水稻条纹叶枯病由灰飞虱传播的发生严重的病毒病，近几年来该病在诸暨市发生面积不断扩大，发病程度越来越重，对水稻安全生产构成重大威胁。抗性品种选育推广是防治条纹叶枯病最经济有效的措施，为此，我们对诸暨市引种试验的晚粳糯新品种（系）和在本市进行的全省联合检验的晚粳糯新品种（系）系，进行了条纹叶枯病田间自然发病的抗性测定，现将结果报告如下：分4组处理。第一组本地引进试种品种，E44、杂2、杂1、杂3、杂4、杂5、浙粳22、E8、F104、加优04-1、加优06-1等11个新品种，以甬优1号作对照品种；第二组12个全省联合检验品种（系）（简称联检），春优59、05G354、浙优2611、春优658、05G361、浙优0630、春优6172、05G227、嘉花一号、A/XR155、05G290、嘉优06-2、八优158、秀水63（对照）等13个品种；第三组作苗情观察，浙糯5号、春江糯2号、浙粳22、春江026、春江026、加优06-1、加优04-1、秀优5号、加优1号、E8、甬优2号、甬优1号等12个本地推广品种；第四组全省展示品种，秀水63、E8、浙粳22、秀水09、秀优5号、春江026、浙优9号、加乐优2号、甬优5号、加优1号等10个品种。由迁入试验小区的灰飞虱自然传毒接种。引种品试和联检在江藻镇陈潘村进行，每个品种重复3次种植，随机区组排列，5月30日播种，6月24日移栽，小区面积13.3m2，株行距品试为23.3cm×20cm，联检为30cm×16.7cm。苗情品种分别在江藻镇陈潘村和浣东街道泰南村种植作两地观察，5月30日播种，6月25日移栽，小区面积陈潘村100m2，种植2352丛，泰南村20m2，种植516丛。展示品种分别在王家井镇楼许村和枫桥镇择墅下村两地种植，每个品种种植667m2以上，择墅下点在5月22～23日播种，6月18～20日移栽，楼许点6月2～3日播种旱地育秧，6月18日左右移栽。所有处理除条纹叶枯病没有进行专门预防外，其他病虫均进行常规防治，每个试验或观察区肥水管理基本一致。8月下旬水稻未抽穗时调查；调查数量为，品试或联检试验及苗情观察的品种全小区调查，展示品种每块田调查500丛，记载发病丛数、株数和5丛的苗数。计算丛发病率和株发病率，并作统计分析。引种试验品种和联检品种的条纹叶枯病发生况调查结果见表1和表2。引种试验品种中的E44、E8、F104、杂5等没有条纹叶枯病的发生，与其他品种相比达显著或极显著差异，而杂1、加优06-1、浙粳22、杂4和加优04-1等品种的丛发病率和株发病率分别在1%和0.2%以上，浙粳22和加优04-1发病程度最重，对照品种甬优1号发病最轻。联检品种中代号1、2、3号和8号没有条纹叶枯病发病，代号9、10、11、12号丛发病率和株发病率分别在1%和0.2%以上；另外，丛发病率在1%、株发病率在0.2%以上的还有代号4号和7号。联检品种中除代号10发病程度重，与其他品种比较有显著性差异外，其他品种间差异不显著。苗情点品种条纹叶枯病抗性测定结果见表3。在两地种植都没有发生条纹叶枯病的有E8，而丛发病率和株发病率分别在1%、0.2%以上的品种有浙糯5号、春江糯2号、加优06-1、加优04-1和加优1号，其中春江糯2号发病最重，与E8比较有显著差异，但与其他品种间无显著差异；秀优5号丛发病率1%、株发病率0.2%。品种平均发病丛发病率（%）株发病率（%）E440.00cB0.000cD杂20.86bAB0.210bBCD杂11.05abA0.257bABC加优06-11.05abA0.140bcCD浙粳221.63aA0.407aABE80.00cB0.000cD杂30.09cB0.009cD甬优1号0.09cB0.018cD杂41.21abA0.257bABCF1040.00cB0.000cD杂50.00cB0.000cD加优04-11.48abA0.427aA表1 引种试验品种条纹叶枯病发生情况表（浙江诸暨，2005～2006）品种代号平均发病丛发病率（%）株发病率（%）10.00bA0.000bB20.00bA0.000bB30.00bA0.000bB40.79abA0.340bAB50.00bA0.000bB60.32bA0.097bB70.95abA0.207bAB80.00bA0.000bB91.27abA0.510bAB101.90abA1.227aA111.11abA0.207bAB121.43abA0.253bAB130.48abA0.050bB表2 联检品种条纹叶枯病发生情况表 （浙江诸暨，2005～2006）品种丛发病率（%）株发病率（%）陈泮点泰南点平均陈泮点泰南点平均浙糯5号0.461.931.195aA0.080.410.245abA春江糯2号0.565.232.895aA0.150.780.465aA浙粳220.38—0.380.075—0.075春江026选0.04—0.040.007—0.007春江0260.17—0.170.016—0.016加优06-10.173.41.785aA0.0240.520.272abA加优04-10.531.871.2aA0.430.340.385abA秀优5号1.020.940.98aA0.240.160.20abA加优1号0.852.641.745aA0.130.420.275abAE8000.00aA000.00bA甬优2号0.510.340.425aA0.0760.030.053abA甬优1号0.170.0850.128aA0.0180.0290.024abA表3 苗情点品种条纹叶枯病发病情况（浙江诸暨，2005～2006）展示点品种抗条纹叶枯病测定结果见表4。在展示的10个品种中，E8在两地都没有发现病苗，丛发病率1%、株发病率0.2%以上的品种有浙粳22、秀水09、春江026和加优1号，这4个品种在两地都有发病，择墅下点重于楼许点；而秀优5号、浙优9号、加乐优2号和甬优2号在枫桥择墅下点均有发病，分析发病程度差异的原因可能与播种时间和方式不同有关。品种丛发病率（%）株发病率（%）楼许点枫桥点平均楼许点枫桥点平均秀水630.20.60.4aA0.010.060.035aAE8000.0aA000.000aA浙粳2212.81.9aA0.120.630.375aA秀水091.23.22.2aA0.170.560.365aA秀优5号010.5aA00.140.07aA春江02622.22.1aA0.240.490.365aA浙优9号01.20.6aA00.290.145aA加乐优2号00.60.3aA00.070.035aA甬优5号00.20.1aA00.040.02aA加优1号0.63.82.2aA0.121.210.665aA表4 展示品种发病情况调查表（浙江诸暨，2005～2006）从多点试验可以看出，多数晚粳糯品种（系）不抗条纹叶枯病，只是发病程度有轻重而异，而E8在多点调查或试验中都没有发现条纹叶枯病的发生，从种质资源看它是一个籼粳交品种，2006年浙江诸暨市进行较大面积示范种植，显示出产量较高、品质较优、抗病性较好、但耐肥能力较差的特性，具有一定的推广价值。其他如E44、F104、杂5等也有较好抗病表现。调查观察表明，甬优6号和甬优8号没有发生条纹叶枯病，甬优系列的其他品种发病也较轻，如甬优1号、甬优2号、甬优5号，几年调查结果趋势基本一致。但是秀优5号、加优1号和秀水09等品种，对条纹叶枯病比较容易感染，且发病程度较重，对这些品种种植区，条纹叶枯病的防范要采取更加严格的措施。

苹果 （ Malus pumila Mill.） 是世界上栽培最为普遍的落叶果树之一，有着很强的生态适应性，地域分布极为广泛。中国不仅是苹果属植物的发源地之一，拥有悠久栽培历史和极为丰富的苹果种质资源，也是世界上最大的苹果生产国和消费国，在世界苹果产业中占有重要的地位。近年来，我国苹果栽培面积快速增长，苹果产量和质量得到了稳步提髙。据统计数据显示，2015年我国苹果栽培面积和产量分别达到232 万 hm2和 4300万 t，居世界首位。苹果在调整农业产业结构、增加农民收入、促进地方经济快速发展等方面发挥着越来越重要的作用。病害是制约着苹果产业发展的重要影响因素。其中苹果炭疽病是苹果生产中普遍发生的一种重要病害，包括发生在果实上的苦腐病（Bitter rot of apple） 和主要发生在叶片上的炭疽菌叶枯病 （ Glomerella leaf spot，GLS）。苦腐病又被称作晚腐病，是苹果果实的三大病害之一，多在果实成熟期或半成熟期发病，主要是引起大量落果、果实腐烂，降低了果实的产量和商品价值。而苹果炭疽菌叶枯病是一种流行性很强的病害，由于该病潜育期短、发病快，在外界环境条件适宜的情况下从侵染到发病落叶仅需要3d或者更短的时间，造成树叶大量干枯、脱落，严重时形成二次开花，也侵染果实引起坏死性斑点，不仅导致当季果实产量和品质的下降，而且大大削弱了翌年的树势，严重地威胁着苹果产业的发展。特别是广泛种植于我国各大苹果产区的重要栽培品种 ‘金冠’ ‘嘎拉’ 品种极易感病，尤其是 ‘金冠’ 在世界苹果生产国中 （中国除外） 品种比例最高，这也是选择 ‘金冠’作为苹果基因组测序材料的重要原因。它不仅是生产上的优良品种，同时也是苹果育种的核心亲本 （陈学森，2015），所以炭疽菌叶枯病的侵染不仅仅是对 ‘金冠’ ‘嘎拉’ 等品种的侵害，而可能是对 ‘金冠’ 系、‘嘎拉’ 系苹果的为害。化学药物防治是目前采用的主要防治方法，但成效甚微。所以急需培育出抗病品种从根本上解决该问题，同时也减少了果园化学试剂的使用，降低农药残留，保证果品的安全。但育种实践表明，要实现育种目标，在亲本选择与选配恰当的前提条件下，必须保证每个杂交组合有足够数量的后代群体，至少 3000株 （陈学森，2010），加上果树具有童期长 （6～12 年），基因组高度杂合，杂种后代广泛分离，自交不亲和，许多重要的经济性状是多基因控制的数量性状等特点，使得常规育种工作难度大、周期长。因此利用杂交后代早期选择技术，及早地剔除非目标基因的单株，减少杂种后代的数目，提高筛选效率，减少盲目性是提高育种效率的最实用有效的方法。随着分子生物学技术的快速发展，特别是以DNA多态性为基础的分子标记技术在苹果育种中的应用，大大提高了目标性状早期选择的效率，缩短了育种周期，加快了新品种选育的速率。同时，通过构建高密度分子标记遗传图谱对重要农艺性状基因进行标记定位，找到与目的基因紧密连锁的分子标记，不断缩小候选区域进而克隆该基因，并验证其功能，阐明其作用机制，通过基因工程实现对果树性状的改良。因此，揭示苹果炭疽菌叶枯病的抗性遗传规律，发掘与抗性基因紧密连锁的分子标记，构建精细的抗病遗传图谱对于定位抗病基因，研究基因功能，探索、掌握抗病机制，培育抗病品种有着重要的意义。苹果炭疽菌叶枯病 （ Glomerella Leaf Spot，GLS） 是近几年在中国大部分苹果主产区新出现的一种流行性很强的真菌病害。主要为害苹果叶片，造成病叶早期的干枯、脱落，也侵染果实引起坏死性斑点，导致苹果失去商品价值 （刘源霞等，2015）。该病于1988年首次报道于巴西，导致感病的 ‘嘎拉’ 苹果70%以上的叶片脱落，经鉴定其病原为围小丛壳Glomerella cingulate （Leite et al.，1988；Camilo＆Denar-di，2002；González et al.，1999，2003），为盘长孢状刺盘孢 Colleto-trichum gloeosporioides 的有性态，定名为围小丛壳叶斑病 （ Glomerella leaf spot，GLS），在中国被称为炭疽菌叶枯病。1997—1999年在巴西6个苹果产区均发现了炭疽菌叶枯病，由于‘嘎拉’ 品种是巴西的主栽品种，所以该病严重威胁着巴西苹果产业，成为巴西苹果的主要病害 （Katsurayama et al.，2000；Crusius et al.，2002；Velho et al.，2014）。1998 年在美国田纳西州的两个 ‘嘎拉’果园中暴发了苹果炭疽菌叶枯病，引起大量落叶，这也是美国首次报道苹果炭疽菌叶枯病的发生，随后在佐治亚州和北卡罗来纳州也发现了这种病害 （González，1999，2003）。我国最早于2008 年发现了炭疽菌叶枯病 （王素芳，2009），2010年相继报道了在黄河故道苹果主产区发现了炭疽叶枯病，该病引起 ‘嘎拉’ ‘金冠’ 等苹果的大量落叶。尤为严重的是在 2011 年，据报道江苏丰县、安徽砀山、淮北等地栽培的 ‘嘎拉’ ‘金冠’ 等苹果品种大面积发生叶斑病，导致叶片干枯脱落，严重的造成果树二次开花 （宋清等，2012） （附图1-1）。经鉴定该病为苹果炭疽菌叶枯病，病原为围小丛壳 G. cingulata （宋清等，2012；Wang et al.，2012）。González 等 （2006）通过利用mtDNA-RFLP 对病原菌的甘油酸脱氢酶核苷酸序列进行分析，认为引起 GLS 的病原分别属于尖孢炭疽菌 C. acutatum 和围小丛壳G. cingulata。这两种菌分别归属于尖胞刺盘孢复合群和盘长孢状刺盘孢复合群 （王嶶等，2015）。王薇等 （2015） 的研究明确了在我国引起该病害的病原为果生刺盘孢 （ Colletotrichum fructicola） 和隐秘刺盘孢 （ C. aenigma），均归属于盘长孢状刺盘孢复合群。中国是否存在尖孢刺盘孢复合群的病原，还没有明确的结论。由苹果叶枯炭疽菌引起的苹果炭疽菌叶枯病症状为 （附图1-2）：在幼叶上发病时，初期表现为红至黄褐色或红褐色小点，针尖大小，边缘不规则，病健交界不清晰。在老叶上发病时，初期表现为黑色坏死性病斑，病斑边缘模糊。在7—8月高温高湿或连续阴雨的条件下，病斑迅速扩展，2～3d便可使整个叶片失水、焦枯、变黑、坏死，很快脱落。感病叶片在环境条件不适宜时，病斑停止扩展，在叶片上形成大小不等的枯死斑，病斑周围的健康组织逐渐变黄，叶片呈现花叶状，病重叶片逐渐脱落。病斑的形状多为圆形或椭圆形，也可能形成不规则的形状。病原菌侵染果实时，前期为红褐色小点，然后变为圆形或近圆形红褐色斑点，病斑周围有红褐色晕圈，中间变为灰白色，微凹。在自然环境条件下果实病斑上很少产生分生孢子，与常见的苹果炭疽病的症状明显不同。叶片上的病斑多为直径在 1～2 mm的小斑点，也有少数病斑直径超过1 cm。后期病斑中央产生黑色小点 （分生孢子盘），呈轮纹状排列，病斑上形成大量淡黄色分生孢子堆，当孢子萌发时会在病斑上产生白色丝状物 （宋清等，2012；符丹丹，2014）。苹果炭疽菌叶枯病的病原菌有性世代为 Glomerella cingulata （Stonem） Spauld＆Schrenk，属真菌子囊菌 （亚） 门，球壳目，小丛壳属，围小丛壳菌；无性世代为胶孢炭疽菌 Colletotrichum gloeosporioides （Penz.） Penz.＆Sacc.和尖孢炭疽菌C. acutatum J.H.Simmonds （González，2003）。在PDA 平板上培养的菌落特征为（附图1-2e）：菌落边缘完整，呈规则圆形，气生菌丝呈絮状，比较稀疏，边缘颜色为白色中间为淡灰色。分生孢子堆呈柠檬色或橙色（符丹丹，2014）。