美国白蛾繁殖量大，发生期长，且发生地点复杂，对其防治在技术上要区别于一般次要害虫的方法，要采取“人工与物理防治相结合、化学与生物防治相结合、地面与空中防治相结合”的措施，按照“一代为主，地面为主，村庄为主”的防治方针，依照“一挖二剪三喷四飞五放”的防治程序，进行全覆盖、多措施、不间断的防治。美国白蛾化蛹场所主要为树皮缝、墙缝、砖瓦堆下及枯枝杂草下等处，且化蛹比较集中。在越冬、越夏时期，组织人员在这些地方挖蛹，将挖得的蛹集中后埋入沙坑，坑口用网布封口，便于天敌羽化飞出。通过挖蛹可以大大降低美国白蛾发生基数，取得较好防治效果。每年的3月底至5月初、7月上旬、8月下旬，在美国白蛾发生地块，利用成虫趋光性，在成虫羽化期悬挂杀虫灯诱杀成虫。悬挂高度、挂灯间隔可根据不同类型的杀虫灯具体确定。以频振式杀虫灯为例：悬挂高度为离地面1.5m，悬挂间隔以100m为宜，每天从19：00至次日6：00开灯。在距离灯中心点50～100m的范围内进行喷药毒杀诱成虫，可获得较理想的防治效果。美国白蛾幼虫有群集和吐丝结网缀叶的习性，即1～4龄幼虫在树上为害时将局部枝条及叶片吐丝结成网幕状，在网内取食叶片。因此，在幼虫网幕期（分别在每年的5月中旬至6月上旬，7月中、下旬，9月上、中旬）人工剪除网幕，就可以达到直接防治的目的。人工剪网防治是一种最环保、最直接和成本最低的防治方法，同时也是效果极为明显的防治手段。具体方法：在美国白蛾各代幼虫4龄前，每隔2～3天仔细查找一遍美国白蛾幼虫网幕，发现网幕可用高枝剪将网幕连同小枝一起剪下。剪网时要特别注意不要造成破网，以免幼虫漏出。剪下的网幕必须立即集中烧毁或深埋，散落在地上的幼虫也应立即杀死。利用老熟幼虫有沿树干下树寻找潜伏场所进行结茧的习性，在树干上人为设置结茧场所，引诱其潜伏，然后予以消灭。此方法适用于防治困难的高大零星树木。具体操作方法：发现有美国白蛾为害的树木，在老熟幼虫开始下树时期（6月下旬，8月中旬，10月上旬），在树干离地面1～1.5m处，用谷草、稻谷、麦秸、杂草或草帘等，在树干上围绑起来，要求上松下紧，诱集下树老熟幼虫在其中化蛹。化蛹期间如果虫口密度过大时，每隔7～9天换一次草把，将换下来的草把集中销毁。喷药防治主要是在人工防治的基础上，在每一代幼虫破网前后进行。药剂选择主要以对环境和人、畜无害的仿生、生物和植物性杀虫剂为主。喷药可根据发生区域分地面喷药和飞机喷药进行。喷药地点：地面喷药主要适用于较低片林、村庄内零星分布疫点，以及飞机不便作业地点。喷药器械：地面喷药器械主要有担架式喷雾器、车载式高压喷雾器、背负式喷雾器和喷烟机等。喷药时根据不同情况选择适宜的喷药器械，担架式主要适合于村庄内零星疫点的防治，车载式高压喷雾器主要适合于绿化道两旁林木发生的美国白蛾防治，背负式喷雾器主要适合于较低的花草、绿化带上发生的美国白蛾防治，喷烟主要适合于林分密度较大的片林中发生的美国白蛾防治。喷药方法：对有网幕的树进行两次喷药；对剪除网幕的进行补充喷药；对发生的疫点周围扩大20～30m范围的林木进行预防喷药。喷药时要求必须均匀周到，不能漏喷，不留死角。药剂选择：在美国白蛾防治上，药剂选择除了选择使用环保、高效和无公害药剂外，还要根据美国白蛾幼虫发育阶段选择长效或速效的药剂。在进行大面积预防或提前喷药及幼虫破网前要选择药效比较长的药剂，在幼虫破网后要选择速效药剂。目前美国白蛾防治中选用药剂和使用浓度：20%除虫脲悬浮剂4000～5000倍液、20%米满胶悬剂1500～2000倍液、25%灭幼脲三号胶悬剂1500～2000倍液、杀蛉脲2000～3000倍液、森得保2000～3000倍液、1.8%阿维菌素4000～5000倍液、1%苦参烟碱1000～1500倍液、1.2%苦·烟乳油1000～2000倍液喷药。选用1.2%苦·烟乳油，在清晨或傍晚气温产生递增时，采用苦·烟乳油：柴油为1：10或1：20的比例喷烟；另外，可使用美国白蛾核型多角体病100倍液；或1.6万单位BT剂1000倍液。飞防地点：飞机喷药防治主要适合于大面积片林、绿色通道和河渠路堤两侧等村庄外窗口地带的林木。飞防机型：目前在林业有害生物飞防中使用的飞机机型有R44直升机、S-300型直升机、蜜蜂轻型飞机、运五型固定翼飞机、B-3105型通用飞机等。目前飞防中运用比较多的是前3种轻型飞机。与其他飞机相比较，轻型飞机在喷药防治中的优越性表现在：一是硬件条件容易满足。轻型飞机机动灵活，作业方便，受机场、跑道等硬件条件限制小，一般就地找一个净空比较好的学校操场，或两侧比较开阔的一段200m长公路，就可以满足轻型飞机的起降点条件，不需要远距离寻找机场或专门修建跑道。二是作业效率高。由于飞机起降点与作业点在同一地区，受气候环境影响小，且空飞路径少，机身小巧灵活，作业点转弯半径小，作业效率高。三是作业准确度高。轻型飞机一般均带有GPS导航仪，不需要人员领航。作业时飞机操作人员根据地面GPS定位图，与机载GPS相对应，进行定点喷药作业，作业准确度高，误差小。四是防治效果好。轻型飞机飞行高度低，一般在树上5～7m，加上旋翼卷风带动树叶翻转，喷施的雾滴均匀，且不限叶正面，叶背面也有雾滴，防治效果好。五是轻型飞机机场与作业点较近，喷药存在问题，可以很快反馈到起降点，及时进行补喷。前期准备要从六方面着手：一要准备GPS定位及绘制飞防作业图。根据调查的虫情及飞防条件，对计划飞防的作业点进行GPS定位，定位结束后，将所有作业点进行绘图，一般以当地行政图为底图在其上绘制飞防作业图。在图上准确绘出每个作业点的形状、位置，标明GPS定位经纬度和作业点面积，以及飞防作业区电塔、高压线、高大建筑物、养鱼、养虾池等位置，并在图上根据每架次飞机作业面积编排好作业架次和顺序。二要制定实施方案。飞机喷药作业是一项大规模林业有害生物防治工作，为了确保飞防工作顺利进行，保障飞行作业安全，提高防治效果，每一次飞防作业都要根据情况制定飞防实施方案，确定飞防任务、飞防作业区、资金预算、采用飞机机型、使用药剂、地勤服务和保障等方面工作措施。三要租赁飞机和采购药剂。飞防物资的采购招标也是一项比较繁琐的工作，为了确保飞机和药剂及时到位，飞防作业能够按时进行，要提前对飞防物资进行采购。根据飞防实施方案确定的飞机机型和飞防药剂类型，在飞防前一个月进行提前采购。四要选择飞机起降点。不同作业机型选择的飞机起降点不同，轻型飞机起降点条件要求较低，在飞防作业区附近一般能够就近找到满足起降条件的场所。如四周空旷，面积约4000m2的学校操场，或两侧开阔约长200m的宽公路，均能满足轻型飞机的起降。为了提高飞防效率，缩短空飞路径，可根据飞防作业区的大小、远近，选定多个起降点，飞防时可就近起飞作业，节约飞防时间和成本。五要进行飞防公告。飞防作业区一般在郊外，由于这些地方往往有养鱼、养虾养殖场所以及放风筝等情况的存在，为了避免引起纠纷和保障飞行安全，在飞防前要以当地政府的名义在飞防作业区各村街和养殖场所张贴飞防公告，告知群众飞防的时间、范围、使用的药剂以及注意事项。六要进行飞防作业参数测定。