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报告周氏啮小蜂繁殖及释放技术
出版时间:2009美国白蛾周氏啮小蜂Chouioia cunea,属膜翅目Hymenoptera小蜂总科Chalcidoidea姬小蜂科Eulophidae啮小蜂亚科Tetrastichinae周氏啮小蜂属Chouioia,是杨忠歧等在1985年调查美国白蛾天敌昆虫时发现,并于1989年记述发表的一个新属新种。成虫 雌成虫体长1.1~1.5mm。红褐色稍带光泽,但头部、前胸及腹部色深;触角各节褐黄色;上额、单眼褐红色;3对足及下额、下唇复合体均为污黄色。头部正面观宽大于高(24:19),触角窝中部位于复眼下缘的连线上。前胸背板后缘有1排鬃毛,其他部分也生有较密的黑色短毛。中胸背片中叶及侧叶上的刚毛较密,但三角片上无毛。中胸小盾片略呈八边形,有比较明显的网状刻纹,在中部处刻纹明显较密且小,似乎形成1纵线。前翅长为宽的2倍,翅面被毛。3对足的腿节外方、胫节及跗节上生有密的刚毛,这些刚毛比雄性的短。雄成虫体长1.4mm左右,近黑色略带光泽,胸腹节色较淡,腹柄节、腹部第1节基部为淡黄褐色,触角及2分裂的唇基片黄褐色,足除基节色同触角外,其余各节均为污黄色。头部正面观宽显著大于高(22:14),在两触角窝之间的脸部的倒“V”字形缺口两侧各着生相向生长的刚毛5根;2唇基裂片外侧、颜面端部与上颚前端部形成的半圆形凹入部处的缘部生有很密的刷状毛。腹部背观卵圆形,背面及腹面均生有密毛,宽度与长度都比胸部显著为小。卵 初产时白色,半透明,牡蛎形,长0.054~0.065mm,大的一端宽0.021~0.033mm。幼虫 蛆形,无头无足,自由生活于寄主蛹内。蛹 蛹长1.2~1.7mm,体白色,腹部收缩,体色逐渐由白色变为浅黄色,腹部微呈黑色。周氏啮小蜂一年可发生4~7代。以老熟幼虫在美国白蛾蛹中越冬,翌年4月下旬5月初成蜂羽化。周氏啮小蜂发育起点温度为6.14℃,有效积温为(365.12±15.56)日·度。在温度为30℃,相对湿度为85%时,一世代发育时间为15.7天。周氏啮小蜂雌成虫在羽化后的当天即可产卵。既可咬破美国白蛾蛹体外的薄茧将卵产于蛹体上,也可找到美国白蛾的老熟幼虫,爬附于幼虫体上,用产卵器刺蜇寄主,注入毒液,促使其提前化蛹。化蛹时将雌蜂也包在茧内,一旦寄主化蛹完成,雌蜂即开始产卵,产卵时间可长达6~10小时。卵产于寄主体内的组织中,一头雌蜂最多能产卵680粒。产卵后2~3天,孵化为幼虫。幼虫以寄主的血淋巴器官组织为食。经7~8天后,幼虫开始化蛹。周氏啮小蜂的蛹为裸蛹,蛹期约5~6天。雌蜂在羽化后12~24小时即可交配,1头雄蜂可和多头雌蜂交配,雌蜂一生只交配1次,无重复交配现象。待一个寄主蛹内所有的雌蜂均与雄蜂交配后,咬开一不规则的圆孔爬出寄主体外。雌成虫在饥饿条件下可存活8天以上。人工繁育周氏啮小蜂的主要设施有:寄主冷藏库、成品蜂冷藏库、接种室、寄生暗室、培养室、暖蜂室、选蜂室、贮物室,此外,还应有办公室、实验室等。主要设备有:空调、冰箱、冰柜、加湿器、操作台、恒温恒湿箱、消毒设备、解剖镜、显微镜、电脑、打印机等。常用工具有:接种箱、玻璃试管、削茧刀、镊子、剪刀、软毛刷、棉花、胶带、消毒药液等。周氏啮小蜂虽然在自然界中寄主的种类很多,不仅可寄生美国白蛾,还可寄生油松毛虫、赤松毛虫、天幕毛虫、榆毒蛾、舞毒蛾、侧柏毒蛾、杨雪毒蛾、银杏大蚕蛾、野蚕、柞蚕、亚洲玉米螟、菜粉蝶、卫茅巢蛾、国槐尺蛾、卫茅尺蛾、大袋蛾、杨扇舟蛾及桃剑纹夜蛾等多种昆虫的蛹,也可重寄生于寄生蝇的幼虫或蛹,但在大规模人工繁育生产中,以柞蚕蛹为寄主为好。主要是因为柞蚕蛹容易被周氏啮小蜂寄生、个体大、繁殖系数高,且资源丰富,成本低,易于获得,能终年大量供应。柞蚕蛹宜在入冬前大量准备,收购回的柞蚕蛹应进行低温贮藏,温度控制在-2~2℃。贮藏时,将茧装入竹筐或塑料筐中,交错摆放,不宜过密,保持通风,防止受热。寄主的健康状况是繁蜂成败的关键,接蜂时必须剔除死亡、感病及不健康的蛹,只选用健康的柞蚕蛹作为繁育寄主。接蜂前,将柞蚕茧外面的浮丝剥去,首先在带有茧蒂的一侧削开一口,观察蛹的颅顶板。若颅顶板发白、且色泽新鲜则为健康蛹,如果颅顶板发黄或色泽发污,则为死蛹或不健康蛹。然后,再于茧的另一端削开一口,并用刀尖挑出柞蚕化蛹时的蜕皮。削茧时应掌握好下刀的深度,避免削到蛹体,两端的开口为直径约1.5~1.8cm的圆形或椭圆形。削好的茧既可直接用于接蜂,也可放回冷藏室贮藏备用。人工繁育周氏啮小蜂所用的种蜂,主要采用人工野外采集获得。在冬季,到美国白蛾的老发生区,人工野外采集美国白蛾蛹,以获得自然寄生于美国白蛾蛹中的周氏啮小蜂。将采回的美国白蛾蛹放入指形管或矿泉水瓶中,视指形管及矿泉水瓶的大小,装入约1/3的美国白蛾蛹,用棉花或黑布将口封好,放在22~26℃的暗室内或培养箱中培养,约10~15天,便可从白蛾蛹中羽化出周氏啮小蜂。从野外采集的种蜂数量是有限的,大规模人工繁育时,可根据防治需要再进行1~2次扩繁,从扩繁的种蜂中淘汰弱蜂,选择体壮、个体大、活动能力强的蜂作为种蜂进行成品蜂繁育生产。将削好的茧蛹放入繁蜂箱中,摆放最多不超过2层,按1头柞蚕蛹接65~75头雌蜂的比例将周氏啮小蜂接入繁蜂箱中,及时用胶带将箱缝密封。接蜂后的繁蜂箱,放入恒温箱或暗室中,在暗光条件下,周氏啮小蜂在柞蚕蛹上产卵寄生。暗室的温度控制在23~25℃,相对湿度保持在50%~70%。36小时后,打开繁蜂箱,将繁蜂箱转入培养室中培养,培养室的温度控制在23~28℃,相对湿度保持在40%~60%。7~10天后,蛹体内的啮小蜂进入老龄幼虫期,这时便可进行被寄生柞蚕蛹的挑选。被寄生柞蚕蛹可通过颅顶板或蛹体腹部的节间处看到蛹体内寄生的小蜂幼虫。健康的柞蚕蛹,周氏啮小蜂寄生率可达90%以上,单蛹出蜂量在4000~8000头,平均5000头,最多的可达10000头以上。将被寄生的柞蚕蛹挑选出后,装入筐中,放入15℃左右的过渡室中2~3天后便可转放6~10℃的冰箱或冷藏室中贮藏,贮藏时间以不超过30天为宜。出蜂时间应与美国白蛾老熟幼虫期和化蛹初期吻合,放蜂防治时间确定后,应将冷藏的成品蜂提前10~15天取出,放在暖蜂室进行升温。暖蜂温度应逐渐升高,每2~3小时升高5℃,1天后温度控制在24~26℃,相对湿度保持在60%~70%,并应注意通风。出蜂前1~2天即可进行林间释放。在恒温条件下人工繁育周氏啮小蜂多代后,产生蜂种会产生退化,影响繁蜂质量和防治效果。蜂种退化现象表现为同一批蜂出现羽化不整齐、羽化率低、体型变小、飞翔能力弱、寿命短、群体雄蜂数显著增多。为了防止蜂种退化,应在人工繁殖5~6代后进行蜂种复壮。利用自然界的蜂种进行复壮是一个有效措施,由于其已有相当长一段时间的自然锻练,故生命力旺盛。每年繁育周氏啮小蜂的种蜂应来自于野外采集的美国白蛾越冬蛹。冬季在上年放蜂地点或美国白蛾老发生区大量采集美国白蛾蛹,将采集回的美国白蛾蛹放入培养室中培养出蜂,然后,收集培养出的周氏啮小蜂进行种蜂扩繁,根据当年的繁蜂计划数量,将种蜂扩繁2~3代。繁育用于防治的成品蜂时,应采用扩繁的种蜂进行接蜂,不得用繁育的成品蜂作种蜂,尽量减少蜂的代数,控制退化现象的发生。周氏啮小蜂可以爬附在美国白蛾的老熟幼虫体上刺蛰,促其提前化蛹,然后产卵于美国白蛾蛹中,也可在美国白蛾蛹期直接在蛹体上产卵寄生。因此,放蜂防治的最佳时期是美国白蛾化蛹初期。由于美国白蛾的发育常常很不整齐,化蛹期持续时间较长,因此,1个世代应放蜂2次,才能达到较好的防治效果。一次在首批美国白蛾老熟幼虫期或化蛹初期,第二次放蜂应在第一次放蜂7~10天进行。也可将不同发育期的周氏啮小蜂(相差3~7天)混合,一次性放蜂。在自然环境中,周氏啮小蜂一年可繁殖4~7代,因此,为提高放蜂效果,放蜂应尽量在美国白蛾的第1代和第2代进行,第3代美国白蛾蛹期,很快就进入冬季休眠期,放蜂的利用率较低。释放周氏啮小蜂应选择风和日丽的晴天进行,阴雨和大风天气放蜂效果差。放蜂时最好选择下午日落之前和日出之前,这一段时间气象因子较为稳定,无风,空气湿度较为适宜。