在一般情况下，苹果炭疽叶枯病病原菌主要在苹果的休眠芽和枝条上越冬，也可以以菌丝体的形态在病僵果、干枝、果台和有虫害的树枝上越冬。5月在条件适宜的情况下产生分生孢子，成为初侵染源，越冬的子囊壳也是初侵染源之一 （宋清等，2012）。病原孢子可以随着雨水或气流传播，经皮孔或伤口侵染后，进入苹果叶片或果实内。病害发生时，首先形成中心病株，随后迅速的向四周蔓延侵染，可多次侵染，最终造成病害大面积的发生。Wang等 （2015） 的试验结果表明，温度和湿度是炭疽菌叶枯病发生的必要条件。苹果炭疽菌叶枯病病原菌分生孢子萌发的温度范围在15～35℃，最适宜温度为30℃。菌丝生长的温度范围在15～35℃，最适宜温度为25℃。炭疽菌叶枯病病原菌主要依靠雨水传播，病原菌分生孢子的萌发和侵染也需要自由水或高湿环境，而我国北方苹果主产区6—8月气温多在30℃左右，雨水充沛，满足了苹果炭疽菌叶枯病病原菌的传播、侵染和发病条件，是苹果炭疽菌叶枯病病害发生的高峰期。植物虽然在充满多种潜在病原微生物的环境中生长，但是在多数情况下植物并不表现出感病，这表明，植物在与病原微生物共同进化过程中，为了防御病原微生物的入侵，逐渐形成一套天然的免疫系统（Takken et al.，2009；Boller et al.，2009）。研究表明，病原微生物表面存在着一些保守分子，而且很少发生变异，对维持微生物的基本生物学特征非常重要。这些保守的分子特征被称为病原相关分子模式 （Pathogen Associated Molecular Patterns，PAMPs） （Jones and Dangl，2006），例如细菌的鞭毛蛋白 （flagellin）。这些保守的分子并非病原微生物所特有，而是广泛的存在于微生物中（Zipfel et al.，2008），所以它们也被称之为微生物相关分子模式（Microbe-associated Molecular Pattern，MAMPs）。真菌的病原相关分子模式主要包括多聚半乳糖醛酸内切酶、麦角甾醇、木聚糖酶以及细胞壁衍生物葡聚糖和几丁质等；细菌的病原相关分子模式主要包括冷激蛋白、脂多糖、延伸因子 （EF-Tu） 及鞭毛蛋白等，卵菌的病原相关分子模式主要包括 β-葡聚糖及转谷氨酰胺酶等 （Van et al.，2008；Naito et al.，2008）。与之相对应，植物的细胞表面存在着识别病原相关分子模式的模式识别受体 （Pattern Recognition Receptors，PRRs）。P RRs是一类跨膜蛋白，具有高度的灵敏性和专化性，大都是存在于细胞表面的受体激酶或者具有亮氨酸重复序列的受体样蛋白 （LRR-RLP） （Fritz-Laylin et al.，2005）。例如，鞭毛蛋白的识别受体 FLS2 （Gomez-Gomez，et al.，2000；Chinchilla，et al.，2006）、水稻几丁质酶的识别受体CEBiP （Kaku et al.，2006）、延伸因子的识别受体EFR （EF-Tu receptor） （Zipfel et al.，2006）、水稻 Ax21 的识别受体 XA21 （Park et al.，2010）、拟南芥几丁质酶的识别受体CERKl （Miya et al.，2007；Wan et al.，2008）、水稻几丁质酶的识别受体OsCERK1 （Chen et al.，2010）等。在病原微生物与植物表面接触的瞬间，植物通过其细胞表面的PRRs感知病原微生物的 PAMPs，从而识别各类微生物，激活一系列的信号元件，启动植物的先天免疫反应 （Zhang，2010）。这种通过植物的PRRs感知 PAMPs并启动的主动防卫反应被定义为植物的基础抗性 （Basal Disease Resistance），也称为基础免疫 （Basal Immunity） （Boller et al.，2009）。该免疫过程被称为病原物相关分子模式触发免疫 （PAMP-triggered Immunity，PTI），可以激活植物体内的一系列抗病反应，包括激酶的活化、胼胝质沉积、PR-蛋白的表达以及miRNA 的合成等 （Navarro et al.，2008），从而帮助植物阻止了环境中绝大多数病原微生物的入侵 （赵开军等，2011；柏素花，2012；程曦等，2012）。在PTI中，研究最为清楚的 PAMPs 及其相应 PRR 是细菌的鞭毛蛋白以及拟南芥中鞭毛蛋白的识别受体 FLS2 （Flagellin-sensing 2）。鞭毛蛋白是一种构成细菌鞭毛的粒状蛋白。在对铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa） 的序列分析中发现，其鞭毛蛋白 N 端存在着一个肽段 （flg22），含有22个氨基酸，具有激发子活性。该区域在革兰氏阴性菌中高度保守 （Felix et al.，1999）。Chinchilla等 （2006）发现在模式植物拟南芥中，鞭毛蛋白的识别受体是富含亮氨酸重复序列的类受体蛋白激酶 （Leucine-rich repeat receptor-like kinase，LRR-RLK） FLS2。LRR-RLK是一类单跨膜蛋白，通常由富含亮氨酸重复序列的膜外功能区，跨膜区以及胞内丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶区组成。FLS2能特异性识别并结合 flg22。现已证明番茄、烟草以及水稻中的FLS2 同源蛋白均对鞭毛蛋白具有识别功能 （程曦等，2012）。水稻白叶枯病菌 （ Xanthomonas oryzae pv.Oryzae） 的病原相关分子模式（PAMP） 是N末端具有一个硫酸化肽段 （axYS22） 的蛋白 Ax21，由17个氨基酸组成。 axYS22 结构在所有黄单胞菌属细菌中高度保守。而在水稻中能够结合并识别 axYS22的模式识别受体是LRRXII 亚家族的类受体激酶XA21 蛋白 （Lee et al.，2009）。几丁质是大多数高等真菌细胞壁的主要组成成份。源于几丁质的 N-乙酰几丁寡糖是许多植物的PAMP。水稻几丁质结合蛋白 （Chitin elicitor binding protein，CE-BiP） 和拟南芥的受体激酶 （LysM-containing chitin elicitor receptor ki-nase，CERKl） 是典型的真菌病原识别受体。水稻的几丁质结合蛋白是一类跨膜蛋白，带有两个胞外 LysM 基序，能够与几丁质结合，但缺少胞内蛋白激酶区域。这很可能暗示着CEBiP 介导的免疫反应需要其他受体的参与 （Kaku et al.，2006）。拟南芥的受体激酶含有三个胞外LysM基序和一个胞内丝氨酸/苏氨酸激酶结构域，它能够在体外直接结合几丁质 （Lizasa et al.，2010）。植物通过PRRs识别外来病原微生物的 PAMPs触发 PTI，成功抵挡了大部分病原微生物的侵入，保护宿主免受侵染。然而有少数病原微生物依然能够通过效应子抑制 PTI，从而成功避开宿主的防御，进而展开进一步入侵。效应子对P TI的抑制方式是多样的，一部分效应子可能促进病原物扩散或植物细胞养分渗漏 （Badel et al.，2002），一部分效应子有可能在卵菌及真菌侵染植物细胞并形成吸器外基质的过程中起到了框架结构作用 （Schulze-Lefert et al.，2003），一部分效应子则有可能对P TI过程中的一个或多个成分起到了抑制作用。在植物的许多致病细菌中都具有III型分泌系统 （Type III secretion system，TTSS）。该系统能够使致病细菌直接将效应子送入宿主植物细胞中。细菌效应子常常通过模仿或抑制真核生物的细胞功能来实现病原菌对宿主的侵染。在拟南芥及烟草中，丁香假单胞菌株 DC3000 所分泌的效应子AvrPto以及 AvrPtoB 能够成功的抑制 PTI的防卫反应并促进细菌繁殖。对这两种蛋白结构的分析表明， AvrPto可能作为一种蛋白激酶抑制剂，与FLS2、 BAK1及EFR的激酶区域相互作用，抑制了 PRRs的激酶活性 （Xiang et al.，2008），并干扰了 FLS2-BAK1 复合体的形成 （Shan et al.，2008）。 AvrPtoB是一种类泛素连接酶蛋白，其酶活性与 FLS2 的泛素化及降解有关 （Gohre et al.，2008）。丁香假单胞菌的另一个效应子 HopAI1 是一个磷酸苏氨酸裂解酶，能够使丝裂原活化蛋白激酶 （mitogen-activatedprotein kinases，MAPKs） MPK3和MPK6去磷酸化，从而实现了对PRR信号的传导终止，抑制了宿主PTI的功能 （Zhang et al.，2007）。病原微生物能够通过效应子的作用抑制宿主的 P TI防卫反应，从而成功的进入宿主体内。病原微生物的效应子是菌种甚至小种所特有的。然而在自然选择压力下，植物也相应的进化出能够特异性的识别这些效应子的受体，在植物细胞内部开启了由效应子触发的免疫反应（Effector-triggered immunity，ETI） （Takken and Tameling，2009）。该免疫主要依靠抗病基因 （Resistance gene，R gene） 所编码的NB-LRR （Nucleotide binding-leucine rich repeat） 蛋白产物起作用，它们能够识别病原菌效应子，激活并介导小种专化抗性。这种抗性通常伴随有局部细胞死亡即超敏反应 （hypersensitive response，HR）。植物 NB-LRR 蛋白是植物细胞内的一类能与核苷酸结合并具有亮氨酸重复序列的蛋白质，是由一个多变的N 末端，C末端的LRR区域及一个NB-ARC结构域构成 （Elmore et al.，2011）。植物识别效应子并导致NB-LRR蛋白构象发生改变，从而将 NB-LRR 蛋白由抑制状态转变为激活状态，进一步诱导下游信号的转导 （Collier et al.，2009），从而实现对病原菌的防御反应。NB-LRR 蛋白对效应子的识别一般采用两种方式：间接识别和直接识别。间接识别大都是由病原效应子诱导特定的宿主蛋白发生修饰，修饰的宿主蛋白再激活 NB-LRR蛋白，完成抗病反应。拟南芥中的 RIN4 蛋白就是一种能够被病原效应子特定诱导的宿主蛋白。该蛋白是多种病原效应子 （ AvrRpt2、AvrRpm1、 AvrB 及 HopF2） 的靶标，在病原效应子的诱导作用下，RIN4蛋白被修饰，从而激活NB-LRR 蛋白，触发下游免疫应答。 Avr-Rpt2对RIN4的修饰作用是通过对RIN4蛋白的直接裂解完成的，从而激活NB-LRR蛋白RPS2介导的 ETI （Axtell et al.，2003）。直接识别是NB-LRR 蛋白与病原菌的效应子直接结合。例如，拟南芥中的RRS1-R 蛋白能够与茄科雷尔氏菌 （ Ralstoniasolanacearum） 的效应子Pop2 直接结合，从而启动了ETI应答 （Deslandes et al.，2003）。通过酵母双杂交实验也证明了亚麻的 TIR-NB-LRR 蛋白能够与亚麻锈病病菌的效应子Avr567相互作用，开启ETI应答 （Dodds et al.，2006）。植物与病原微生物之间相互作用并协同进化的过程被 Jones 等（2006） 总结为 “之” 字形模型 （附图1-3）：这个过程可以分为四个阶段，第一阶段：触发 P TI。植物通过 P RRs识别绝大多数病原微生物的 PAMPs，从而引发基础抗性。第二阶段：抑制 PTI。病原微生物相应的进化出效应子来抑制 PTI，避开宿主的防御，对植物展开再次侵染，此时植物对病原微生物是感病的。第三阶段：触发 ETI。在自然选择压力下，植物进化出能够特异性识别相应效应子的 NB-LRR蛋白，激发防御反应，阻止病原微生物的进一步侵染。第四阶段：避开 ETI。病原微生物通过不同的进化策略，产生新的效应子，展开新一轮的入侵。长期以来，作物的抗病育种主要使用了小种专化性抗病性 （即过敏性坏死反应类型），由于病原微生物生理小种的变异，导致作物抗病性的 “丧失”，缩短了抗病品种的使用年限。而且随着作物产量水平的不断提高，农田生态条件的变化和作物抗性资源的消耗，许多新的病害逐渐显现。再加上抗病性多与不良农艺性状相连锁，所以要培育出优良的抗病品种越来越难。抗病分子机理的研究为作物抗病育种提供了新的发展思路。一是重视 P TI的利用。植物细胞表面的模式识别受体对病原微生物相关分子模式的识别，诱导 P TI，是植物免受病害侵染的第一道防线。因此将 P TI 有效应用于作物抗病品种的选育，有望获得广谱性抗病品种。拟南芥中的受体基因 EFR 能够识别细菌延伸因子EF-Tu。Lacombe等 （2010） 利用农杆菌介导法将拟南芥中的受体基因 EFR 转入到烟草和番茄的基因组中，成功获得了转基因植株。经验证，转入 EFR 基因的植株可以抗假单胞菌属 （ Pseudomonas）、黄单胞菌属 （ Xanthomonas）、拉尔氏菌属 （ Ralstonia） 和农杆菌属（ Agrobacterium） 等不同属的病原细菌。这说明在育种中可以充分利用不同植物的模式识别受体基因来培育出具有广谱性、持久性抗性的作物新品种。二是将 ETI 与 PTI 相结合。植物大多数 R-基因是专门为识别病原微生物效应子而进化的，而病原微生物的效应子是菌种甚至小种所特有的，所以尽管植物ETI 能很强的特异性抵抗某种病害，但是也容易激发病原微生物产生新的效应子而避开原有的 ETI，使抗性消失。如果在利用 ETI 时，结合利用 PTI，便可以达到两道防线共同作用的效果，可以有效地避免大面积推广的抗病品种因 ETI的丧失而造成重大的产量损失。在育种实践中，利用P TI 抗性较好的栽培品种作为育种材料，利用多基因聚合或多基因转化将多个优良抗病基因导入其中，有利于扩大作物的抗病广谱性，改良作物的 ETI 抗性。近等基因系法 （Near-isogenic Lines，NIL） 和分离群体分析法（Bulked Segregant Analysis，BSA） 是获取与抗病基因紧密连锁的分子标记的两种最经典的方法。近等基因系是指仅在目标性状存在差异的两种基因型个体，通过杂交及多代自交或回交分离而获得的群体 （Young，1998）。近等基因系法的基本原理是比较轮回亲本与近等基因系及供体亲本三者的标记基因型。当近等基因系与供体亲本具有相同的标记基因型，但与轮回亲本的不同时，则该标记就有可能与目标基因连锁 （Muehlbauer，1988）。近等基因系的建立一般需要连续自交或回交6～8 代，耗时较长，而且常会导致一些重要基因的丢失或形成连锁累赘，因而限制了它的应用。分离群体分组分析法又称近等基因池法，是从近等基因系法演化而来的，属于双尾分析中的选择 DNA 基因池法 （selective DNA pooling，SDP）。Michelmore等 （1991） 首先利用 BSA 法在没有近等基因系的条件下通过对F2分离群体进行RAPD分析，成功的从100 个引物中筛选出3 个与莴苣霜霉病抗性基因 Dm5/8紧密连锁的 RAPD 标记。