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报告板栗生产技术
出版时间:2019板栗根深叶茂,适应性强,较耐干旱和瘠薄,栽培容易,管理方便,适宜在山区发展。对山区经济的振兴和生态环境的改善效果非常显著。板栗多为高大乔木,寿命较长,但结果较晚,实生树一般5~8年开始结果,15~20年进入盛果期,50~60年生结实最多,盛果期可延续百年以上。嫁接树2~3年即能结果。板栗为深根性果树,主根可深达4m,但大多数根系分布在20~80cm的土层内,根系分布深浅受土层厚薄的影响。大树根系的水平分布可达1.5m以上,水平根扩展范围可为冠径的3~5倍,强大的根系是板栗抗旱耐瘠薄的重要因素。侧根细根发达,须根前端常有白色菌丝呈分枝状,为板栗的共生菌根,对板栗的生长和结果有显著的促进作用,同时也是板栗适应性强的重要原因。板栗根系受伤后再生能力弱,需经较长时间才能萌发新根,在栽植时要少伤根,特别是大根。板栗的芽按性质可分为叶芽、完全混合芽、不完全混合芽和副芽(休眠芽)四种。幼旺树叶芽着生在旺盛枝条的顶部和其中下部。进入结果期的树,多着生在各类枝条的中下部。芽体瘦小,芽顶尖,茸毛较多。多数品种不经短截不萌发或萌发形成弱枝。完全混合花芽着生于结果枝顶端及其以下数节,芽体肥大,发育充实、饱满,芽形钝圆,茸毛较少,外层鳞片较大,部分品种在枝条的中下部也能形成完全混合花芽。完全混合花芽翌春萌芽后抽生的结果枝既有雄花序也有雌花序。不完全混合花芽一般着生于完全混合花芽的下部或较弱枝的顶端及下部,芽体比完全混合花芽略小,萌发后抽生带花序的雄花枝。副芽又称休眠芽或饮芽,着生在各类枝条的基部短缩的位节上,芽体极小,一般不萌发,呈休眠状态,寿命长。遇刺激或前部枝条衰老时,萌发抽生徒长枝。板栗的枝条分为营养枝、结果枝、结果母枝和雄花枝四种。①营养枝由叶芽或副芽萌发而成,不着生雌花和雄花。根据枝条生长势不同,可将其分为徒长枝、营养枝和细弱枝三种。徒长枝由枝干上的副芽萌发而成,年生长量50~100cm,生长旺,节间长,组织不充实是老树更新和缺枝补空的主要枝条,一般30cm以上的徒长枝通过合理修剪,3~4年后也可开花结果;营养枝又称发育枝,由叶芽萌发而成,年生长量20~40cm,生长健壮,无混合芽,是扩大树冠和形成结果母枝的主要枝条,生长充实、健壮的枝可转化为结果母枝,来年抽梢开花结果;细弱枝由枝条基部叶芽抽生,生长较弱,长度在10cm以下,不能形成混合芽,翌年生长很少或枯死。②结果枝是结果母枝上完全混合花芽萌发抽生的、具有雌雄花序能开花结果的新梢。从结果枝基部第2~4节起,直到第8~10节止,每个叶腋间着生柔荑雄花序。在近顶端的1~4节雄花基部,着生球状雌花簇。③结果母枝是指着生完全混合芽的1年生枝条。大部分的结果母枝是由去年的结果枝转化而来。此外,雄花枝和营养枝也有形成结果母枝的,结果母枝顶端一至数芽为混合芽,抽生结果枝,下边的芽较弱,只能形成雄花枝和细弱营养枝。④雄花序由分化较差的混合芽形成,大多比较细弱,枝条上只有雄花序和叶片,不结果。一般情况下,当年也不能形成结果母枝。北方板栗适于冷凉干燥气候,南方板栗适于温暖湿润气候。板栗要求年平均气温为10~15℃,生长期(4—10月)平均气温16~20℃;冬季不低于-25℃;开花期为17~27℃。一般情况下北方板栗产量高,品质好。板栗为喜光树种。当内膛着光量占外围光照量的1/4时枝条生长势弱,无结果部位。光照不足6h的沟谷地带,树冠直立,枝条徒长,叶薄枝细,老干易光秃,株产低,坚果品质差。在板栗花期,光照不足则会引起生理落果。建园时,应选择日照充足的阳坡或开阔的沟谷地较为理想。板栗树虽较抗旱,但在生长期对水分仍有一定要求。新梢和果实生长期供应适量水分,可促进枝梢健壮和增大果实。一般年降水量500~1000mm的地方最适于板栗树生长。板栗树对土壤适应性广泛,以土层深厚、有机质多、保水排水良好的砾质壤土最适宜板栗树生长。其适宜的土壤含水量相当于田间持水量的30%~40%。超过60%,易烂根,低于12%,树体衰弱,降至9%时,树可枯死。板栗对pH值的适应范围是4.6~7.0,以pH值5.5~6.5最为适宜;pH值超过7.6则生长不良。板栗正常生长,要求含盐量在0.2%以下,且板栗是高锰作物。pH值增高,土壤中锰呈不溶状态,影响其对锰的吸收,树体发育不良,叶片发黄。板栗自然分布区地势差别较大,海拔50~2800m均可生长板栗。我国南北纬度跨度较大,但在海拔1000m以上的高山地带,板栗仍可正常生长结果。处于温带地区的河北、山东、河南等地,板栗经济栽培区要求海拔在500 m以下,海拔800 m以上的山地出现生长结果不良现象。在山地建园对坡地要求不太严格,可在15°以下的缓坡建园,15°~25°坡地建园要修建水土保持工程。30°以上陡坡,可作为生态经济林和绿化树来经营。花期微风对板栗树授粉有利,但板栗不抗大风,不耐烟害,空气中氯和氟等含量稍高,栗树易受害。板栗园地应选择土层深厚、排水良好、地下水位不高的沙壤土、沙土或砾质土及退耕地等。土壤宜微酸性,要求光照充足,空气干爽。在山坡地造林应选择南坡、东南坡或西南坡为宜。整地一般在板栗栽植前的3个月进行。整地方法常采用水平梯地整地和鱼鳞坑整地。水平梯地整地就是沿等高线修水平梯地。以等高线为中轴线,在中轴线上侧取土填到下侧,保持地面水平,然后在地上挖坑栽树。该法适用于坡度在20°以下的山地。在坡度较陡或地形复杂的栗园,则可采用鱼鳞坑整地。其方法是:按照需要栽植的株行距,以栽植点为中心。由上部取土修成外高里低、形似鱼鳞状的小台田。无论哪种整地方法,挖穴时要将生土和熟土分开堆放,然后施入农家肥或秸秆、杂草、油渣等,再将熟土回填。造林宜采用1~2年生大苗,苗高不低于1m,地径不小于0.8~1cm,根系发达完整,生长健壮,无病虫害,无机械损伤。板栗栽植密度要根据地形、土质条件及品种特性而定。一般栽植密度以3m×4m为宜。挖苗时应尽可能少损伤侧根和须根,已经损伤的根应剪平伤口,主根过长时可以截短一些。如果挖出的栗苗不能马上定植或需远距离运输时,应进行泥浆蘸根,然后再假植或包装运输。栽植穴宽80cm,深80cm。每穴施入充分腐熟的有机肥料30~50 kg,将肥料和熟土混合均匀、踏实即可。栽植在秋季落叶到春季萌发前均可进行。除寒冷地区外,以秋季栽植为好。栽植要求是树要栽端,土要踏实,根要舒展,树苗埋土一半时,将树苗向上轻轻提一下,可使根系舒展。栽植的深度,保持原来的入土深度,栽好后踏实树干基部周围的覆土,并及时进行浇水,以提高栽植成活率。选用2种以上优良品种混合栽植,一般主栽品种与授粉品种比例是(4~8)∶1。休眠期进行耕翻,萌芽前每667m2施纯氮12kg,以促进花的发育,施肥后灌水。枝条基部叶刚展开由黄变绿时,根外喷施0.3%尿素+0.1%磷酸二氢钾+0.1%硼砂混合液,新梢生长期喷50mg/kg赤霉素,以促进雌花发育形成。开花前追肥,每667m2追施纯氮6kg,纯磷8kg,纯钾5kg,追肥后浇水;清耕栗园进行除草松土,行间适时播种矮秆1年生作物或绿肥。7月下旬至8月初,果实迅速膨大期施增重肥,每667m2施纯氮5kg,纯磷6kg,纯钾20kg,根据土壤含水量浇增重水。种植绿肥的果园翻压肥田或刈割覆盖树盘。采收前1个月或半个月间隔10~15d喷2次0.1%磷酸二氢钾。果实采收后叶面喷布0.3%的尿素液。10月施基肥,每667m2施充分腐熟的土杂肥3000kg+纯氮5kg。对空苞严重的果园同时土施硼肥,方法是沿树冠外围每隔2m挖深25cm,长、宽各40cm的坑,大树施0.75kg,将硼砂均匀施入穴内,与表土搅拌,浇入少量水溶解,然后施入有机肥,再覆土灌水。雄花序长到1~2cm时,保留新梢最顶端4~5个雄花序,其余全部疏除。一般保留全树雄花序的5%~10%。采用化学疏雄的方法是在混合花序2cm时喷1次板栗疏雄醇。雄花序长到5cm时喷施0.2%尿素+0.2%硼砂混合液,空苞严重的栗园可连续喷3次。当1个花枝上的雄花序或雄花序上大部分花簇的花药刚刚由青变黄时,在5∶00前采集雄花序制备花粉。当一个总苞中的3个雌花的多裂性柱头完全伸出到反卷变黄时,用毛笔或带橡皮头的铅笔,蘸花粉点在反卷的柱头上。也可采用纱布袋抖撒法或喷粉法进行授粉;夏季修剪并疏栗蓬,及早疏除病虫、过密、瘦小的幼蓬,一般每个节上只保留1个蓬,30cm的结果枝可保留2~3个蓬,20cm的结果枝可保留1~2个蓬。 -
报告附录
出版时间:2019主要步骤如下。(1) 将 800 μl 提取缓冲液 CTAB buffer (内含 2%CTAB、100 mmol/L Tris-HCl pH值8.0、20 mmol/L EDTA、1.4 mol/L NaCl、2%PVP30、1%的β-巯基乙醇) 加入2 ml的离心管内65℃预热。(2) 从-70℃超低温冰箱中取0.2 g ‘富士’ 和 ‘金冠’ 及其杂交群体单株的嫩叶,放入研钵中,加入液氮迅速研磨成粉末状,并迅速转移到装有预热的提取缓冲液的离心管内,并上下颠倒混匀。(3) 65℃水浴中保温3 min,数次颠倒使内含物充分混匀。(4) 将离心管取出,加800 μl氯仿∶异戊醇 (体积比为24∶1)。颠倒充分混合,温和震荡2~3 min。(5) 在高速离心机上离心10 min (14000 r/min),将上清液转移到1.5 ml离心管中。(6) 加入6 μl RNase (10 mg/ml) 充分混匀,在37℃恒温箱内温育1 h,再用氯仿∶异戊醇抽提1次。(7) 加500 μl 事先在-20℃冰箱内预冷的异丙醇,上下颠倒混匀后,于4℃冰箱中沉淀 DNA 10~25 min。(8) 在高速离心机上 14000 r/min 离心 3 min,然后弃掉上清,得到沉于离心管底部的DNA。(9) 用500 μl 75%乙醇洗 DNA沉淀两次。倒掉乙醇,注意不要将DNA倒出。(10) 在超净工作台上干燥 DNA 2 h。(11) 将吹干的DNA溶于100 μl超纯水中。1.缓冲液的的制备取适量50×TBE缓冲液配制成1×TBE稀释缓冲液,待用。2.胶液的制备称取1 g琼脂糖,置于锥形瓶中,加入 100 ml 1×TBE 稀释缓冲液,放入微波炉里加热至琼脂糖全部熔化,取出摇匀,制成1%琼脂糖凝胶液。加热过程中要不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液。3.胶板的制备待凝胶温度稍低后加入5 μl EB (溴化乙锭),混匀,然后倒入模具中 (注意不要有气泡),加上合适的梳子形成加样孔,梳子的位置应该在托盘底面上0.5~1.0 mm。4.待胶完全凝固后拔出梳子注意不要损伤梳底部的凝胶,将模具放入电泳槽内并加入1×TBE稀释缓冲液至液面恰好没过胶板上表面。5.加样取10 μl DNA稀释液,用微量移液枪小心加入样品槽中。每加完一个样品要更换 tip 头,以防止互相污染,注意上样时要小心操作,避免损坏凝胶或将样品槽底部凝胶刺穿。6.电泳加完样后,合上电泳槽盖,立即接通电源。DNA 应该向阳极泳动,用120 V电压电泳15~30 min,停止电泳。1.6%非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备方法(1) 胶板的制备。先用水将平板和耳朵板冲洗干净,将其平放在桌面上,用餐巾纸将其擦干之后,用 95%酒精擦洗 2 次,待其干后,将0.5%的 Banding silane 溶液均匀的倒在平板上,用餐巾纸迅速将其涂匀,待其晾干,然后将洗干净的梳子和压条整齐的摆在平板之上,将2%的 Repel silane溶液均匀的涂在耳朵板上 (此项操作应在通风橱中进行),待其晾干后,将其整齐摆放在平板之上,用夹子将其夹好。(2) 凝胶的制备。取50%的PA胶50 ml,加入60 μl的TEMED,120 μl 10%的过硫酸铵 (APS),温和混匀。(3) 灌胶。将混合好的胶沿着玻璃板的灌胶口缓缓灌入,注意使灌入的胶基本上沿着一条直线灌入,如不整齐,可用手轻轻拍打胶板,使胶保持同一直线灌入,避免气泡的产生。胶灌入到底部之后,迅速将梳子平面插入到两玻璃板之间,插好梳子之后,用夹子夹好,让其聚合1h后用于电泳。(4) 电泳。加入电极缓冲液lxTBE,50 W恒功率,预电泳10 min后,清除气泡,插入梳齿,将扩增好的 PCR 产物,加入6 μl的溴酚蓝,混匀95℃变性5 min,之后用微量加样器取6 μl,进行电泳1 h左右 (根据分子量的大小调整电泳时间)。2.非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的银染方法 (体积100 ml)(1) 固定。在磁盘中加入 10%的乙醇和 500 μl 冰乙酸,摇匀后加入凝胶,再平行摇动3~5 min。(2) 染色。在固定液中加入 1 ml 20%AgNO3 储备液后,平行摇动 5~8 min。(3) 漂洗。倒掉定影液,加入蒸馏水漂洗 2~3 次,洗净后,倒掉蒸馏水。(4) 显色。在磁盘中加入 100 ml 3%NaOH 溶液和 500 μl 甲醛,迅速振荡,使显影液均匀作用,然后平行摇动,直至显影。(5) 洗涤。清楚显影后,倒掉显影液,用自来水清洗凝胶 1~2次,彻底去掉显影液,以免保存时变色。1.胶回收(1) 将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳。(2) 在紫外灯下切出含有目的片段 DNA 的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面的液体。此时应注意尽量切除不含目的片段 DNA 部分的凝胶,尽量减小凝胶体积,提高 DNA 回收率。胶块超过 300 mg时,使用多个 Column 进行回收,否则严重影响回收率。注:切胶时注意不要将 DNA 长时间暴露于紫外灯下,以防 DNA损伤。(3) 切碎胶块。胶块切碎后可以加快操作步骤 6 的胶块溶解时间,提高 DNA 回收率。(4) 称量胶块重量,计算胶块体积。计算胶块体积时,以 1 mg=1μl 进行计算。(5) 向胶块中加入胶块溶解液 Buffer GM,Buffer GM 的加量如下表。凝胶浓度BufferGM使用量1.0%3个凝胶体积量1.0%~1.5%4个凝胶体积量1.5%~2.0%5个凝胶体积量(6) 将不溶解液与胶块充分混合后,15~25℃溶解胶块 (胶浓度较大或比较难溶时可以在 37℃加热)。间断振荡混合,使胶块充分溶解 (5~10 min)。注:胶块一定要充分溶解,否则将会严重影响 DNA 的回收率。高浓度凝胶可以适当延长溶胶时间。(7) 当凝胶完全溶解后,观察溶胶液的颜色,如果溶胶液颜色由黄色变为橙色或粉色,向上述胶块溶解液中加入 3M 醋酸钠溶液(pH值5.2) 10 μl,均匀混合至溶液恢复黄色。当分离小于 400 bp的DNA片段时,应在此溶液中再加入终浓度为 20%的异丙醇。(8) 将试剂盒中的 Spin Column 安置于 Collection Tube 上。(9)将上述操作步骤7的溶液转移至Spin Column中,12000r/min离心1min,弃滤液。注:如将滤液再加入Spin Column中离心一次,可以提高 DNA 的回收率。(10)将700μl的Buffer WB加入Spin Column中,室温12000r/min离心30s,弃滤液。注:确认Buffer WB中已经加入了指定体积的100%乙醇。(11) 重复操作步骤 10。(12) 将Spin Column安置于Collection Tube上,室温12000 r/min离心1 min。(13) 将Spin Column安置于新的1.5 ml的离心管上,在Spin Col-umn膜的中央处加入 30 μl 灭菌蒸馏水或 Elution Buffer,室温静置1 min。注:将灭菌蒸馏水或 Elution Buffer加热至60℃使用时有利于提高洗脱效率。(14) 室温12000 r/min离心1 min洗脱DNA。2.大肠杆菌感受态的制备(1) 取大肠杆菌DH5α 在 LB 培养基上划线,37℃培养箱内过夜培养,长出单菌落。(2) 挑取单菌落,接种于4 ml不含抗生素的LB培养基上,37℃振荡 (轻摇) 培养过夜。(3) 过夜培养的菌液与 LB 培养基按 1∶50 的比例转入三角瓶,37℃振荡培养 (约3 h),至OD600=0.4~0.6。(4) 4℃,5000 r/min离心5 min,轻轻倒掉上清,用5 ml (1/5体积) 预冷的0.1 mol/L Mgcl2悬浮细胞 (0.95 g/100 ml)。(5) 4℃,5000 r/min 离心 5 min,轻轻倒掉上清,用 12.5 ml (1/2体积) 预冷的 0.1 mol/L CaCl2悬浮细胞,冰浴放置 20 min(1.1 g/100 ml)。(6) 4℃,5000 r/min离心5 min,轻轻倒掉上清,用2.5 ml预冷的 0.1 mol/L CaCl2 (含 10%的甘油) 悬浮细胞,分装,每管120 μl。(7) 液氮速冻,-80℃保存。3.