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报告Discrepancy of Transmission Rate of the Rice Stripe Virus by Nymphs and Adults of the Small Brown Planthopper Laodelphax striatellus Fallen(Homoptera: Delphacidae)? Corresponding authors:E-mail:wanghd61@126.com;zrzhu@zju.edu.cn
出版时间:2007The small brown planthopper,Laodelphax striatellus Fallen(Homoptera:Delphacidae)is a widely geographical distributed planthopper in the Euro-Asian continents(Zhu et al.2005).It is the vector of the rice stripe disease caused by the rice stripe virus(RSV).RSV has been a destructive rice disease in the Eastern Asian countries(Hibino,1996;Cheng et al.2002;Zhu et al.2005;Zhu et al.2007).The transmission process and efficiency of a plant virus by their vectors was influenced by many factors(Gray&Banejee,1999),for instance,environmental temperature,plant species(Jin et al.1985),plant age(Wang et al.2007),but no information was documented on the role of the planthopper vector's age on the rice stripe virus.In the year 2006 and 2007,we collected nymphs and adults of the vector planthoppers from overwintering habits and biologically tested their transmission rates.In 2006,the small planthoppers in growth stages of large nymphs and macropterous and brachypterous adults were collected from overwintering habits such wheat,barley,rye fields and grasses in bank fields of 5 sites,e.g.Haiyan,Haining,Jiashan,Huzhou and Changxin,Northern Zhejiang Province.In 2007,the vectors were collected from 7 sites,e.g.Haiyan,Haining,Xiuzhou,Jiashan,Tongxiang and Changxin.More than 100 planthoppers were collected from each site each year.2.2 Rice seedlingThe most widely grown rice cultivar Xiushui 110,a Japonica type bred by Jiaxing Academy of Agricultural Sciences,was sown and maintained in greenhouse plots and the seedlings at age of 15 days were used for the bioassay.After they were collected and transported in healthy rice seedlings to the laboratory,the planthoppers were separated into groups of larger nymphs,macropterous and brachypterous adults as described in Sun et al.(2007).One rice seedling was set in a glass tube in size of 15cm×2cm and enclosed in one end with nylon mesh.After one planthopper of either nymph or adult was put into each glass tube,the second end was enclosed as for other the end and the glass tubes were marked for the vector's site etc.All the tubes and plants with planthoppers were sitting vertically on trays with still water to maintain the plants alive.The trays were kept in a greenhouse of RH75%,25~28℃ with 14L:10D.After 24 hours after infection,the seedlings were transplanted into plots in a screen house and covered by net cages in size of 30 cm in height×10cm in diameter individually.The seedlings were monitored and recorded daily for the incidence of the rice stripe disease till 30 days.Since all the incidence data of percentages of infected rice plants were lying within the range of 0 to 30%,the square-root transformation was used before analysis of variance.The Generic linear model(GLM)was applied to separate the factors and their interactions on the variance.Thereafter,the least significant difference(LSD)was used to compare the difference among the transmission rates of different status of vectors.The data analysis was performed in the DPS program(Tang and Feng 2006).The age and site of the vector had significant effect on the transmission rate(ANOVA,F(2,32)=82.85,P=0.0001;and F(6,32)=8.54,P=0.0098,Table 1),but the factor of year and the two-paired interactions among all the three factors were not significant(P>0.05,Table 1).This indicates that transmission competencies of the vectors collected from different sites were consistent over these two years.In both the years of 2006 and 2007 for each site,the transmission rate of large nymph was higher than those of brachypter and macropter,respectively,and the mean of the former was significantly higher than those of later(Table 2).The