该实验的基本原理是：具有相对性状 （如抗病、感病） 的一对亲本杂交，在其后代分离群体中，根据个体表型或基因型分为两组 （如抗病组、感病组），选取两组中相同数量的极端差异个体，提取DNA，并进行等量混合，构建两个相当于近等基因系的基因池 （如抗病基因池、感病基因池），并对两个基因池进行标记的多态性筛选。由于两个基因池在遗传背景上是相似的，表型上的差异就有可能是由于某一目的基因的改变而造成的。因此两池间筛选出的多态性 DNA 标记就有可能是与目的基因连锁的分子标记。将多态性分子标记在后代分离群体上进行进一步验证，就可以分析出多态性标记与目的基因是否连锁以及连锁程度 （廖毅等，2009）。分离群体分组分析法包括基于标记基因型的 BSA 法 （Giovannoni et al.，1991） 和基于性状表现型的 BSA 法 （Michelmore et al.，1991）。前者是根据已有图谱或标记信息对基因进行精细定位，后者是通过对分离群体中就某一性状表现极端差异的个体进行分组，构建两个相对性状的 DNA 池，并筛选与目的基因连锁的多态性标记，实现对基因的初步定位。BSA 法具有许多优点：如原理简单、操作方便、实用经济等，重要一点是克服了许多作物没有或者难以创建近等基因系的限制，所以被广泛应用于质量性状单基因的定位以及数量性状主效基因的定位。2007 年，Korol等对 BSA法进行了优化，在精密仪器的辅助作用下实现了对定位效应较大QTL的定位。许多学者从理论上和实践上都证明了 BSA 法对数量性状基因定位的合理性 （Wang and Paterson，1994；William et al.，1997；Chagué et al.，1997；Hill，1998；Mackay and Caligari，2000；Chantret et al.，2000）。分子标记 （Molecular markers） 是 20 世纪 80 年代以来，继形态标记 （Morphological marker）、细胞标记 （Cytological marker）、生化标记 （Biochemical marker） 三大遗传标记之后，又诞生的一种以 DNA一级序列的多态性为基础的新的遗传标记。分子标记与其他遗传标记的不同之处在于，分子标记能够直接从 DNA 序列上找出差异。因此其具有如下的优点：一是准确性高，不受组织器官、个体发育时期状况、环境条件等因素的干扰；二是检测定位多，几乎遍及整个基因组；三是共显性好，有些共显性分子标记可有效的鉴别出二倍体中纯合和杂合基因型；四是多态性高，无需专门去创造特殊的遗传材料，自然就存在着许多等位变异；五是表现为 “中性” （即无基因多效性），与不良性状没有必然的连锁遗传，也不影响目标性状的正常表达；六是遗传稳定，可靠性强，检测速度快，操作简单。根据分子标记的发展进程，可以将其归类划分为三代分子标记：第一代分子标记以扩增片段长度多态性分子标记 AFLP （Amplified fragment length polymorphism）、限制性片段长度多态性分子标记 RFLP （Restriction fragment length polymorphisms）、随机扩增多态性DNA分子标记 RAPD （Random amplified polymorphism DNA） 为代表。第二代分子标记以重复序列的重复次数作为标记，操作较为简单，易于分型，且为共显性标记，更便于进行遗传分析。其代表性标记为简单重复序列标记 SSR （Simple sequence repeat） 和简单重复序列间扩增标记ISSR （Inter-simple sequence repeat）。第三代分子标记以核苷酸多态性标记SNP （Single nucleotide polymorphism）、插入缺失标记 InDel （In-sertion-deletion）、拷贝数变异标记 CNV （Copy Number Variation） 为代表，在后基因组时代已被大量开发，并被广泛使用。这类标记的最大特点是数量多、范围广、为显性标记、易于高通量分型。SSR （Simple sequence repeat），即简单重复序列，又称微卫星（Microsatellite），是Litt等1989 年提出，Moore等1991 年创立的。由1～6 个核苷酸为单位组成的串联重复序列 （Wang，1994），是 DNA复制和修复过程中，微卫星序列内发生滑链错配或不均等重组时，导致增加或缺失一个或更多的重复单元 （Levinson and Gutman，1987；Richards，1992），广泛分布于植物和动物的基因组中 （Tautz and Renz，1984）。每个SSR两侧具有相对保守的单拷贝序列，这为设计特异引物扩增SSR序列提供了模板。由于扩增产物中基本单元重复次数的不同，就形成了SSR座位的多态性。通常经过SSR引物扩增出来的PCR产物，可以经过聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳进行检测其多态性。SSR分子标记的优点在于信息量大、多态性高、重复性好、操作简单、呈共显性 （Kalia et al.，2011），因此被广泛应用于作物及果树等目标基因的遗传定位、遗传连锁图谱的构建、遗传多样性的检测以及分子标记辅助育种等方面。SSR标记的开发：目前常见的 SSR标记开发的方法包括数据库检索法、构建与筛选基因组文库法、微卫星富集法以及省略筛库法等。其中数据库检索法是开发SSR标记既经济又有效的方法。充分利用现有的DNA序列数据库中的信息，搜索 SSR 序列，可以轻松的获得全基因组的所有SSR引物，省去构建基因文库、杂交、测序等烦琐的工作，节省了大量的时间和财力。随着高通量测序技术的快速发展，使得如GenBank、EMBL/EBI （European Bioinformatics Institute，http：//www.embl-heidelberg.de/）、NCBI （National Center for Biotechnology Information， http：//www.ncbi.rdm.nih.gov/） 以及 DDBJ （DNA Data Bank of Japan，http：//www.Ddbj.nig.ac.jp） 等公共数据库中各物种的基因组序列、转录组序列及EST序列等不断增多。结合在线软件SSRIT （ http：//archive.gramene.org/db/markers/ssrtool） 以及 SSRHunter 等来搜索SSR位点，利用 Primer Premier 5.0 或者利用在线引物设计软件Primer 3.0 （http：//primer3.ut.ee/） 根据位点两侧保守核苷酸序列设计特异性引物。SNP 即单核苷酸多态性，是两个DNA序列中的某个位点由于单个核苷酸的变化而引起的多态性。SNP 标记的优点在于数量多，分布广，相对稳定，易于快速筛查和基因分型。SNP 标记的开发：可以通过多种方式和方法实现对SNP 标记的检测和分析。一是质谱分析法。通过 PCR 扩增后，用质谱进行分析检测。二是HRM分析法。利用高分辨率熔解曲线 （High resolution melt-ing，HRM） 分析方法进行分型检测。三是芯片法。利用 SNP 标记芯片进行分型检测。四是测序法。通过高通量测序手段进行检测 （孙瑞，2015）。SNP 标记的开发主要依赖于含有大量测序序列的数据库，具有速度快、高通量的特点。随着测序技术的发展，特别是全基因组测序，不仅可以从全基因组中获得大量的SNP 位点，而且还可以了解到SNP 位点在基因组中的分布状况，对于我们进一步分析基因的功能及表达提供了更多的可能。基于参考基因组序列的分析方法包括：全基因组重测序 （Whole-genome re-sequencing，WGR）、转录组测序（RNA-seq） 和简化基因组测序 （Reduced-Representation Genome Se-quencing，RRGS）。全基因组重测序是对已知物种基因组序列的前提下所进行的全基因组范围内的测序，并在个体或群体水平上进行差异性分析的方法。优点：快速进行资源普查筛选，寻找到大量遗传变异，实现遗传分析及重要性状候选基因的预测。转录组测序的研究对象为某个体在某一特定的功能状态下所能转录出来的所有 RNA 的总和，检测的是某个体位于编码区的碱基差异。优点是能够降低成本，能够直接检测功能区碱基的序列变化，能够有效的检测分析基因的表达水平，更有可能找到直接与表型相关的 SNP 差异 （Geraldes et al.，2011；Li et al.，2012a）。简化基因组测序是对与限制性核酸内切酶识别位点相关的DNA进行高通量测序。RAD-seq （Restriction-site Associated DNA Se-quence） 和 GBS （Genotyping-by Sequencing） 技术是目前应用最为广泛的简化基因组技术，优点是可以大幅度地降低基因组的复杂程度，简化操作，同时不受有无参考基因组的限制，可快速有效地鉴定出高密度的SNP 位点，从而实现遗传分析及重要性状候选基因的预测。InDel是指父母本之间在全基因组序列范围内存在的差异。一个亲本相对于另一个亲本而言，在基因组中存在着一定数量的核苷酸插入或缺失 （Jander et al.，2002）。InDel标记就是根据基因组中的这些插入或缺失位点，依据一定原则，在其上下游设计一些PCR引物能扩增出包含这些插入缺失位点的碱基片段，成为 InDel标记。基于全基因组重测序的 InDel 标记是遗传标记的一个重要来源，因其具有分布广、密度高、变异稳定、多态性强、基因型判别简单、检测容易等优点，受到越来越多的关注。InDel标记已广泛应用于目标基因的遗传定位、高密度遗传图谱的构建、目的基因的精细定位、生物遗传多样性的分析、种子纯度鉴定及分子标记辅助育种等多方面。Yu等 （2003） 利用InDel标记、RFLP 标记、SSR标记构建了一张向日葵的高饱和度分子标记遗传连锁图谱。Feng等 （2005） 利用日本晴和9311 序列筛选得到的分布于每条染色体的20 对 InDel标记和53 对 SSR 标记，分析鉴定了46份粳稻和47份籼稻的遗传多样性。葛敏等 （2013） 利用生物信息学对玉米全基因组进行扫描，发现可用于开发 Indel分子标记的插入缺失位点，同时成功地运用 Indel分子标记鉴定了玉米杂交种的纯度。Hayashi等将开发的9对InDel标记成功的应用于水稻抗性基因的筛选。分子遗传图谱 （Genetic linkage map） 是不同分子标记在染色体上的位置和相对距离的排列图，遗传图谱上的每个分子标记反映的都是与遗传特征有关的相应染色体座位上的遗传变异和多态性。分子遗传图谱的构建是基于染色体交换与重组的理论，它是分子遗传学研究中的重要领域，是对基因进行定位及克隆的基础，也是遗传育种的重要依据。随着分子标记技术的发展，图谱上标记的种类越来越多，标记的密度也越来越高。起源于 “欧洲苹果基因组作图计划” 的第一张遗传连锁图谱于1994年由 Hemmat等人完成发表。该图谱以56 株 ‘Rome Beauty’בWhite Angel’ 的杂交后代为作图群体，构建了包含 360 个标记的父本和母本两个苹果品种的遗传连锁图 （Hemmat et al.，1994），实现了苹果遗传图谱构建的突破。2003 年，Liebhard 等以 ‘Fiesta’בDiscovery’ 的 267 株 F1 代杂交群体为试材，利用 SCAR、AFLP、SSR、RAPD标记等840个不同类型的分子标记构建了高密度的遗传连锁图谱 （Liebhard et al.，2003）。2009 年，Celton 等利用 93 个‘M.9’בR.5’ 的F1 杂交群体构建了17 个连锁群，包含了224 个SSR标记，42 个 RAPD 标记、18 个 SCAR 标记和 14 个 SNP 标记（Celton et al.，2009）。随着苹果基因组全序列的公布 （Velasco et al.，2010），利用全基因组重测序技术大规模开发 SNP 标记构建高密度遗传连锁图谱成为现实。2012 年，Antanaviciute等完成了以 ‘M.27’בM.116’ F1 代杂交后代为群体，构建了由306个SSR标记和2272个SNP 标记组成的高密度遗传连锁图谱，平均每一个标记间的遗传距离为0.5 cM （Antanaviciute et al.，2012）。同年 Khan 等构建了包含2033个SNP 和843 个SSR共2875个分子标记的苹果整合遗传图谱，总长为1991.38 cM。DNA指纹图谱因具有高度的特异性、稳定的遗传性和体细胞稳定性的特点，因此不受植物组织和器官的种类、生长发育阶段、环境条件等因素的影响，所以在苗期即可对品种进行快速、有效的鉴定，提高了鉴定的准确性和效率。高质量的指纹图谱不仅可以应用于种质资源亲缘关系的分析，遗传多样性的研究，还可以通过对苹果 DNA 指纹图谱的比较分析，从本质上找出生物个体间的差异，实现对苹果栽培品种的鉴别、新品种登记、注册和产权保护。Koller等 （1993） 利用RAPD标记对11 个苹果栽培品种进行了鉴别。Gianfranceschi等 （1998） 利用两对SSR 引物对19 个苹果栽培品种的DNA进行扩增，成功的将 17 个苹果品种区分开来。祝军等（2000a） 应用 AFLP 技术，用筛选出的引物P32M46 绘制了我国苹果生产中常见的 25 个重要品种的 DNA 指纹图谱，通过对该指纹图谱的分析表明，苹果栽培品种在 DNA结构组成上具有较高的遗传多样性。祝军等 （2000b） 还利用AFLP 引物 P44M64 构建了5 个苹果矮化砧木基因型的DNA 指纹图谱，区分了供试的5 个矮化砧木的基因型并确定了他们之间的遗传关系。Liu等 （2014） 利用8 对SSR引物和60个苹果样品 （包括几个栽培品种和 ‘富士’בTelamon’ F1 实生苗）运用品种鉴定图 （Cultivar identification diagram，CID） 策略完成了第一张苹果品种鉴定图谱的构建，并证明了该方法能高效地应用于品种鉴别。分子标记辅助选择育种和基因定位克隆的前提是筛选与目的基因紧密连锁的分子标记。控制苹果重要农艺性状的基因大多属于数量性状由多基因或主效基因控制，受环境因素影响大，并且由于果树的基因高度杂和，更增加了筛选分子遗传标记的难度。目前，研究进展较快，所获得的遗传距离较近的分子标记多来自于单基因控制的质量性状。在苹果抗病性育种工作方面，研究最为广泛和深入的是对抗黑星病基因的研究。Yang 和 Krüger （1994） 首次报道了利用改进的分离分析法发现了一个与苹果抗黑星病基因Vf连锁的分子标记。随后，经过不懈的研究，不同类型的分子标记如 RAP D 标记、RFLP 标记、AFLP 标记、SSR标记等众多与苹果抗黑星病 V 基因连锁的标记被挖掘，与抗病位点连锁最紧密的分子标记的遗传距离仅为 0.5cM （Koller et al.