重水肥管理,适期、适量施氮肥,增施磷钾肥,可以有效降低白粉病的发生。(3)药剂防治,药剂防治是一个必不可少的重要手段,但要注重提前预防,不要发病才防,要交替使用药剂,防止产生抗药性。进入开花期,是白粉病最易侵染的时期,叶面喷施药剂易造成果实畸形,所以在开花期尽可能不使用喷雾剂,以硫黄熏蒸为主。采收前病害高发期可每隔7~14天喷1次保护性药剂,交替使用防止产生抗药性。此外,在前期预防白粉病时,也可以使用百菌清烟熏剂熏棚。综合防治温室白粉虱可采取以下措施:(1)农业防治。①清洁田园。摘除老叶和采收后,尽快清理植株残体,因地制宜无害处理;及时清除蔬菜园区尤其是棚室周边的杂草。②培育无虫苗。育苗时要把苗床和生产温室分开;育苗前应进行棚室表面消毒;育苗期间棚内悬挂少量黄板监测白粉虱,及时防治,风口用40目防虫网隔离;定植时确保移栽苗无虫。(2)物理防治。①覆盖防虫网。在种植棚用30~40目防虫网封闭通风口或设立隔离门。防虫网应定期检查,破损及时修补,防虫门应做好密封。有条件可用两道防虫门设置一个缓冲间,中间悬挂3~4块黄板,效果更佳。②黄板或黄盆诱杀。发生初期使用效果好,每亩放置25厘米×40厘米黄板20~25块,板下端高于植株顶部5厘米左右,视粘虫量及时更换;也可用黄盆盛清水,内放一定量的洗衣粉,放置高度略低于植株生长点,每亩放置直径30厘米左右黄盆15个左右,需及时清除表面漂浮成虫和换水。(3)生物防治。慎用广谱杀虫剂,保护和利用温室白粉虱的天敌,包括草蛉、东亚小花蝽和丽蚜小蜂等。低密度发生时,可通过人工释放丽蚜小蜂防治。成虫在0.5头/株以下时,丽蚜小蜂释放密度为15头/株,发生量大时适当增加释放密度,每隔10天左右放1次,视情况连放3~4次,利于控制害虫种群增长。(4)化学防治。温室白粉虱在田间点片发生时即需着手防治。选择合适的化学药剂进行防治。综合防治瓜绢螟应采取以下措施:(1)及时清理田园,消灭藏匿于枯蔓落叶的虫蛹。(2)幼虫发生初期及时摘除卷叶,消灭部分幼虫。(3)药剂防治。在幼虫发生初期及时进行药剂防治。可选用19%溴氰虫酰胺悬浮剂喷雾防治。由于斑潜蝇虫体微小。繁殖能力强,成虫飞行,药剂防治极易产生抗性。同时,田间世代重叠明显,蛹粒可掉落在土壤表层。因此要有效控制斑潜蝇为害,必须采取多种方法综合防治。(1)收获完毕后,及时清洁田间病残体。实施与斑潜蝇非喜食蔬菜轮作。夏季深翻土壤高温闷棚。(2)斑潜蝇轻发区加强调查,发现受害叶片及时摘除,并悬挂黄色粘虫黄板,诱杀成虫。(3)药剂防治需注意交替使用不同药剂,防止害虫产生抗药性。综合防治保护地番茄灰霉病应采取以下措施:(1)选用抗病品种,播种前做好种子消毒工作。(2)清洁田园。整地前及时清除病残体,减少菌源;定植前进行高温闷棚,或采用熏蒸法对棚室表面进行消毒,如10%腐霉利烟剂;作物生长期内及时清除病花病果,避免病菌扩散再次侵染。(3)加强田间管理。遇连续阴雨天或雾霾天气,切忌浇水、喷药,防止湿度再度增加,在保证棚内温度同时适时通风。在番茄坐果后,应及时摘除柱头,防止侵染果实。(4)药剂防治。应重视番茄花期和浇催果水前的防治,针对性地喷花和喷果保护果实不受侵害,选择适宜的农药进行防治。综合防治番茄叶霉病应采取以下措施:(1)选用抗病品种,播种前进行温汤浸种,对种子进行消毒。(2)合理轮作,重病棚室选择与非茄科类蔬菜进行2~3年轮作,减少田间菌源。(3)加强棚室管理,适当控制浇水,浇水后及时通风,避免长时间闷棚。及时整枝打杈、植株下部老黄叶片尽快摘除,有利于通风透光。使用配方肥,避免氮肥过多,适当增加磷、钾肥。(4)发病初期选择适宜的农药进行防治。综合防治芹菜叶枯病应采取以下措施:(1)选用无病种子,用无病株留种。播种前需进行种子处理,可采用温汤浸种。(2)加强田间管理,施足底肥,增加植株抗病力。合理种植,掌握适当种植密度。发病初期,及时清除病株和病叶。(3)保护地种植应加强通风,降低空气湿度,禁止大水漫灌。(4)选择适宜的农药进行防治。综合防治芹菜根结线虫应采取以下措施:(1)彻底清洁田园,在前茬拉秧后仔细清除植株残根,带出田园集中销毁。(2)轮作换茬,实行与葱、蒜、韭菜、辣椒等抗病、耐病蔬菜轮作,可减少损失,降低土壤种线虫数量。(3)客土育苗,选择未发生过根结线虫的地块育苗,防治根结线虫通过土壤传播,可采取穴盘育苗,缩短移栽缓苗期。(4)棚内土壤高温消毒。根结线虫喜温暖干燥的环境,最适生长发育的土温为25~30℃,土壤含水量40%左右。根结线虫在土温10℃以下时,幼虫停止活动,55℃时,经10分钟即可死亡。在盛夏,深翻土壤,挖沟起垄,有条件可将生石灰施入土壤,灌水后盖严地膜,密封棚室10~15天,利用夏季强光高温有效杀灭根结线虫。北方冬季可进行表土层换土,经严冬可冻死大量虫卵。(5)药剂处理,选用15%阿维·吡虫啉微囊悬浮剂沟施,或使用10%噻唑膦颗粒剂土壤撒施,可达控制效果。综合防治芹菜病毒病可采取以下措施:(1)选用抗病品种,适时播种,避开蚜虫高发期,防治苗期染病。重病苗及时剔除,减少感染源。(2)加强田间管理,合理施肥,高温季节及时浇水,注意防旱排涝,增强植株抗耐病能力。(3)芹菜生长期间做好蚜虫、粉虱防治,悬挂黄板诱杀,及时添加防虫网,减少病毒传播。(4)药剂防治,选择适宜的农药每10天左右喷药一次,连续喷施2~3次。综合防治芹菜叶斑病应采取以下措施:(1)选用无病种子,用无病株留种。播种前需进行种子处理,用48~50℃温水浸种15~20分钟,边浸边搅拌,其后用凉水冷却,晾干后播种。根据气候特点和需要,因地制宜选用抗病、耐病品种。(2)清洁田园。收获后彻底清除田间病残叶,发病初期及时清除病叶、病茎等,带到田外集中深埋处理,减收菌源。实行2年以上轮作,可大大减少病源数量。(3)加强田间管理。增施底肥,适时追肥,雨后及时排水。保护地注意通风排湿,减少夜间结露,禁止大水漫灌。(4)药剂防治。选择适宜的农药进行防治。综合防治保护地芹菜蚜虫可采取以下措施:(1)种植前,在田间间隔铺设银灰色膜或悬挂银灰色膜条驱避蚜虫。(2)悬挂黄板诱杀有翅蚜。(3)天敌防治,可在保护地内释放瓢虫、草蛉等食蚜昆虫防治蚜虫。(4)药剂防治,由于蚜虫世代周期短,繁殖快,蔓延迅速,多聚集于菜心或叶背皱缩隐蔽处,应选用兼具触杀、内吸、熏蒸三重作用的药剂。露地蔬菜病虫害综合治理的重点在播种育苗阶段,其后主要是加强管理、适期用药并严格执行用药安全间隔期。(1)播种育苗阶段。①轮作:与适宜作物隔年轮作,可以有效控制多种病虫害。②选用抗病、耐病品种:此项措施对大多数病害来说,是一种十分有效的防治措施。③苗床选择与消毒:育苗一般要选择新的苗床,老苗床必须换用无病新土或进行药剂处理。④种子处理:蔬菜通常用种数量较少,可以采取温汤浸种、干热处理、酸处理、碱处理等。⑤嫁接防病:一般瓜类、茄果类采取这种措施。(2)生长期。①加强栽培管理:定植前喷药,带药移栽,防止苗期带病虫进入田间。施足基肥,多施腐熟的有机肥,增施磷肥、钾肥,控制氮肥用量,以防旺长;深耕减少菌源;合理密植;及时摘除病果病叶,集中销毁或深埋;收获后彻底消除病残体等。②病虫害防治:一般用药处理要掌握防治适期,注意保护天敌,严禁使用高毒高残留农药防治病虫害,并严格遵守用药间隔期。保护地蔬菜细菌性病害几乎都能够通过土壤进行传播,防治上可按照防治土传病害的综合措施进行。长期以来在对细菌性病害化学防治上,多用农用链霉素、氢氧化铜、甲霜铜等。由于长时期使用此类药品,多数细菌性病害已经对其产生了很强的抗药性,导致再用这类药品防治效果差,难以控制病菌为害与发展。因此防治细菌性病害应该多选用喹啉铜、络氨铜等新型农药,并注意不同类农药交替使用,以确保其防治效果。综合防控桃园主要病虫害应采取以下措施:(1)桃炭疽病、桃细菌性穿孔病。剪除树上的枯枝、僵果和残桩,或在芽萌动至开花前后的初次发病的病枝,消灭越冬病源、防止引起再次侵染;加强排水,增施磷肥、钾肥,增强树势,并避免留枝过密及过长;桃芽萌动时喷洒1~2次倍波尔多液(展叶后禁用)。(2)桃根癌病。