利用4个抗感杂交组合 （‘富士’ב金冠’ ‘金冠’ב富士’‘嘎拉’ב富士’ ‘富士’בQF-2’） 进行了苹果炭疽菌叶枯病抗性鉴定和遗传分析。结果表明，4 个群体中抗、感植株的分离比分别符合1∶1、1∶1、0∶1和1∶0的理论比值，初步推测苹果抗炭疽菌叶枯病性状受隐性单基因控制，抗病基因型为 rr，感病基因型为 RR和Rr。由此推测供试杂交群体的亲本品种 （系） ‘富士’ ‘金冠’‘嘎拉’ ‘QF-2’ 的基因型分别为rr、Rr、RR和rr。利用207株 ‘金冠’ב富士’ 的杂交后代为试材，构建了抗感基因池用于BSA分析。从HiDRAS和GenBank网站上下载了300 对均匀覆盖苹果染色体组的 SSR 引物，通过在亲本及抗感池中的初步筛选，将产生多态性条带的引物进行群体验证，获得了两个位于苹果15号连锁群上与抗病性状相关的分子标记 CH01d08 和 CH05g05。通过MapMarker 4.0 软件分析，将这两个标记定位于Rgls基因两侧，重组率分别为7.3%和 23.2%。依据苹果基因组 CH01d08 和 CH05g05 标记之间的序列，自行设计了276对SSR引物。经过亲本及抗感池的初步筛选及群体验证，最终筛选出 9 对与 R gls基因位点连锁的分子标记。将表型抗性鉴定结果与标记基因型数据相结合采用 JoinMap ver.4.0软件，完成了SSR标记与Rgls基因位点的连锁图谱。这11个标记覆盖了49.2 cM的遗传距离，最近的标记为 S0405127 遗传距离为 0.5 cM。Rgls基因位点两侧最近的两个标记 S0304673 和 S0405127 之间的物理距离为500kb。以‘金冠’和‘富士’及‘金冠’ב富士’的F1代群体中20株极端抗和20株极端感炭疽菌叶枯病的单株为材料，利用全基因组重测序（whole genome re-sequencing，WGR）技术，结合混合分组分析法（bulked szegregate analysis，BSA）共开发SNP位点3399950个，InDel位点573040个，SNP位点位于内含子上的465317个，位于外显子上的13029个，其中同义变异7330个，InDel位点位于内含子上的108996个，位于外显子上的19957个，其中插入或缺失3或3的整数倍的碱基，不改变蛋白质的编码框的有6928个。在全基因组范围内共得到33个候选的SNP位点及所对应的29个候选基因。通过对△（SNP-index）的筛选，将抗性基因位点快速定位于苹果第15条染色体的2～5Mb的区域内，结合SSR标记定位结果，最终锁定18个SNP位点、30个InDel位点，以及5个候选基因。通过对5个候选基因在接种病原菌后不同时间点的表达量差异及生物信息学分析，结果显示，基因MDP0000686092、MDP0000205432、MDP0000120033为功能未知蛋白，基因MDP0000945764具有CCHC型锌指结构，是丝氨酸/精氨酸富集剪接因子，具有核酸绑定、锌离子结合分子功能，参与RNA剪切生物过程，调节基因产物的表达。基因MDP0000864010具有烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（磷酸盐）NAD（P）绑定区域，属于NAD依赖差向异构酶/脱氢酶家族，具有辅酶绑定功能，可能与鼠李糖生物合成酶1有关。通过qRT-PCR验证，5个候选基因均不同程度的响应炭疽叶枯病病原菌的诱导，是苹果炭疽叶枯病抗病相关基因。通过高分辨熔解曲线 （HRM） 分析技术对SNP 及InDel标记进行验证。对SNP 及InDel引物在亲本和抗感基因池中进行初步筛选，将出现不同分型的引物在分离群体上进行验证，获得了6个SNP 及5 个InDel标记与Rgls基因位点紧密连锁。从中挑选了10 个标记对所检验出的重组个体进行了分析，将 Rgls基因位点定位于标记 InDel4199 和SNP4257之间，范围缩小为58 kb以内。以青岛农业大学苹果试验基地 （山东省胶州市） 栽培的50 个田间栽培品种和品系为试材，利用四个紧密连锁的分子标记 S0405127、S0304673、SNP4236和InDel4254验证了分子标记的可靠性。结果表明，SSR标记 S0405127，S0304673，SNP 标记 SNP4236，InDel标记InDel4254鉴定的准确率分别为 90.0%，94.0%，98.0%，96.0%，其鉴定结果的准确率均达到90%以上，可以应用于田间栽培品种、品系、种质资源以及杂种后代幼苗对炭疽菌叶枯病抗性的鉴定。一是通过对4个杂交组合的F1 群体及4个亲本进行苹果炭疽菌叶枯病抗性鉴定和遗传分析，推断出苹果抗炭疽菌叶枯病性状受隐性单基因控制，抗病基因型为rr，感病基因型为RR和Rr。二是通过300对均匀覆盖苹果染色体组的SSR引物和自行设计的276对SSR引物在亲本及抗感池中进行筛选，得到的多态性标记经作图群体验证，共获得了11个与Rgls基因位点连锁的分子标记，将抗病基因定位于苹果第15条染色体上，并完成了SSR标记与Rgls基因位点连锁图谱的构建。将 Rgls基因位点定位在 SSR 标记 S0304673 和S0405127之间，物理距离为500 kb，与最近的标记 S0405127 的遗传距离仅为0.5 cM。三是开发了与抗炭疽菌基因相关的 SNP 标记和 Indel标记，并对部分SNP 及 InDel 标记进行了验证，将 R gls基因位点进行精细定位，将抗病基因的范围进一步缩小至58 kb，并获得了14 个与抗病相关的候选基因。

冻害症状:冬季0℃左右的低温天气持续时间长，或遇极值温度低于-5℃时，柑橘枝梢叶片将严重受冻。从叶尖、叶缘向中脉方向纵卷，并产生大块相连的灰褐色枯死斑；秋梢嫩茎也变褐枯死；老叶受冻，症状与前述相似，但枯斑面积较小，一般不卷曲。3月底至4月初春梢抽发时，受冻叶片纷纷脱落，形成秃枝，嫩梢发育差，花蕾小，坐果率低，对产量影响很大。如措施不力，树势很难在当年恢复(图9-1、图9-2)。图9-1 蜜橘类低温寒害和冻害图9-2 柑橘整株结冰一是自然灾害。二是人为因素。冬季，尤其是春节前由广东向华北、东北、西北调运柑橘时，途中需几天时间，防寒设施跟不上很易出现冻害。(1)预防低温寒害对接芽和果实的伤害，应注意把握好农事季节，特别要掌握好当地的气温变化规律，即破膜露芽时间最好在柑橘园20%～30%植株芽萌发5mm长左右(贵州在4月初)。(2)预防冻害首先应培育壮树，控制秋梢抽发过度，用15%多效唑可湿性粉剂1000mg/kg，在秋梢抽发3cm左右时喷枝梢至湿透，可达到控制树梢矮壮、促进花芽分化、提高翌年坐果率之目的；受冻后，3月灌水浇透，可减少落叶、落花和落果；春季萌芽前及时剪除冻伤枝梢，减少养分消耗，促进中间态的中弱枝转换成果枝；全园进行2～3次叶面喷肥，第一次生理落果期可加10mg/kg的2，4-D钠盐保果；全年注意合理施肥，防治好重要病虫害，尽快恢复冻前的树势。(3)冬季柑橘调运时，设法用空调车，防止贮运途中受害。(4)为了防止柑橘类冻害提倡喷洒3.4%赤·吲乙·芸可湿性粉剂(碧护)7500倍液，不仅可防止寒害和冻害，还可生产碧护柑橘美果。干旱初期表现为幼嫩枝叶萎蔫、卷曲、干枯；随着干旱程度加剧，老熟叶片卷曲、脱落，土壤表层根系死亡；严重时，枝梢甚至整株枯死(图9-3、图9-4)。干旱易诱发的次生灾害主要为柑橘红蜘蛛、柑橘锈壁虱和柑橘炭疽病等。图9-3 干旱导致叶片卷曲图9-4 干旱导致叶片失水干枯（1）尽量选择水源条件好的地方建园，如果水源条件不好，要因地制宜修建蓄水设施。（2）通过深翻改土、压埋有机质等措施改良土壤，柑橘园的改土深度应达到80cm以上，增强土壤保水能力。（3）采用生草栽培，以降低土壤温度，增加土壤的蓄水能力。（4）采用滴灌、微喷灌、地下渗灌等节水灌溉方式。（5）没有灌溉条件的柑橘园，遇到严重干旱时，应首先剪除未老熟的新梢；如果干旱有长期持续的趋势，应进一步剪除部分枝叶，减少树体水分蒸发。低洼地、水田等改造的柑橘园，由于排水不畅或地下水位过高，会导致柑橘树根系处于积水缺氧状态。长时间根部积水，首先表现为须根变褐、腐烂，随后侧根皮层腐烂，木质部腐朽；树冠表现为叶片变黄、脱落，部分新梢枯死，生长势衰弱，严重时树冠全部死亡(图9-5、图9-6)。图9-5 低洼果园淹水状图9-6 淹水后枝干流胶洪涝灾害时，沿江果园由于洪水冲袭，易造成主干从环割口、嫁接口断裂，或从主枝分叉处劈裂；河滩果园土层被严重冲刷，露出根系或严重倾倒。地势低洼，排水不良的果园由于淹没深度和时间的不同，会造成不同程度的伤害。未成熟叶片对淹水敏感，淹水后叶片全部呈水浸状，继而腐烂干枯；多数老叶和部分成熟叶片卷曲、脱落，少量1～2年生枝枯死；长时间淹水后，落叶严重，大部分1～2年生枝枯死，部分3～5年生枝枯死，严重的整株树死亡。果实淹水后会导致幼果脱落或在枝梢上变黑，长时间淹水后会导致大量落果。另外，树体受害程度与洪水状态也有关，一般情况下，如果水流较慢或基本静止，淹没高度不超过树冠(枳砧)高度的1/2，浸泡1～2天仍可维持基本正常，不会出现大量落叶落果(成熟期果树除外);如果洪水无污染，流速较快，则浸泡2～3天仍可维持基本正常。另外，柑橘果实成熟期雨水过多会导致果实品质下降、浮皮发泡、裂果、难以储藏、大量落果及腐烂发霉等。水涝灾害易诱发的次生灾害主要为柑橘炭疽病、柑橘溃疡病、柑橘枝干流胶病等。(1)选择合适的果园地址。果园应建在地势较高的地方，尽量避免在河滩地、低洼地等易被洪水淹没的地方建园。(2)做好果园排水系统水田、平地建设柑橘果园，应根据地下水位情况，起垄栽培、深挖排水沟和建设畅通的排灌系统。(3)洪涝灾害后橘园的救治措施。及时排水:洪水退去后，立即挖沟疏渠，清除障碍物，及时清除淤泥，排尽积水，加速表土干燥。冲洗树冠:在淹水退去时，应及时清洗树冠，去除树冠淤泥；同时将挂留在树上的树枝、杂草及垃圾等杂物清理干净。因树修剪、清除病枯枝:树体正常、长势一般的成年树，只剪除黄叶而任其挂果；幼树或长势差、流胶病严重的树，除疏果外，还需疏剪丛生枝、交叉枝和衰弱枝，缩剪夏梢，减少叶面水分蒸发和树体养分消耗，加速树势恢复；落叶严重又烂根的树，回缩多年生枝条。病虫害防治:水淹后树冠和根系受到一定程度的伤害，易使病菌入侵，地面和树冠要及时喷药1～2次，以预防炭疽病、溃疡病及流胶病等。培土及中耕松土:退完水后，将冲倒或冲歪的树扶正并固定，对泥土被冲走、根系外露的果树进行培土；整个果园在脚踩表土不感觉黏烂时，及时中耕松土，翻土深度10cm左右，以免伤根。合理施肥:淹水后不宜立即在根际施肥，可用0.3%磷酸二氢钾根外追肥2次，每次间隔10～15 天。恢复后(1个月左右)成年结果树可每株沟施粪水或沤熟麸肥20～25kg，尿素100～200g，促进新根萌发。同时开环状沟重施一次基肥，每株施菜麸肥1.5～2.5kg、复合肥250～500g。树干涂白:柑橘树受涝后造成大量枯枝落叶，致使主干和主枝暴露在烈日下，易发生日灼病，用生石灰1份、水10份，充分溶解后涂刷在主干和主枝上，保护树体。近成熟果实阳面果皮易受害，初呈青灰色，后变黄褐色，灼伤部果皮呈焦灼状变硬、粗糙，有的稍下陷。受害轻的焦灼部仅限于果皮；受害重的可深入到囊肉，致使囊瓣、汁胞干缩呈海绵状，汁少而味淡，品质和品级下降(图9-7、图9-8)。图9-7 日灼症状（1）图9-8 日灼症状（2）（1）营造防护林，实行生态防除。（2）深翻改土，增施有机肥，实行配方施肥，增强根系活力，使植株地上部和地下部保持平衡。（3）果面涂白，对顶生无绿叶遮挡的果实用比例为1∶4：0.2的石灰、水、猪油调匀后的混合物涂至果面。果皮在生长后期纵裂开口，瓤瓣亦裂开露出汁泡，失水后干枯或受次生真菌侵入引起腐烂。久旱遇骤雨、水分供应不均匀；缺钙；果皮较薄的品种易发生(图9-9、图9-10)。图9-9 脐橙裂果症状（1）图9-10 脐橙裂果症状（2）改善果园排灌条件，果实生长期均匀供水和养分，后期避免灌水过多；喷洒3.4%赤·吲乙·芸薹可湿性粉剂7500倍液。新梢抽发少且叶片小而薄，老叶发黄直至全叶发黄，树势弱。枝叶稀少而细小；叶片薄黄，呈淡绿色至黄色，以致全株叶片均匀黄化，提前脱落；严重时，枯梢，树冠光秃；花芽分化少，坐果率低，果小，果皮苍白光滑，常早熟(图9-11、图9-12)。图9-11 柑橘缺氮果实及叶片症状图9-12 柑橘氮过量果实症状确定合理的氮肥施用量、施用时期以及施用方法；多施有机肥，增加土壤保肥能力；不要偏施钾肥。氮肥用量一般在0.5～1.2kg/株，分2～4次施用，最好沟施或穴施或对水施用；也可叶面喷施1%～1.5%的尿素。