，1994；Durham and Korban，1994；Tartarini，1996；Yang and Korban，1996；Yang et al.，1997；Tartarin et al.，1998；Xu and Korban，2000；Benaouf and Parisi.，2000；Gygax et al.，2004；Dunemann and Egerer，2010；Galli et al.，2010）。在果实品质育种方面，筛选出与控制果皮颜色主基因Rf连锁的分子标记，并将其定位在第九连锁群上 （Cheng et al.，1996；何晓薇等，2009）。与控制果实酸度、果形指数、果肉褐变等性状基因连锁的分子标记都有报道 （王雷存等，2012；Sun et al.，2012）。在矮化密植育种方面，田义柯等（2003） 筛选出一个与柱形基因Co基因位点的连锁距离为8.66 cM的RAPD标记。Moriya等 （2012） 在苹果第十条染色体上筛选出3 个与Co基因位点共分离的分子标记 （Mdo.ch10.12、Mdo.ch10.13 和Mdo.ch10.14），将Co基因定位在196 kb 个碱基区间内。分子标记辅助选择 （Molecular marker-assisted selection，MAS） 是利用与目标性状紧密连锁的分子标记作为辅助手段进行选择育种。MAS可以不用测交或后裔测定，加速遗传改良的速度；独立于环境，增加可靠性；进行育种早期选择，提高育种效率；实验室操作，降低成本；对多基因、多个性状甚至全基因组选择，增加选择效率 （徐云碧，2014）。主要应用于：种质资源的有效鉴定、量化和表征遗传变异 （Tanksley et al.，1989；Gur and Zamir，2004）；对改良目标性状的基因或数量性状基因座 （Quantitative trait loci，QTL） 的定位、克隆和导入 （Peters et al.，2003；Gur and Zamir，2004；Holland，2004；Salvi and Tuberosa，2005）；对遗传变异的操作 （包括鉴定、选择、聚合及整合） （Collard et al.，2005；Francia et al.，2005；Varshney et al.，2005；Wang et al.，2007）；植物品种保护和特殊性、均匀性及稳定性测试过程 （CFIA/NFS，2005；Heckenberger et al.，2006；IBRD/World Bank，2006） 等。MAS在苹果育种中主要应用于重要性状的筛选，杂种实生苗的早期选择，杂交亲本的选配，遗传转化中目的基因的检测等。Tartarini等（2000）报道了利用获得的与抗苹果黑星病的显性单基因Vf紧密连锁的RAPD标记测验了携带该基因个体，淘汰错误率为3%，保留错选率仅为0.02%。Cheng等（1996）利用与控制果色的Thd01基因紧密连锁的RAPD标记，在苹果实生苗发育早期进行了标记筛选，实现了对果色这一特定性状的早期选择，大大减少了人力物力的浪费。由苹果单基因Co控制的柱型性状有利于形成集约高效的现代苹果栽培模式，能够降低生产成本，提高产量。Moriya等（2012）所得到的3个与Co基因共分离的标记Mdo.chlO.12、Mdo.chlO.13和Mdo.chlO.14，对于柱型苹果杂交育种中对群体材料的早期选择、基因的克隆及转化有着重要意义。Nybom等（1990）利用M13作为探针，对64株枫树实生苗进行了DNA指纹验证，通过亲缘关系和系统分类分析，成功的实现了对其中56株枫树实生苗的身份认证。苹果炭疽菌叶枯病是近年来高发且蔓延速度极快的一种真菌病害，目前尚没有有效的药物进行预防和治疗，对于感病的品种，特别是在高温高湿的季节，一旦发病将会带来毁灭性的为害。培育和种植抗病品种是防控植物病害的重要途径之一。随着分子生物学的快速发展，分子标记辅助选择技术逐渐成为植物抗病育种的有效手段。研究苹果对炭疽菌叶枯病的抗性遗传规律，筛选与苹果抗炭疽菌叶枯病基因连锁的分子标记对于抗病基因的定位、构建精细遗传图谱、进行图位克隆、基因功能验证及苹果抗病分子育种有着极其重要的意义。本书采用两个高抗苹果炭疽菌叶枯病品种 （系） ‘富士’ ‘QF-2’ （‘秦冠’ב富士’ 杂交后代中的高抗品系） 和两个高感病品种‘金冠’ ‘嘎拉’ 做亲本配制了4个杂交群体 （‘金冠’ב富士’ F1代 207 株，‘富士’ב金冠’ F1代 95 株，‘嘎拉’ב富士’ F1代262 株，‘富士’בQF-2’ F1代 198 株），采用室内人工离体接种的方法对 F1单株进行了苹果炭疽菌叶枯病的抗性鉴定。首先采用 BSA （bulked segregation analysis，分离群体分组分析） 法和 SSR （simple se-quence repeats，简单重复序列） 分子标记相结合的手段筛选抗性标记，然后通过全基因重测序与BSA相结合的方法筛选与目标基因相关的SNP 标记和Indel标记，并运用高分辨率熔解曲线 （High Resolution Melting，HRM） 分析技术验证 SNP 及 Indel标记，进一步将目标基因进行精细定位，筛选与抗炭疽菌叶枯病相关的候选基因，以期揭示苹果炭疽菌叶枯病的抗性遗传规律，获得与目标基因紧密连锁的分子标记，实现抗性基因定位，为挖掘抗病的关键基因，探索病原菌与抗病基因的互作机制，实现分子标记辅助育种，提高苹果抗病育种效率打下基础。

病菌能侵染嫩叶、嫩梢、花蕾、花梗和幼果，产生褐色至黑色的斑点，斑点周围常有黄色晕圈。较小叶龄病斑如针头状黑点，无黄色晕圈；较大叶龄病斑较大，黄色晕圈明显，并常沿着维管束扩散、沿叶脉扩展，形成类似带尾须的病斑。病叶、病果极易脱落。枝梢发病时，大部分嫩叶感病后脱落，随后整个枝梢枯死，严重时还会蔓延到大枝上，造成死树。重发病果园，当年春梢叶片可全部落光，只剩下上一年梢上的少数叶片，地面可见落叶一层。潮湿时病斑上有墨绿色霉层，为病原菌的菌丝和孢子(图8-1至图8-4)。图8-1 贡柑嫩梢柑橘褐斑病症状（1）图8-2 贡柑嫩梢柑橘褐斑病症状（2）图8-3 贡柑嫩梢柑橘褐斑病症状（3）图8-4 贡柑受害严重树（1）清园后树冠喷0.8～1.0波美度的石硫合剂。（2）在新梢长至3～5cm时及幼果期及时喷药保护，药剂可选用25%吡唑醚菌酯乳油1000～1500倍液、25%吡唑醚菌酯·代森联可湿性粉剂1000～1500倍液、25%嘧菌酯悬浮剂1000倍液、10%苯醚甲环唑可湿性粉剂800倍液、80%乙蒜素乳油1000倍液、80%代森锰锌可湿性粉剂600倍液、70%甲基硫菌灵可湿性粉剂600倍液。花期遇连续阴雨，花瓣上先出现水渍状小圆点，随后迅速扩大为黄褐色的病斑，引起花瓣腐烂，其上长出灰黄色霉层。若天气干燥，则呈淡褐色干腐。腐烂的花瓣若落在幼叶、嫩枝和幼果上，就可使其发病。嫩叶上的病斑，在潮湿天气时呈水渍状软腐；干燥时呈淡黄褐色，半透明。小枝受害后常枯萎。幼果受害易脱落，若不落，病斑则会木栓化，或稍隆起，呈形状不规则的花斑果(图8-5、图8-6)。图8-5 柑橘灰霉病果实症状图8-6 柑橘灰霉病花症状（1）栽培管理。冬季结合清园，剪除病枝、病叶，将其带出果园集中烧毁。花期遇雨，则进行摇花。花期发病，早上趁露水未干时摘除病花，以减少侵染源。（2）药剂防治。开花前喷1～2次药预防，可用400g/L嘧霉胺悬浮剂1000～1500倍液。在被害枝干上长出的子实体，如同贴着膏药一般，故称柑橘膏药病。白色膏药病的子实体表面较平滑，乳白色或灰白色，在条件适宜时，边缘常扩展新的菌膜，严重时菌膜包围枝条。褐色膏药病的子实体表面呈厚丝绒状，略隆起，通常呈栗褐色，周缘有狭窄的灰白色带。两种病菌的子实体，后期常龟裂，易剥离(图8-7、图8-8)。图8-7 白色膏药病发病症状（1）图8-8 白色膏药病发病症状（2）（1）栽培管理。加强管理，结合修剪，清除带病枝条和过密枝条，使柑橘园通风透光，减少发病。（2）药剂防治。在蚧壳虫幼蚧孵化盛期和末期，以及蚜虫发生期及时喷施药剂进行防治；用刀刮除病部子实体后，涂抹3～5波美度的石硫合剂，亦可用10%波尔多液涂刷病部子实体1～2次。病树往往大部分枝条同时发病，病枝不发或少发新梢。新梢上部分叶片黄化，继而老叶失去光泽，主脉、侧脉附近明显黄化，叶片褪色后不久逐渐脱落，部分仅叶身脱落，叶柄仍留在枝上。落叶后从腋芽长出的新梢弱而直立，叶小，色灰淡，主脉黄化，开花特别多。根系是细根先腐烂，然后大根逐渐腐烂。地上部许多小枝相继枯死，病树逐渐衰退，有的病树则在初期症状出现几个月后，突然萎蔫枯死，叶片干挂树上，此类型为急性衰退病(图8-9、图8-10)。图8-9 植株衰退病毒后表现的明脉症状图8-10 衰退病毒后表现的茎陷点症状（1）严格检疫，防止病毒传入。（2）种植无病毒苗木，不用带病接穗繁殖。（3）选择抗病砧木，如酸橘、江西红橘、枳、枳橙、红橘、粗柠檬和檫檬等作砧木。（4）加强栽培管理，注意防治蚜虫。最典型的症状是以枳或枳橙作砧木的柑橘树，感染了柑橘碎叶病毒后，嫁接部位出现褶折黄环，接穗基部肿大，地上部黄化、落叶，植株生长衰弱、矮化，结果很少，甚至枯死。在抗病、耐病砧木上无症状。在腊斯克枳橙上叶片表现黄色透明斑点，呈圆形或不规则形，叶片边缘缺损，叶片畸形且叶脉透明。在茎上首先出现水溃状的纵向条沟，后变成黄白色条斑，稍凹陷，剥开嫁接口的树皮，接穗与砧木的木质之间有一圈缢缩线，受强风等外力的作用，砧木与接穗之间容易断裂，裂面整齐。以枳橙、厚皮柠檬作接穗发病后，新叶上呈现黄斑和叶缘缺损扭曲。有时条斑联合成斑块，枝条弯曲。严重时，植株矮化(图8-11、图8-12)。图8-11 病树接穗基部肿大图8-12 病树嫁接（1）建立无病苗圃，培育无病苗木。从田间选取健康的优良单株，经指示植物腊斯克枳橙检测，证明不带柑橘碎叶病毒后，方可作为接穗无病母树。也可选取健康的优良单株嫁接苗，在30～44℃环境中处理40天以上，在生长点切取0.2mm微芽进行茎尖嫁接，即可获得无柑橘碎叶病毒的繁殖材料。（2）采用抗病、耐病砧木。避免用枳作砧木，可采用枸头橙、酸橘、红橘等作砧木。（3）更换砧木。凡感染碎叶病毒而出现黄化、生长衰弱的幼龄树，可以靠接2～3株抗病砧木，一年后树势便可以得到恢复，且获得一定产量。主要为害叶片、新梢和果实，尤其易侵染幼嫩组织。叶片染病，初生蜡黄色油渍状小斑点，后渐扩大，形成灰白色至暗褐色圆锥状疮痂，后病斑木质化凸起，叶背突出，叶面凹陷，病斑不穿透叶片，散生或连片，病害发生严重时叶片扭曲、畸形。新梢染病，与叶片症状相似，枝梢与正常枝相比较为短小，有扭曲状。幼果染病，果面密生茶褐色小斑，后扩大在果皮上形成黄褐色圆锥形，木质化的瘤状突起(图8-13、图8-14)。近成熟果实发病，病斑小不明显。合理修剪、整枝，增强通透性，降低湿度；控制肥水，促使新梢抽发整齐；结合修剪和清园，彻底剪除树上残枝、残叶；并清除园内落叶，集中烧毁。对外来苗木实行严格检疫或50%多菌灵可湿性粉剂800倍液浸30min。图8-13 柑橘疮痂病为害果实初期症状图8-14 柑橘疮痂病为害果实后期症状可为害地上部的各个部位。叶片受害症状分叶斑型及叶枯型两种。叶斑型(图8-15至图8-17):症状多出现在成长叶片、老叶边缘或近边缘处，病斑近圆形，稍凹陷，中央灰白色，边缘褐色至深褐色；潮湿时可在病斑上出现许多朱红色带黏性的小液点，干燥时为黑色小粒点，排列成同心轮状或呈散生。叶枯型(图8-18):症状多从叶尖开始，初期病斑呈暗绿色，渐变为黄褐色，叶卷曲，常大量脱落。枝梢症状分为两种:急性型:发生于连续阴雨时刚抽出的嫩梢，似开水烫伤状，后生橘红色小液点。慢性型:多自叶柄基部腋芽处发生，病斑椭圆形淡黄色，后扩大为长梭形，一周后变灰白枯死，上生黑色小点。幼果初期症状为暗绿色凹陷不规则病斑，后扩大至全果，湿度大时，出现白色霉层及红色小点，后变成黑色僵果。成熟果发病，一般从果蒂部开始，初期为淡褐色，以后变为褐色凹陷而腐烂。泪痕型:受害果实的果皮表面有许多条如眼泪一样的红褐色小凸点组成的病斑。也可为害柚子，症状同上。图8-15 柑橘炭疽病为害叶片叶斑型症状图8-16 柑橘炭疽病为害叶片叶斑型叶背症状图8-17 柑橘炭疽病为害叶片叶斑型叶缘受害症状加强橘园管理，重视深翻改土；增施有机肥，防止偏施氮肥，适当增施磷、钾肥；雨后排水；及时清除病残体，集中烧毁或深埋，以减少菌源；修去树冠上衰弱枝、交叉枝、扫帚枝。图8-18 柑橘炭疽病为害叶片叶枯型症状冬季清园时喷施1次0.8～1波美度石硫合剂，同时可兼治其他病害。在病害发生前期，可喷施下列药剂:65%代森锌可湿性粉剂600～800倍液；50%代森铵水剂800～1000倍液。在春、夏、秋梢及嫩叶期、幼果期各喷药1次，可喷施下列药剂:25%嘧菌酯悬浮剂800～1250倍液；80%福美锌·福美双可湿性粉剂800～1000倍液。枝、叶、花、果及根部均可显症，尤以夏、秋梢症状最明显。发病初期，部分新梢叶片黄化，树冠顶部新梢先黄化(图8-19)，逐渐向下发展，经1～2年后全株发病，3～4年后失去经济价值。叶肉变厚、硬化、叶表无光泽，叶脉肿大，有些肿大的叶脉背面破裂，似缺硼状(图8-20、图8-21)。病树开花早而多，花瓣较短小，肥厚，淡黄色，无光泽。根部症状主要表现为腐烂，其严重程度与地上枝梢相对称(图8-22)。果实受害，畸形，着色不均，常表现为“红鼻子”果。也可为害柚子，症状同上。图8-19 柑橘黄龙病为害新梢症状图8-20 柑橘黄龙病为害叶片初期症状加强检疫。杜绝病苗、病穗传入无病区和新建的橘园。对幼龄树，在生长季节的4—8月，每月施1次稀薄水肥，年施肥4～6次。对结果树，每年要施好萌芽肥、稳果肥、壮果肥和采果肥。同时，也要科学地进行水分管理，要保证水分及时、适量供应。图8-21 柑橘黄龙病为害叶片后期症状图8-22 柑橘黄龙病为害后期症状播种前砧木种子用50～52℃热水预浸5min，再用55～56℃温水浸泡50min。接穗选自无病毒的高产优质母树，用1000mg/kg盐酸四环素液浸泡2h，取出后用清水洗净再嫁接。在嫩梢抽发期对病树进行治疗。重病树立即挖除；轻病树，可在主干基部钻孔，深达主干直径的2/3，从孔口注射药液，每株成年树注射1000mg/kg盐酸四环素液2～5L。主要为害叶片、果实和枝梢。叶片染病，初在叶背产生黄色或暗黄绿色油渍状小斑点，后叶面隆起，呈米黄色海绵状物；后隆起部破碎呈木栓状或病部凹陷，形成褶皱；后期病斑淡褐色，中央灰白色，并在病健部交界处形成一圈褐色釉光；凹陷部常破裂呈放射状(图8-23、图8-24)。果实染病，与叶片上症状相似(图8-25、图8-26);病斑只限于在果皮上，发生严重时会引起早期落果。枝梢染病，初生圆形水渍状小点，暗绿色，后扩大灰褐色，木栓化，形成大而深的裂口，最后数个病斑融合形成黄褐色不规则形大斑，边缘明显。图8-23 柑橘溃疡病为害叶片症状加强栽培管理。不偏施氮肥，增施钾肥；控制橘园肥水，保证夏、秋梢抽发整齐。结合冬季清园，彻底清除树上与树下的残枝、残果或落地枝叶，集中烧毁或深埋；控制夏梢，抹除早秋梢，适时放梢；及时防治害虫。