目的基因连接载体pMD-19T simple 1 μl,目的 DNA 4 μl,solution Ⅰ 5 μl,混匀后于16℃金属浴中反应30 min。4.目的基因转化(1) 1.5 ml离心管中加入10 μl的连接产物和50 μl大肠杆菌感受态细胞。(2) 冰上放置30 min。(3) 42℃金属浴加热45 s 后,冰中放置1 min。(4) 加入 500 μl LB 液体培养基,37℃,200 r/min 振荡培养45 min。(5) 取100 μl菌液涂板 (LB+Amp+),37℃过夜培养。(6) 过夜培养之后,挑取单克隆菌落,加到 LB 液体培养基(Amp+100 mg/L) 中37℃,200 r/min振荡培养6~8 h。(7) 菌液PCR检测正确后,送测序。序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置1CH03g12GCGCTGAAAAAGGTCAGTTTCAAGGATGCGCATGTATTTGChr12CH05g08CCAAGACCAAGGCAACATTTCCCTTCACCTCATTCTCACCChr13Hi02c07AGAGCTACGGGGATCCAAATGTTTAAGCATCCCGATTGAAAGGChr14Hi07d08TGACATGCTTTTAGAGGTGGACGTTTGAGGGGTGTCCGTACAAGChr15Hi12c02GCAATGGCGTTCTAGGATTCGTTTCACCAACAGCTGGGACAAGChr16C10455AAGGCAATACAAGACGGACGTTCACACCGAAAGCCTCTCTChr17Hi21g05GACGAGCTCAAGAAGCGAACGTTTGCTCTTGCCATTTTCTTTCGChr18C13810CGTCCTAGATAGATGCCCCACAGGACTCTAAGGACTGCCGChr1附表1 实验所用已发表SSR引物列表序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置9C13280CTCCTCCTCCCTCAGTACCCCCTTCACTCACCTTTCTCGCChr110C16757AATGGGACCCAACTGGTACATCGACCATACAAATTGCTGCChr111C6948CTTGGAGCTGTGAGAGTCCCCAAACCTCTCATCGCAACCTChr112KA4bAAAGGTCTCTCTCACTGTCTCCTCAGCCCAACTCAAAGCCChr113CH02a04GAAACAGGCGCCATTATTTGAAAGGAGACGTTGCAAGTGGChr214CH02b10CAAGGAAATCATCAAAGATTCAAGCAAGTGGCTTCGGATAGTTGChr215CH02c02aCTTCAAGTTCAGCATCAAGACAATAGGGCACACTTGCTGGTCChr216CH02c06TGACGAAATCCACTACTAATGCAGATTGCGCGCTTTTTAACATChr217CH02f06CCCTCTTCAGACCTGCATATGACTGTTTCCAAGCGATCAGGChr218CH03d01CGCACCACAAATCCAACTCAGAGTCAGAAGCACAGCCTCChr219CH03d10CTCCCTTACCAAAAACACCAAAGTGATTAAGAGAGTGATCGGGGChr220CH05e03CGAATATTTTCACTCTGACTGGGCAAGTTGTTGTACTGCTCCGACChr221Hi02a07TTGAAGCTAGCATTTGCCTGTTAGATTGCCCAAAGACTGGGChr222Hi05g12TCTCTAGCATCCATTGCTTCTGGTTTGTGTGTTCTCTCATCGGATTCChr223Hi07d12GGAATGAGGGAGAAGGAAGTGGTTTCCTCTTCACGTGGGATGTACCChr224Hi08f05GTGTGGGCGATTCTAACTGCGTTTCCTTTATTCTAAACATGCCACGTCChr225Hi08g12AGTTCGGTCGGTTCCGTAATGTTTAGGGCAAGGGGAAAGAAGTChr226Hi22d06CCCCGAGCTCTACCTCAAACATTATGTTTCCGGTTTTTGGChr227Hi24f04CCGACGGCTCAAAGACAACTGAAAAGTGAAGGGAATGGAAGChr228AJ251116GATCAGAAAATTGCTAGGAAAAGGAGAGAACGGTGAGCTCCTGAChr229AT000400CTCCCTTTGCTCCCTCTCTTAGGATGTCAGGGTTGTACGGChr230CN444636CACCACTTGAGTAATCGTAAGAGCGTTTGCCAGTTAAGGACCACAAGGChr231CN493139CACGACCTCCAAACCTATGCGTTTATGAAAGTACGGCACCCATCChr232CN581493GCTTTTCATGGTGGAAAAACTGGTTTGACTCTCCGCTCTGATGGACChr233NH033bGTCTGAAACAAAAAGCATCGCAACTGCCTCGTCTTCCTCCTTATCTCCChr234CH03e03GCACATTCTGCCTTATCTTGGAAAACCCACAAATAGCGCCChr335CH03g07AATAAGCATTCAAAGCAATCCGTTTTTCCAAATCGAGTTTCGTTChr336MS14h03CGCTCACCTCGTAGACGTATGCAATGGCTAAGCATAChr3附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-1序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置37Hi03d06TCATGGATCATTTCGGCTAAGTTTGCCAATTTTATCCAGGTTGCChr338Hi03e03ACGGGTGAGACTCCTTGTTGGTTTAACAGCGGGAGATCAAGAACChr339Hi04c10TGCGCATTTGATAGAGAGAGAAGTTTAACAAAGAACGACCCACCTGChr340Hi05f12TTTGGGTTTGGGTAGGTTAGGGTTTGTGCAGCGCATGCTAATGChr341Hi07e08TTCGTGCTAGGGAGTTGTAGCGTTTGCCTCCATAGGATTATTTGACChr342Hi15b02TATGGTGGCAACAGTGGAGAGTTTCGCCACCTCCACTTAACATCChr343Hi15h12GAACAAGAAGGACGCGAATCGTTTGGGCCTCGTTATCACTACCAChr344AU223657TTCTCCGTCCCCTTCAACTACACCTTGAGGCCTCTGTAGCChr345HGA8bAACAAGCAAAGGCAGAACAACATAGAGAAAGCAAAGCAAAChr346GD12CTAACGAAGCCGCCATTTCTTTTTGAGGTGTTTCTCCCATTGGAChr347IPPN15AACCATGGCATTGGATTGATGAAGCACTCAATGGGGAAAAChr348NZmsCN943818TGAACAGCTCATCGTCGGTACGGGAAGAGGAAATGTGATTChr349C9312TCCACCAGTGACAAGAGCTGAGGATTCAATCAGCTACGCCChr350C6359CGGAAATGGTCACTGGAACTTGGGACGGACACACACACChr351CH01b12CGCATGCTGACATGTTGAATCGGTGAGCCCTCTTATGTGAChr452CH01d03CCACTTGGCAATGACTCCTCACCTTACCGCCAATGTGAAGChr453CH02c02bTGCATGCATGGAAACGACTGGAAAAAGTCACACTGCTCCChr454CH02h11aCGTGGCATGCCTATCATTTGCTGTTTGAACCGCTTCCTTCChr455CH04e02GGCGATGACTACCAGGAAAAATGTAGCCAAGCCAGCGTATChr456CH05d02AAACTCCCTCACCTCACATCACAATAGTCCAATGGTGTGGATGGChr457Hi01e10TGGGCTTGTTTAGTGTGTCAGGTTTGGCTAGTGATGGTGGAGGTGChr458Hi07b02ATTTGGGGTTTCAACAATGGGTTTCGGACATCAAACAAATGTGCChr459Hi08e04GCATGGTGGCCTTTCTAAGGTTTACCCTCTGACTCAACCCAACChr460Hi08h03GCAATGGCGTTCTAGGATTCGGTGGTGAACCCTTAATTGGChr461Hi23d11bGACAGCCAGAAGAACCCAACGTTTATTGGTCCATTTCCCAGGAGChr462Hi23g02TTTTCCAGGATATACTACCCTTCCGTTTCTTCGAGGTCAGGGTTTGChr463Hi23g08AGCCGTTTCCCTCCGTTTGTTTGTGGATGAGAAGCACAGTCAChr464AT000420TTGGACCAATTATCTCTGCTATTGATGTGGTCAGGGAGAGGAGChr4附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-2序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置65MSS6CGAAACTCAAAAACGAAATCAAACGGGAGAGAAACTCAAGACCChr466C12595ATGAAAACCCACAAAACCCAAAACCATACACAACGCCACAChr467C13146CTGGGAAAAATGGGGAAAATGCTTTCCCTTTCCTTCTTCAAChr468C15TTGCGAGAAAGCTAAAAACCACAGACTCTGCAACCCCTCTCChr469CH01d07AGTCGAAATCCCGAACAATCAAAATCCAGTTTTCCACCTCChr470NZ01a6TTAGACGACGCTACTTGTCCTAGGATTGCTGGAAAAGGAGGChr471GD162AAAATGTAACAACCCGTCCAAGTGGAGGCAAGTGACAAAGAAAGATGChr472NH011bTTTGCCGTTGGACCGAGCGGTTCACATAGAGAGAGAGAGChr473CH02a08GAGGAGCTGAAGCAGCAGAGATGCCAACAAAAGCATAGCCChr574CH02b12GGCAGGCTTTACGATTATGCCCCACTAAAAGTTCACAGGCChr575CH03a04GACGCATAACTTCTCTTCCACCTCAAGGTGTGCTAGACAAGGAGChr576CH03a09GCCAGGTGTGACTCCTTCTCCTGCAGCTGCTGAAACTGGChr577CH04e03TTGAAGATGTTTGGCTGTGCTGCATGTCTGTCTCCTCCATChr578CH04g09TTGTCGCACAAGCCAGTTTAGAAGACTCATGGGTGCCATTChr579CH05e06ACACGCACAGAGACAGAGACATGTTGAATAGCATCCCAAATGGTChr580CH05f06TTAGATCCGGTCACTCTCCACTTGGAGGAAGACGAAGAAGAAAGChr581Hi01c04GCTGCCGTTGACGTTAGAGGTTTGTAGAAGTGGCGTTTGAGGChr582Hi02a03GACATGTGGTAGAACTCATCGGTTTAGTGCGATTCATTTCCAAGGChr583Hi04a08TTGAAGGAGTTTCCGGTTTGGTTTCACTCTGTGCTGGATTATGCChr584Hi04d02TTCGTGGCTGAGAAAGGAGTGTTTGTACGGTGCATTGTGAAAGChr585Hi08a04TTGTCCTTCTGTGGTTGCAGGTTTGAAGGTAAGGGCATTGTGGChr586Hi08h08TGAACAAATTCCACCACGAAGTTTGCCAAGGCTACAATTTTCAChr587Hi09b04GCGATGACCAATCTCTGAAACTGGGCTTGAATTGGTGAATCChr588Hi11a03GGAATTGGAGCTTGATGCAGGTTTCATACGGAATGGCAAATCGChr589Hi15e04AAACCTCTGCATTCCGTCTCCTCATACTCCTCCCACATTGTCChr590Hi21c08TTCTTCTCCTCCACCACCTCGTTTGTCACTGAGAAGGCGGTAGCChr591Hi22a07CTCTTCCTTCTCCGCCTCTTGTTTCACTCAGAATGCCTCACAGCChr592Hi22f12GGCCTCACCCAGTCTACATTGTTTGGTGTGATGGGGTACTTTGCChr5附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-3序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置93AU223670GGACTCAATGCCTTTTCTGGAGGATGGCAGCAATCTTGAAChr594CN445599TCAAATGGGTTCGATCTTCACGTTTGCCTGGCTGTAACTGTTTGGChr595CN496002TCAGAATCTCAAGCAAGATCCTCGTTTGATTGATCGTGGCGATATGChr596CH03d07CAAATCAATGCAAAACTGTCAGGCTTCTGGCCATGATTTTAChr697CH03d12GCCCAGAAGCAATAAGTAAACCATTGCTCCATGCATAAAGGGChr698CH05a05TGTATCAGTGGTTTGCATGAACGCAACTCCCAACTCTTCTTTCTChr699Hi03a03ACACTTCCGGATTTCTGCTCGTTTGTTGCTGTTGGATTATGCCChr6100CH01b11AACCTAACCAAACACGTACGGTTCGGCTGTACTCTTTGAGChr6101Hi04d10AAATTCCCACTCCTCCCTGTGTTTGAGACGGATTGGGGTAGChr6102Hi05d10AATGGGTGGTTTGGGCTTAGTTTCTTTGGCTATTAGGCCTGCChr6103Hi07b06AGCTGCAGGTAGAGTTCCAAGGTTTCATTACCATTACACGTACAGCChr6104Hi08g03ATTCACTTCCACCGCCATAGGTTTGGAATGATTGCGAGTGAAGCChr6105CN445290TCTCAGTTGCTCTGGCTTTGGTTTGCAATCAATGCCACTCTTCChr6106U78949TTTGTCTACCTCTGATCTTAACCAACAGCATCGCAGAGAACTGAGChr6107CH04e05AGGCTAACAGAAATGTGGTTTGATGGCTCCTATTGCCATCATChr7108Hi01d05GGTATCCTCTTCATCGCCTGTTAGATTGACGTTCCGACCCChr7109Hi03a10GGACCTGCTTCCCCTTATTCGTTTCAGGGAACTTGTTTGATGGChr7110Hi12f04ATTGTCCCCACAAAATTGGATGTTCGATGTGACTTCAATGCChr7111CN444794CATGGCAGGTGCTAAACTTGAAACTGAAGCCATGAGGGCChr7112CH02b11CACAACGCAGTTCGATCACTACCTTACCTGGTAGAGAGAGAChr7113EMPc111CCGATCAGAAAGAGCTGTGAGTCAAACCTTCCAACCTCAACAATChr7114Hi05b09GTTTCTAACGTGCGCCTAACGTGAAACCCAACCCAAAGAGTGGChr7115MS06c09AATATAAGAGCCAGAGGCACTATTGGAGTAAGTCGAChr7116Z38126AAGAGGGTGTTCCCAGATCCAATTCCAATTTCAGAACAGGChr7117CH01c06TTCCCCATCATCGATCTCTCAGGAGGGATTGTTTGTGCACChr8118CH01f09ATGTACATCAAAGTGTGGATTGCAAACAAACCAGTACCGCAAChr8119CH01h10TGCAAAGATAGGTAGATATATGCCATTTTGACCCCATAAAACCCACChr8120CH02g09TCAGACAGAAGAGGAACTGTATTTGGTTTGAGTTTGATCTCCAACATTACChr8附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-4序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置121CH05a02GTTGCAAGAGTTGCATGTTAGCGTTTGAGCAGAGGTTGCTGTTGCChr8122Hi01c11TTGGGCCACTTCACAACAGGGTGCGCTGTCTTCCATAAAChr8123Hi04b12CCCAAACTCCCAACAAAGCGTTTAGTTGCTAATGGCGTGTCGChr8124Hi04e05AAGGGTGTTTGCGGAGTTAGGTTTGTCTACAACTGTCTGATGGTAGCChr8125Hi20b03AAACTGCAATCCACAACTGCGTTTAAAGGGGCCCACAAAGTGChr8126Hi22g06GAAAGGACCGAATTTCATGCGGACATGGATGAAGAATTGGAChr8127Hi23g12CCCTTCCCTACCAAATGGACCTCCCCGGCTCCTATTCTACChr8128Z71980TCTTTCTCTGAAGCTCTCATCTTTCATCTTTTGGTGCTCCCACACChr8129CH01f03bGAGAAGCAAATGCAAAACCCGGGATGCATTGCTAAATAGGATChr9130CH01h02AGAGCTTCGAGCTTCGTTTGTGATTGCCACATGTCAGTGTTChr9131CH05c07TGATGCATTAGGGCTTGTACTTGTTTACCAATTAGGACTTAAAGCTGChr9132CH05d08TCATGGATGGGAAAAAGAGGGTTTCATGTCAAATCCGATCATCACChr9133Hi01d01CTGAAATGGAAGGCTTGGAGATTTATGGTGATGGTGTGAACGTGChr9134Hi04a05GGCAGCAGGGATGTATTCTGGTTTCAAGAACCGTGCGAAATGChr9135Hi05e07CCCAAGTCCCTATCCCTCTCGCTTAATAGAAACATCGCTGAChr9136Hi23d06TTGAAACCCGTACATTCAACTCGTTTGCAGTGGATTGATGTTCCChr9137AJ320188AACGATGCTTGAGGAAGAACACCTCCCGTCTCCCACCATATTAGChr9138CN444542ATAAGCCAGGCCACCAAATCCGTTTTTGGAGCGTAGGAACChr9139NH029aGAAGAAAACCAGAGCAGGGCAGCAAAAACCACAGGCATAACChr9140CH02a10ATGCCAATGCATGAGACAAAACACGCAGCTGAAACACTTGChr10141CH02b03bATAAGGATACAAAAACCCTACACAGGACATGTTTGGTTGAAAACTTGChr10142CH02b07CCAGACAAGTCATCACAACACTCATGTCGATGTCGCTCTGTTGChr10143CH02c11TGAAGGCAATCACTCTGTGCTTCCGAGAATCCTCTTCGACChr10144CH03d11ACCCCACAGAAACCTTCTCCCAACTGCAAGAATCGCAGAGChr10145COLAGGAGAAAGGCGTTTACCTGGACTCATTCTTCGTCGTCACTGChr10146MS01a03AGCAGTATAGGTCTTCAGTGCGTAGATAACACTCGATChr10147MS02a01CTCCTACATTGACATTGCATTAGACATTTGATGAGACTGChr10148MS06g03CGGAGGGTGTGCTGCCGAAGGCCCAGCCCATATCTGCTChr10附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-5序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置149Hi01a03CGAATGAAATGTCTAAACAGGCAAGCTACAGGCTTGTTGATAACGChr10150Hi01b01GCTACAGGCTTGTTGATAACGCACGAATGAAATGTCTAAACAGGCChr10151Hi02d04TGCTGAGTTGGCTAGAAGAGCGTTTAAGTTCGCCAACATCGTCTCChr10152Hi03c04CGTAAATAGCGAATCCGATACCGTTTCAACATCTGTGGGTCATTGCChr10153Hi03f06ACGATTTGGTGATCCGATTCGTTTCGTCGCATTGTGCTTCACChr10154Hi04f08CGTGAAAACTCTAACTCTCCGTTTGAAAAGCGCATCAAAGTTCCChr10155Hi05b02GATGCGGTTTGACTTGCTTCGTTTCTCCAGCTCCCATAGATTGCChr10156Hi08g06AATCGAACCAGCACAGGAAGGTTTAGATGGAGGTCGTGGTTACGChr10157Hi08h12GAAGGAAATCATCATCAAGACGGTTTCAAGACCATGGAACAACTTGGChr10158Hi21f08GAGAAAACGCAGAAGCATTGAGTAATGATTTCATCGCGAGTCChr10159Hi22f04TCAATCCTCTGCTCTTCAAGGGTTTAATCACCTGCTGCTGCTTGChr10160AF057134ACTACCCAATGCCCACAAAGTATCCTCGCCCAAAAGACTGChr10161AU223548ACCACCACTGCAGAGACTCAGACGCACCCATTCATCTTTTChr10162CH02d08TCCAAAATGGCGTACCTCTCGCAGACACTCACTCACTATCTCTCChr11163CH02d12AACCAGATTTGCTTGCCATCGCTGGTGGTAAACGTGGTGChr11164CH03d02AAACTTTCACTTTCACCCACGACTACATTTTTAGATTTGTGCGTCChr11165CH04a12CAGCCTGCAACTGCACTTATATCCATGGTCCCATAAACCAChr11166CH04d07TGTCCTCCAATCTTAACCCGCACACAGACGACACATTCACCChr11167CH04d10GAGGGATCTGTAGCTCCGACTGGTGAGTATCTGCTCGCTGChr11168CH04g07CCCTAACCTCAATCCCCAATATGAGGCAGGTGAAGAAGGAChr11169CH04h02GGAAGCTGCATGATGAGACCCTCAAGGATTTCATGCCCACChr11170Hi01d06GGAGAGTTCCTGGGTTCCACAAGTGCACCCACACCCTTACChr11171Hi02a09ATCTCTAAGGGCAGGCAGACCTGACTCTTTGGGAAGGGCChr11172Hi02c06AGCAAGCGGTTGGAGAGAGTTTGCAACAGGTGGACTTGCTCTChr11173Hi04g11CAGAGGATTATCAATTGGACGCAAACTATCTCCAGTTATCCTGCTTCChr11174Hi06b06GGTGGGATTGTGGTTACTGGGTTTCATCGTCGGCAAGAACTAGAGChr11175Hi07d11CCTTAGGGCCTTTGTGGTAAGGTTTGAGCCGATTAGGGTTTAGGGChr11176Hi07g10TATTGGGTTTTGGGTTTGGAGTTTCAACCCTTTTGGTTGTGAGGChr11附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-6序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置177Hi09a01GAAGCAACCACCAGAAGAGCGTTTCCCATTCGCTGGTACTTGAGChr11178Hi16d02AACCCAACTGCCTCCTTTTCGTTTCGACATGATCTGCCTTGChr11179Hi23d02CCGGCATATCAAAGTCTTCCGTTTGATGGTCTGAGGCAATGGAGChr11180CN491050CGCTGATGCGATAATCAATGGTTTCACCCACAGAATCACCAGAChr11181CH01d09GCCATCTGAACAGAATGTGCCCCTTCATTCACATTTCCAGChr12182CH01f02ACCACATTAGAGCAGTTGAGGCTGGTTTGTTTTCCTCCAGCChr12183CH01g12CCCACCAATCAAAAATCACCTGAAGTATGGTGGTGCGTTCChr12184CH03c02TCACTATTTACGGGATCAAGCAGTGCAGAGTCTTTGACAAGGCChr12185CH04d02CGTACGCTGCTTCTTTTGCTCTATCCACCACCCGTCAACTChr12186CH04g04AGTGGCTGATGAGGATGAGGGCTAGTTGCACCAAGTTCACAChr12187CH05d04ACTTGTGAGCCGTGAGAGGTTCCGAAGGTATGCTTCGATTChr12188CH05d11CACAACCTGATATCCGGGACGAGAAGGTCGTACATTCCTCAAChr12189CH05g07CCCAAGCAATATAGTGAATCTCAATTCATCTCCTGCTGCAAATAACChr12190MS14b04CCTTAAGAATCATGTGATACTAATGGCACAAAGATTGTChr12191Hi02b07TGTGAGCCTCTCCTATTGGGTGGCAGTCATCTAACCTCCCChr12192Hi02d05GAGGGAGAATCGGTGCATAGCATCCCTCAGACCCTCATTGChr12193Hi03b03TGAATTGAGTTTGAGAATGGAATGGTTTGTCAGGACGGGTAATCAAGGChr12194Hi07f01GGAGGGCTTTAGTTGGGAACGTTTGAGCTCCACTTCCAACTCCChr12195CN496913TGCCTTTGAGAATCGAAATGTGTTTGTCAATTTCTTGGAACTCChr12196CH03a08TTGGTTTGCTAGGAAAAGAAGGAAGTTTATCGGGCCTACACGChr13197CH03h03AAGAAATCGGATCCAAAACAACTCCCTCAAAGATTGCTCCTGChr13198CH05c04CCTTCGTTATCTTCCTTGCATTGAGCTTAAGAATAAGAGAAGGGGChr13199CH05f04GATGATGGTGCTCTCGGTTATTTTATGTTGGGTAATGTCTTCCGChr13200Hi03e04CTTCACACCGTTTGGACCTCGTTTCATATCCCACCACCACAGAAGChr13201Hi04a02TTCGTGGAAACCTAATTGCAGGTTTCCTCTGCTTCTTCATCTTTGCChr13202Hi04f09ACTGGGTGGCTTGATTTGAGGTTTCAACTCACACCCTCTACATGCChr13203Hi04g05CTGAAACAGGAAACCAATGCGTTTCGTAGAAGCATCGTTGCAGChr13204Hi08e06GCAATGGCGTTCTAGGATTCGTTTGGCTGCTTGGAGATGTGChr13附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-7序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置205Hi08f06CTTAGAGCATAGATGACCTGCAAGTTTAGAAATCCAACGGCCAAAGChr13206AU223486TGACTCCATGGTTTCAGACGAGCAATTCCTCCTCCTCCTCChr13207GD147TCCCGCCATTTCTCTGCGTTTAAACCGCTGCTGCTGAACChr13208NH009bCCGAGCACTACCATTGACGTCTGTTTACCGCTTCTChr13209CH01e01GGTTGGAGGGACCAATCATTCCCACTCTCTGTGCCAGATCChr14210CH01g05CATCAGTCTCTTGCACTGGAAAGACAGAGTAAGCTAGGGCTAGGGChr14211CH03a02TTGTGGACGTTCTGTGTTGGCAAGTTCAACAGCTCAAGATGAChr14212CH03d08CATCAGTCTCTTGCACTGGAAATAGGGCTAGGGAGAGATGATGAChr14213CH03g04ATGTCCAATGTAGACACGCAACTTGAAGATGGCCTAACCTTGTTChr14214CH04c07GGCCTTCCATGTCTCAGAAGCCTCATGCCCTCCACTAACAChr14215CH04f06GGCTCAGAGTACTTGCAGAGGATCCTTAAGCGCTCTCCACAChr14216CH05d03TACCTGAAAGAGGAAGCCCTTCATTCCTTCTCACATCCACTChr14217CH05e05TCCTAGCGATAGCTTGTGAGAGGAAACCACCAAACCGTTACAATChr14218CH05g11GCAAACCAACCTCTGGTGATAAACTGTTCCAACGACGCTAChr14219MS01a05GGAAGGAACATGCAGACTTGATGTTTCATCTTTACAChr14220Hi01c09AAAGGCGAGGGATAAGAAGCGTTTGCACATTTGAGCTGTCAAGCChr14221Hi02d11GCAATGTTGTGGGTGACAAGGTTTGCAGAATCAAAACCAAGCAAGChr14222Hi08c05TCATATAGCCGACCCCACTTAGGTTTCACACTCCAAGATTGCATACGChr14223Hi21e04TGGAAACCTGTTGTGGGATTTGCAGAGCGGATGTAAGTTGChr14224Hi23b12TGAGCGCAATGACGTTTTAGGTTTCAGGCTTTCCCTTCAGTGTCChr14225AJ000761aCTGGGTGGATGCTTTGACTTTCAATGACATTAATTCAACTTACAAAAChr14226AJ000761bCCCTAAACACACAGCCTCCTGTTTCAGCATCGCAGAGAACTGAGChr14227U78948GATCGTCCGCCACCTTAATAGGGTTTTCATCATGCACATTChr14228CH01d08CTCCGCCGCTATAACACTTCTACTCTGGAGGGTATGTCAAAGChr15229CH02c09TTATGTACCAACTTTGCTAACCTCAGAAGCAGCAGAGGAGGATGChr15230CH02d11AGCGTCCAGAGCAACAGCAACAAAAGCAGATCCGTTGCChr15231CH03b06GCATCCTTGAATGAGGTTCACTCCAATCACCAAATCAATGTCACChr15232CH03b10CCCTCCAAAATATCTCCTCCTCCGTTGTCCTGCTCATCATACTCChr15附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-8序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置233CH04g10CAAAGATGTGGTGTGAAGAGGAGGAGGCAAAAAGAGTGAACCTChr15234Hi01c06TTAGCCCGTATTTGGACCAGGTTTCACCTACACACACGCATGGChr15235Hi02