ratio of such transmission rates was nymph:macropter:brachypter=1:0.69:0.35 in 2006 and 1:0.68:0.45 in 2007.SourceofvarianceSSDegreeoffreedomdfMeansquaresMSFProbabilitylevel,PAge223.02572111.512982.84770.0001Site68.9879611.49808.54230.0098Year7.041717.04175.23160.0622Year×Age2.320621.16030.86200.4687Year×Site17.451335.81714.32180.0604Site×Age44.6304123.71922.76320.1107Error8.076061.3460Total335.229532Table 1 Analysis of variance of factors affecting the transmission rate of overwintering Laodelphax striatellus FallenSBPHoriginationsAgeofsmallbrownplanthopper(SBPH)20062007MacropterBrachypterLargenymphMacropterBrachypterLargenymphHaiyan3.36.258.233.525.026.12Haining3.855.136.992.143.035.81Jiashang2.783.836.222.594.216.25Tongxiang3.547.6913.64Xiuzhou3.595.267.13Changxin2.604.228.505.636.487.69Huzhou1.829.0911.29Mean±SE2.87±0.345.7±0.948.25±0.873.5±0.495.28±0.677.77±0.215%cbababa1%BAABABATable 2 Comparison of transmission rate (%) of the rice stripe virus by different age of the small brown planthopper (SBPH), Laodelphax striatellus FallenThe experiment presented in the paper showed that the large nymphs of the planthopper vector had higher transmission efficiency than their adults.Such discrepancy between adults and younger stages are found in many plant virus vectors.For both sexes of Frankliniella occidentalis(Pergande)(Thysanoptera:Thripidae),the vector of the tomato spotted wilt virus,the transmission efficiency dropped with age,simultaneously with the consumption rate(van de Wetering et al.1999).The transmission of Tomato spotted wilt virus by Thrips tabaci adults decreased with the age too at which the virus was acquired by larvae(Chatzivassiliou et al.,2002).In aphid vector of the persistent transmission of plant viruses,transmission efficiency decline with age though they remain infectivefor a long time,possibly over their whole life.Infectivity is not affected by molting,important because of existence of the virus as aphids mature.Foregut and hind gut is lined with cuticle that is shed with the molt;viruses transmitted in a persistent fashion must be either in midgut or within the body.But Ling(1975)noted that adult green leafhopper(Nephotettix virescens)is three times more efficient vector than nymphs in rice tungro transmission.The acquisition access period(AAP)and inoculation access feeding periods(IAP)are two of the important factors determining the transmission efficiency.The proportion of aster leafhoppers,Macrosteles quadrilineatus Forbes,that became vectors was significantly higher for bolt strain of aster yellows phytoplasma when leafhoppers acquired aster yellows phytoplasma as nymphs than as adults.Once leafhoppers became inoculative,the rate of transmission remained constant over their life spans(Murral et al.1996).Acquisition only occurs in the first and early second nymphal stages of the life-cycle and adult thrips cannot acquire the virus(Moritz et al.,2004).Due to the lack of strong evidence to elucidate the mechanism undergoing the different transmission ability between the ages and wing-morphs of the small brown planthopper,more experiments are necessary to carried out to draw the clear pictures.When winter crops such wheat,ryegrass are spatially connected with or temporally followed by rice seedling nursery or transplanted rice,viruliferous planthopper nymphs remained in the nearby winter crops or grasses will move by jumping to the newly-planted rice plants and transmit the virus to rice resulting in severer RSV incidence than viruliferous adults.Such event should be prevent through spatially and temporally isolation.Postpone of sowing date of rice has been tested experimentally as one of the effective approach to avoid RSV disease outbreak in rice(Zhu,et al.2007,in review).Additionally,the data can be used in a rice stripe disease epidemiological model to evaluate strategies for the disease management.The research presented in the paper is part of the Zhejiang Provincial Key Projects(2005C32033,2004E60055),China National High-Tech(863)Program(2007AA10Z220). -