氮过量：枝叶繁茂，树势生长过旺，夏秋梢旺盛，叶色浓绿，多为徒长枝，花少果少，果实变旺，果皮加厚，着色不良，含糖少，不耐储藏，严重时会导致缺钾和缺钙。老叶片变为淡绿色至暗绿色或青铜色，失去光泽，下部叶片发紫以致早落；枝条细弱，新梢上有小而窄的稀疏叶片，叶片狭小，密生；果小皮厚而粗糙，无光泽，出现皱皮，味酸(图9-13)。图9-13 柑橘缺磷果实症状过酸土壤通过施用石灰类肥料矫正土壤酸度，并选择施用碱性的钙镁磷肥，并通过重施有机肥提高土壤磷的有效性；干旱季节注意灌溉，防止土壤干旱导致缺磷。磷肥施用量:过磷酸钙0.5～1.0kg/株，分2～4次施用；酸性土则施用钙镁磷肥；或者叶面喷施0.5%～1.0%过磷酸钙或1%磷酸铵，7～10天喷施1次，连续喷施2～3次。磷过量：会诱导锌、铁、硼等元素的缺乏，果实会浮皮(皱皮)。生产中施用1∶1：1(N：P2O5：K2O)复合肥的柑橘产区，易因磷施用比例高诱发钙、硼、锌等的缺乏。老叶叶尖和上部叶叶缘首先变黄，逐渐向叶部中心扩展，变为黄褐色至褐色焦枯，叶缘向上卷曲，叶片畸形，叶尖枯落；新梢纤细，叶片较小；严重时，开花期大量落叶，枝梢枯死；果小皮薄光滑，着色不好，汁多酸少，果汁味淡，易腐烂脱落(图9-14)。图9-14 柑橘缺钾果实症状沙质土、红壤等钾易流失的土壤，增施有机肥以增加其保水保肥能力，减少钾的流失；根据柑橘对各种矿质营养的需求量及需求比例，进行配方施肥，减少因氮、磷、钙、镁等肥料施用过多导致的缺钾。钾肥施用量:硫酸钾0.5～1kg/株，分2～4次施用；或叶面喷施0.5%硝酸钾、硫酸钾或磷酸二氢钾溶液，1周喷施1次。钾过量：目前在柑橘园还未见钾过量对树体和果实外观产生影响，但已有的研究表明，钾过量会导致果实糖/酸比下降，影响果实品质。嫩叶由叶尖开始黄化，黄化区域沿叶缘向下扩大，叶幅变窄，叶形变小，枝条端部枯死。钙移动性差，故缺钙一般发生于幼嫩部位，生长点和根尖受害最重。缺钙时新梢短弱早枯，先端呈丛芽，叶片褪绿先在叶缘出现，后逐渐扩展到叶脉间，这是与缺硼枯梢的区别所在。植株缺钙，果实膨大期易产生裂果。在酸性土壤中，钙含量偏低；在温暖多雨地区，土壤中钙素易被淋溶而流失掉，导致土壤中钙素不足；土壤中过量施用氨态氮化肥(如硫酸铵、硝酸铵等)，或土壤中钾、镁、锌、硼元素含量多，在干旱时造成元素不均衡，易诱发缺钙(图9-15、图9-16)。图9-15 柑橘缺钙图9-16 沙糖橘缺钙每亩施石灰100～150kg，调节土壤pH值至5.5～6.5为宜。在嫩梢期和幼果期，喷施液体钙。树盘覆盖、适时淋水与叶面喷施液体钙结合，防止裂果。老枝、成叶先显症，但老叶形状正常。老叶初期中脉两侧叶肉呈黄白色，主侧脉仍呈绿色，肋骨状，后期大部分黄化，仅叶尖处及主脉为绿色，叶片基部呈现一个绿色倒“V”字形。以夏末和秋季发病较多，特别是果实接近成熟时发病最多，以老叶和果实附近的叶片表现较为突出。柑橘缺镁和缺硼往往同时出现(图9-17、图9-18)。图9-17 金柑缺镁图9-18 柑橘缺镁果实症状镁在酸性土或轻沙质土中易流失；磷、钾肥施用过多易诱发缺镁；柑橘多核品种比无核或少核品种更易产生缺镁病。（1）叶面喷施0.2%硫酸镁（添加0.3%尿素）2～4次，或在叶面喷施1%硝酸镁（5月以后使用）。（2）对严重缺镁的植株，最好采用镁肥混合堆肥根施，效果更好。酸性土（pH值<6）宜施用石灰镁（0.8～1.0kg/株），微酸性至碱性土宜施用硫酸镁或硝酸镁，酸性土中每株树施1kg氧化镁作基肥。新叶色淡透明，黄化起泡，形成黄色斑点；叶片反卷失去光泽，叶脉稍肿大，老叶主、侧脉木栓化，纵向破裂，呈暗色；果小，皮厚而硬，汁少渣多，常称为“石头果”，果心及海绵层均有褐色胶状物。初夏，开始时幼果果皮呈现乳白色凸起小斑，随后斑点变黑下陷，形成不规则黑斑，同时中果果皮、果心出现褐色胶状物。严重缺硼时，幼芽突然变黑枯落。酸性土壤中硼易流失；花岗岩、片麻岩、片岩等成土母质，硼含量低；碱性土壤中硼的有效性低；磷肥或石灰施用过多，或土壤干旱，影响硼的有效性和根系对硼的吸收，均容易缺硼；酸橙对硼的吸收力弱，以酸橙做砧木的品种容易缺硼(图9-19、图9-20)。图9-19 夏橙缺硼症状图9-20 柑橘缺硼叶片症状（1）每亩果园土壤施硼砂250～500g，要与有机肥或土壤混合施用，避免硼肥和根系直接接触，以免伤根。沙质土宜浅施，黏重土土施比叶面喷施效果好，或土施持力硼。硼砂、大粒硼难溶于水，最好在春季施基肥时，将其混入肥料中撒施，每株施50g。（2）花期喷硼是矫治缺硼的关键时期，叶面喷施0.1%～0.2%的硼酸或硼砂溶液（如速乐硼、持力硼等），每隔7天喷1次，连喷2～3次。禾丰硼和金钾硼为速溶性硼，可用1000～2000倍液喷雾。新梢幼叶先显症。具体表现为嫩叶不均匀黄化(即嫩叶主、侧脉间的叶肉黄化，主脉、侧脉及其附近仍呈绿色)；嫩叶变得窄小、直立；叶肉黄化，经常在褪绿区出现小绿点；枝叶丛生。在弱酸至强酸性土壤中锌含量低；黄泥土和石灰性土缺锌，在碱性土壤中锌元素虽存在，但溶解度低，不能被柑橘植株吸收利用；土壤有机质缺乏、瘦瘠；氮、磷、钾和钙施用过量，或镁、铜元素不足，皆易缺锌(图9-21)。图9-21 柑橘缺锌叶片症状（1）酸性土施硫酸锌（100g/株）。（2）叶面喷施0.2%硫酸锌，连喷2～3次。初发病时，幼枝长而柔软，稍呈三角形，上部扭曲下垂或呈“S”形，叶片变大且浓绿，叶面不平整，中脉弯曲呈弓形。严重时病株抽生大量不定芽，形成丛生枝且很快枯死。轻度缺铜时，果实表面产生许多大小不等的褐色斑点，随着果实成熟斑点变成黑色，内果皮出现树脂斑，果皮变厚且畸形。发病特别严重的病株，根群大量死亡，病枝的皮部和木质部之间呈现袋状树脂泡包围中心柱而产生的流胶(图9-22、图9-23)。图9-22 缺铜枯梢图9-23 缺铜枝条导管凝胶淋溶性强的酸性或碱性沙质土以及酸性腐泥土易缺铜；大量施用磷肥以及氮肥施用过多均易引起缺铜。春梢萌动前，叶面喷施0.1%的硫酸铜液，每隔10天喷1次，喷1～2次，须注意硫酸铜容易烧伤叶片，故嫩叶及炎夏慎用；为结合防治其他病害，叶面喷施硫酸铜、石灰、水配比为0.5∶0.5∶100的波尔多液。田间症状主要是叶片出现黄斑。病斑在初春叶片叶脉间呈水渍状，后发展成圆形褪绿小点，最后变成圆形黄斑，叶片和果实的向阳面黄斑较为普遍。晚夏及初秋较低的叶片分泌树脂胶状物，并很快变成黑色。严重时褪绿部分坏死，叶斑破裂穿孔，落叶落果(图9-24、图9-25)。图9-24 柑橘褪绿叶片图9-25 柑橘缺钼叶片症状土壤酸性过重或锰过量，抑制钼的吸收；长期使用硫酸铵等酸性肥料，使土壤中的钼难以被果树吸收。（1）对酸性过重的土壤，每亩施150kg石灰，调节土壤pH值，使其在5.5～6.5。（2）春季叶面喷0.008%～0.015%的钼酸钠或0.008%～0.025%钼酸铵溶液，每隔7～10天喷1次，连喷2～3次。为防止新梢受药害，只能在幼果期喷施。（3）每亩用20～35g钼酸铵与钙镁磷根施。叶脉间区域变黄色，叶脉及侧脉保持绿色，病叶呈现绿色的网状脉，严重时，仅叶片中脉保持绿色，叶片呈乳白色。石灰性土壤，土壤水分过多、透气不良；磷酸氢根离子含量高，营养元素不平衡；碱性土壤，枳砧品种易缺铁(图9-26至图9-28)。图9-26 沙糖橘缺铁图9-27 甜橙缺铁图9-28 柑橘缺铁叶片症状（1）改良土壤，多施有机肥和绿肥，搞好排灌，保持土壤疏松、通透。（2）在酸性土壤中，土施螯合铁（EDTA-Fe），每株施10～20g，配合灌水或与有机肥混施效果更好，但对碱性土无效。（3）叶面喷0.2%柠檬酸铁或硫酸亚铁，喷施时加等量石灰水，以免产生药害。严重缺锰时，叶片在淡绿色的底色上呈现暗绿色的网状脉纹；缺锰较轻时，叶脉和主脉、侧脉及附近叶肉呈暗绿色不规则色带，其余叶肉呈黄绿色。缺锰时叶片大小形状正常，与缺锌的叶片变窄小有别。（1）叶面喷施0.3%硫酸锰（加0.1%熟石灰）或有机螯合锰3000～5000倍液，连喷2～3次，最好在春季施用。（2）酸性土施锰，每亩施硫酸锰3.0～4.0kg，与有机肥混施；中性和碱性土施锰无效（图9-29）。图9-29 柑橘缺锰叶片

氮是保证葡萄正常生长结果最主要的元素之一，是原生质和酶的必要成分。氮能调节生长及结实，当其他的任何一种元素缺乏时也不会和缺氮一样很快地引起生长的停止，任何一种元素作为肥料施入土壤时也不能像氮一样迅速而明显地起作用，甚至其他元素过量地施入，也不能和氮一样表现出相反的效果。因此，氮肥管理是葡萄施肥管理中的重点。氮供应充足时，可以大大促进植株或群体的光合总产量；但若过量施氮，可使叶片生长和发育过速，叶片内的含氮量“稀释”，并增加其他元素相对缺乏的可能性；同时枝叶旺长导致相互遮阴，光合效率下降，且枝叶旺长消耗大量营养，果实成熟期推迟、果实着色差、风味淡，不利于养分积累等，产生众多副作用。氮素缺乏常表现植株生长受阻、叶片失绿黄化、叶柄和穗轴呈粉红色或红色等，氮在植物体内移动性强，可从老龄组织中转移至幼嫩组织中，因此，老叶通常相对于幼叶会较早表现出缺素症状。在增施有机肥提高土壤肥力的基础上，葡萄生产上一般可在三个时期补充氮素化肥，即萌芽期、末花期后、果实采收后，每亩施尿素30～40千克或相当氮素含量的其他氮素化肥。磷元素参与生物基本代谢与合成，在能量代谢、促进碳水化合物的运转及遗传方面起重要作用。磷元素以磷酸根离子形式供植物吸收利用，有单价磷酸根离子()和二价磷酸根离子(233223)，土壤中磷酸根离子态受土壤pH值影响，当pH值小于7时，呈233223态，为主要吸收态，pH值大于7时呈233223态，易被吸附固定成不被植物利用状态，为缺素症发生的主要因素之一。改良土壤可使被吸附固定的磷重新被释放而被植物利用。磷在植物体内移动性良好，可再利用。磷元素参与生物基本代谢与合成，在能量代谢、促进碳水化合物的运转及遗传方面起重要作用。磷元素以磷酸根离子形式供植物吸收利用，有单价磷酸根离子()和二价磷酸根离子(233223)，土壤中磷酸根离子态受土壤pH值影响，当pH值小于7时，呈233223态，为主要吸收态，pH值大于7时呈233223态，易被吸附固定成不被植物利用状态，为缺素症发生的主要因素之一。改良土壤可使被吸附固定的磷重新被释放而被植物利用。磷在植物体内移动性良好，可再利用。磷元素参与生物基本代谢与合成，在能量代谢、促进碳水化合物的运转及遗传方面起重要作用。磷元素以磷酸根离子形式供植物吸收利用，有单价磷酸根离子()和二价磷酸根离子(233223)，土壤中磷酸根离子态受土壤pH值影响，当pH值小于7时，呈233223态，为主要吸收态，pH值大于7时呈233223态，易被吸附固定成不被植物利用状态，为缺素症发生的主要因素之一。改良土壤可使被吸附固定的磷重新被释放而被植物利用。磷在植物体内移动性良好，可再利用。磷元素参与生物基本代谢与合成，在能量代谢、促进碳水化合物的运转及遗传方面起重要作用。磷元素以磷酸根离子形式供植物吸收利用，有单价磷酸根离子()和二价磷酸根离子(233223)，土壤中磷酸根离子态受土壤pH值影响，当pH值小于7时，呈233223态，为主要吸收态，pH值大于7时呈233223态，易被吸附固定成不被植物利用状态，为缺素症发生的主要因素之一。改良土壤可使被吸附固定的磷重新被释放而被植物利用。磷在植物体内移动性良好，可再利用。葡萄植株缺乏磷元素时表现叶片较小、叶色暗绿、花序小、果粒小、果实小、单果重小、产量低、果实成熟期推迟等，一般对生殖生长的影响早于营养生长(彩图11-1-1)。葡萄磷元素的补充仍以土壤施入为主，在增施有机肥的基础上，宜在花期前后和果实采收后施入适当化肥，可选用磷酸铵、磷酸二氢钾或含磷的果树专用肥料等。每亩施过磷酸钙10～15千克或相当磷素的其他磷肥。钾与碳水化合物的形成、积累和运转有关，可提高果实含糖量、降低含酸量，促进芳香物质和色素的形成，有利浆果成熟，同时对细胞壁加厚和提高细胞液浓度有良好的作用，从而促进枝蔓成熟，加强养分的贮藏和积累，提高抗病力和抗寒性。钾还对葡萄花芽的分化、根系发育有促进作用。钾在植物体内移动性良好，可再利用。葡萄有“钾质植物”之称，在生长结实过程中对钾的需求量相对较大，缺钾时，常引起碳水化合物和氮代谢紊乱，蛋白质合成受阻，植株抗病力降低；枝条中部叶片表现扭曲，以后叶缘和叶脉间失绿变干，并逐渐由边缘向中间焦枯，叶子变脆容易脱落；果实小、着色不良，成熟前容易落果，产量低、品质差。钾过量时可阻碍钙、镁、氮的吸收，果实易得生理病害(彩图11-1-2)。葡萄钾元素的补充以土壤施入为主，在增施有机肥的基础上，宜在花期前后和果实采收后施入适当化肥，可选用硫酸钾或含钾的果树专用肥料等。