如果放蜂量较大时,放蜂时间可选择在5:00~9:00时和17:00~20:00进行。炎热的中午时段,不适合放蜂作业。在美国白蛾发生的林中,如果树冠较低或树干上有细枝条,可将小细枝折断,将寄生有周氏啮小蜂的柞蚕茧蛹从削口处挂在树枝上即可。如果树冠较高或树干上没有细枝条,则可用大头针将茧蛹固定在树干上。根据美国白蛾的发生情况,可采用逐株放蜂,也可只在有美国白蛾发生的树上放蜂。一般情况下,1头周氏啮小蜂雌蜂可以寄生1头美国白蛾。如果将自然界中的多种不利因素考虑在内,放蜂量应适当加大。放蜂量可根据美国白蛾虫口密度的调查结果,按蜂虫比(3~5):1的比例计算。每个网幕美国白蛾按300头幼虫计算,每个柞蚕蛹出蜂量按5000头计算。天敌防治不同于一般药物防治,周氏啮小蜂放蜂后,具有在自然环境中多次繁殖、多次寄生的作用,所以防治效果调查应在放蜂后的各代美国白蛾蛹期进行调查,并以一年内总的寄生率来评价放蜂防治效果。寄生率调查,在放蜂后10~12天便可进行。分别在放蜂区和未放蜂区采集美国白蛾蛹,调查寄生情况,并计算出寄生率和防治效果。放蜂寄生率(%)=被寄生蛹数/调查总蛹数×100放蜂防治效果(%)=(放蜂区寄生率-对照区寄生率)/(1-对照区寄生率)×100%周氏啮小蜂在自然界中可以寄生多种鳞翅目害虫的蛹,这些害虫的蛹期相互衔接,为周氏啮小蜂在自然界中的生存提供了非常有利的条件。我们释放周氏啮小蜂防治美国白蛾时,周氏啮小蜂不仅可以寄生美国白蛾的蛹,而且,在两代美国白蛾蛹期之间,小蜂可以在其他害虫的蛹上寄生,等到下一代美国白蛾蛹期时,又可转到美国白蛾的蛹上寄生,从而达到持续控制美国白蛾的效果。利用周氏啮小蜂进行生物防治,不仅能有效地控制美国白蛾的危害,而且对其他害虫也有很好的控制作用,收到“一虫多治”的效果。 -
报告从质量管理谈制造企业的发展
出版时间:2009企业是以盈利为目的的,制造企业也不例外。制造企业要想健康发展就必须把生产出来的产品卖出去,赢取利润,只有赚钱的企业才会有好的发展。因此,目前在很多的制造企业当中就形成了这样的观念:市场营销是制造企业的核心竞争力。他们的论据很简单:产品生产出来,做得再好卖不出去赚不到钱,质量再好也没用;反之,即便是垃圾,通过合理的营销模式能够卖出去也是成功的。这种想法是有一定道理的,但是过分抬高市场营销的地位,会导致让树枝遮住了树干。在河南有一家水泵生产厂家,销售人员的数量与一线工人差不多,因为老板深信只要把产品卖出去就能让企业有发展。他们的销售人员全国各地跑订单,起初阶段,公司发展迅速,由于销售人员营销有道,接到全国各地很多订单,公司的生产规模很大,工人加班加点赶生产进度。然而,经过调查发现这家公司的利润却很低,原因何在呢?因为公司只注重生产进度,忽视了产品质量,致使产品的返修率很高,仅三包费用就已经相当于其全部利润。随着时间推移,公司的回头客越来越少,同时在行业中也产生负面影响。因此,制造企业在确定自己的企业发展目标的同时,就必须首先确定自己的核心竞争力,事实证明,产品质量的优劣直接决定着制造企业的发展,是制造企业的根本。只有确立了这个根本,再辅以良好的市场营销模式,企业才能够像大树一样茁壮成长,才能够健康发展。提高产品质量不能只停留在口头上,寻找适合企业的质量管理体系是企业发展的重中之重,是每个制造企业必须研究的课题。一般来说,制造业的产品质量控制包括以下部分:控制产品材料的质量,即毛料质量,它决定产品的最终质量;产品零件加工过程中的质量控制;产品组装过程中的质量控制;产品售后服务质量的控制。影响产品质量的因素应该包含职工的素质、加工设备的能力和生产管理的科学性。在这些因素中,加工设备的能力是相对固定的。而人是最重要、最灵活、起决定性作用的因素。提高员工质量意识和员工参与质量管理的积极性,对于质量管理体系的合理建立十分重要。合理的质量管理体系应该遵循六大原则:● 以客户为中心:企业依存于其客户,因此,企业应当了解掌握客户目前和以后对产品的需要,制定相应的措施,保证能够满足客户对于产品质量的要求。● 充分发挥领导的作用:领导者将本企业的宗旨、方向和内部环境统一起来,并营造使员工能够充分参与实现企业目标的环境。● 必须全员参与:各级人员是企业之本,只有他们的充分参与,才能使他们的才干为企业带来最大的收益。这也就是以人为本的管理理念。● 科学过程方法:过程的控制对于制造业来讲也就是要在生产过程中,充分合理的利用有效资源,包括设备资源、人力资源等等,创造最大的生产能力。● 科学管理的系统方法:要根据制造企业的实际情况制定合理的、行之有效的管理文件,来约束职工的质量行为。● 具有持续改进的特点:质量管理体系必须具有持续发展的能力,要随时根据市场状况以及企业自身的经营状况进行改进,持续的改进质量管理方式才是企业发展的保证。质量管理必须是全面的、全过程的、全员参加的。全面质量管理中的质量不仅包括一般质量特征,而且包括成本质量和服务质量,它不仅包括产品质量而且还包括工程质量、工作质量。全过程的质量管理包括:产品设计、各个加工车间的生产合理化安排、制造毛料的控制、工艺文件的合理化、加工设备的合理使用等,也就是从采购开始到产品出厂的全过程的质量管理。在这个过程中就要求全员参与质量管理。产品的质量是企业素质的综合反映,涉及全体部门和员工,提高产品质量需要靠全体员工的共同努力,质量管理人人有责,从企业的领导人员到每个员工,都要学习,运用科学质量管理的理论和方法,提高本职工作质量。全员参与指的是要推动全员参与,对全过程进行质量控制与管理。以人为本,充分调动各级人员的积极性,推动全员参与。只有全体员工的充分参与,才能使他们的才干为企业带来收益,才能够真正实现对企业全过程进行质量控制与管理,并且确保企业在推行全面质量管理过程中,采用系统化的方法进行管理。制定质量管理体系必须做好以下几个方面的工作:第一,强化员工质量意识。“人”在质量管理体系中处于主导地位,起着决定性的作用。所以对企业员工的“质量意识”提升就显得更为重要。那么什么是质量意识呢?质量意识是一个企业从领导决策层到每一个员工对质量和质量工作的认识和理解,这对质量行为起着极其重要的影响和制约作用。提高质量意识需要企业管理者和全体员工的共同努力。首先企业管理者要以质量为中心,将质量管理贯穿于企业发展的全过程,通过优质的产品和满意的售后服务,使企业快速发展壮大。此外,利用多种宣传形式,加大宣传力度、强化质量意识,使员工在头脑中牢固地树立“质量第一”的思想意识。让员工在宣传活动中既强化了质量意识,又加强了自觉性和责任心。纵观国内外成功企业可以看出:企业应在质量意识教育中,培植企业文化,增强职工的团队精神,才能真正把全面质量管理落实到实处,充分体现质量意识的内涵和意义。第二,制定标准化的工作体系,包括技术标准、检测标准、工作标准等。其中工作标准是指必须根据实际情况制定不同职工的岗位标准,使每位职工都能够各司其职,充分发挥职工能动作用。第三,掌握准确的质量信息。质量信息是反映产品质量和供、产、销各环节工作质量的数据、原始记录,以便在产品使用过程中形成的各种数据和资料,加以汇总、整理、分析而得到的情况。第四,制定合理的质量监督措施。质量监督包括企业内部的质量审查和经过专业质量审查部门的审查(ISO9001认证等)。质量管理体系文件编制工作结束后即开始生效,质量管理体系投入运行实施。要重点对员工进行教育和培训,掌握全面质量活动的程序管理要求,明确各自的职责和权限,提高员工执行质量管理体系文件的自觉性和责任感。质量管理体系运行控制机制示意图质量管理体系改进是产品质量改进的重要组成部分,是质量管理的主要目的之一,重点是提高质量体系的有效性和效率,为企业及其客户和其他受益者提供更多收益的质量改进活动。企业质量管理体系改进重点是:把满足客户的期望和需要作为推进质量体系改进的基本动力;改进质量体系在资源配置上要充分考虑知识、技术、手段的更新和满足动态管理的要求,在战略上确保质量体系能够更好地服务于企业获得长期成功的总体目标的实现,要把提高质量体系的有效性作为质量改进的主要目标。