d02TTCCTAGGCTACCCGAAATATGGTTTCTGGCATGGACATTCAACCChr15236Hi02f06TAAATACGAGTGCCTCGGTGGCAGTTGAAGCTGGGATTGChr15237Hi02g06AGATAGGTTTCACCGTCTCAGCGACCTCTTTGGTGCGTCTGChr15238Hi03a06TGGTGAGAGAAGGTGACAGGGTTTAAGGCCGGGATTATTAGTCGChr15239Hi03g06TGCCAATACTCCCTCATTTACCGTTTAAACAGAACTGCACCACATCCChr15240Hi04c05AGGATGCTCTGCCTGTCTTCGTTTCTCACTCGCCTGCTCTATCCChr15241Hi06f09AACCAAGGAACCCACATCAGGTTTCACTTACACACGCACACACGChr15242Hi09f01CACCACCAAATTCTCCATCTTCGTTTACCGCCAAATGCTTTGTTACChr15243Hi11a01ACCGCCAAATGCTTTGTTACGTTTCCTCCATTAAACTCCTCAGTGChr15244Hi15c07TCACTTCCCATCATCACTGCGTTTCAATGTCGAGGCTGGTAATGChr15245Z71981GCACTTACCTTTGTTGGGTCACCGGCATTCCAAATGTAACTChr15246CH02a03AGAAGTTTTCACGGGTGCCTGGAGACATGCAGAATGGAGChr16247CH02d10aTGATTTCCTTTTTCGCAAGGTTCATCGTTCCCTCTCAAACChr16248CH04f10GTAATGGAAATACAGTTTCACAATTAAATGCTTGGTGTGTTTTGCChr16249CH05a04GAAGCGAATTTTGCACGAATGCTTTTGTTTCATTGAATCCCCChr16250CH05c06ATTGGAACTCTCCGTATTGTGCATCAACAGTAGTGGTAGCCGGTChr16251CH05e04AAGGAGAAGACCGTGTGAAATCCATGGATAAGGCATAGTCAGGAChr16252Hi01a08AAGTCCAATCGCACTCACGCGTAGCTCTCTCCCGATACGChr16253Hi02b10TGTCTCAAGAACACAGCTATCACCGCCGTTTCTTGGAGGCAGTAGTGCAGChr16254Hi02h08AACGGCTTCTTGTCAACACCGTTTGGCTGGGAATATATGATCAGGTGChr16255Hi04e04GACCACGAAGCGCTGTTAAGGTTTCGGTAATTCCTTCCATCTTGChr16256Hi08d09ACTCATACCCATCGTATTGGTTTACTGCATCCCTTACCACCACChr16257Hi08f12GGTTTGTAACCCGTCTCTCGGTTTCGTAGCTCTCTCCCGATACGChr16258Hi12a02GCAAGTCGTAGGGTGAAGCTCGTTTAGTATGTTCCCTCGGTGACGChr16259Hi15a13TTCTCCCCTTCTAAACCAACCGGTTTCTTGGCGTAACATTGChr16260Hi15g11TGACATGCATAGGGTTACATGCGTTTGGGTTCGTAATCGTTCTTGTGChr16附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-9序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置261Hi22f06CAATGGCGTCTGTGTCACTCGTTTACGACGGGTAAGGTGATGTCChr16262AU301431TCTTCCTCCTCCTCCTCCTCTCTTTTTCTTGGGGTCTTGGChr16263NB102aTGTTATCACCTGAGCTACTGCCCTTCCTCTTTATTTGCCGTCTTChr16264CH01h01GAAAGACTTGCAGTGGGAGCGGAGTGGGTTTGAGAAGGTTAChr17265CH02g04TTTTACCTTTTTACGTACTTGAGCGGCTTGGAAAAGGTCACTTGCChr17266CH04c06GCTGCTGCTGCTTCTAGGTTGGCAAAACTCTGCAAGTCCChr17267CH05g03GCTTTGAATGGATACAGGAACCCCTGTCTCATGGCATTGTTGChr17268Hi02f12ACATGGCCGAAGACAATGACGTTTCAACCTTTATCCCTCCATCTTTCChr17269Hi03c05GAAGAGAGAGGCCATGATACGTTTAACTGAAACTTCAATCTAGGChr17270Hi05c06TGCGTGTATGGTTGGTTTTGTGTTTTCTTTGGTTTTAGTTGGTGChr17271Hi07h02CAAATTGGCAACTGGGTCTGGTTTAGGTGGAGGTGAAGGGATGChr17272AF527800TGGAAAGGGTTGATTGACCTAACAGCGGGTGGTAAATCTCChr17273AJ001681CCTGAGGTTATTGACCCAAAACACTCAGTTGGAAAACCCTACAChr17274AT000174CGGAGGCCGCTATAATTAGGCCTGGAAAGAAAGTAAAAGGACAChr17275AY187627GAGGACTGAATTGGTTGAGGTCGTTTCTCACCCGTATATAGGCCAACChr17276CH05a09TGATTTAGACGTCCACTTCACCTTGATTGGATCATGGTGACTAGGChr17277BGA35AGAGGGAGAAAGGCGATTGCTTCATCACCGTCTGCTChr17278BGT23bCACATTCAAAGATTAAGATACTCAGCCTTTTTTTCCCACChr17279KA5CAACAACAACAAAAAACAGTAAAGCCTTAGAAATAGAAACAACAChr17280KA14ATGGCAAGGGATATTATTAGTCATTGTAGCATTTTTATTTTTChr17281KA16GCCAGCGAACTCAAATCTAACGAGAACGACGAGCGChr17282KB16GATTTTGTCCGCAGGTAAAGAACAGCAAGAACCAChr17283KU10AGTATGTGACAACCCCGATGTTAGAGTCGGTTGGGAAATGATTGChr17284NB103aTTGTAGGGAAAATGATGCCAGTGTTGATACTCTCTCTCTCChr17285NB105aAAACAACCGACTGAGCAACATCAAAATCTTAGCCCAAAATCTCCChr17286NB106aGTACGTCGACATGAGAGAGTCTCTTGTTCCTTCCTGCACChr17287NB109aATGCTCTATAAAACCCACCTACCAGAGGGACCATTGTGTTATTGTATChr17288NB110aTGATGATGTGATTTGATGGAGTGCCATTCCATTGTACGGATTChr17附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-10序号引物名称正向引物序列反向引物序列染色体位置289NB111aCCAAGCTGTGATTATAGGAAGAGGCTGAAAGATTGTAAGGTChr17290NB113aATGAAATATGTCGTGTTGCCCTTAGCCCTTCCTCAGCATGTTTCCTAGACChr17291NH007bACCTTGATGGGAACTGAACAATAGTAGATTGCAATTACTCChr17292NH019bGAGATGGAGTAGTAAAGAAGAAGGACGACATAGTGAAAACAGAAGChr17293NH020aGGATCAGCCAAGAGGAGGTGCGAGATGCAGAGGACGACGChr17294NH021aATCTCAATTTTCTCGGTAACCACTGATATCTCTCTGCACTCCCTChr17295NH022aCATGAAGTGCGTAGAAGTTGGTGTCCCAATAATGATAAGTTCCCAAAGChr17296NH023aGATGCTAGAAGGAAGGAATGATGGCTTTTCAACCCCTTCACCTTCTCChr17297NH024bACCAAAAGTAGAGAGAGAGACCCAACCAGACTAAAAGAGAChr17298NH025aCTGGACACAAACATTCAAGAGGGCACACCAGAAACTCCAAAACAGGChr17299NH027aTAATGTGTTGGGGAGAGAGAGGCTCTTGTTCCTTGCTCCTAAChr17300NH030aGCAACAGATAGGAGCAAAGAGGCTCCAAAGTTCAAChr17附表1 实验所用已发表SSR引物列表(续)-111.基因MDP0000686092编码的氨基酸序列MSDDKMAHDIEXQLDNLSGLSPERCIYRVPERLRQVNEKAYTPQVV XVGPLHHGNGPLKAMEEHKLRYLKHFLSKTKVKLSDCLQKIQEQXKELR GFYAEPIXFDKGEFVRIVSVDAAFVIDLLLRFEVVNYREDEDDYIFSKPTM KSDVIRDLQLLENQLPFFILQDLFKLIPPQLQLQLPSLLEISYNFFQSXIDSE VKXEKFNKISSSGVEVKHFVDLIRILYLPLEPKXKPKTTATPKTRDXPNVT ELHQAGAKFKVGKGSSLFDIKFSCGILKIXKLRVDDTTDLKLRNLLAFEQC HHRKEEEDXLANYVFLMKRLAKTREDVQLLVEKGIIENWLGDTQKISNLL HDLGTGMIVDDWYYAPHXEKLIEYRXVLCRGWMVILKQKYFNTPWSTIS VAAAVILLILTLIQTACSYKSVPLL*2.基因MDP0000205432编码的氨基酸序列MAIEGRFNWSRTSHSFSALCKNRKAATLSRRNLRRESPPQPCKKTGI KSVGLKPTWSFSLLASCCCWTIGRAMRGLEETTCRWRRGGRKMKRKDY EELDDDFFSPSSKSRRLDAGLFATLNEDQSSAAQVFDEKPAPETSVVMQT DDLPTDPLPSGDEXALVLYNPTNTRIFKAPDSQDFSVIVNSDLIPGLREDX GSDEENKEVSNRCMAVVPWVAPNFPPASRDETQAASQSESMEVEMMDT DDNGYNGAEASGFGGTMMEGPGGIQYWQQQQLRWMEPQLFQNNITPVT3.基因MDP0000120033编码的氨基酸序列KNNWRVELSHNSRGGGGGRGGGGRGRSGGSDLKCYECGEPGHFAR ECRLRGGGGGGGGGGRRRSRTPPRYRRSPSYGRRSYSPRGRSPRRRSLT PRGNSRSRSPPYRGREELPYANGMTFHLIHAMMQWSEGSPPKQELRSAY MATWRCFRRYTGIKCCLVCLDISTTMFKLGDALSLYCLSDLVKFLPFLTLA GFIYLCKIGVGIRILKVSSASSASLVLFFCTPLAPGIFVLHYCPALGSSILNGC RSQPARASILCFCTLPGISSLPCYWDLQFXIVVDPSLLSAELLFSLNFVGSN APPSNYYSXICLIEQWVTPRMFLFYRSWRFGSDNRFSDPTPIFLPLIFNWIQ KYRNKFGSKGNLDHTETLTPCFVVG4.基因MDP0000864010编码的氨基酸序列MESEGTPYAPKSILITGAAGFIGSHVTNRLIKNYPSYKIVALDKIDYCS SFKNLRPCRSSPNFKFVKGDIACADLINHLLIADEIDTIMHFAAQTHVDNSF GNSFEFTNNNVYGTHVLLEACKVTQRVKRFIHVSTDEVYGETDMETNIGN PEASQLLPTNPYSATKAGAEMLVMAYHRSYGLPTITTRSNNVYGPHQYP EKLIPKFSLLAMKGEKLPIHGNGSNVRSYLYCDDVAEAFDVILHKGVIGH VYNIGTKKERSVLNVAEDICKMIGLNSKEAITFVQDRPFNDQRYFLDDQK LKRLGWDVRTSWEEGLKLTTEWYTKHADWWGDVSAALHPHPSFAVISR PNDDSWFFEYGFTRLSRTCNEGSNSSELKFLIYGRTGWIGGLLGKLCKGEG IXFEYGKGRLEDRKSLLEDITRVQPTHVFNAAGVTGRPNVDWCEXHKAQ TIRTNVAGTLNLADVCKDQGLLMMNFATGCIFEYDKEHPLGSGIGFKEED NPNFTGSFYSKTKAMVEELLKEYDKVCTLRVRMPISSDLSNPRNFITKIAR XDKVVNIPNSMTVLDELLPISIEMARRNCRGIWNFTNPGVISHNEILEMYR DYIDPKLKWQNFDLEEQAKVIVAPRSNNELDASKLKKEFPELLSIKDSIIK YVFEPIKKT*5.基因MDP0000945764编码的氨基酸序列MDVLVGPTFSLDVSSYGPAPTQDNRNRGGLYLNQDRGAAVAEEASS DSSSSIGVPDDSEEEEDSKGDNGDEVQSKFNGGGGGGLGSLGSFGSLEDSL PIKRGLSNYFSGKSKSFASLSEVSSTVSSVKEVEKQDNPFNKRRRVLIASK WSRRSSSSSSLYNWPNPKSMPLLALAEDGDEDDDEHDRDREGEGENASS EQSSSDEKEDQERRRXPQKLLDRRLKSFKSKSCYCLSDLQEHDEQ*引物名称正向引物序列反向引物序列SNP4970R:TGGACAAACAGGAAGCACGF:CAGCGACAGTGGCGACAASNP4236R:GCTTATCATAAAAAGCAAGACCACF:ATCATATAATTGTGTAATTTAGTAGAACASNP4257R:GGAGTCATAAGCCACAACGAGF:TCAGCTTTGAAGCATCCAATTSNP4336R:AGTTCGTTCTTTTCCGTTGCTF:GCGGTCCTGATTCAGGTACAGSNP3955R:CCCTTAAAAGCCATGGAAGAGF:GTTCTGCATAAAAACCTCGCASNP4094R:GGGTTTTGTGAGGAGGAGGAGF:CGAAGATTGCGACGGGATAGSNP3969R:CTCGTTAGGCCAAGACAAGCF:TTCAAAGAGTAGGTAGGAAGGGT附表2 