每亩施入20千克硫酸钾或相当钾素量的其他钾肥。钙元素参与细胞壁形成、调节光合作用，是一些酶的激活剂，具有重要的生理功能。钙在植物体内移动性差，缺钙时新梢嫩叶上形成褪绿斑，叶尖及叶缘向下卷曲，几天后褪绿部分变成暗褐色，并形成枯斑。缺钙可使浆果硬度下降，贮藏性变差等。葡萄缺钙常发生在酸度较高的土壤上，同时过多的钾、氮、镁供应也可以使植株出现缺钙症状。葡萄根系对钙的吸收主要集中在花期到转色期，吸收量占全年总量的60%。可增施有机肥，调节土壤pH值，土壤施入硝酸钙或氧化钙，控制钾肥施入量，调节葡萄树体钾/钙比例。根据叶柄营养分析，使钾/钙比在1.2～1.5为宜，如果高于此值，减少钾或增加钙。钙也可通过叶面喷肥加以补充，缺钙严重的果园，一般可于葡萄生长前期、幼果膨大期和采前1个月叶面喷布钙肥，如硝酸钙、氯化钙等，浓度以0.5%为宜。钙在葡萄体内移动性差，因此，以少量多次喷布效果为佳。硼能促进葡萄花粉管的萌发和生长，促进授粉受精，提高坐果率，减少无籽小果比率，提高产量，促进芳香物质的形成，提高含糖量，改善浆果品质。同时，硼可以促进新梢和花序的生长，使新梢成熟良好。葡萄缺硼时可抑制根尖和茎尖细胞分裂，生长受阻，表现为植株矮小，枝蔓节间变短，副梢生长弱；叶片小、增厚、发脆、皱缩、向外弯曲，叶缘出现失绿黄斑，叶柄短、粗。根短、粗，肿胀并形成结，可出现纵裂。硼元素对花粉管伸长具有重要作用，缺乏时可导致开花时花冠不脱落或落花严重，花序干缩、枯萎，坐果率低，无种子的小粒果实增加(彩图11-1-3)。硼的吸收与灌溉有关，干旱条件下不利于硼的吸收，另一方面，雨水过多或灌溉过量易造成硼离子淋失，尤其是对于沙滩地葡萄园，由此造成的缺硼现象较为严重。硼缺素症的防治可在增施有机肥、改善土壤结构、注意适时适量灌水的基础上，在花前1周进行叶面喷硼，可喷21%保倍硼2000倍液或0.3%硼酸(或硼砂)等，在幼果期可以增喷一次。在秋季叶面喷硼效果更佳，一是可以增加芽中硼元素含量，有利于消除早春缺硼症状，二是此时叶片耐性较强，可以适当增加喷施浓度而不易发生药害。在叶面喷肥的同时应注意土壤施硼，缺硼土壤施硼宜在秋季每年适量进行，每亩每年施入硼砂500克，效果好于间隔几年一次大量施入。土壤施入硼时应注意均匀，以防局部过量而导致不良效果。锌元素参与多种酶促反应和植物激素的合成，尤其是与植物生长素和叶绿素的形成有关。缺锌时植株生长异常，新梢顶部叶片狭小，呈小叶状，枝条纤细，节间短。叶片叶绿素含量低，叶脉间失绿黄化，呈花叶状。果粒发育不整齐，无籽小果多，果穗大小粒现象严重，果实产量、品质下降。锌在土壤中移动性很差，在植物体内，当锌充足时，可以从老组织向新组织移动，但当锌缺乏时，则很难移动(彩图11-1-4、彩图11-1-5)。葡萄树栽植在沙质土壤、高pH值土壤、含磷元素较多的土壤上，易发生缺锌现象。防治缺锌症可从增施有机肥等措施做起，补充树体锌元素最好的方法是叶面喷施。茎尖分析结果表明，补充锌的效果仅可持续20天，因此锌应用的最佳时期为盛花期前2周到坐果期。可应用锌钙氨基酸、硫酸锌等。另外，在剪口上涂抹150克/升硫酸锌溶液对缺锌株可以起到增加果穗重、增强新梢生长势和提高叶柄中锌元素水平的作用。落叶前使用锌肥，可以增加锌营养的贮藏，对于解决锌缺乏问题非常重要和显著；落叶前补锌，开始成为重要的补锌形式。铁元素是植物许多蛋白和酶的组成成分，参与光合作用和呼吸作用，是植物叶绿素的重要组成物质，同时参与体内一系列代谢活动。铁在植物体内不易移动，葡萄缺铁时首先表现的症状是幼叶失绿，叶片除叶脉保持绿色外，叶面黄化甚至白化，光合效率差，进一步出现新梢生长弱，花序黄化，花蕾脱落，坐果率低(彩图11-1-6)。葡萄缺铁常发生在冷湿条件下，此时铁离子在土壤中的移动性很差，不利于根系吸收。同时铁缺乏还常与土壤较高pH值有关，在此条件下铁离子常呈不为植物所利用形态。克服铁缺素症的措施应从土壤改良着手，增施有机肥，防止土壤盐碱化和过分黏重，促进土壤中铁转化为植物可利用形态。同时可采用叶面喷肥的方法对铁缺素症进行矫正，可在生长前期每7～10天喷一次螯合铁2000倍液或0.2%硫酸亚铁溶液。铁缺乏症的矫正通常需要多次进行才能收到良好效果。葡萄气灼病，亦称为缩果病，是与特殊气候条件有直接或间接关系的生理性病害，为水分生理失调和高温环境共同作用引起的，属于“生理性水分失调症”之一。气灼病为红地球葡萄常见病害之一，尤其是果实套袋后发生较多；在其他葡萄品种上，气灼病也时有发生，有些年份非常严重。气灼病发生严重时，病穗率可在80%以上，产量损失可达10%～30%。在我国1998年的宁夏葡萄产区(贺兰山东麓)、2001年山西省晋南葡萄产区均发生了大范围的且比较严重的气灼病，损失惨重。在葡萄生产中，有些地区的果农把气灼病误认做“日烧病”。严格的讲，两者在发生时期、为害症状等方面均存在明显不同，应区别对待。气灼病一般发生在幼果期，从落花后45天左右，至转色前均可发生，以幼果期至封穗期发生最为严重。首先表现为失水、凹陷、浅褐色小斑点，并迅速扩大为大面积病斑，整个过程基本上在2小时内完成。病斑面积一般占果粒面积的5%～30%，严重时一个果实上会有2～5个病斑，从而导致整个果粒干枯。病斑开始为浅黄褐色，而后颜色略变深并逐渐形成干疤(几个病斑的果实，整粒干枯形成“干果”)。病斑常发生在果粒近果梗的基部或果面的中上部，在果粒的侧面、底部也可发生(彩图11-2-1至彩图11-2-3)。发生部位与阳光直射无关，在叶幕下的背阴部位、果穗的背阴部及套袋果穗上均会发生。如土壤湿度大(水浸泡一段时间后)、遇雨水(在葡萄粒上有水珠)后，若忽然高温，在有水珠的部分易出现气灼病。气灼病是由于“生理性水分失调”造成的生理病害，与特殊气候、栽培管理条件密切相关。任何影响葡萄水分吸收、加大水分流失和蒸发的气候条件、田间操作，都会引起或加重气灼病的发生。一般情况下，连续阴雨后，土壤含水量长期处于饱和状态，天气转晴后的高温、闷热天气，易导致气灼病发生。这可能是由于根系被水长时间浸泡后功能降低，影响水分吸收；而高温需要蒸腾作用调节体温，需要比较多的水分，植株需水与供水发生矛盾，导致水分生理失调而发生气灼病。气灼病发生情况在品种间有差异，如红地球、龙眼、白牛奶等品种气灼病相对较易发生。葡萄套袋，尤其是套袋前大量疏果会引起或加重气灼病的发生。土壤通透性差(土壤黏重、长期被水浸泡)、土壤干旱、土壤有机质含量低，会引起或加重气灼病的发生。葡萄气灼病的防治，从根本上是保持水分的供求平衡。因此，防治气灼病要从保证根系吸收功能的正常发挥和水分的稳定供应入手。首先要培养健壮、发达的根系，可采用增施有机肥来提高土壤通透性、调整负载量、防治根系和地上部病虫害等措施，有利于根系呼吸和根系功能正常，避免或减轻气灼病。水分的供应，包括土壤水分供应和水分在葡萄体内的输导两个方面。在易发生气灼病的时期(大幼果期)，尤其是套袋前后，要保持充足的水分供应。水分供应一般注意两个问题：第一，土壤不能缺水，缺水后要注意浇水。滴灌是最好的浇水方法，如果大水漫灌，要注意灌溉时间，一般在18：00至早晨浇水，避免中午浇水。第二，保持水分。有机质含量丰富、覆盖草或秸秆等，都有利于土壤水分的保持，减少或避免气灼病。另一方面，主蔓、枝条、穗轴、果柄出现问题或病害，会影响水分的输导，引起或加重气灼病的发生。尤其是穗轴、果柄的病害，如霜霉、灰霉、白粉等病害，及镰刀菌、链格孢为害，均影响水分传导。所以，花前花后病虫害的防治，尤其是花序和果穗的病害防治非常重要。从近几年的调查看，病虫害规范防治的葡萄园，可有效避免或减少穗轴、果柄伤害，能减轻或避免气灼病的发生。协调地上部和地下部的平衡关系。如果根系弱，要减少地上部的枝、叶、果的量，保持地上部和地下部的协调一致，会减轻或避免气灼病。主要发生在浆果近成熟期，表现为果皮开裂。裂果不仅影响果实的外观，而且会导致外源微生物的侵染，发生腐烂(酸腐病)，严重降低果实的商品价值(彩图11-3-1)。葡萄裂果一般是由于水分吸收不平衡而导致的果皮破裂，其发生的根本原因是葡萄果实在较长时间的干旱条件下突然大量吸水，引起果实含水量急剧增加，使果实皮层细胞的体积大幅度增加，而果实表皮细胞膨大较慢造成果实内外生长失调而形成裂果。引起葡萄裂果的原因还有果穗的粒间过于紧凑，后期因果实膨大而互相挤压造成裂果；病虫的为害和机械损伤，使果皮受到一定的损害，进而降低了果皮抗内压的能力，从而导致裂果；药害造成的果皮伤害，导致果皮韧性减小等。因此，影响葡萄裂果的主要因素如下。（1）水分供求平衡问题。尤其是在持续高温久旱的情况下，突遇大雨或大水灌溉，造成土壤和空气湿度急剧变化，使果肉细胞迅速膨大，易造成裂果。（2）与土壤条件有关。一般在地势低洼、易板结、排水不良、通透性差、易旱易涝的黏土上易裂果；土层厚、土质疏松、通透性好的沙壤土上裂果轻。（3）与品种有关。一般乍娜、里扎马特、香妃等品种裂果严重，而京亚、红地球等品种不易发生裂果。（4）与果皮强度有关。果皮强度随着果实成熟急剧下降，同一果粒不同部位降低的幅度不同。如玫瑰露葡萄，果粒密集，接触部位果皮薄，果皮强度降低幅度大；巨峰着色期，果顶部出现小龟裂或从蒂部到果粒中部产生纹状凹陷，这些部位果皮强度低，易裂果。（5）与某些病虫害有关。白粉病为害后，果皮硬化失去弹性，硬核期后从果顶纵裂。红蜘蛛为害后，果面形成褐色锈斑，多为果蒂纵裂。（6）与栽培管理有关。一般树势弱、光照差、通风不良及施氮肥过多的果园裂果重。负载量大、叶果比小、着色延迟，易诱发裂果。（7）与农药使用有关。幼果期，尤其是落花后的45天以内，农药的品种或使用不当，造成果皮伤害，后期容易裂果；喷布乙烯利或赤霉素易造成裂果。在易发生裂果的地区首先选择不易裂果的品种；栽培措施中应着重保持果实发育后期水分的供求平衡与水分供应的稳定性，防止土壤水分急剧变化现象的发生；做好花果管理工作，通过疏穗、疏粒控制负载量和果粒着生状况；易裂果品种不使用乙烯利或赤霉素；落花后农药品种的科学选择和使用；加强病虫害防控工作，减少病虫为害导致的裂果现象发生。葡萄成熟的果穗中有时会出现许多小粒果实，多数小粒果实不着色，但也有部分小粒果亦可着色、成熟，一般小粒果实中没有种子，但小粒果没有商品价值(彩图11-4-1)。果穗中出现较多小粒果的现象称为果实大小粒，它不仅影响果穗整齐度，使外观品质下降，也对产量有较大影响。在果实第一次速长期时，由于部分果实停止生长，果实体积不再增大，从而形成大小粒现象。葡萄大小粒的形成主要与授粉受精不良和树体营养及生长势有关。良好的授粉受精可使葡萄果实在发育过程中成为生长中心，可调运营养，满足果实的迅速生长发育之需，如授粉受精不良，导致果实发育受阻而形成小果。葡萄前期如果生长势过于旺盛，营养生长过强，营养生长与生殖生长不平衡，花芽分化过程中性细胞分化不良，常加重果实大小粒现象的发生。生产上前期若施氮肥过多、营养元素供应不平衡尤其是锌元素的缺乏、供水过多、修剪不合理等，易导致果实出现大小粒现象。合理修剪，调节树势。对新梢摘心时间和强度及副梢处理方式务必考虑品种特性，因品种而异。平衡施肥，控制氮肥施用量，对缺锌植株及时补充锌肥(参见锌肥施用方法)。花前或花期使用硼肥，促进授粉受精。合理灌溉，花前控制水分供应，减少枝梢旺长。及时进行花、穗管理，如修整果穗、掐穗尖、疏果等。葡萄上的药害分两个方面：葡萄园使用的药剂选择不当或使用不当造成的药害；葡萄园周围农田使用药剂，药液飘移造成的药害(彩图11-5-1至彩图11-5-11)。(1)代森锰锌。代森锰锌是混配型、安全性比较好的杀菌剂，但原药杂质高或质量不高(悬浮率等)时，容易造成药害。所以，注意选择使用质量比较好的品牌，或在花前及套袋前不使用，在套袋后及采收后使用。使用代森锰锌的混配制剂，代森锰锌原药的质量直接决定混配制剂的质量；如果代森锰锌原药选择不当，其混配产品产生药害的风险增大。(2)百菌清。在某些品种上有药害，用百菌清混配的制剂存在相同的药害风险。(3)溴菌腈(炭特灵)。在果皮比较薄的品种上产生药害。(4)三唑类。所有三唑类杀菌剂在葡萄上使用，几乎都存在药害的风险。最严重的药害是抑制果实、新梢、叶片的生长。其次是造成叶片的早衰。当然，这类产品差异性很大，有些比较安全。同时，葡萄的品种多，有些药剂对某些品种安全，但对另一些品种就存在比较大的药害风险。比较安全的三唑类农药有苯醚甲环唑、戊唑醇等。(5)克菌丹(开普敦)。我国在葡萄上很少使用，但国外报道在葡萄果实上使用克菌丹存在严重的药害，请谨慎选择和使用或避开幼果期使用。(6)硫制剂使用不当会在果实和叶片上存在药害。药害的发生，与产品质量、温度有直接关系：分散性、悬浮率不好，容易造成药害；温度高于30℃，容易产生药害。