在质量体系改进过程中,应尽量减少损失,降低质量成本,增长经济效益,有效利用资源,发挥现有资源的使用效率。在经营思想上要强化“面向客户,让客户满意”的理念,明确以“长远发展”而不是“眼前利益”为宗旨,倡导“树立品牌”。通过“三全”质量管理体系的实施,企业可以从采购开始进行合理的控制,提高毛料的质量,在生产中就可以减少由于材料问题引起的废品,减少废品率,降低成本。同时通过“三全”质量管理体系的实施,企业可以在过程控制中,更好地调动广大职工的工作积极性,更合理地对人力资源进行配置,充分发挥每个人的能动作用,减少目前企业中常见的废岗、重岗现象,节约人力成本。在此过程中,由于合理使用加工设备,可以最大程度的发挥每台加工设备的加工能力,使生产过程更加的科学化,提高产品生产的效率。品牌战略是目前企业发展的一个非常热点的话题,树立自身品牌已经成为很多企业都在追求的目标。品牌,是广大消费者对一个企业及其产品过硬的产品质量、完善的售后服务、良好的产品形象、美好的文化价值、优秀的管理结果等所形成的一种评价和认知,是企业经营和管理者投入巨大的人力、物力甚至几代人长期辛勤耕耘建立起来的与消费者之间的一种信任。而质量是品牌的本质、基础,也是品牌的生命。只有优秀的产品质量作为基础,才能够树立起优秀的品牌。通过“三全”质量管理体系的实施,制造企业可以达到利用科学的质量管理文件规定职工工作范围,提高职工工作积极性,提高职工工作效率、合理利用设备能力,控制生产全过程中的产品质量和工作质量,从而提高产品的最终质量和对客户的服务质量的目标。产品质量有了保障,就能够在行业中树立企业良好的口碑和企业品牌,也就是以产品质量树立品牌。制造企业的核心竞争力不只是体现在生产的产品质量上,还有诸如售后服务等其他方面。如果每个部门每位员工都能够注重自身的工作质量,也就在不同的范围内帮助企业提高了竞争力。比如:接待部门工作质量有了保障,在客户到企业进行考察的时候能够感受到亲切的接待,给客户留下良好的第一印象;财务部门提高工作质量,能够更好地提供合理的财务数据,是企业能够更准确地进行定位;售后服务人员提高自身的工作质量,能够更好的为客户提供周到的售后服务,解除客户的后顾之忧。这些方面的质量控制,能够使企业更好地找准市场定位,为客户提供满意的服务,无形中提高了企业的市场竞争力。产品质量是制造企业的生命,是核心竞争力,制造企业必须把提高产品质量作为企业发展的前提,因此,必须制定合理有效的质量管理体系并在企业中逐步实施,制造企业也必将能够从根本上提高产品质量,形成质量品牌,提高竞争力,企业也就会得到更好的发展。 -
报告Control of Wheat and Melons Powdery Mildew by Vegard a Plant Extract
出版时间:2007白粉病是我国小麦、蔬菜及花卉等作物上的一种常见重要病害。气候适宜时,该病在湖北麦区以及大棚瓜类蔬菜上分别造成小麦白粉病和瓜类白粉病流行,损失严重[1~2]。三唑酮、烯唑醇、福美双、氟化硅等是我国防治白粉病的常用药剂,而一些研究表明,在某地区已发现白粉病对这些药剂防效有所降低,已产生一定程度的抗药性[3~5]。随着人们对可持续发展和环境污染的高度重视,开发对环境友好且又能延缓抗药性产生的杀菌剂成为农药研究的一个新方向。为寻找和开发替代三唑酮的高效、无公害的杀菌剂,由本课题组和内蒙古清源保科技有限公司联合研制了用于防治植物白粉病的植物源提取物Vegard(0.5%大黄素水剂),该制剂对黄瓜白粉病和小麦白粉病室内活性明显,为明确该药剂的田间效果,对该制剂进行了防治小麦和甜瓜白粉病的试验,现将结果报道如下。0.5%Vegard水剂,内蒙古清源保科技有限公司生产;15%三唑酮可湿性粉剂,江苏利民化工有限公司生产;共设6个处理:①Vegard 500倍液;②Vegard 200倍液;③Vegard 100倍液;④Vegard 50倍液;⑤15%三唑酮可湿性粉剂1000倍液;⑥ 清水对照。小麦白粉病防治试验设在湖北省农业科学院南湖试验农场进行。小麦品种为“郑98”,高感白粉病,条播,试验每个处理3次重复,小区面积30m2,小区随机区组排列,亩施5kg尿素作拔节肥。甜瓜白粉病试验在湖北省农业科学院新科源温室内进行,供试甜瓜为感白粉病品种“金红”,营养钵育苗后移植至温室,行距1m,株距0.5m,小区面积15m2,每个处理3次重复,随机排列。分别在小麦始见零星白粉病斑期和甜瓜白粉病发病初期分别进行施药,施药量为小麦每亩对水50kg,甜瓜每亩对水60kg喷雾,喷药时尽量做到叶面均匀喷透。喷雾器械为426-8型压缩式喷雾器。对于小麦白粉病,药前调查病情基数,药后14天作最终病情结果调查,各小区对角线五点法取样,每点定15株,采用0~9级分级标准,每株调查上3叶。对于甜瓜白粉病,每小区对角线五点法取样,每点取2株,采用0~9级分级标准,调查每株上所有叶片的病情(每小区约调查80~100片叶),调查时期分别为药前,药后7天、10天和14天。病情分级标准、病指、药效的计算方法参照《农药试验田间药效准则》进行,并对防效进行平均值的多重比较(SSR法)。从表1可以看出,Vegard对小麦白粉病具有明显的保护效果,采用该药剂50~500倍液,于始见病期施药1次即可达到76.2%~94.2%的效果,其中该制剂200倍液、100倍液和50倍液药液的防效间差异不显著,该制剂100倍液和50倍液处理的防效与对照药剂15%三唑酮可湿性粉剂1000倍液的防效相当。结果表明,Vegard 50倍液和100倍液两个浓度处理的防效在用药后7天、10天、14天均在90%以上;200倍液处理在用药后7天和10天调查的防效分别为89.9%和89.1%,14天后的防效也达80%以上;500倍浓度在施药后7天和10天的防效分别为84.0%和83.6%,14天的防效下降为77.8%(表2)。三唑酮对甜瓜白粉病防效不理想,该药剂在药后7天、10天、14天的防效为79%、66%和30%,明显低于Vegard的防效。Vegard对瓜类白粉病具有良好的防治效果且残效期较长。500倍浓度的残效期为10天,比常规药剂三唑酮的残效长3~4天。100倍液和50倍液处理药后14天绝对病情指数未有发展,表明在这两个浓度下其残效长于14天。处理Treatment稀释倍数Dilution药前病指Diseaseindexbeforeapplication药后14天病指Diseaseindexafterapplication14days防效(%)Effect显著性Significant0.5%Vegard水剂0.5%vegard500倍500×0.221.6476.2c200倍200×0.241.3383.6bc100倍100×0.220.5592.2a50倍500×0.160.3194.2a15%三唑酮可湿粉15%triadimefon1000倍1000×0.160.2495.8a空白对照Watercontrol—0.248.32——表1 Vegard防治小麦白粉病试验结果Table 1 Effect of Vegard on wheat powdery mildew处理Treatment稀释倍数Dilution药前病指Diseaseindexbeforeapplication药后7天病指Diseaseindexafterapplication7days防效(%)Effect药后10天病指Diseaseindexafterapplication10days防效(%)Effect药后14天病指Diseaseindexafterapplication14days防效(%)Effect0.5%Vegard水剂0.5%vegard500倍500×7.7011.5584.0c13.2383.6c20.4377.8c200倍200×8.037.5589.9b9.2589.1b16.1383.2bc100倍100×7.053.5594.6a6.5091.5b8.5390.0ab50倍50×7.983.3595.5a3.0096.5a4.9894.7a15%三唑酮可湿粉剂15%triadimefon1000倍1000×7.6014.5379.1d27.3366.0d63.1830.1d空白对照Watercontrol—7.6071.63—81.20—91.63—表2 Vegard防治甜瓜白粉病试验结果Table 2 Effect of Vegard on melons powdery mildew随着人们对环保意识的高度关注,无公害农药的研制成为农药开发领域的一个新方向。本课题组和内蒙古清源保科技有限公司联合开发的无公害植物源提取物Vegard田间防治小麦和甜瓜白粉病效果明显。在发病初期喷施,Vegard 200倍液对小麦白粉病可达83.6%的效果,100倍液和50倍液防效可达90%以上的效果,其防效与15%三唑酮1000倍液的防效相当。该制剂对瓜类白粉病防效亦突出,且防效明显超过三唑酮常规用量的防效,持效期长。从防治成本考虑,在防治小麦白粉病和瓜类白粉病上可选用Vegard 100~200倍液在发病初期喷施,10~12天用药1次,则可取得理想的效果。 -