图8-24 柑橘溃疡病为害叶片背面症状图8-25 柑橘溃疡病为害果实初期症状图8-26 柑橘溃疡病为害果实后期症状培育无病苗木，在无病区设置苗圃，所用苗木、接穗进行消毒，可用72%农用链霉素可溶性粉剂1000倍液加1%酒精浸30～60min，或用0.3%硫酸亚铁浸泡10min。冬季清园时或春季萌芽前喷45%晶体石硫合剂50～70倍液。春季开花前及落花后的10天、30天、50天，夏、秋梢期在嫩梢展叶和叶片转绿时，各喷药1次。可用药剂有:72%农用硫酸链霉素可湿性粉剂3000～4500倍液；20%噻菌铜胶悬剂300～500倍液；20%乙酸铜水分散粒剂800～1200倍液。主要为害柑橘成熟叶片，有时也可为害果实和小枝，常见有两种症状。一种是黄斑型:发病初期在叶背生1个或数个油浸状小黄斑（图8-27)，随叶片长大，病斑逐渐变成黄褐色或暗褐色，形成疮痂状黄色斑块。另一种是褐色小圆斑型（图8-28）：初在叶面产生赤褐色略凸起小病斑，后稍扩大，中部略凹陷，变为灰褐色圆形至椭圆形斑，后期病部中央变成灰白色，边缘黑褐色略凸起，在灰白色病斑上可见密生的黑色小粒点，即病原菌的子实体。果实受害，果面产生褐色的斑点，后逐渐扩大，至整个果面。也可为害柚子，症状同上。图8-27 柑橘黄斑病为害叶片黄斑型初期症状图8-28 柑橘黄磁病为害叶片症状（褐色小圆斑型，正面）加强橘园管理，增施有机肥，及时松土、排水，增强树势，提高抗病力。及时清除地面的落叶，集中深埋或烧毁。第1次喷药可结合疮痂病防治，在落花后，喷施下列药剂:50%多菌灵可湿性粉剂600～800倍液；80%代森锰锌可湿性粉剂600～800倍液；70%甲基硫菌灵可湿性粉剂800～1000倍液；77%氢氧化铜可湿性粉剂800～1000倍液；65%代森锌可湿性粉剂500～600倍液；70%丙森锌可湿性粉剂600～800倍液等，间隔15～20天喷1次，连喷2～3次。主要为害果实，症状分黑星型和黑斑型两类。黑星型(图8-29):病斑圆形，红褐色，后期病斑边缘略隆起，呈红褐色至黑色，中部略凹陷，为灰褐色，常长出黑色粒状的分生孢子器。果上病斑达数十个时，可引起落果。黑斑型(图8-30):初期斑点为淡黄色或橙黄色，以后扩大形成不规则的黑色大病斑，中央部分有许多黑色小粒点。病害严重的果实，表面大部分可以被许多互相联合的病斑所覆盖。叶片上的病斑与果实上的相似。也可为害柚子，症状同上。图8-29 柑橘黑星病病果黑星型图8-30 柑橘黑星病病果黑斑型加强橘园栽培管理。采用配方施肥技术，调节氮、磷、钾比例；低洼积水地注意排水；修剪时，去除过密枝叶，增强树体通透性，提高抗病力；清除初侵染源，秋末冬初结合修剪，剪除病枝、病叶，并清除地上落叶、落果，集中销毁，同时喷洒1～2波美度石硫合剂，铲除初侵染源。柑橘落花后，开始喷洒下列药剂:50%多菌灵可湿性粉剂800～1000倍液；80%代森锰锌可湿性粉剂500～800倍液。症状青霉病多发生于储藏前期。病果初期呈现水溃状黄褐色圆形病班。2～3天后长出白色霉状物，随后病部中央产生青(蓝)色粉状霉层。病部边缘整齐明显。腐烂速度较慢，全果腐烂约需15天。病果有发霉气味，不会黏附在包装纸或箱子上。病原特征分生孢子梗无色，直立，顶端2～5个分枝，呈扫帚状。小梗瓶状，顶端渐尖细。分生孢子念珠状串生，单胞无色，近球形，(3.1～6.2)μm×(2.9～6.0)μm(图8-31、图8-32)。图8-31 青霉病病果图8-32 柑橘青霉病初期病果(1)不要在雨后或晨露未干时进行采收。从采收开始就应避免机械损伤。(2)拟储藏的果实采下时应立即用50%万利得乳油2000～2500倍液、25%戴唑霉乳油1000～1500倍液、45%扑霉灵乳油2000倍液等浸泡1min。症状多发生于储藏后期。病果初期症状与青霉病的相同。孢子丛绿色。病部边缘不整齐，不明显。腐烂速度较快，全果腐烂约需7天。病果具芳香气味，黏附在包装纸或箱子上(图8-33、图8-34)。图8-33 绿霉病病果图8-34 柑橘绿霉病后期病果同柑橘青霉病。橘树染病后致枝叶凋萎或整株枯死。枝干染病，有流胶和干枯两种类型。流胶型:病部初期呈灰褐色水渍状，组织松软，皮层具细小裂缝，后期流有褐色胶液，边缘皮层干枯或坏死翘起，致木质部裸露。干枯型:皮层初呈红褐色、干枯稍凹陷，有裂缝、皮层不易脱落，病健部相接处具明显隆起界线，流胶不明显。果实染病，表面散生黑褐色硬质凸起小点，有的很多密集成片，呈砂皮状(图8-35、图8-36)，果心腐烂比果皮快，当果皮1/3～1/2腐烂时，果心已全部腐烂，故又称“穿心烂”。也可为害柚子，症状同上。图8-35 柑橘树脂病为害果实初期症状加强管理，主要是防冻、防涝、避免日灼及各种伤口，以减少病菌侵染。剪除病枝，收集落叶，集中烧毁或深埋。图8-36 柑橘树脂病为害果实后期症状可于春芽萌发期喷1次0.8∶0.8∶100等量式波尔多液，喷洒时注意主干及大枝部分。认真刮除病枝或病干上病皮，病部伤口涂抹下列药剂:36%甲基硫菌灵悬浮剂100倍液；25%甲霜灵可湿性粉剂100～200倍液；80%三乙膦酸铝可湿性粉剂100倍液。若施药后再用无色透明乙烯薄膜包扎伤口，防效更佳。主要为害根颈部，地上部也可受害。根颈部染病(图8-37)，初期病部褐色，湿腐，具酒糟气味，流有胶液。后期如天气干燥，病部常干裂，条件适宜时，病斑迅速扩展，严重的环绕整个树干，致橘树死亡。果实发病时，先为圆形的淡褐色病斑，后渐变为褐色水渍状软腐，长出白色菌丝(图8-38)，有腐臭味，病健部明显，干燥时病斑干韧。图8-37 脚腐病症状图8-38 柑橘脚腐病为害果实症状选用抗病砧木是防治此病的根本措施。嫁接时，适当提高嫁接口位置，不宜定植太深。加强管理，低洼积水地注意排水，合理修剪，增强通透性，避免间作高秆作物。发现病树，及时将腐烂皮层刮除，并刮掉病部周围健全组织0.5～1cm，然后于切口处涂抹下列药剂:10%等量式波尔多液；2%～3%硫酸铜液；80%三乙膦酸铝可湿性粉剂100～200倍液；25%甲霜灵可湿性粉剂400～500倍液。主要为害叶片、枝梢及果实，初期仅在病部生一层暗褐色小霉点，后期逐渐扩大，直至形成绒毛状黑色或暗褐色霉层，并散生黑色小点，即病菌的闭囊壳或分生孢子器(图8-39、图8-40)。图8-39 柑橘煤烟病为害叶片前期症状及时防治蚧壳虫、粉虱、蚜虫等刺吸式口器害虫，加强橘园管理。图8-40 柑橘煤烟病为害叶片后期症状发病初期，喷施下列药剂:40%g菌丹可湿性粉剂400倍液;0.5∶1：100倍式波尔多液；90%机油乳剂200倍液；50%多菌灵可湿性粉剂600～800倍液。主要为害果实。果面近脐部变黄，似成熟果，后病部变褐，呈水溃状，不断扩大，呈不规则状，四周紫褐色，中央色淡，湿度大时，病部表面长出白色气生菌丝，后转为墨绿色，致果瓣腐烂，果心空隙长出墨绿色绒状霉菌，严重的果皮开裂。幼果染病，多发生在果蒂部，后经果柄向枝上蔓延，造成枝条干枯，致幼果变黑或成僵果早落(图8-41、图8-42)。图8-41 柑橘黑腐病为害果实初期症状图8-42 柑橘黑腐病为害果实后期症状加强橘园管理，在花前、采果后增施有机肥，做好排水工作，雨后排涝，干旱时及时浇水，保证水分均匀供应。及时剪除过密枝条和枯枝，及时防虫，以减少人为伤口和虫伤。发病初期，可喷施下列药剂:75%百菌清可湿性粉剂600～800倍液；70%代森猛锌可湿性粉剂500～600倍液；40%克菌丹可湿性粉剂400～500倍液。新梢少或部分小枝枯死，叶片小或叶脉附近绿色叶肉黄化，似缺锌状，病树树势弱但开花多，落花落果严重。枝条纤细，丛生，树冠矮化。砧木部分树皮纵向开裂，翅起延至根部，皮层剥落，木质部外露呈黑色(图8-43、图8-44)。图8-43 枳壳站木皮层纵裂图8-44 靠接枳壳砧木皮层纵裂操作前后用5%～20%漂白粉或25%福尔马林溶液加2%～5%氢氧化钠溶液或5%次氯酸钠浸洗嫁接刀、枝剪、果剪等工具和手1～2s，进行消毒，以防接触传染。果实染病后，出现橘黄色圆形斑。病斑在短时间内迅速扩大，使全果软腐，病部变软，果皮易脱落。后期出现白色黏状物，为气生菌丝及分生孢子，整个果实出水腐烂并发生酸败臭味(图8-45、图8-46)。图8-45 柑橘酸腐病为害果实的症状图8-46 酸腐病病果表面的白色霜霉层（左）和烂柿子状病果（右）参照柑橘青霉病与绿霉病的防治方法，及时清除烂果与流出的汁液。地衣是一类菌藻共生物，呈青灰色或灰绿色的叶状体组织附生于果树的枝干上，呈圆形膏药状紧贴于枝干树皮上，不易剥离，青灰色或灰绿色(图8-47、图8-48)。图8-47 地衣病为害枝干症状图8-48 壳状地衣加强栽培管理，采果后，清洁果园，及时修剪整枝，增强园内通风透光，降低果园湿度；科学施用肥料，增强果树长势。适度药剂防治:采用挑治法和刮疗法。于春季雨后，用竹片或削刀刮除枝干上的地衣和苔藓，然后用药治疗。刮除下来的地衣和苔藓必须收集烧毁。用10%～15%的石灰水涂刷。或用下列药剂喷施:30%氧氯化铜悬浮剂500倍液；1%～1.5%硫酸亚铁溶液；1∶1：100等量式波尔多液。主要发生在春梢上，夏秋梢因高温不表现症状。病树春梢新芽弓形。梢黄，向外侧反转，节间缩短，丛生状。叶小，凹凸皱缩状，下卷呈船形。低温时症状明显，较暖时，叶尖缩短，生长停止，成匙形。树冠萎缩，发病后期果实小，果皮粗厚，品质差(图8-49、图8-50)。图8-49 蜜柑船形叶症状图8-50 蜜柑匙形叶症状（1）种植无病苗木。（2）及时砍伐病树，在树周围开深沟以防止病情蔓延。（3）加强水肥管理，增强树势。（4）枝剪、嫁接刀等在使用前，用20%漂白粉液（或10倍漂白粉液）或1%次氯酸钠液进行消毒。病斑可发生在果面任何部位，初为淡褐色小斑，后病斑迅速扩展成圆形暗褐色水渍状软腐，有腐臭味，病果很快脱落。高温高湿时病部长出白色菌丝，干旱时病斑干韧。有时叶片亦受害，病斑呈水溃状，似开水烫伤，病、健部交界不明显，病斑近圆形或不规则形，初期颜色较浅，随后迅速转变为浅褐色至深褐色，易误诊为急性炭疽。病菌为害柑橘主干基部则引起皮层腐烂，称为“脚腐病”(图8-51、图8-52)。图8-51 疫菌褐腐病病叶图8-52 疫菌褐腐病病果（只侵染白皮层，不烂及果肉）(1)栽培管理。加强栽培管理，平衡施肥；雨季及时开沟排水，降低果园湿度；冬季清园，修剪过密及分枝过低的枝条，剪除病虫枝，清除病果，并将其集中烧毁，保持地面光洁和果园通风透光。(2)药剂防治。及时在全园喷药防治，重点对树冠中下部、内膛和地面喷药，每隔5～7天喷1次，连喷2～3次。药剂可选用70%甲霜灵锰锌可湿性粉剂800～1000倍液。主要为害嫩叶、新梢和幼果。在嫩叶的正面、背面和新梢表面呈现一层白色粉状物。病叶组织开始呈水渍状，后逐渐褪绿，最后呈黄色。病叶多为畸形、扭曲状。病部由叶柄传播到新梢，致使整条新梢和嫩叶被白色粉状物覆盖。严重时引起大量落叶、落果，新梢枯死(图8-53、图8-54)。图8-53 柑橘白粉病病枝、病叶图8-54 白粉病为害叶片在春梢萌芽前，喷洒药剂，可选用99%矿物油乳油200倍液、45%晶体石硫合剂150倍液、80%代森锰锌可湿性粉剂400～500倍液等。在容易发病的新梢期喷洒药剂，可选用25%三唑酮可湿性粉剂800～1000倍液。主要为害柑橘主干，其次在主枝，小枝上也可发生。初发病时，皮层出现红褐色小点，疏松变软，水渍状，并开裂和流胶。之后病斑扩大，且病斑不定形，病部皮层变褐色，流胶增多。感染至木质部后，除引起流胶症状外，病树常出现枯枝，叶片黄化脱落，树势弱，产量低，病树果实小，提前转黄，味酸，严重时引起植株木质部坏死，导致整株树死亡，甚至摧毁整个果园(图8-55、图8-56)。图8-55 柑橘流胶病树干症状（1）图8-56 柑橘流胶病树干症状（2）（1）栽培管理。合理修剪，多施有机肥，增强树势；雨季注意果园及时排水；减少树体机械伤口和其他病虫害的发生；冬季树干涂白。（2）药剂防治。晴天刮除病斑腐烂部分，刮除时采取浅刮深刻（即将病部的粗皮刮去，再纵切裂口数条，深达木质部，刮至健处韧皮部）的方法，待刮除部位风干水分后涂抹药剂，可选用70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、80%代森锰锌可湿性粉剂、25%吡唑醚菌酯乳油、25%吡唑醚菌酯·代森联可湿性粉剂、25%嘧菌酯悬浮剂、10%苯醚甲环唑可湿性粉剂、80%乙蒜素乳油等，将药剂稀释至30～50倍液使用，各药剂于发病期涂抹2～3次，间隔30天涂1次。因发病时期不同，可出现3种症状类型。（1）感染刚出土或尚未出土的幼芽，使病芽在土中变褐腐烂，形成芽腐。（2）幼苗顶部叶片染病，产生圆形或不定形淡褐色病斑，并迅速蔓延，叶片枯死，形成枯顶病株。（3）苗木靠近土表的基部缢缩，变褐色腐烂，叶片凋萎不落，苗木不倒伏，形成青枯病株，此为典型症状（图8-57、图8-58）。图8-57 柑橘苗木立枯病病株图8-58 柑橘苗木立枯病症状药剂防治。幼苗发病初期，立即用1%硫酸亚铁或70%敌克松500倍液施于苗木根颈部。如苗床较干，则配成液剂施用于苗木根颈部.施用之后随即用清水喷洗苗木，以防茎、叶部分受药害。如发现茎、叶腐烂型立枯病，要立即喷波尔多液［硫酸铜、石灰、水的比例为1∶1：（120～170）］，每隔10～15天喷1次。25%吡唑醚菌酯乳油2000倍液有良好的治疗作用，发病前用50%啶酰菌胺水分散粒剂1500倍液可起到预防作用。发病期可用80%代森锰锌600倍液、30%氧氯化铜悬浮剂300～400倍液。每5天喷1次，连续喷3次。该病主要为害柑橘幼苗的嫩叶、顶芽和嫩梢。苗木顶芽或嫩梢感病后，最初出现水渍状小斑点，后变成暗绿色或褐色病斑，天气潮湿时，病斑向四周扩展，直至嫩梢基部，使整条新梢或整株幼苗变为褐色而枯死。在潮湿天气下，新鲜的病部出现散生较薄的白色霉层，此为病原菌的孢子囊、孢子囊梗和菌丝体。根部在苗木枯死前无明显腐烂症状(图8-59、图8-60)。图8-59 柑橘苗疫病症状（1）图8-60 柑橘苗疫病症状（2）（1）选择抗病砧木。选择红橘、枳壳等对疫病抗性较强的实生苗作砧木。（2）苗圃地选择。选择地势高、土质疏松、排灌方便的新地或作高畦栽培。（3）加强管理。育苗前整地要精细，施足腐熟的有机肥；苗期雨天要注意排水，及时挖除病苗或剪除零星受害叶片，清除病源中心，并喷药控制蔓延。（4）药剂防治。发现少数病苗时，及时剪除病部，将其集中烧毁并立即喷施农药1次，以后每隔10～14天再喷1次，共喷2～3次。有效的药剂有58%瑞毒霉锰锌可湿性粉剂600～800倍液、64%恶霜·锰锌可湿性粉剂500～600倍液、90%三乙膦酸铝可湿性粉剂500倍液、0.5%波尔多液、80%代森锰锌可湿性粉剂600倍液、50%烯酰吗啉可湿性粉剂1500倍液、50%啶酰菌胺水分散粒剂1500倍液等。根结线虫侵害果树根部，使根组织过度生长，形成大小不等的根瘤。根瘤大多数发生在细根上，感染严重时又会产生次生根瘤，并出现大量小根，根系盘结成须根团。新生根瘤乳白色，后期变成黄褐色至黑褐色，腐烂坏死。果树受害后，枝短梢弱，叶片变小，生长衰退，成年树开花多，结果少。受害严重时，叶色发黄，叶缘卷曲，似缺水状，最后可造成叶片干枯脱落，直至全株凋萎死亡(图8-61、图8-62)。图8-61 柑橘根结线虫为害 根系症状（1）图8-62 柑橘根结线虫为害根 系症状（2）（1）加强苗木检疫。外来苗木必须经过检疫，防止病苗传入无病区。（2）培育无病苗木。选用无病原的土地育苗。（3）苗木处理。