由于不同的机型及装载喷药设备不同，所以喷药时的参数不同，为了计算每架次飞防面积、调整喷雾雾滴，必须在飞防开始前对飞机飞防作业参数进行精确测定。飞机飞防作业参数主要有喷管长度、雾线角度、喷药时间、喷药压力、作业高度、作业速度等。通过对这些参数的测定，计算每架次飞防作业面积，根据每架次作业面积和每亩用药量，确定每架次的加药量和加水量。飞防药剂：飞机喷药作业主要用于有害生物除治和大面积预防，因高空作业，雾滴容易飘散，在飞防药剂选择上主要以药效较长、对环境污染小和对人、畜无害的药剂为主，为了提高雾滴沉降速度，在加药时配合加食盐，一般每架次加盐1kg。飞防作业一般包括作业保障、后勤保障、药滴测试、防效调查四方面内容。飞防时的地面作业保障直接影响飞防作业进度。由于飞机喷药作业受风、雨、雾、气温、气压和高空能见度等客观因素的影响，所以飞防作业时间一般选择在早晨5～9时、下午16～18时，一天当中真正有利于飞防作业的时间为6个小时，当飞防作业面积较大，虫情较紧时，如果地面作业保障跟不上，就会大大影响飞防作业进度，错过最佳防治时期，影响防治效果。因此，在飞防时要充分做好地面保障。地面保障主要是加药、加水，作业保障人员一般分组轮流进行，每组按加药、加水进行分工。为了提高加药、加水速度，在飞机起飞作业后，就开始准备下一架次的药剂和水，保证飞机一降落立即开始加药和水，不因药和水配制耽误时间。一般正常的加药和加水时间为3～5分钟。药和水准备好后要盖好，以防飞机降落时带起的扬尘弄脏了药和水，堵塞喷头。飞防作业后勤保障主要指飞机安全保障、起降点秩序维护和飞防物资的供应等工作。后勤保障组按分工可分作业区安全保障、起降点秩序维护和飞防物资供应三个小组。飞机安全保障主要是飞行作业区周围放风筝、高空气球等可能影响飞行安全活动的事前勘察和排除。由于飞机喷药对大多数作业区的群众来说是一件新鲜事，围观群众较多，所以要做好起降点秩序维护，要用红色警戒绳划出飞机起降区，派专人负责维护秩序，保证观看群众和飞机起降安全。为了保证飞防物资及时、足量到位，后勤保障组要根据需要及时补充飞防用药和油及其他物资，并根据作业情况，在向下一个起降点飞机转场前把飞防物资及时送到。飞防喷药是现代较高水平的机械喷药作业，由于是树上部较高位置喷药，对喷药雾滴的测试，除了在喷药前测定外，还要在喷药作业区设置标准地进行测试，根据测试情况，按照喷药要求对喷头和压力进行调整，以达到喷药雾滴大小和数量要求。具体方法：在作业区内的四个角和中间设置5个点，每个点在树下部挂置2～3个硬质黑纸板，飞机喷药过后，检查黑板上雾滴大小，并测量每平方厘米内的雾滴数量。一般以低量喷药为好，雾滴直径0.8～1.0mm，雾滴数量为每平方厘米2滴以上。防效调查是对作业质量和药剂药效的检查。一般在标准地内设10株标准株，每个标准株设置1～3个标准枝（标准枝长50cm）。飞防前调查并记载有虫数及虫口密度，飞防后7日、11日和15日，分别调查标准枝上的虫口数，统计虫口死亡率。飞防条件是指作业区条件和气象条件。作业区条件要求：飞防片林面积应在666.7hm2以上，且郁闭度达到0.5以上；飞防绿色通道、河渠路堤两侧林木宽度不能小于一个喷幅；作业区内不存在高塔和高压线。气象条件要求：为了保证飞行安全和飞防效果，风速超过5m/s时不能喷药作业；由于降雨冲刷作用，影响药滴在树上着固，根据气象预报在6～12小时内有降雨时不能喷药作业；气温较高、上升气流较强时，雾滴容易飘失，不容易着落，气温达30°C以上时不能作业。天敌防治与病毒防治一样，与喷药防治相比较而言，控制时间长，且防治靶标专一，不会对天敌造成伤害，是一种较经济、防治效果较好的防治方法。美国白蛾天敌有寄生蜂、寄生蝇和捕食性天敌多种，目前能够大量繁育生产，并在防治中大量运用的主要有寄生蜂——周氏啮小蜂。放蜂时期：周氏啮小蜂是美国白蛾蛹寄生天敌，在田间放蜂时间的掌握是关键，一般选择在老熟幼虫期和化蛹初期进行放蜂。放蜂条件：利用周氏啮小蜂防治美国白蛾，要选择在美国白蛾低虫口密度的地区释放，才能达到较好防治效果。放蜂数量：根据调查的美国白蛾基数，确定防治区的放蜂数量，一般周氏啮小蜂与美国白蛾数量为（3～5）：1，为了提高放蜂效果，可采2次放蜂的方法进行放蜂，即在老熟幼虫期和化蛹期分2次放。放蜂方法：确定放蜂地点和数量后，放蜂时间一般选择在晴天上午9时以后。放蜂时把繁殖周氏啮小蜂的蚕茧用细铁丝或细绳挂在靠近树干树枝上，或用图钉固定在树干上即可。美国白蛾作为世界性检疫害虫，自1979年传入我国辽宁省丹东市后，经过多年的扩散、蔓延，目前已在我国7个省、市发生，对当地的经济、生产、生活产生了较大影响。经过近几年大力防治，已取得了明显防治效果。美国白蛾防治就是一场林业有害生物防治“攻坚战”，这场“战役”除了把握好战术措施外，还要在战略上到位。美国白蛾是检疫性林业有害生物，同时也是我国两种极度危险性林业有害生物之一。防治美国白蛾是一项保护生态环境的社会公益活动，属于社会防灾减灾范畴。美国白蛾防治需要投入大量的人力、物力，动员全社会力量，采取坚决措施才能取得真正的防治效果。因此，按照《森林病虫害防治重要条例》的有关规定，美国白蛾防治必须突出政府主导作用，由政府统一领导，统一组织，把美国白蛾防治工作纳入各级政府的防灾、减灾计划，统一部署，可以从以下五方面具体实施。一是成立防治指挥部。指挥部由各级政府逐级建立，以政府主要领导牵头，财政、林业、农业、园林、水利、交通、教育、房管等相关部门参加，确定各相关部门的责任和任务，制定应急组织方案。二是签订防治责任状。按照总体防治指标，划分防治目标和任务，并以此逐级签订上级政府与下级政府、政府与相关部门责任状。责任状明确签订单位的防治任务和完成的防治目标，并明确完成目标或未完成目标时的相应责任。三是组织发起防治动员活动。美国白蛾防治开展前，由政府组织各相关单位领导和下级政府领导参加的防治动员大会，安排部署美国白蛾防治前期准备工作和防治期防治开展工作，以及全年防治方案和任务。四是政府牵头，进行督导检查。根据美国白蛾防治工作需要，由政府牵头，组织相关部门人员，在防治期巡回督导检查各地防治工作开展情况。五是防治资金纳入本级政府财政预算。根据美国白蛾防治“属地管理、分级负责”的原则，美国白蛾防治资金要纳入本级政府财政预算，做到优先安排，重点保证。美国白蛾主要发生在村庄，在防治上要充分发挥和利用基层组织的中坚力量作用，建立县、乡、村三级专业防治体系，形成组织有效的快速反应防治机制，这样在防治上才能做到及时开展，有效防治。防治网络的建立可以在县级林业部门建立防治技术服务队，负责技术指导和人员培训的基础上，按照“乡自为战、村自为战、户自为战”的防治战略，以乡、村、户为单位，建立防治体系。在乡级建立2～3个防治专业队，并成立防治组织机构，负责防治专业队统一调配和村防治工作的督导。在村级设置查防员，成立防治小分队，对村内防治任务按片进行责任划分，由责任人每天对责任区进行巡查和防治。进入防治期后，由乡防治专业队根据查防员上报的查防情况，调配防治专业队逐村进行规模化防治。