加强土壤管理,合理施肥,改良土壤,增强树势;加强果园检查,对可疑病株挖开表土,发现病后用刀刮除或彻底刮除并用KG84浇根消毒,对发生严重植株挖出烧毁。(3)桑白蚧。萌芽前喷洒1~2次石硫合剂,或用100倍机油乳剂,消灭越冬雌成虫。虫体密集成片时,喷药前可用硬毛刷刷除再行喷药,以利药液渗透。综合防治樱桃病虫害应采取以下措施:(1)农业防治。培育健壮无病毒苗木;合理密植间作;加强管理,保持树体健壮,增强抵御病虫害的能力。(2)生物防治。保护和利用天敌;利用昆虫激素防治害虫;利用真菌、细菌、放线菌、病毒、线虫等有益微生物或其代谢产物防治果树病虫。(3)物理防治。利用昆虫的趋光性诱杀;害虫越冬前,诱集害虫并集中消灭;冬季树干涂白,可防日烧、冻害,也可阻止天牛等害虫产卵为害。(4)化学防治。根据病虫害发生情况,及时采取化学农药进行防治。综合防治樱桃褐腐病应采取以下措施:(1)清洁果园,将落叶、落果清扫烧毁;(2)合理修剪,使树冠具有良好的通风透光条件;(3)发芽前喷1次石硫合剂;(4)生长季每隔10~15天喷1次药,共喷4~6次,选择适宜的农药进行防治。对葡萄病虫害可采取农业防治、物理防治和化学防治措施。(1)农业防治。在休眠期结合冬季修剪,剪除并烧毁各种病虫枝、叶、干枯果穗,清除地面落叶、残枝、残果,剥老皮、消灭越冬虫卵和病菌。及时绑蔓摘心和疏除副梢,创造良好的通风透光条件。接近地面的果穗,可用绳子适当高拉,以防病虫为害。结合施基肥深翻,可以将土壤表层的害虫和病菌埋入施肥沟中,以减少病虫来源。并将葡萄植株根部附近土中的虫蛹、虫茧和幼虫挖出来,集中杀死。病害发生前对果穗套袋能有效阻止病菌与果穗的接触,是防治白腐病、黑痘病、炭疽病等病害的有效办法。(2)物理防治。利用果树病原、害虫对温度、光谱、声响等特异性、反应和耐受能力,杀死或驱避有害生物。在害虫的成虫盛发期,利用频振式杀虫灯诱杀透翅蛾、吸果夜蛾等害虫的成虫,减少果园卵量,这样既能消灭害虫,又能减少化学农药对葡萄果实的污染。小面积果园还可设置糖醋液诱盆诱杀吸果夜蛾等害虫。(3)化学防治。防治重点包括黑痘病、白粉病、炭疽病、透翅蛾;浆果着色至完熟期主要防治炭疽病、白粉病、白腐病。不同时期的病害选用对症化学药剂,适时防治。在施药时,交替使用农药品种,避免病菌产生抗药性。综合防治葡萄霜霉病可采取农业防治和化学防治措施。(1)农业防治。注意葡萄园排水,降低果园湿度。及时摘心抹芽除副梢,改善果园通风透光条件,均可减少霜霉病的发生。(2)化学防治。以防为主,根据需要选择适宜的农药进行防治。综合防治梨病虫害可采取物理措施和化学措施。(1)物理措施。①彻底清园,减少越冬病虫源。将留在树上的无用枝条清除(特别是病枝、枯枝);刮掉老皮,杀灭越冬害虫;清除园内杂草,与修剪下的枯枝、烂叶集中烧毁,并将草木灰返园能降低园内病虫基数。②搞好果园水肥管理。尤其按照开花前需水多、花期需水少、果实膨大期需水多、果实成熟期需水少的原则,合理排灌,以增强树势,提高对病虫害的抵抗能力。③改善通风透光条件。根据品种特性和土壤状况,在修剪时有选择性地留枝。在生长季节多摘心,及时抹除多余的枝梢,使树冠通风透光,以减少病虫害。④及时除草,降低果园湿度。梨园内若杂草太多,湿度偏高,会使害虫基数提高,并引发多种病害,故要及时除草,但尽量少用除草剂。⑤套袋。套袋能预防梨病虫为害,并能提高梨果外观品质,防止日灼,减少环境污染,降低用药量及农药残留。套袋时间在5月中旬至6月上旬,套前必须喷1次以水剂和粉剂为主的农药,忌喷乳剂等容易诱发锈斑的农药,干后即套。套袋时应撑开袋体,幼果在袋中央部,避免袋纸与果面接触,袋口扎紧,勿使漏光,并使袋与果位于叶的下面。套袋(2)化学措施。①休眠期喷化学药剂。冬季梨树进入休眠期,彻底清园后,全园喷3~5波美度石硫合剂等高效杀虫杀菌剂1次,3月初萌芽前再喷1次,可有效杀灭病菌害虫,降低病虫基数。②生长期喷保护剂。对生长期的病虫害,除了有针对性地防治外,还要求定时、定量用药:除了对梨锈病在3月中旬至4月中旬用2%粉锈宁1000倍液防治外,其余的治虫药剂根据情况选择适宜的药剂进行防治。综合防治苹果病虫害可采取物理防治和化学防治措施。(1)物理防治。①加强病虫害预测预报,根据病虫发生的规律,结合苹果的物候、气象、天敌等进行全面科学分析,预测病虫害未来发展的态势,为及时防治病虫害提供最佳时期和方法。②土壤管理,深翻改土,增施有机肥,增强树势,增加树体抗性,结合深翻改土,深埋枯枝落叶,减轻食心虫、早期落叶病越冬基数,减轻病虫害发生。③疏花疏果,合理负载。结合疏花疏果摘除病果、病叶、病梢等,合理负载。④冬、夏修剪:通过合理修剪,改善通风透光条件,剪除病虫枝梢、病僵果等。⑤清园:刮除腐烂病病斑,刮除老翘皮,消除病虫害越冬场所,彻底清扫枯枝落叶,对减轻果园多种病虫为害有很好的效果。(2)化学防治。①疏果定果套袋前的病虫害防治。可于5月中旬左右选择适宜的防治药剂。②套袋后的病虫害防治。果实套袋前后是病虫害防治的关键时期。病害主要有褐斑病、斑点落叶病、轮纹病、炭疽病等;害虫主要有桃小食心虫、蚜虫、潜叶蛾、害螨等。根据病虫发生情况合理选择化学农药防治,一般在6月下旬对套袋苹果进行第二次喷药防治。 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报告六 田间管理
出版时间:2015定植到缓苗期间,温度可控制高一些,以利于迅速缓苗。白天可达32~35℃。尤其是早春或深秋定植时,由于外界温度较低,温室一般不通风。室内湿度过大时,尤其低温弱光天气时,选择中午时间适当放风,潮气放出后,及时封闭棚膜。缓苗后(一般定植后7~10天),白天温度控制在20~25℃,夜间15~18℃。夏季定植的,由于7~8月温度高,将温度降到生长适温有一定难度,应尽量放大风口,控制浇水,以免由于高温高湿而引起的植株疯长现象。随着植株的生长,进入开花结果期,这时应保持白天温度20~30℃,夜间15℃左右。低于15℃引起落花落果,高于30℃影响养分的积累。条件不适宜时,应增加一些辅助栽培措施,如化学调控、“两网一膜”等技术。定植时浇足定植水,滴灌35立方米/亩左右,畦灌比滴灌多用水1/3~1/2。7~10天后浇一次缓苗水。之后,原则上不再浇水,直到第一穗果核桃大小时再开始浇水。此期如果水分过多,易引起植株徒长,从而影响以后的开花结果。主要栽培措施是中耕,以促使根系向土壤深层发展。特殊情况时,若土壤、植株表现干旱,尤其是采取滴灌措施时,前期水分不是很大,这时确需浇水时,可补一小水。另外,因品种特性各异,有些品种不需要控苗,可根据需要补水。当第三花序开花时,正是第一果穗膨大期(核桃大小),这时开始浇水,水要充足,一般滴灌25~30立方米/亩,畦灌(明水)40~50立方米/亩。水量以渗透土层15~20厘米为宜。充足的水分对茎叶的生长和果实的发育均有很好的促进作用。进入结果期,不同种植模式由于温度的原因,水分管理有所区别,冬春茬栽培的番茄,此时室内外温度适宜,10~12天浇1次水,以保证果实发育所需。进入盛果期,需水量逐渐加大,5~7天浇1水。而越冬栽培,进入结果期后,室内外温度逐渐降低,且外界光照时间短且弱,植株生长和果实发育均较缓慢,此时必须适当控制浇水。最冷的12月中下旬到翌年1月,基本不浇水以求保持土壤温度。待翌年2月中旬后,随着天气转暖,开始浇水,一般10~15天浇1次。无论是哪种模式的种植,番茄水分管理总原则是:苗期要控制浇水,以防止秧苗徒长,以达到田间最大持水量的换头栽培的此时应考虑“浇果不浇花”的原则,掌握好水量,以防止落花落果。60%左右为宜。结果期水量加大,以达到田间最大持水量的80%为宜,且要保持相对稳定。棚室内土壤水分过大时,除妨碍根系的正常呼吸外,还会增加室内空气湿度,加大病害发生几率。忽干忽湿导致裂果和脐腐病的发生。不同栽培模式追肥方案见表5。中短季节栽培模式亩产5000~7500千克番茄。番茄第一穗果坐果后,追第一次肥,依然是遵照施肥原则,将氮素施用总量的80%(56~80千克)和硫酸钾施用总量的60%(42~54千克)分3~4次随水追施。