报告自然环境与人体洋葱伯克氏菌的毒力比较?? 基金项目:国家自然科学基金(30370951)。
出版时间:2007洋葱伯克氏菌(Burkholderia cepacia)是一种广泛存在于土壤、水和植物根围、与医院感染病人密切相关的革兰氏阴性细菌。它最初作为植物病原菌被认识,后来发现它也是医院中重要的人体条件致病菌,由该菌引起患者洋葱伯克氏菌综合症的致死事件在国内外均有报道。同时它在农业领域中具有生物防治、生物降解和促进植物生长等多种功能。近年来,该菌被认为不是一个种,而是一组基因型不同、表型相近的复合物,称为洋葱伯克氏菌群(Burkholderia cepacia complex,简称Bcc)。因此,重新认识医院和自然环境中的Bcc菌对于Bcc生防因子的风险评估尤为重要。Bcc菌致病基因的发现和挖掘将有助于更好的认识病菌的致病机制。目前已证实的毒力基因有BCESM和cblA基因。这些毒力基因大部分存在于医院菌,以在基因型Ⅲ菌株中分布率最高。虽然大量与囊性肺纤维化患者致病相关的Bcc致病菌及生防菌已被用来风险评估,但其他来源Bcc菌的毒力研究相对较少。近年来研究表明,苜蓿可以作为评估Bcc基因型毒力因子侵染的植物模型。因此,本试验采用苜蓿植物模型对来源于中国自然环境和医院中的Bcc菌株进行了毒力测定,同时也对两个毒力基因BCESM和cblA进行了特异性PCR检测,以便为评价所获Bcc不同基因型菌株的安全性提供重要依据。研究结果表明,来源于医院的基因型Ⅰ和Ⅲ菌株均对苜蓿幼苗有较强的毒力,幼苗子叶黄化或白化,根短小、畸形,对苜蓿幼苗的平均发病率分别达到69%和68%。来源于自然环境的Bcc菌株中,基因型ⅢB也对苜蓿幼苗表现出强毒力,幼苗症状类似于医院致病菌的致病效果,幼苗平均发病率为55%;基因型Ⅰ菌株对苜蓿幼苗的毒力程度较轻,有的菌株没有致幼苗发病;基因型Ⅴ和Ⅸ的多数菌株对苜蓿幼苗发病率很低,部分菌株不致幼苗发病。这说明来源于自然环境的基因型ⅢB菌株与医院致病菌的基因型ⅢA和Ⅰ菌株具有相同的毒力,表明自然环境中的基因型ⅢB菌可能为潜在的人体条件致病菌。同时研究表明,在这些Bcc菌株中,未检测到BCESM和cblA这两个毒力基因。 -
报告Identification for Resistance of Maize Germplasm to the Two Virus Disseases
出版时间:2007玉米矮花叶病(Maize Dwarf Mosaic)和玉米粗缩病(Maize Rough Dwarf)是近十几年来为害我国玉米生产的两种主要病毒病害[1]。自20世纪90年代以来,玉米矮花叶病、粗缩病在山西流行严重[1,2,5],给玉米生产带来很大损失,特别是1994~2000年连续严重发生的玉米矮花叶病和粗缩病,使山西省运城、临汾等地的晚播玉米颗粒无收,夏玉米因病害减产30%以上[2]。1998年全省发病面积45万hm2,占玉米种植面积的52%,全省损失粮食5亿多kg[3]。大面积种植感病品种是病害流行的重要原因。改良山西省常用玉米自交系和杂交种对病毒病的抗性,已成为玉米生产和育种单位急待解决的问题[3,7]。国内外研究表明:不同的玉米自交系和杂交种对玉米病毒病的抗性有明显差异[4]。选育和种植抗病品种是防治玉米矮花叶病和粗缩病最经济有效的措施[3,6,7]。本研究皆在通过田间自然发病初选,人工接种,病圃重复鉴定,筛选出对两种玉米病毒病具有抗性的种质资源。为有效地开展玉米抗病毒病育种提供参考依据。供试玉米种质资源材料共915份,其中常用玉米自交系276份,杂交种及新组合181份,热带改良新选系458份。热带改良新选系由本所种质改良课题组提供,其余的玉米资源由省内有关育种单位和种子公司提供。1.2.1 田间自然发病鉴定初选 田间自然发病鉴定初选:2001年和2002年对全部材料分2年在山西省玉米病毒病发生严重的地区运城、临汾和太谷3个点同时进行。每份材料种植2行,每行50株,行长15m,株行距0.3m×0.65m。以自然发病为主,授粉1~2周后调查病株率,发病率在15%以上的视为不抗病。对这批材料将不进行抗病复选。1.2.2 人工接种重复鉴定复选 2003~2004年,对经过田间初选的抗病材料同时进行矮花叶病人工接种和粗缩病自然重复鉴定。病圃设在山西省农业科学院小麦研究所实验场(临汾市区),历年发病较重的固定地块。供试材料田间顺序排列,每份材料种植2行,每行25株,行长7.5m,株行距0.3m×0.6m。玉米矮花叶病人工接种方法:采用蚜虫接种法,设自交系黄早4(R),Mo17(S)为抗、感对照种。玉米粗缩病重复鉴定方法:采用田间自然接种法,鉴定圃四周全部种植冬麦,利用灰飞虱发生规律,调节玉米播期(5月中旬)使幼苗与成虫羽化高峰期吻合,以达到传毒最佳效果,设自交系沈137(R),478(S)为抗、感对照品种。玉米授粉半个月后调查病情。玉米矮花叶病病株分级标准参照吴全安的方法[11]。即:0级全株无症状;1级,植株上部叶片1%~3%显症,有褪绿斑花叶;2级,植株中部叶片,1%~30%显症,植株略矮;3级,植株严重发病,2/3的叶片呈现花斑条纹,果穗弯小或不结实。病情指数按以下公式计算:依据病情指数划分抗病类型,0~5.0高抗(HR);5.1~15.0抗病(R);15.1~30.0中抗(MR);30.0以上感病(S)。玉米粗缩病病害分级标准参照陈巽珍分级标准[8],即:0级,健株,全株无症状;1级,比健株矮1/5,雄穗轴稍短;2级,比健株矮1/2,顶部略丛生,果穗长度为健株的1/2;3级,株高为健株的1/3,顶部叶小,上冲,穗小多畸形;4级,苗株死亡或极矮小,顶叶上冲丛生,绝收。病情指数计算公式同前。依据病情指数,划分抗病类型,0~5.0高抗(HR);5.1~20.0抗(R);20.1~40.0感(S);40.1以上高感(HS)。2001~2002年,对915份玉米自交系和杂交种在重病区进了田间自然发病鉴定初选,淘汰了感病材料208份。2002~2004年,对初选的912份材料(自交系537份,杂交种142个),进行了矮花叶病、粗缩病人工接种,病圃重复鉴定。鉴定筛选结果见表1、表2和表3。种质类型Germplasmtype鉴定数量No高抗highResistant抗Resistant感Susceptible高感HighsusceptibleNo%No%No%No%自交系Inbredlines734253.411816.125334.533846.0杂交种Hybrids181168.96938.15832.03821.0合计Total915414.518720.431134.037641.1Table 1 Results of indentification for resistance of maize inbred lines and hybrids to SCMV-MDB种质类型Germplasmtype鉴定数量No高抗highResistant抗Resistant感Susceptible高感HighsusceptibleNo%No%No%No%自交系Inbredlines734334.512917.634547.022730.9杂交种Hybrids1812916.05128.26636.53619.9合计Total915626.817919.641144.926328.7Table 2 Results of indentification for resistance of Maize inbred lines and hybrids to MRDV种质类型Germplasmtype鉴定数量No双高抗双抗DoublehighNoResistant%DoubleNoResistant%自交系Inbredlines73470.967510.2杂交种Hybrids18195.05027.6合计Total915161.7512613.8Table 3 Results of indentification for resistance of Maize inbred lines and hybrids to SCMV-MDB and MRDV表1表明经过人工接病鉴定:筛选出抗矮花叶病自交系118份,占自交系鉴定总数的16.1%,杂交组合69个,占杂交种鉴定总数的38.1%,优良高抗病自交系有25份,占自交系鉴定总数的3.4%,它们是:选9、齐31、93选2、假B734、选78、选7、选141、选127、选301、选145、选151、选250、5081、改84-2、改99-1、改100-1、改113-1、改100-2、改474-1、改418-1、改377、改403、改426、沈137、99-5。表现为高抗病的杂交种有16个,占杂交种鉴定总数的8.9%,它们是:长单39、长单40、忻抗7号、太早单18号、98-1×5081、并单3号、齐319×98-3、并单4号、422×齐35、B734×93选2、H9-21×临京11-2、农大108、忻玉106、忻单108、晋单36、鲁单50。