SNP、InDel引物设计引物名称正向引物序列反向引物序列SNP4137R:GCACGAGTATGATGTTGCTAATGF:CCATCTTATGTCCCCAATTTGTAGSNP42992R:GGTTATACATAGAGGCACTTAGAGCF:GCACAAAACTTAGATCAAAGATGAGSNP42994R:TCAACTCATGTGCAGGAATTGGF:GCTGTGACATAAACCAGGTGAGASNP4376R:GTTTGCTGAGAAATTGATTGGAF:CCATTTCTCCTGGGGCATAGSNP4390R:AGGGCTTGGCTCACAATACTCF:TCAGGTCACAGTTGTTTTGGCSNP4432R:CGAGGAGCAAACGATAGTCAGF:ATTGGTCTCCGAATTAGAAGTCCSNP4782R:GGAGAGCGATTTATTCTACCCTACF:AGACGAAGAAAGCAACGAAAGASNP4842R:GGTCAAAATTGTCCTAGCCTATTTCF:TCCCTCATTTCCTCTTTTTACCTACSNP4878R:GAAGCAGCAGTGCAGGATGAGF:CCATAGCCCTTTGCTCTATTTGTSNP4903R:CTAGGCAAATTTAGGTAAATTTCTTAF:GACAGGTTATCAGTTTATAGCATCAAGSNP4960R:TGAGGCTATCACATTTCCAACGF:GGTTAGATGCAGCCCGATTTindel4199R:ATTGTGAAACCTTGATTGGGF:GAGATTATCCTTATTTTGTGGGindel4209R:ATGGAACGTAAGAACAAGGAF:TTGCTGAGAAGAGTACAAGTGindel4225R:AGGCGCGGTGTTGTCTAAF:CCTCAGGTGCAATAATCATCAindel4227R:AGCGTTGCTATGCTTCTAATGF:AAGATGGAAATGGTATGTGATindel4229R:AACAGAAACATTCGAGGCGTAF:TCCTTGAACTTCGTCGGTAGCindel4235R:GTGTGAAAGCTCAACTCTCCF:CAGCCTTCTCATCGGGTAGindel4246R:GGTAGCACATGCATACTGACAF:CGTTTTGGTAACTAAATCTCCindel4247R:ATGAATGTTTCGCCGAGCF:GTTCAACCATTTTATTGGATTTTindel4254R:ATAAAGTCACTTCTAGCACAAATAF:CGAAAAACGCTTTACTTAGGindel4268R:TCCACAGAAAACAACTAAAAAF:GTTTGCCAATGGGAATGindel42686R:GGCATGAATAGTTTCCACAGAF:TTTGCCAATGGGAATGTTTindel4273R:GAATGTAAGCCATGCCCTCTF:TTCCTACCATTTGTTGCCTCindel4273aR:AATGAAGAGGCAACAAATGGF:TTTTTTATCAAATCCAAATGTGindel4273bR:GTGGTTAAAGGGATTATGTCTF:TGCGAATAGGATTGAGGTindel4274R:TTGAGGGAATGAAATATGCTAF:TTGTTTATCGAATTGGGTTTindel4305R:GTAAACTCATTAAATTATGCTTGF:TGCTTTACTCCGATTCTTCindel4305aR:GTTACTTGGGCTTCCAGACAF:CCCCCAGAGAAATAGAGAGTTindel4307R:AGAAATCCGATCCTTACCACF:TGTTATCCCGTGGGTCTTindel4311R:AAACTGATAAACTTGGAGATTGF:GACGCCTACCGAACTACAindel4334R:ATACTATGAGGTGAAGGATTTAAF:GTATCTTCTACATTATCTTTCGTGindel4336R:CTCGTCGTCTATCGGTGTTF:GGGGTTTACTTGATTGGGA附表2 SNP、InDel引物设计(续)-1引物名称正向引物序列反向引物序列indel4341R:AGTCGGAAAATTCATTCATATF:GAGCTTACAGTTTTTGGTTTTindel4346R:GTTCACGGGATTAAGTCATGF:CAACGGCAAAAAATTATTATAindel4348R:GCTTATGCTCAGGGTCGTF:TTTTGATTTAAGTTATTATTTTCCAindel4349R:CAATCCATTTCAATTTTTCTGF:TTATTTTACCCCTACCCCATindel4362R:TTGAGGTTCGTTTTGGTATF:TTCAATTTTATCTCTTGGTCCindel4362aR:ACAAGTTAACAGATTTTCAAAGTF:GCTTGTAATTTGTTTTTTATGAAindel4371R:TTATTGTGTTTCTGTGCGTACF:CCAAATTATCGTTCACTGCTndel4372R:TTTGAAAACACCCTTGAATGF:TGGTTCCTGAGTGGGTAAAGindel4374R:TCAGTGACTTCGGCGTATTF:AGTTCAATCAATCTCCCAAA附表2 SNP、InDel引物设计(续)-2 -
报告柑橘生产技术
出版时间:2019柑橘是世界第一大果树。全世界柑橘年产量有1亿多吨,种植面积高达667万hm2。中国是柑橘最重要的原产中心之一,有着悠久的种植历史。在所有的水果中,其鲜食、加工性能均好,基本上可以做到没有废料。柑橘性喜微酸、湿润环境,最适宜的生长温度为29℃,最适合生长的湿度75%左右;平均生长寿命50年左右。柑橘树形比较矮小,树冠直立或呈自然圆头形或半圆头形。成枝力中等,枝条的顶端优势不强,分枝间势力均衡,常无明显主干,树形比较优美。柑橘的花芽为混合芽,可在生长健壮的各类梢的先端依次形成。如新梢多次生长,则花芽发生的部位随之上移。结果枝有带叶果枝和无叶果枝两种。柑橘的花为雌雄同花,多单生或丛生,为完全花,能自花授粉结实。抗性强、易栽、易管、丰产、品质优良和耐储运等是现代柑橘优良品种的主要特征。砂糖橘、本地早、温州蜜柑、梭柑、蕉柑、南丰蜜橘等。新会橙、柳橙、雪柑、伏令夏橙、血橙、香水橙、脐橙、冰糖橙等。沙田柚、琯溪蜜柚、文旦柚、葡萄柚类等。金弹、四季橘等。选择土壤肥沃、质地疏松、土层深厚、保水排水性好,心土松软的红壤、沙壤土建园。坡向以南向、东南或马蹄形山窝建园为好,西向北向要注意营造防护林。坡度选择5°~15°建园为佳。橘园附近必须有水源。现代柑橘建园技术推广宽行密株和宽行稀株两种模式。在方便管理的同时能大幅度提高柑橘品质,增加柑橘生产效益。宽行密株行距5~6m,株距2~3m,每667m2植38~67株。山地宜密,平地宜稀。一般柑橘苗春、秋两季都可定植,以春季定植为佳,一般在3月上旬橘芽萌发前定植为宜。容器苗全年均可定植,其最佳定植时间是春梢发生结束后。挖大穴,施足基肥。通常要求挖深0.8m,宽1m的定植穴,把心土和表土分开放,每穴施入腐熟有机肥30~50kg,石灰1.5~2.0kg,腐熟菜饼1kg,钙镁磷1.5~2kg,与表土充分混匀填入穴内,肥土要踏紧。定植时苗木置入定植穴后,再用小刀划开并取出营养袋,扶正苗木,填土踏实即可。(1)深翻。每年要进行一次深翻,对柑橘园20~40cm土层进行翻动,近树颈处浅些,树冠外深些,结合增施有机肥,以改良和活化土壤。萌芽期、花期尽量不要深翻。(2)培土覆盖。夏秋高温干旱,在树冠下每株培土高5~10cm防旱,冬季采果后,进行培土高30cm防寒。(3)中耕松土。成年橘园春节杂草容易滋生,雨后土壤板结,结合除草疏松表土,夏季中耕切断毛细管,减少水分蒸发。(1)早施基肥。早熟品种在10月中、下旬,中熟品种宜在11月中旬或采果后,每株施腐熟有机肥20~30kg,磷肥3~5kg,石灰1~1.5kg,复合肥1~2kg,施肥量占全年35%~40%,结果多,大树多施,小树少施。(2)巧施追肥。①春芽肥。一般在2月下旬至3月上旬春梢萌动期进行。以施用高比例的氮、磷复合肥为宜,配合施用腐熟的有机肥。株施尿素0.5~1.0kg,人粪尿20~30kg,复合肥2kg。施肥量占全年施肥的20%。②稳果肥。施肥量占全年10%,5月上中旬一般株施复合肥1kg,开花结果多的多施,结果少的不宜施。③壮果促梢肥。7月下旬至8月上旬株施腐熟饼肥1.5~2kg,人粪尿20~30kg,硫酸钾1~2kg,施肥量占全年的25%~30%。(3)施肥方法。①条状沟施肥。山地果园通常采用条状沟施肥方式,即在树冠滴水线处,开深20~30cm,宽30cm的条沟,沟长根据树冠而定。下次施肥在树冠的另外两侧开沟,施肥后盖土。②放射沟施肥。在树冠距树干1~1.5m处,按树冠大小,向外开放射状沟4~6条,沟深20cm,沟宽30cm,靠近树干处开浅些,逐步向外沿开深些,施肥后盖土。这方法适用于较窄的梯台。在谢花2/3时喷20mg/kg赤霉素或5406细胞分裂素800倍液+0.2%硼砂和0.2%磷酸二氢钾一次;5月上旬和6月中下旬各喷一次30mg/kg水溶性防落素或800倍液5406细胞分裂素+0.2%磷酸二氢钾和0.3%尿素,提高坐果率。供贮藏用的橘果采收时间一般应在九成熟,果面有2/3转黄时采收。短期贮藏或直接上市果实宜在果实全面着色,果实可溶性固形物和含量达到该品种应有的标准时采收。以晴天采收为佳。采收前15d内,应停止灌水、喷药。应该准备好采收工具,橘剪、橘梯、橘篓和橘筐。橘剪必须圆头平口,刀口锋利。特别需要提醒的是,采收人员采收果实时,不宜留指甲,应戴手套,以免采收时在果面上留下伤害。采收柑橘时,应遵照自下而上、由外及内顺序采摘。采果应将不同成熟度的果实分批采收,分批储藏和加工,保证果实品质的一致性。严格采用“一果两剪”法,即第一剪在离果蒂1~2cm处,第二剪把果柄剪至与果肩相平。千万不要从果树上一下把果肩剪平,把果蒂留在植株上,以免消耗更多的养分。采收时尽量不拉枝拉果,注意轻拿轻放。 -
报告Study on the Differentiation in Pathogenicity of Different Isolates of Botrytis cinerea Pers to Tomato
出版时间:2007由灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)侵染引起的番茄灰霉病是当前番茄生产上重要病害,尤以设施栽培条件下发生较重,一般引起产量损失20%~30%。灰葡萄孢的寄主很广,已经报道过的寄主至少有235种,能为害多种粮食作物、经济作物、蔬菜、果树和观赏植物[1]。随着高效农业的发展,温室中蔬菜、花卉、果树轮作、间作日渐频繁,使得同种作物间、不同种作物间交互感染成为可能[2~3]。为了明确来自其他寄主植物的灰葡萄孢菌株能否侵染番茄,不同寄主来源的菌株对番茄的致病力是否存在差异,从而为生产上包括番茄灰霉病在内的灰葡萄孢所致植物灰霉病的综合治理提供参考依据,作者对不同寄主来源的灰霉菌株对番茄的致病力及其分化进行了研究。2005~2007年,从合肥市、蚌埠市、长丰县、和县等地区的番茄、辣椒、草莓、葡萄等发病寄主上分离鉴定获得18个灰葡萄孢菌株,采用菌丝块创伤接种法,分别测定了上述不同寄主来源的灰葡萄孢菌对番茄果实和叶片的致病力。结果表明,所有供试菌株接种番茄果实后均可引起发病,但不同菌株所致病斑的平均直径有显著差异,提示灰葡萄孢菌株间对番茄果实的致病力存在明显分化。按照在番茄果实上所致病斑的平均直径大小可将供试菌株划分为致病力较强、致病力中等和致病力较弱3种类型。总体来说,来自番茄的菌株对番茄果实的致病力较强,来自草莓、葡萄和辣椒的菌株对番茄果实的致病力较弱,但来自相同寄主的菌株间致病力也存在差异,菌株致病力差异与菌株地域来源无明显相关。供试灰葡萄孢菌株接种番茄叶片后,除CF1外,均可引起番茄叶片发病,但不同菌株所致番茄叶片病斑的平均直径也有显著差异,但菌株致病力差异与菌株的寄主和地域来源无显著相关。本文关于灰葡萄孢不同菌株致病力存在差异的研究结果与Kersises[4]的报道一致。Lorenz[5]和Kersises[4]认为灰葡萄孢不同菌株致病力分化的原因可能与异核现象有关。作者也曾采用细胞核染色法观察到部分灰葡萄孢菌株菌丝细胞内存在多核现象,但这种多核现象与异核现象乃至致病力分化之间的关系尚不清楚。因此,有关灰葡萄孢不同菌株致病力分化的机制尚需进一步研究。灰葡萄孢菌株对番茄果实和叶片的致病力测定结果比较表明,除FQ外,其余各供试菌株对番茄果实所致病斑直径均比叶片病斑直径大,但各供试菌株接种番茄果实和叶片后所致病斑直径之间没有明显的相关性。作者认为,采用菌丝块创伤接种法测定灰葡萄孢菌对番茄的致病力时,以接种果实为宜;由于不同菌株的致病力差异较大,所以在番茄抗病性测定时,宜选用强菌株或混合菌株。本研究结果指出,来自辣椒、草莓、葡萄等其他寄主植物的灰葡萄孢菌株能够侵染番茄果实和叶片,意味着上述植物上的灰霉病菌(灰葡萄孢)可以成为番茄灰霉病的侵染来源,建议在番茄灰霉病的综合治理中应予以注意。 -
报告八、豆类蔬菜病虫害
出版时间:2015(1)症状:在叶片正、背面初生淡黄色小斑点,稍有隆起,渐扩大,出现黄褐色的夏孢子堆。表皮破裂后,散出锈褐色粉末,即夏孢子。有时在夏孢子堆的四周,产生许多新的夏孢子堆围成一圈,发病重的叶子,满布锈疱状病斑,使全叶遍布锈粉。夏孢子堆一般多发生在叶片背面,正面对应部位形成褪绿斑点。后期,夏孢子堆转为黑色的冬孢子堆,或者在叶片上长出冬孢子堆。不久冬孢子堆中央纵裂,露出黑色的粉状物,即冬孢子。茎部受害产生的孢子堆较大,呈纺缍形。发病重时,易使茎、叶早枯。豇豆锈病叶正面大豆锈病叶背面(2)药剂防治:同葱蒜类蔬菜锈病防治方法。(1)症状:炭疽病也是豆类常见而重要的一个病害。通常以菜豆、豇豆和菜用大豆较易受害,从小苗至收获期均可发生,子叶、子茎、叶片、叶柄、茎蔓、荚果及种子皆可受害。病菌侵染,子叶上病斑呈圆形,红褐色至黑褐色,凹陷;茎上病斑为褐色或红锈色,细条形,凹陷和龟裂。成株叶片上病斑主要发生于叶脉上,呈多角形,红褐色至黑褐色;茎上病斑与苗期茎上的相似;荚上病斑呈长椭圆形或近圆形,褐色至黑褐色,边缘常隆起,中央部凹陷,潮湿时各患部斑面上出现朱红色小点或小黑点。(2)药剂防治:60%苯醚甲环唑水分散粒剂6000~8000倍液、60%唑醚·代森联水分散粒剂1000~2000倍液、50%硫黄·甲硫灵400~800倍液对水喷雾。豆类炭疽病为害状(1)症状:叶斑病常见的有煤斑病(赤斑病)、褐缘白斑病(斑点病)、灰褐斑病和褐轮斑病4种,其中以煤斑病发生较多。煤斑病是在叶面初生赤褐色小斑,后扩展成近圆形或不规则形,无明显界限的病斑,大小1~2厘米,有时汇合成大斑。褐缘白斑的病斑穿透叶的表面、斑点较小,圆形或不规则形,周缘赤褐色,微凸,中部褐色,后转为灰褐色至灰白色。灰褐斑病和褐轮纹斑病的病斑与褐缘白斑病有明显的同心轮纹。以上4种叶斑病的病斑背面均生有灰黑色的霉状物,其中以煤斑病产生的霉状物较多较浓密,其他的叶斑病产生的霉状物则较少较稀。豆类叶斑病病叶背面(2)药剂防治:可选用25%咪鲜胺乳油3000~4000倍液喷雾。(1)症状:此病为害根系和根茎部。初在主根或侧生根上产生红褐色水渍状斑,逐渐向上下发展使根系坏死,以后变褐腐烂,并向根茎发展,终致根茎坏死腐烂。(2)药剂防治:可选用50%多菌灵可湿性粉剂500倍液、25%丙环唑乳油2000倍液、1×106个孢子/克寡雄腐霉3000倍液进行灌根处理。架豆根腐病(1)症状:病毒病是为害较大的一类传染性病害。豆类病毒病的症状依每一种豆类感染的病毒病不同而各有特点。如多种豆类的花叶病,叶片表现明脉、浓绿与淡绿相间的斑驳花叶、叶片畸形皱缩、叶片变小。又如,豇豆丛枝病,除叶片变小,叶面皱缩、卷曲外,其最大特点是叶腋簇生多条不定枝而表现为丛枝状,豆荚短而卷曲,尾端尖细如鼠尾状。上述豆类病毒病症状的共同点是:病株矮小,开花迟缓或易落花,或不开花结荚,荚果少而小,畸形或变色。病株荚果产量和质量都大为降低,经济损失明显。(2)药剂防治:同番茄黄化曲叶病毒病防治方法。可通过防控蚜虫、蓟马、粉虱等传毒介体进行预防。豆类病毒病病叶(1)为害特点:豆蚜成虫和若虫刺吸嫩叶、嫩茎、花及豆荚的汁液,使叶片卷缩发黄,嫩荚萎缩,影响生长发育,造成减产。其常常引起煤污病、病毒病等间接为害。(2)药剂防治:同葫芦科蔬菜蚜虫防治方法。豆蚜为害状(1)为害特点:幼虫蛀荚,取食豆粒,严重影响产量和质量。(2)形态特征:①成虫。体长10~12毫米,翅展20~24毫米,体灰褐色或暗黄褐色。前翅狭长,沿前缘有一条白色纵带,近翅基1/3处有一条金黄色宽横带。后翅黄白色,沿外缘褐色。②卵。椭圆形,长约0.5毫米,表面密布不明显的网纹,初产时乳白色,渐变红色,孵化前呈浅菊黄色。③幼虫。共5龄,老熟幼虫体长14~18毫米,初孵幼虫为淡黄色。以后为灰绿直至紫红色。4~5龄幼虫前胸背板近前缘中央有“人”字形黑斑,两侧各有1个黑斑,后缘中央有2个小黑斑。④蛹。体长9~10毫米,黄褐色,臀刺6根,蛹外包有白色丝质的椭圆形茧。豆荚螟为害花与荚(3)药剂防治:可选用10%溴虫氰酰胺可分散油悬浮剂6000倍液、10%氯氰·敌敌畏乳油6000~8000倍液、200克/升氯虫苯甲酰胺悬浮剂8000倍液喷雾。(1)为害特点:若螨、成螨在叶背面吸食汁液,致叶片出现褪绿斑点,逐渐变成灰白色斑和红色斑。严重时叶片枯焦脱落,田块如火烧状,造成植株早衰,缩短结果期,降低产量和品质。(2)药剂防治:可选用1.8%阿维菌素乳油2500~3000倍液、0.5%藜芦碱可溶液剂3000倍液、43%联苯肼酯悬浮剂2000~3000倍液喷雾。(1)为害特点:成虫和若虫为害蔬菜花器,影响开花结实,也为害幼苗、嫩叶和嫩荚。严重时显著降低产量和质量。(2)药剂防治:同葫芦科蔬菜蓟马防治方法。豆类蓟马为害状 -
报告猕猴桃病害诊断及绿色防控