村级防治小分队主要负责村范围内零星疫点除治，村查防员主要负责村内美国白蛾发生情况的查防和上报，以及简单防治（剪网）。县、乡、村三级专业防治网络的建立，形成了“技术一线指导、防治多点开展、查防专人负责”的美国白蛾防治体系，对控制美国白蛾疫情的发生及蔓延起到积极有效的作用。根据美国白蛾第一代幼虫虫口密度小、网幕期长、发生疫点比较零散、且危害林木部位较低，有利于防治的特点，坚持以“一代为主、地面为主”作为防治美国白蛾的整体策略。第一代美国白蛾防治成效的好坏，直接关系到后期防治基础，影响到全年防治成果。第一代美国白蛾防治，从越冬蛹开始，在蛹期、成虫羽化期、幼虫期和幼虫化蛹期等美国白蛾发生的各个阶段，先后利用挖蛹、灯光诱杀、剪网幕、地面喷药、释放天敌等多种措施，进行各虫态全覆盖，多环节连续防治的手段，实现“全覆盖、多措施、不间断”的防治战略，重点突出地面防治工作，地面防治开展坚持以树为目标普遍喷药预防，以疫点为中心扩大范围二次喷药，以普遍查防为主消灭死角死面的措施，达到对第一代美国白蛾普遍防治的目的。在美国白蛾防治工作中，资金的保障是防治成功与否的决定性因素之一。美国白蛾防治投入不能单纯依靠国家财政资金，应制定完善的资金投入政策，依据“谁经营、谁防治”的原则，以林主自筹防治资金为主，省、市、县、经营单位（林主）按比例配套投资，建立多元化、长效型的防治资金投入保障体系，使美国白蛾防治工作建立在可靠的物质基础上，全面提高美国白蛾防治能力。群众对美国白蛾了解得越多，参与得也就越多，美国白蛾防治就有了良好的群众基础，有了基层广泛力量的支持，防治工作就更容易开展。美国白蛾基层防治宣传，通过电视、报纸等新闻媒体，利用村广播、黑板报、明白纸等形式，大力宣传美国白蛾发生危害状、识别特点，以及美国白蛾危害的严重性和防治工作的重要性，让群众深入了解美国白蛾对林木、人类生活，乃至生态环境带来的危害和影响。通过深入的宣传，消灭群众对美国白蛾可防可不防的消极思想，树立防治美国白蛾的紧迫感和责任感，增强群众参与美国白蛾防治的积极性和主动性，进而形成美国白蛾群防群治的良好局面。

节能政策是为提高能源利用率、控制能源消耗和减少污染物排放而制定的一系列政策，是防治大气污染的根本政策之一。国务院在1986年颁布了《节约能源管理暂行条例》和《中国技术政策·能源》蓝皮书，要求把节约能源作为在国民经济调整时期挖潜、革新、改造的重点来抓，并提出了切实加强节能研究，开发和推广节能新技术、新工艺、新设备和新材料，加速节能技术改造，调整高耗能工业产品结构，降低能源工业自耗能比重等一系列技术政策。这些政策，为我国大气污染排放的减少已起到了积极的作用。节能是我国经济和社会发展的一项长远战略方针，也是当前一项极为紧迫的任务。为推动全社会开展节能降耗，缓解能源消耗，建设节能型社会，促进经济社会可持续发展，实现全面建设小康社会的宏伟目标，我国制定了适应中国国情的专项节能规划。作为一个迅速崛起的发展中国家，面对经济增长和环境保护的双重压力，为了在不牺牲环境质量的条件下实现经济持续增长，逐步优化能源结构、提高能源效率、改变能源的生产和消费方式，开发利用清洁新能源是必然的选择。2007年中央出台的首个《煤炭产业发展政策》指出，将继续鼓励大型煤炭企业的发展，同时将在山西、陕西等煤炭资源丰富的省（区）建设13个大型煤炭生产基地，并严格了新建煤矿的产业准入标准。《煤炭产业发展政策》还指出，国家将限制在地质灾害高易发区、重要地下水资源补给区和生态环境脆弱区开采煤炭。同时，禁止在自然保护区、重要水源保护区和地质灾害危险区等禁采区内开采煤炭。此外，在安全生产方面，《煤炭产业发展政策》提出落实企业安全生产责任制，严禁超能力、超强度、超定员组织生产，建立和完善灾害预防和应急救援体系，实行安全标志管理制度；在贸易与运输方面，提出建立健全煤炭交易市场体系，完善煤炭价格市场形成机制，鼓励煤炭供、运、需三方建立长期合作关系，限制低热值煤、高灰分煤长距离运输；在劳动保护方面，提出建立和完善工伤保险制度体系，推广井下四班六小时工作制，降低工人劳动强度，建立健全职业病危害控制体系。《煤炭产业发展政策》对我国“深化煤炭企业改革，推进煤炭企业的股份制改造、兼并和重组，提高产业集中度，形成以大型煤炭企业集团为主、中小型煤矿协调发展的产业组织结构”将发挥重要作用。我国煤炭主要消费体为电力、钢铁、建筑材料。目前，煤炭消费占我国一次能源消费的69%，比世界平均水平高42个百分点。以煤为主的能源消费结构和比较粗放的经济增长方式，带来了许多环境和社会问题，经济社会可持续发展受到严峻挑战。由于我国的煤炭消费基本靠国内供应，是煤炭净出口国家，煤炭价格形成机制与国际上又有不同之处。因此，国内煤炭价格与国际煤炭价格走势并不完全一致。国内煤炭价格从1997年开始一路下跌，直到2001年才呈现反弹态势。2004年，缺煤问题开始凸现，煤价大幅上涨。2007年全国煤炭产量达到25亿吨左右，仍不能改变煤价持续上涨的局面。2008年初，受冰冻雨雪灾害天气的影响，煤炭运输受阻，煤炭价格大幅上涨，2月上旬达到高点，秦皇岛港发热量5500大卡/千克动力煤的平仓价格达到610～625元，创下历史新高，平均上涨了20%以上。2月中旬，受煤炭库存提高、运力增加以及煤炭消费淡季逐步到来，煤炭开始小幅回落，吨煤价格回调20元/吨左右，但仍然处于较高水平。1999～2008年煤炭行业平均价格及其增长率走势图根据海关统计数据，2007年中国出口煤炭5317万吨，进口5102万吨，纯出口215万吨。虽然我国煤炭供给越来越紧，但仍然是煤炭纯出口国。在我国煤炭出口的四大企业中，2007年神华公司的出口规模最大，达到了2557万吨。其次是中煤公司，出口规模达到了808万吨。另外两家山西煤炭进出口公司和五矿公司分别出口了504万吨、402万吨。中国的能源约70%是来自燃烧化石燃料，尽管政府保证企图减少国家对煤的依赖，生产与需求持续一同增长。2007年以来，煤炭需求旺盛。主要耗煤产品产量快速增长，带动了煤炭需求快速增长。铁路运输制约煤炭供应的格局有所缓解，但增量集中在大秦和神朔黄线上，部分地区运输瓶颈制约依然存在，尤其是炼焦煤外运通道石太线和侯月线的运煤增量十分有限，制约了炼焦煤供应。全国动力煤供应仍然是“买煤的不愁买，卖煤的不愁卖”。近年来，随着世界经济的发展，各国在能源的生产、消费和贸易方面都存在不同程度的增长。在石油、天然气等相关能源资源价格长期居高不下的形势下，世界对原来逐步疏远淡忘的煤炭资源又给予高度关注和重新认识。特别是随着洁净煤技术、煤炭液化、气化技术的成熟以及节能技术和燃煤热能转换效率的提高，世界对储量大、分布广、成本低的煤炭资源给予了更多的厚望。中国、印度、美国等许多能源大国都在不同程度地逐步将能源重心向煤炭倾斜，使得近年来世界煤炭生产、消费和贸易呈明显增长态势。煤炭产量：据世界煤炭协会WCI统计，在过去的20年中，全球煤炭产量增长了38%。从全球煤炭产量增长的整体来看，亚洲增长最快，欧洲有所下降，而北美保持稳中有升。