所以，我国一般在葡萄发芽前后、落叶前等时期使用硫制剂。(7)退菌特在葡萄上使用不当有药害。(8)赤霉素使用过量会影响花芽形成，影响第二年的产量和质量。(9)细胞分裂素。细胞分裂素类的物质往往造成叶片畸形。(10)其他。国外报道了乙烯菌核利、硫丹、甲基砷酸铁铵钠盐(田安)、百草枯、草甘膦、敌草隆、麦草畏、西玛津等对葡萄的药害。因我国在葡萄园使用比较少，不作介绍。由于分田到户，每家葡萄园面积不大，周围被其他人的农田包围；如果其他农田使用药剂(尤其是除草剂)，药剂飘移到葡萄园，造成药害。这种情况在东北地区非常严重，已经成为危害葡萄生产的重大问题，造成乡亲、邻里之间的矛盾和对立，不但影响葡萄生产和葡萄质量，还影响社会和谐。葡萄采收后，需要经过贮藏运输才能到达消费者手中。鲜食葡萄贮运期，会受到病害的困扰；发生的病害也有多种，归纳起来有两类：一类是侵染性病害，另一类是生理性病害。贮藏期的侵染性病害主要由真菌引起，按照病原菌对温度的适应范围，又可分为两类。即适于常温、亚常温和较低温度的一类病害，为了便于区别另一类病害，我们给这一类病害起名为低温病害，这类病害发生较多的有以下几种。1.葡萄灰霉病由于灰霉菌在-0.5℃仍可生长，因此，它是葡萄低温贮藏中的主要病害，也是鲜食葡萄贮藏中具毁灭性的病害。葡萄对此病的抵抗力很弱，各品种葡萄皆易感染。灰霉病在葡萄种植园的为害也时有发生，易在被侵染部位形成黑色的菌核，这些菌核在干燥或不利的条件下长期存活。菌核在潮湿的条件下则萌发产生大量分生孢子，这些孢子能侵染幼芽、花和浆果。在贮藏期间，目前尚无有效药剂可在防治灰霉病腐烂和总的适用性方面超过SO2的性能和效果。2.葡萄青霉病葡萄青霉病是葡萄贮运期间一种较常见的病害。（1）病原。青霉属真菌（Penicillium spp.），属半知菌亚门，丝孢纲。有几个不同的种，其中指状青霉（P.digitatum Sacc.）是较常见的种。在PDA培养基上生长茂盛；菌落绒状，暗黄绿色，后变榄灰色，背面无色或淡暗褐色，有特殊的香味，分生孢子梗较短，直径4～5微米，帚状枝大而不规则；小梗在不同的高度上形成，尺度为（14～21）微米×（2.8～6.5）微米。(2)症状。初期病原菌在葡萄上形成2～8毫米水浸状圆形凹斑，果面皱缩，果实软化，组织腐烂并有一种霉味。受害的果实，组织稍带褐色，逐渐变软腐烂，果梗和果实表面常长出一层相当厚的霉层。霉层开始出现时呈白色，较稀薄，为病菌的分生孢子梗和分生孢子，当其大量形成时，霉层变为青绿色，较厚实。受害果实均有腐败的气味。在密闭的包装箱里，一旦出现病果，腐烂便会迅速地扩展，造成大量葡萄果实腐烂，甚至全箱腐烂，危害甚为严重。(3)发病规律。青霉菌是弱寄生性菌，发生侵染的部位通常是因为操作粗放、包装过紧或其他原因造成的果实伤口。病害的扩展主要与湿度有关，在包装箱内湿度高的条件下，病菌侵入果实后，可以很快地繁殖，并扩散到烂果接触的邻近果实上。青霉菌的发生还与葡萄种类、环境温度有关。在鲜食和制干葡萄生产区，如果温度太高，不利于病菌的繁殖和扩散，青霉病就发生的少；对于冷凉地区的酿酒葡萄品种来说，由于葡萄穗上的果粒紧密，较低的温度又有利于病菌的扩展，青霉病一般发生较为严重。(4)预防措施。参考葡萄灰霉病。青霉菌在低温0℃以下生长缓慢。在运输和贮藏期间可用SO2杀死或抑制青霉菌发展。精细采收与贮运，也是防止伤果、防止青霉菌为害所不可忽视的有效措施。3.葡萄黑斑病(1)病原。由真菌引起的病害。主要有多枝孢霉(Cladosporium herbarum)、交链孢霉(Alternaria alternata)和葡柄霉(Stemphylium)，是葡萄贮藏后期的重要病害。各品种葡萄都易发生此病，其中以欧洲种葡萄发病为重。(2)症状。初期发病果实上有不规则近圆形浅褐色斑，表面光滑干燥，后形成黑色或浅绿色霉层；多发生在穗梗、果梗基部及果粒侧面，并使果梗迅速失水、干缩、失绿，易侵入果刷而导致果实落粒。(3)发病规律。病菌主要由采前经田间侵入，在1～2℃的冷库中仍然能发病。枯死的花易被侵染并成为传播源，孢子借空气传播。即使在无雨的条件下，病菌也能直接侵入健康的成熟果实组织，在潮湿条件下，葡萄果实会大量发病。(4)预防措施。参考葡萄灰霉病、炭疽病的防治。上述这些病害的特点，在环境温度0～2℃下分生孢子可以萌发，菌丝还可以缓慢生长，低温下危害较大，是长期贮藏防治的对象。这类病害的病原菌需在5℃以上的温度，菌丝才能生长并开始为害。随着温度不断升高，为害不断增强，是长途运输期的主要防治对象。常见的这类病害如下。1.葡萄黑霉病(1)病原菌。黑根霉(Rhizopus nigricans)。病原菌不能在-0.5～0℃条件下生长。它是在高温运输、存放或土窖贮藏时常出现的病害。常见于马奶、无核白等葡萄早、中熟品种。(2)症状。发病初期菌丝侵入果实，先出现褐色水浸状斑，后果实流汁、软烂，果皮易脱落，病组织可迅速感染健康组织。发病果实上长出绒毛状灰色黑头菌层，故称黑霉。病菌子实体出现之前，症状类似青霉菌引起的腐烂。(3)发病规律。黑根霉是一种喜温的弱寄生菌，它主要通过果实表面的伤口侵入，因此，葡萄园管理和采收、包装操作粗放，容易为病菌侵入创造条件，高温高湿的环境条件特别利于病害的发生和发展。病菌生活在土壤或植物残体中，其孢子借空气传播。初侵染多从伤口进入，可迅速传播并侵染邻近的健康果实。(4)预防措施。参考葡萄灰霉病。降低贮藏温度，防止果实碰伤和用SO2防腐均有明显的防治效果。采后葡萄迅速预冷可大大降低因根霉菌引起的腐烂。2.葡萄曲霉腐烂病（1）病原。引起黑粉病的主要病原菌是黑曲霉（Aspergillus niger V.Tieghem），属半知菌亚门，丝孢纲。分生孢子穗灰黑色至炭黑色，圆形至放射状，直径0.3～1毫米；分生孢子梗尺度为（200～400）微米×（7～10）微米；顶囊球形或近球形，表面生小梗两层；分生孢子成熟时球形，初光滑，后变粗糙或有细刺，有色物质表面沉积成瘤状、条状或环状，直径2.5～4微米；有时产生菌核。(2)症状。黑粉病的主要特征是烂果表面产生大量的黑粉或紫黑粉状物，这是病菌的分生孢子梗和分生孢子，烂果常有一股潮湿的腐败气味。葡萄成熟时开始发生，到收获时，烂果常剩下一层干壳，用手轻碰整个腐烂的果穗，便会释放出尘埃状的孢子粉末。(3)发病规律。黑曲霉也是一种喜温好湿的弱寄生菌，21～38℃的高温最有利于黑曲霉的扩展。因而，此病常见于湿热地区。黑曲霉的侵染需要伤口和高湿度。病菌的分生孢子存在于各种基质和空气中，但只有果皮破裂或受损伤才会侵染。(4)预防措施。葡萄在采收、包装、运输、贮藏过程中，应尽力避免机械伤。为此，应轻拿轻放，防止挤压，避免二次装箱和倒箱。病害防治方法参考葡萄灰霉病。鲜食葡萄采后在贮运过程中，由于环境条件不适宜，引起生理代谢失调，发生的病变，均属于生理病害。生理病害按其病变的原因，分以下几种。1.症状SO2是葡萄常用的防腐保鲜剂，使用不当极易使葡萄中毒，果皮出现漂白色，以果蒂与果粒连接处周围的果面或在果皮有裂痕伤处最严重，中毒葡萄粒上产生许多黄白色凹陷的小斑，与健康组织界限清晰；严重时一穗上大多数果粒局部成片褪色，甚至整粒果实呈黄白色，有时整穗葡萄受害。2.发病规律鲜食葡萄冷藏指南的国际标准(ISO 2168—1974)中明确提出，“为了防止真菌繁殖，特别是灰霉菌的繁殖，可使用杀菌剂。目前通常用二氧化硫进行预处理”。但在生产实践中发现，如果二氧化硫使用不当，特别是采用直接注入二氧化硫或点燃硫磺产生二氧化硫熏蒸时，往往因用量不当，二氧化硫与空气混合不均匀等原因，使葡萄褪色或出现异味。伤害程度取决于进入果粒的二氧化硫量。葡萄对二氧化硫忍耐最弱处是浆果与果柄之间的连接处。如果果粒表面有伤口，则二氧化硫也很容易从伤口处进入。一般来讲，果实温度高的葡萄吸收二氧化硫比果实温度低的葡萄快；未成熟的葡萄吸收二氧化硫比成熟的快；薄皮品种比厚皮品种吸收快；果穗松散的比紧密的吸收二氧化硫快。破碎、损伤、潮湿及发霉的葡萄吸收二氧化硫比自然状态良好的葡萄迅速；果蒂部对二氧化硫比果粒更敏感。研究和生产实践都表明，葡萄不同品种对二氧化硫的耐受性存在较大差异。巨峰、龙眼、玫瑰香、泽香、秋黑等葡萄品种较耐二氧化硫，而红地球、木纳格、马奶等品种对二氧化硫敏感。因此，耐二氧化硫的品种和对二氧化硫敏感的品种，在保鲜剂的使用量和配置方面是不相同的。以下情况会加速SO2释放而引起漂白和加重SO2对果实的污染：果箱袋内严重结露湿度过大；果箱垛码过紧，果箱间温度差异大，贮藏前期(15天)果实温度高于0℃；冷库预冷不达标，冷库温度波动大；药剂投放量偏多或使用粉剂型且释放速度快的药剂；药剂扎眼数多或孔很大；果实质量差，引起裂果和呼吸强度大；果实伤害较多，引起呼吸强度升高。3.防治措施对葡萄采用点燃硫磺产生二氧化硫的方法处理时，应采用低浓度、分次处理的方法。对于不耐二氧化硫的品种，一要使用较低的浓度，并要先做剂量试验，以免造成较大的损失。研究指出，导致葡萄吸收5～18毫克/千克的二氧化硫熏蒸处理，足以控制灰霉病的发生，在连续作用条件下，空气中二氧化硫的浓度应保持在80～300毫克/千克，这样宽的浓度幅度在实际应用时就应充分考虑，根据不同品种和其他情况灵活掌握。如果采用亚硫酸盐缓释剂与葡萄一起放入保鲜袋，则果实封袋前对葡萄必须进行良好的预冷处理，必须把果实的温度在尽量短的时间内降到0℃后(正常年份巨峰葡萄的预冷时间一般不得超过12小时，红地球葡萄的预冷时间一般不超过24小时)，再扎紧袋口。贮藏期间保持-1～0℃的恒定低温，以保证袋内不结露和出现水汽，就可使二氧化硫的挥发缓慢均匀，减免二氧化硫伤害。必须注意不同的品种对二氧化硫的忍耐性相差很大，绝不能把贮藏巨峰、龙眼等葡萄的保鲜剂用量，用于不耐二氧化硫的红地球等品种上。根据运输距离决定是否使用保鲜剂；用于贮运的葡萄分别使用运输用保鲜剂和贮藏用保鲜剂，注意药剂种类、品种选择等以控制二次污染；注意SO2型防腐保鲜剂在箱内的均匀摆放与药剂释放量的调控。总之，不要采摘成熟不良或采前灌水的葡萄用于贮藏；对SO2较敏感的品种如里扎马特、牛奶、粉红葡萄、皇帝、无核白、红地球等，要通过增加预冷时间、降低贮藏温度、控制药剂用量和包装膜扎眼数量或者使用复合保鲜剂，适当减少SO2释放量；减少人为碰伤，一旦果皮破伤或果粒与果蒂间有肉眼看不见的轻微伤痕，都会导致SO2伤害而出现果粒局部漂白现象。另外，挤压伤也会引起褐变，压伤部位呈暗灰色或黑色，并因吸收SO2而被漂白。1.病状裂果是葡萄贮藏过程中最易发生的生理病害，多在果顶或梗附近发生果皮与果肉破开。2.发病原因及条件粉红葡萄、红马拉加、无核白、乍娜、里扎马特、美国黑大粒等品种易发生裂果。若采前灌水或成熟期多雨，即使果皮较厚的巨峰葡萄，在贮藏期间也会发生裂果，随贮藏期的延长而加重。此病应通过栽培措施加以控制。开裂的果实在贮藏过程中不但自身易腐烂和出现漂白斑点，而且裂果易造成“保鲜剂局部积累过多”，其余部分葡萄果实周围的“药劲不足”。3.防治措施采收前防止裂果，请参考生理性病害。在贮藏过程中要防止裂果，主要办法是：①降雨量大的年份，或者生长前期干旱后期降雨量大的年份应延迟采收并延长预冷时间。②采收前喷布100倍CT葡萄涂膜剂。③严禁有裂果的葡萄入库贮藏。④防止贮藏过程中保鲜袋内的结露。⑤采收及贮藏过程中要轻拿轻放，防止挤压、颠簸，包装容量不宜过大，应以单位重量5千克以下为宜。1.症状虽然略低于冰点的温度并不伤害果实，但可使果梗变成深绿色，呈水渍状态，贮藏时易受SO2侵害，出现浅褐色腐烂，最后造成果梗干缩变褐。果实受冻时可呈褐色、蔫软，或渗出果汁。冻害还导致霉菌侵染，引起霉变腐烂。2.发病原因及条件北方地区，晚熟、极晚熟品种会受各种因素影响而采收期推迟，常会在晚秋遇到早霜冻。冻害既可能发生在田间，也可能因冷库温度低于葡萄冰点引起冻害。在长城以北地区，极晚熟品种采收期极易遇早霜、轻霜，若持续时间不长，对果穗影响不大；经受重霜或霜冻危害的葡萄则不能用于贮藏。3.防治措施（1）采收期不宜过晚，应在早霜之前采收完毕。（2）贮藏过程中温度应严格控制在-0.5℃±0.5℃。（3）靠近冷风机附近的葡萄应加覆盖物。（4）及时观察库内的情况，一旦看到葡萄出现冻结情况应及时调控温度，如果冻结时间不很长，通过逐步升温可以缓解。1.症状葡萄果肉褐变在不同品种上的表现不同，红色品种褐变表现为果实色泽发暗，一些白色品种更易显现，如牛奶、无核白、意大利、白马拉加等欧洲种的脆肉型品种。这类品种在贮藏后期也易出现果肉内部褐变。一般是从维管束开始褐变向果肉扩展。2.