出版时间:2018猕猴桃细菌性溃疡病是一种严重威胁猕猴桃生产的毁灭性病害,被列为全国森林植物检疫对象。此病来势凶猛,流行年份致使全园濒于毁灭,造成重大经济损失。猕猴桃细菌性溃疡病不仅可造成产量降低,而且导致果皮变厚、果味变酸、果实变小、果形不一、品质下降、商品价值降低。(1) 枝干症状。病菌能够侵染至木质部造成局部溃疡腐烂,影响养分的输送和吸收,造成树势衰弱,流出白色至红褐色菌脓,严重时可环绕茎秆引起,形成龟裂斑,甚至致使树体死亡(图9-1)。(2) 叶部症状。在新生叶片上呈现褪绿小点,水渍状,后发展成不规则形或多角形、褐色斑点,病斑周围有较宽的黄色晕圈。在连续低温阴雨的条件下,因病斑扩展很快,有也不产生黄色晕圈。严重时,叶片卷曲成杯状 (图9-2)。猕猴桃细菌性溃疡病的病菌从气孔、水孔、皮孔、伤口(虫伤、刀伤、冻伤等) 等进入植株体内裂殖。传播途径主要是借风、雨、嫁接等活动进行近距离传播,并通过苗木、接穗的运输进行远距离传播。猕猴桃细菌性溃疡病病菌对高温适应性差,在气温5℃时开始繁殖,15~25℃是生长最适宜温度,在感病后7天即可见明显病症,30℃时短时间也可繁殖。所以容易在冷凉、湿润地区发生并造成大的为害。2月初在多年生枝干上出现菌脓白点,自粗皮、皮孔、剪口、裂皮等伤口溢出,并迅速扩散变乳白色,然后变红褐色。3月末以后,溢出的菌脓增多,病部组织软腐变黑,枝干出现溃疡斑或整株枯死,成熟新叶出现褐色病斑,周围组织有黄色晕圈。6月后发病减轻,夏、秋、冬季处于潜伏状态。图9-1 猕猴桃溃疡病图9-2 叶片溃疡病染病状态(1) 叶片发病规律。叶部感病,先形成红色小点,外围有不明显的黄色晕圈。后扩大为不规则的暗绿色病斑,叶色浓绿,黄色晕圈明显。在潮湿条件下迅速扩大成水渍状大斑,受叶脉限制呈多角形。秋季产生的病斑呈暗紫色或暗褐色,晕圈较窄(图9-3)。(2) 枝干发病规律。溃疡病多从茎蔓的幼芽、皮孔、落叶痕、枝条分叉部开始,初呈水渍状,后病斑扩大,色加深,皮层与木质部分离,手压感觉松软。后期病部皮层呈纵向线状龟裂,流出青白色黏液,后转为红褐色。病斑绕茎迅速扩展,病茎横切面可见皮层和髓部变褐色,髓部充满白色菌脓 (图9-4)。受害茎蔓上部枝叶萎蔫死亡。图9-3 猕猴桃细菌性溃疡病叶部发病规律(1) 病斑处理。此技术主要针对猕猴桃植株的主杆上的溃疡病病斑,目的是减少溃疡病活菌数量及清除发病部位的腐烂组织。①用具与药剂。工具:小刀、酒精瓶 (内装75%酒精)、无菌塑料布条、毛笔等工具;药液:72%的硫酸链霉素可溶粉剂稀释100~200倍液、3%中生菌素可湿性粉剂50~100倍液、6%春雷霉素可湿性粉剂50~100 倍液、1%申嗪霉素悬浮剂100~150倍液等。②实施方案。时间:每年冬季、春季,树干出现病斑、流脓等症状的时期;方法:用消毒后的小刀,刮除猕猴桃树干病斑,包括发病表皮、变色木质部和距病斑边缘0.5厘米左右的健康表皮,选取上述药液涂抹在刮除部分,然后用无菌塑料布包好。③注意事项。小刀用完后及时消毒,避免交叉传染;刮除的病部组织要及时带出园区,集中烧毁。图9-4 猕猴桃细菌性溃疡病白色菌脓(2) 涂干。此技术主要是针对猕猴桃植株冬季越冬制定的。①用具与药剂。工具:水桶、刷子等;药剂:涂白剂可自行配制,生石灰10 份、石硫合剂2 份、食盐1~2 份、黏土2份、水35~40份,也可选商品制剂。②实施方案。时间:每年采果后对树体进行保护,在11月初至12月初进行,猕猴桃植株涂干技术的应在冬季修剪、清园后进行;方法:将调制好的涂白剂用刷子均匀地涂抹在冬剪后主干和主蔓上,以覆盖全部主干和主蔓为准,特别是一些树缝隙处。本方法既可防止病菌浸入树干,又可预防树干冬季冻害。(3) 灌根。①用具与药剂。工具:水桶、量杯、玻璃棒等;药液:72%的硫酸链霉素可溶粉剂稀释500~1000倍液、3%中生菌素可湿性粉剂200~500倍液、6%春雷霉素可湿性粉剂200~500倍液、36%三氯溴异氰尿酸可湿性粉剂300~500倍液、1%申嗪霉素悬浮剂500~1000倍液、荧光假单胞杆菌500倍液等。②实施方案。时间:猕猴桃溃疡病重点发生期,4月初至6月;方法:选取以上药剂两种以上,复配制成上述浓度药液。按每棵猕猴桃树3~5升的施药量进行灌根施用,以湿润猕猴桃根系附近土壤为准,发生严重的果园,每15天施用1次。③注意事项。选择药剂时应选择内吸性较好的药剂,药剂需要交替使用和混合施用。猕猴桃褐斑病又称叶斑病,主要为害叶片和枝干,是猕猴桃生长期严重的叶部病害之一。严重时导致叶片大量枯死或提早脱落,影响果实产量和品质。发病初期,多在叶片边缘产生近圆形暗绿色水溃状斑,在多雨高湿的条件下,病斑迅速扩展,形成大型近圆形或不规则形斑。后期病斑中央为褐色,周围呈灰褐色或灰褐相间,边缘深褐色,其上产生许多黑色小点 (图9-5)。图9-5 猕猴桃褐斑病——叶部病斑在多雨高湿条件下,病情发展迅速,病部由褐色变成黑色,引起霉烂。严重时,受害叶片卷曲破裂,干枯易脱落 (图9-6、图9-7)。病菌可以在病残体上越冬,翌年春季萌发新叶后,借助风雨飞溅到嫩叶上,一年内可多次发病。5—6月为病菌侵染高峰期,病菌从叶背面入侵。7—8月为发病高峰期。高温高湿易发此病。图9-6 猕猴桃褐斑病图9-7 猕猴桃褐斑病严重时期(1) 农业防治。加强果园管理,清沟排水,增施有机肥,适时修剪,清除病残体。(2) 化学防治。发病初期使用75%百菌清500倍液、25%嘧菌酯1500倍、68%精甲霜锰锌400倍液,隔5~7天喷1次,连喷2~3次。发病中期使用30%苯甲丙环唑2000倍液,32.5%苯甲嘧菌酯1500倍液。在采果前30天,用56%嘧菌·百菌清1000倍液喷1~2次,可延长叶片寿命,提高果实品质。用70%代森锰锌400~800倍液叶面喷施,要均匀周到片片见药或喷洒猕杀粉剂600~800倍液,如发现园内叶片有红蜘蛛,可在药液中加入阿维菌素或阿维甲氰1500~2000倍液,兼杀红蜘蛛。猕猴桃黄叶病在各地普遍发生,造成严重为害,尤其在地下水位较高的湿地,发病率较高,发病株率占到栽培总株数的20%左右,严重田块发病株率高达30%~50%。发生黄化病的叶片,除叶脉为淡绿色外,其余部分均发黄失绿 (图9-8),叶片小,树势衰弱。严重时叶片发白,外缘卷缩、枯焦,果实外皮黄化,果肉切开呈白色,丧失食用价值,长时间发病还会引起整株树死亡。图9-8 猕猴桃黄叶病叶部症状发病原因发病严重的有5种情况。(1) 进入盛果期的老果园因结果负载量大而发病严重。(2) 以往的上浸地和无法浇灌的干旱果园。(3) 不注意氮、磷、钾及微量元素平衡配套施肥的果园。(4) 忽视防治线虫病、根腐病为害的果园。(5) 管理粗放的果园。以上几种情况都从根本上导致树势衰弱,根系吸收、输送能力下降而发生黄叶病。(1) 农业防治。结合修剪抹芽、疏花疏果,剪除病枝蔓,抹掉病弱芽,合理留花留果,以免果树负载量过大,造成树势衰弱,降低自身抗病能力;注意平衡施肥,结合浇水,在施足氮、磷 (磷肥不宜施用过量) 肥料的同时注意增施氯化钾或硫酸钾,盛果园每亩7千克。(2) 化学防治。中草药保护性杀菌剂靓果安和叶面肥沃丰素配合使用。靓果安重点使用时期:萌芽展叶期、新梢生长期各喷施1次 (4—5月)、果实膨大期6—8月,每个月全园喷施靓果安效果佳。沃丰素重点使用时期:新梢期、花后、果实膨大期使用,按500~600 倍液 (每350 毫升对水200 千克使用)各时期喷施1次。受害叶背面生出许多点状、团块状至不规则形,黑褐色或灰黑色厚而密的扩散霉层。叶片初期生褪绿的黄色小点,后扩大成圆形至不规则形的黄褐色至深褐色病斑,其上依稀可见许多近黑色小点,一片叶子上有数个或数十个病斑,病斑上有黑色小霉点 (图9-9),后期融合成大病斑 (图9-10)。严重时叶片变黄早落,影响产量。图9-9 猕猴桃黑斑病叶部症状图9-10 猕猴桃黑斑病中期叶背病斑病菌在叶片病部或病残组织中越冬,翌年春天猕猴桃开花前后开始发病。进入雨季病情扩展较快,有些地区有些年份可造成较大损失。栽植过密、棚 (篱) 架低矮、枝叶稠密或疯长而通风透光不良的果园极利于病害的发生与流行。(1) 农业防治。建园时选用抗病品种,如梅沃德、建宁79D-13等品种 (株系);生产管理上除做好冬剪、夏剪、落叶后清园外,还应注意防止病菌传入。(2) 化学防治。对发病植株,在发病初期、中期对全植株喷洒70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1000倍液,或25%多菌灵可湿性粉剂500倍液,或20%三环唑可湿性粉剂1000倍液。主要为害叶片,7—8月发生。叶上初生黄褐色小点,后扩展成枯斑,边缘褐色,中部灰褐色,有较明显轮纹。病部生有黑色小粒点 (图9-11)。图9-11 猕猴桃轮纹斑病病菌在叶片等病残体上越冬,翌年6—8月高温多雨季节进入发病盛期。品种间抗病性有差异。(1) 农业防治。重病区选用抗病品种;发病初期,于5—6月及时剪除发病枝条;秋冬认真清园,结合修剪,彻底清除枯枝、落叶,剪除病枝,集中烧毁病残体,消除病源。(2) 化学防治。春季萌芽前喷布1次3~5波美度的石硫合剂。发病初期喷施25%苯菌灵乳油700倍液或50%甲基硫菌灵可湿性粉剂900~1000倍液、12%松脂酸铜乳油600倍液。为害症状一般从猕猴桃叶片边缘开始,初呈水溃状,后变为褐色不规则形病斑。病健交界处明显。病斑后期中间变为灰白色,边缘深渴色。受害叶片边缘卷曲,干燥时叶片易破裂,病斑正面散生许多小黑点 (图9-12、 图9-13)。图9-12 生长期果实炭疽病图9-13 成熟果实炭疽病病菌主要以菌丝体或分生孢子在病残体或芽鳞、腋芽等部位越冬。病菌从伤口、气孔或直接侵入,病菌有潜伏侵染现象。(1) 农业防治。注意及时摘心绑蔓,使果园通风透光,合理施用氮、磷、钾肥,提高植株抗病能力,注意雨后排水,防止积水;结合修剪、冬季清园、集中烧毁病残体。(2) 化学防治。在猕猴桃生长期,果园初次出现孢子时,3~5天内开始喷药,以后每10~15天喷1次,连喷3~5次。使用药剂有 (1 ∶ 0.5 ∶ 200) 波尔多液,0.3波美度的石硫合剂加0.1%洗衣粉,50%甲基硫菌灵可湿性粉剂 800~1000 倍液,65%代森锌可湿性粉剂500倍液,50%代森铵水剂800倍液。猕猴桃灰斑病一般从叶片叶缘开始发病,叶片上有灰色病斑,初期病斑呈水渍状褪绿褐斑,随着病情的发展,病斑逐渐沿叶缘迅速纵深扩大,侵染局部或大部叶面。叶面的病斑受叶脉限制,呈不规则状。病斑穿透叶片,叶背病斑呈黑褐色,叶面暗褐至灰褐色,发生较严重的叶片上会产生轮纹状灰斑。发生后期,在叶面病部散生许多小黑点。严重时可造成叶片干枯、早落,影响正常产量 (图9-14)。图9-14 猕猴桃灰斑病病菌在病残体上越冬,在春芽萌发展叶后,随风雨传播到嫩叶背面进行潜伏侵染,在叶片坏死病斑上,进行再次侵染。5—6月,病菌开始入侵。到7—8月叶部症状明显,开始是小病斑,之后逐步扩大,叶片后期干枯,大量落叶。到8月下旬开始大量落果。10月下旬至11月开始进入越冬期。被侵染的叶片,抗性减弱,该病原常发生再侵染,所以有时在同一叶片上出现两种病征。(1) 农业防治。加强果园管理,合理施肥灌水,增强树势,提高树体抗病力;科学修剪,剪除病残枝及茂密枝,调节通风透光,保持果园适当的温湿度;冬季彻底清园,将地面落叶和枝条清扫干净,集中烧毁。(2) 化学防治。翻土后喷5~6波美度石硫合剂于枝蔓。5月是最佳保护预防期,开花前后各喷1次药会减少初侵染。7—8月,用代森锰锌1000倍液、甲基硫菌灵800倍液进行树冠喷雾,进行2~3次即可。在叶面、枝梢上形成黑色小霉斑,后扩大连片,使整个叶面、嫩梢上布满黑霉层。由于煤烟病病菌种类很多,同一植物上可染上多种病菌,其症状上也略有差异。呈黑色霉层或黑色煤粉层是该病的重要特征 (图9-15)。病菌在病部及病落叶上越冬,翌年孢子由风雨、昆虫等传播。寄生到蚜虫、介壳虫等昆虫的分泌物及排泄物上,或植物自身分泌物上,或寄生在寄主上发育。高温多湿,通风不良,蚜虫、介壳虫等害虫发生多且分泌蜜露,均加重发病。图9-15 煤烟病(1) 农业防治。植株种植不要过密,适当修剪,温室要通风透光良好,以降低湿度,切忌环境湿闷。(2) 化学防治。植物休眠期喷施3~5波美度的石硫合剂,消灭越冬病源;该病发生与分泌蜜露的昆虫关系密切,喷药防治蚜虫、介壳虫等是减少发病的主要措施,防治介壳虫还可用松脂合剂10~20倍液、石油乳剂等;在喷洒杀虫剂时加入紫药水10000倍液防效较好;对于寄生菌引起的煤烟病,可喷用代森铵。主要为害猕猴桃的花蕾、花,其次为害幼果和叶片,引起大量落花、落果,还可造成小果和畸形果,严重影响猕猴桃的产量和品质。受害严重的猕猴桃植株,花蕾不能膨大,花萼变褐,花蕾脱落,花丝变褐腐烂;中度受害植株,花能开放,花瓣呈橙黄色,雄蕊变黑褐色腐烂,雌蕊部分变褐,柱头变黑,阴雨天子房也受感染,有的雌花虽然能授粉受精,但雌蕊基部不膨大,果实不正常,种子少或无种子,受害果大多在花后一周内脱落;轻度受害植株,果实子房膨大,形成畸形果或果实心柱变成褐色,果顶部变褐腐烂,导致套袋后才脱落。受花腐病为害的树挂果少、果小,造成果实空心或果心褐色坏死脱落,不能正常后熟 (图9-16、 图9-17)。图9-16 猕猴桃花腐病引起的果实病斑图9-17 猕猴桃花腐病为害花蕾 (左) 和花 (右)受害严重的猕猴桃植株,花蕾不能膨大,花萼变褐,花蕾脱落,花丝变褐腐烂;中等受害植株,花能开放,花瓣呈橙黄色,雄蕊变黑褐色腐烂,雌蕊部分变褐,柱头变黑,阴雨天子房也受感染,有的雌花虽然能授粉受精,但雌蕊基部不膨大,果实不正常,种子少或无种子,受害果大多在花后一周内脱落。(1) 农业防治。加强果园土肥管理,提高树体的抗病能力,秋冬季深翻扩穴,增施大量的腐熟有机肥,保持土壤疏松,春季以速效氮肥为主,配合速效磷钾肥和微量元素肥施用,夏季以速效磷钾肥为主,适量配合速效氮肥和微量元素肥;适时中耕除草,改善园地环境,特别在平坝区5—9月要保持排水沟渠畅通,降低园地湿度。(2) 化学防治。冬季用5波美度石硫合剂对全园进行彻底喷雾,在猕猴桃芽萌动期用3~5波美度石硫合剂全园喷雾,展叶期用65%的代森锌可湿性粉剂500倍液或50%退菌特可湿性粉剂800倍液或0.3波美度的石硫合剂喷洒全树,每10~15天喷1次。特别是在猕猴桃开花初期要重防1次。在收获的果实一侧出现类似大拇指压痕斑,微微凹陷,褐色,酒窝状,直径大约5毫米,其表皮并不破,剥开皮层显出微淡黄色的果肉,病斑边缘呈暗绿色或水渍状,中间常有乳白色的锥形腐烂,数天内可扩展至果肉中间乃至整个果实腐烂(图9-18)。该病菌靠风、雨、气流传播,从修剪造成的枝条伤口感染。图9-18 熟腐病(1) 农业防治。谢花后1周开始幼果套袋,避免侵染;清除修剪下来的枝条和枯枝落叶,集中烧毁,减少病菌寄生场所。(2) 化学防治。从谢花后两周至果实膨大期 (5—8月) 向树冠喷布 50%多菌灵可湿性粉剂 800 倍液或波尔多液 (1 ∶0.5 ∶ 200),或80%甲基硫菌灵可湿性粉剂1000倍液,喷洒2~3次,喷药期间隔20天左右。受害果起初在果蒂处出现水渍状病斑,以后病斑均匀向下扩展,果肉由果蒂处向下腐烂,蔓延全果,略有透明感,有酒味,病部果皮上长出一层不均匀的绒毛状灰白霉菌,后变为灰色 (图9-19、 图9-20)。病菌以分生孢子在病部越冬,通过气流传播。图9-19 猕猴桃蒂腐病图9-20 蒂腐病在花季期的表现(1) 农业防治。搞好冬季清园工作;及时摘除病花,集中烧毁。(2) 化学防治。开花后期和采收前各喷1次杀菌剂,如倍量式波尔多液或65%代森锌可湿性粉剂500倍液;采前用药应尽量使药液喷洒到果蒂处,采后24小时内用药剂处理伤口和全果,如用50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液加2,4-D 100~200毫克/千克浸果1分钟。秃斑表面若是由外果肉表层细胞愈合形成,比较粗糙,常伴之有龟裂缝;若是由果实表层细胞脱落后留下的内果皮愈合,则秃斑光滑。湿度大时,在病斑上疏生黑色的粒状小点,即病原分生孢子盘。病果不脱落,不易腐烂 (图9-21)。病菌先侵染其他寄主后,随风雨吹溅分生孢子萌发侵染。图9-21 猕猴桃秃斑病为害果实状(1) 农业防治。加强果园管理,增施钾肥,避免偏施氮肥,增强抗病力。(2) 化学防治。发病初期喷施27%碱式硫酸铜悬浮剂600倍液或50%氯溴异清尿酸水溶性粉剂1000倍液、50%咪鲜胺可湿性粉剂900倍液、75%百菌清可湿性粉剂600倍液。受病菌感染的雌花和雄花都会变成褐色枯萎状,常萎蔫下垂,难以开放。发病花器的病残组织与果实接触后可使果实感染病菌,果实受害后,果面形成下陷褐色病斑,上面覆盖白色菌丝体 (图9-22)。多雨潮湿,温度较低时,有利于菌核萌发和子囊孢子的形成。土壤黏重的地方,发病也较重。图9-22 猕猴桃果实褐腐病前期症状大量的菌丝体在受害部位变成黑硬的菌核,菌核落到果园后,病菌继续蔓延,在果园中传播。(1) 农业防治。加强果园土肥水管理,及时清除树盘周围枯枝落叶并集中烧毁。(2) 化学防治。菌核萌发期、落瓣后及采收前应喷洒0.5波美度的石硫合剂或800倍液甲基硫菌灵。展叶前后喷施50%代森锌可湿性粉剂500倍液。为害果实,多在果肩或朝上果面上发生,病斑近圆形,红褐色,较小,突起呈疱疹状,果实上许多病斑连成一片,表面粗糙,似疮痂状。病斑仅发生在表皮组织,不深入果肉,因此,为害较小,但降低商品价值。多在果实生长后期发生 (图9-23)。图9-23 猕猴桃疮痂病以菌丝体和分生孢子器随病残体遗落土中越冬或越夏,并以分生孢子进行初侵染和再侵染,借雨水溅射传播蔓延。通常温暖高湿的天气有利发病。(1) 农业防治。及时收集病残物烧毁。(2) 化学防治。结合防治其他叶斑病喷施75%百菌清可湿性粉剂1000倍液加70%甲基硫菌灵可湿性粉剂1000倍液,或75%百菌清可湿性粉剂1000倍液加70%代森锰锌可湿性粉剂1000倍液,每隔10天左右喷施1次,连续喷施2~3次。