以共追肥4次算,第一次每亩追施水溶性氮钾冲施肥14~16千克。第二穗果开始膨大时(距第一次追肥约10~15天)追第二次肥,每亩追施水溶性氮钾肥12~18千克;氮钾比为1∶3。结第三穗果时,追第三次水溶性氮钾肥15~18千克,氮钾比为1∶3。在第四穗果开始膨大,第五穗坐果后进行第四次追肥15~20千克。长季节栽培模式亩产10000~15000千克番茄。番茄第一穗果坐果后,追第一次肥。将底肥中氮素和钾素施入肥量减去,定植后氮素的施用量(130~180千克)和钾肥施用量(65~135千克)在整个生育期分8~9次随水冲施。每次施入水溶性氮钾肥15千克左右。秋季施3~4次,于第一穗果膨大时开始追第一次肥;第二穗果开始膨大时,追第二次肥。表5 番茄不同栽培模式追肥施用方案长季节栽培模式第三穗果或第四穗果膨大时,追第三次肥。以后,视植株长势而定。这种模式的栽培(8月初定植)到10月中下旬已留有4~5穗花序,此时可摘心换头,也可延续长下去。到12月底前这几穗果一般可成熟上市,此时栽培的一个重要目的是供给元旦、春节市场,故一般不采收,直到节日前再采摘上市。而12月中旬后到翌年2月,是温室的低温期,与浇水同步,此期严格控制追肥。2月中旬后,天气转暖,室内外温度上升迅速,配合浇水,开始缓施生物菌肥让其根系复苏激发活力,逐渐增施水溶肥总量。到采收结束,一般施肥5~6次,每次施肥量同前,以满足植株快速生长所需。掌握依然是换头后第一穗果膨大时开始追肥。建议每施2次水溶肥,增加1次生物钾肥或海藻菌生物肥,以期改善根系吸收活力。追肥后管理同冬春茬栽培。表5 番茄不同栽培模式追肥施用方案(续)-1无论是基肥,还是追肥,此方案仅属常规施肥技术,应根据不同棚室的具体情况,进行适当的调整。有条件的地方,坚持测土施肥,做到施肥合理。在高产的同时,节约成本和土地资源。目前生产上,一味追求高产,超量追施氮肥的现象十分严重,过量施用加速了土壤盐化的程度致使微量元素吸收困难,经常造成重度盐渍化环境下的缺素番茄不完全转色(花脸果),同时对土地资源的可持续利用构成了很大的威胁。所以合理施肥是蔬菜生产亟需遵守的原则。1 整枝 目前,生产上大多栽培品种属无限生长类型,菜农多采用单干整枝法。双干或多干整枝常见于樱桃番茄或无土基质、设施岩棉栽培。菜农单干整枝即每株只留1个主干,把所有侧枝都陆续摘除掰掉。这种整枝方法单株结果数虽然不多,但果个增大,营养生长与生殖生长易保持平衡,早期产量和总产量均较高。只要注意合理密植,此方法坐果率较高且上下层果实大小均匀一致。2 换头 日光温室长季节跨年度栽培时,常每一植株都需10穗以上的果实,保持主茎的不断伸长虽可获得生产需要的花序量,但土壤栽培的根部吸收供给最上部的水分、养分明显减弱,致使果个变小,产量低等;同时,北方10月中下旬后,随着外界温度的逐渐降低,落花落果现象开始加重,且即使是已坐住的果实,成熟速度缓慢。为解决这些问题,生产中常利用换头的方法,打掉主干的生长点,使养分集中供给逐渐膨大的果实。待现有果实成熟后的2个月后,随着温度的升高和侧枝的发展,前期的果实又陆续采收完毕,栽培重点又重新转移到侧枝的生长点上来,通过这种方法,春节前后均能获得较好的收成。换头的部位各不相同,目前使用较多的是:10月中下旬(此时,8月定植的已有4~5穗花序)开始掐尖,具体的方法是:主干留4~5穗花序后在其上留2~3个叶片后摘心,诱发侧枝的萌发。这时养分集中到果实的发育与注意:诱发出的侧枝部位各异,选择较粗壮的侧枝(一般在植株2~3穗果实的腋芽处长出,也有选择茎基部萌发的侧枝的)。成熟上,待温度升高后,以诱发出的侧枝为主干,重复基本的栽培管理。3 打杈 除主干和换头后的主侧枝外,其余的侧枝和赘芽都要掰除去掉。在打杈时,由于植株侧枝的生长将刺激地下根群的伸展,过早摘除侧枝,就会抑制地下根群的生长。所以正确的做法是,在侧枝长到5~6厘米时,及时进行打杈。另外,夏季定植的番茄,由于温度高,很容易徒长,如果此时打杈过早,更加重了徒长的程度,直接影响以后的开花结果,夏季番茄为了控制徒长,常常晚一些时候打杈。4 摘心 摘心即打顶,打顶时机由栽培方式、栽培时节以及品种生长类型所决定。早春栽培和秋延后栽培一般留5~6穗花序后摘心。在最后一穗花序充分开花坐果后,留取花穗以上3~4片叶子,其余摘心打顶。冷凉地区无霜期一年长季节或棚室周年生长栽培模式一般留8~10穗以上,采取换头方法栽培的要经过两次或多次摘心。每次摘心后,要在最上部花序上保留2~3片叶。掌握拉秧前40~50天进行最后一次摘心,以保证最后一穗花序能正常发育成商品果。5 去叶 对于生长正常的叶子,原则上是不摘除的。但由于各种原因,植株整体上透光不足,直接影响到生殖生长,造成落花落果时,要及时且有控制地摘除一些叶片。另外,对于植株下部的病、老、黄叶要及时摘除,以减少病虫害的传播和蔓延,增加透光率。对已收获的下部果实周围的枝叶要及时全部打掉。6 吊蔓及落蔓 番茄属蔓生草本植物,幼苗时,尚可直立。但随着枝叶、花果增多增大,茎不能承担其重量而呈匍匐状态,所以必须插架绑蔓或吊蔓,使其直立生长,增加透光,提高产量和品质,且利于田间操作。目前,番茄棚室生产中多采用吊蔓的栽培方式,一般在定植缓苗后着手开始吊蔓,吊蔓时,宜在各行上部拉上铁丝,尼龙线吊在铁丝上。注意铁丝和尼龙线要足够结实以防盛果期突然断裂,造成损失。长季节栽培的番茄,随着前期果实的不断成熟上市,要将底部的枝叶全部打掉的同时随之及时落蔓,将底部茎有序地盘绕在根部。增加空间,增加透光,减少消耗,便于管理。为第二年的生长创造良好的环境。7 疏花疏果 为了高产和使果实生长整齐一致,需要采用疏花疏果措施。品种不同,选留的果数不同,且第一穗果要比以后各穗果少留1~2个。大果型品种一般第一穗果留3~4个,以上各穗留4~5个;中果型品种第一穗果留4~5个;小型果品种可留5个以上。疏果时,首先将病果、畸形果去掉。番茄虽属自花授粉作物,但遇到不利的环境条件时,例如阴雨、低温、高温等,子房不能正常授粉、受精形成种子,子房内生长素类物质浓度不高,导致子房不膨大,产生落花。棚室番茄生产中,为保证产量,多采用五种方法进行保花保果。1 熊蜂授粉 番茄全年生产中,棚室温度低于15℃或高于30℃时易引起落花落果,设施栽培中使用熊蜂授粉技术在一定程度上解决了这一问题。熊蜂授粉的优点是果实整齐一致,无畸形果,品质优,是绿色栽培的第一选择;避免使用激素类药物;省工省力,简单易掌握。一般500~667平方米的棚室,一棚放一群(箱)蜂,给予一定的水分和营养,将蜂箱置于棚室中部挖一穴坑埋入小型水缸,距地面1米左右的地下,放入3~4块砖头或板凳,高出缸底(避免蚂蚁侵蚀),将蜂箱放在砖头上面即可。蜂群寿命不等,一般40~50天,诸如春季或秋季短季节栽培一箱可用到授粉结束。利用熊蜂授粉,坐果率可达95%以上。2 振动授粉法 利用番茄自花授粉的特点,在晴好天气的上午对已经开放的花朵进行人工手棒震动吊绳数次,使花柄振动促进花粉散出落到柱头上进行授粉,特别是越夏栽培和春秋季栽培,通常5~6月棚室温度高于25℃以上时,采用振动授粉是促进授粉的最好方法。此时若一味使用激素蘸花,会造成大量畸形果产生。先进的科技园区有手持振动器进行操作。这样授粉生长的果实内会有种子,可与激素蘸花处理的番茄相区别。3 药剂喷花法 药剂保花保果的方法主要是依靠使用外源激素,也就是常用的2,4-D、防落素、番茄灵等,用其进行蘸花或喷花。喷花法,将配好的药液装在一个小的喷壶里,用壶嘴对准基本开放的花序喷施,同时设法挡住番茄的枝叶和生长点,以免药液喷到枝叶上引起药害。此法可用于花序开放整齐,至少花序有3~4朵花开放时进行效果好。为保证在炎热酷暑期的坐果率,最好在喷花前,先浇水。然后在每穗花开2~3朵时喷施番茄灵类保花药剂,保持柱头湿润,提高坐果率。生产中采用此方法的居多,但要注意喷壶的压力,雾滴要均匀一致,花萼、柱头着药均匀。不可重复喷施。4 涂抹法 涂抹法农民也叫“点花”。