WCI预测到2030年全球煤炭产量将达到70亿吨（其中增量的一半来自中国），其中动力煤将达到52亿吨，炼焦煤达6.24亿吨，褐煤将达12亿吨。煤炭消费量：据世界煤炭协会WCI和英国石油公司BP预测，自2002～2030年全球煤炭消费平均将以每年1.5%的速度递增（其中褐煤每年递增1%，炼焦煤的需求将以每年0.9%的速度递增）。世界上煤炭最大的消费市场在亚洲。海运煤炭贸易量：据世界煤炭协会WCI统计，海运贸易占世界煤炭贸易总量的90%左右。在国际煤炭贸易中，由于运输成本占相当的比例，所以国际煤炭贸易自然分成太平洋和大西洋两个板块，大西洋板块进口国主要是西欧各国，特别是英国、德国和西班牙等；太平洋板块主要由亚洲煤炭进口国和地区组成，尤其是日本、韩国和中国台湾，太平洋市场约占全球煤炭贸易的60%。近年来，由于煤炭生产和洁净煤技术的进步和成熟，增强了煤炭在能源市场上的比较优势，因此，发电用煤需求急剧增长，尤其是以煤为主的中国和印度的工业化步伐加快促使煤炭产量剧增，煤炭生产的国际化和海运成本的下降又加速了煤炭国际贸易的发展。据相关资料表明，煤炭中长期供需形势及价格走势的主要影响因素有两方面，一方面，房地产开发、重工业建设、灾后重建和钢铁产品出口是拉动煤炭需求的四大主力引擎，房地产开发和重工业建设两个建设集群对煤炭需求的拉动力度较大。另一方面，主要耗煤产业的煤炭消费增长趋缓，其中钢铁行业节能效果不彰，是煤炭消费量增幅回落幅度较小的原因之一。2009年煤炭供需形势将有所好转。从煤炭价格来看，2007～2008年前两季度，尽管不同煤种价格走势略有差异，但我国煤炭价格总体上呈现小幅上涨。从2008年第三季度以来，特别是进入第四季度，尽管冬季用煤一向是高峰时期，但宏观经济下行速度呈现加快趋势。受国际金融危机的影响，我国经济增长下降将会直接影响煤炭需求。2009年将会呈现一定程度的供给过剩。受金融危机影响，国际市场煤炭价格偏低，可能一些南方经济发达地区放弃采购国内煤炭，而转向采购国际市场上的煤炭，减少了国内煤炭市场的需求。同时，煤炭价格下调可以缓减下游企业的经营压力，如电力行业。2009年我国经济增长放慢，煤炭供需宽松。

长城润滑油前身是始建于1958年的北京煤炼油示范厂，是中国首个含氟润滑油脂的生产和研制基地；1982年成立长城高级润滑油公司，开始进入市场化发展轨道；2003年，中国石化润滑油公司与长城润滑油公司合并，使得长城润滑油成为中国石化润滑油业务主体。目前，中国石化润滑油公司集润滑油生产、研发、储运、销售和服务于一体，具备120万吨/年包装油生产能力，是目前国内最大高档润滑油专业产销集团，是全球第四大润滑油企业。长城润滑油品牌价值从1998年的1.5亿元逐年攀升至2008年的112.68亿元，2004年位居全国500强第68位，是润滑油行业唯一入选品牌。连续5年稳居中国润滑油行业第一品牌的位置。近年来，国内汽车工业等相关行业的快速发展，国外企业大举进入中国市场，促使国内润滑油市场的消费者构成、市场结构、消费模式、营销网络等发生了根本性变化，长城润滑油在市场竞争中遇到了许多新的问题，原有的竞争优势受到了挑战。润滑油行业是中国最早实现完全市场化运作的石化行业。国外大公司都力图通过润滑油业务树立自身品牌形象，为今后进入其它石化领域进行消费者认知上的准备。从1994年起，美孚、壳牌、埃索、加德士、福斯、日本石油等十几家跨国石油公司开始在中国投资建立20多家专业调合厂，总调合能力达到80万吨/年。国外石化企业依托雄厚的资金实力、灵活的营销手段，重点进行高端润滑油市场开发和品牌建设，逐步建立国外品牌质量更高、品质更好的品牌形象，目前占据着中国高档润滑油市场大部分的市场份额（图1）。图1 进口品牌在中国市场占有率面对广阔的市场空间，各润滑油企业纷纷引进先进相似的生产设备和生产工艺，不断增强竞争能力。从2002年开始，昆仑、统一开始进行大范围技术改造，先后引进自动化生产设施、管道调合设施，加强生产、物流的管理。竞争对手引入的新生产设备在工艺控制、生产柔性等方面达到长城润滑油的水平，使长城润滑油在生产体系方面建立的优势地位被削弱。近年来，中国润滑油市场向高档化发展的速度越来越快，SG、CF-4以上产品销售量快速成长，已逐步成为城市车用润滑油的市场主流。当润滑油市场主导产品开始向SG以上级别转移时，长城润滑油同类产品却在市场上表现不佳。长城润滑油渠道价格体系日益混乱。由于长城润滑油所建立的销售网络主要集中在批发流通领域，在长城润滑油不断增长的销售压力和长期反复的促销活动刺激下，产品销售价格变的十分混乱，经销商之间恶性竞争变得十分普遍。长城润滑油现有销售渠道主要是覆盖加油站、润滑油专卖店、零售店等传统销售终端，对日益兴起的汽车修理厂、汽车养护中心等销售网络覆盖能力严重不足。一是依托于中国石化，可在资金、科研、渠道等方面得到强力支持。二是掌握基础油资源，基本上能够实现基础油的供给自足，价格相对比较优惠。依托于燕山石化、高桥石化、茂名石化、荆门石化四大基础油生产基地的稳定供给，长城润滑油在I类基础油上基本实现了80%以上供给自足，质量上是过硬的。三是渠道优势。在长期发展中，长城润滑油已建立覆盖全国的销售网络。从2004年7月起，中国石化润滑油公司实施渠道整合，把旗下原销售渠道全部移交中国石化销售公司统一管理，采取总代理的营销管理模式，利用销售公司拥有的19个省级石油公司（其中9个地处沿海经济发达地区，2.8万座加油站遍布全国各地），形成了庞大销售网络。目前，中国石化润滑油公司以北京、上海、茂名、重庆、武汉五大营销中心为基础，形成了纵横南北、横贯东西、覆盖全国的营销网络。四是以中高档产品填补国内市场空白，树立起较高的品牌知名度和忠诚度。改革开放后，国内对SE、CD级别的中高档小包装润滑油需求开始出现。当时国内其他企业还停留在SB、SC、CA、CB等较低级别的散装油品生产上，国外品牌只能以产品进口的方式进入中国市场。长城润滑油抓住这一商机，率先进行高档小包装SE、CD产品的生产，填补国内市场的空白。20世纪90年代以来，长城润滑油依托在这两个产品上树立的优质形象，实现了稳定发展，基本上树立起“国货精品”、“质量可靠”的品牌形象（图2）。图2 品牌产品总体满意度对比（得分）五是拥有较高的市场占有率。2002年，中国石化润滑油公司对旗下分散经营的润滑油品牌实行统一管理，集中资源打造强势长城品牌。在完成润滑油业务专业化重组后，长城润滑油市场销售量稳步上升，2003～2007年，年销量由99.67万吨逐年提升到131.61万吨，稳居中国市场第一位，其中中档产品市场占有率达到40%。六是合理的生产布局。目前，长城润滑油已在全国建立9个生产基地，分布在以北京、上海、武汉、广州、重庆为中心的地区，布局比较合理。一是长城润滑油尽管有比较高的品牌知名度，但整体品牌形象不足，消费者普遍认为长城润滑油只是国产第一品牌，与壳牌等国际品牌相比，仍有一定差距。特别是在高档润滑油市场上，长城润滑油的认同程度仍然比较低（图3）。二是终端影响力不足。