对带病苗木用48℃热水浸根15min，可杀死病原线虫。（4）药剂防治。成年病树每株用1.5%阿维菌素颗粒剂150～200g或10%噻唑磷颗粒剂150～200g，在树盘外围开环状沟施入，也可每株用10.5%阿维·噻唑磷颗粒剂150～200g树盘撒施或2亿活孢子/g淡紫拟青霉粉剂25～33g在树盘外围开环状沟施入。柑橘根线虫侵害根部，受害根部没有明显的根瘤，须根比正常根粗大，表面不平，严重时小根粗短、畸形，易碎裂，无光泽。由于柑橘根线虫的穿刺，组织坏死呈黑色。严重受害时，可使皮层和中柱分离。柑橘受害后，叶片逐渐发黄或呈青铜色，严重受害时造成叶片脱落，小枝枯萎。有些病树整株落叶，有些病树仅1/2或1～2个枝条落叶，病树一般不枯死(图8-63、图8-64)。图8-63 根线虫病（1）图8-64 根线虫病（2）同柑橘根结线虫病防治方法。为害树干时，初期表现为黄绿色小点，后逐渐扩大成绿色斑块，直至包被整个树干。为害叶片时，先在中脉、叶尖和边缘处出现黄色小点，黄色小点逐步连成一片，最后形成一层绿色苔斑，俗称“青苔”。为害果实时，一般在果蒂附近先出现黄色小点，后逐步向其他部位蔓延，最后在果实表面形成一层绿色污斑，生产上常称其为“绿斑病”。该病主要在树冠的中下部发生，严重时整株受害，对树体光合作用及果实外观和品质造成严重影响(图8-65、图8-66)。图8-65 柑橘虚幻球藻为害的枝干图8-66 柑橘虚幻球藻为害的果实（1）栽培管理。加强果园管理，增强树势；注意果园排水，降低果园湿度；合理修剪，增强果园通风透光性，以减轻发病程度。（2）药剂防治。发病果园在冬季清园时，用45%代森铵水剂300倍液喷施；在柑橘生长季节，发病果园用80%乙蒜素乳油1000～1500倍液或50%氯溴异氰尿酸可溶性粉剂600～800倍液均匀喷雾，每隔10天左右喷1次，连喷2次。在贮藏期间，果实多从果蒂或近果蒂处开始发病，初期呈浅褐色水渍状，之后扩大，病部边缘呈波纹状，深褐色。由于果实内部较果皮腐烂快，当病斑扩大到果皮的1/3～2/3时，果心已经全部腐烂。病部表面大多会散生黑褐色的小粒点(图8-67、图8-68)。图8-67 褐色蒂腐病病果环绕果蒂呈水渍状图8-68 褐色蒂腐病病果内部白色菌丝（1）加强栽培管理，增强树势。（2）精细采收，尽量减少和避免机械损伤。（3）采果前2～4周，用50～100mg/L的2，4-D溶液喷湿果实。（4）果实采摘后3天内，用70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1000倍液，或25%咪鲜胺乳油500～1000倍液等浸果1～2min，晾干后贮藏。（5）贮藏前剔除病果、伤果。（6）在5 ℃左右的温度条件下贮藏果实。果实发病多自蒂部或近蒂部伤口开始。病部呈褐色病斑，之后蔓延全果。病斑可随瓤瓣排列而蔓延，使果面形成深褐色带纹，由蒂部直达脐部。病果表面常溢出琥珀色黏液。在高湿条件下，病果表面长出气生菌丝，起初呈污灰色，后渐变成淡黑色；在干燥条件下，则成黑色僵果。感病果实内部腐烂，并长出污灰色菌丝，瓤瓣、果皮最后变黑色。在菌丝中也产生黑色点粒(图8-69、图8-70)。图8-69 黑腐病病果心腐型图8-70 黑腐病病果内部症状枝干发病常从小枝顶端开始，迅速向下蔓延，或在小枝与树干的其他部位发病。病部红褐色，树皮开裂、流胶，严重时引起枝干枯死，病部密生黑色小粒点。参考柑橘褐色蒂腐病的防治方法。

长城润滑油前身是始建于1958年的北京煤炼油示范厂，是中国首个含氟润滑油脂的生产和研制基地；1982年成立长城高级润滑油公司，开始进入市场化发展轨道；2003年，中国石化润滑油公司与长城润滑油公司合并，使得长城润滑油成为中国石化润滑油业务主体。目前，中国石化润滑油公司集润滑油生产、研发、储运、销售和服务于一体，具备120万吨/年包装油生产能力，是目前国内最大高档润滑油专业产销集团，是全球第四大润滑油企业。长城润滑油品牌价值从1998年的1.5亿元逐年攀升至2008年的112.68亿元，2004年位居全国500强第68位，是润滑油行业唯一入选品牌。连续5年稳居中国润滑油行业第一品牌的位置。近年来，国内汽车工业等相关行业的快速发展，国外企业大举进入中国市场，促使国内润滑油市场的消费者构成、市场结构、消费模式、营销网络等发生了根本性变化，长城润滑油在市场竞争中遇到了许多新的问题，原有的竞争优势受到了挑战。润滑油行业是中国最早实现完全市场化运作的石化行业。国外大公司都力图通过润滑油业务树立自身品牌形象，为今后进入其它石化领域进行消费者认知上的准备。从1994年起，美孚、壳牌、埃索、加德士、福斯、日本石油等十几家跨国石油公司开始在中国投资建立20多家专业调合厂，总调合能力达到80万吨/年。国外石化企业依托雄厚的资金实力、灵活的营销手段，重点进行高端润滑油市场开发和品牌建设，逐步建立国外品牌质量更高、品质更好的品牌形象，目前占据着中国高档润滑油市场大部分的市场份额（图1）。图1 进口品牌在中国市场占有率面对广阔的市场空间，各润滑油企业纷纷引进先进相似的生产设备和生产工艺，不断增强竞争能力。从2002年开始，昆仑、统一开始进行大范围技术改造，先后引进自动化生产设施、管道调合设施，加强生产、物流的管理。竞争对手引入的新生产设备在工艺控制、生产柔性等方面达到长城润滑油的水平，使长城润滑油在生产体系方面建立的优势地位被削弱。近年来，中国润滑油市场向高档化发展的速度越来越快，SG、CF-4以上产品销售量快速成长，已逐步成为城市车用润滑油的市场主流。当润滑油市场主导产品开始向SG以上级别转移时，长城润滑油同类产品却在市场上表现不佳。长城润滑油渠道价格体系日益混乱。由于长城润滑油所建立的销售网络主要集中在批发流通领域，在长城润滑油不断增长的销售压力和长期反复的促销活动刺激下，产品销售价格变的十分混乱，经销商之间恶性竞争变得十分普遍。长城润滑油现有销售渠道主要是覆盖加油站、润滑油专卖店、零售店等传统销售终端，对日益兴起的汽车修理厂、汽车养护中心等销售网络覆盖能力严重不足。一是依托于中国石化，可在资金、科研、渠道等方面得到强力支持。二是掌握基础油资源，基本上能够实现基础油的供给自足，价格相对比较优惠。依托于燕山石化、高桥石化、茂名石化、荆门石化四大基础油生产基地的稳定供给，长城润滑油在I类基础油上基本实现了80%以上供给自足，质量上是过硬的。三是渠道优势。在长期发展中，长城润滑油已建立覆盖全国的销售网络。从2004年7月起，中国石化润滑油公司实施渠道整合，把旗下原销售渠道全部移交中国石化销售公司统一管理，采取总代理的营销管理模式，利用销售公司拥有的19个省级石油公司（其中9个地处沿海经济发达地区，2.8万座加油站遍布全国各地），形成了庞大销售网络。目前，中国石化润滑油公司以北京、上海、茂名、重庆、武汉五大营销中心为基础，形成了纵横南北、横贯东西、覆盖全国的营销网络。四是以中高档产品填补国内市场空白，树立起较高的品牌知名度和忠诚度。改革开放后，国内对SE、CD级别的中高档小包装润滑油需求开始出现。当时国内其他企业还停留在SB、SC、CA、CB等较低级别的散装油品生产上，国外品牌只能以产品进口的方式进入中国市场。长城润滑油抓住这一商机，率先进行高档小包装SE、CD产品的生产，填补国内市场的空白。20世纪90年代以来，长城润滑油依托在这两个产品上树立的优质形象，实现了稳定发展，基本上树立起“国货精品”、“质量可靠”的品牌形象（图2）。图2 品牌产品总体满意度对比（得分）五是拥有较高的市场占有率。2002年，中国石化润滑油公司对旗下分散经营的润滑油品牌实行统一管理，集中资源打造强势长城品牌。在完成润滑油业务专业化重组后，长城润滑油市场销售量稳步上升，2003～2007年，年销量由99.67万吨逐年提升到131.61万吨，稳居中国市场第一位，其中中档产品市场占有率达到40%。六是合理的生产布局。目前，长城润滑油已在全国建立9个生产基地，分布在以北京、上海、武汉、广州、重庆为中心的地区，布局比较合理。一是长城润滑油尽管有比较高的品牌知名度，但整体品牌形象不足，消费者普遍认为长城润滑油只是国产第一品牌，与壳牌等国际品牌相比，仍有一定差距。特别是在高档润滑油市场上，长城润滑油的认同程度仍然比较低（图3）。二是终端影响力不足。尽管长城润滑油建立起覆盖全国的销售网络，但长城润滑油对渠道的掌握更多集中在一、二级分销商上，在终端市场上更多的是依靠分销商进行开发和维护，长城润滑油对终端缺少足够的影响力，与国外品牌存在比较大差距（表1）。图3 国内各大品牌知名度比较大众消费者市场（CMMS）高端消费者市场（H3）排名品牌消费者份额（%）品牌消费者份额（%）1壳牌20.04壳牌31.752美孚18.46美孚14.523嘉实多9.68嘉实多11.264长城8.14长城10.11表1 2006年车用润滑油市场消费者份额第一，市场快速发展。近年来，我国汽车特别是乘用车发展迅速。2007年全国汽车年销量超过800万辆，汽车保有量突破5000万辆。2008年上半年汽车产销量双双突破500万辆，分别达到519.96万辆和518.22万辆，同比分别增长16.71%和18.52%。其中，私人购车快速增加，特别是私人载客车辆增长迅速，成为推动市场发展的主要动力。专家预测，轿车销量每增加100万辆，每年就会增加润滑油需求9.1万吨。2007年，中国市场仅车用润滑油年需求量就在200万～300万吨。跨国咨询公司克莱恩发布的《2009中国润滑油市场上的商业机遇》报告指出：中国润滑油市场在未来5年内将以每年10%的速度增长，预计到2020年，中国的润滑油消费量将超过美国。第二，消费者对国产品牌逐步认同。2002年以来，长城、昆仑等国产品牌不断进行品牌建设，在整个国产品牌的共同努力下，润滑油消费者对国外品牌的盲目崇拜现象得到了明显改变，越来越多的消费者开始认同国产品牌。第三，新兴终端的兴起给长城提供了同等机会。汽车连锁维修企业、养护企业作为新兴的销售终端，将在润滑油销售中发挥越来越重要的作用，从而使原有的市场格局发生根本性改变，使得众多润滑油企业重新站在同一条起跑线上，为长城润滑油赶超国外品牌提供了机会。首先，汽车制造商、设备制造商将掌握更大的发言权。由于汽车制造商、设备制造商指定用油、推荐用油对消费者有着越来越重要的影响，这些设备制造商在与长城润滑油的合作中将掌握越来越大的发言权。其次，新兴终端的兴起改变了润滑油渠道结构。终端地位的突出，特别是随着连锁型汽车养护、维修企业的日益发展，润滑油的销售将越来越受制于终端企业，长城润滑油原有的以加油站、专卖店、零售店为主体的渠道作用将日益减弱。同时，渠道扁平化的要求也使得长城润滑油原有的四级渠道模式受到挑战。再次，国际石油价格持续居高不下。石油价格持续走高以及国内成品油价格的持续上涨，使得基础油供应形势日益紧张，长城润滑油在外购尤其是Ⅱ类及以上的高档基础油资源上将遇到更多阻力。最后，市场竞争日益激烈。随着中国石化市场的全面放开，越来越多的国际石化企业将进入中国市场，相应地，更多具有雄厚实力的润滑油品牌也将加入竞争者行业，国内的润滑油市场竞争将成为国际化企业之间的竞争。主要包括：为汽车商提供原厂装填用油，即汽车出厂时所加注的润滑油，虽然只是一次性使用、数量较少，但对引导消费者今后对润滑油的选择有重要意义；提供汽车制造商服务站用油，即为汽车制造商所建立的特约维修服务站体系提供专用油品，这部分产品的使用量比较大，也是各润滑油企业争夺的焦点；获得汽车制造商的用油品牌指定，即取得汽车制造商在其车辆维护要求中明确指定或推荐使用长城润滑油的权利；建立全面的战略合作关系，包括为汽车制造商提供全面、系列的润滑产品，为其设计成本最低的油品供应、采购、使用方案，联合进行针对性的产品开发等。营销渠道调整的重点是将长城润滑油现有的以经销商（批发商）为重点的渠道结构转变为以终端商特别是汽修厂等终端为重点的渠道结构。将营销网络建设的重点从区域性批发网络建设转移到零售终端建设，加强终端掌控和信息沟通力度，搭建一个可以直接服务于用户，能够快速沟通信息的平台，以保证各项营销政策的顺利实施。针对销售终端多样性的局面制订差异化的销售政策，转变现有批发商职能。第一种是引导批发商转变为配销商，生产厂家、配销商和销售终端之间通过契约或合资等方式建立一种产销同盟，由配销商承担日常销售和物流配送职能，厂家则专注于市场开发和市场维护。第二种是与资金、管理实力强的经销商合作，利用其原有客户群，依靠产权合作或加盟连锁的方式，组建以合作经销商为龙头的专业换油维护网点联盟，将批发商转变为连锁企业。第三种是全程协助经销商实行深度分销。主要是通过设置市场协销人员，指导、协助经销商进行所属区域内的终端网络的开发和维护，借助经销商的力量实现在广大城乡、农村市场的深度开发。第一种方式，长城润滑油可自行投资建立自有品牌的汽车维修养护企业。这种方式的优点是长城润滑油可以实现对汽修企业的完全控制，使之有效服从于长城润滑油的整体发展需要，同时可以取得比较高的经营利润。其缺点是长城润滑油进入并不熟悉的新业务领域，缺少相关的人力资源和管理经验，并且独资兴建的成本投入比较高，扩张的速度比较慢。第二种方式，长城润滑油以资金投入参股的方式，介入其他汽车连锁养护企业，以股东形式出现。这种方式的优点是可以利用其他企业的已有资源，资金投入比较少；可以由更专业的人士经营管理，避免长城在不熟悉的领域竞争。但缺点是合作方之间会出现冲突。第三种方式，互相提供支持和帮助，以契约或共同利益为纽带进行合作。如长城润滑油提供产品、技术、服务上的支持，共同进行双方品牌的传播等。这种合作方式比较灵活，但缺点是控制力比较弱，特别是随着汽车养护企业地位的不断增强，当双方出现冲突时，长城润滑油的利益很容易受到损害。从长城润滑油的整体战略要求来看，进入汽车养护领域更多的是要解决未来长城润滑油在终端渠道的销售问题。因此，长城润滑油可以更多的采取参股方式，建立与汽车养护企业的合作，避免独自进入不熟悉领域的风险。长城润滑油在高档市场的品牌认知不足和品牌形象不高始终是制约其在高档市场实现快速发展的原因之一。在建立长城润滑油产业链的过程中，应当及时提高长城润滑油在高档市场的品牌形象。实施整合营销传播，通过持续稳定的向消费者传递长城润滑油的品牌和品质信息，扩大长城润滑油的品牌影响；与昆仑等国内品牌合作，共同提高消费者对国产品牌的认同，继续消除消费者对国产品牌的偏见；加强与终端合作，提高终端的推荐力度。通过有效的激励措施，如提供奖金奖励等，促使销售终端的汽车修理工进行长城品牌推荐；同具有品牌影响力的汽修企业合作，借助对方品牌形象扩大自身影响。