报告试论技术创新与企业核心竞争力
出版时间:2009全球化浪潮的兴起预示着一个新时代的来临,管理学大师彼得·德鲁克指出:在这样的时代里,“唯一关键的事情就是创新”。技术创新在现代社会有重要的意义。对企业而言,技术创新是提高竞争优势的主要途径,是企业参与竞争的主要手段,创新能够创造差别,使企业能够寻求新的竞争机会,并据此而获得差别优势和利益。改革开放以来,中国在国际经济舞台上的迅速崛起令世人瞩目,我国企业的生存与发展环境发生了巨大的变化,在赢得众多发展机会的同时,亦面临极为严峻的考验。竞争和创新也使市场更为动荡,人们越来越清醒地认识到,技术创新能力的培育对企业获取竞争优势的关键作用,从而迫使企业要不断地开展技术创新。何谓技术创新?有人定义创新为发明加开发,换句话说,它不只是发明创造活动,还包括把产品推向市场并销售给人们的活动。因此,技术创新是科技新设想转变成一种新的或改进的新产品或新工艺,并把新的或改进的产品、工艺、物料或服务开发并转移到它们适合的工厂或市场的过程。企业核心竞争力,是近几年来企业界谈论最多的话题,也不乏有一些理论性的研究和观点上的争论。“核心竞争力”这一术语首次出现是在1990年,著名管理专家C.K.Prahalad和Gary Hamel在《哈佛商业评论》上发表的《企业的核心竞争力》(The Core Competence of the Corporation)中指出:“核心竞争力是在一组织内部经过整合了的知识和技能,尤其是关于怎样协调多种生产技能和整合不同技术的知识和技能。”按照Prahalad和Hamel的定义,企业的核心能力有三个基本特征:核心能力提供了进入多样化市场的潜能;核心能力应当对最终产品中顾客重视的价值作出关键贡献;核心能力应当是竞争对手难以模仿的能力。那么,所谓核心竞争力就是指蕴涵于企业内质中的,支撑企业过去、现在和未来竞争优势的,并是企业长时间内在竞争环境中能取得主动的核心能力。Prahalad和Hamel提出了一个“树形”模型来解释核心能力:企业是一棵枝叶繁茂的大树,其最终产品是果实,最终服务是叶子,树枝是结合产品和服务的战略业务单位,树干和主枝是核心产品,为整棵树提供和输送养分,维系生命的根系就是企业的核心能力。这一模型是要表明核心能力与核心产品相关联,但是这种关联不是因为企业有自己的核心产品,因此相应的技术和技能就成为核心能力,而是强调以核心技术和知识为基础的核心能力导致了企业的核心产品。这一模型还表明了核心能力主要是一种和价值创造过程直接相关的技术能力,只有构成企业主体部分的价值创造活动中的能力才能带来实际的价值,并通过企业的产品或服务来体现。因此,技术创新能力是企业核心能力的根基。核心竞争力以企业核心技术能力为核心,通过企业战略决策、产品制造、市场营销、组织管理以及企业文化的整合而使企业获得长期竞争优势。而企业核心技术能力又在于不断创新。在经济全球化的市场经济体系下,企业所面对的市场不再是一个国家或一个地区,而是全球化的市场,企业今天的核心技术不等于明天的核心技术。因此,只有通过不断的创新,才能保证企业的技术始终走在科学的前沿,才能成为企业的核心。因特网搜索引擎技术的发展历史让人们充分体会到竞争环境变化之快,也证实了保持竞争优势有多么困难。1994年出现了第一个搜索引擎EINet Galaxy,它是“Yahoo!”搜索技术的基础。但是,90年代末期,在该领域Google就取代了Yahoo!的主导地位,现在其他的竞争者通过更多的链接以及能够浏览更多的页面向Google发起冲击。手机公司也同样面临快速变化的市场模式。1998年,诺基亚是手机生产商家的领军者,到2002年,诺基亚在市场中落到了第四,三星成为彩屏手机的领导者。但是在2003年,诺基亚凭借带摄像头的手机打入市场,再一次成为了该领域的领军人物。我们可以看到,获取持续竞争优势需要付出多年的努力,而要在超竞争的环境中保持竞争优势则更加困难。技术是竞争优势的来源,如何把企业的技术能力转换为竞争优势更为关键,那么技术创新就是联结技术能力和竞争优势的纽带。经济发展的现实已经证明,技术创新一直是整个历史上产业发展、生产率增长以及人们生活水平不断上升的强大动力。技术创新可能是使竞争对手之间市场份额发生重大变化的唯一的最为重要的源泉,它还可能同时是造成占有牢固地位的企业死亡或让位的最经常的原因,因为它能够创造或破坏企业的利润。技术创新还常常能创造新的产业,并且能改变或摧毁现有产业。简而言之,技术创新就是现代企业竞争环境中最具决定性和毁灭性的力量。因此在市场竞争日趋激烈的今天,企业要想求得生存与发展,必须加强技术管理与技术创新管理,以提升企业的核心竞争力。技术管理与技术创新管理已成为成功企业的一种新特征,其成功之处不是对已存的人、财、物和信息资源的管理,而是对自己独特的技术资源的管理,是对企业技术创新体系的建设。技术管理的关键不是要员工在职能管理的体制下各司其职,最大效率地完成其分担的工作,而是要创造一种机制和氛围,是企业员工个人及组织的技术创新能力能够最大限度地发挥出来。而创造竞争优势则需要开发和利用企业中的技术,包括企业员工的知识、技能和思想的交流,也包括历史和现有技术的应用。企业的技术管理最终能够达到提高企业核心竞争力的目标。创新是一个民族进步的灵魂,是国家兴旺发达的不竭动力,毫无疑问也是企业发展的不竭之源。企业应通过技术创新提高产品的独创性。一个行业,一个企业,如果没有持续不断的科技创新,就没有发展的源泉。企业的技术创新体系,通常以一项核心技术或几项关键技术为核心,企业的核心竞争力往往就体现在这些核心技术的开发和利用上。于是就有了这么一个逻辑:企业核心竞争力——企业自主创新——企业的生存与发展。在思考这三者关系时,企业的生存与发展是作为企业经营者最为关心的,是工作的目的;企业自主创新是方法、是手段;而企业的核心竞争力则是能力、是根本。即:企业经营者通过技术创新和产品创新等来把握和培育好企业核心竞争力,以达到企业发展的目的。只有源源不断地技术创新,企业才能不断向市场推出新产品,不断提高产品的知识含量和科技含量,改进生产技术,降低成本,进而提高顾客价值,提高产品的市场竞争力和市场占有率,并适时开拓新的市场领域。跨国公司都非常重视技术创新,设有专门的研发部门,并不断加大对技术创新的投入,以此增强企业的创新能力。据统计,世界500强的研发投入占销售收入的比重平均为5%~10%,大大高于中国企业的平均比重。2001年当国内各彩电品牌在大打价格战时,沉寂多年的索尼在中国市场仅50万台高端彩电的销售量所获得的利润就相当于国内所有彩电品牌的利润总和。“技术的索尼”的威力显露无遗。与国外知名企业相比,中国企业普遍存在的一个问题便是对技术创新不够重视,忽视对新技术、新产品的研发投入,在研发方面的投入过低自主创新能力不强,而满足于以设备制造商方式赚取微利,动辄打“价格战”。由于历史原因,中国的许多企业还未从计划经济时代“生产工厂”的角色中完全脱胎出来,很多企业没有专门的研发部门,对技术创新的投入长期处于很低的水平上,这就直接导致了当前中国企业自主创新能力普遍较差的局面。