发病原因及条件葡萄的褐变由多种因素引起，衰老也是褐变的一种表现，冻害或损伤也能引起果肉褐变。此外灰霉病等病菌的侵染，果实贮藏过程中气体不适也会引起果肉褐变。3.防治措施贮藏期应随时注意观察褐变的初始迹象，并及时出库销售。（1）贮藏温度过低，但未达到冰点，引起生理代谢失调，发生果皮、果梗及果穗褐变，属于冷害。（2）气调贮藏中，过低的O2（2%以下），过高的CO2（10%以上），产生的低O2和高CO2伤害。（3）贮藏温度过高，湿度过大，引起的大量脱粒；或采前使用催熟剂，发生脱粒。采前葡萄生育期的气候、栽培管理、病虫害防治、葡萄质量对采后各类微生物病害、生理病害均可产生影响(表11-1)。采前不利因素可能引起的贮藏病害花前多雨灰霉病菌侵入、潜伏，贮藏期发病霉烂果实成熟期多雨灰霉等病菌侵入、发病，贮藏期裂果、霉烂、SO2漂白果实熟期连续干旱裂果、干梗果实采前轻霜冻果梗SO2漂白、霉变黑梗产量过高或施氮过多裂果、SO2漂白、果穗内部腐烂花前花序拉长剂过量干梗果实熟期使用催熟、催红药脱粒、裂果后期感染霜霉病、白腐病、炭疽病干梗和果实腐烂采前灌水裂果、腐烂和SO2漂白表11-1 采前因素对葡萄贮藏病害的影响由于引起葡萄贮藏期果实腐烂的病原主要是一些由伤口侵染的弱寄生菌，其中有些是早期侵入后，由于寄主的抗性较强而潜伏于果实内，待果实成熟时才出现症状，引致腐烂；此外，多数是在高湿度和高温、不通风的贮藏条件下，有利于病害发展。因此，对这类病害的防治，应以做好早期的预防工作为主。1.采收前葡萄园应进行精细管理，通过修剪清除受伤和已发病的果实；使用一定浓度的赤霉素适当疏果，使果穗不要过于紧密，以防成熟前或成熟过程中，由于果粒膨大相互挤压造成果皮伤裂；在刚坐果和果实成熟时，应慎重用水，避免造成太大的田间湿度和在果实表面长时间留下自由水，而给病菌创造有利的侵染条件。此外，田间病虫害的防治，具有决定性作用。2.采收时采收时期过早，果实含糖量低、酸度高，会影响果实的品质和产量，采收过晚，有的品种易出现落粒现象，而且果实过熟往往不利于贮藏。因此，要根据品种的特性，市场的需要，选择相适宜的采收期。由于葡萄果实皮薄汁多，采收时，剪、拿、运、送等操作都要十分细致小心，尽量减少损伤，防止擦去果粉，采收的时间宜选择晴朗天气露水干后的上午或气温凉爽的傍晚，在露水未干的清晨、阴雨天，特别是雨后烈日暴晒的情况下不宜采收，不然会降低品质和不利于贮藏。3.采收后采收后应迅速将果实运送到阴凉处摊开散热，然后进行整修、分级包装。整修时应将所有病果、虫伤和机械损伤的果实剪除。装箱后要进行预冷，以消除田间带来的热气，及降低呼吸率，还可以预防果梗变干、变褐及果粒变软或落粒，利于延长贮存时间。贮藏前用二氧化硫熏蒸，不但能杀死果实表面各种可能引起果腐的病原菌，而且可以降低果实呼吸率，减少糖分的消耗，并能较长时间保持果色和保持果穗梗的新鲜状态。4.综合防治贮藏真菌病虫害防治的主要措施如下。(1)加强果园田间病害防治。(2)长期贮藏的葡萄可于采前对果穗喷一次杀菌剂。(3)采收时认真筛选栽培管理好的无病果园和挑选果穗，剔除病、虫、伤果。(4)轻拿、轻放、轻运，防止人为伤果。(5)迅速降低库温，保持温度稳定。(6)气调贮藏，选择适合不同品种的保鲜袋。(7)使用防腐保鲜剂。采后葡萄产品质量是葡萄贮藏病害防控的生命线。近年来我国葡萄质量虽有很大的进展，但与贮藏果品的质量要求还有差距。1.葡萄标准化栽培方面(1)整形修剪。葡萄果穗生长期间，可使用生长调节剂调控或进行整形修剪、疏花疏果，培育出适合的穗形和果粒。一般果穗在300～500克，大穗型在700～800克。亩产不超过1500～2000千克。(2)架式改良与机械化利用技术。通过架式以及栽培方式的改良，使得葡萄果实穗形、成熟度等各方面标准统一，既有利于采后葡萄果实外观以及品质质量，又方便机械化操作。(3)肥料使用技术。果穗生长期间，适量施用氮肥，适期多施有机肥和磷、钾肥。(4)节水灌溉技术。葡萄采前10～15天内停止灌溉，遇雨应推迟采收并及时排水。(5)病虫害综合防治技术。葡萄采前在田间病虫害的规范化防治，采前应喷1～2次食品添加剂级防腐保鲜剂。(6)植物生长调节剂安全使用技术。适量使用膨大剂和无核剂。严禁使用催熟、催红、催甜等激素。(7)葡萄栽培生产中，果实套袋管理。可调节果色，减少病虫污染和减少农药使用。(8)记录葡萄生产档案，建立质量追溯系统。控制葡萄源头的质量是确保物流中鲜食葡萄质量和安全的源头，建立质量可追溯系统，可实施产地标识，即在包装箱上清楚标记生产农户、产品名称、地点、产品标准、等级等，进行质量跟踪，提高安全意识。2.采收关键环节应在早晨露水干后或下午气温凉爽时采收，避免在雾天、雨天、烈日暴晒时采收。同一果园葡萄应多次采收。应选择果穗紧凑、穗形适宜，果粒均匀，且无病虫害的果实采收。人工采收应用圆头剪刀，一手握采果剪，一手提起主梗，贴近母枝处剪下，尽量带较长的主梗。轻采轻放，尽量避免机械伤害。采收同时，对果穗上的伤粒、病粒、虫粒、裂粒、日烧粒等进行剪除，并对果穗进行修整和挑选。落地果、残次果、腐烂果、沾泥果不能用于贮存。对田间经修整和挑选的葡萄，可直接放入贮藏容器或运输容器中，对未经修整和挑选的葡萄可放入采收容器中，运到包装间，进行修整和挑选处理。采收后，果实应放到阴凉处，或尽快运到包装间，避免日晒雨淋。果实随采、随运，采后田间停留不应超过2小时，应在6小时内进入预冷过程或冷藏环境。1.把好入贮质量关葡萄贮藏保鲜是葡萄生产的继续，提供代谢正常、田间带菌量低、质量好、耐贮藏、抗病强的葡萄入库贮藏，才能为产品长期贮藏获得良好的质量和效益奠定基础。要选择耐藏的优良品种。葡萄不同品种之间的耐藏性差异很大；一般情况晚熟品种比早熟、中熟品种耐贮藏，中熟品种比早熟品种耐贮藏。龙眼是北方常见的栽培品种，果实柔软多汁，味酸甜，果粉厚，果皮中厚，抗病，耐旱，耐贮运性很强；巨峰是各地主栽品种，果实味甜酸多汁，品质较好，果粒大，抗病力强，耐贮运性中上；玫瑰香属我国最早引入品种，果实含糖量高，味甜，有浓郁的玫瑰香味，鲜食品味极佳，果皮中厚且韧，耐藏性中等；牛奶品种肉质硬脆多汁，味甜无香味，品质上，皮薄，果粉薄，耐藏性中下；其他果皮厚韧，果面和穗轴含蜡质和含糖量高的晚熟优良品种：红提、秋黑、甲斐路、红宝石、红瑞宝耐藏性都较好；一些7月、8月份采收的莎巴珍珠、京亚、87-1、无核白鸡心等早熟品种，耐藏性差。2.库房消毒葡萄贮运设施(包括简易贮藏场所、通风库、机械冷藏库和运输车辆等)，是葡萄贮藏病害的主要初侵染源之一，对贮运设施进行清洁和消毒可有效地减少和杀灭贮运设施中的病原微生物，减少贮藏病害的发生。因而，在每次贮运产品前必须对贮运设施进行彻底清扫，地面、货架、塑料箱等应进行清洗，以达到洁净卫生。同时要对贮运设施、贮藏用具等进行消毒杀菌处理，常用的杀菌剂及使用方法如下。(1)高效库房消毒剂。CT高效库房消毒剂，为粉末状，具有杀菌谱广，杀菌效力强，对金属器械腐蚀性小等特点。使用时将袋内两小袋粉剂混合均匀，按每立方米5克的使用量点燃，密闭熏蒸4小时以上。(2)二氧化氯。该剂为无色无臭的透明液体，对细菌、真菌都有很强的杀灭和抑制作用。市售消毒用二氧化氯的浓度为2%。(3)过氧乙酸。是一种无色、透明、具有强烈氧化作用的广谱液体杀菌剂，对真菌、细菌、病毒都有良好的杀灭作用，分解后无残留，但腐蚀性较强。使用方法是，将市售的过氧乙酸消毒剂甲液和乙液混合后，加水配制成0.5%～0.7%的溶液，按每立方米空间500毫升的用量，倒入玻璃或陶瓷器皿中，分多点放置在冷库中，或直接在库内喷洒(注意保护操作人员的皮肤眼睛等，也不能将药液喷洒在金属表面)，密闭熏蒸。（4）高锰酸钾和甲醛的混合液（福尔马林含40%甲醛，使用时要折算成甲醛）。按1：1的重量比将高锰酸甲加入甲醛液体中，使用量为每百立方米1千克，操作时要注意安全，迅速撤离，密闭库房48小时以上。此法适用于污染较重的老库。(5)漂白粉溶液。贮运设施消毒常用4%的漂白粉溶液喷洒，在葡萄贮藏期间结合加湿，也可喷洒漂白粉溶液。3.温度、湿度、气体的控制在葡萄贮运保鲜过程中，温度、湿度、气体成分的控制与防腐保鲜剂的使用，是保持产品质量和延长贮运期限的四个必不可少的技术措施。葡萄贮藏的适宜低温为-1～0℃，适宜的低温在葡萄贮运保鲜的所有措施中可占60%～70%甚至更高的效应，这是因为低温能明显地降低葡萄的呼吸强度，延缓生理代谢过程，减少营养物质的消耗，提高葡萄对病菌侵染的抵抗力；低温对病菌孢子的萌发、生长和致病力有明显的抑制作用。葡萄保鲜的目的，从一个角度来理解，可认为是“保水”，水分散失较多，鲜度就会降低较多，通常当葡萄的水分散失量超过5%时，就会表现出明显的萎蔫皱缩，因此，葡萄贮运期间要求较高的相对湿度，一般应保持在90%～95%。气体调节可延缓葡萄的衰老，特别是葡萄果梗的衰老，并对病菌孢子的萌发、生长和致病力也有明显的抑制作用，将CO2控制在5%～8%尤为重要。葡萄在没有保鲜剂使用的情况下即使对温度、湿度和气体成分进行严格的控制，在不太长的贮藏期内其腐烂程度仍然是相当严重的，防腐保鲜剂的使用结合温度、湿度和气体成分的控制，才能对葡萄进行较长期的贮运保鲜，一般使用可控释放SO2的亚硫酸盐作为葡萄的保鲜剂。(1)冷藏。温度是一切水果和蔬菜贮藏的基础条件，一般说来，葡萄的最佳贮藏温度为0～10℃。葡萄粒的冰点为-3.7～-2℃，这种冰点差异主要来自于品种、成熟度以及果实的含糖量。如晚采的龙眼葡萄，含糖量达到15%以上时，其冰点为-3.5℃，这种葡萄即使贮藏在-3℃温度下，葡萄粒也不会遭受冻害。但当温度低于-1℃以下时，便会造成果梗和穗梗不同程度的冻害(果梗的冰点在-1.1℃，穗梗的冰点在-1.3～1.1℃)。所以，鲜食葡萄长期贮藏中，温度不宜过低，应在-1～0℃。但温度又不可过高，当贮藏温度长期在1℃以上时，便会加大病害的危害程度，腐烂率增高。这里简单介绍不同处理阶段的温度参数：①冷藏温度：-1～0℃。②变温贮藏：-1～10℃(不超过20天)。③预冷温度：1～3℃(12～18小时)。不同的品种适于冷藏或变温贮藏均有明显差异，以巨峰和龙眼两个品种为例，巨峰葡萄极适于冷藏，果实采后立即预冷(1～3℃)，将其贮藏在-1～0℃的条件下，效果较好。而龙眼葡萄则以变温贮藏效果最佳。鲜食葡萄贮运中的适宜相对湿度为90%～95%。(2)气调贮藏。应用气调进行鲜食葡萄的保鲜，虽然国外在生产上并未大量应用，而我国传统的贮藏方法中早已应用。民间采用的沙(土)埋、糠藏、囤藏以及后来的缸藏，均为气调贮藏的一种方式。目前，采用PVC或PE塑料小包装进行冷藏和变温贮藏，也是一种简易气调贮藏技术。试验证明，气调贮藏不但能保持果实水分和熏蒸防腐，更重要的是改变贮藏环境中的气体成分，抑制果实的呼吸强度，达到果实保鲜和果梗保绿，并防止果实脱粒。鲜食葡萄贮藏中的气体成分，不同品种之间虽然有一定的差异，但并不十分明显，大体趋势为：通常鲜食葡萄在气调贮藏过程中，对低氧和高二氧化碳是不敏感的，但过高的二氧化碳和过低的氧也会产生伤害。伤害的初期症状表现为，产生刺鼻的乙醇味，继而出现果皮褐变，果梗及穗梗发生浅褐色的病变。4.防腐保鲜葡萄柔软多汁，贮藏期内很易发生青霉病、灰霉病和褐腐病。在-1℃低温下仍可使病害传染，造成腐烂变质。多年贮藏实践总结的经验是葡萄贮藏必须配合使用防腐措施。(1)硫黄熏蒸。土窖和通风库入贮前，需每立方米用10～15克硫黄，窖内布点燃烧密闭熏蒸杀菌一昼夜，然后通风换气。采用装筐(箱)不封袋，或在窖内堆摆，或吊挂方法贮藏葡萄，入窖后按每立方米4克硫黄量熏蒸，前一个月10天熏1次，以后每月熏1次，用量为每立方米2克硫黄，开春3—4月，再增加到每立方米4克。(2)二氧化硫熏蒸。熏蒸应分次进行，首次可用0.5%的二氧化硫熏蒸20分钟，必须使二氧化硫迅速而均匀地达到每箱的每个果穗中，以确保防效而不致引起病害。再次熏蒸时，二氧化硫浓度用0.1%熏蒸30分钟。这种处理大约每隔7～10天进行一次。葡萄贮藏期用二氧化硫消毒，除了熏蒸法以外，还有其他多种处理方法，可参考其他的有关资料。(3)防腐保鲜片。采用衬薄塑料袋装箱，冷库堆垛的可在入库敞口预冷后或在田间按每千克葡萄加4片CT-保鲜片(每小袋2片，用大头针在小袋两层膜上扎2个透眼)。5.包装包装分为预包装、短期冷藏及运输包装和长期冷藏包装。预包装包括用软绵纸单穗包裹、用纸袋或用果实套袋单穗包装、用开孔塑料或塑料与纸做成的T-形袋、圆底袋或方形袋单穗包装。也有以300～500克装入塑料盒、塑料盘、纸盘和泡沫塑料盘，再用自粘膜或收缩膜进行裹包。短期冷藏及运输包装一般装入5～10千克。包括不衬塑料膜(袋)箱装和塑料膜(袋)衬里箱装。不衬塑料膜(袋)箱装是把无预包装或经预包装的葡萄单层放入瓦楞纸箱、塑料箱(筐)、泡沫塑料箱或木箱；塑料膜(袋)衬里箱装是用0.02～0.03毫米厚有孔或无孔塑料膜(袋)展开，衬放瓦楞纸箱、塑料箱(筐)、泡沫塑料箱或木箱后，再把无预包装或经预包装的葡萄单层放入。两者最后要进行托盘包装，也就是将葡萄包装箱摆放在托盘上，用拉伸(收缩)塑料膜或塑料网缠绕包裹。长期冷藏包装包括不衬塑料膜(袋)箱装和塑料膜(袋)衬里箱装。不衬塑料膜(袋)箱装是把无预包装的葡萄，单层直接放入瓦楞纸箱、塑料箱(筐)、泡沫塑料箱或木箱；塑料膜(袋)衬里箱装是用0.02～0.03毫米厚塑料膜(袋)展开，衬放瓦楞纸箱、塑料箱(筐)、泡沫塑料箱或木箱，再把无预包装的葡萄单层放入。