营销的“推”主要是指主动推介销售，是销售人员主动寻找客户，把企业的产品和服务“推”出去。也就是说，“推”的战略主要是借助于强有力的销售队伍，在各种促销措施的支持下，将产品推向各种销售渠道，推上经销商的货架。从这个意义上说，它是指产品销售网络的渗透。营销的“拉”主要是指企业制定一些营销手段、策略让顾客自动发出回馈，形成互动，找上门来，这样的营销战略就是网络营销的“拉式”策略。也就是说“拉”的战略主要是围绕如何将顾客“拉”进销售点，并鼓励消费者从货架上将商品“拉”走。它往往是通过大量的广告宣传来烘托企业和产品品牌形象，从而创造出新的客户需求。网络营销的“推”主要是指网络销售，是网络销售人员主动的寻找客户，把企业的产品和服务“推”出去。网络营销的“拉”主要是指企业制定一些网络营销手段、策略让顾客自动找上门来，这样的网络营销战略就是网络营销的“拉式”策略。网络营销的“拉式”策略，是网络营销者应该主要应用的策略。网络营销的“拉式”策略的手段也是比较多的。比如可以采用搜索引擎优化、博客营销、互动营销、病毒式营销、网络炒作和网络视频营销等。总之，网络营销“拉式”与“推式”策略，网络营销公司在选择的时候根据实际情况灵活地选择并应用就可以达到网络营销的真正目的。渠道、终端之间进行很好地协调和联动，形成分销推力和零售终端的无形拉力，才会使分销及零售覆盖达到一个新的标准。在分销管理中，依靠有限的分销商来完成市场的零售终端覆盖总是显得力量比较单薄，需要厂家评估机制，先入为主施加压力。作为销售代表，可能会有一种企业在求经销商的感觉，经销商经常压着企业，给销售代表很大的压力。实际上反而需要给经销商增加压力，因为没有压力就没有动力。根据每个经销商的具体表现以及不同地区市场变化状况，各销售代表要定期地分析现有的渠道是否能满足终端零售覆盖的需求，是否需要开发新的渠道，或增加渠道中的个别经销商，乃至调整整个销售渠道结构等。定期评估该地区的覆盖率，对没有按照合同要求完成零售覆盖的，要求给予正式书面指正，并协助商议解决办法，对于连续多次没有达到零售覆盖标准的，可进行调整。将经销商当作合作伙伴对待，多帮助经销商收集与其自身有关的信息，经常交流，从而拉近与经销商之间的距离，消除猜忌和隔阂。销售渠道差异化：了解竞争对手与本企业所使用的销售渠道的差异，并进行比较；对于主要竞争对手，企业要进行销售渠道差异分析，以了解本企业在业界所处的地位。经营管理专业化：不定期协助经销商开展促销活动；对经销商进行销售管理知识培训，如进行商品陈列、销售技巧、店面管理、库存管理、订货系统等方面的培训。竞争对策有效化：竞争对手开辟了哪些新的渠道，实施了哪些新的销售策略，企业必须根据竞争对手的情况提出应对之策。因为在经销商面前，利益和优惠政策是最有说服力，也是最有效的。渠道信息规范化：销售渠道的一个重要功能就是信息传递功能，企业要通过销售渠道不断地收集和反馈市场信息。利益冲突最小化：销售渠道之间存在利益冲突，这是在所难免的，企业不能视而不见，必须通过有效的管理与控制手段，解决销售渠道间的冲突。可能选定的大多数分销商不能完成对所在区域的整个零售终端的零售覆盖，要达到原先的终端规模和数量就必须牢牢抓住县、镇一级二批商，只有通过他们自身固有的渠道才能完成对乡镇一级零售终端的覆盖问题。如果对一些已经停止合作的经销商采取了不理不睬的态度，加上又不直接供货后，经销商存在的抵触情绪，将会使销售代表望而却步。这样与这些经销商的关系就处理的不是很融洽。所以销售代表对二、三级批发商也要与直供的经销商同样的态度和热情对待，帮助他们完善网络，整合渠道，通过交流和沟通，消除误会，共同将本区域市场销售稳定和持续发展。二、三级批发商的选择应注意网络覆盖情况、渠道管理理念及发展状况、及资金信誉状况。建立二批商进行网络延伸将我们初步选定的二、三级批发商名单交给分销商，与分销商沟通，说服分销商与其接触并建立良好的合作关系，同时也要考虑到分销商自身的网络下线经销商，如果符合条件，也考虑作为我们的二批商。在选择好二、三级批发商后，就立刻着手进行谈判，可以由经销商负责谈判工作，主要针对价格、回款状况。销售代表走访终端，实现销量及销售四项基本原则（分销、货架陈列、助销、价格管理）；树立二批商经营我们产品的信心；帮助二批商制定出一个月的销售计划；把二批商（经销商）当做以前我们公司来作，帮助经销商建立下属终端的资金和信誉调查表，同时设计出经销商送货路线图；对经销商经营我们产品的利润和附带的其它产品所带来的额外利润的经营观念进行引导；让二批商印出名片，名片内容包括经营产品名单和价格单；和二批商一起商量订单设计和送货路线及送货时间、频率；销售代表在定期走访终端时收集订单，订单不光是我们的产品信息还可以收集其它品牌的信息，最后进行订单的归纳整理；对发展前景比较好的二批商，并且对我们公司政策比较支持的要加以引导。对于“推”与“拉”战略的应用，不同企业之间有不同的取向。实际上，“推”和“拉”常常是构成企业营销战略中的相互作用、不可或缺的两个要素。大量的广告（拉）将会促进产品的销售，而这反过来又会使到销售人员更加卖力地推销产品（推）。必须看到，要想取得长期的市场成功，仅靠推或拉是不够的。任何一个产品在市场上的成功往往取决于一个平衡的市场营销组合。同样地，如果产品已经渗透到各种不同的营销渠道，消费者也被广告吸引到销售点，但缺乏营销组合中的其它要素的支持，如价格太高或销售服务太差等，也可能使消费者对购买该产品望而却步。因此，如果要取得长期的市场成功，企业为客户提供的产品（或服务）必须与广告促销中的许诺相吻合。否则，消费者只会购买一次他认为是差的产品。“推”与“拉”是营销战略的两个基本取向，两者并无优劣之分。在实际运作中如果能够巧妙地把握两者之间的平衡，同时又注意到与其它营销要素的搭配使用，成功的希望就更大一些。营销的太极——“推”与“拉”，就是营销过程中的一张一弛，张弛有力有度，方可达到营销艺术的最佳境界。

民营企业创业初期，找到挣钱的项目后，企业飞速发展的表象掩盖了内部经营管理不足的问题，但高利润期是不可能永久持续的，进入平缓期要求企业必须向规模化发展。此时，企业引入专业化管理人才，希望借助其丰富的管理知识和管理经验，带领企业走向辉煌成为必然趋势。民营企业职业经理人就应运而生。于是，通过朋友的介绍、从同行业中挖取墙角或者猎头公司为中介，成为民营企业老板谋求职业经理人的几大手段。然而，这些并未真正解决企业发展中心诸多“瓶颈”，因为职业经理人自产生起就存在方方面面的问题，因此，如何正确引进和运用职业经理人成为目前民营企业的必修课。企业发展到一定的规模之后，企业家的管理半径不能辐射到整个企业，管理就出现了漏洞和空白区，前期发展过程中潜伏的问题和危机就会逐渐浮出水面。在文化背景上，民营企业家大多文化水平相对较低，尤其是一些家族式的民营企业。而职业经理人文化水平普遍较高，很多还接受过西方教育，熟悉西方的管理理念。由于文化背景的差异，在企业内往往带来一些管理上、机制上的矛盾。目前，中国民营企业老板和职业经理人都普遍缺乏良好的职业道德。企业老板在保持自己对整个企业的掌控权时，要求职业经理人在短期内带来丰厚的利润。而职业经理人又习惯了公众对他们的仰视，他们的不足愈发加重了他们的生存压力以及对资本意志的屈服。他们对未来普遍有一种难以把握的恐惧，这就不可避免地造成职业经理人对老板的戒备，而这种戒备与恐惧心态的极端表现促使其职业行为的严重扭曲。没有良好的管理环境：由于中国市场还不规范，特别是法制环境不健全，道德环境不成熟，现阶段中国还不具备形成职业经理人阶层的条件。特别是管理不成熟，缺乏运作平台，造成职业经理人需要付出更多的艰辛和更大的代价，既要谙熟企业规则和技巧，又要积极适应中国企业的现状。一些民营企业的企业主不愿以股权或期权作为有效的激励机制，甚至降低已约定的工资报酬，奖励机制不能真正到位，造成职业经理人的波动与流失。而职业经理人方面，经理人一碰到不如意、遭遇企业低潮，或者竞争对手高价招手，就拍屁股走人，损害了原企业形象和客户关系，造成民营企业的资产流失。企业主和职业经理人之间这种信托关系会因多种因素的影响而使私营企业主与职业经理人之间产生差异，导致二者互不信任。民营企业想要持久发展，走向良性发展的道路，不解决经营权和所有权的问题，实现职业经理人制度，就无法实现真正的专业管理，企业最终还是难以突破管理瓶颈。所以，企业需要解决以下现实问题：一是是否需要引进职业经理人。要根据公司规模、机制的成熟度、对职业经理人的认识程度，来思考是否聘用以及聘用什么样的职业经理人。如果企业的内部管理体系本来就不成熟，存在着先天的或者是由于客观原因造成的严重得难以克服的问题，在这样的情况下，即使聘用职业经理人也无法力挽狂澜。二是以正确的态度对待职业经理人。职业经理人可以为企业带来新的思维方式、新的管理理念和先进的信息资源。他们多数时候可以将企业的具体经营战略付诸实施并取得实效，但有时也不可避免一些决策失误和重大偏差。而应该抱着宽容客观的态度，辅之以必要的约束和防范机制，让职业经理人在心灵深处建立以事业为目标、以诚信为纽带、以发展为动力、以共创辉煌为企盼的与企业同生共荣的信念，避免因缺乏沟通造成反目为仇的结果，给企业酿造无穷的危机。三是民营企业应注重自身的人才培养。目前，国内的职业经理人阶层还有待形成，企业应该充分发挥自身的作用，注重自身的人才培养的投入，重视人力资本的比较优势，从而在其职权范围内，按照企业的战略发展目标，肩负起领导和设计本组织许多变革和改革的重要任务，有效避免因决策不当而造成财力和人力资本的浪费。四是建立有效的激励机制。对职业经理人的激励可以分为短期激励、长期激励和特殊激励。短期激励是指根据职业经理人当年业绩目标的完成情况和能力发挥情况的综合考核，每年按年度兑现的激励；长期激励是指公司为实现既定的长期战略目标对优秀职业经理人未来若干年安排的激励措施，以吸引优秀的职业经理人长期工作，避免流失。特殊激励就是实行合伙制，公司股东会对于特别优秀的、做出巨大贡献的职业经理人，邀请他们成为新股东，作为合伙人，共享企业发展的美好明天。这个问题看似不难，但很多企业的老板一开始并不知道自己的真正需求是什么？譬如公司产品的销量和利润都下降了，市场管理出现问题了，这看上去好像只要一个营销总监就可以了。但真实的情况往往不是这样的，要仔细深挖下去，找到出现问题的真正原因，然后才能确定是不是需要引进这么一个营销管理高手来解决企业的问题，也可能有些表面上的营销问题，其实是内部管理体系的混乱引起的。营销高手来了可能也解决不了实际问题。人品绝对比专业能力更重要，这个问题无可非议。要了解一个人的人品可以通过他（她）原先的工作单位及同事进行调查获得；同时要仔细查明对方看中的是高薪水？还是企业的前途？或者老板的个人魅力？是不是有其他的想法？有的职业经理人口头表达能力高于实际工作技能，面试时有意隐藏自己的真实意图，这就使选择者会作出错误的选择。能力有多方面的，在弄清楚前两个问题之后，其实很容易查明对方的工作能力，譬如人力资源总监人选，除了专业学历以外，一定要调查他以前工作的单位领导和员工对他的评价，他本人在这方面的观点以及某些成功的案例。假如是营销总监人选，除了要看他的理论素养和实战能力以外，还要看他的综合协调能力、跟上下级的沟通能力以及带队伍的能力。把合适的人放在合适的岗位，这是许多老板都懂的道理。但事实上我们做起来往往不能尽如本意。有的老板，因为过度信任而把公司的全部权力交给经理人一个人掌握，导致其能力的局限而出现管理问题。所以，经理人上任以后，要明确他的职权利，规定他的管理范围，同时建立与老板的定期沟通机制和汇报总结制度，使经理人自己的工作有明确的方向，也不至于完全失控。企业应从内部着手强化委托代理的约束和激励机制，实现委托代理机制和民营企业的有效融合，努力降低委托代理机制的运行成本，使其成为一项内生性制度安排。具体而言，就是要让委托代理机制的设计既使职业经理人的个人利益与民营企业利益的战略选择趋同上发挥其应有的激励约束作用，又从制度和具体的管理措施上有效防范职业经理人阶层的道德风险问题。建立章程约束、合同约束、组织机构约束、法律约束、道德约束等。综上所述，民营企业想要走向良性发展的道路，应实现职业经理人制度，企业对经理人信任，经理人对企业忠诚。作为一段历史的进程，将来，我们一定会欣喜地看到职业经理人与中国民营企业密切合作的双赢局面。

2005年7月21日，我国根据经济发展状况，结合国际金融环境，及时地进行了人民币汇率形成机制改革和汇率调整，中国人民银行宣布自即日起，开始实行以市场供求为基础、参考一篮子货币进行调节、有管理的浮动汇率制度。人民币汇率不再盯住单一美元，形成更富弹性的人民币汇率机制，同时宣布人民币对美元升值2%，实现汇改以来，人民币汇率弹性循序增加。根据中国人民银行授权中国外汇交易中心公布的数据，2008年1月2日人民币对美元汇率中间价再创新高，人民币对美元汇率中间价为人民币7.2996元，2008年首日交易日即创下2005年7月汇改以来新高。美元对人民币中间价破7.3大关，人民币升幅达10%。金融市场这一新的变化，无疑将对中国的外贸以及中国与中亚国家的贸易具有较大的影响，乃至世界经济产生深远的影响。改革开放的最近十年来，人民币升值问题已经成为大家关注的焦点，人民币汇率存在升值压力的原因是一个国内与国际间错综复杂的社会、政治、经济利益紧密相结合的问题。造成人民币升值的原因很多，但总的来说主要可分为国内原因和国际原因，从国际环境上，要求人民币升值的呼声日益高涨，主要依据在于中国的贸易顺差，巨额外汇储备等因素。在国内物价日趋上涨的今天，政府希望提高人民币价值，加快吸收外国廉价物品以缓和有可能出现的通货膨胀等等。人民币汇率问题不仅是经济问题，也演变成了国际政治问题。有些西方国家学者频频呼吁人民币升值，或是出于嫉妒，或是转移国内对当局的指责，亦或是为了争取国内制造业的选票。引发西方国家呼吁人民币升值的主要因素有以下几点：一是人民币汇率过低，二是中国拥有大量的外汇储备，三是中国廉价商品大量出口造成世界通货紧缩。有人认为，导致日本和欧美通货紧缩是由于中国廉价产品大量出口造成的，因此中国应使人民币升值，在世界经济中担负相应责任。美国之所以施压人民币升值，是认为中国实行的“盯住美元汇率”政策，使美元贬值的积极效用没能全面发挥，只是“极大地增强了中国企业的出口竞争力，刺激了中国产品的出口”，尤其是2002年美元贬值的同时，美国外贸逆差却创出了4352亿美元的历史峰值，对华贸易逆差达到1031亿美元。美国通过美元贬值，既能减轻其外债负担，每次美元大幅贬值都能使美国债务减少三分之一，又能刺激其产品的出口，还能转嫁其各种经济危机，成为其对其他国家进行剥削的主要形式。近年来，关于“亚元”问题的讨论已越来越热，哪种货币能够成为未来“亚元”的载体，已变成一个日益敏感的话题。日本由于其经济十年来的萎靡不振，日元充当亚洲货币主导的可能性在变小。逼迫人民币升值，目的就在于想通过人民币升值，打垮人民币对日元的挑战，确保日元的未来主导地位。从经济学上讲，主要有以下几个方面的依据：第一，人民币汇率自1994年以来已近10年没有进行调整，而这10年中国经济和国力已经发生了深刻的变化。1994年中国人均GDP折合美元为2100美元，2000年中国人均GDP为856美元，2003年人均GDP为1087美元，2004年人均GDP为1490美元，2005年人均GDP达到1703美元，2006年是2017.6美元，2007年人均GDP为2280美元。第二，按照国际经济学的理论，外汇节余过多本身就表明外币定价过高，本币定价过低，本币有升值压力。截至2007年，中国的外汇储备已高达1.6多万亿美元，中国已成为世界上第一大外汇储备国。第三，从2001年以来，世界各主要货币包括东南亚国家的货币对美元都大幅度升值，只有人民币对美元的汇率一直没有调整，即人民币实际上也跟随美元对其他货币大幅度贬值。且不说20世纪90年代人民币是不是过度贬值或定价过低，单说近年来其他国家的货币对美元都大幅度升值，只有人民币对美元的汇率没有变化，仅此一条，就可以判断人民币对美元的价值有可能低估。