表2结果表明:供鉴定材料中,抗粗缩病自交系有129份,占自交系鉴定总数的17.6%;杂交种50份,占杂交种鉴定总数的27.6%;高抗病自交系有33份,占自交系鉴定总数的4.5%。它们是:选29、选41、选114、选125、选214、齐31、齐35、93选2、假B734、选331、选78、选184、选159、R选3、选50、选59、选2-2、选11-1、选46-2、选121-1、选132-1、选155-1、R10-2、R49-1、选90-3、海选36、改357-1、改474-1、改418、改408、改427、98-2、98-3。高抗病杂交种29个,占杂交种鉴定总数的16.0%,它们是:B734×93选2、422×齐35、并单4号、陕单971、新陕单1号、鉴35、齐31×98-3、并单3号、陕高农5号、临油1号、忻玉106、长单40、屯9902、同单4号、同早5号、春早单3号、运早1号、FL2、晋玉681、早利26、京单958、太早单20、太早单21、早玉2号、早玉4号、LD981、运单14、H9-2×临京11-2、H9-2×临京11-3。通过表3可以看出:被鉴定材料中,对两种病毒病同时都表现为抗病的自交系有75份,占自交系鉴定总数的11.6%,如:选41、选125、选214、齐35、选331选159、选50、选7、选141、选31、选211、选87、选14、选217、选301、选186、选102、选145、选151、选153、选250、改2-2、改11-1、改132-1、改155-1、R49-1、选90-3、海选36、改15-2、改16-2、改29-2、改50-2、改99-1、改100-1、改102-2、改111-2、改113-1、改116-1、改125-1、改134-2、改170-2、改357-1、改474-1、改418、改408、改427、改377、改403、改426、改404、改476、改406、改407、改416、改419-1、改420、改422、改430、改432、改433、改440等。双抗杂交种51个,占杂交种鉴定总数的29.8%,如:陕单971、新陕资1号、鉴35、陕单931、98-1×5081、4-18、临油1号、忻玉106、选66×308-2、忻5344、忻玉105、长单39、屯单9901、屯9902、屯9906、京玉8号、春早单1号、春早3号、太单早18、太单23、太单32、早利26、协玉2号、运单13号、晋玉681、晋玉751、科试7号、沈单10号、早玉3号、早玉2号、并单1号、太早单20、高油115、忻玉9704、忻抗13、LD981、DH3801、强盛17、并单2号、同单36号等。对两种病毒病同时都表现为高抗的材料共16份,占鉴定总数的1.96%,其中双高抗自交系有选29、齐31、93选2、假B734、选78、改474-1、改418,共7份,占自交系鉴定总数的1.1%。双高抗病杂交种有B734×93选2、422×齐35、并单4号、齐31×98-3、并单3号、陕高农5号、长单40号、H9-21×临京11-2、忻玉106,共计9个,占杂交种鉴定总数的5.3%。杂交种抗矮花叶病的比例为38.1%,自交系的为16.1%;杂交种抗粗缩病的比例为28.2%,自交系的为17.6%;杂交种同时抗这两种病毒病的比例为27.6%,自交系的为10.2%;杂交种同时高抗这两种病毒病的比例为5.0%,自交系的为0.96%;通过对杂交种和自交系材料抗病性比较,可以看出杂交种抗病的比例远高于自交系的。从表4看出被鉴定热带亚热带玉米改良自交系中,对两种病毒病同时都表现为抗病的有59份,占热带改良系鉴定总数的12.9%;对两种病毒病同时都表现为高抗的有5份,占热带改良系鉴定总数的1.1%。而国内温带自交系对两种病毒病同时都表现为抗病的有16份,占国内温带自交系鉴定总数的5.8%;对两种病毒病同时都表现为高抗的仅2份,占国内温带自交系鉴定总数的0.7%。从而可以看出热带亚热带玉米改良自交系抗病比例远远大于国内温带系。种质类型Germplasmtype鉴定数量No双高抗双抗DoublehighNoResistant%DoubleNoResistant%自交系Inbredlines73470.967510.2热带改良系Tropicalinbredlines45851.15912.9国内温带系Chinatemperate'sinbredlines27620.7165.8Table 4 Results of indentification for resistance of Tropical and China temperate's inbred lines to SCMV-MDB and MRDV采用蚜虫接种法,重病区病圃自然发病重复鉴定法,4年来,对816份不同类型玉米种质资源进行了玉米矮花叶病、粗缩病的抗病性鉴定。筛选出同时抗两种病毒病的自交材料75份,杂交种51个;双高抗病优良自交系7份;双高抗病杂交种9个;为玉米抗病毒病育种提供了一批抗病材料,为玉米生产上应用抗病品种提供了科学依据。在鉴定材料中双抗病材料所占比例较小,同时高抗两种病毒病的材料所占比例更小,鉴定材料的抗病性与其来源关系密切,不同的种质材料对两种玉米病毒病的抗病性有明显差异,杂交种和杂交组合的抗病性比例明显优于自交系;不同来源自交系的抗病性差异更大。利用热带、亚热带玉米种质改良的新选自交系,抗病比例远远高于没有热带血缘的常规系,这说明热带、亚热带玉米种质资源中有优良的抗病毒病基因,是改良我国温带玉米种质病毒病抗性的很有利用前景的抗源种质。本研究采用的矮花叶病蚜虫接种法,是我国多年来传统接种的方法,虽然由于养蚜、饲毒等工作量较大,但不失为一种可靠性强的接种方法。粗缩病的抗性鉴定方法国内现在一直采用田间自然发病鉴定方法,试验选择了利于病毒病发生的试验环境,把鉴定点设在山西省发病严重的地块进行,并进行了重复鉴定,使鉴定结果有了更强的可靠性。 -
报告Advances on Genus Cordyceps Fungi Research
出版时间:2007虫草属(Cordyceps)属于真菌门(Eumycota)、子囊菌亚门(Ascomycotina)、核菌纲(Pyrenomyceres)、麦角菌目(Clavicipitales)、麦角菌科(Clavicipitaceae)。本属真菌绝大多数能感染昆虫,并从其头部或体表长出子座体而构成虫、菌复合体——虫草。我国是世界上最早将虫生真菌——冬虫夏草进行药用的国家[1~6],受我国对虫草传统药用的启发,加上微生物制药的诸多优点,近年来世界上许多国家都加强了虫生真菌的研究。初步研究已表明,虫草及相关真菌是最有潜力从中发现新型生物活性化合物或药物先导化合物的真菌类群[5~11]。根据寄生真菌和寄主的不同可以形成各式各样的虫草,虫草属作为药用真菌中的一个大类,目前报道虫草属真菌已达400多种,我国已记载的有90多种[12]。除冬虫夏草外,还有如霍克斯虫草、大团囊虫草、蛹虫草、珊瑚虫草、鳞翅目虫草等,其中冬虫夏草应用历史悠久,研究得最为深入[13]。尽管虫草在世界各地均有分布,但是相对集中地分布于亚欧大陆。研究表明,虫草可产生多种生理活性物质,这些物质分别具有抗菌、抗病毒、杀虫以及免疫调节等功能,它们在医药、农业、食品工业及现代生物技术的应用中皆有十分重要的意义。目前按其用途可将虫草资源分为3类:即药用、食用和害虫微生物防治资源。我国药用常用种有10余种,最多的是冬虫夏草(C.sinensis)群,其他还有蛹虫草(C.militaris)、亚香棒虫草(C.hawkesii)、大团囊虫草(C.ophioglossides)、凉山虫草(C.liangshanensis)、香棒虫草(C.barnesii)、古尼虫草(C.gunnii)、蝉花(C.sobolifera)等。对于虫草的认识,我国可追溯到公元前11世纪西周至秦朝。从出土的文物中就发现有以虫草作图案的玉雕饰品[14]。1578年成书的《本草纲目》中记载有雪蚕,根据其生活史、性味功效、形态、环境及产地判断,应当是冬虫夏草的古名。在1694年清朝汪昂的《本草备要》中也有关于冬虫夏草的论述,该书记载:“冬虫夏草,甘平,保肺益肾,止血化痰,止劳咳。四川嘉定府所产者佳。冬在土中形如老蚕,有毛能动,至夏则毛出土上,连身俱化成草”,这是冬虫夏草的最早文字记载[3]。赵学敏(1765)著的《本草纲目拾遗》把它的药用归之为“能治诸虚百损”[15~16]。在中华医药百味中,虫草正是以“治诸虚百损”、“阴阳平衡”、“保肺益肾、补精益气、专补命门”的神奇功效被认为是一种不可多得的中药之宝而蜚声华夏,饮誉海外,与人参、鹿茸齐名[14],共称为中国的三大补品。虫草菌无性型种类包括20余属70余种,其中重要的有拟青霉属17种,头孢霉属6种,层梗孢属l1种,被毛孢属21种,葡萄穗霉属1种,小束梗孢属2种,刺束霉属3种,球束孢霉属1种,轮枝孢属3种,侧孢霉属3种及多头霉属的一些种,其中拟青霉、被毛孢霉、头孢霉及轮枝孢霉的许多种已用于害虫生物防治。早在20世纪50年代,前苏联科学家就用棒形虫草(Cordyceps clavulata)的性型蜡蚧被毛孢(Hirsutella lecanicola)人工培养后防治核桃介壳虫,并获得成功。Shimazu(1988)确证的布氏虫草(Cordyceps brongniartii)及其无性型布氏白僵菌(Beauveria brongniartii),是金龟子幼虫一种常见的病原,多年来日本、法国及我国利用该菌防治森林苗圃、牧场及农田的蛴螬均有较好的效果,在有些场合下可较长期地控制虫口。