即在上午用毛笔蘸药液涂抹番茄的花柄或花柱上。此法可以对花序开放不整齐的花蕾分别进行毛笔蘸药点涂,棚室温度较低生长势较弱时涂抹效果好一些,但费工。有时毛笔点涂的药剂量和浓度不好掌握,容易产生畸形果。5 浸蘸法 生产上也叫“涮花”。方法是把已经开放的花序或至少开放3~4朵的花序放入配好药液的碗中,浸没花柄后立即取出将花序在碗的边缘滴尽多余药液。此法配置的药液浓度稍低些。用于药剂辅助保花保果的药品有甲硫·乙霉威保花剂1毫升药液对水1.5升,丰产素2号20毫克原液对水1升,2,4-D 10~20毫克原液对水1升,番茄灵20~30毫克原液对水1升,防落素等20~50毫克原液对1升水(注:以购买药品实际使用说明操作为准)。药剂辅助保花技术,虽可保证产量,但也带来诸多问题,若浓度使用不当,造成畸形花果,直接影响品质,销售价格降低。商品果率低。◎ 浓度与标记:无论用哪种激素,也无论采用哪种方法,一定按照产品说明书严格要求的浓度操作。浓度小,影响效果;浓度大,易造成畸形果,直接影响品质和效益。药液中加入红色或墨汁作标记,避免重复蘸、涂或喷花。生产中常用含有红色颜料的2.5%咯菌腈种子包衣剂配置在蘸花药剂中,即红色起标记作用,杀菌剂的药性又预防了番茄灰霉病的发生,此法已经得到菜农的广泛使用。◎ 避开高温时间:避免中午高温时操作,一般选10时前和15时后再操作。生产中多在上午7~10点钟进行辅助授粉工作。◎ 防止药液碰到茎叶或生长点:如果药液溅到茎叶或生长点,将导致茎叶皱缩、僵硬,影响光合作用,严重时,生长受阻,产量下降。如果药液溅到茎叶上,及时喷施清水、或碧护可湿性粉剂5000倍液药液进行药害解除。为了提早上市,菜农为了赶价格常用乙烯利对进入白熟期的果实进行催熟处理使用浓度1000毫克/升。1 上催熟 将1毫升乙烯利药液对水1升倒入小喷雾器中,向待催熟的果上直接喷药液。4~5天后,果实可大量变红。2 后催熟 把白熟期的果采下后,将20毫升乙烯利药液对水1升把待青果放入配制好的乙烯利溶液中浸1~2分钟,取出后装在容器中,25℃下催熟,4~6天全部转色。3 整株处理 一般对秋延后棚室的最后一批果实成熟前,用20~40毫升乙烯利药液对水1升的乙烯利喷洒植株,可提早4~6天采收。番茄夏季生产中,育苗期正值高温多雨季节,高温高湿使得幼苗很容易徒长,如何控制徒长是夏季番茄育苗的关键所在。生产上防止蔬菜徒长的化学调控手段主要是采用植物生长抑制剂或延缓剂。在番茄幼苗3~4片真叶期,用矮壮素0.5克对水1升或丁酰肼(比久)4克对水1升,或多效唑0.015~0.025克对水1升进行叶面喷施,可防止幼苗徒长,起到壮苗作用。近几年,为了更有效地控制徒长,也有的农民将处理期提前到幼苗一叶一心,但要更多地注意把握好处理浓度。 -
报告四 不同茬次注意事项
出版时间:2015棚室辣(甜)椒冬春茬栽培重点是解决早春到初夏甜椒供应短缺的问题。此期栽培管理比较简单,经济效益比较好。华北中南部地区一般10月中下旬育苗,1月中下旬定植,3月底至4月初开始收获。这时南菜北运基地的辣(甜)椒生产已经结束,而北方地区塑料大拱棚春提前栽培的辣(甜)椒,在5月中旬左右开始收获,此期间正值供应淡季,经济效益较高。1 选用适宜品种 该茬口栽培实质是早熟栽培,必须注重品种的早熟性,兼顾丰产性和抗病性等。根据以上要求,宜选用中早熟品种玛索、冀研12号、冀研新6号、红英达、红罗丹、索菲娅、硕源3号、湘研系列等。2 因地制宜,确定适宜播期 棚室辣(甜)椒冬春茬生产,前茬为日光温室秋冬茬,一般在1月中下旬至2月上旬拉秧,播种期可根据温室内前茬作物可腾地的时间和实际需要的日历苗龄来确定。前茬作物可腾地的时间确定后,需有90~100天时间,秧苗可长到10片叶左右,显现小花蕾,达到生产用苗的标准。日光温室辣(甜)椒冬春茬一般在10月中下旬播种育苗。3 适时定植,提早上市,抢占辣(甜)椒淡季市场 为使甜辣椒果实能在3月底至4月上旬上市,供应甜椒市场淡季,在1月中下旬,抓紧时间腾茬整地,进行定植。一般要求定植温室亩施优质粪肥或堆肥5000千克,磷酸二铵50~100千克,硫酸钾20千克,饼肥100~200千克,硫酸铜3千克,硫酸锌1千克,持效硼肥10千克。深翻使肥料与土充分混匀。采用小高畦地膜覆盖、膜下暗灌的栽培方法,小高畦间距1.1~1.2米,每畦栽双行,采用大小行栽培,小行距0.45~0.5米,大行距0.65~0.7米,株距0.4米,亩栽2500株左右。生长势较弱的早熟品种栽培密度可适当大些,亩栽3000株。定植应选晴天上午进行,而且期望定植后能遇到连续几个晴天,有利于提高地温,促进发根。定植前,将垄沟先用68%精甲霜灵·锰锌水分散粒剂500倍液进行地面药剂封闭杀菌,然后再定植。定植时要把大小苗分开,一垄之上大苗在前,小苗在后摆好,栽苗深度以覆土不超过子叶节为宜,栽后分穴浇水。或采用“水稳苗”方法栽苗,即按一定的株距挖穴,穴内浇水,尔后坐水栽入苗坨,再填土整平。为了创造更有利于秧苗早发的环境,定植后要盖小拱棚增温。栽苗1~3天后地温稍有回升,再浇定植水。4 定植后分期管理 管理可分为前、中、后三期。(1)前期(定植到采收前):定植后至缓苗前要尽量创造高温高湿条件,白天温室保持在30℃左右,夜间力求达到18~20℃,促进缓苗。定植后5~7天要密封温室和小拱棚,不通风,提高室温,栽苗1~3天后地温稍有回升,再浇定植水。心叶开始变绿、生长即已缓苗。缓苗后(定植10天左右)顺沟浇水1次,以后通风降温,并在行间中耕,中耕要由深到浅、由近到远,避免伤根,反复进行,促进秧苗健壮生长。坐果以前尽量少浇水,以防徒长。开花时温度较低,为防止落花落果,用30~50毫克/升番茄灵或20~30毫克/升的2,4-D涂抹花柄,促进坐果。前期历时40~50天,此期管理不仅要竭力促根,还要促进枝叶生长。(2)中期(采收初期到采收盛期):此期是定植后的40~75天,是既发根又长果的时期,也是辣(甜)椒生产的关键时期。温度对花器素质和果实膨大生长都有重要作用。白天尽量不出现30℃以上的高温,夜间温度维持在19℃左右,最低也要控制在16~18℃,低于13℃果实易形成僵果和畸形果。土壤要保持湿润,一般结果前期7~10天浇一水,结果盛期6~7天浇一水。结合浇水亩追施速效氮肥10~15千克,同时,配合施入钾肥,硫酸钾15千克。进入盛果期,应水水带肥,三元复合肥、速效氮肥、冲施肥交替使用。3月底去除草苫,当露地最低温度稳定在15℃以上时,揭去棚围子,设上防虫网。(3)后期:采收盛期过后,植株趋向衰老,故此期管理应维持长势为主,不能缺水缺肥。追肥应以氮、钾肥为主,并做到追肥与浇水结合。中后期除进行正常追肥外,还需适当进行根外追肥,一般进入盛果期后,结合防病每周喷1次0.3%瑞培绿、或螯合锌+螯合硼微肥叶面肥喷施。及时整理植株,清理下部老、黄叶片及空枝弱枝,以减少养分消耗,促进植株通风见光,促进坐果。秋冬茬栽培是为解决秋延晚生产结束后供应上市的一茬生产。一般是7月下旬到8月上旬开始育苗,苗龄30~40天,定植后40~50天始收,1月中旬至2月初结束。因其后期光照时间短、强度小、温度低。为了争取在有限的时间里拿到产量,在整个生长过程中都要“重促、忌控”,并尽最大努力防治初秋高温蚜虫迁飞传染病毒病的发生和为害。1 选用适宜秋冬茬的品种 育苗在7月中下旬到8月上旬开始,时值高温多雨季节,应搭建遮阳防雨棚,采用营养钵或穴盘护根育苗方法,以减轻病虫为害。2 秋延后育苗方法 由于辣(甜)椒塑料大棚栽培育苗时值高温多雨季节,为避免雨涝和毒病危害,育苗场应选择地势高燥,排水良好的地块搭建防雨遮阳棚。搭棚时要注意覆盖物不宜过厚,一般以造成花荫凉为宜,覆盖物还应随着幼苗的生长逐渐撤去,否则幼苗易徒长,难于达到培育壮苗的目的。此外,塑料大棚去掉围子,棚顶上覆盖遮阳网,两侧设防虫网是夏季育苗的理想场所。育苗中注意的几个环节:◎播种前一定要进行种子消毒。◎整个生育期注意防治蚜虫和病毒病,喷10%噻虫嗪水分散粒剂2000倍液防治蚜虫、白粉虱,预防病毒病。