灰霉病（gray mold）是番茄生产中一种重要的气传病害，其病原为灰葡萄孢属（Botrytis cinerea）真菌，寄主范围广，再侵染频繁，为害严重。化学防治仍是目前生产中防控该病害的主要手段，其中以甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂为代表的呼吸作用抑制剂近年来在灰霉病防治实践中显现出了良好的防效，而线粒体作为真核细胞呼吸作用的主要场所，在线粒体上合成的ATP提供了细胞生命活动所需的大部分能量。为此，进行高纯度线粒体的分离对于开展呼吸抑制剂类杀菌剂的作用机制研究[1～5]具有十分重要的意义。至今，从病原真菌中分离获得高纯度线粒体的方法尚不成熟，国内外一般采用从动物或高等植物中分离得到的线粒体作为替代品来进行研究。本研究拟借鉴相关研究[6～7]方法，采用机械破壁及差速离心的方法从番茄灰霉病菌中分离获得线粒体，并对其进行呼吸测定，以确证获得的线粒体是否具备完整的结构和功能。现将研究结果报道如下。1.1.1 番茄灰霉病菌（B.cinerea）菌株NJ-9，由中国农业大学植物病理学系种子病理学和杀菌剂药理学实验室提供。1.1.2 供试药剂 α-酮戊二酸，NADHNa2（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二钠盐）为Roche公司产品，ADPNa2（5′-腺苷二磷酸二钠盐）为Sigma公司产品。线粒体分离液的配制[9]：0.5mol/L 蔗糖，5mmol/L半胱氨酸，1mmol/L 乙二胺四乙酸二钠盐，0.3%（w/v）牛血清白蛋白Ⅴ组分，0.1mol/L（pH值7.4）磷酸盐缓冲液；线粒体保持液（洗液）的配制[9]：0.5mol/L 蔗糖，1mmol/L 乙二胺四乙酸二钠盐，0.3%（w/v）牛血清白蛋白Ⅴ组分，0.1mol/L（pH 7.4）的磷酸盐缓冲液；线粒体呼吸测定的反应液[9]：0.5mol/L 蔗糖，10mmol/L KCl，5mmol/L MgCl2，1mmol/L 乙二胺四乙酸二钠盐，0.1%（w/v）牛血清白蛋白Ⅴ组分，0.01mol/L（pH 7.2）的磷酸盐缓冲液。1.1.3 菌体的培养 将浓度为8×106个/ml的孢子悬浮液接种到1L的复合盐液体培养基（SSY）[9]（10g可溶性淀粉，2g KH2PO4，1.5g K2HPO4，0.5g MgSO·7H2O4，1g（NH4）2SO4，2g 酵母粉，1L去离子水，pH 6.2）中，置于23℃，150rpm条件下摇培24h。1.1.4 供试仪器 Oxytherm氧电极（Hansatech Instruments Ltd.），DHZ-D冷冻恒温振荡器（江苏太仓实验设备厂），高速低温离心机（Beckman Coulter AvantiR J-E）。1.2.1 灰霉病菌孢子的获得 将菌株NJ-9接种至MEA（麦芽糖20g，酵母粉5g，琼脂粉14g，1L去离子水）培养基上，25℃下黑暗培养5～7 天后，放置于日光灯和长波长紫外灯（黑光灯）下，12h轮流交替照射7～14天，产生大量的分生孢子，备用[8]。1.2.2 线粒体的分离 通过真空抽滤的方法收集幼嫩菌丝，依次用4℃的去离子水冲洗两次，再用线粒体分离液冲洗。随后各操作中所用的器材必须在4℃下经过预冷处理，操作过程均需在0～4℃下进行。将用线粒体分离液预洗得到的菌丝悬浮在3倍体积的分离液中，分别采用以下两种方式进行破碎细胞壁：（1）杵状玻璃匀浆器法：每30～40g菌丝用100ml的分离液悬浮，用杵摩擦20次左右，混合到匀浆物均一、平滑即可。每次时间不要超过2～3min，整个样品处理的时间不要超过30min。立即将得到的匀浆物倒入50ml的离心管中，于2000g离心25min，取上清液于7000g转速下离心20min后取上清液于12000g再次离心15min，最后小心弃去上清，沉淀即为分离到的线粒体，外观为浅黄色胶状物。将线粒体悬浮在200μl的线粒体保持液中，置于冰上备用，放置时间不能超过3～4h，避免线粒体的降解。（2）高速组织匀浆器法：采用高速组织匀浆机（恒定功率220W），破碎菌丝，每次破碎时间15s，破碎3次，中间的隔1min（防止匀将机刀口发热影响线粒体的分离，将匀浆物用双层预冷的湿纱布快速过滤，过滤的时间不要超过30s，立即将匀浆物倒入50ml的离心管中，于1200g下离心20min；取上清于6000g离心20min后再取上清于12000g离心15min，小心弃去上清，沉淀即为分离到的线粒体。1.2.3 氧消耗量的测定 采用极谱法在25℃条件下使用Oxytherm氧电极进行测定，标准反应液2ml，加入线粒体50μl（蛋白质的含量大约为0.3mg），反应液中氧饱和的最大浓度是226μmol/L，所有的底物都溶解到反应液中，依据Estabrook[10]的方法计算RCR和P/O值。提取过程保持0～4℃低温条件下，杵状玻璃匀浆、高速组织匀浆两种破壁方法均可从番茄灰霉病菌幼嫩的菌丝中分离得到紧密偶联的线粒体。全玻璃杵状匀浆器手工破壁操作耗费人力，需要的菌丝量较少，从10g到几十克湿重菌丝都能分离到完整的线粒体。通常60～80g湿重菌丝即可以分离得到满足试验需要的线粒体。高速匀浆器省力快速，但是在匀浆器高速转动时易产热可导致分离物的降解，操作过程中持续时间不能过长，必要时应使用循环冷却水降温或置于低温环境下操作；同时该法需要的菌丝量也较多，以50g 以上的湿重菌丝为宜，菌丝量少时容易在破碎过程中使线粒体结构受到破坏，从而影响提取效果。番茄灰霉病菌线粒体的底物利用，呼吸控制率和磷氧值测定结果见表1。当以外源的NADH和α-酮戊二酸作底物被氧化时，状态3（在线粒体中加入底物及ADP后测定的线粒体呼吸速率）的呼吸数率明显增加，反映了在ADP刺激下线粒体功能增强的程度；两种底物的呼吸控制率（RCR）值都在3.1～3.3之间，高的呼吸控制率值表明线粒体中电子传递与氧化磷酸化紧密偶联；加入NADH做外源的呼吸底物时，磷氧比值（P/O）是1.3～1.7，表明有2个氧化磷酸化位点，即ATP生成有两个部位；α-酮戊二酸的磷氧比值（P/O）是2.2～2.5，表明有3个氧化磷酸化位点，即ATP生成有3个部位。图1表示两种破壁方法获得线粒体在外援NADH电子供体下呼吸特征图。以上研究结果表明分离的高纯度线粒体具有在活细胞中对等的生物功能，可作为线粒体生物学研究的适宜材料。MethodsofdisruptionSubstratesState3respirationrates(nmolO2/min)(mgprotein)Respiratorycontrolrations(RCR)ADP/OrationsAll-glassNADH90.16±203.8±0.11.7±0.2Potter-Elvehjemhomogenizerα-ketoglutarate175.43±453.3±0.62.2±0.1AwaringNADH118.96±303.5±0.71.3±0.1blendorα-ketoglutarate198.17±653.1±0.52.5±0.2Table 1 Respiration properties of mitochondrial isolated from mycelia of Botrytis cinereaaFigure 1 oxidation of NADH and α-ketoglutarate by mitochondrial isolated from mycelial of B.cinerea, Concentration of substrates were 10mmol/L α-ketoglutarate,2mmol/L NADHNa2, the ADP concentration was 200μmol/L and reaction were carried with 0.2~0.4mg mitochondrial protein本研究获得以下结论：（1）采用杵状玻璃匀浆器和高速组织匀浆机两种机械力可以有效破碎番茄灰霉病菌的细胞壁，借助梯度离心可以实现番茄灰霉病菌线粒体的有效分离；（2）使用本方法获得的番茄灰霉病菌线粒体结构完整、功能齐备，具有在活细胞中对等的生物功能，可作为线粒体生物学研究的适宜材料。（3）B.cinerea在培养液中生长很缓慢，选取生长代谢最旺盛的菌丝，有利于线粒体的分离。目前常用的破碎细胞方法包括传统的机械法（如匀浆、研磨、压榨、研磨、超声等）和非机械法（包括酶溶、冻融、化学等），都有其适用范围和优缺点，选择的原则是该方法不影响目标蛋白和产物的结构和功能。本文除采用上述两种机械破壁方法外，也曾尝试过超声波破壁方法以及采用蜗牛酶和纤维素酶进行酶解处理以获得原生质体的方法，但均没有获得理想的结果，推测可能与真菌细胞壁较厚，或使用的降解酶的降解特点有关。有关线粒体生物学和呼吸动力学的研究报道[9]表明，RCR 比ADP/O比值更能反映线粒体功能的完整性和氧化磷酸化的效率，ADP/O值是指线粒体每吸收一克原子氧的同时，生成ATP 的克分子数的比值，它反映线粒体的能量转化效率。RCR是表征线粒体结构、功能完整性及氧化磷酸化效率的指标。本文研究表明外源的NADH仅有2个氧化磷酸化位点，即只能生成2个ATP，然而，有文献报道[11]灰霉病菌的线粒体在氧化NADH的电子传递链中有3个磷酸化位点。因此，需要进一步研究不同的呼吸抑制剂和氧化磷酸化抑制剂在灰霉菌线粒体的电子传递链的各种抑制效果。

1.利用柑橘溃疡病菌细胞悬浮液免疫BALB/c小鼠，免疫后小鼠抗血清效价为2500倍左右。提取小鼠脾细胞mRNA，构建的单链抗体文库重链DNA大小为350bp左右，轻链为650bp左右，经linker（Gly3Ser）4连接后单链抗体DNA大小为1.2kb左右。将单链抗体文库DNA克隆到大肠杆菌JM109中，随机挑选了9个克隆子测序表明，9条单链抗体序列都是开放阅读框，其重链分别属于VH1、VH2、VH3基因家簇，轻链属于VKⅠ、VKⅢ、VKⅣ亚基因家簇。每个单链抗体的互补决定区（CDRs）都为不同的CDR，其中氨基酸序列变化多样，说明构建的单链抗体文库多样性好，适合于进一步进行单链抗体的筛选。2.采用核糖体展示技术对构建单链抗体文库进行了进化和富集。结果显示第一轮核糖体展示后回收的mRNA量非常少，分光光度计已测不出其浓度，反转录RCR后，扩增得到的条带非常弱，说明在原始未筛选的抗体文库中，能与柑橘溃疡病菌O-特异性脂多糖作用的单链抗体数量较少。经过三轮筛选后，得到的mRNA量逐渐增多，经RT-PCR后，产生了比较亮的扩增条带。说明在核糖体展示过程中，抗原阳性的单链抗体得到了富集。3.将未经过核糖体展示的原始单链抗体文库DNA和经过三轮展示的单链抗体文库DNA与噬菌体表达载体pCANTAB5E相连接后，转入大肠杆菌TG1中小量表达，表达后用间接ELISA测定单链抗体与抗原的结合活性。结果表明：从未经过筛选的原始单链抗体文库中随机挑取的60个克隆子表达产物与柑橘溃疡病菌O-特异性脂多糖几乎没有结合能力；而从经过三轮展示后的单链抗体文库中挑取的60个克隆子中有30%与柑橘溃疡病菌O-特异性脂多糖有较好的结合能力。从三轮展示后的单链抗体文库中共挑取了180个克隆子，用间接ELISA法初筛到60株抗原阳性的单链抗体；然后用生物分子相互作用技术（biosensor，biacore）对筛选的抗原阳性的单链抗体进行了复筛，筛选了3株高亲和力的单链抗体（GX13、GX44和GX95）以用于下一步的表达鉴定。4.将筛选的高亲和力抗原阳性的克隆子从大肠杆菌TG1中转入高表达菌株HB2151中进行可溶性表达。单链抗体表达后，其表达产物主要集中于细胞周质提取物中，具有抗体活性。将浓缩的周质提取物进行SDS-PAGE电泳，显示在32 kDa处有一蛋白条带产生。将表达产物纯化后进行SDS-PAGE电泳显示，在32 kDa处有单一蛋白条带产生。为了进一步验证表达的蛋白即目的蛋白，将表达产物进行了Western blot 杂交，结果显示，与纯化后的电泳结果一致，在32 kDa处有单一的条带产生，说明表达纯化的蛋白即目的蛋白。5.将筛选的抗原阳性单链抗体进行了特性研究。单链抗体（GX95、GX44、GX13）特异性强、亲和力高。其与柑橘溃疡病菌近源种Xanthomonas oryzae pv.oryzae（Xooc）；Xanthomonas campestris pv.campestri（Xcc）；Xanthomonas oryzae pv.oryzicola（Xoc）；及从柑橘叶片上分离的10种腐生黄单孢菌及Bacillus subtilis；E.coli 都没有交叉反应。Biacore 分析其亲和力表明，单链抗体GX95、GX44和GX13的亲和常数分别为1.98×1010 M-1、1.89×1010 M-1、3.43×1010 M-1。6.对筛选的单链抗体进行了测序。用DNAplot 软件分析单链抗体序列。结果表明：单链抗体 GX44 和GX13重链分别属于VH1基因家簇，GX95 重链属于VH3基因家簇；GX44和GX13轻链属于Vk IV亚基因家簇，GX95轻链属于Vk III亚基因家簇。用Vector NTI软件对筛选的单链抗体的序列同源性进行了分析，表明GX44 和GX13重链有89.67%的同源性，GX95和GX13具有92.53%的同源性。