因此我国企业必须制定技术创新战略,建立符合技术创新功能要求的组织机构,建立保证技术创新顺畅运行、互相衔接、及时反馈的运行程序以及科学的现代管理,建立能够鼓励技术创新并在一定程度上自主控制技术的管理体系;并围绕与高校、科研机构联合攻关,或形成研发战略联盟,从而大大提高企业的技术创新能力,以提高企业核心竞争力。技术创新战略决定企业创新的具体行为。企业能否正确选择并贯彻实施良好的创新战略,是其能否顺利推进技术创新,赢得创新利益的先决条件。那么如何选择正确的创新战略是企业面临的重大问题,是涉及企业生存与发展的根本前提。由于技术创新活动主要源于市场拉动或技术推动及两者结合,因此技术创新活动一方面要立足市场,另一方面要把握科技发展潮流。由于全球化浪潮不以人的意志为转移地到来,要求企业及早地融入全球化环境中。借鉴国外企业创新战略的经验,下面几种创新战略可以供我国企业选择、探索。● 自主创新战略。自主创新战略是当今国际上一些成功的知识型企业为在竞争中取胜而较多采用的创新战略。它所需的核心技术来源于企业内部的技术突破,是企业依靠自身力量,通过独立的研究开发活动而获得的。对于自主创新的企业来说,在技术开发方面,由于能在一定时期内掌握和控制某项产品或工艺的核心技术,这在一定程度上左右了行业或产品技术发展方向;同时由于自主创新者一般是新市场的开拓者,因而可处于完全独占性垄断地位。● 模仿创新战略。模仿创新战略的核心是快速高效而特别的技术积累。首先,向成功的率先创新企业学习,模仿创新活动,快速而有效地增长创新知识和技能。企业的技术积累中包含大量暗默性的知识和技能,模仿却能够让一个企业在不解析原理和结构的情况下,有效地“复制”另一个企业的知识技能而丰富其技术积累,再在此基础上消化吸收,进行新的探索,而在技术积累方面青出于蓝而胜于蓝。其次,在模仿创新中实现高效的技术积累,再在高效的技术积累基础上将技术积累的重点后移,即将注意力和主要资源投入到工艺、批量生产、质量控制等环节,在这些方面形成丰厚的技术积累,从而建立起核心竞争能力。● 联盟创新战略。当今世界全球性的技术竞争不断加强,企业技术创新活动中面对的技术问题越来越复杂,技术的综合性和集群性越来越强,即使是技术实力雄厚的大企业也会面临技术资源短缺的问题,单个企业依靠自身能力取得技术进展越来越难。因此,以企业间的分工合作方式进行重大的技术创新,通过外部技术资源内部化,形成联盟以实现知识资源共享和优势互补,成为新经济形式下企业技术创新的必然趋势。通过联盟各方技术经验和教训的交流,集中各方智慧,能为参与联盟的企业赢得市场,带来经济效益,使知识增值,提高企业在市场竞争的地位。随着全球经济一体化,市场、制造全球化的发展,世界已经步入全球化新时代,为应对全球化竞争,我国企业走向全球化已势在必行。因此提高技术开发与创新能力,获取技术与竞争优势尤为重要,在全球范围内获取与保持持续竞争优势实现持续发展也成为重中之重。结合技术创新战略,企业有效地采取与实施全球化战略与管理是中国企业走向全球化、获取全球化发展的根本出路。 -
报告The Gene Encoding CuZn-Superoxide Dismutase from Bacillus cereus 905 and Its Expression in Escherichia coli
出版时间:2007利用植物有益内生细菌进行植物病害生物防治和提高作物产量是当前农用微生物研究的一个热点。在我国,以植物有益内生细菌为主体的植物微生态制剂已经进入田间的农业生产应用,取得了良好的经济和生态效益。细菌在植物上发挥其功能的关键是细菌可以在作用部位很好的定殖。研究发现,在细菌与植物相互作用时,会引起该区域的氧自由基浓度的急剧升高;同时植物也会代谢分泌出一些酚类物质,这些物质都会产生氧自由基[1,2]。在该环境中定殖的细菌必须克服这种氧自由基对细胞的毒性。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是细胞抗氧自由基毒性的一种关键酶。SOD广泛存在于生物体内,催化O·2歧化为H2O2 和O2。按照结合的不同金属离子,SOD主要分为Mn-SOD、Fe-SOD和CuZn-SOD[3]。其中,Mn-SOD和Fe-SOD在细胞体内发挥功能,而CuZn-SOD定位在胞壁空间或者胞外以清除细胞膜外的氧自由基[4]。Bacillus cereus 905是本研究室从小麦体内分离获得的一株具有很好的促生和防病效果的细菌,在小麦体内及根围定殖能力强。为分析其定殖的分子机制,根据已公布的蜡样芽孢杆菌的全基因组序列及本实验室已获得的B.cereus M22的CuZn-SOD基因[5],推测在B.cereus 905中也存在CuZn-SOD基因。本研究试图从氧自由基毒性角度探讨CuZn-SOD在细菌与宿主相互作用时发挥的重要功能。比对Genbank发表的几个B.cereus菌株的CuZn-SOD基因序列,根据两端高度保守的序列设计引物,利用PCR方法扩增B.cereus 905的CuZn-SOD基因全长(sodC)。构建表达载体pET-22b-sodC,转化Escherichia coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,化学抑制法验证蛋白种类。以B.cereus 905的基因组DNA为模板进行PCR,得到了B.cereus 905的CuZn-SOD基因全长(sodC)。该基因由537 bp组成,编码179个氨基酸残基。根据该蛋白的分子量大小和pET-22b载体中的多克隆位点上游pelB前导序列和下游His-tag序列,预测表达出的蛋白大小约为23kD。序列比对发现其与B.cereus M22同源性高至96%[5],BLAST结果也显示其与其他的几株蜡样芽孢杆菌的CuZn-SOD基因的同源性在90%以上。在sodC推定的179个氨基酸残基中,甘氨酸(G)含量最高,达到12.29%(22/179,mol/mol),且在序列中均匀分布。在推定氨基酸序列中,不含酪氨酸(Y)和色氨酸(W),这与其他CuZn-SOD序列特征一致。构建表达载体pET-22b-sodC,转化Escherichia coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,NBT反相染色后,较未诱导样品相比,诱导后的细胞裂解液出现一条明显的亮带,表明该基因表达出的蛋白表现出SOD活性(图1)。SOD酶活测定也发现诱导后细胞裂解液的SOD酶活有了显著的提高,化学抑制法得出诱导出的SOD蛋白经KCN和H2O2处理后,其活性受到很大程度上的抑制,而氯仿/乙醇对其活性没有影响,确定了诱导表达出的蛋白为CuZn-SOD(图2)。Figure 1 Enzymatic activity tests of E.coli BL21(pET-22b-sodC) by Native-PAGEFigure 2 Identification of CuZn-SOD with chemical inhibitant methods超氧化物歧化酶普遍存在于所有的需氧生物中,从最低等的原核生物到高度复杂的人脑,都存在SOD的防御反应。B.cereus 905是一种植物内生细菌。有数据发现在细菌与植物互作及植物体内都可能有超氧阴离子的存在。B.cereus 905很可能依靠其CuZn-SOD的活性清除胞外的氧自由基以保证该细菌可以在植物体内很好的定殖。作为非病原菌的植物内生细菌,CuZn-SOD可能在其侵入及定殖过程中扮演着重要角色,更明确的结论需要下一步基因缺失后的定殖能力的比较分析。 -
报告Study on Interspecial Transmission of Sclerotinia sclerotiorum Debilitation hyphen Associated RNA virus (SsDRV) to S. nivalis