◎在夏秋高温季节育苗为减少伤根和病害为害,建议尽量采用营养钵或穴盘护根育苗方法。◎播种后苗床或育苗穴盘上铺盖旧报纸、遮阳网等不透明覆盖物保湿降温,待出苗时及时去掉苗床上的覆盖物见光。◎幼苗出齐,子叶展平后要降低苗床温度,防止幼苗徒长,形成“高脚苗”。同时延长光照时间,保证子叶肥大,叶柄长度适中,生长健壮。◎要求苗龄30~40天,植株长有7~9片真叶时即可定植。3 定植 一般在8月中下旬至9月初定植。在整地前,每亩施入优质腐熟有机肥5000千克以上,同时施入速效的氮磷钾复合肥50~60千克,硫酸铜3千克,硫酸锌1千克,硼砂1千克,生物钾肥1千克。各种肥料可随着深翻细耙,与土壤充分混合。然后起垄,采用大小行栽培,小行距0.45~0.5米,大行距0.65~0.7米,垄高0.15~0.18米,株距0.4米,亩栽2500株。生长势较强的中晚熟品种栽培密度可适当小些,亩栽2000株左右即可。定植期正值高温季节,应选择下午、傍晚或阴天定植,定植覆土不超过子叶节为宜。随栽随浇定植水,要把垄洇透,防止萎蔫发生。4 田间管理(1)定植后管理:定植后第二天浇1次缓苗水,水后浅中耕(深约3厘米),缓苗后浇第三水,以后加强中耕保墒,促进根系发达。蹲苗7天左右再开始浇水,此后保持畦内见干见湿,一般7~10天浇1次水。(2)缓苗后的管理:缓苗后浇1次缓苗水,以后以中耕提高土壤温度为主,白天温度以22~28℃为宜,温度过高及时放风降温。坐果前尽量少浇水,以防徒长。(3)开花期的管理:为防止徒长,促进坐果,开花期切忌浇水和施用氮肥,应进行蹲苗。温度过高时应及时放风降温促进坐果。可喷施爱多收、瑞培绿等辣椒促进坐果的生长调节剂,提高坐果率。结合喷洒螯合硼、新禾硼、速乐硼效果更好。发现植株徒长可用0.03%~0.05%的缩节胺药液或0.5%矮壮素药液控制。(4)结果期的水肥管理:门椒坐住后,开始浇水,一般结果期7~10天浇1水,保持土壤湿润。结合浇水亩施水溶性冲施肥(氮钾肥比1∶2)10~15千克,或亩追施生物海藻菌复合肥12~15千克。进入结果期,每浇1水或两水追肥1次。每冲施1~2次水溶肥,间隔冲施一次生物菌肥,如海藻菌或芽孢杆菌生物肥,以期改善辣椒根系生命活力。每7~10天喷1次90%益施帮生物活性剂,或0.2%磷酸二氢钾+螯合锌或瑞培锌、瑞培绿。增强植株抗性,提高坐果率。(5)注意及时防治蚜虫,防止病毒病的发生。同时防治茶黄螨。(6)当夜温低于16~18℃以前,及时扣上棚膜。扣膜初期要加强通风,降低湿度和温度,防止植株徒长和落花落果及病害的发生,在整个生长期内都要做好通风降湿工作。白天温度25~28℃,夜间不低于16~18℃。温度范围不能保证时,要及时加盖草苫、纸被。随着气温降低,适当减少浇水次数,保持土壤湿润即可。1 施足底肥,平衡施肥 根据甜椒生长需求和土壤营养状况,春提前大棚在整地前,每亩施入优质腐熟有机肥5000千克以上,磷酸二铵50~80千克,硫酸钾20千克,饼肥100~200千克,昆卡硼镁锌钙中量元素2~3千克,各种肥料可随着深翻细耙,与土壤充分混合。如果肥量不足可利用沟施、条施,进行补充施肥。2 提早扣棚,适时定植 定植前15天扣好棚暖地,当棚内10厘米地温稳定在12℃以上时进行定植。华北地区一般于3月中下旬定植。采用大小行栽培,小行距0.45~0.5米,大行距0.65~0.7米,株距0.4米,亩栽2500株,生长势较弱的早熟品种栽培密度可适当大些,亩栽3000株。3 定植后的田间管理(1)温度管理:春季为促进缓苗,定植后一般闷棚5~7天,棚内温度不超过35℃不放风,以提高棚内温度,促进幼苗早发根、早缓苗。采用多层薄膜覆盖的,白天应将保温帘膜(二道幕)揭开,以利透光和提高地温,晚上再盖严保温。约一周后,幼苗叶色转绿,心叶开始见长,即可浇缓苗水,水后开始逐渐放风。晴天白天保持25~28℃,夜间维持在17℃以上,4月中旬后,一般当棚温上升至25℃以上时就应进行小放风。此后,随外界气温升高,逐渐扩大放风口。放风时,从背风面揭开棚膜,大风天气要随时注意放风口管理,风向改变,放风口随之改到背风面。当棚温下降至20℃以下时逐渐关闭风口。采用多层覆盖的,夜间棚内温度在15℃以上时可不再覆盖。当外界最低气温稳定在15℃以上时,晚上不再关闭风口,即可进行昼夜通风。5月中旬选择阴天傍晚撤去棚模,避免闪苗萎蔫。撤下的棚膜折叠好置于阴凉处保存,以备后用。有些地区夏季只撤棚围子,不撤膜棚。(2)水肥管理:定植水后2~3天即可中耕,以提高地温、改善土壤通气状况,促进缓苗。定植后1周左右浇缓苗水,以后进入中耕蹲苗期,待绝大部分植株门椒坐果后(果有核桃大小)结束蹲苗,开始浇水追肥。此后经常保持大棚内土壤湿润,一般结果期7天左右浇1次水,进入结果盛期4~5天左右浇1次水。浇水宜在晴天上午进行,每次浇水量不宜过大。甜椒喜肥不耐肥。门椒坐果后开始浇水追肥,可参见棚室冬春茬栽培。在植株封垄前应进行培土,培土不宜过早,否则易使根部处于相对较深的土层中,地温回升慢,根系发展也慢,从而影响地上部生长。不同栽培模式,整枝打杈及吊秧方式有所不同。一年一大茬生产多采取2杈整枝方式,同时结合坐果的连续性进行疏花疏果。随着整枝打杈双秆整枝,枝干伸长可以采用绳索吊挂棚内,以免因果实赘秧。吊秧方法参考番茄吊蔓方法。同时,为防止果实赘秧,影响中、上层开花坐果和果实膨大变色应及时采收。1 冬季连阴冷天气 连续阴天,低温、寒流天气时,在注意加强防寒保温的同时,无论雨雪如何都应照样揭盖草苫,可以适当晚揭早盖,但幼苗要有一定时间的散射光。在连续阴雪天外界温度低时,中午前后要揭苫见光。夜间增加覆盖物保温,日光温室也可采用释放“美喜平”气体30升/亩(剪开口的气袋在棚内来回走动2~3圈,直至气体全部放出)。用以改善因天气寒冷造成的作物寒害,或采用临时性加温措施。2 雨雪天气 雨雪天时应加盖一层薄膜,既可保持草苫干燥,又可增加保温效果。湿透的草苫,天晴后抓紧晒干。温室管理上注意控水和适当放风,防止温室内湿度过大而发病,可用粉尘剂或烟雾剂防病。也可采用释放“美喜平”气体30升/亩,剪开口的气袋在棚内来回走动2~3圈,直至气体全部放出。改善因天气寒冷造成的作物寒害。连续几天阴雨雪天晴后,可揭开草苫,必须注意观察,发现植株萎蔫,应立即回苫,恢复后再揭开,经过几次反复便不再萎蔫。3 大风天气 把薄膜固定好,夜间把草苫压住,以防秧苗受冻。后期遇大风,应放小风,顺风防风,避免冷风直接吹入,以防闪苗。 -
报告八 生理性病害防治
出版时间:20151 症状 钾可在植株体内移动,植株缺钾时老叶的钾就会移动到生长旺盛的新叶,从而导致老叶缺钾。在生长早期,叶缘出现轻微的黄化现象,继而叶缘枯死,随着叶片不断生长,叶向外侧卷曲;其症状品种间的差异显著。缺钙的症状首先出现在上位叶,叶缘完全变黄时多为缺钾。果实会因钾的缺乏和分布不均影响体内糖分储备和细胞的渗透压,使果实呈现绿肩果。2 发病原因 虽然氮、钾肥在复合肥的施入量常相同,但是番茄中钾的吸收量是氮肥的1~2倍。因此,在施入有机肥不足,补充含有氮、钾的复合肥时,连年种植地块,钾会越来越少,生长后期出现缺钾现象经常发生。磷肥的过量施用会导致钾肥的减少。在沙性土壤栽培时易缺钾。有机肥和钾肥施用量小,满足不了生长需要时;地温低、湿度大、日照不足,阻碍了钾的吸收;施用氮肥过多,会影响对钾肥的吸收。3 救治方法 使用足够的钾肥,特别在生育的中、后期,注意不可缺钾;每株对钾的吸收量平均为7克,确定施肥量要考虑这一点;施用充足的优质有机肥料;如果钾不足,每亩可一次追施生物速效钾肥3~5千克。缺钾时也会影响铁的移动、吸收。因此,补充钾肥的同时,应该补铁,二者同时进行。可用0.3%~1%硫酸钾、氯化钾喷施,或施用生物钾肥及时补充速效钾。1 症状 在生长发育过程中,下位叶的叶脉间叶肉渐渐失绿变黄,进一步发展,除了叶缘残留点绿色外叶脉间均黄化;当下位叶的机能下降,不能充分向上位叶输送养分时,其稍上位叶也可发生缺镁症;缺镁症状和缺钾相似,区别在于缺镁是先从叶内侧失绿,缺钾是先从叶缘开始失绿。