甜瓜为一年生草本植物，按其生态形分为薄皮甜瓜和厚皮甜瓜。济宁市种植薄皮甜瓜具有悠久的历史，但大面积集中栽培还是在近些年随着农业产业结构的调整而发展，目前仅在任城区、金乡县、鱼台县西部、嘉祥县南部保护地种植面积就达5万余亩，成为山东省最大的薄皮甜瓜种植基地。随着种植时间的延长和种植面积的不断扩大，甜瓜病害不断加重，特别是苗期病害，由于甜瓜多采用大棚育苗，育苗时间一般在1月下旬，常常遭遇低温，棚内温湿度不宜控制，病害容易发生，经常因防治不当，苗床大量死苗或移栽后造成大量死亡，若控制不力，将会对甜瓜的发展带来严重危害。几年来笔者针对为害较大的甜瓜苗期病害的发生及防治进行了试验研究，目的在于了解、掌握该类病害的发病特点和防治方法，进行经济有效的防治。已有国内外学者对该类病害进行了研究，特别是对露地栽培条件下的发生与防治研究较多[1～4]，而对保护地苗床期的发病特点和防治方法却少见报道。1.1.1 症状 发病初期，出土幼苗茎基部出现水烫状病斑，继而病斑逐渐加深为淡黄褐色，同时绕茎扩展，病部缢缩呈细线状，幼苗因失去支撑而折倒，刚折倒的病苗子叶短期内仍为绿色。发病严重时，种子未萌发或刚发芽时，即受病菌侵害，造成烂种、烂芽。湿度大时，成片幼苗猝倒，在病苗或病芽附近常密生白色棉絮状菌丝。1.1.2 病原菌 该病原菌为真菌Pythium aphanidermatum（Eds.）Fitsp.属鞭毛菌亚门，为瓜果腐霉菌。此外，甜瓜疫霉（P.melonis Katsura）和辣椒疫霉（Phytophthora capsici Leonian）等也可引起蔬菜幼苗猝倒病。1.1.3 传播途径和发病条件 病菌以菌丝体、卵孢子等随病残体在土壤中越冬，并可长期存活。遇有适宜条件，卵孢子萌发产生孢子囊，以游动孢子或直接长出芽管侵入寄主。田间病菌主要随水的移动、飞溅等进行传播蔓延。湿度大时，病苗上产生孢子囊和流动孢子，进行重复传染。低温高湿是猝倒病发生的必要条件。这是因为低温高湿不利于幼苗生长，但病菌仍能活动。一般猝倒病适宜地温为10℃左右。所以猝倒病多发生在早春育苗床上，尤其当幼苗期遇连阴天，光照不足，出现低温高湿环境，极易发生猝倒病。有的苗床开始发病时，是从棚顶滴水处的个别幼苗上先表现病症，几天后以此为中心，向周围蔓延扩展。该病也是甜瓜苗期的一种重要病害。据笔者几年调查，新苗床30%以上，老苗床50%以上可发现该病害。特别是老苗床，如不注意温湿度管理和及时防治，整个苗床可在几天基本死光，为害很大。是所有甜瓜种植区均能形成为害的一种病害。1.2.1 症状 刚出土的幼苗即可受害，以中后期发病为多。发病初期，病苗茎基部变褐，产生椭圆形病斑，叶片白天萎蔫，早晚尚可恢复。随病情发展，病斑渐凹陷、扩大，绕茎一周，叶片萎蔫不能复原，最后病部收缩干枯，病苗枯萎死亡。但病苗不呈猝倒状，病部有同心轮纹及淡褐色蛛网状菌丝。这一特点是本病与猝倒病相区别的主要特征。1.2.2 病原菌 该病原菌为真菌Rhizoctonia solani Kuhn.属半知菌亚门，为立枯丝核菌。该菌不产生孢子，主要以菌丝传播和繁殖。菌丝从无色变为黄褐色。病菌可产生菌核，菌核近球形或无定形，无色、浅褐色至黑褐色。有性阶段Pellicularia filamentosa（Pat.）Rogers.为丝核薄膜革菌。1.2.3 传播途径和发病条件 病菌以菌丝体和菌核在土中越冬，能存活2～3年。菌丝能直接侵入寄主，通过水流及带菌的堆肥传播为害。病菌生长适温为24℃。播种过密，间苗不及时，温度过高，易诱发此病。1.3.1 症状 该病害为一种生理性病害。幼苗出土后不长新根或不定根，幼根表面开始为锈褐色，尔后腐烂。沤根后地上部子叶或真叶呈黄绿或乳黄色，叶缘开始枯焦，严重的整叶皱缩枯焦，生长极为缓慢。在子叶期出现沤根，子叶即枯焦。在真叶期发生沤根，真叶就会出现枯焦。1.3.2 病因及发生条件 主要是苗床地温12℃以下持续时间较长，地势低洼、土壤黏重加之浇水过量或遇阴雨天气，苗床地温过低，致使幼苗根部呼吸作用减弱，活性降低。如此持续时间较长就会发生沤根。甜瓜育苗应选择土壤松而不散、黏而不硬、通气透水性良好、保肥保水力强的壤土新地或轮作3～5年的无病地育苗，大棚苗床必须选用无病土育苗。如用连作地或病地土壤，则苗床需深翻或用药剂消毒，常用50%福美双可湿性粉剂与40%五氯硝基苯粉剂消毒，或50%多菌灵可湿性粉剂，每平方米苗床8～10g，与20～30kg细干土拌匀成药土，待苗床所浇底水渗下后，取1/3药土作垫土铺底，种子播下后再将其余2/3药土覆在种子上，播后保持床面湿润；或将以上药土制成营养钵，再播种育苗。应用该方法进行防治，两年平均防治效果达到88.63%，实践证明这是一种经济有效的防治方法，可以兼治甜瓜猝倒病和甜瓜立枯病。加强苗床管理应以促进幼苗健壮生长，提高地温、降低苗床湿度为中心。为给幼苗创造良好生长条件，增强抗病能力，育苗前选用土质肥沃，不积水的苗床，施足优质腐熟有机肥，采用营养土育苗；提供使用无土育苗基质进行育苗。播种前浇足底水，出苗后尽量不浇水或少浇水，播种要均匀，密度不宜过大，防止床土过湿。出苗后，如果后，如果苗床出现过湿情况，可用小锄划锄或撒施干草木灰，以降低湿度；早春采用大棚育苗，必须做好增温保温工作。为了有效增加苗床温度，可结合实际情况，选用地热线育苗或火坑育苗，以缩短苗期时间。苗床还要尽量多地增加光照，并且苗床的通风、降湿，尤其在连续阴天、光照不足时更要抓住时机通风降湿；苗床要早分苗，使苗健壮，提高抗病力。出苗后如有少量病苗时应立即挖除，移出苗床处理，并选择下列杀菌剂在病苗及全苗床喷雾防治：以猝倒病为主时使用72.2%普力克水剂400～600倍液，72%克露可湿性粉剂500～600倍液，70%百得富可湿性粉剂600倍液，64%杀毒矾可湿性粉剂500倍液，50%多菌灵悬浮剂500倍液，75%百菌清可湿性粉剂600倍液；以立枯病为主时使用20%甲基立枯磷乳油800倍液，70%甲基托布津800倍液，70%敌克松原粉1000倍液，50%福美双可湿性粉剂500倍液，64%杀毒矾可湿性粉剂500倍液，50%多菌灵悬浮剂500倍液，75%百菌清可湿性粉剂600倍液，每平方米苗床喷淋药液2～3L，视病情发展情况，间隔7～10天再喷一次；在瓜苗移栽定植前选择广谱性杀菌剂如百菌清、杀毒矾、代森锰锌、多菌灵等再喷雾一次，带药移栽定植。选用土壤疏松，透气、透水性好的田园土，施足优质腐熟有机肥或生物肥，采用营养土育苗，提倡使用无土育苗基质进行育苗，播种前浇足底水，出苗后尽量不浇水或少浇水，播种密度不宜过大，出苗后如果出现苗床过湿，可采用小锄划锄或撒施干草木灰，以降低湿度，白天温度控制在20～25℃，夜间15℃，最低应在12℃以上，如果苗床出现沤根，应立即控制浇水，采取各种降湿升温措施。除划锄或撒施干草木灰以外，还可用生石灰降湿除潮。方法是：选新烧制的生石灰，分散放入苗床小拱棚内，充分吸潮后，进行更换，但注意生石灰不能与瓜苗直接接触。

柑橘砧木种类很多，在砧木的选用上，应就地取材，适当引种。引种砧木应对其特性有充分了解或先行试验，表现良好的方能大量引进、推广。选择砧木主要依据下列几点:第一，砧木与接穗具有良好的亲和力，通常同种之间亲和力最高，同属之间有的亲和力好,有的差。一般综合考虑，大多砧木在同属之间选择。第二，砧木应生长健壮，根系发达，对栽培地区的气候、土壤等环境条件适应性强，抗寒、抗旱、抗病虫能力强。第三，砧木种源丰富、繁殖系数高、繁殖工艺简单、成本低。第四，砧木对接穗的生长和开花结果有良好影响，并能保持接穗原有的优良品性。1.确定T字形芽接时期生长期凡接穗、砧木皮层能够剥离时均可进行。苗木繁育时，如当年出圃宜在6月份进行嫁接；如第二年出圃应在8月份进行，具体日期应根据各地生长季长短适当调整。图3-1 切砧木2.嫁接(1)削芽片。选接穗上的饱满芽作接芽。先在芽的上方0.5厘米处横切一刀，深达木质部，然后在芽的下方1厘米处下刀，由浅入深略倾斜向上推刀至横切口，用手的拇指和食指捏住芽的两侧，左右轻轻一掰，取下一个盾状芽片，注意芽片不带木质部。(2)切砧木。在砧木离地面3～5厘米处，选择光滑无疤部位，用刀切一T字形切口。方法是先横切一刀，宽1厘米左右，再从横切口中央往下竖切一刀，长1.5厘米左右，深度以切断皮层而不伤木质部为宜(图3-1)。(3)嫁接和绑缚。用刀尖或嫁接刀的骨柄将砧木上T字形切口撬开，将芽片从切口插入，直至芽片的上方对齐砧木横切口(图3-2)，然后用塑料薄膜条绑紧，要求叶柄芽眼外露(当年萌发)或不外露(来年萌发)。图3-2 嫁接1.确定嵌芽接时期嵌芽接是带木质芽接。在接穗保存好的前提下不受时期限制，在春季萌芽前和生长季节内均可进行。但春季嫁接以砧木进入萌芽期以后为宜，秋季不能过晚，夏季温度过高时也不宜嫁接，以免影响成活。2.嫁接(1)削芽片。在接穗上选饱满芽，从芽上方1～1.2厘米处向下斜削入木质部(略带木质但不宜过厚)，长1.5～2厘米，然后在芽下方0.5厘米处斜切(呈30°)到第一刀口底部，取下带木质盾状芽片(图3-3)。(2)削砧木。在砧木离地面5厘米处，选光滑部位，先斜切一刀，再在其上方2厘米处由上向下斜削入木质部，至下切口处相遇。砧木削面可比接芽稍长，但宽度应保持一致(图3-3)。(3)嫁接与绑缚。将接芽嵌入，如果砧木粗，削面宽时，可将一边形成层对齐。然后用塑料薄膜条由下往上缠绑到接口上方，绑紧包严(图3-3)。图3-3 嵌芽接硬枝嫁接在春季树液开始流动的3—4月进行。只要接穗保存良好，处于尚未萌发状态，嫁接时间可以延续到砧木展叶以后，一般在砧木大量萌芽前结束为宜。葡萄、猕猴桃等伤流严重的树种，应在伤流期结束后进行。嫩枝嫁接在生长期进行。1.劈接劈接是应用广泛的一种嫁接方法，在砧木不离皮的情况下也可进行。其操作如下:(1)削接穗。剪截一段带有2～4个饱满芽的接穗，在接穗的下端削一个2～3厘米的斜面，再在这个削面背后削一个相等的斜面，使接穗下端呈长楔形，插入砧木的内侧稍薄，外侧稍厚些，削面光滑、平整(图3-4)。(2)劈砧木。先将砧木从嫁接处剪(锯)断，修平茬口。然后在砧木断面中央垂直劈一切口，长度略长于接穗的削面长。(3)嫁接与绑缚。将接穗厚的一面朝外，薄的一面朝内插入砧木垂直切口，形成层至少一侧对齐，削面上端露出切面0.3～0.4厘米(俗称露白)，使砧、穗紧密接触，有利于伤口愈合。较粗砧木可插入2个接穗(劈口两端各1个)。然后将砧木断面和接口用塑料薄膜条缠绑严密(图3-4)。较粗砧木要用薄膜方块覆盖伤口，或罩套塑料袋，以免漏气失水，影响成活。图3-4 劈接2.切接(1)削接穗。剪一段带有2～4个芽的接穗，在接穗下端斜削一个长2～3厘米的长削面，削掉约2/3木质部。再在这个长削面背后尖端削一个长1厘米的短削面(图3-5)。(2)切砧木。先在砧木近地面处选光滑无疤部位剪断，削平茬口，然后在砧木皮层光滑的一侧纵切一刀，切口宽度尽量与接穗宽度一致，长度略短于接穗(图3-5)。(3)嫁接与绑缚。将接穗长削面向内，紧贴木质部插入，使两者形成层对齐、靠紧。