尽管长城润滑油建立起覆盖全国的销售网络，但长城润滑油对渠道的掌握更多集中在一、二级分销商上，在终端市场上更多的是依靠分销商进行开发和维护，长城润滑油对终端缺少足够的影响力，与国外品牌存在比较大差距（表1）。图3 国内各大品牌知名度比较大众消费者市场（CMMS）高端消费者市场（H3）排名品牌消费者份额（%）品牌消费者份额（%）1壳牌20.04壳牌31.752美孚18.46美孚14.523嘉实多9.68嘉实多11.264长城8.14长城10.11表1 2006年车用润滑油市场消费者份额第一，市场快速发展。近年来，我国汽车特别是乘用车发展迅速。2007年全国汽车年销量超过800万辆，汽车保有量突破5000万辆。2008年上半年汽车产销量双双突破500万辆，分别达到519.96万辆和518.22万辆，同比分别增长16.71%和18.52%。其中，私人购车快速增加，特别是私人载客车辆增长迅速，成为推动市场发展的主要动力。专家预测，轿车销量每增加100万辆，每年就会增加润滑油需求9.1万吨。2007年，中国市场仅车用润滑油年需求量就在200万～300万吨。跨国咨询公司克莱恩发布的《2009中国润滑油市场上的商业机遇》报告指出：中国润滑油市场在未来5年内将以每年10%的速度增长，预计到2020年，中国的润滑油消费量将超过美国。第二，消费者对国产品牌逐步认同。2002年以来，长城、昆仑等国产品牌不断进行品牌建设，在整个国产品牌的共同努力下，润滑油消费者对国外品牌的盲目崇拜现象得到了明显改变，越来越多的消费者开始认同国产品牌。第三，新兴终端的兴起给长城提供了同等机会。汽车连锁维修企业、养护企业作为新兴的销售终端，将在润滑油销售中发挥越来越重要的作用，从而使原有的市场格局发生根本性改变，使得众多润滑油企业重新站在同一条起跑线上，为长城润滑油赶超国外品牌提供了机会。首先，汽车制造商、设备制造商将掌握更大的发言权。由于汽车制造商、设备制造商指定用油、推荐用油对消费者有着越来越重要的影响，这些设备制造商在与长城润滑油的合作中将掌握越来越大的发言权。其次，新兴终端的兴起改变了润滑油渠道结构。终端地位的突出，特别是随着连锁型汽车养护、维修企业的日益发展，润滑油的销售将越来越受制于终端企业，长城润滑油原有的以加油站、专卖店、零售店为主体的渠道作用将日益减弱。同时，渠道扁平化的要求也使得长城润滑油原有的四级渠道模式受到挑战。再次，国际石油价格持续居高不下。石油价格持续走高以及国内成品油价格的持续上涨，使得基础油供应形势日益紧张，长城润滑油在外购尤其是Ⅱ类及以上的高档基础油资源上将遇到更多阻力。最后，市场竞争日益激烈。随着中国石化市场的全面放开，越来越多的国际石化企业将进入中国市场，相应地，更多具有雄厚实力的润滑油品牌也将加入竞争者行业，国内的润滑油市场竞争将成为国际化企业之间的竞争。主要包括：为汽车商提供原厂装填用油，即汽车出厂时所加注的润滑油，虽然只是一次性使用、数量较少，但对引导消费者今后对润滑油的选择有重要意义；提供汽车制造商服务站用油，即为汽车制造商所建立的特约维修服务站体系提供专用油品，这部分产品的使用量比较大，也是各润滑油企业争夺的焦点；获得汽车制造商的用油品牌指定，即取得汽车制造商在其车辆维护要求中明确指定或推荐使用长城润滑油的权利；建立全面的战略合作关系，包括为汽车制造商提供全面、系列的润滑产品，为其设计成本最低的油品供应、采购、使用方案，联合进行针对性的产品开发等。营销渠道调整的重点是将长城润滑油现有的以经销商（批发商）为重点的渠道结构转变为以终端商特别是汽修厂等终端为重点的渠道结构。将营销网络建设的重点从区域性批发网络建设转移到零售终端建设，加强终端掌控和信息沟通力度，搭建一个可以直接服务于用户，能够快速沟通信息的平台，以保证各项营销政策的顺利实施。针对销售终端多样性的局面制订差异化的销售政策，转变现有批发商职能。第一种是引导批发商转变为配销商，生产厂家、配销商和销售终端之间通过契约或合资等方式建立一种产销同盟，由配销商承担日常销售和物流配送职能，厂家则专注于市场开发和市场维护。第二种是与资金、管理实力强的经销商合作，利用其原有客户群，依靠产权合作或加盟连锁的方式，组建以合作经销商为龙头的专业换油维护网点联盟，将批发商转变为连锁企业。第三种是全程协助经销商实行深度分销。主要是通过设置市场协销人员，指导、协助经销商进行所属区域内的终端网络的开发和维护，借助经销商的力量实现在广大城乡、农村市场的深度开发。第一种方式，长城润滑油可自行投资建立自有品牌的汽车维修养护企业。这种方式的优点是长城润滑油可以实现对汽修企业的完全控制，使之有效服从于长城润滑油的整体发展需要，同时可以取得比较高的经营利润。其缺点是长城润滑油进入并不熟悉的新业务领域，缺少相关的人力资源和管理经验，并且独资兴建的成本投入比较高，扩张的速度比较慢。第二种方式，长城润滑油以资金投入参股的方式，介入其他汽车连锁养护企业，以股东形式出现。这种方式的优点是可以利用其他企业的已有资源，资金投入比较少；可以由更专业的人士经营管理，避免长城在不熟悉的领域竞争。但缺点是合作方之间会出现冲突。第三种方式，互相提供支持和帮助，以契约或共同利益为纽带进行合作。如长城润滑油提供产品、技术、服务上的支持，共同进行双方品牌的传播等。这种合作方式比较灵活，但缺点是控制力比较弱，特别是随着汽车养护企业地位的不断增强，当双方出现冲突时，长城润滑油的利益很容易受到损害。从长城润滑油的整体战略要求来看，进入汽车养护领域更多的是要解决未来长城润滑油在终端渠道的销售问题。因此，长城润滑油可以更多的采取参股方式，建立与汽车养护企业的合作，避免独自进入不熟悉领域的风险。长城润滑油在高档市场的品牌认知不足和品牌形象不高始终是制约其在高档市场实现快速发展的原因之一。在建立长城润滑油产业链的过程中，应当及时提高长城润滑油在高档市场的品牌形象。实施整合营销传播，通过持续稳定的向消费者传递长城润滑油的品牌和品质信息，扩大长城润滑油的品牌影响；与昆仑等国内品牌合作，共同提高消费者对国产品牌的认同，继续消除消费者对国产品牌的偏见；加强与终端合作，提高终端的推荐力度。通过有效的激励措施，如提供奖金奖励等，促使销售终端的汽车修理工进行长城品牌推荐；同具有品牌影响力的汽修企业合作，借助对方品牌形象扩大自身影响。