多与枝干粗皮、裂口、藤肿等症状相伴生,如膏药一样贴在枝干上。病菌表面较光滑,初期呈白色,扩展后为白色或灰色,病菌衰老时通常在枝干部发生龟裂,容易剥离,受害严重的造成树体早衰,枝条干枯 (图9-24)。图9-24 猕猴桃膏药病在患病枝干越冬,翌年春夏之交,在高温多湿条件下形成子实体。本病多出现于土壤速效硼含量偏低的猕猴桃植株及含硼较低 (10毫克/千克以下) 的两年生以上的老枝上。本病的发生是土壤和树体缺硼的生理性原因,和弱寄生菌侵染共同作用的结果。土壤施硼 (萌芽至抽梢期根际土壤每平方米1克硼砂) 和树冠喷硼,以0.2%硼砂液治粗皮、裂皮、藤肿和流胶等现象,减少弱寄生菌侵染的场所。用小刀刮除菌膜,涂抹3波美度石硫合剂或涂三灵膏 (凡士林50克,多菌灵2.5克,赤霉素0.05克调匀)。主要在树冠外围结果枝出现枝条叶片萎蔫,继而整枝失水枯死,但结果母枝正常。在一个园中,整园或整株发病较少,往往是局部园或一株上局部枝出现枝枯 (图9-25)。图9-25 猕猴桃发生枝枯病后新梢萎垂状一般发生在猕猴桃新梢迅速抽生期,即4—5月春夏交替期。此期北方地区在春旱情况下,往往是干热风盛行期,给猕猴桃这种阔叶果树带来一定影响。一般在春季持续性干旱时易诱发此病。发生的两个条件:一是春旱,二是强风。在春旱情况下,若出现6级以上强风,持续5小时以上,猕猴桃树即可发病。4年以上未遮阴封行的幼龄果树发病较重,因为该树龄的树生长势较强,对水分要求较迫切,而根系分布较浅,吸收功能有限,抗旱性相对较差,一旦强风天气出现,发病严重。(1) 早摘心。主要针对外围结果枝控制顶端优势,加速枝条木质化,减少迎风面,提高抗风性。(2) 规范绑枝。冬剪后结果母枝必须枝枝绑缚,且排列有序,杜绝交叉、重叠、拥挤,以防结果枝抽生后空间局限,密集生长,遇风移位,增大摩擦,造成伤口,抗风能力下降。(3) 注意灌水。尤其在春旱风害严重情况下,提倡灌水,以减缓强风形成的地面蒸发及叶面蒸腾对树体水分生理平衡的破坏。猕猴桃根腐病为毁灭性真菌病害,能造成根颈部和根系腐烂,严重时整株死亡。初期在根颈部出现暗褐色水溃状病斑,逐渐扩大后产生白色绢丝状菌丝。病部皮层和木质部逐渐腐烂,有酒糟气味,菌丝大量发生后经8~9天形成菌核,似油菜籽大小,淡黄色。下面的根系逐渐变黑腐烂,地上部叶片变黄脱落,树体萎蔫死亡 (图9-26)。病菌在根部病组织皮层内越冬或随病残体在土壤中越冬,病菌在土壤病组织中可存活1年以上,病根和土壤中的病菌是翌年的主要侵染源。翌年4 月开始发病,高温高湿季节发病,由病残体传播,经接触传染。水过多,果园积水,施肥距主根较近或施肥量大,翻地时造成大的根系损伤,栽植过深,土壤板结,挂果量大,土壤养分不足,栽植时苗木带菌,这些情况都容易引发根腐病。图9-26 猕猴桃根腐病(1) 农业防治。实行高垄栽培,合理排水、灌水,保证果园无积水;及时中耕除草,破除土壤板结,增加土壤通气性,促进根系生长;增施有机肥,提高土壤腐殖质含量,促进根系生长;科学施肥,合理耕作,避免肥害和大的根系损伤;控制负载量,增强树势。(2) 植物检疫。把好苗木检疫关。(3) 化学防治。在早春和夏末进行扒土晾根,刮治病部或截除病根,然后使用青枯立克300倍液+海藻生根剂——根基宝300倍液进行灌根,小树1株灌7.5~10千克,大树1株灌15~25千克。猕猴桃白纹羽病分布范围广,为害树种很多,是主要根系病害之一。其症状是多从细根开始发病,然后扩展到侧根和主根。病根皮层腐烂,病部表面缠绕有白色或灰白色丝网状物,即根状菌索。后期霉烂根皮层变硬如鞘。有时在病根木质部生有黑色圆形菌核。根际地面有菌丝膜,其上有时有小黑点即病菌的子囊壳。当病部根皮全部腐烂后,在坏死的木质部上形成大量的白色或灰白色放射状菌索。受害植株生长势逐渐衰弱,直至最后死亡 (图9-27、 图9-28)。图9-27 猕猴桃白纹羽病图9-28 受白纹羽病为害的猕猴桃树病菌以菌丝体、根状菌索和菌核随病根在土壤中越冬。温湿度适宜时,菌核或菌索长出新的菌丝,首先侵害新根的幼嫩组织,使幼根腐烂,然后逐渐蔓延到大根。病菌接触传染。(1) 农业防治。加强果园肥水管理,增强树势,提高树体抗病性。(2) 化学防治。栽植前,红心猕猴桃苗木用10%硫酸铜溶液,或20%石灰水,或70%甲基硫菌灵可湿性粉剂500倍液浸泡1小时进行消毒。先为害根的外部,受害根皮层呈褐色腐烂状,病部不断扩展,最后整个根颈部环割腐烂,有酒糟味,从而导致整株死亡。树体发病后使萌芽期推迟、叶片枯萎、叶面积小、枝条干枯,为害严重时因影响水分和养分的运输而使植株死亡 (图9-29、图9-30)。图9-29 猕猴桃疫霉病形成的菌落图9-30 猕猴桃疫霉病的果实在排水不良的果园以及多雨季节,病菌通过猕猴桃根颈伤口侵染皮层而引起根腐。春天或夏天,根部在土壤中被侵染。(1) 农业防治。选择排水良好的土壤建园。防止植株创伤。(2) 化学防治。当植株感病时,在 3 月或 5 月中下旬用2500毫克/升的代森锌或100~200 毫克/升的瑞毒霉或1 ∶ 2 ∶200的波尔多液灌根部;挖出病部,刮除病部腐烂组织,并用0.1%升汞溶液消毒,后涂上波尔多液或石硫合剂原液,两个星期后再更换新土覆盖。在植株受害嫩根上产生细小肿胀或小瘤,数次感染则变成大瘤。瘤初期白色,后变为浅褐色,再变为深褐色,最后变成黑褐色。受根结线虫为害的植株根系发育不良,大量嫩根枯死,细根呈丛状,根发枝少,且生长短小,对幼树影响较大 (图9-31、 图9-32)。图9-31 猕猴桃根结线虫病(1) 线虫繁殖生长条件。土壤相对湿度40%~70%、土壤温度0~30℃、土壤pH值为4~8。(2) 其他有利条件。雨季有利于线虫孵化和侵染;地势高燥、土壤质地疏松、盐分低等利于线虫病发生。图9-32 猕猴桃根结线虫为害状(3) 自身传播。自身一年能移动1米的距离,远距离的传播主要依靠灌水、病土、带病的种子、苗木和其他营养材料及农事操作活动等传播。(1) 农业防治。猕猴桃定植地及苗圃地不要利用原来种过葡萄、棉花、番茄及其他果树的苗圃地,最好采用水旱轮作地作苗圃地和定植地,此法对防治根结线虫病效果很好。此外要重视植株的整形修剪,合理密植,改善园内通风透光条件;多施农家肥,改良土壤,提高土壤的通透性。(2) 化学防治。患病轻的种苗可先剪去发病的根,然后将根部浸泡在1%的异丙三唑硫磷、克线丹等农药中1小时。对可疑有根结线虫的园地,定植前每亩用10%克线丹3~5千克进行沟施,然后翻入土中。猕猴桃园中发现轻病株可在病树冠下5~10厘米的土层撒施10%克线丹 (每亩撒入3~5千克),施药后要浇水。苗圃地发现病株,可用1.8%阿维菌素乳油,每亩用680克对水200升,浇施于耕作层 (深15~20厘米),效果好,且无残毒遗留,对人畜安全。用3%米尔乐颗粒剂撒施、沟施或穴施,每亩用6~7千克,药效期长达2~3个月。该病主要发生在幼苗期,往往在幼苗出现2~3片真叶、根颈基部尚未木质化之前发病。苗茎部先出现浸渍状病斑 (图9-33)。图9-33 猕猴桃立枯病病苗多从上土表侵入幼苗的茎基部,发病时,先变成褐色,后成暗褐色,受害严重时,韧皮部被破坏,根部成黑褐色腐烂。此时,病株叶片发黄,植株萎蔫,枯死,但不倒伏。此病菌也可侵染幼株近地面的潮湿叶片,引起叶枯,边缘产生不规则、水渍状、黄褐色至黑褐色大斑,很快波及全叶和叶柄,造成死腐,病部有时可见褐色菌丝体和附着的小菌核。病菌在残留的病株上或土壤中越冬或长期生存。带菌土壤是主要侵染来源,病株残体、肥料也有传病可能,还可通过流水、农具、人畜等传播。菌丝呈蛛网状,围绕寄生的组织。土温在13~26℃都能发病,以20~24℃为适宜。对土壤pH值适应范围广,pH值2.6~6.9都能发病。天气潮湿适于病害的大发生,反之,天气干燥病害则不发展。多年连作地发病常较重。(1) 农业防治。严格控制苗床及扦插床的浇灌水量,注意及时排水;注意通风;晴天要遮阳,以防土温过高,灼伤苗木,造成伤口,使病菌易于侵染。(2) 化学防治。对被污染的苗床,如继续用于扦插育苗,或用于扦插的其他土壤,在扦插前,可用甲醛进行土壤消毒,每平方米用甲醛50毫升,加水8~12千克浇灌于土壤中,浇灌后隔1周以上方可用于播种栽苗,或用70%五氯硝基苯粉剂与65%代森锌可湿性粉剂等量混合,处理土壤,每平方米用混合粉剂8~10克,撒施土中,并与土拌和均匀。果实上有明显的日晒伤痕 (图9-34、 图9-35)。猕猴桃日灼病大多发生在高温季节,气候干燥、持续强烈日照容易发生,尤其是在果实生长后期的7—9月,叶幕层薄,叶片稀疏、果实裸露的发生严重。挂果幼园比老果园发生严重。弱树、病树、超负荷挂果的树日灼残果率可达15%~25%。土壤水分供应不足、修剪过重、果实遮阳面少、保水不良的地块,易发生严重日灼。图9-34 猕猴桃日灼病发病初期症状图9-35 不同程度日灼受害状(1) 夏季修剪在最顶果多留2~3 片叶,可以遮挡直射太阳光。(2) 有条件的早晚隔几天喷一次水,也可配成果友氨基酸400倍液,既可降低果园温度,又可快速供给营养。(3) 果园覆盖,可用麦糠或麦草覆盖,如眉县张江成果园直接覆盖行间,减少土壤水分蒸发。(4) 套袋果打开通气孔,通气孔小时可略剪大,利用通气,降低袋内温度,一般可降低1~2℃。 -
报告猕猴桃的生物学特性
出版时间:2018猕猴桃的根为肉质根,皮厚;最初为白色,后转为黄色或黄褐色,嫩脆,受伤后会流出液体,即伤流;老根外表灰褐色到黑褐色,有纵向裂纹;主根在幼苗期即停止生长,骨架根主要为侧根;侧根和细根很密集,共同组成发达的根系。幼根和须根再生能力很强,既能发新根,又能产生不定芽;老根发新根的能力很弱,伤断后较难再生。猕猴桃优良品种根系在土壤温度为8℃时开始活动;25℃时进入生长高峰期,随后生长开始下降;当土壤温度为30℃时,新根生长基本停止。生长在坚硬土层内的根系分布较浅;生长在疏松土壤内的根系分布较深 (图1-1)。图1-1 猕猴桃的根系常规栽培种类的猕猴桃叶大、较薄、脆,容易被风刮烂。早春萌芽后约20天开始展叶,其后迅速生长一个月,当其大小接近总面积的90%左右时,转入缓慢生长至定型。通风透光条件下,定型后的叶片到落叶前的几个月里,光合作用最强,制造和向其他器官输送的养分最多。叶具有光合和呼吸功能,当其光合作用产物大于呼吸作用所消耗的物质时,养分积累并输出供给树体及果实生长发育所需;当呼吸所消耗的物质大于光合产物时,消耗营养。具有营养积累功能的叶叫有效叶,不具有营养积累功能的叶叫无效叶。栽培的目的就是尽可能地提高有效叶总面积,减少无效叶数量。无效叶的种类有幼嫩叶、衰老叶、遮阴叶、病虫害或风等机械伤造成大面积失绿或破损叶。果园管理中增加有效叶面积才能提高果实的产量和品质,进而提高经济效益。优良品种的叶片面积大、叶厚、色深,光合能力强、养分积累多,供给花芽、树体及果实生长发育的养分多,革质强,抗风害能力强。当然,相同品种的叶片大小和形状因树龄和着生位置会略有差异,但是不同种类、不同品种的猕猴桃叶片形状和叶尖端形状均有较大差异 (图1-2)。图1-2 猕猴桃叶片形状常规栽培的猕猴桃芽由数片具有锈色茸毛的鳞片和生长点组成,被深深地包埋在叶腋间海绵状芽座中。每个芽座中有1~3个芽,3个芽中两侧较小的为副芽,中间较大的为主芽。副芽常呈潜伏状,当主芽受伤或枝条短截时,副芽便萌发生长,有时主、副芽同时萌发。按芽的性质分为叶芽和混合芽 (花芽)。叶芽瘦小,萌发后只抽梢长叶;混合芽肥大、饱满,萌发后不仅抽梢长叶,而且可开花结果。需要注意的是混合芽,即花芽 (又称花序芽或花枝芽),因其和葡萄一样,花序是着生在当年萌发的新梢上,所以是栽培猕猴桃时重点培养的对象。混合芽根据枝条上萌发的位置,可分为上位芽、平位芽、下位芽。上位芽背向地面,萌发率高、抽枝旺、结果多;平位芽与地面平行,枝条生长中等、结果较多;下位芽朝地面,萌发率低、抽生枝条衰弱、结果少(图1-3)。图1-3 猕猴桃的芽猕猴桃为木质藤本植物,枝蔓比较柔软,需攀缘支撑物生长,其蔓可伸长生长达10米左右。根据枝蔓是否带有花芽,可将其分为营养枝蔓和结果枝蔓。根据猕猴桃雌株生长的骨干结构,雌株可分为主干、主蔓、结果母枝 (蔓)、结果枝 (蔓)、营养枝 (蔓)。营养枝蔓主要构成树体的骨架结构或用于结果母枝蔓更新,如主干、主枝蔓、侧枝蔓和未形成花芽的一年生枝蔓。具有开花结果能力的当年生枝蔓,叫结果枝蔓。因为猕猴桃的花芽为混合芽,所以着生在结果枝蔓的母枝上,叫结果母枝蔓。一般选长势中庸、组织充实的枝蔓培养成结果母枝蔓。一般结果母枝蔓的中下端第7~10个节位着生的结果枝蔓较多,结果枝蔓于基部1~7节位间开始结果,一个结果枝蔓可以着生3~5个花序,每个花序可以结果1~4个。凡是达到结果年龄的枝条,除基部和蔓上抽生的徒长枝外,几乎所有的新梢都很容易形成花芽,进而形成结果母枝蔓。猕猴桃一年可抽梢3~4次,各蔓抽生的长势和生长量自下而上减弱 (图1-4、 图1-5)。图1-4 猕猴桃的新梢图1-5 猕猴桃的枝蔓中华猕猴桃和美味猕猴桃的结果枝蔓一般按以下长短进行划分:小于 10 厘米叫超短结果枝蔓 (也称丛状结果枝蔓),10~30厘米叫短结果枝蔓,30~50厘米叫中结果枝蔓,50~100厘米叫长结果枝蔓。将软枣猕猴桃天源红的花枝划分为以下五种类型:短缩花枝 (0~5厘米),从基部到顶端均可着花;短花枝 (5~10厘米);中花枝 (10~30厘米),部分着花可达顶部,一般3~10节;长花枝 (30~50厘米);徒长性花枝 (50厘米以上),着花于枝条的中下部4~13节。猕猴桃花从结构上来看属于完全花,具有花柄、花萼、花瓣、雄蕊和雌蕊,但是从功能上来看绝大多数品种属于单性花,分为雌花和雄花。雌花子房发育肥大,多为上位扁球形,柱头多个,心室中有多数胚珠,发育正常;雄蕊退化发育,花丝明显矮于雌花柱头,花药干瘪,有些虽然肉眼观察高度接近,但是花药中没有花粉,或即使有少量的花粉,花粉没有活力,在大蕾期套硫酸纸袋完全隔离外界花粉的情况下自身不能坐果。雄花则雄蕊发达,明显高于子房,花药呈现饱满状态,花粉粒大,花粉量充分且活力强;子房退化很小,呈圆锥形,有心室而无胚珠,不能正常发育。猕猴桃的花序有单花、二歧聚伞花序和多歧聚伞花序。中华猕猴桃每花序多为1~3朵 (少数品种较多,如金艳),而美味猕猴桃多为单花序或二歧聚伞花序。开花时间和花期长短因品种、雌雄性别、管理水平和环境条件而变化。中华猕猴桃和美味猕猴桃的花初开呈白色,后渐变成淡黄色或棕黄色;花大、美观,具芳香味;缺乏明显的蜜腺组织。有效授粉期是指开花后在花粉管到达胚珠之前,胚囊保持活力和接受花粉能力的天数。有效授粉期的长短除了与柱头的活力、柱头与花粉的亲和力及花粉活力等亲本性状有关外,也与授粉期的温度、湿度等环境因子有关。花期温度较为平稳,花期持续的时间相对较长,而如果花期温度变化幅度大,则会加速柱头的褐化,使可授粉性降低。雌性品种以中期开的花质量好,所结果实果形端正;雄性品种以早期花质量高,所以选配雄性授粉品种时,以其初花期正对上雌性品种的盛花期为宜。开花前1天至其后第二天,花柱呈现纯白色而且鲜亮,从开花第三天开始柱头逐渐变黄、变干,第五天开始变黄褐、焦枯 (图1-6、 图1-7)。图1-6 猕猴桃的雌花图1-7 猕猴桃的雄花猕猴桃是中轴胎座多心皮浆果,倒生胚珠,寥型胚囊。果实形状不一,有圆形、长椭圆形、椭圆形或扁圆形等;果皮颜色有绿色、黄色、褐色、红色等;表面被毛情况分为有毛、无毛两种类型,有毛类型根据毛的分布可分为稀毛、中毛、多毛,根据生长状态可分为短茸毛、茸毛、硬毛、糙毛等不同类型。内、外层果肉颜色可分为绿色、黄色、橙色、红色等各种类型,目前生产上栽培品种多为选自绿色果肉的美味猕猴桃和黄色或内果皮为红色果肉的中华猕猴桃,也有极少量的全红型或绿肉型的软枣猕猴桃。中华猕猴桃和美味猕猴桃品种在正常的管理和气候条件下较少发生采前落果现象,软枣猕猴桃有少量采前落果现象。同一品种栽培在不同地区和条件下,品质表现有差异,体现出区域适应性,引种时应注意 (图 1-8、 图 1-9、图1-10)。猕猴桃按果实成熟期一般可分为早熟、中熟、晚熟和极晚熟品种。早熟品种指8月达到成熟度而能够上市的品种,中熟品种指9月上市的品种,晚熟品种指10月上市的品种,极晚熟品种指11月上市的品种。目前尚未发现7 月成熟的极早熟品种,也未培育出早熟的美味猕猴桃品种。由于猕猴桃种植地域较大,很难用地方成熟期来衡量,所以只能以达到采收成熟度、能够上市为准。图1-8 黄肉果实猕猴桃图1-9 绿肉果实猕猴桃图1-10 红心及红肉果实猕猴桃猕猴桃的种子较小,形状多为扁长圆形,成熟新鲜的种子多为棕褐色或黑褐色,干燥的种子呈黄褐色或红褐色,表面有网纹 (图1-11)。经相关部门测定,猕猴桃籽粒中含油率平均为28.85%,其中不饱和脂肪酸含量高达90.37%,而亚油酸、亚麻酸含量平均占不饱和脂肪酸的74.83%。图1-11 猕猴桃种子猕猴桃根系的生长随一年气候的变化而变化。根系在土壤温度8℃时开始活动,20℃左右进入生长高峰期,若温度继续升高,生长速率开始下降,30℃左右时新根生长基本停止。在温暖地区,只要温度适宜,根系可常年生长而无明显的休眠期。根系的生长常与新梢生长交替进行,第一次生长高峰期出现在新梢迅速生长后的6月,第二次生长高峰期在果实发育后期的9月。