随着化学农药的大量使用对环境生态的严重影响,生物防治日益被人们所重视,利用昆虫病原微生物防治害虫是重要的手段之一。虫生真菌种类多,代谢类型复杂,以其安全有效,显著的流行潜力,容易大量生产等优点,在害虫的生物防治中占有越来越重要的地位。目前生物防治中应用最广的真菌杀虫剂是白僵菌、绿僵菌、汤普森多毛菌、蜡蚧轮枝菌、拟青霉等。据试验,白僵菌用于防治农、林、果、茶类30余种害虫,均取得良好的效果。国外对白僵菌研究较多的国家有前苏联、美国、日本、法国、德国等。前苏联在20世纪70年代批准登记为Boverin微生物杀虫剂,用作大面积防治马铃薯甲虫、苹果食心虫、小麦盾蝽、玉米螟和甜菜象甲等。我国利用该菌防治农林害虫每年达67万hm2 以上。绿僵菌仅次于白僵菌,目前美国、巴西已有绿僵菌商品制剂,主要用于防治沫蝉、蚊子等。国内应用其防治梨虎、天牛、梨心毛虫、菜青虫、蠹虫、蚊子等,其防效达30%~94%。有关资料显示,目前虫生真菌制剂的研究进展依然缓慢。至1996年,国外登记注册的只有27种剂型,40多种不同的虫生真菌制剂,其中主要为球孢白僵菌和金龟绿僵菌,而国内的商业产品均未形成[17]。因此,还有待于国内科研工作者进行广泛深入的研究。我国虫草资源主要用于药用,其次是食用,作为生物杀虫剂尚处在试验研究阶段。近年来由于人工滥采乱挖,以及生态环境的严重破坏,许多虫草菌面临灭绝的危险。研究人员已意识到这一点,从菌种分类、种类分布、生态、寄主、人工驯化与培养、化学成分、药理与临床等方面做了大量的研究,发现人工培养的菌丝体和发酵液,经化学、药理研究证明与天然虫草基本一致[18],这无疑为虫草的获得开辟了一条新途径。总之,虫草属真菌的研究还有很多地方有待深入。虫草的药用价值和微生物防治还有很大的潜力可挖,只要广大真菌工作者不懈努力,这一古老的药用真菌必将为人类健康做出新的贡献。 -
报告Application of Molecular Marker Technology in the Studies of Phytophthora Infestans on Patato
出版时间:2007马铃薯晚疫病是一种毁灭性病害,从20世纪在欧洲暴发引起大饥荒以来,在全球范围内绝大多数马铃薯栽培地区广泛传播。1996年,据CIP(国际马铃薯中心)估计,全球因晚疫病造成的直接经济损失达到170亿美元,发展中国家的损失53亿美元。晚疫病的危害性、防治难度及对社会的影响早已超过水稻稻瘟病和小麦锈病,被视为国际第一大作物病害。近几十年随着分子生物学技术的发展,各国科学家都对马铃薯晚疫病病菌的分子遗传学进行了深入的研究。本文仅对分子标记技术在晚疫病病菌研究中的应用进行简要的综述。限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,简称RFLP)。RFLP是出现最早,现在依然使用最普遍的DNA标记。RFLP技术的基本原理是:不同材料的DNA用已知的限制性内切酶消化后,产生许多大小不等的DNA片段,电泳分离、Southern印迹转移到硝酸纤维膜上,用放射性标记的探针与膜上变性的酶切DNA进行杂交,放射自显影,即可显示出不同材料的多态性图谱,即显示出所分析的DNA序列间的RFLP。目前,有两种方法可进行DNA的RFLP分析:①如原理中所述,其中用作RFLP的探针可以是特殊基因的DNA克隆、cDNA克隆、随机的基因组DNA克隆和合成的低聚核苷酸克隆。②对那些分子量较小的DNA样本(如线粒体DNA、核糖体DNA等),可在酶切后对其产物直接电泳,将不同大小的限制性酶切DNA片段分离,从而得到该DNA的RFLP图谱。RFLP反映了DNA水平上的差异,而差异往往是由变异造成的,变异分为单碱基突变型和结构重排型两大类。单碱基因突变发生在限制性内切酶的位点上,致使酶切位点增加或丢失而产生多态性,这称为点多态性。结构重排型是指DNA序列内部发生了较大的变化,如插入或缺失,从而使酶切位点间的长度发生改变,造成了片段长度的多态性。这些变异经酶切、分离、杂交、放射自显影就会使RFLP带的特征发生改变,由此对生物的变异进行分析。目前,在晚疫病病菌的研究中,RFLP技术主要用于病菌群体的遗传分化,如:分析一个国家或地区致病疫霉种群的基因结构及变化;有性生殖的发生情况等。1992年Stephen等利用RG57探针分析了墨西哥中北部的晚疫病病菌遗传结构,发现墨西哥中部病菌的遗传多样性非常明显,这也充分说明这个地区由于A2交配型的存在有性重组率高于其他地区[1];1993年Drenth等将采自荷兰6个地区的153个菌株分为35个RG-57基因型,明确了荷兰不同地区基因型的分布情况[2];1998年Lionel等利用RG57探针和同工酶基因型研究发现采自番茄和马铃薯上的晚疫病病菌基因型明显不同,说明晚疫病病菌有寄主专化作用[3]。目前利用该标记对来自全世界的成千上万的马铃薯晚疫病病菌建立了指纹图谱数据库。1990年Williams等人首次应用随机引物扩增寻找多态性DNA片段作为分子标记,并将此法命名为随机扩增多态性DNA(Random amplified polymorphism DNA,RAPD)[4]。RAPD技术是建立在PCR技术基础上的,利用随机的短的脱氧核苷酸序列作为PCR引物(通常为十聚体)以基因组DNA为模板进行PCR扩增。通过凝胶电泳分离得到扩增产物DNA片段的多态性。RAPD所用的一系列引物DNA序列各不相同,但对任一特定的引物,它同基因组DNA序列有特定的结合位点。如果基因组在这些有特定位点的区域发生DNA插入,缺失或碱基突变就可导致这些特定结合位点发生相应的变化。通过对PCR产物的检测可测出基因组DNA在这些区域的多态性。在RAPD分析中可用一系列的引物使检测区域扩大至整个基因组。因此,RAPD可以对整个基因组DNA进行多态性分析,适于研究生物的遗传多样性及生物的遗传关系,进行遗传作图和基因定位等。在晚疫病病菌的研究中,RAPD技术一般多用于研究种内群体遗传分析。如:Mahuku[5]对1994~1996年采自加拿大的141个菌株进行RAPD分析,将其分为21个组,分析表明97%的变异来自于种群内,3%的变异来源于种群间。2001年朱杰华等利用RAPD方法研究了马铃薯晚疫病病菌DNA多态性与A2交配型的关系[6]。2005年侯淑英等使用178个10bp随机引物对晚疫病病菌的甲霜灵抗性性状进行RAPD分析,得到一个相对稳定的与甲霜灵抗性连锁或相关的标记S500,为晚疫病的有效防治和病原菌的抗药性治理提供了理论依据和实践方法[7]。AFLP是1993年由荷兰keygene公司科学家Zabeau等人发明的一种DNA分子标记技术[8],该技术的基本原理是:对基因组DNA进行限制性酶切片段的选择性扩增。主要步骤是:将基因组DNA进行限制性酶切后,将特定的接头连接在DNA酶切片段的两端,从而形成一个带接头的特异片段,通过接头序列和PCR引物3'端的识别,进行PCR扩增,最终经过变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,通过银染或放射自显影检测。AFLP技术实际上是将RFLP和PCR相结合的一种技术[9~10]。该技术既继承了RFLP的稳定性,又具有PCR反应快速、灵敏的特点,同时克服了RFLP和RAPD的缺点,且扩增的带纹多(50~100条)。AFLP的大多数扩增片段与基因组的单一位置相对应,实验重复性高,该标记为孟德尔式遗传。目前,AFLP 技术主要用于构建晚疫病病菌的基因连锁图谱,此外也被用来检测病菌的基因型。1997年,Van de Lee[11] 等完成了一张比较完整的致病疫霉基因连锁图谱,这张图谱包括183个AFLP标记,7 个RFLP 标记和交配型基因座,包括10个主要的连锁群和7个次要的连锁群,共827cm,并证明主要连锁群中的标记来自于两个亲本,而次要连锁群中的标记来自A1 交配型的亲本或来自A2 交配型的亲本。同时还证明了致病疫霉是同核型的二倍体[12]。Cooke[13],Flier等[14]以及Knapova等[15]利用AFLP对来自墨西哥和欧洲的病菌研究发现,墨西哥的菌株几乎每个都具有其特异的AFLP基因型,而欧洲的菌株平均每两个就具有一个特异的AFLP基因型。AFLP带型在分裂中能够保持稳定,并遵循孟德尔遗传规律[16]。交配型及其所在的连锁群的其他标记均不遵循孟德尔遗传规律。AFLP技术用于构建基因连锁图谱,使我们可以从基因水平了解晚疫病病菌,为更好地研究晚疫病病菌、防治晚疫病提供理论依据。短序列重复即SSR(Short sequence repeat)、又称微卫星DNA或短串联重复(Short tandem repeat,STR),这是一类由1~5个核苷酸为重复单位组成的长达几十个核苷酸的串联重复序列[17]。同一类的微卫星DNA可分布于整个基因组的不同位置上,由于基本单元重复次数的不同以及重复程度的不完全而造成了SSR位点的多态性,这种多态性有比较丰富的信息量。由于在每个微卫星DNA两端的序列是相对保守的单拷贝序列,因而可根据两端的序列设计一对特定的引物,扩增每一位点的微卫星序列,再经凝胶电泳比较扩增产物的长度变化,即可显示不同基因型个体在微卫星DNA位点上的多态性[18~19]。