出版时间:2007真菌病毒缺乏体外传播途径,其传播仅能依赖寄主的繁殖进行垂直传播或通过菌株间菌丝融合(hyphal anastomosis)进行水平传播;多数感染子囊菌的真菌病毒不能通过有性繁殖传播,受菌丝不融合的限制,真菌病毒不能在与寄主菌株处于不同营养体亲和型的菌株间扩散。近年来,有些研究论文报道,感染不同种属,甚至不同纲真菌的病毒具有高度的等同性(identity),表明真菌病毒可能存在一种潜在的有别于菌丝融合的传播途径。核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)弱毒株EP-1PN分离自黑龙江佳木斯茄子病残体上,较正常菌株生长速度慢,菌落异常扩展,菌核产量低,致病性弱。前期研究表明EP-1PN菌株中含有3条dsRNA片段,大小分别为7.4kb、6.4kb和1.0kb,证实6.4 kb dsRNA片段与核盘菌Ep-1PN菌株毒力衰退紧密相关;对该dsRNA片段进行了cDNA克隆和序列分析,证明其可能为真菌病毒SsDRV(核盘菌致病力衰退相关RNA病毒)的复制体形式。雪腐核盘菌(S.nivalis)是核盘菌的近缘种,其Let-19菌株分离自湖北省神农架发病莴苣。在PDA培养皿中,将核盘菌与雪腐核盘菌对峙培养,两菌落接触后,形成典型的坏死带(菌丝不融合所致)。我们将Ep-1PN菌株与Let-19菌株于20℃对峙培养,当两菌落接触后,自Let-19菌株的菌落边缘挑取菌丝尖端移至新的PDA平皿中培养,发现Let-19菌株继代培养物的菌落形态发生了显著的变化,它们较正常的Let-19菌株生长慢,菌落异常扩展、致病力较弱,这些继代培养物的表型与Ep-1PN菌株的类似。将这些继代培养物与Let-19菌株对峙培养,同样可以促使Let-19菌株的表型发生显著变化。表明与Ep-1PN菌株接触后,Let-19菌株获得了具传染性的衰退因子。采用纤维素粉CF-11吸附的方法自Let-19菌株的继代培养物的菌丝中提取获得了大小为7.6kb和6.4kb的dsRNA片段。经过Northern杂交验证,证实其中6.4kb的片段为SsDRV的dsRNA。表明核盘菌Ep-1PN菌株中的SsDRV已经传染至雪腐核盘菌Let-19菌株。为了检测真菌病毒在跨种间传播的频率,我们将核盘菌Ep-1PN菌株与雪腐核盘菌Let-19菌株于PDA平皿上对峙培养,12天后在Let-19菌株的菌落边缘挑取4个菌丝块移至新的PDA平皿中培养,观察继代培养物的表型变化,若出现类似衰退症状的培养物,将用提取dsRNA的方法进一步鉴定和确认,只要4个继代培养物中出现1个感染SsDRV的培养物,即计算为传播成功。试验重复100次,共获得400个Let-19菌株的继代分离物。研究证实,在100个对峙培养的培养皿中,有29个培养皿发生了SsDRV成功传播的事件,即传播频率为29%。 -
报告Review of the Research Advances of Biocontrol Factor of Plant Parasitic Nematode
出版时间:2007植物寄生线虫是重要的植物病原物,全世界已报道的植物寄生线虫达200多属5000余种[1],我国粗略统计到2005年底报道的植物线虫约有40属,400种[2]。植物寄生线虫不但为害植物根部,而且还为害茎、叶、花和果实。据估计全球每年因植物寄生线虫造成的经济损失达1000亿美元[3]。植物寄生线虫的生防因子包含天敌(真菌、细菌、病毒、立克氏体、捕食性线虫、涡虫、螨类、昆虫和原生动物等)、动植物、微生物等[4]。1917年美国的Cobb最早提出植物寄生线虫的生物防治,1924年Thorne在美国犹他州将捕食性线虫Iotonchus amphiogonicusy引入甜菜地中并获得成功。其后,各国学者做了大量工作,到20世纪70年代,又开始研究利用捕食线虫防治植物寄生线虫,在法国Cayrol及其合作者利用Arthrobotrys robusta和A.irregularis首先研制成功防治蘑菇栽培中的有害线虫和蔬菜根结线虫的商品制剂Royal 300[5]和Royal 350[6]。从20世纪80年代开始,国内外开始大量调查定殖于固着性线虫卵、雌虫、胞囊上的真菌,国际马铃薯中心组织了40多个国家和地区的专家对Paecilomyces lilacinus进行了防治根结线虫的试验并取得一定结果[7],Paecilomyces lilacinus被研制成商品制剂应用于根结线虫的防治[8]。90年代之后,植物寄生线虫的生防资源挖掘工作大量增加,新的生防因子不断被发现。据统计,关于线虫生物防治的文献中,以真菌为材料的占76%,捕食性线虫占7%,细菌和放线菌占5%左右,其余在3%以下[9]。目前,国内外发现的线虫生防因子主要包括以下几种类型:植物寄生线虫生防真菌包括捕食性真菌、线虫内寄生真菌、卵寄生真菌、产毒真菌、菌根真菌、机会真菌。研究较多的有寡孢节丛孢(Arthrobotrys oligospora)、指状节丛孢(A.dactyloides)、淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)、黑曲霉(Aspergillus niger)、木霉属(Trichoderma spp.)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)以及担子菌中的粗皮侧耳(Pleurotus ostreatus)等[10]。应用于植物寄生线虫的生防真菌有:节丛孢属(Arthrobotrys)的A.irregularis,A.robusta,A.conoides,A.oligospora,A.dactyloides[11]等;单顶孢霉属(Monacrosporium oudemans)的椭圆单顶孢M.ellipsosporium[12];指状节丛孢A.dactyloides[13]。其中不规则节丛孢(A.irregularis)已经制成了商品制剂Royal 300和Royal 350。目前报道的线虫内寄生真菌主要有被毛孢菌(Hirsutella rhossiliensis=Hirsutella heteroderea)[14]和Hirsutella minnesotensis[15]。轮枝霉属(Verticillium)的8种:V.catenulatum,V.chlamydosporium(厚垣轮枝孢),V.sinensis(中国轮枝孢),V.lamellicola(菌褶轮枝霉),V.leptobactum,V.lecanii(蜡蚧轮枝霉),V.psalliotae(蘑菇轮枝霉),V.inseatorum。还有Drechmeria coniospora等[11]。我国已用厚垣孢普可尼亚菌(Pochonia chlamydospora)ZK7菌株制成了“线虫必克”商品制剂。目前研究最多的是淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus。该菌是一类广泛存在的线虫卵寄生土壤真菌。不少研究表明,淡紫拟青霉可以寄生根结线虫Meloidogyne spp.[16]、胞囊线虫Heterodera spp.等植物病原线虫的卵[17],对南方根结线虫卵的寄生率高达60%~70%[7]。刘畅在18℃和25℃条件下,室内测定厚垣轮枝菌V10菌株对南方根结线虫卵的寄生效果,结果表明,在18℃和25℃条件下,V10菌株对南方根结线虫卵的相对寄生率分别为77.22%、73.00%[18]。除寄生作用外,Cayrol等还报道了淡紫拟青霉的培养滤液中含有杀线虫物质。目前,该菌株已被各国学者广泛应用于线虫的生防并成为商品制剂[19]。目前发现的有90多个杀线虫菌物毒素,其中包括担子菌、子囊菌、半知菌中的部分菌物产生杀线虫的毒素。1984年Thorn&Barron报道了侧耳属真菌的5个种具有侵染和消解线虫的活性,1987年他们证明了侧耳属侵染线虫的机制是通过产生毒素作用于线虫,向红琼等的研究也认为糙皮侧耳对腐生线虫的作用机制是杀虫寄生。