在高温干旱的夏季和寒冷的冬季,根系生长缓慢或停止活动。猕猴桃新梢全年的生长期为170~190天。在北方地区,一般有2个生长阶段,从4月中旬展叶到6月中旬大部分新梢停止生长,为第一个生长期,在4月末到5月中旬形成第一个生长高峰期;7月初大部分停止生长的枝条重新开始生长起到9月初枝条生长逐渐停止为第二个生长期,在8月上中旬形成第二个生长高峰期。在南方地区,9月上旬到10月中旬还会出现第三个生长期,并在9月中下旬形成第三个生长高峰期,但强度比前两次高峰要小得多。枝蔓生长动态枝条的加粗生长主要集中于前期,5月上中旬至下旬加粗生长形成第一次高峰期,至7月上旬又出现小的增粗高峰,之后便趋于缓慢增粗,直至停止。猕猴桃叶片生长是从芽萌动开始,展叶以后随着枝条生长而生长,当枝条生长最快的时候,叶子生长也最迅速。正常叶从展叶到最终叶面大,需要35~40天。展叶后的第10~25天是叶片迅速生长期,此期的叶面积可达到最终的叶面积90%左右。叶龄小于22天的叶片制造的光合产物不能满足本身生长的需要,要不断从成龄叶输入碳素营养物质;叶龄22~24天时叶片的光合产物输入和输出达到平衡,叶片光合作用已能满足本身需要,但不能进行光合产物净输出。从展叶后25天起,叶片制造的光合产物除满足本身需要外已有剩余,开始大量输出光合产物。猕猴桃在当年夏秋季完成生理分化形成花芽原基后,直到翌年春季形态分化开始前,花器原基只是数量增加,体积变肥大,形态上并不进行分化,从外观上无法与叶芽相区别。猕猴桃的花芽为混合芽,着生在1年生母枝当年抽生出的新梢叶腋间。休眠的越冬芽由1个肥大的叶柄痕包被着,未萌动前顶芽平齐,芽外密被棕褐色茸毛。直到盛花前70天左右才进入形态分化期,而形态分化期时间很短,速度很快,从芽萌动前10天左右开始,到开花前1~2天结束。越冬芽的发育进程为:春季3月上旬猕猴桃的越冬芽开始萌动,芽体上端由平顶变为突起,在叶腋间出现1个微小的突起物。新梢上萌发的混合芽在萌发后可以分化成花枝和营养枝。花芽发生在离冬芽基部较远的叶原基腋间,花芽原基膨大隆起,逐渐发育成包片。花序开始发育的最早标志是腋芽原基的伸长和两侧生包片的显现,产生明显的三裂片结构。花芽萌发4~7天后,苞片腋部出现聚伞状花序原基,两侧产生萼片原基。在较低部位的叶腋内,由于顶花分生组织在发育过程中受到抑制,侧生花与顶花融合,使这些花发生畸变,开花授粉后产生畸形果,有些畸变甚至是3朵花融合而成的,在结果枝基部的第1、第2个果上出现的概率较高。这种现象在开花坐果前从花蕾的形态就大致可以辨别出来,凡呈扁平状或畸形而非近圆形的花蕾将来很可能形成畸形果实 (图1-12)。图1-12 畸形果猕猴桃植株的花量与品种、树龄、生态环境及管理水平有关,生长正常的雌性品种海沃德的成龄植株平均花量有3000朵左右,而秦美、金魁、布鲁诺的花量较海沃德品种高。成龄的雄株的花量显著地高于雌株,可达5000~10000朵。猕猴桃的雌花从显蕾到花瓣开裂需要35~40天,雄花则需要30~35天。雌株花期多为5~7天,雄株则达7~12天,长的可达15天。花初开放时呈白色,后逐渐变为浅黄色至橙黄色。雌花开放后3~6天落瓣,雄花为2~4天落瓣。花期因种类、品种而差异较大,同时受环境的影响也很大。美味猕猴桃品种在陕西关中地区一般于5 月上旬和中旬开花,中华猕猴桃品种一般较美味猕猴桃早7~10天。在22℃下,用10%的蔗糖加0.01%硼酸的培养基上摇床培养3.5小时,以测定花粉的生活力,一般早熟雄株系的花粉发芽率超过80%,中晚熟株系在65%~70%。但在管理不良的果园,如架面郁闭严重、营养不良等时,花粉会萌发产生大量不正常扭曲、盘绕或叉状的花粉管。自然状态下,昆虫及风均可为猕猴桃传花授粉。雌蕊的柱头为辐射状,表面有许多乳头状突起,分泌汁液。受过粉的柱头为黄色,未受粉的为白色。花粉管的适宜伸长温度为 20~25℃,15℃伸长较差,而在30℃时初期伸长良好,2 小时后极端衰弱,4小时后伸长停止。据赤井昭雄在实验室用显微镜观察,10℃下授粉后11小时花粉开始发芽,57小时后花粉管抵达花柱基部,84小时后进入子房。而15℃下授粉后4小时花粉开始发芽,36小时后花粉管通过花柱中部,60小时后进入子房。在20℃下授粉后2小时花粉开始发芽,24小时后花粉管抵达花柱基部,36小时后进入子房。在25℃下授粉后1小时花粉开始发芽,2小时后进入花柱,4小时后花粉管通过花柱中部,24小时后进入子房。雌花受精后的形态表现为:柱头受粉后第3天变色,第4天枯萎,花瓣萎蔫脱落,子房逐渐膨大。人工授粉时,如果将花粉直接放在水里制成悬浮液,会使花粉由于渗透压的剧烈改变而丧失生命力。经过一系列试验,Hopping等发现由Ca(3 ) 2+H3 BO4+纤维素胶 (重量与体积百分比各为 0.01%)+阿拉贝树胶 (重量与体积百分比为0.005%) 组成的悬浮基效果好,但同时还要求水中没有金属离子,花粉的含水量超过10%。花粉在这种悬浮液中可保持生命力3小时,同时可保护落在柱头上的花粉在悬浮液滴干燥过程中免受脱水为害。从授粉后60天双细胞胚开始分裂,到发育成具有2片完整子叶的子叶胚,约需50天。即从开花到胚发育完成约110天。在胚发育完成时,种子内仍有部分胚乳细胞存在。猕猴桃容易早结果。实生苗一般是在2~4年开始开花结果,5~7年进入盛果期。嫁接苗翌年就可开花结果,特别是中华猕猴桃品种,在苗圃即可见到开花结果植株 (图1-13),一般4~5年后进入盛果期,株产15~20千克,亩产 (1亩≈666.7平方米。全书同) 可达1500~2000千克。如能提高管理技术水平,有的嫁接苗亩栽110株,创下了栽后翌年亩产500千克,第六年亩产3277千克的良好成绩。图1-13 苗圃开花结果植株猕猴桃成花容易,坐果率高,一般无落果现象。在山东潍坊地区实生苗定植后翌年开花株率为6.5%,第三年开花株率为52.8%,第四年获得亩产 431 千克的果实。可溶性固形物为13%~21%。如果选用良种嫁接苗,结果年龄会更早,一般2~3年结果,4~6年进入盛果期,株产可达10~20千克,高的可达50千克以上。为了不影响猕猴桃的发育,前三年最好不要挂果。物候期指果树在1年中随着四季气候变化,有节奏地进行各种生命活动的现象,是在长期进化过程中形成的与周围环境相适应的特性。了解猕猴桃的物候期,有助于认识环境条件对猕猴桃的影响,为在生产中采取适宜的栽培管理措施提供依据。温度是影响猕猴桃物候期的主要因素,所以海拔、湿度、光照、坡向等凡能影响温度变化的因素都能间接地影响物候期的变化。由于猕猴桃分布地区很广,各地的自然条件也不一致,因而在不同地区和不同年份猕猴桃的物候期也有差异。猕猴桃的种类不同,物候期差异很大,中华猕猴桃品种的物候期一般比美味猕猴桃早7~10天;在同一种类中,品种之间的物候期差异也很大。美味猕猴桃中,海沃德品种的物候期明显比其他品种晚;同一品种在不同的栽培区域物候期也显著不同。猕猴桃的大多数种类和品种要求亚热带或暖温带湿润和半湿润气候。早春寒冷,晚霜低温,盛夏高温,常常影响猕猴桃生长发育。在年均气温11.3~17.9℃的条件下生长良好。多数猕猴桃种类喜半阴环境。幼苗期喜阴凉,忌阳光直射;成年结果树要求充足的光照。猕猴桃是中等喜光果树,要求日照时数为1300~2600小时,喜漫射光,忌强光直射,光照强度以正常日照的40%~45%为宜。猕猴桃喜凉爽湿润的气候,不耐涝,在渍水或排水不良时常不能生存。在年降水量740~1800毫米的区域比较适宜。猕猴桃喜土层深厚、疏松肥沃、排水良好、腐殖质含量高的沙质土壤,忌黏性重、易渍水及瘠薄的土壤,最适 pH 值5.5~6.5。 -
报告Identification of Pathogens Causing Leaf Spot Disease on Zingiber officinale Rosc*
出版时间:2007姜(Zingiber officinale Rosc.)为姜科(Zingiberaceae)、姜属(Zingiber),多年生草本植物,是一种既能作为调味蔬菜,又能入药的重要的经济作物。山东省是我国姜的主要产区,近年来,由于多数品种长期无性繁殖及连年重茬种植,出现了一种严重影响姜产量和质量的病害,该病害主要为害姜叶部,发病初期呈现水浸状小斑点,随后变成黄色,逐渐扩大成为椭圆形、近圆形或不规则形的白色病斑,边缘则为黄褐色,病斑继而彼此融合,导致整叶干枯;在老熟病斑上可见大量黑色小颗粒。目前国内外有关文献报道认为,引起姜叶斑病的病原菌为姜叶点霉(Phyllosticta zingiberiHori)[1],白金铠[2]在《中国真菌志》中描述过Phyllosticta zingiberi的形态特征,而Mathur[3]曾提到Phyllosticta zingiberi T.S.Ramakr.为Phoma zingiberi Khune的基原异名,但关于Phoma zingiberi的产孢细胞等形态特征及ITS序列分析未见报道。由于茎点霉属(Phoma)真菌与叶点霉属(Phyllosticta)真菌有诸多类似的地方,如分生孢子器和分生孢子的形态、颜色、大小等。因此,Phoma和Phyllostica两属间的分类及属下种的分类问题一直存在着许多争议。Saccardo[4]认为,两者的主要区别在于寄生部位的不同,即Phoma寄生于植物叶以外的部位,而Phyllosticta寄生于植物叶片上,这种主观的划分受到许多真菌学家的批评。由于产孢方式是Phyllosticta和Phoma两属共同具有的稳定特征。因此,目前已作为被多数学者所接受的分类标准。对于植物病原真菌,传统的分类方法多以真菌的形态特征为依据,而近年来分子生物学手段的应用为真菌的分类鉴定提供了更多遗传信息方面的依据。核糖体基因内转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,简称ITS)在真菌种间存在丰富的差异,已广泛应用于真菌亲缘关系较近分类群的系统发育研究。目前,对于形态学上难以区分的Phoma和Phyllosticta两属真菌,尚未开展ITS序列的比对研究,其ITS序列资源也有待进一步丰富。本文发现的病害症状与已报道的由Phyllosticta zingiberi引起的姜叶斑病症状基本一致。为了正确鉴定分离到的姜叶斑病的致病菌,本文利用传统的形态学观察并结合分子手段对该病原菌的分类归属进行了研究。姜病叶采自山东省生姜主要产地莱芜市姜田。1.2.1 病菌的培养及光镜观察 将发病叶片表面消毒后置于PDA培养基上培养4~5天,从菌落边缘取直径为5mm的菌落圆片进行纯培养,在Olympus光学显微镜下观察并描述分生孢子器、分生孢子、产孢细胞形态特征,用显微测量尺测定分生孢子器及分生孢子的大小。1.2.2 透射电镜样品制备与观察 将新鲜的感病叶片切成小于0.5cm×0.5cm的材料,固定于3%戊二醛中,再用1%锇酸二次固定,乙醇梯度脱水、Epon812树脂浸透、包埋、超薄切片,经醋酸双氧铀、柠檬酸铅双重染色,JEM-1200EX透射电镜观察、拍照。将配制好的孢子悬浮液(低倍镜下每视野约30个孢子)喷洒在4~5叶期健康的姜新叶上,接种后套袋保湿48h。定期观察并记录发病情况和症状特点。取病斑上产生的子实体镜检,并从发病组织中再次分离致病菌,观察并描述病原菌形态特征。菌丝染色体DNA的提取参照何月秋[5]的方法并做适当的修改,质粒提取采用碱裂解法,大肠杆菌Escherichia coli DH5α感受态制备、连接、转化等参考《分子克隆实验指南》(第三版)[6]。以总DNA为模板,以通用引物ITS1:5′-TCC GTA GGT GAA CCT GCG G-3′和ITS2:5′-GCT GCG TTC ATC GAT GC-3′,ITS3:5′-GCA TCG ATG AAG AAC GCA GC-3′和ITS4:5′-TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC-3′分别扩增ITSI和ITSII片段。PCR反应程序如下:94 ℃预变性3 min,94 ℃变性1min,50 ℃退火1min,72 ℃延伸30s,30个循环,最后72℃延伸10min。PCR产物连接到pMD18-T(大连宝生物工程有限公司),转化E.coli DH5α,经鉴定的重组质粒送上海英俊生物技术公司测序。该病原菌在PDA培养基上菌丝初为白色,后变为褐色,25 ℃培养20~25天后,逐渐出现分生孢子器。光镜观察分生孢子器为球形、扁球形,暗褐色,直径55~135μm,高75~130μm,器壁褐色,由3~5层细胞组成,壁厚9~13μm,内壁形成产孢细胞,上着生分生孢子;分生孢子椭圆形、卵形,无色,单胞,两端各含有一油球,5~8.5μm×2~4.5μm,其形态与报道的Phyllosticta zingiberi基本一致(Figure 1),但光镜和透射电镜观察其产孢方式为内壁芽生瓶梗式(eb-ph)(Figure 2)。Figure 1 Picnidium(Micro)(×400)Figure 2 Morphology of conidiogenous cell(Micro)(×1 000)用分生孢子悬浮液接种姜嫩叶后,发病症状和病原菌形态特征与自然发病株相同。取病健交界处组织再分离,其培养性状和形态特征与第1次分离结果一致。根据柯赫氏法则,接种菌即为姜叶斑病的致病菌。2.3.1 菌丝染色体DNA的提取与核糖体DNA ITS的PCR扩增 用改进的CTAB法提取该菌染色体DNA,琼脂糖凝胶电泳检测。采用真菌核糖体基因ITS区域通用引物ITS1和ITS2、ITS3和ITS4分别扩增了茎点霉的ITSI和ITSII,1%琼脂糖凝胶电泳检测结果均为单一条带,大小分别为224bp和343bp。2.3.2 核糖体DNA ITS序列分析 将克隆到的ITSI和ITSII测序后进行拼接,确定了ITS片段的核苷酸序列(Genbank登录号为EF408240)。用DNAStar软件对所得序列进行编辑和排序比对,得出该病原菌ITS序列与叶点霉的同源性最高为58.7%,与茎点霉的同源性最高为95.6%。利用MEGA3.1软件分析核苷酸组成并计算种间遗传距离,结果显示该病原菌与茎点霉亲缘性更大。以往报道认为,引起姜叶斑病的病原为Phyllosticta zingiberi Hori,Hara记载并描述了Phyllosticta zingiberi Hori的形态特征:叶上病斑圆形、不规则形,中央灰白色,直径1~3mm;分生孢子器球形、扁球形,暗褐色,直径50~120μm,分生孢子椭圆形、卵形,单胞,无色,两端各含有一油球,5~9μm×2.5~3.5μm。后人Sawada[7]对中国台湾省姜叶上的Phyllosticta zingiberi Hori、戚佩坤等[8]对广东姜叶上的Phyllosticta zingiberi Hori以及本研究对分离菌的描述与上述基本一致,应视为同种。Ramakrishnan[9]描述的印度姜叶上的Phyllosticta zingiberi T.S.Ramakr.的形态特征为,叶上病斑卵圆形,中央灰白色,可形成穿孔,9~10μm×3~4μm;分生孢子器球形,78~150μm,分生孢子无色,椭圆形,3.7~7.4μm×1.2~2.5μm,两端各含有一油球,此形态与Phyllosticta zingiberi Hori基本一致。因此,Phyllosticta zingiberi T.S.Ramakr.应视为Phyllosticta zingiberi Hori的同物异名。Sutton[10]通过对Phoma和Phyllosticta产孢方式的研究,认为Phoma是内壁芽生瓶梗式(eb-ph),Phyllosticta是全壁芽生单生式(hb-sol),这与Dictionary of the fungi第九版[11]对两属产孢方式的描述一致,而吕国忠电镜观察结果显示,两属的产孢方式相同,均为全壁芽生环痕式(hn-ann),同样,王琪[12]对龙眼叶点霉(Phyllosticta dimocarpi)研究结果也是全壁芽生环痕式(hn-ann),周永力[13]则认为Phyllosticta为内壁芽生瓶梗式(eb-ph)。因此,有关两属的产孢方式目前尚有争论。本研究对该病原菌的光镜和电镜观察结果表明,其产孢方式为内壁芽生瓶梗式(eb-ph),符合Kendrick等对Phoma产孢细胞特征的描述,ITS序列分析结果发现,该菌与Phoma ITS序列同源性高达95.6%,远远高于与Phyllosticta ITS序列的同源性(58.7%)。本研究结果支持Mathur的观点,认为Phyllosticta zingiberi T.S.Ramakr.为Phoma zingiberi Khune的基原异名。由于Phyllosticta zingiberi T.S.Ramakr.是Phyllosticta zingiberi Hori的同物异名。因此,引起姜叶斑病的病原菌应为姜茎点霉(Phoma zingiberi Hori)。致谢:山东农业大学张天宇教授、张修国教授对本研究提供了热情帮助,并对论文修改提出了建议。