SSR技术的特点是:呈共显性遗传;在数量方面没有生物学上的限制;其标记带型简单,记录的条带一致、客观、明确;采用PCR技术进行检测只需少量DNA样品,且质量要求不高,即使是部分降解的样品也可进行分析;每个位点均有许多等位形式;另外,它还具有多态性高、实验程序简单等优点[19~20],所以自1989年SSR技术产生以来,被广泛应用于基因定位和QTLs分析、DNA指纹和品种鉴定、种质资源保存和利用、系谱分析和标记辅助育种[18]。2001年Knapova [21]等首次利用SSR技术研究了瑞士和法国的马铃薯和番茄的晚疫病病菌群体的遗传多样性,同时分析了致病疫霉有性杂交F1代的分离情况,结果发现被测菌株群体具有丰富的遗传多样性。试验中6个SSR位点被鉴定出来,其中的3个SSR位点具有多样性,他们又从3个SSR位点中选择了2个SSR位点的引物(Pi4G和Pi4B)对来源于瑞士和法国的176个菌株进行了鉴定,分别得到4种和6种不同长度的等位基因片段(共21个组合)。2002年G.Knappva [22]等再次报道了法国和瑞士的晚疫病病菌的表型和基因型结构,他们研究的马铃薯晚疫病病菌株中存在11个SSR基因型,其中以A-03和A-06为主,另有1/9的菌株是其他SSR基因型;但尚未发现SSR基因型与菌株的交配型、对甲霜灵的敏感性和菌株来源的地域性有相关关系。Knappva[21~22]等的研究揭示了SSR分子标记适用于分析晚疫病病菌的群体结构,同时也指出了SSR标记技术在病菌应用的潜力和存在的问题,如stutter bands、非特异扩增等。但同其他分子标记相比,SSR技术具有位点特异的优点,有利于分析全球马铃薯晚疫病病菌的种群结构。若能对SSR标记技术进行大量人力、物力的投入,获得更多理想的SSR标记,这种技术将具有巨大的应用潜力。2004年朱杰华用AFLP分子标记研究了河北、云南、四川及黑龙江省的50个晚疫病病菌株的DNA指纹,当欧式距离为10时,50个菌株被聚类为4组,分组情况与菌株来源的地理位置相关,表明马铃薯晚疫病病菌的DNA的AFLP分子标记多样性与病菌的地理来源及病菌对甲霜灵的抗性有一定相关性,但未发现和生理小种及交配型有相关性[23]。2004年魏长拴用RAPD分子标记分析了我国马铃薯主产区的晚疫病病菌的亲缘关系和遗传相关性[24]。2005年郭军等利用SSR、AFLP和线粒体DNA单倍型技术分析了内蒙古地区马铃薯晚疫病病菌的遗传多样性。2006年姚国胜等利用SSR技术测定出中国菌株中存在7种SSR基因型[25]。总的来说,分子标记技术在我国马铃薯晚疫病病菌的研究中应用还很少,今后应进一步将各种分子标记技术应用到马铃薯晚疫病病菌的研究中。综上所述,DNA分子标记技术在马铃薯晚疫病病菌遗传研究上具有重要应用价值,并已取得了可喜的进展,展现了广阔的应用前景。现已研究了晚疫病病菌发源和墨西哥以外地区A2交配型的来源,为晚疫病的防治提供理论基础;明确了一个地区不同菌株之间的基因结构变化,遗传结构差异。利用DNA分子标记技术绘制晚疫病病菌的连锁图谱,使两个标记间距离足够小;借助高密度标记对一些性状基因进行准确定位,从而为抗病育种研究提供科学依据;并运用分子标记找到与目的基因紧密连锁的标记,如在致病疫霉中找到与抗瑞毒霉基因连锁的标记,与毒力基因连锁的标记,从而指导晚疫病的防治。由于上述几种分子标记都各有优缺点,任何一种均不能满足晚疫病病菌遗传研究的所有要求。所以如何更好地利用各种分子标记研究马铃薯晚疫病病菌,预防和控制马铃薯晚疫病,仍需不断研究。 -
报告Molecular Analysis of Ralstonia solanacearum in Guangdong
出版时间:2007茄科青枯菌[Ralstonia solanacearum(E.F.Smith)Yabuuchi et al.]是世界上最重要植物病原细菌之一。该病原菌的寄主范围很广,可侵染44科数百种植物。该病原菌种内存在明显的异质性和多样性,根据其寄主范围或对碳水化合物利用差异,分别划分为5个生理小种和5个生化变种。广东地处亚热带,气候温暖湿润,终年适合作物生长,这为茄科青枯菌侵染引起的作物青枯病发生与流行创造了条件,每年均造成较大的经济损失。以前的研究结果表明,广东茄科青枯菌存在明显的致病性分化。为了深入研究该病原菌种内分化,对采自广东各种作物上的茄科青枯菌菌株进行了分子分析。从200条随机引物中筛选出17条扩增带清晰且扩增结果稳定的随机引物,用这些引物分别对31株茄科青枯病菌DNA进行RAPD分析。结果显示,17条随机引物扩增带主要分布于0.35~3.5kb范围,共扩增出523条带,其中468条为多态性带,占89.5%,说明广东茄科青枯菌DNA存在较丰富的遗传多态性。RAPD结果的聚类分析可以将上述31株茄科青枯菌划分为4个簇群,这些簇群与寄主植物间存在较高程度的相关性,说明青枯菌的致病性分化是由于其DNA上的差异所致。对分离自广东各地番茄、茄子、烟草、辣椒、空心菜、沙姜、姜、马铃薯、花生、菊花、桑树和藿香等12种作物21株茄科青枯菌菌株16S rDNA和16S~23S ITS克隆和序列分析表明,这些菌株16S rDNA序列间同源率大于99%,ITS序列间同源率大于93%,说明广东茄科青枯菌16S rDNA序列高度保守,而16S~23S rDNA ITS序列也很保守。 -
报告Preliminary Studies on the Biological Characteristics of the Pathogen Causing Stemphylium White Spot of Garlic in Hubei Province
出版时间:2007大蒜(Allium sativum L.)为百合科葱属草本植物,别名胡蒜(崔豹《古今注》)、葫(《名医别录》)等,原产中亚,栽培历史悠久。味辛,性温;入脾、胃、肺经;有行滞气、暖脾胃、消癥积、解毒、杀虫之功效。近几年来,随着大蒜的市场需求越来越大,在湖北省当阳、广水等地已经开始大规模种植,并成为当地农业增效、农民增收的支柱产业。但随着种植面积的不断扩大,加上大蒜品种单一,为病害的发生创造了有利条件。2005~2007年在湖北省当阳市大蒜生产基地调查发现,大蒜白斑病发生十分严重,植株发病率在95%以上,均产损失超过2/3,部分田块绝收,严重影响了大蒜的产量与品质。大蒜白斑病主要为害叶片。叶片最初受侵染后,上部出现许多卵圆形或圆形小白斑,部分白斑湿度大时会演变成紫斑,后期叶片变枯黄。2006年4月从湖北省当阳市采集典型大蒜病叶,经分离、鉴定得到大蒜白斑病菌(Stemphylium solani),对其生物学特性进行研究。结果表明,在PSA培养基上,该菌菌丝在5~35℃均可生长,最适生长温度为20~30℃;pH值在4~10均能生长,最适pH值为6~8。在查彼克液体培养基中,病菌能利用多种碳、氮源,其中以淀粉为最佳碳源,谷氨酸为最佳氮源。菌丝的致死温度为55℃,10min。对9种供试杀菌剂采用菌丝生长速率法进行室内药剂筛选,研究表明,40%福星乳油对菌丝生长抑制效果最好,而75%百菌清可湿性粉剂对其抑制效果最差。 -
报告南方果树虫害
出版时间:2018【症状】 柑橘大实蝇,又名柑橘大果实蝇,幼虫称为柑蛆、蝇蛆。主要为害甜橙、酸橙、红橘、温州蜜柑等。成虫产卵于柑橘幼果中,幼虫孵化后在果实内部穿食瓤瓣,导致果实出现未熟先黄、黄中带红现象被害果实严重腐烂,提前脱落,完全失去食用价值,严重影响柑橘产量和品质。柑橘大实蝇为害引起落果【形态特征】 成虫体长10~13mm,翅展约21mm,全体呈淡黄褐色,复眼金绿色。老熟幼虫体长15~19mm,乳白色圆锥形,前端尖细,后端粗壮。【发生规律】 一年发生1代,以蛹在土中越冬。成虫于4月下旬开始羽化出土,5月为盛期,产卵盛期为6月中旬至7 月上旬。柑橘大实蝇雄虫柑橘大实蝇雌虫【防治方法】 (1) 农业防治:①果实套袋。②在8月下旬至11月,随时摘除产卵痕迹明显的青果、被幼虫蛀害 “着色不正常” 的黄果,彻底捡拾掉落的虫果,并对这些果实进行集中处理。(2) 物理生物防治:成虫羽化开始后进行诱杀,如用频振式杀虫灯、糖醋液、性引诱剂等诱杀成虫。(3) 化学防治:关键要在成虫出土和幼虫入土时进行地面喷药。药剂有65%辛硫磷1000~2000倍液、20%灭扫利、20%灭杀菊酯或25%溴氰菊酯2000~3000倍液等。被害果实内的幼虫柑橘大实蝇蛹【症状】 柑橘小实蝇,又名黄苍蝇、果蛆等,主要为害柑橘、桃、李等果树。以幼虫蛀食果肉为害,导致果实腐烂、脱落,为害极其严重,防治不及时常造成绝收。【形态特征】 成虫头部黄色或黄褐色,肩胛、背侧胛完全黄色。卵乳白色,长约1mm,宽约0.1mm;3 龄老熟幼虫长7~11mm;蛹椭圆形,长4~5mm,宽1.5~2.5mm,淡黄色。【发生规律】 一年发生3~5 代,以蛹越冬。发生不整齐,同一时期各种虫态并存。柑橘小实蝇幼虫柑橘小实蝇成虫【防治方法】 (1) 农业防治:及早摘除被害的果实并捡净落地的虫果,集中深埋;果实初熟前进行果实套袋;冬季清园挖蛹,减少虫源;加强预测预报,建立统一防治措施。(2) 化学防治:在幼虫脱果入土盛期和成虫羽化盛期地面喷洒50%辛硫磷800~1000倍液;主要为害期树冠喷洒90%晶体敌百虫或50%马拉硫磷乳油800~1000倍液。