缺镁症在不同番茄品种间发生程度、表现症状有差异。2 发病原因 镁是植株体内所必需的元素之一。由于施氮肥过量,造成土壤呈酸性影响镁肥的吸收,或钙中毒造成碱性土壤也应影响镁的吸收从而影响叶绿素的形成,造成叶肉黃化现象。低温时,氮、磷肥过量,有机肥的不足也是造成土壤缺镁的重要原因。根系损伤对养分的吸收量的下降,其引起最活跃叶片缺镁吸收的现象也是不容忽视的。土壤中含镁量低的沙土、沙壤土及未施用镁肥的露地栽培地块易发生缺镁。3 救治方法 增施有机肥,合理配施氮、磷肥,配方施肥非常重要,及时调试土壤酸碱度改良土壤避免低温。若缺镁,在栽培前要施足够镁肥,例如生产中随底肥施入中量元素硼镁锌钙肥(昆卡中量元素肥1千克)效果好。应该注意土壤中钾、钙含量,保持土壤适当的盐基水平补镁的同时应该加补钾肥、锌肥,多施含镁、钾肥的厩肥。叶片可喷施1%~2%的硫酸镁和螯合镁、螯合锌等。1 症状 钙素在植株体内不易转移,缺钙时新叶黄化,首先是幼叶叶缘失水,继而叶片干枯变褐。果实病斑果面初期呈水浸状暗绿色,逐步发展为深绿色或灰白色凹陷。成熟后斑点褐变不腐烂。2 发病原因 由植株缺钙引起,虽然土壤中不缺钙离子,但是,连续多年种植番茄的棚室,若过量施用氮磷钾肥会造成土壤盐分过高,引发缺钙现象发生。干旱时,土壤浓度浓缩,减少根系吸水,抑制钙离子的吸收,造成果实成熟时体内糖分不均衡分布,糖转化失调,造成缺糖部位木栓化不转色的凹陷斑。盐渍化障碍、高温、干旱和旱涝不均的粗放管理也是影响钙吸收量的主要原因。根群分布浅,生育中后期地温高时,易发生缺钙。3 救治方法 增施有机肥,增加腐熟好的腐殖质含量高的松软性肥料,加强土壤的透气性改变根系的吸收环境。调节土壤的pH值至中性,酸性土壤及时补充石灰质肥料。尽量避免连年多茬种植同一种作物。肥水管理上应避免过量施用氮肥和含有隐性氮肥的复合冲施肥,随底肥增施水溶性钙镁肥。适当保持土壤含水量,可以考虑使用一些具有保水功能的松土精或阿克吸保水剂。果实膨大期可叶面喷施速效钙肥或0.1%~1%的氯化钙,稍加入少量的维生素B6,可防止高温强光下形成的过量草酸,对预防缺钙有较好效果。1 症状 缺硼的新叶停止生长,生长点附近的节间显著缩短。上位叶向外侧卷曲,叶缘部分变褐色。叶缘黃化并向叶缘纵深枯黄呈叶缘宽带症、果皮组织龟裂、硬化。停止生长的果实典型性症状是即生产中常说的网状木栓化果。2 发病原因 硼可参与碳水化合物在植株体内的分配,缺硼时生长点坏死,花器发育不完全。新叶生长、茎与果实因生长停止,叶缘黃化并向叶缘纵深枯,大田作物改种植甜瓜后容易缺硼。多年种植甜瓜连茬,重茬,有机肥不足的碱性土壤和沙性土壤,施用过多的石灰降低了硼的有效吸收,以及干旱、浇水不当,施用钾肥过多,钾肥过剩都会造成硼缺乏。缺硼时,并不对吸收钙的量产生直接影响,但缺钙症是伴有缺硼症发生。3 救治方法 改良土壤,多施厩肥增加土壤的保水能力,合理灌溉。底肥施足硼肥,如持效硼,叶面喷施速乐硼、新禾硼或0.1%~0.2%的硼砂或硼酸液。注意配置时,将硼砂先置于60~70℃水中溶解后,再稀释至规定浓度。 -
报告Primary Study of Oligochitosan Inducing Resistance to Sclerotinia sclerotiorum on Brassica napus
出版时间:2007菌核病为我国油菜三大病害之首,严重影响油菜的产量和品质,目前通过使用化学农药等措施对其进行防治,但是效果不很明显,且长期使用化学农药会造成对环境的严重污染。所以利用植物自身诱导抗病性对菌核病进行防治是现在农业生产中的新趋势。植物诱导抗病性是植物抵御病害侵袭的重要机制之一,具有作用效果明显,广谱性及环境友好等优点,作为一种经济有效的抗病策略,在农业可持续病害防治中具有广阔的应用前景,日益受到人们的关注。我们实验室开发研制的生物农药中科六号(壳寡糖)在田间及温室实验中被证实可诱导烟草等作物对相应的病害产生防治作用[1];田间使用中科六号可减轻油菜菌核病对油菜的影响,故本文中利用植物生理生化方法进行温室实验及生化实验,初步探讨壳寡糖诱导油菜抗菌核病的作用机制。1.1.1 供试药剂 壳寡糖(oligochitosan、COS),脱乙酰度>95%,聚合度为3-10,由中国科学院大连化学物理研究所研制;配制成50μg/ml使用。1.1.2 供试植物 甘蓝型油菜沪油15(Brassica napus L.)温室中培养至4~6片叶期。1.1.3 供试病原菌 油菜菌核病病原菌 核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)本实验室保存。1.2.1 实验设计 为考察接菌前不同时间壳寡糖预处理对诱抗作用的影响,分别在接菌前0~4天处理油菜植株。新鲜配置的50μg/ml壳寡糖溶液喷雾油菜植株,每株取两片叶子,确保其正反面均润湿,确保其他叶片未被喷上壳寡糖溶液。1.2.2 油菜菌核病接种方法 保存的菌核用70%乙醇浸泡30s,1%的升汞消毒10min,无菌水冲洗3次后,接种于PDA(potato dextrose agar)培养基中。在25℃下暗培养3~5天,待菌丝长满培养皿后即可进行接种。接种试验之前,先将4~6片叶期油菜植株喷上雾状水珠,用打孔器将菌丝截成直径为0.15cm大小的菌丝琼脂块,将有菌丝的一面与壳寡糖预处理的油菜叶片接触,每株取一片叶子,每片叶子上放一块菌丝琼脂块,然后用保鲜膜盖上,再喷一次雾状水珠,保持温度20℃左右,接种后每天喷一次水。1.2.3 病情指数调查方法 在接菌后第五天根据病斑占叶片面积比例调查病情指数,分级标准为:0=没有病斑;1=病斑面积占叶面积11%以下;2=病斑面积占叶面积11%~30%;3=病斑面积占叶面积31%~50%;4=病斑面积占叶面积51%以上。1.3.1 粗酶提取 取提前三天壳寡糖预处理植株进行试验,以正常、壳寡糖处理不接核盘菌和未经壳寡糖预处理接核盘菌的植株为对照。每个试验点选取4株植株,每株取系统叶和处理叶各一片,迅速放入液氮中保存。取样叶1.4g,10.0ml含5mmol/L巯基乙醇的硼酸缓冲液(0.05M,pH 8.8),加入0.5g PVP和石英砂在研钵中研磨,在冰水中研磨成浆。10000r/min 4℃离心10min,上清液即为酶液。考马斯亮蓝法测定总蛋白含量。1.3.2 脂氧合酶(LOX)活性测定 0.1ml粗酶液与3ml 0.20mM亚麻酸溶液混匀后放入30℃水浴中反应,监测5min后OD234变化值,酶活由以下公式计算:(A234末-A234初)/0.001/总蛋白含量(mg)。用滤纸片法在PDA培养基平板上进行抑菌试验,在培养基平板正中央接0.15cm大小的核盘菌菌丝琼脂块,打孔器取直径5~6mm的滤纸片,在无菌条件下浸泡壳寡糖溶液均匀后放置平板上,每皿放置5点,其中一点为对照即浸无菌水,另设不放滤纸片的培养皿平板为阴性对照,观察不同浓度处理滤纸片后其周围病菌生长状况,与对照相比,经72h恒温培养后,根据抑菌圈大小判断抑菌效果。壳寡糖溶液浓度50mg/kg,200mg/kg,500mg/kg,1000mg/kg。依据田间试验诱抗效果取最佳浓度50μg/ml进行温室试验,试图寻找防效最好的预处理时间点。对照植株在12h时就发病明显,96h后叶片枯萎。而经壳寡糖预处理者接核盘菌后12h内症状不明显,24h时产生病症,120h后叶片出现枯萎现象(图1),说明壳寡糖处理能延缓菌核病发病,壳寡糖预处理的植株都表现出一定的抗菌核病的能力接菌(表1),提前三天(72h)预处理有最佳效果,在120h时防效为54.60%,试验结果显示防效可达120h以上。图1 壳寡糖提前三天预处理后油菜接菌核病后表型变化(0h,12h,24h,48h,120h)Figure 1 Appearance of 72h before COS pretreated B.napus leaves challenged with S.sclerotiorum.