到目前为止,已经证明侧耳属的P.ostreatus,P.pulmonarius,P.tuberregium,P.strigosus,P.subareo latus,P.cornucopiae,P.cystidiosus,P.citrinopileatus,P.colombinus,P.shodophyllus,P.salmon seostramineus,P.sapidus,P.sajorcaju,P.florrida,P.flabellatus,P.dryinus,P.euosmus,P.eryngii,P.levis,.ferulae,P.spodoleucus,P.memberan cens,P.certicautus等23个种对线虫有活性。汪来发等对草皮侧耳属真菌对松材线虫的作用也进行了初步研究。在对线虫抑制活性的测定中,经过测定的该属的不同种都对线虫有活性,但还没有活性显著强于其他种的优势种,毒力高、活性强的菌株都分属于不同的种[20]。在菌根真菌的研究中,最为关注并被研究最多的是丛枝菌根Arbusculare Mycorrhiza 简称为AM。据报道AM真菌对Globodela rostochiensis,Meloidognearenaria,M.incognita,M.javanica,Heterodera cajani,H.glycines,Helicolylenchus dihstera,Pratylenchus subrachyurus,P.pene-trans,P.zeae,Potylenchulus reniformis,Radopholus citrophilus,R.semilis,Tylenchulus semipenetrans等引起的花生、大豆、蚕豆、鹰嘴豆、棉花、燕麦、番茄、黄瓜、马铃薯、桃、葡萄、柑橘等各种线虫病害,都能不同程度地降低其为害[21]。机会真菌是可以寄生线虫的卵、胞囊或雌虫的一类真菌,有的学者把这种菌物称为机会真菌。对此类真菌的侵染机制已进行了超微结构观察和分子机制研究[22]。Chen和Dickson对12种真菌对大豆胞囊线虫卵的侵染做了扫描电镜和透射电镜观察,其中10种能够侵染[23]。Galper等报道,Cuninghamella elegans可以产生胶原蛋白酶,其菌物在胶原蛋白培养基上的培养滤液可以抑制爪哇根结线虫卵的孵化,影响幼虫的活动和侵入[24]。1982年Zavaleta-Mejia和Van Gundy首次报道了根际细菌对番茄和黄瓜根结线虫侵染的抑制作用,随后Becker在1988年报道了根际细菌对南方根结线虫的防治作用,Jaworski等于1986年将2株对根结线虫具有防治作用的荧光假单胞Pseudomons fluorescens申请了专利。2001年据Copping报道,美国CCT Corp.公司用洋葱假单胞菌Pseudomonas cepacia制成了杀线剂“Deny”。到目前为止,发现有效的根际拮抗细菌有Pseudomons spp.,Bacillus spp.,Agrobacterium radiobacter,Gluconobacter spp.,Sporolactobacillus spp.,Serratia spp.,Acinebacter spp.等,这些根际细菌的作用机理和应用技术都在进一步的研究中 [25]。1906年美国线虫学家Cobb首次报道了巴氏杆菌Pasteuria penetrans对线虫的寄生作用。1996年,Ebert等从水蚤上重又分离到细菌寄生物P.ramosa,并以此作为巴氏杆菌的模式种。现今报道巴氏杆菌可根据其寄主类型及内生孢子分为4个种,即水虱寄生菌P.ramos、根结线虫Meloidogne spp.成虫上的寄生物P.penetrans、仅寄生短体线虫Pratylenchusbrachyurus的P.thornei及可以寄生胞囊线虫Heterodera spp.、球形胞囊线虫Globodera spp.成虫的P.nishizawae。另外有两个未鉴定的种:从德国豌豆胞囊线虫上分离的菌株和从佛罗里达长尾刺线虫上分离的菌株[26]。鉴于巴氏杆菌具备生防菌的诸多优良性状,许多国家和地区都十分重视对该菌的研究。我国在这方面起步较晚,相关研究虽然取得了很大进展,但距离开发成商品制剂还有许多工作要做。苏云金杆菌是一种广谱微生物杀虫剂,它的最大的优点就是能够形成芽孢的同时,也能够形成不同形态且具蛋白性质的伴孢晶体。苏云金杆菌(BT)目前已广泛应用于鳞翅目害虫的防治。1990年Davidas报道,苏云金杆菌β-外毒素对南方根结线虫、大豆胞囊线虫有毒杀作用[27]。放线菌和真菌、细菌一样,是植物寄生线虫的重要天敌类群之一。尽管对放线菌研究很少,但阿维菌素及其衍生物的研究和开发利用是少数成功例子中典型的一个。我国于20世纪80年代末引进和分离到阿维菌素产生菌。1994年由中国农业大学和上海农药研究所等单位开发成功首个AVM产品—北农爱福丁,到2003年6月登记的AVM产品品种达到658个。近30年来国内外陆续发现了莫比霉素(Milbemycin)、戒台霉素(Jietaicin)、阿维菌素(Avermectin)、南昌霉素(Nanchangmycin)等高活性杀虫杀线虫抗生素[28~29]。病毒作为植物寄生线虫的天敌因子研究甚少。迄今为止发现的受病毒感染的线虫只有6种:南方根结线虫Meloidogyne incognita、鼠膀胱线虫Trichosomoides crassicauda、异头锥线虫Dolichodorus heterocephalus、食蚊罗索线虫Romanomermis culicivorax、马氏矮化线虫Tylenchorhynchus martini、Thaumamermis cosgrovei等 [30]。1973年Shepherd等首次报道豌豆胞囊线虫Heterodera goettingiana和马铃薯金线虫Globodera rostochiensis体内存在有立克次氏体,从而证实立克次氏体是线虫的致病因子。1979年Endo也报道大豆胞囊线虫Heyerodera glycines细胞受到立克次氏体的感染。尽管30多年前就证实立克次氏体能够感染胞囊线虫,但利用立克次氏体进行植物寄生线虫的生物防治至今未见报道。研究发现,一些植物能产生对线虫的行为和发育有较强影响的物质,最终可引起线虫死亡,或干扰卵孵化、蜕皮和激素调控,作用方式也多种多样。目前已知约有75科植物含有杀线虫物质,其中菊科和豆科植物是研究最多的杀线虫植物。非洲万寿菊(Tagetes erecta)的根部、叶部提取物都表现明显的杀线虫活性或抑制卵孵化。日本杉(Cryptomeria japonica)的叶片对南方根结线虫有显著防效[31];毛鱼藤(Derrielliptica)根有极强杀线活性,三尖杉(Cephalotaxus fortunei)茎叶、粗榧(Cephalotaxus sinensis)树叶、狼牙刺(Sophora viciifolia)种子、紫斑牡丹(Paeonia suffruticosa var.papaveracea)茎的抽提物对南方根结线虫和水稻潜根线虫具极强的杀线虫活性[32]。众多研究表明,万寿菊是应用植物防治线虫的生防研究中使用最多的一种植物[33]。有机改良剂种类繁多,主要有壳质粗粉、植物残体及加工废料、绿肥、饼肥、堆肥和粪肥等。在有机改良剂防治根结线虫病方面国内外也有不少的报道,例如 Singh 等报道了不同植物饼肥提取物对根结线虫卵孵化的影响,发现菜子饼和棉子饼的水煮提取物可降低孵化率 90%以上[34]。本课题组研究了不同植物有机质对黄瓜根结线虫病的防治效果。盆栽试验结果表明:蓖麻叶、麦糠、楝叶和花生饼粕对黄瓜根结线虫病防治效果分别达到70.44%、68.17%、56.09%和54.92%;田间小区的试验结果与盆栽试验结果基本一致,防效较好的有麦糠、楝叶、蓖麻叶和菜籽饼粕4个处理,防效分别达到71.55%、69.99%,63.14%和62.19%[35]。