树冠喷药防治成虫。在5—11月成虫盛发期,用1%水解蛋白加90%晶体敌百虫600倍液;或用90%晶体敌百虫1000倍液加3%红糖;或用20%灭扫利1000倍加3%的红糖制成毒饵,喷布果园及周围杂树树冠。10天喷1次,连喷3~4次,连续防治2~3年。【症状】 杨梅果蝇是杨梅的主要害虫之一,在杨梅果园及其周边环境中都有发生,且分布较广泛。以雌果蝇产卵于成熟的杨梅果实乳柱上,孵化后的幼虫 (蛆) 蛀食为害。引起受害果实凸凹不平、霉变和落果,影响品质、产量和贮藏性,严重时绝收。杨梅果蝇繁殖力强,有时呈暴发性为害。【形态特征】 杨梅果蝇体形较小,一般体长约2.5mm。卵长约0.5mm,呈白色椭圆形,具有绒毛膜和卵黄膜。幼虫白色,头尖尾钝。【发生规律】 杨梅果蝇在田间世代重叠,不易划分代数,无严格越冬过程。果蝇发生盛期在6月中下旬 (果实成熟期) 和7月中下旬 (果实采收后),6月中下旬的发生为害会造成经济损失。清晨和黄昏为成虫的日活动高峰期。【防治方法】 (1) 农业防治:①加强果园水肥管理和修剪,增强树势,确保果园通风透光。②及时清理果园,尤其是落地果、腐烂的杂物及发酵物等,以减少虫源。(2) 化学防治:①药液诱杀。在杨梅落花后,用敌百虫、香蕉、蜂蜜、食醋按10∶10∶6∶3的比例,配制成诱杀液,每亩投放10份。②药剂喷施落地果。在成熟期前 (即5月中旬) 用低毒低残留的1.8%阿维菌素喷洒落地果,喷后及时清理。杨梅果实受害症状杨梅果蝇幼虫【症状】 桃蛀螟,俗称蛀心虫、食心虫。主要以幼虫为害桃树、梨、石榴、枇杷等的果实。幼虫孵化后多从果蒂或果与叶、果与果相接处蛀入果心。被害果内和果外都有大量虫粪和黄褐色胶液。【形态特征】 幼虫体长15~25mm,暗红色,头部深褐色,前胸背板褐色,各节体都有灰褐色斑。【发生规律】 越冬代成虫于5月上旬发生,成虫夜间产卵于果实上,两果相接处产卵较多。卵7天左右孵化成幼虫,蛀果为害。南方地区一年发生4~5代,为害果树的一般为第一、第二代幼虫。9月下旬,老熟幼虫爬到树皮缝隙或树洞等处结茧越冬。受害果实堆积大量虫粪和黄褐色胶液桃蛀螟幼虫【防治方法】 (1) 农业防治:①冬季清园,刮除老翘皮,清除越冬茧。生长季及时摘除被害果,集中处理,秋季采果前在树干上绑草把诱集越冬幼虫集中杀灭。②合理剪枝和疏果,避免枝叶郁闭和果与果相互密接。③幼果期套袋保护。(2) 物理防治:利用黑光灯、糖醋液、性诱剂诱杀成虫。(3) 化学防治:在各代成虫产卵期喷洒30%乙酰甲胺磷乳剂500倍液,或用50%杀螟松乳剂1000倍液,或用90%晶体敌百虫1000倍液,或用20%速灭杀丁乳油或用20%杀灭菊酯乳剂3000液,或用2.5%溴氰菊酯5000倍液等。李受桃蛀螟为害症状【症状】 桃小食心虫为害桃、梨、李、杏、枣等果树。主要以幼虫蛀果为害,导致果实畸形,果内虫道纵横,并充满大量虫粪。【形态特征】 幼虫体长13~16mm,头黄褐色,前胸盾黄褐色至深褐色,臀板黄褐色或粉红色,其他部分桃红色。桃小食心虫幼虫桃小食心虫蛀入口【发生规律】 湖南地区一般1年发生3代,以老熟幼虫在土中结茧越冬。越冬幼虫主要分布在树干周围1米以内。翌年4月开始破茧出土。第一代幼虫盛发期在7月下旬至8月上中旬,第二代幼虫盛发期在8月中下旬至9月上旬。【防治方法】 (1) 农业防治:①越冬幼虫出土前,用宽幅地膜覆盖在树盘地面上,防止越冬代成虫飞出产卵。②绑草绳诱杀:在越冬幼虫出土前,用草绳在树干基部缠绑2~3圈,诱集出土幼虫入内化蛹,定期检查捕杀。③套袋:幼果期即套袋保护。④摘除虫果:每 10 天摘一次虫果,杀灭果内幼虫。(2) 物理防治:果园安置黑光灯或利用性诱剂诱杀成虫。(3) 化学防治:①撒毒土防治:在桃小食心虫幼虫出土高峰前,每亩用15%乐斯本颗粒剂2千克与细土25~50千克充分混合,均匀地撒在树干下地面,整平。②在产卵盛期及幼虫孵化初期进行药剂防治,可用的药剂有48%乐斯本乳油1000~1500倍液、50%杀螟松乳油1000倍液、20%杀灭菊酯乳油2000~4000倍液、2.5%氟氯菊酯 (天王星) 乳油1500倍液等。葡萄瘿蚊上只发生1代。品种之间受害程度有差异,郑州早红、巨峰、龙眼受害较重,保尔加尔、葡萄园皇后、玫瑰香次之。主要发生在吉林、辽宁、山东、陕西、山西。【生活习性】 成虫白天活动、飞行力不强成虫产卵较集中,产卵果穗上的果实多数都着卵,葡萄架的中部果穗落卵较多。【为害症状】 以幼虫在葡萄果心蛀食,并排粪其中,致使果粒不能正常生长,畸形,不能食用。【防治方法】(1) 2.5%高效氯氟氰菊酯水乳剂 (中等毒) 使用40~50毫升/亩喷雾。使用的安全间隔期为7天,一季作物最多施用次数2次。(2) 5%甲维·高氯氟水乳剂 (中等毒) 使用8~12克/亩喷雾。使用安全间隔期为7天,每季作物最多可以使用3次。(3) 3%甲维·啶虫脒微乳剂 (低毒) 使用40~50克/亩喷雾。使用安全间隔期为7天,每季作物最多使用2次。【症状】 柑橘凤蝶主要以幼虫为害柑橘新梢、叶片,造成叶片残缺不全。严重时,被害的叶片只存叶脉,嫩枝光秃,伤口易感染溃疡病。【形态特征】 柑橘凤蝶幼虫体长4~5cm,黄绿色,后胸背两侧有眼斑;1龄幼虫黑色,刺毛多;2~4龄幼虫黑褐色,有白色斜带纹,虫体似鸟粪。卵近球形,直径1.2~1.5mm,初黄色后变深黄,孵化前紫灰至黑色。【发生规律】 湖南地区一年发生4~5代,以蛹在叶背或枝条上越冬,翌年5月上中旬羽化为成虫。白天活动,吸食花蜜补充营养后交尾产卵,卵散产于枝梢嫩叶上。卵经3~7天孵化为幼虫,幼虫共5龄。幼虫老熟后吐丝固定尾端,系住身体附着在枝条上化蛹。3—11月,田间均可发现成虫飞翔。【防治方法】 (1) 农业防治:人工捕杀幼虫和蛹。(2) 生物防治:保护和引放天敌。为保护天敌可将蛹放在纱笼里置于园内,寄主蜂羽化后飞出再行寄生。(3) 化学防治。可用每克300亿孢子青虫菌粉剂1000~2000倍液、40%敌·马乳油1500倍液、40%菊·杀乳油1000~1500倍液、90%晶体敌百虫800~1000倍液、10%溴·马乳油2000倍液、50%杀螟松或45%马拉硫磷乳油1000~1500倍液,于幼虫期喷洒。凤蝶幼虫凤蝶为害的叶片凤蝶的卵【症状】 柑橘潜叶蛾,又名潜叶虫、绘图虫、鬼画符、橘潜蛾。主要以幼虫潜入嫩叶和果实的表皮下取食,蛀成弯曲的隧道,使叶片不能正常生长。为害严重时,所有新叶卷曲成筒状,破坏光合作用,导致叶片早落,树冠生长受阻,其伤口易感染病害。【形态特征】 成虫体长仅有2mm,翅展5mm左右。卵扁圆形,长0.3~0.4mm,白色,透明。幼虫体扁平,纺锤形,黄绿色。蛹扁平纺锤形,长3mm左右,初为淡黄色,后变深褐色。幼虫在叶片上取食,蛀成弯曲的隧道柑橘潜叶蛾为害秋梢症状【发生规律】 一年发生9~10代,以老熟幼虫和蛹在柑橘的秋梢或冬梢上过冬。以7—9月夏秋梢抽发期为害最严重。【防治方法】 (1) 农业防治:杜绝虫源,防止传入;结合冬季修剪,剪除被害枝叶并烧毁。(2) 化学防治:成虫羽化期和低龄幼虫期是防治最佳时期,防治成虫可在傍晚进行,防治幼虫宜在晴天午后用药。可喷施10%二氯苯醚菊酯2000~3000倍液、2.5%溴氰菊酯2500倍液、25%杀虫双水剂500倍液 (杀虫和杀卵效果均好)、25%西维因可湿性粉剂500~1000倍液、5%吡虫啉乳油1500倍液。每隔7~10 天喷1 次,连续喷3~4次。【症状】 桃天蛾又称枣桃六点天蛾,我国南北均有分布。主要为害桃、樱桃、李、杏、苹果、梨等果树,主要以幼虫为害叶片,可将叶片吃成孔洞或缺刻,甚至吃光,仅剩下叶柄,严重影响果树树势和果实产量。【形态特征】 老熟幼虫体长约80mm,绿色或黄褐色,体表密生黄白色颗粒;头部三角形,青绿色;第四节后每节气门上方有黄色斜条纹,尾角较长,斜向后方,生于第八腹节背面。【发生规律】 该虫在南方一般发生3 代,以蛹在土壤中越冬,5~6月羽化开始为害,为害期可持续到10月。10月后老熟幼虫陆续入土化蛹越冬,入土深度在10cm以内。【防治方法】 (1) 农业防治:冬季翻耕树盘挖蛹;捕捉幼虫。为害轻微时,可根据树下虫粪搜寻幼虫,捕杀。(2) 物理防治:用黑光灯诱杀成虫。(3) 化学防治:以幼虫期防治为佳。常用药剂:90%晶体敌百虫1500倍液或80%敌百虫1000倍液、20%杀灭菊酯乳油3000倍液、10%安绿宝乳油3000倍液。发生严重时,可在3龄幼虫之前喷洒25%天达灭幼脲3 号1500倍液、2%阿维菌素2000倍液1~2次。桃天蛾幼虫桃天蛾为害桃叶【症状】 蓑蛾,又名袋蛾,分布遍及全国,其中以长江及其以南各省受害较重。主要为害柑橘、桃、杨梅、葡萄、柿子、枇杷、石榴、核桃等果树,是多食性的食叶害虫,主要以幼虫为害。低龄幼虫咬食叶肉,形成不规则半透明斑;高龄幼虫取食叶片形成不规则孔洞。严重时局部叶片全部被吃光,甚至引起果树死亡。【形态特征】 幼虫用丝、枝叶碎屑和其他残屑构成长 6~15cm的袋状外壳,并在其中化蛹。雄蛾体粗大,有翅;雌蛾蛆形,无翅,留在袋内交配和产卵。大蓑蛾护囊大蓑蛾幼虫【发生规律】 一年发生1~2代,以老熟幼虫在护囊内越冬,翌年4—5月间成蛹、羽化。幼虫6月上旬孵化,一般7—9月是幼虫为害高峰期;10月开始封闭囊口越冬。夏季高温干旱的年份为害较严重。【防治方法】 (1) 农业防治:结合整形修剪,及时人工摘除虫囊,集中消灭。(2) 物理生物防治:①用黑光灯或性激素诱杀雄成虫。