(0h,12h,24h,48h,120h)预处理时间病情指数(%)防效(%)022.91—提前24h15.6231.8提前48h14.5836.35提前72h10.4154.60提前96h12.5045.44表1 不同时间壳寡糖预处理对油菜菌核病的影响Table 1 The resistance of COS pretreated B.napus to S.sclerotiorum不同处理后油菜植株LOX的活性变化如图2所示。处理叶在只接菌和COS预处理后接菌情况下,72h小后活力提高,而COS处理的植株96h后活力才提高,且COS处理后的植株LOX活力高于只接菌者。在系统叶中获利变化更明显,在48时有一个峰值,96h水平又明显提高一个途径使SOD酶活升高。这些复杂现象说明在油菜中COS可通过多种途径诱导LOX活力升高。图2 壳寡糖和核盘菌引起的LOX酶活力变化 (A)处理叶 (B)系统叶Figure 2 Effects of oligochitosan and S.sclerotiorum on activities of LOX enzymes in B.napus leafs.(A)Treat leafs (B) System leafs如表2所示,低浓度壳寡糖对核盘菌的直接抑制作用不明显。壳寡糖浓度(mg/kg)抑菌圈直径(cm)壳寡糖浓度(mg/kg)抑菌圈直径(cm)0—5000.34±0.0550无抑制10000.75±0.11100无抑制表2 不同浓度壳寡糖对核盘菌的抑菌圈直径Table 2 The inhibitory diameter of S.sclerotiorum by different concentration COS壳寡糖作为近几年研究较多的一种植物诱抗剂,已经被广泛应用于烟草、棉花、油菜等作物生产中。然而其作用机制尚不明了,本文首次进行了壳寡糖对油菜抗菌核病的研究。发现使用50μg/ml的壳寡糖溶液预处理油菜植株,可以提高其抗菌核病能力,其抗性可持续96h以上,防效可达到54.60%。防治效果虽然没有化学药剂作用明显[2],但与其他诱抗剂效果相当[3,4],在环境友好前提下具有良好的防治效果。壳寡糖对核盘菌的生长没有显著抑制作用,于汉寿等人也发现壳聚糖对核盘菌的直接抑制作用也不明显[3,5],说明喷施壳寡糖使油菜对菌核病产生抗性主要是因为壳寡糖诱导油菜产生了系统抗性,而不是来源于壳寡糖对菌核病的直接作用。提前三天预处理的植株有最高防效,说明壳寡糖诱导对菌核病的抗性可能有一个响应和滞后期,Molloy等人[6]报道壳寡糖诱导胡萝卜防治菌核病的最佳处理期也是接菌前三天,说明这种现象是广泛存在的。脂氧合酶(LOX)在植物抗胁迫响应时扮演重要角色[7],脂氧合酶可催化多不饱和脂肪酸转化为氢过氧化物,并最终生成重要的植物抗性反应信号分子茉莉酸(JA)。Kim等人[8]报道LOX酶水平可以被JA诱导升高,我们的实验结果说明壳寡糖可同时诱导油菜处理叶和系统叶中LOX酶活性升高,揭示壳寡糖可能是通过JA酸途径诱导植物产生抗病性的,这与我们之前利用基因芯片得出的结论相吻合[9],但具体的信号转导网络仍有待进一步研究。 -
报告Application of Gene Expression Research Methods in Plant Pathology
出版时间:2007基因表达是基因在生物体内转录、翻译以及所有加工的过程,在真核生物中,约有10万个基因,而表达的基因只占基因组的15%左右,了解不同条件下细胞内基因表达的变化,可以帮助我们了解控制生命过程的机理[13]。对于植物来说,在植物不同的发育阶段和不同的环境条件下,基因的时空表达受到严密的调控。当植物受到病原物,如细菌、真菌、病毒、线虫等的侵袭时,植物体内存在防御机制,诱导相关基因表达,或者诱导相关基因表达量增加,产生次生代谢产物或表达抗性基因,从而抵御病原物的侵袭。因此研究植物基因表达变化水平对于揭示植物抗感病机理有重要的意义。在人类控制植物病虫害的措施中,抗病虫转基因植物是其中的重要手段之一,这样可以减少农药的使用,减少对环境的污染,并且符合可持续发展农业的要求,而基因表达分析又是其中必不可少的一步。它可以检测抗病虫基因能否高效的表达,以及能否在特定的发育阶段或者特定的组织器官中表达。基因表达研究方法有Northern杂交法、表达序列标签、mRNA差别显示技术、基因表达的系列分析方法和基因表达芯片等,本文对主要基因表达研究方法在植物病理学上的应用进行了简单概述。Northern杂交技术是用于测定真核生物RNA样品中特定mRNA分子的量和大小以及估计其丰度的技术,是研究基因转录产物的重要手段[14]。Northern杂交技术是在Southern技术的基础上建立起来的,具体的步骤是首先从要研究的组织或细胞中分离完整的mRNA,然后将RNA根据大小用变性琼脂糖凝胶电泳分离,再通过毛细管作用或负压法装置使RNA条带转移到纤维膜上,进行必要的处理后,用固相RNA与探针分子杂交,对特异结合的探针分子的图象进行检测、捕获和分析[15]。这种方法具有较高的特异性,主要是应用于检测特异rnRNA,以分析已知基因的表达情况。李子银等[16]根据已知植物抗病基因的保守区域设计引物,从抗稻瘟水稻品种窄叶青8号第一链cDNA和基因组DNA中扩增出3个与植物抗病基因同源的序列,利用Northern杂交技术,显示其中一个基因在水稻叶片、幼茎和根中均有转录。程志强等[17]利用已知的植物R类基因保守结构域,设计简并引物作为随机引物,分析水稻愈伤组织受白叶枯病菌诱导的mRNA表达丰度差异,获得3个差异片段。Northern杂交结果证实该片段受白叶枯病菌诱导表达,且在抗性品种中的诱导表达明显强于感病品种的诱导表达。黄萱等[18]根据已知植物抗病基因的保守结构域设计引物,从抗锈病小麦品种西农88基因组DNA扩增触3条与植物抗病基因同源的序列,通过Northern杂交表明其中一个同源序列在小麦中受水杨酸调控,属于诱导型表达的抗病基因。表达序列标签(EST)技术是由Adams等[1]提出的。典型的真核基因mRNA是由5’帽子,5’-UTR,编码区,3’-UTR,3’polyA尾巴五部分组成,其中5’-UTR和3’-UTR对基因具有特异性,3’或5’端的一段序列就可以表示在某种条件下基因的表达情况[19]。表达序列标签即在不同的组织构建的cDNA文库中,随机挑选不同的克隆,进行克隆的部分测序从而产生的cDNA序列。目前,已经建立了大量的EST数据库,可以根据不同时间,不同处理、不同组织,不同条件下EST数据的比对,鉴别特异表达的基因。但是,此技术对实验室的仪器、测序、经费等要求高。马金彪等[20]利用EST技术构建条锈菌诱导的小麦叶片cDNA文库,通过序列分析,了解小麦与条锈菌互作过程中表达的基因,为从分子水平揭示寄主与病原菌亲和互作机理奠定了理论基础。mRNA差别显示技术,又称差示反转录PCR(differential display of reverse transcriptional PCR),简称DDRT-PCR,它是将mRNA反转录技术与PCR技术二者相互结合发展起来的一种RNA指纹图谱技术。几乎所有的真核基因mRNA分子的3’末端都带有poly(A)尾巴,在RNA聚合酶的作用下,以mRNA为模板,以oligo(dT)为引物合成出cDNA链[21]。此技术的优点在于简单方便、灵敏度高,但同时它也存在局限性,如:假阳性比例高,可达50%~70%;扩增的片段分子量比较小;工作量大等[13]。mRNA差别显示技术最初是为动物研究设计的,但是从其原理来看,在植物基因表达的研究上也存在很大的潜力,可以应用于植物抗病基因的表达研究上,研究发现,抗病基因中很多都是多基因家族,这样的多基因家族在抗、感病品种中都存在,只是其中的成员有所不同,有的基因缺失,这可能就是造成抗病品种抗病、感病品种感病的原因。所以,可以应用mRNA差别显示技术分析比较抗病品种和感病品种的差异表达的基因,从而进行进一步的分析。