刘辉志研究发现将不同有机改良剂及其生防菌混用,可以提高防治效果[36]。捕食性线虫一直是国内外线虫学家关注的重点之一,其中最重要的属有Odontopharynx,Butlerius,Onchulus,Mononchuus,Ironus,Labronema,Aporcelaimus,Sectonema,Actinoloaimus,Carcharolaimus和Nygolaimus。此外Discolaimium,Discolaimus,Eudorylaimus,Tripyla中的一些种也捕食线虫。捕食性线虫在土壤中分布广、数量大,Rahaman 和Ahmad从90个土壤样品中分离的64个种中,捕食线虫占第二位,并且Aporcelaimellus密度大,数量多[37]。捕食性节肢动物的研究也很广泛,可取食植物线虫的节肢动物主要有4种功能类型:①普通捕食者:主要有吸食猎物的螨、捕食猎物的蜈蚣、Symphylan也在此列;②线虫捕食者:主要有螨类如犹伊螨属(Eviphis)、异伊螨属(Alliphis)、Crasscheles三类吸食体液的螨类以及Alycus和无爪螨属Alicorhagia;③吸食真菌或线虫体液者:如Tydeus,Eupodes,Tarsonemus,Bakerdania,Pediculaster,Scutacarus,Speleorchestes等;④摄取线虫某一部分:如Oribatula,Zygoribatula,Pilogalumna,Tyrophagus,Folsomia,Isotoma,Oppiella,Joshuella,Ceratocepheus,Anotylus,Tullbergia,Hypogastura 等 [38~39]。经过国内外植物寄生线虫研究工作者的共同努力,植物寄生线虫的生物防治研究取得了很大成就,大量的生防资源被挖掘出来并进行了深入研究,一些生防因子也已被开发利用,除广泛使用的阿维菌素(AVM)和线虫必克外,还有防治蔬菜根结线虫的Pasteuria penenteans;防治植物根结线虫和胞囊线虫的Paecilomyces lilacinu,Pochonia chlamydosporia;防治大豆胞囊线虫的不产孢真菌(ARF18);防治植物寄生线虫的Myrothecium verrucaria和H.rhossilienesis,防治松材线虫的植物杀线剂杀线一号等。线虫分子生物学技术近年来也取得长足发展,尤其是在线虫生防资源调查、高效生防菌株的选育、基因改良、菌剂研制、抗病育种及线虫与植物的互作等研究领域得到广泛应用[11]。此外,其他一些相关的研究方法和评价办法也日臻成熟,这些都为我们进一步开展更深入和更广泛的研究奠定了良好的基础。在植物寄生线虫的生物防治研究中,存在的突出问题主要是:(1)在生防因子方面,筛选出的生防因子主要是真菌,而细菌和放线菌很少,并且在植物寄生线虫的生防因子的作用机制研究方面还较匮乏。(2)所开发出的生防制剂仍然存在稳定性差、自然条件下存贮时间短的问题,并且剂型单一,推广应用难度大。(3)优良菌株筛选模型和评价体系不完备。优良菌株筛选模型和评价标准是植物寄生线虫生物防治及生防制剂开发的基础,但至今国内外仍然没有统一的、科学的筛选模型和评价标准,尤其是生防制剂的安全评价标准。(4)在杀线植物、杀线植物产品和有机改良剂利用研究方面仍较少,一些植物病原线虫如禾谷胞囊线虫的生防研究仍较滞后。(5)在植物寄生线虫的生防微生物代谢产物的生防作用研究方面,国内外报道较少,如何利用微生物高活性代谢产物为模板,开发出更多的生物源杀线剂,仍是需要进一步深入研究解决的问题。运用有益生物防治植物病害,包括植物寄生线虫在内,是今后植物病害防治的重要手段。在自然界,线虫的天敌数量大、种类多、分布广,有着极大的生防潜力;杀线虫植物在自然界也广泛存在。国内外学者虽然对植物寄生线虫的生物学、生态学、生防因子等方面进行了深入研究,并开发出一些生防制剂,但在植物寄生线虫的生防因子的作用机制研究方面还较匮乏,对筛选出来的生防因子进行产品开发和利用技术研究还相对滞后,致使能够在生产中应用的生防产品还相对较少,而且效果不够稳定。今后需要重点研究解决的问题包括土壤的抑菌作用问题、生防菌的风险评估、生防制剂的质量评价标准和体系问题等。在生防制剂的开发和应用技术研究方面,应投入更多人力物力进行攻关,有关研究单位应加强合作和交流。此外,在利用微生物高活性代谢产物为模板,开发生物源杀线剂,对杀线植物的调查和挖掘工作也需进一步深入开展。 -
报告Preliminary Studies on the Effect of Coniothyrium minitans ZS-1 on Sclerotinia sclerotiorum Hypovirulent Strain Ep-1PN
出版时间:2007真菌病毒广泛存在于真菌中,其核酸类型多为dsRNA,也有少数为ssRNA。大多数真菌被侵染后不表现症状,但有些真菌病毒可以对寄主造成显著影响,如引致寄主真菌生长缓慢、菌落形态异常和致病力显著下降等,即弱毒现象(Hypovirulence)。由于真菌病毒在植物病原真菌间扩散可导致病原真菌群体出现致病力衰退。因此,与植物病原真菌衰退相关的真菌病毒在植物病害控制中有重要的作用。前期研究证实核盘菌Ep-1PN菌株的衰退与真菌病毒SsDRV(核盘菌致病力衰退相关病毒)有关。但是我们发现Ep-1PN菌株可以通过有性繁殖摆脱SsDRV的为害,而恢复生长和致病,通过RT-PCR检测,Ep-1PN菌株的子囊孢子子代不携带有SsDRV;在Ep-1PN菌株的菌核分离物中,也可以获得恢复正常表型的培养物,这些培养物或携带SsDRV或不携带SsDRV。这即表明,在自然界感染真菌病毒(SsDRV)的核盘菌仍然有可能摆脱SsDRV的影响。带毒真菌的这种脱毒作用对利用真菌病毒控制植物病害造成了潜在的风险。植物病原真菌周遍存在众多的微生物,它们是否对带毒真菌的脱毒作用目前并不明了。盾壳霉(Coniothyrium minitans)是核盘菌的重寄生菌,其所需的适宜温度与核盘菌的相似,随核盘菌生长而生长。我们推定盾壳霉可能对Ep-1PN菌株的脱毒作用存在一定影响。将核盘菌Ep-1PN菌株在PDA平板上于20℃培养2~4天后,形成小菌落,移走菌落中接种时遗留的Ep-1PN菌株的菌丝块,并在此部位接种盾壳霉ZS-1菌株的菌丝块,继续置于20℃培养7~10天。依据混合菌落边缘的特征将其分成4种类型:A.菌落边缘长出生长速度较快的核盘菌菌丝,出现的频率为16.3%;B.菌落边缘大部分是类似核盘菌Ep-1PN菌株的菌落,出现的频率为47.1%;C.菌落边缘大部分是盾壳霉ZS-1菌株菌落,出现的频率为28.8%;D.菌落边缘全部是ZS-1菌株的菌落,出现的频率为7.7%。对A型菌落,挑取核盘菌菌丝尖端进行继代培养。随机选择34株进行表型分析,测定其菌丝生长速度、致病力和观察其菌落形态。结果表明这些继代培养物均恢复为强毒力菌株的特性,称恢复菌株。这些恢复菌株的菌落形态正常、生长速度在1.7~3.0cm/天,其中17株培养物集中于2.2~2.4cm/天,8株培养物的生长速度大于2.4 cm/天。它们的致病力较强,病斑扩展速度在1.0~1.4cm/天之间,其中16株培养物的病斑扩展速度在1.15~1.3cm/天之间,有9株培养物的扩展速度大于1.3cm/天;而Ep-1PN菌株仅能形成微小的病斑,或不形成病斑。这些恢复菌株对SsDRV不具有抗性,与Ep-1PN菌株对峙培养后又重新被感染表现弱毒特性。对这些恢复菌株提取dsRNA发现大部分含有7.4 kb的片段,小部分菌株同时含有7.4kb和6.4kp的片段,还有一部分未检测出含任何dsRNA。未发现含有1.0kb或仅含6.4 kb,但不含7.4 kp片段的培养物。我们的研究证实核盘菌寄生真菌盾壳霉对Ep-1PN菌株摆脱SsDRV的影响具有一定的促进作用,盾壳霉促进Ep-1PN菌株摆脱SsDRV的影响的机理有待进一步研究。