②喷洒每克含100亿个孢子的青虫菌1000倍液。(3) 化学防治:在幼虫孵化盛期和幼龄期,喷布5%高效氯氟菊酯乳油或2.5%功夫乳油2000~3000倍液,90%敌百虫1000倍液,50%马拉松乳剂1000倍液。喷药时要充分润湿护囊,喷药时间以傍晚最好。【症状】 叶蝉为同翅目叶蝉科昆虫的通称,多为害叶片。以成虫、若虫吸汁为害,被害叶初现黄白色斑点,渐扩成片,严重时全叶苍白早落。【形态特征】 成虫体长2~15mm,后足胫节有棱脊,棱背上有3~4列刺状毛,这是叶蝉最显著的识别特征。【发生规律】 一年发生4~6代,以成虫在落叶、杂草或低矮绿色植物中越冬;翌春桃、李、杏发芽后出蛰为害。6月虫口数量增加,8—9月最多且为害严重,秋后以末代成虫越冬。成虫、若虫喜白天活动,在叶背刺吸汁液或栖息。成虫善跳,可借风力扩散,旬均温15~25℃适宜其生长发育,28℃以上及连阴雨天气虫口密度下降。叶蝉为害猕猴桃叶片症状小绿叶蝉成虫【防治方法】 (1) 农业防治:冬季清园,消灭越冬成虫。(2) 化学防治:掌握在越冬代成虫迁入后,各代若虫孵化盛期及时喷洒20%叶蝉散 (灭扑威) 乳油800倍液、25%速灭威可湿性粉剂600~800倍液、20%害扑威乳油400倍液、50%马拉硫磷乳油1500~2000倍液、20%菊马乳油2000倍液、2.5%敌杀死或功夫乳油4000~5000倍液、50%抗蚜威超微可湿性粉剂3000~4000倍液、10%吡虫啉可湿性粉剂2500倍液、20%扑虱灵乳油1000倍液,各种药剂最好轮换使用,每种连续使用次数不要超过3次。【症状】 梨木虱是中国梨树主要害虫之一。以成虫、若虫刺吸叶、芽、嫩枝梢汁液为害,同时分泌黏液,诱生煤污病等病害,造成早期落叶,同时污染果实,严重影响梨的产量和品质。梨木虱幼虫【形态特征】 冬型成虫黑褐色,夏型成虫黄绿色至淡黄色;卵一端稍尖具有细柄。越冬成虫早春产卵黄色,夏季卵均为乳白色。若虫,体扁椭圆形。初孵若虫淡黄色,夏季各代若虫体色随虫体变化由乳白色变为绿色,老若虫绿色。【发生规律】 在我国南方一年发生5~6代,以受精雌成虫在梨园的树皮缝、落叶下、杂草丛中越冬。在梨花芽膨大期开始出蛰为害,6—7月为害最严重,因各代重叠交错,全年均可为害。梨木虱幼虫为害梨叶症状【防治方法】 (1) 农业防治:彻底清园,冬季刮掉老树皮;清除园内杂草、落叶。(2) 化学防治:①2月中旬越冬成虫出蛰盛期喷药,可选用1.8%爱福丁乳油2000~3000倍液,5%阿维虫清5000倍液等。②在第一代若虫发生期 (约谢花3/4时)用10%吡虫啉2000倍液+灭扫利2000倍液液喷雾。③5—9月喷施10%吡虫啉2000倍液+1.8%阿维菌素3000倍液+百磷3号1300倍液+0.1%洗衣粉,防效显著。葡萄十星叶甲以成、幼虫食芽、叶成孔洞或缺刻,残留1层绒毛和叶脉,严重的可把叶片吃光,残留主脉。【形态特征】 成虫体长约12mm,椭圆形,土黄色。头小隐于前胸下;复眼黑色;触角淡黄色丝状,末端3节及第4节端部黑褐色;前胸背板及鞘翅上布有细刻点,鞘翅宽大,共有黑色圆斑10个略成3横列。足淡黄色,前足小,中、后足大。后胸及第1~4腹节的腹板两侧各具近圆形黑点个。卵椭圆形,长约1mm,表面具不规则小突起,初草绿色,后变黄褐色。幼虫体长12~15mm,长椭圆形略扁,土黄色。头小、胸足3对较小,除前胸及尾节外,各节背面均具两横列黑斑,中、后胸每列各4个,腹部前列4个,后列6个。除尾节外,各节两侧具3 个肉质突起,顶端黑褐色。蛹金黄色,体长9~12mm,腹部两侧具齿状突起。【生活史及习性】 长江以北年生l代,江西2代,少数1代,云南2代,均以卵在根际附近的土中或落叶下越冬,南方有以成虫在各种缝隙中越冬者。越冬卵于4月中旬孵化,5月下旬化蛹,6月中旬羽化,8月上旬产卵,8月中旬孵化,9月上旬化蛹,9月下旬羽化,交配及产卵。以卵越冬,月成虫死亡。以成虫越冬的于3月下旬至4月上旬开始活动,并交配产卵。【防治方法】(1) 秋末及时清除葡萄园枯枝落叶和杂草,及时烧毁或深埋,消灭越冬卵。(2) 振落捕杀成、幼虫,尤其要注意捕杀群集在下部叶片上的小幼虫。(3) 必要时,喷洒5%氯氰菊酯乳油3000倍液、2.5%功夫乳油3000倍液、30%桃小灵乳油2500倍液、10%天王星乳油6000~8000倍液。【症状】 桃红颈天牛主要为害桃、杏、李、梅、樱桃等果树。主要以幼虫在树干蛀隧道,造成树干中空,皮层脱离,树势衰弱,以致枯死。在树干的蛀孔外及地面上常大量堆积红褐色粪屑。【形态特征】 成虫体长28~37mm,黑色、有光泽。前胸背板棕红色或黑色,背有4个瘤状突起,两侧各有一刺突。雄虫体小、触角长。卵长6~7mm,乳白色,形似大米粒。幼虫体长50mm左右。小幼虫乳白色,大幼虫黄白色。前胸背板扁平、长方形,前缘黄褐色,后缘色淡。【发生规律】 一般2~3年发生1代,以幼虫越冬。南方各省于5月下旬出现成虫。6月出现幼虫为害,幼虫期维持23个月。除短暂的越冬休眠外,幼虫期内持续蛀害。桃红颈天牛成虫树干蛀孔外有粪屑【防治方法】 (1) 农业防治:5—7月的雨后晴天中午在主枝或主干上捕杀成虫。经常检查树干,发现有新鲜虫粪排出,用小刀在幼虫为害部位顺树干纵划2~3刀杀死幼虫。(2) 化学防治:5—8月喷50%杀螟松乳油800倍液,捕杀成虫。对蛀干幼虫,用药物毒杀,将虫孔内粪便清除干净后用80%敌敌畏乳剂或50%马拉硫磷乳油等加水50倍液,用铗子裹着小棉球,蘸上药物,塞入虫孔;或用磷化铝片剂分成小粒后塞入虫孔,再用湿泥土堵封虫孔。【症状】 星天牛别名柑橘星天牛。全国大部分省份均有分布,普遍发生,局部地区为害严重,影响树势生长,甚至导致全株枯死。该虫以幼虫蛀害树干基部和主根 (树干下常有成堆虫粪),严重影响到树体的生长发育。成虫咬食嫩枝皮层,形成枯梢,也啃食叶片成缺刻状。【形态特征】 成虫:漆黑色,略带金属光泽,体长2~4cm。头部和腹面被银灰色和蓝灰色细毛。前胸背板中瘤明显,两侧具尖锐粗大的侧刺突。幼虫老熟时体长4~6cm,乳白色,圆筒形。星天牛成虫星天牛幼虫【发生规律】 2年完成1代,以幼虫在木质部坑道内越冬。翌年3月间开始活动,4月幼虫老熟化蛹。5月上旬开始羽化,5月末至6月初为成虫出孔高峰期。从5月下旬至7月下旬均有成虫活动。卵期9~15天,6月中旬孵化,孵化高峰在7月中、下旬。9月末绝大部分幼虫转而沿原坑道向下移动,至蛀入孔再另蛀新坑道向下部蛀害,11月开始越冬。【防治方法】 (1) 农业防治:树干涂白,拒避天牛成虫产卵。于5月上旬用涂白剂 (石灰∶硫黄∶水=16∶2∶40) 和少量皮胶混合后涂于树主干上。人工捕杀成虫,锤杀卵及初孵幼虫。(2) 化学防治:在幼虫蛀入木质部之前,在主干受害部位用刀划若干条纵伤口,涂以50%敌敌畏柴油溶液 (1∶9),药量以略有药液下淌为宜。若在幼虫蛀入木质部之后,要先将排粪孔处的虫粪和蛀屑清理干净,再塞入磷化铝片、丸等,并用泥封死蛀孔及排粪孔。梨小食心虫【为害症状】 梨小食心虫在各地果园均有发生,为害梨、桃、李、杏,严重影响果品质量和产量,主要以幼虫蛀食新梢和果实。一代幼虫多为害新梢,使新梢萎蔫下垂、干枯。二、三代幼虫为害果实可直达果心,常在果实表面留有小圆孔或小黑斑。【形态特征】 末龄幼虫体长10~13mm。头部黄褐色,其他部分淡黄白色或粉红色。蛹体长6~7mm,纺锤形,黄褐色,腹部背面有两排短刺,排列整齐。【发生规律】 梨小食心虫一年可发生3~4代。以老熟幼虫在梨树和桃树的老翘皮下、根颈部、杈丫等处结茧越冬,翌年4月上旬开始化蛹,4月下旬羽化,为害期一般在4—9月。【防治方法】 (1) 农业防治:①冬季刮除老翘皮,集中烧毁。秋季在越冬幼虫脱果前,在树干或主枝基部绑草,诱集幼虫越冬,冬前解下烧毁。②及时清理虫果、虫梢,集中深埋。(2) 物理生物防治:①黑光灯诱杀成虫;②糖醋液诱杀;③在卵发生初期,释放松毛虫赤眼蜂,每5 天放一次,共放5 次,每亩每次放蜂量为2.5万头左右。(3) 化学防治:发现有幼虫蛀果时,50%杀螟松1000倍液、20%杀灭菊酯2000~3000倍液喷雾,均有良好的防治效果。梨小食心虫幼虫梨小食心虫幼虫为害嫩梢柑橘花蕾蛆【为害症状】 柑橘花蕾蛆,又名橘蕾瘿蚊、花蛆等。成虫在柑橘花蕾上产卵,孵出的幼虫蛀害花蕾,导致花蕾膨大、变短,花瓣变形,不能正常发育及开花结果,最后花朵脱落。柑橘花蕾蛆为害花蕾状【形态特征】 雌成虫体长1.5~1.8mm,暗黄褐色,周身密被黑褐色柔软细毛。头扁圆、复眼黑色。前翅膜质透明被细毛,在强光下有金属闪光。幼虫长纺锤形、橙黄色;蛹黄褐色、纺锤形,长约1.6mm;卵长椭圆形、无色透明,长约0.16mm。放大镜下的柑橘花蕾蛆【发生规律】 在湖南一年发生1代,越冬幼虫3月中下旬化蛹。3月下旬柑橘现蕾发白时,为成虫羽化出土盛期。【防治方法】 (1) 农业防治:每年的2月底至3月初对树冠附近的浅土层进行浅耕。在成虫出土前地面用地膜覆盖,阻止成虫出土羽化与上树产卵。摘除受害的花蕾,集中烧毁。(2) 化学防治:成虫出土时进行地面喷药,是阻止花蕾蛆上树为害最有效的办法,喷药时间为花蕾顶端开始露白前的3~5天,可用的药剂有:20%速灭杀丁乳油3000~5000倍液、2.5%敌杀死乳油或20%杀灭菊酯3000~4000倍液、90%敌百虫或80%敌敌畏800~1000倍液等喷洒地面,7~10天1次,连喷2次。幼虫入土前摘除受害花蕾煮沸或深埋,冬春翻耕园土杀灭部分幼虫。