黄旭等[22]通过外源DNA浸泡幼胚将普通野生稻(Oryza rufipogen)抗稻瘟系YD1005总DNA导入受体粳稻寒丰S(Oryzasativa ssp.japonica)育成一抗稻瘟病变异株(D1代),利用mRNA 差别显示技术分离得到一个原品种中没有的与抗稻瘟病相关的一个cDNA。饶志明等[23]人利用mRNA差别显示技术对水稻感病品系G71受苯并噻二唑诱导3天的应答反应进行分析,从抗病及其相关基因保守结构域设计的10个引物组合的反应中获得11个受BTH诱导的cDNA差异片段,进一步利用Northern杂交证实其中一个阳性片段的表达受BTH和稻瘟病菌的诱导。由于差别杂交技术、mRNA差别显示技术各有缺点,不能够提供全面的表达分析图谱,不能够全面系统的分析基因转录组。因此,在此基础上,1995年Velculesue等[2][3]描述了一种基因表达的序列分析技术(SAGE),该技术能快速详细的分析成千上万个转录子,能够全面的对基因组的表达进行分析,而无须依赖以前的转录信息。在一个转录物中,可以找到一段特异的序列,这个特异的序列就可以代表这个转录物,该序列即转录序列标签(SAGE标签),一般为9~10bp;SAGE 标签经随机连接、扩增并集中在1个克隆中测序,标签重复出现的次数代表该转录物的拷贝数。根据其占总标签数的比例即可分析出其所对应的编码基因的表达频率。SAGE是分析诱导表达的抗病基因的一种有效的方法,Matsumara等[4]应用SAGE 技术研究水稻在白粉病菌侵染后基因表达的整体变化,旨在发现与稻瘟病抗性相关的新基因;Mitchell 等[5]利用SAGE 方法对水稻与稻瘟病菌之间相互识别及病理反应进行全基因组分析,以了解与病原菌致病力和寄主抗性相关的基因。Mysore 等[6]以番茄为材料,分析了不亲和的植物病原菌互作过程中经诱导产生或被抑制的基因表达图谱。基因芯片技术最早是由Fodor[7]等提出的,基因芯片是一种用于合成和分析生物分子的微型装置。其原理是指是指将大量生物讯息密码,以预先设计的方式固定在玻片、硅片、塑料和尼龙膜等固相载体上组成的密集分子阵列。微阵列在一定条件下进行生化反应,反应结果用化学荧光法、酶标法、同位素法显示,再用扫描仪等光学仪器进行数据采集,最后通过专门的计算机软件进行数据分析[8]。微阵列芯片主要有两种:基于寡核苷酸微阵列芯片和基于cDNA 片段的微阵列芯片。虽然寡核苷酸阵列芯片的检测灵敏度高,可检测出一个碱基的错配,但寡核苷酸芯片的制作是基于DNA 序列已知的基础上,而cDNA 片段可以来自序列未知的cDNA 克隆、EST 克隆,隐含的基因组克隆,或已知的基因组序列的扩增ORFs [24]。因此,基因表达芯片技术是一种高通量的对两种组织或细胞基因表达进行检测和分析的方法。该方法并且克服了核酸杂交技术的操作繁杂、自动化程度低、操作序列数量少、检测效率低等问题[19]。Whitham等[9][25]通过使用微阵列技术,对不同种RNA病毒对易感的拟南芥基因表达的影响进行了研究,结果发现,不同种RNA病毒在易感植物宿主中诱发相同的反应,此研究有利于深入理解RNA病毒致病机理。在遗传上有显著差异的植物病原菌Xylellafastidiosa(Xf)的菌株导致了许多种植物病害,在全世界造成了巨大的经济损失。Nunes 等[10]以Xf 9a5c 菌株(导致柑橘花斑缺绿症)的基因组为参照,使用以微阵列技术为基础的方法,比较了12 个Xf 分离菌株,并对菌株间的基因组组成差异进行全面的评价。定量RT-PCR技术是在反转录和定量PCR的基础上发展起来的一种检测特定基因表达量的技术,可以根据PCR扩增产物的量确定目的基因的表达水平[26]。包括相对定量RT-PCR,竞争性定量RT-PCR、比较定量RT-PCR 和实时定量RT-PCR[27]。朱建裕等[28]根据番茄环斑病毒(ToRSV)各株系RNAⅠ聚合酶基因的保守序列,设计并合成1对引物和1条Taqman荧光探针,建立了对ToRSV的实时荧光RT-PCR检测方法。Chang JH等[11]根据番茄Pto基因家族的序列,设计特异性引物,应用RT-PCR技术,验证了Pto基因家族成员在抗感病番茄中的表达情况,结果发现Pto基因家族成员LescFen、Lescpth2和Lescpth5在感病番茄Rio Grande 76S中表达,Pto、Fen、Lpimpth2和Lpimpth5在抗病番茄Rio Grande 76R中表达。Gene calling是Shimkets等[12]人于1999年提出的,该技术受专利保护(USPYO5871697和USPYO5972693)。主要分为三步:①限制内切酶双酶切②加接头③PCR扩增,并对每个片段回收测序,测序结果数据库比对。具体步骤如下:合成双链cDNA,限制内切酶双酶切,对酶切产物加接头,然后用接头特异性的引物进行PCR扩增,引物分别用生物素和FAM标记,扩增产物毛细管电泳分离,并对每个片段回收测序,测序结果数据库比对。它可以对同一位点的基因表达种类和表达丰度进行分析[29]。此技术的应用有以下几个方面:①确定新的、稀少的表达基因;②当植物受到病原物侵袭时,可以快速检测到特异表达的基因;③可以利用比较基因组学比较种间基因差异,从而确定基因功能;④可以敏感地确定基因表达的微量变化等。另外,还有一些基因表达研究方法,如差异杂交,但仅适用于基因组基因组复杂程度较低的基因组,如酵母;S1核酸酶保护分析法间接的检测mRNA,适用于基因调控方面的研究,但是费时费力费用高;噬菌斑原位杂交可以分离cDNA中的目的基因,但费用较高;基因表达指纹技术,它采用酶切代替了PCR扩增,所获结果含有一定的编码信息,但是仅能得到高表达的基因,并且受电泳技术限制。在植物病理学研究领域,基因表达分析技术已经广泛的应用于病原菌的检测、转基因植物的检测、植物病原物互作机理的研究以及植物抗病信号转导研究等方面,使植物病理学研究者根据不同时期基因表达的变化,揭示植物抗感病机理、防治病虫害的发生以及选育植物抗病品种。虽然目前还有一些问题需要解决,但是相信随着各种基因表达研究方法的不断完善和改进,在植物病理学研究上将会有越来越广泛的应用。 -
报告来源于梨的苹果茎痘病毒的分离与鉴定?? 基金项目:湖北省自然科学基金资助项目(2006ABA162)。
出版时间:2007苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)主要侵染苹果和梨,且分布范围十分广泛,可导致其产量明显下降和品质改变。本研究从湖北省农业科学院果茶蚕桑研究所国家砂梨资源圃采集砂梨样品52份,采用试管捕捉反转录-聚合酶链式反应(TC-RT-PCR)对这些样品中的苹果茎痘病毒进行了检测,其中33份样品的ASPV检测结果为阳性,带病毒率为63.5%。取RT-PCR检测为阳性的13个样品,在温室汁液摩擦接种草本指示植物西方烟,对该病毒的生物学特性进行了分析,大部分样品的病毒分离物在西方烟叶片上表现褪绿斑点或褪绿斑、坏死斑或坏死线或网状褪绿纹。从上述样品中选取5个分离物,接种不同的草本鉴别寄主植物,以明确其寄主范围。5个分离物在昆诺藜、心叶烟、本氏烟和克利夫兰烟上均产生明显的症状,但分离物间在症状出现时间和症状类型上存在一定的差异。在昆诺藜上症状表现最早,本氏烟和克里夫兰烟次之,心叶烟最晚。5个分离物在昆诺藜上均产生褪绿斑或斑点;在心叶烟主要产生褪绿斑;在本氏烟上主要产生褪绿斑点;在克里夫兰烟上只有个别分离物在叶片上产生边缘浅黄色,中间绿色的环斑;在千日红叶片上有不规则的凹陷的白斑;在苋色藜上没有明显症状。而心叶烟和苋色藜的ASPV检测结果为阴性,其他草本植物的ASPV检测结果为阳性。以上结果表明,ASPV可以侵染昆诺藜、本氏烟、克利夫兰烟和千日红。取症状表现明显的两个分离物进行了致死温度的测定,接种后观察症状表现发现两个分离物在处理55℃时仍表现症状,而在处理58℃和高于58℃的温度时都不表现症状,可以初步推测该病毒的致死温度为58℃。