长削面上端应在砧木平断面之上外露0.3～0.4厘米，使接穗保持垂直，接触紧密。然后用塑料条绑紧包严(图3-5)。图3-5 切接图3-6 插皮接3.皮下接(插皮接)(1)削接穗。剪一段带有2～4个芽的接穗，在接穗下端斜削1个长约3厘米的长削面。再在这个长削面背后尖端削1个长0.3～0.5厘米的短削面，并将长削面背后两侧皮层削去少量，但不伤木质部(图3-6)。(2)切砧木。先在砧木近地面处选光滑无疤部位剪断，削平剪口，然后在砧木皮层光滑的一侧纵切1刀，长度约2厘米,不伤木质部。(3)嫁接与绑缚。用刀尖将砧木纵切口皮层向两边拨开。将接穗长削面向内，紧贴木质部插入，长削面上端应在砧木平断面之上外露0.3～0.4厘米，使接穗保持垂直，接触紧密。然后用塑料条包严绑紧(图3-6)。压条育苗是在枝条不与母株分离的情况下，将枝梢部分埋于土中，或包裹在能发根的基质中，促进枝梢生根，然后再与母株分离成为独立植株的繁殖方法。果树用于压条繁殖的树种较多。常见的落叶果树有苹果、梨、榛子、树莓、樱桃、石榴、无花果、李、葡萄等;南方果树有荔枝、龙眼、柑橘类、油梨、人心果等。直立压条又称为垂直压条或堆土压条。主要用于发枝力强、枝条硬度较大的树种。方法是在春季重剪枝条，促进基部萌发多数分枝。当新梢长到20～30厘米时进行第一次培土，培土前可去掉新梢基部几片叶片或进行纵向刻伤等以利生根（图3-7）。培土厚度约为新梢长度的1/2。当新梢长到40～50厘米时进行第2次培土，在原土堆上再增加厚10～15厘米的土。每次培土前要视土壤墒情灌水，保证土壤湿润，一般20天左右即可生根。入冬前或翌春即可分株起苗，起苗时扒开土壤，在靠近母株处留桩短截，剪完后对母株立即覆土以防受冻或风干，第二年春继续进行压条繁殖。图3-7 直立压条示意图水平压条适用于枝条柔软、扦插生根较难的树种。方法是在早春发芽前，选择离地面较近的枝条,将整个枝条压入沟中，用枝杈固定，覆上薄土，使每个芽节处下方产生不定根，上方芽萌发新枝，待生根成活后分别切割，使之成为各自独立的新植株。这种方法每个压条可产生数株苗木。苹果矮化砧用水平压条时，早春将母株按行距1.5米、株距30～50厘米定植，植株与沟底呈45°角倾斜栽植,定植当年即可压条。将枝条顺行压入5厘米深的斜沟中，用枝杈固定后覆以浅土。枝条上的芽眼萌发生长，待新梢长至15～20厘米时进行第一次培土，培土高度约10厘米,宽25厘米。1个月后，进行第二次培土，培土高度20厘米,宽40厘米。枝条基部未压入土中的芽眼处于顶端的优势地位，应及时抹去强旺萌蘖。秋季落叶后即可分株，靠近母株基部的地方，应保留1～2株，以供来年再次压条时用(图3-8)。图3-8 矮化砧水平压条示意图图3-9 空中压条示意图空中压条又称高压法,适用于枝条坚硬、不易弯曲或树冠太高以及扦插生根较难的珍贵树种的繁殖。在整个生长季均可进行，但以春季和夏季为好。选择发育充实的1～3年生枝条，在枝条基部5～6厘米处环剥，宽3～4厘米，在伤口处用毛笔涂抹5000毫克/千克的吲哚丁酸(IBA)或萘乙酸(NAA)等生长素或生根粉，然后在环剥处覆以保湿生根基质，如沙壤土、细沙、锯末、蛭石等，用塑料膜或油纸包紧，适量灌水。一般2～3个月即可生根，发根后剪离母株成一新植株(图3-9)。

（1）症状：苗期至成株期均可发病。发病初期，上部叶片首先表现黄化型花叶，叶片有皱褶，向上卷曲，变小，变厚，叶片僵硬，生长点黄化，上部嫩叶症状明显，下部老叶症状不明显。茎秆上部变粗，节间变短，多分枝，生长缓慢或停滞，植株明显矮化，后期发病严重时，开花后坐果困难，果实不能正常转色，导致减产或绝收。番茄黄化曲叶病毒病番茄黄化曲叶病毒病后期病株（2）药剂防治：可选用6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂600～800倍液、40%烯羟吗啉胍可溶性粉剂1000～1500倍液喷雾防治，或者在病害发生前控制传毒介体烟粉虱进行预防。番茄黄化曲叶病毒病田间为害状（1）主要为害作物：该病主要在番茄、茄子上发病。（2）症状：苗期、成株期均可染病，主要侵染叶、茎、果。叶片发病初期呈针尖大小的黑点，后不断扩展成轮纹状，边缘多具浅绿色或黄色晕圈，中部有同心轮纹。茎部染病，多在分枝处产生褐色至深褐色不规则圆形或椭圆形病斑，表面生灰黑色霉状物。叶柄受害，产生椭圆形轮纹斑，深褐色或黑色，一般不将茎包住。果实染病，始于花萼附近，初为椭圆形或不定形褐色或黑色斑，凹陷，直径10～20毫米，后期果实开裂，病部较硬，密生黑色霉层，提早变红。番茄早疫病病叶番茄早疫病病果番茄早疫病茎部病斑（3）药剂防治：可选用50%异菌脲可湿性粉剂600～800倍液、80%代森锰锌可湿性粉剂400～500倍液、42.8%氟菌·肟菌酯悬浮剂4500～5000倍液喷雾防治。（1）主要为害作物：主要为害番茄、马铃薯等作物。（2）症状：幼苗、叶、茎和果实均可染病。幼苗染病，病斑由叶片向茎蔓延，使茎变细并呈黑褐色，萎蔫或折倒，湿度大时病部表面生有白霉。叶片染病，多从植株下部叶片叶尖或叶缘处开始发病，初为暗绿色水浸状不定形病班，扩大后转为褐色，湿度大时，叶背病健交界处长有白霉。茎上病斑呈腐败状，导致植株萎蔫。果实染病主要发生在青果上，病斑初呈油浸状暗绿色，后变为棕褐色至暗褐色，稍凹陷，边缘明显，果实一般不变软，湿度大时果实上长有少量白霉，迅速腐烂。番茄晚疫病为害叶正面番茄晚疫病为害叶背面番茄晚疫病病果高湿环境长出的白色霉层番茄晚疫病田间为害状（3）药剂防治：可选用72%霜脲·锰锌可湿性粉剂600～800倍液、250克/升嘧菌酯悬浮剂4000～4500倍液、687.5克/升氟菌·霜霉威悬浮剂1200～1500倍液喷雾。（1）主要为害作物：主要为害番茄、茄子、辣椒等作物。（2）症状：苗期至成株期花、果、叶、茎均可发病。叶片发病从叶尖开始，沿叶脉间成“V”形向内扩展，灰褐色，有深浅相间的纹状线，病健交界分明，高湿时表面生有灰霉。果实染病，青果受害重，残留的柱头或花瓣多先被侵染，后向果实扩展，致使果皮呈灰白色，并生有厚厚的灰色霉层，呈水腐状。番茄灰霉病病叶番茄灰霉病病果大椒灰霉病病果（3）药剂防治：可选用400克/升嘧霉胺悬浮剂600～1000倍液、43%腐霉利悬浮剂900～1200倍液、60%乙霉·多菌灵可湿性粉剂400～800倍液、50%啶酰菌胺水分散粒剂2000倍液喷雾防治。（1）主要为害作物：主要侵染番茄、辣椒、茄子等作物。（2）症状：主要为害保护地作物的果实、叶片、茎。叶片多从叶缘开始，初呈水浸状，暗绿色，无定形病斑，潮湿时长出白霉，后期叶片灰褐色枯死。茎部染病，灰白色，稍凹陷，后期表皮纵裂，病斑大小、形状、长短不等，边缘水渍状，发生严重时，表面和病茎内均生有白色菌丝及黑色菌核。果实被害多从果柄开始向果实蔓延，病部灰白色至淡黄色，斑面长出白色菌丝及黑色菌核，病果软腐。大椒感染菌核病大椒菌核病病茎和病果番茄菌核病初期病果番茄菌核病后期病果（3）药剂防治：定植前可选用20%辣根素水乳剂5升/亩随滴灌进行土壤处理，待药液全部滴入后覆膜密闭棚室2～3天，揭膜后1～2天即可定植；定植后可选用43%腐霉利悬浮剂900～1200倍液、1×106个孢子/克寡雄腐霉3000倍液进行灌根处理。（1）主要为害作物：主要为害番茄、辣椒、茄子等作物。（2）症状：病害主要发生在根部的须根和侧根上。病部肿大成不规则一串串瘤状，大小不一，剖开根结有乳白线虫。地上部植株生长衰弱、矮小，生长不良，结实少而小。当天气干旱或水分供应不足时，中午前后地上部常出现萎蔫，严重时植株枯死。番茄根结线虫病地上部植株症状番茄根结线虫病根部症状（3）药剂防治：可在播种前用1.8%阿维菌素乳油1.3～2毫升/平方米对苗床进行处理；定植前1.8%阿维菌素乳油0.9～1.4千克/亩或10%噻唑膦颗粒剂1.5～2千克/亩，拌细（沙）土40千克，撒施、沟施或穴施，进行土壤处理。（1）主要为害作物：主要为害番茄。（2）症状：叶霉病主要为害叶片。发病初期，叶背生白色霉斑，病斑近圆形或不规则形。病斑多时可相互融合，布满叶背，后期病斑转褐色至墨绿色。被害叶片正面，出现椭圆形或不规则淡黄色褪绿斑，叶背病斑上长出墨绿色霉层，随着叶背霉斑的扩大，叶面黄色区也扩大直至全叶枯黄，严重时叶片正面也会产生霉斑，导致叶及整株干枯。番茄叶霉病叶正面病斑番茄叶霉病叶背面病斑（3）药剂防治：可选用47%春雷霉素·王铜可湿性粉剂600～800倍液、10%苯醚甲环唑水分散粒剂800～1500倍液、42.8%氟菌·肟菌酯悬浮剂4000～6000倍液喷雾防治。（1）主要为害作物：可为害番茄、辣椒等作物。（2）为害特点：棉铃虫为杂食性害虫，是喜温喜湿性害虫。主要为害叶和果实，有钻蛀性和转主为害的特性，被其钻蛀过的果实失去商品性。（3）形态特征：①成虫。成虫体长14～18毫米，翅展30～38毫米，灰褐色。前翅长度等于体长，前翅具褐色环状纹及肾形纹，肾纹前方的前缘脉上有一褐纹，肾纹外侧为褐色宽横带，端区各脉间有黑点。后翅黄白色或淡褐色，端区褐色或黑色。②卵。卵约0.5毫米，半球形，乳白色，具纵横网格。③幼虫。体色多变（所谓1龄白，2龄黑，3龄黄绿色，还有淡红、紫黑色）；北京地区一年发生4代，露地番茄以第二代，保护地番茄以第三、第四代为害较重。番茄棉铃虫卵番茄棉铃虫为害果实状（4）生物防治：成虫扬飞前在田间悬挂棉铃虫诱芯，配套诱捕器，监测每公顷用1套，防治每亩用3～5套，1个月左右更换一次诱芯。悬挂棉铃虫诱芯悬挂诱捕器（5）药剂防治：可选用4.5%高效氯氰菊酯乳油1000～1500倍液、2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐乳油6000～8000倍液、25%灭幼脲悬浮剂1000～1200倍液喷雾防治。（1）主要为害作物：可为害番茄、辣椒、茄子等作物。（2）为害特点：幼虫孵化后潜食叶肉，在叶片上形成蛇形弯曲虫道，仅留表皮，虫道的终端不明显变宽。上部叶片和底部叶片均会发生，发生严重时叶片在很短时间内就被钻花干枯，至叶片坏死，严重影响植株的光合作用。番茄潜叶蝇为害状（3）药剂防治：可选用10%溴氰虫酰胺可分散油悬浮剂8000倍液、10%灭蝇胺悬浮剂1500～2000倍液、30%阿维·杀单可湿性粉剂1500～2000倍液对水喷雾。（1）主要为害作物：可为害番茄、茄子、辣椒等多种茄科作物。（2）发生特点：以成虫、若虫聚集在植株中上部叶片背面，吸食汁液，受害叶褪绿、变黄、萎焉或枯死。为害时分泌蜜露，产生灰黑色霉状物，引发煤污病；更严重的是传播番茄黄化曲叶病毒病，影响作物产量和品质。高温、干旱、强光照的气候条件，利于烟粉虱的发育繁殖和迁飞。（3）形态特征：①成虫。雌虫体长（0.91f 0.04）毫米，翅展（2.13f0.06）毫米，雄虫体长（0.85f 0.05）毫米，翅展（1.81f 0.06）毫米。虫体淡黄白色到白色，复眼红色，肾形，翅白色无斑点，停息时左右翅合拢呈屋脊状（与温室白粉虱的区别）。②卵。椭圆形，有小柄，与叶面垂直，卵柄通过产卵器插入叶内，卵初产时淡黄绿色，孵化前颜色加深，呈琥珀色至深褐色，但不变黑。卵不规则散产，多产在背面。每头雌虫可产卵30～300粒，在适合的植物上平均产卵200粒以上。从卵发育到成虫需要18～30天不等。③若虫（3龄）。椭圆形。1龄体长约0.27 毫米，宽0.14 毫米，有触角和足，能爬行，一旦成功取食合适寄主的汁液，就固定下来取食直到成虫羽化。2龄、3龄体长分别为0.36毫米和0.50毫米。烟粉虱为害大椒烟粉虱为害番茄（4）药剂防治：可选用25%噻嗪酮可湿性粉剂1000～1500倍液、25%噻虫嗪水分散粒剂3000～5000倍液、22%氟啶虫胺腈悬浮剂8000倍液对水喷雾。（1）主要为害作物：可为害番茄、茄子、辣椒等多种茄科作物。（2）发生特点：以成虫、若虫聚集在植株中上部叶片背面，吸食汁液，受害叶褪绿、变黄、萎焉或枯死。为害时分泌蜜露，产生灰黑色霉状物，更严重的是传播病毒病，影响作物产量和品质；还可传播病毒病，造成更大为害。高温、干旱、强光照的气候条件，利于其发育繁殖和迁飞。（3）形态特征：①成虫。长1～1.5毫米，淡黄色，翅面覆盖白色蜡粉，停息时双翅在体上呈平铺状。②卵。长约0.2毫米，从叶背气孔插入植物组织中。初产淡绿色，后渐变褐色，孵化前呈黑色，表面覆蜡粉。③若虫。共分4个龄期，1龄若虫体长约0.29毫米，长椭圆形；2龄若虫体长约0.37毫米；3龄若虫体长约0.51毫米，淡绿色或黄绿色；4龄若虫又称伪蛹，体长0.7～0.8毫米，椭圆形，体背有长短不齐的蜡丝，体侧有刺，黄褐色。温室白粉虱成虫和伪蛹温室白粉虱诱发的煤污病（4）药剂防治：同烟粉虱防治方法。