中国与世界上几乎每一个国家的贸易都在增长。最明显的一些变化还是在中国周边地区。以蒙古为例。根据世界银行的数据，直到20世纪80年代末，蒙古经济还完全为前苏联所控制，其95%的出口都是面向苏联或其东欧卫星国。现在中国是蒙古最大的投资国和贸易伙伴。以美元计，2004年上半年蒙古约有60%的出口商品流向了中国，27%的进口来自中国。贸易联系正在为中国与中亚国家建立更稳固的关系铺平道路。中国正在建设或力促兴建的项目包括：从俄罗斯和哈萨克斯坦通往中国的石油和天然气输送管道，以及连接中国与俄罗斯、蒙古和缅甸的铁路线。贸易正在推动基础设施方面的支出。俄罗斯、蒙古和哈萨克斯坦拥有石油、天然气、铁矿石、铜等中国急需的资源。国际环境的这一转变对中国来说可谓巨大，在整个冷战时期，甚至在中国历史上很多时候，中国都是被充满敌意或怀疑态度的邻国包围的。中国政府已为缓解这些担心做了很多工作，特别是消除邻国对中国经济威胁的担心。当2002中国加入世贸组织时东南亚和印度等邻国尤为担心中国廉价的产品将涌入它们的市场，损害其本国生产商的利益。但当前对中国存在巨额贸易逆差的是遥远的美国和欧洲，因此，亚洲邻国对中国经济崛起的担忧正在消退。世界银行旗下国际金融公司（International Finance Corporation）的首席经济学家斯道延。坦尼夫说，亚洲邻国的心态已经变了，它们现在认为中国的经济崛起对它们是个机会，它们可以从中受益。虽然许多亚洲邻国对中国的担心依然存在，但中国已越来越被视为一个商业伙伴，它的经济崛起能给别人带来利益。中亚是指位于中亚地区的哈萨克斯坦、乌兹别克斯坦、塔吉克斯坦、吉尔吉斯斯坦和土库曼斯坦五国。其自然资源丰富，但产业结构单一；原材料工业发展较快，但加工工业滞后，且重工业依赖出口，轻工业依赖进口。我国西北的新疆作为中亚和南亚弧形经济圈中心，独特的地缘优势，无疑成为我国与中亚经济合作承接地和聚合点。通过其与中亚的贸易，构建中国与中亚各国陆上资源大通道，成为我国建立全球资源供应体系中一个重要组成部分。除了地域因素，我国与中亚贸易也有互补性。据1995～2006年新疆统计年鉴，新疆出口到中亚的商品主要是棉纱、肠衣、鞋、服装类、家用电器、日常生活用品、机电产品、汽车、工程机械等。从中亚主要进口能源、原材料商品，如钢材、原油、化工产品、有色金属、废旧金属、非金属矿石、金属矿石、木材、畜产品、机械配件等。尽管中亚及其辐射地区的购买力比不上发达国家和地区，但因其消费结构的特殊性且消费水平较低，目前通过我国西北部的新疆基本上能够满足中亚从我国的进口需求。人民币升值可以改善我国与中亚的贸易条件。随着人民币汇率的升值，我国从中亚地区进口的能源、石油以及非金属矿的成本得到了改善。近些年来，我国政府主导的固定资产投资增长居高不下，从中亚等国进口的能源和原材料等初级产品所占比重大幅攀升。同时，我国经济的迅速发展导致进口需求的上升无疑在一定程度上提高了国际原材料、技术密集型产品的价格，进一步造成贸易条件的恶化。人民币升值将会降低进口产品价格，特别是原材料和高科技设备价格的降低，企业将会加速技术引进，提高生产效率，进行产品更新换代，实现产品动态比较升级。人民币升值可以优化我国与中亚贸易的商品结构。目前，我国的贸易结构还不是很合理，大多数企业都处在劳动密集型且技术含量不高的水平上，加工收益近80%被拥有高新技术的知名品牌的外国所有者所转移。通过人民币升值的手段，可以最有效率地把制造业中那些技术含量与附加值低的、管理不善地挤出去，这符合中国产业结构转变的发展方向。因为本国货币的持续升值让它们面临“优胜劣汰”的压力，从而不断激励企业创新、再创新。最终走向世界知名品牌之路。可见，人民币升值对于推动我国企业贸易结构调整并激发其自主创新，实现可持续发展具有重要意义。根据一般的经济规律，实际有效汇率的进一步上升会削弱出口。由于人民币对美元汇率的升值，会造成出口产品的美元价格的提高，直接影响出口产品的市场竞争力。因而会削弱我国对中亚地区的出口。但是，根据《人民币汇率升值与贸易余额实证分析——以新疆对中亚贸易为例》的资料显示，在1994～2005年人民币汇率持续升值的同时，新疆与中亚的贸易余额与人民币汇率存在负相关系。从人民币汇率与新疆对中亚贸易余额相关性的回归分析中，也同样证实了直接标价下的人民币对美元汇率与中亚贸易余额存在负相关系，即人民币对美元升值会引起新疆对中亚贸易余额加大。这是因为，虽然人民币对美元的名义汇率升值，但人民币的实际有效汇率是在下降。实际有效汇率不仅涉及一国主要贸易伙伴国货币的变动，且剔除通货膨胀因素，更全面反映一国货币的对外价值，也更准确反映一国相对于贸易伙伴国的竞争力。即一国实际有效汇率下降，该国产品国际竞争能力相对提高，贸易账户余额易出现顺差。此外，也不能忽视包括中亚在内的其他亚洲国家的货币对美元是否升值。第一，考虑调整出口退税率，减少对高能耗低附加值商品的出口补贴。第二，加强对短期资本流动的管制是降低人民币进一步升值的重要途径。对于像企业境外直接投资、大型中资跨国公司的全球资金调拨以及银行持有更多的海外资产等应逐步放宽，扩大国内企业和居民用汇的权利等。第三，降低人民币存款利率或提高贷款利率。存款利率应下调到使人民币的收益率低于其他国家货币如美元的收益率，从而有助于避免大量“热钱”流入我国，降低人民币来自资本项目盈余的升值压力；提高贷款利率会增加出口企业的成本从而会引起出口增长放慢，降低人民币来自经常项目盈余的升值压力。第四，适度控制、合理利用我国的外汇储备。合理利用我国充足的外汇储备，提高企业出口竞争力，这是应对人民币升值贸易冲击的关键。由人民币升值压力微观基础的分析可知，由于人民币升值压力很大程度来源于大量外汇储备，所以利用我国目前大量外汇储备来进口石油、粮食、矿砂和技术设备等我国紧缺资源和亟须技术，不但可以缓解大量外汇储备所累积的人民币升值压力，而且可以提高我国企业生产能力和整体素质，最终有利于对外国的产品出口，充分发挥人民币升值对我国贸易的有利作用。第五，循序渐进地改革人民币汇率形成机制。浮动汇率制度是我国汇率形成机制未来的改革方向，所以最终缓解人民币升值压力，保障我国对外贸易快速平稳发展，必须落实到汇率形成机制改革上来。

企业如何才能在当今激烈的市场竞争中立于不败之地？怎样才能在竞争中取得胜利？归根结底依靠的是人，因为只有人才能创造价值。然而企业要想获得适合自身发展的人才就必须通过各式各样的培训来实现，企业的培训将给员工提供可以胜任他们职位的信息和技能。但是，对于企业管理者来说，除了具备胜任职位的基本技能和能力以外，企业更注重培训他们的团队意识、沟通能力、协作能力等管理能力。素质拓展训练就是以“磨炼意志、陶冶情操、完善人格、熔炼团队”为目的，在体验式培训中实现这一目的的。素质拓展训练起源于西方，英文outward-bound，意为一艘小船离开安全的港湾，驶向波涛汹涌的大海，去迎接挑战。二战时期，大西洋上有很多船只由于受到攻击而沉没，大批船员落水，由于海水冰冷，又远离陆地，绝大多数人不幸牺牲了，但极少数人在经历了长时间的磨难后得以生还。后来，发现得以生还的人并不是那些身体强壮的人，而是那些拥有强烈求生欲望的人。二战结束后，在英国出现了这种模仿真实管理情景，对管理者和企业家进行心理和管理两个方面培训的outward-bound管理培训。由于它新颖的培训形式和良好的培训效果，被世界各地不同的企业所采用。根据管理学理论，我们可以将管理的过程分为四个部分：计划、组织、领导和控制。我们以素质拓展训练中“扫雷”这个项目，来看一下管理过程中的四个部分是如何工作的。“扫雷”游戏是用一张分成若干方格并标上数字的地毯来模拟雷区，每一个方格的结果是有雷或是无雷，在“雷区”中间位置的两侧是分别有两个峡谷。而这个游戏的规则是每一名队员只有两次机会去“扫雷”，如果选择的方格没有雷，那么可以安全地选择前后左右的任意一格继续“探雷”。但如果选择的方格是有雷的话，就必须按原路返回，换另一名队员继续“扫雷”。这个任务获胜的依据就是在规定的时间内所有的队员都可以安全地通过“雷区”。那么，在这个游戏中将如何去应用管理学知识来实现胜利呢？我们知道，计划是每一件事情成功的第一步，在这个游戏中也不例外。作为一个团队，首先应当确定团队的目标，那就是成功走出“雷区”。在制定了这样一个目标之后，应该做的就是制定实现这个目标的计划。当计划完成之后的组织环节中，项目经理应当明确所有成员的分工、团队的分组等事宜，以便所有的成员可以各司其职，避免在项目实施的过程中出现漏洞或者人力资源的浪费。建立起一支高效的团队，在任何一个项目中都是领导环节的重要任务。在这个项目中，其实还有一点是管理者可以实践的，那就是如何去建立一支信任的团队。“扫雷”游戏在完成了一半的时候会有意设置一道障碍，那就是在两个“峡谷”之间的“雷区”全部都是有雷的，也就是要通过正常的途径是不可能通过“雷区”的。在团队成员即将取得胜利的前夕，团队将面临极为严重的信任危机，所有的人都会怀疑是不是记录路线的人记录出了问题，这时的争吵将使团队耽误相当多的时间。如果这样的情况发生了，对于管理者来说需要通过与大家沟通，使团队建立起相互的信任，共同克服困难，渡过团队面临的这一信任危机。管理过程的最后一个阶段就是控制，其实从实施这个项目的第一步起就开始了控制。当队员探雷失败的时候，其实就是表明这一步与团队的目标是不一致的，作为项目的管理者就应该及时纠正错误，派遣另一名队员寻找一条新的道路，从而达到控制的目的；在团队面临信任危机时，管理者也是通过不同的方式消除大家心中的疑虑，重新建立起团队的信任，使之与团队的目标一致。通过“扫雷”游戏，可以看出管理学是可以运用到生活的方方面面的，素质拓展训练就是通过这些看似简单实际却是障碍重重的小游戏，在娱乐与轻松中教会管理者如何运用管理学理论解决实际工作和生活中的一些琐事，使管理者在今后的企业管理中充分地信赖以及运用管理学理论，给企业带来收益。素质拓展训练的很多项目都是为了增进团队合作而设计的，例如攀爬“天梯”项目可以让队员在极为艰难的条件下体会到相互协作带来的力量；“孤岛求生”项目则可以增进队员之间的了解，培养管理者良好的沟通能力；而“背摔”项目则是要让队员在团队中建立起彼此的信任。在Stephen P.Robbins和Mary Coulter所著的《管理学》一书中认为高效团队应当具备以下的特征：清晰的目标、相关的技能、相互的信任、统一的承诺、良好的沟通、谈判的技能、恰当的领导、内部的支持和外部的支持。我们可以看出，素质拓展训练就是要增强管理者的团队合作意识，打造一支高效的团队，而高效的团队正是一个企业获取成功的关键因素之一。企业文化对企业发展的作用在当今的市场竞争中已不言而喻了，海氏集团副总裁梅尔文·斯塔克总结说：“最受赞赏公司的意见的一致程度超过我们研究的几乎所有公司。不仅在文化目标上一致，而且对公司如何争取那些目标的看法也是一致的。”可见，公司出类拔萃的关键在于文化。在素质拓展训练中，所有的参训者首先都会参与一个叫做“破冰”（ice break）的仪式，其最主要的目的就是增进彼此之间的了解，消除队员自我为中心的想法，组建成一支团队，确定团队的队名、队旗、队歌、口号等团队文化，由队员亲自创建的团队文化将是团队迈向成功的基础。当队员在体力透支意图放弃的情况下，团队的口号将是他们坚持的动力；当本队的分数落在其他队伍后面的时候，高亢的队歌将是他们奋勇追赶的声音；当队友在10米高空的木桩上失去信心的时候，挥舞的队旗将是他们勇气的源泉。在队员亲身感受到了组织文化的重要性后，必将加强员工对企业组织文化的认同感，同时迫使管理者利用各种方式建立起适合自身发展的组织文化。一位中信银行的人力资源部经理的体会是：“体验式培训方式对于加强员工对企业文化认同感很有效。尤其是新人，他们刚到新的企业，还抱着观望的态度，对新的人际关系和新的企业文化都要有一个适应的过程。体验式培训创造了一个企业了解新人、新人了解企业的机会，经过这次全员范围的体验式培训，企业里的人际关系有了明显的改善，我们人力资源部门在新员工的任用上也获得了不少直接的信息。”素质拓展训练无疑会对传统的培训方式带来巨大挑战。所谓传统培训方式，即是指由企业自行组织，通过邀请外部的专家学者担任培训讲师，定时、定点、有一定规模、脱产或半脱产，就某个专题进行为期数天或数星期的正式培训活动，采取的形式多为讲座式，辅以若干直观的教具、多媒体手段、案例分析、情景模拟、趣味技巧等。那么，素质拓展训练较之传统培训有什么优势呢？有关专家指出：阅读和听到的资讯，我们只能学到10%～15%，但体验过的事，我们却能收获80%。传统培训方式多数是员工被动的接受信息，自然收获到的东西很少，并且培训的可转换性较低，所以这种培训的效果并不明显。而素质拓展训练正是打破传统培训的枯燥，在青山绿水之间构建一系列的训练项目，使参训者在思想完全放松的状态下接受体验式培训，从而提高参训者的积极性，这样也会使培训起到事半功倍的效果。MBA教育是目前企业对管理人员采用比较多的培训方法，但是MBA教育的费用比较高。有资料显示：“中国的商学院从上世纪90年代末出现至今，短短不到10年的时间，平均学费就从2万元增长到9万元。”费用高不说，收到的效果也不一定好，很多学院通过MBA教育后，又落入只知道理论，而缺乏理论与实践相结合的尴尬局面。从邀请专家学者进行讲座的费用也不低，目前讲师平均课时收费为300～500元/小时，另加差旅费用。当然，西方式的10000美元/天更是难以接受的天文数字。而素质拓展训练的费用为600元/人左右，也就是说企业用于对一位管理者进行MBA培训的费用可以供150人进行一次素质拓展训练。而用于支付讲师授课一小时的费用也可以负担一位员工一天的素质拓展训练，并且企业在素质拓展训练后得到的效果也远大于传统培训得到的效果。意在培养起人们的团队精神、合作精神、凝聚力、勇敢、乐观等品质，这些都是企业员工所需要而平时的知识学习无法培养出来的。试想让一群平时正襟危坐的人放下手中的工作，全身心地投入像孩子们才会去做的游戏中去，本来就是让人很感兴趣的事。在精心设计的游戏中，原本就悟性很高的人们，很容易感受到平时被大家忽视的问题，比如团结才会产生效率，勇敢乐观更有助战胜困难等。有的人更是举一反三，从一个道理想到其他的道理。因为游戏深化了人们的记忆，在以后的工作中，有些人不仅性格有了变化，比以前积极主动起来，还自觉把培训的收获应用到工作和生活中去，待人接物呈现出与从前迥然不同的态度。例如，“背摔”游戏，当台下的人给台上的人做出承诺后，自己也多了一分责任，当伸出双臂去接台上摔下来的人时，是在用双臂托起别人的生命。而台上的人往下摔时，将自己的生命交给别人，也就对台下的人充满信任。通过参加这个游戏，企业所要求的责任和忠诚的品质便可以在潜移默化中培养起来。体验式训练无论从形式，还是从内容上，都适应企业员工提高素质的需要，具备现实操作性，其实用意义显而易见。中国的经济正处于飞速发展阶段，人的素质亟待提高，体验式训练在中国有着广阔的发展前景，随着人们观念的现代化，现代企业培训的趋势在于让更多的员工体验式的培训，通过体验式的培训激发员工的潜能，从而创造出更大的价值。素质拓展训练作为体验式培训重要的方面，将立足于如何帮助企业开发人的潜力，成为企业培训不可或缺的手段，打开企业培训的新思路。