利用植物有益内生细菌进行植物病害生物防治和提高作物产量是当前农用微生物研究的一个热点。在我国，以植物有益内生细菌为主体的植物微生态制剂已经进入田间的农业生产应用，取得了良好的经济和生态效益。细菌在植物上发挥其功能的关键是细菌可以在作用部位很好的定殖。研究发现，在细菌与植物相互作用时，会引起该区域的氧自由基浓度的急剧升高；同时植物也会代谢分泌出一些酚类物质，这些物质都会产生氧自由基[1，2]。在该环境中定殖的细菌必须克服这种氧自由基对细胞的毒性。超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）是细胞抗氧自由基毒性的一种关键酶。SOD广泛存在于生物体内，催化O·2歧化为H2O2 和O2。按照结合的不同金属离子，SOD主要分为Mn-SOD、Fe-SOD和CuZn-SOD[3]。其中，Mn-SOD和Fe-SOD在细胞体内发挥功能，而CuZn-SOD定位在胞壁空间或者胞外以清除细胞膜外的氧自由基[4]。Bacillus cereus 905是本研究室从小麦体内分离获得的一株具有很好的促生和防病效果的细菌，在小麦体内及根围定殖能力强。为分析其定殖的分子机制，根据已公布的蜡样芽孢杆菌的全基因组序列及本实验室已获得的B.cereus M22的CuZn-SOD基因[5]，推测在B.cereus 905中也存在CuZn-SOD基因。本研究试图从氧自由基毒性角度探讨CuZn-SOD在细菌与宿主相互作用时发挥的重要功能。比对Genbank发表的几个B.cereus菌株的CuZn-SOD基因序列，根据两端高度保守的序列设计引物，利用PCR方法扩增B.cereus 905的CuZn-SOD基因全长（sodC）。构建表达载体pET-22b-sodC，转化Escherichia coli BL21（DE3），IPTG诱导表达，化学抑制法验证蛋白种类。以B.cereus 905的基因组DNA为模板进行PCR，得到了B.cereus 905的CuZn-SOD基因全长（sodC）。该基因由537 bp组成，编码179个氨基酸残基。根据该蛋白的分子量大小和pET-22b载体中的多克隆位点上游pelB前导序列和下游His-tag序列，预测表达出的蛋白大小约为23kD。序列比对发现其与B.cereus M22同源性高至96%[5]，BLAST结果也显示其与其他的几株蜡样芽孢杆菌的CuZn-SOD基因的同源性在90%以上。在sodC推定的179个氨基酸残基中，甘氨酸（G）含量最高，达到12.29%（22/179，mol/mol），且在序列中均匀分布。在推定氨基酸序列中，不含酪氨酸（Y）和色氨酸（W），这与其他CuZn-SOD序列特征一致。构建表达载体pET-22b-sodC，转化Escherichia coli BL21（DE3），IPTG诱导表达，NBT反相染色后，较未诱导样品相比，诱导后的细胞裂解液出现一条明显的亮带，表明该基因表达出的蛋白表现出SOD活性（图1）。SOD酶活测定也发现诱导后细胞裂解液的SOD酶活有了显著的提高，化学抑制法得出诱导出的SOD蛋白经KCN和H2O2处理后，其活性受到很大程度上的抑制，而氯仿/乙醇对其活性没有影响，确定了诱导表达出的蛋白为CuZn-SOD（图2）。Figure 1 Enzymatic activity tests of E.coli BL21(pET-22b-sodC) by Native-PAGEFigure 2 Identification of CuZn-SOD with chemical inhibitant methods超氧化物歧化酶普遍存在于所有的需氧生物中，从最低等的原核生物到高度复杂的人脑，都存在SOD的防御反应。B.cereus 905是一种植物内生细菌。有数据发现在细菌与植物互作及植物体内都可能有超氧阴离子的存在。B.cereus 905很可能依靠其CuZn-SOD的活性清除胞外的氧自由基以保证该细菌可以在植物体内很好的定殖。作为非病原菌的植物内生细菌，CuZn-SOD可能在其侵入及定殖过程中扮演着重要角色，更明确的结论需要下一步基因缺失后的定殖能力的比较分析。

真菌病毒广泛存在于真菌中，其核酸类型多为dsRNA，也有少数为ssRNA。大多数真菌被侵染后不表现症状，但有些真菌病毒可以对寄主造成显著影响，如引致寄主真菌生长缓慢、菌落形态异常和致病力显著下降等，即弱毒现象（Hypovirulence）。由于真菌病毒在植物病原真菌间扩散可导致病原真菌群体出现致病力衰退。因此，与植物病原真菌衰退相关的真菌病毒在植物病害控制中有重要的作用。前期研究证实核盘菌Ep-1PN菌株的衰退与真菌病毒SsDRV（核盘菌致病力衰退相关病毒）有关。但是我们发现Ep-1PN菌株可以通过有性繁殖摆脱SsDRV的为害，而恢复生长和致病，通过RT-PCR检测，Ep-1PN菌株的子囊孢子子代不携带有SsDRV；在Ep-1PN菌株的菌核分离物中，也可以获得恢复正常表型的培养物，这些培养物或携带SsDRV或不携带SsDRV。这即表明，在自然界感染真菌病毒（SsDRV）的核盘菌仍然有可能摆脱SsDRV的影响。带毒真菌的这种脱毒作用对利用真菌病毒控制植物病害造成了潜在的风险。植物病原真菌周遍存在众多的微生物，它们是否对带毒真菌的脱毒作用目前并不明了。盾壳霉（Coniothyrium minitans）是核盘菌的重寄生菌，其所需的适宜温度与核盘菌的相似，随核盘菌生长而生长。我们推定盾壳霉可能对Ep-1PN菌株的脱毒作用存在一定影响。将核盘菌Ep-1PN菌株在PDA平板上于20℃培养2～4天后，形成小菌落，移走菌落中接种时遗留的Ep-1PN菌株的菌丝块，并在此部位接种盾壳霉ZS-1菌株的菌丝块，继续置于20℃培养7～10天。依据混合菌落边缘的特征将其分成4种类型：A.菌落边缘长出生长速度较快的核盘菌菌丝，出现的频率为16.3%；B.菌落边缘大部分是类似核盘菌Ep-1PN菌株的菌落，出现的频率为47.1%；C.菌落边缘大部分是盾壳霉ZS-1菌株菌落，出现的频率为28.8%；D.菌落边缘全部是ZS-1菌株的菌落，出现的频率为7.7%。对A型菌落，挑取核盘菌菌丝尖端进行继代培养。随机选择34株进行表型分析，测定其菌丝生长速度、致病力和观察其菌落形态。结果表明这些继代培养物均恢复为强毒力菌株的特性，称恢复菌株。这些恢复菌株的菌落形态正常、生长速度在1.7～3.0cm/天，其中17株培养物集中于2.2～2.4cm/天，8株培养物的生长速度大于2.4 cm/天。它们的致病力较强，病斑扩展速度在1.0～1.4cm/天之间，其中16株培养物的病斑扩展速度在1.15～1.3cm/天之间，有9株培养物的扩展速度大于1.3cm/天；而Ep-1PN菌株仅能形成微小的病斑，或不形成病斑。这些恢复菌株对SsDRV不具有抗性，与Ep-1PN菌株对峙培养后又重新被感染表现弱毒特性。对这些恢复菌株提取dsRNA发现大部分含有7.4 kb的片段，小部分菌株同时含有7.4kb和6.4kp的片段，还有一部分未检测出含任何dsRNA。未发现含有1.0kb或仅含6.4 kb，但不含7.4 kp片段的培养物。我们的研究证实核盘菌寄生真菌盾壳霉对Ep-1PN菌株摆脱SsDRV的影响具有一定的促进作用，盾壳霉促进Ep-1PN菌株摆脱SsDRV的影响的机理有待进一步研究。

真菌病毒缺乏体外传播途径，其传播仅能依赖寄主的繁殖进行垂直传播或通过菌株间菌丝融合（hyphal anastomosis）进行水平传播；多数感染子囊菌的真菌病毒不能通过有性繁殖传播，受菌丝不融合的限制，真菌病毒不能在与寄主菌株处于不同营养体亲和型的菌株间扩散。近年来，有些研究论文报道，感染不同种属，甚至不同纲真菌的病毒具有高度的等同性（identity），表明真菌病毒可能存在一种潜在的有别于菌丝融合的传播途径。核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）弱毒株EP-1PN分离自黑龙江佳木斯茄子病残体上，较正常菌株生长速度慢，菌落异常扩展，菌核产量低，致病性弱。前期研究表明EP-1PN菌株中含有3条dsRNA片段，大小分别为7.4kb、6.4kb和1.0kb，证实6.4 kb dsRNA片段与核盘菌Ep-1PN菌株毒力衰退紧密相关；对该dsRNA片段进行了cDNA克隆和序列分析，证明其可能为真菌病毒SsDRV（核盘菌致病力衰退相关RNA病毒）的复制体形式。雪腐核盘菌（S.nivalis）是核盘菌的近缘种，其Let-19菌株分离自湖北省神农架发病莴苣。在PDA培养皿中，将核盘菌与雪腐核盘菌对峙培养，两菌落接触后，形成典型的坏死带（菌丝不融合所致）。我们将Ep-1PN菌株与Let-19菌株于20℃对峙培养，当两菌落接触后，自Let-19菌株的菌落边缘挑取菌丝尖端移至新的PDA平皿中培养，发现Let-19菌株继代培养物的菌落形态发生了显著的变化，它们较正常的Let-19菌株生长慢，菌落异常扩展、致病力较弱，这些继代培养物的表型与Ep-1PN菌株的类似。将这些继代培养物与Let-19菌株对峙培养，同样可以促使Let-19菌株的表型发生显著变化。表明与Ep-1PN菌株接触后，Let-19菌株获得了具传染性的衰退因子。采用纤维素粉CF-11吸附的方法自Let-19菌株的继代培养物的菌丝中提取获得了大小为7.6kb和6.4kb的dsRNA片段。经过Northern杂交验证，证实其中6.4kb的片段为SsDRV的dsRNA。表明核盘菌Ep-1PN菌株中的SsDRV已经传染至雪腐核盘菌Let-19菌株。为了检测真菌病毒在跨种间传播的频率，我们将核盘菌Ep-1PN菌株与雪腐核盘菌Let-19菌株于PDA平皿上对峙培养，12天后在Let-19菌株的菌落边缘挑取4个菌丝块移至新的PDA平皿中培养，观察继代培养物的表型变化，若出现类似衰退症状的培养物，将用提取dsRNA的方法进一步鉴定和确认，只要4个继代培养物中出现1个感染SsDRV的培养物，即计算为传播成功。试验重复100次，共获得400个Let-19菌株的继代分离物。研究证实，在100个对峙培养的培养皿中，有29个培养皿发生了SsDRV成功传播的事件，即传播频率为29%。

黄瓜连作障碍的主要症状为根系生长受到抑制，吸收养分能力减弱，枯萎病等土传病害严重发生。导致黄瓜连作障碍的原因主要是土壤养分供应失衡，土壤中病原微生物、根结线虫增多，根系残茬及病原微生物产生的有毒物质积累。尽管连作障碍产生的原因很多，但主要原因来自土壤，其中微生物种群结构失衡是导致作物减产、土壤质量下降的主要原因之一。将丛枝菌根真菌，作为缓解连作障碍的有益菌株，利用筛选的合成有机物或菇渣为营养，与培养好的拮抗木霉制剂一起合成生物土壤添加剂，结合太阳能消毒土壤，从改善土壤养分促进养分吸收，抑制土传病害、分解或转化自毒物质，诱导抗性物质等方面，减缓连作障碍的发生。本研究组配制的生物土壤添加剂已在盆栽黄瓜和连作温室内应用，表现较好的抑菌防病作用。有必要对生物土壤添加剂克服黄瓜连作障碍的防病机制，特别是土壤微生物群落变化和诱导抗病性进行系统深入全面的研究。明确其促进植株生长，抑菌防病的机制，为合理利用生物土壤添加剂减轻连作障碍提供理论依据。供试生物土壤添加剂（Biologic soil amendment BSA）为天津市农业科学院植保所研制的一种由有机物、无机物及生防木霉菌和VA菌剂组成的混合物。生物土壤添加剂中含有机发酵肥60%以上，木霉菌剂的孢子数达106cfu/g，VA菌剂孢子20个/g，具有改良土壤，抑制病害的作用。木霉菌剂（Tr9801）为菇渣培养物含量为107cfu/g。黄瓜品种：津春2号，经25℃催芽露白后挑选发芽一致的种子播于营养钵内。供试土壤采自天津郊区北辰区日光温室，每年春秋两茬黄瓜，黄瓜枯萎病等土传病害严重发生的连作9年的重茬土。供试病原菌：黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum），天津市农业科学院植保所病害研究室保存。将F.oxysporum用PDA液体培养基25℃ 培养1周后，血球计数板镜检，将孢子悬浮液调整为106cfu/ml，备用。生物土壤添加剂分别按1%、3%、5%与土壤搅拌混匀，每营养钵装土400g，以不加添加物的连作土为空白对照。用枯萎病菌的孢子悬浮液浸泡已催芽的黄瓜种子30s，每钵3粒种子，每处理12盆，3次重复。播种后7天、14天、21天、28天调查黄瓜根际土壤微生物数量及区系。取根部样品，自来水强力冲洗后，用滤纸吸干，装入保鲜袋，放入-20℃低温冰箱中保存。土壤中微生物的分离采用土壤稀释分离法。土壤和根际真菌、放线菌、细菌分别以10-3， 10-5，10-7的稀释浓度，分别采用马丁氏培养基、改良高氏一号培养基和牛肉膏蛋白胨培养基进行分离。在26℃，28℃，30℃培养箱内培养6天、8天、10天，统计平板上的菌落数。对优势菌属进行鉴定并用平板对峙培养法测定对黄瓜枯萎病菌抑菌作用。不同处理根系的酶活性测定，过氧化物酶POD活性的测定，采用愈创木酚法；多酚氧化酶PPO活性的测定，参照朱广廉的方法，采用邻苯二酚为底物，测定525 nm处的OD值，以每分钟OD值变化0.001为1个酶活单位U；根系脱氢酶采用TTC法。根系酚类物质含量的测定参照Folin 试剂比色法。施用生物土壤添加剂后各种微生物数量明显上升，各处理间真菌数量变化不大，细菌数量明显增加。随施着用量增加，根际微生物总量呈上升趋势，细菌数量增多，放线菌的数量也呈上升状态。细菌和放线菌数量较对照增幅较大，真菌变化相对较小。各处理土壤细菌的优势菌株主要为假单胞菌属和芽孢杆菌属的不同菌株。枯草芽孢杆菌、假单胞菌可以拮抗黄瓜尖镰孢菌（Fusarium oxysporum），可减少土壤中的病原菌。真菌主要为半知菌类，是土壤中常见的类群，不同处理产生的真菌类群主要为木霉菌，其次是青霉菌、毛霉属、根霉属、镰孢霉属及曲霉属，其他菌属所占比例较少。优势菌中的青霉、木霉和毛霉对黄瓜枯萎病菌有不同程度的抑菌作用。土壤放线菌主要为链霉菌，其中优势菌为黄孢类群、灰褐类群、白孢类群及粉孢类群，放线菌大多可以分泌抗生素抑制病原真菌，添加剂处理中黄孢类群、灰褐类群较对照增加，并且这两类菌株对黄瓜枯萎病镰刀菌有较强的抑制作用。在接种后第7天达到酶活性高峰，随着病原菌的侵染，POD酶活性下降，生物土壤添加剂的各处理显著高于对照。根系PPO活性随着添加剂施用量的增加呈现上升，在接菌后7天出现明显的酶活高峰，之后各处理逐渐下降，添加剂各处理的酶活性一直高于仅接枯萎病菌的对照。根系脱氢酶的活性随着施用量的增加其活性增强，随着病菌的侵入各处理的根系活力均有所下降。植株根系防御酶系POD酶及PPO酶活性变化与生物土壤添加剂的抗病性有直接关系，即抗病性越强，其植株内这两种酶的活性越高。酶活性含量越高，变幅越小，其抗性越强。生物土壤添加剂的应用显著提高了根系脱氢酶的活性。增强了根主动吸收的能力，有利于植株的生长。在病原菌的侵入期至潜育期总酚含量逐渐下降，但施用添加剂处理其酚类含量始终高于对照，这可有效阻止病原菌的入侵，植株开始发病时，根系酚类物质含量显著增加。酚类化合物是由植物体内自身合成的一些具有抗菌作用的次生代谢物质。酚类物质在植株体内的含量会受到外源病菌的侵入而发生相应的变化。与启动自身防御体系有关，以此来抵抗病原菌的侵害。生物土壤添加剂防病机制复杂，还有待进一步研究。既有土壤微生物的调节作用，又有添加物的诱导抗病性。生物土壤添加剂对连作障碍的防治作用可归为：①土壤中有益微生物对土传病原菌的拮抗作用增强。②土壤添加剂中含有丰富的营养物质及多种微量元素，可以补充作物生长的需要，促进根系的发育，增强植株的抗病性。③施用添加剂后，改善了土壤微生物的营养条件，提高了土壤微生物多样性，从生态水平上缓解了连作的发生。④生物土壤添加剂具有诱导抗病性，可以诱导植株体内与抗病有关的POD酶、PPO酶及根系脱氢酶的活性，提高植株体内抗病物质酚类化合物的含量。⑤生物土壤添加剂中的一些有机物对土传病原菌具有抑制作用。

植物生产在产前、产中、产后都受到环境条件和病原微生物及附生微生物的影响，在适宜的条件下植物及其产品都会产生病害，严重影响到植物及产品的产量和品质。联合国在1975年第七次特别会议就通过一项采后损失的决议，来要求一些国家重视减少采后损失的问题。但化学防治也带来了一系列生理生态问题，如农残、药害等现象得到了人们的充分重视，绿色食品、有机食品成为人们的关注对象。生物防治在这种情况下应时而生。为了生产“绿色食品”的需要，安徽省农业科学院绿色食品研究所在研制对人体无毒的植物源农药、兽药，获得了实验室产品“绿液”。“绿液”在动物上对鸡新城疫I系病毒、马立克氏火鸡疱疹有良好的防治效果；在医药上，对格兰氏阴性菌、格兰氏阳性菌、链球菌、乳杆菌、大肠杆菌、兼性厌氧菌，口腔中的梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌、小韦荣氏球菌、放线菌、罗氏普氏菌、产黑普氏菌均具有杀灭作用。此外，对乙肝病毒中的HBSAg具有灭活作用，对菱孢774亦有抑制作用；在植物上对水稻白叶枯病、稻瘟病、烟草花叶病毒、芫菁花叶病毒均有防治效果，在食品上对酵母菌、黄曲霉菌、黑曲霉菌均有抑制作用。为此，本文研究了生物制剂“绿液”对采后主要病原菌的抑制作用，以期为采后病害防治提供新途径。“绿液”，由安徽省农业科学院绿色食品研究所提供。苹果轮纹菌（Physalospora piricola Nose），苹果炭疽菌（Gloeospirium fructigenum Berk），青霉菌（Penicillum sp.），草莓灰霉菌（Botrytis cinerea），黄曲霉菌（Aspergillus flavus），由安徽农业大学植物保护学院提供。将“绿液”原液分别配成一定浓度的母液，然后分别吸取2ml至培养皿，把冷却到45～50℃的PDA培养基18ml加入含药剂的培养皿中，混匀凝固，配成相应浓度分别为0.10μg/ml、0.33μg/ml、0.65μg/ml、1.00μg/ml、3.33μg/ml、6.54μg/ml、10.00μg/ml、100.00μg/ml和1000.00μg/ml的含药平板。每皿移接一枚直径为0.6cm的供试病原菌的菌碟于其中央，置25℃光照培养箱中培养，重复3次，逐日定时定点在菌丝生长前沿划线，按十字交叉法测定菌落直径。计算药剂对菌丝生长的相对抑制率。按最小二乘法求回归式，计算EC50。结果见表1。可以看出在低浓度下，苹果轮纹菌、苹果炭疽菌、青霉菌、黄曲霉菌的菌丝生长抑制率都为负值，苹果轮纹菌在“绿液”浓度为1.00μg/ml时，才对苹果轮纹菌有抑制作用；苹果炭疽菌在“绿液”浓度为0.65μg/ml时，才对苹果炭疽菌有抑制作用；烟青霉菌在“绿液”浓度为0.65μg/ml时，才对青霉菌有抑制作用；黄曲霉菌在“绿液”浓度为0.65μg/ml时，才对黄曲霉菌有抑制作用。从而说明“绿液”在低浓度下对苹果轮纹菌、苹果炭疽菌、青霉菌和黄曲霉菌有促进生长的作用，在高浓度下才有明显的抑制作用。相比较而言，“绿液”对草莓灰霉菌的抑制效果最好，在低浓度下就能抑制草莓灰霉菌的菌丝生长。在高浓度下，“绿液”对苹果轮纹菌、苹果炭疽菌和草莓灰霉菌的抑制效果最好，在“绿液”浓度为100μg/ml与1000μg/ml时对苹果轮纹菌、苹果炭疽菌和草莓灰霉菌的抑制率达到100%；而对烟青霉菌和黄曲霉菌是抑制作用就相对较差，在“绿液”浓度为1000μg/ml时对烟青霉菌的抑制率为50.6%，对黄曲霉菌的抑制率为54.0%。结果见表2。“绿液”对草莓灰霉菌的抑制效果最好，EC50为2.18μg/ml；对苹果炭疽菌和苹果轮纹菌抑制效果较好，EC50分别为3.97μg/ml和7.39μg/ml；“绿液”对青霉菌和黄曲霉菌的抑制效果也较差，EC50分别为982.06μg/ml和472.79μg/ml。浓度（μg/ml）苹果轮纹菌苹果炭疽菌烟青霉菌草莓灰霉菌黄曲霉0.10-23.3-2.60-6.801.00-10.80.33-18.5-0.70-3.101.90-4.300.65-9.603.707.409.205.401.008.9011.011.711.210.23.3317.034.112.345.018.36.5423.759.719.891.023.410.0023.779.927.295.128.1100.00100.0100.029.0100.032.41000.00100.0100.050.6100.054.0表1 不同浓度对各菌种的菌丝生长的抑制率菌株回归方程相关系数EC50（μg/ml）苹果轮纹菌Y=2.5992lgx+2.74120.91417.39苹果炭疽菌Y=2.4640lgx+3.52530.99193.97烟草青霉菌Y=0.4198lgx+3.74390.9623982.06草莓灰霉菌Y=2.1732lgx+4.26460.98482.18黄曲霉菌Y=0.4709lgx+3.74050.9540472.79表2 绿液对不同病原菌的毒力作用从试验结果可以看出，“绿液”对草莓灰霉菌、苹果轮纹菌和苹果炭疽菌的作用效果明显，EC50分别为2.18μg/ml、3.97μg/ml和7.39μg/ml；而对烟草青霉菌和黄曲霉菌的抑制作用最差，在“绿液”溶液浓度为1000μg/ml时对青霉菌的抑制率才达50.6%，对黄曲霉的抑制率达54.0%。此外“绿液”溶液在低浓度的时候对苹果轮纹菌、苹果炭疽菌、烟青霉菌和黄曲霉菌的菌丝生长不仅没有抑制作用，还对其菌丝有促进生长的作用。因此，在应用“绿液”时应注意浓度的使用。“绿液”在低浓度下对病菌生长的促进作用以及在较高浓度下对病菌的抑制作用机理有待于深入研究。