2006年10月以来，浙江温州市乐清、瑞安、苍南、瓯海、龙湾等地的大棚番茄上相继发生了一种以前从未见过的病毒病。为此，我们立即分别从不同地点采集了较典型的罹病植株样本送浙江大学生物技术研究所鉴定，经该所用超薄切片电镜观察、ELISA和分子水平检测后确认是台湾番茄曲叶病毒（也称烟草曲叶病毒）（TLCV）所致。该病毒病在浙江省系首次发现，经检索国内也鲜有报道。台湾番茄曲叶病毒病是一种毁灭性的蔬菜新病害，是世界许多地区番茄生产上的重要限制因素，该病为害猖獗、蔬菜生产部门及有关方面须高度警惕。据调查，温州地区秋季定植的大棚番茄株发病率一般为3%～30%；严重田块株发病率高达95%以上，当地农民基本放弃管理或拉秧改种。初步统计温州各县（市、区）台湾番茄曲叶病毒病的发生面积约为333.3hm2，其中株发病率在50%的田块约为53.3 hm2以上，给各地番茄生产造成了严重损失。染病番茄植株矮化，生长缓慢或停滞，顶部叶片大多褪绿发黄、叶变小，边缘上卷，叶片增厚、变硬，叶脉呈紫色。生长发育早期染病的植株严重矮缩，不能正常开花结果；中后期染病的植株仅上部叶片和新芽表现症状，结果减少、果实变小，成熟期果实着色不均匀（红不透），商品价值低；生长发育后期，随着气温上升染病植株症状减轻。该病病原为Tomato leaf curl Tanwan virus，属双生病毒组的一种病毒，据资料报道该病毒只能由烟粉虱（Bemisia tabaci）传毒，土壤、种子和土壤均不传毒。近年来烟粉虱在温州地区的发生为害呈暴发态势，现已证实外来入侵生物B型烟粉虱的入侵蔓延并成为优势种是温州地区烟粉虱暴发的主要起因，估计台湾番茄曲叶病毒由B型烟粉虱带入的可能性较大。2006年秋冬，温州地区总体上呈高温干爽天气，对该病虫媒烟粉虱的发生、繁衍十分有利，虫量发生大、加上带毒种群及其携带病毒的多年积累和扩增，为台湾番茄曲叶病毒病的流行提供了病原数量基础，这可能是该病暴发的主要原因。此外，目前温州生产上推广的大多数番茄品种如红梅王、FA-189、516、托马雷斯、合作903等对该病毒病的抗性较差也是不可忽视的重要原因。据报道，该病极有可能在首次暴发后数年内迅速发展并导致大暴发，故须立即采取措施进行应急防控，以便将该病发生为害控制在最小限度内。抓紧引进、筛选抗耐病的优良品种，同时加强培育适合温州市栽培的抗病品种。对重发田实施与非茄科作物轮作，最好是水旱轮作。①育苗床与生产大棚要分开；②清洁消毒苗床；③使用30～40目防虫网隔离育苗，防止烟粉虱入侵；④苗床挂“黏虫色胶板”诱杀烟粉虱；⑤移栽时带药下田。①加强肥水管理，增强植株抗病能力；②地膜覆盖，去除边际杂草；③及时去除植株下部烟粉虱虫、卵枝叶；④收获后及时清洁棚室和周围环境。消灭虫媒，及时防治烟粉虱。可选用99.9%绿颖农用矿物油200～300倍稀释液、20%啶虫脒（兰宁）可溶性液剂3000倍稀释液、25%扑虱灵可湿性粉剂1000～1500倍稀释液、25%阿克泰水分散粒剂2000～3000倍稀释液、2.5%天王星乳油2000～3000倍稀释液、1.8%阿维菌素1500倍稀释液、1%甲胺基阿维菌素2000倍稀释液等进行防治。应在烟粉虱发生初期防治，并交替使用农药。

RNA介导的病毒抗性主要是基于转录后基因沉默（Post-transcriptional gene silencing，PTGS）作用，在真菌、植物和动物中有PTGS相关的基因存在，这些基因沉默现象可统称为RNA干扰现象（RNA interference，RNAi）。许多证据表明，RNA沉默是由双链RNA（dsRNA）所引发的，且需要细胞内的多种酶参与。基于dsRNA在RNA沉默中的诱导作用，构建能转录后形成dsRNA的载体，转化植物后可有效诱发基因沉默。苹果褪绿叶斑病毒（Apple chlorotic leaf spot virus，ACLSV）是苹果、梨和多种核果类果树上发生普遍的一种病毒，可降低树势和影响果实品质。本研究根据GeneBank上已登陆的ACLSV序列设计合成了一对引物，根据载体pDS1301的限制性内切酶图谱，在引物的两端分别引入了两个不同的限制性内切酶识别位点。以总RNA或dsRNA为模板，通过RT-PCR扩增获得来源于砂梨的2个ACLSV分离物的大小为358bp的片段，该片段位于ACLSV cp基因高度变异区。将扩增片段克隆到载体pMD18-T，筛选阳性克隆后提取质粒，经Kpn I/Bgl II和Spe I/Sac I分别对目标片段及载体pDS1301酶切后，在T4连接酶作用下，将克隆片段以正向和反向方式分别插入植物表达载体pDS1301一内含子两端的多克隆位点，构建了可转录后形成dsRNA的载体pDR358-SMJ和pDR358-HH。将重组质粒转化根癌农杆菌EHA105感受态细胞后，采用叶盘共培养的方法转化5～6叶期的健康西方烟叶片，经潮霉素抗性筛选获得转基因西方烟植株。从获得的转基因西方烟植株提取总DNA，根据载体pDS1301多克隆位点两侧的序列合成特异引物，采用 PCR方法对这些植株进行了鉴定，已得到了转R358-SMJ的西方烟49株、转R358-HH的西方烟12株（图1）。图1 部分转基因西方烟的PCR鉴定

核桃是我国北方栽培面积广、经济价值较高的木本油料果树。其种子具有较高的营养价值和良好的医疗保健作用，尤其是其中的亚油酸，对软化血管、降低血液胆固醇有明显作用。除此之外，核桃既是荒山造林、保持水土、美化环境的优良树种，也是我国传统的出口商品。核桃为深根性果树，一般根系垂直分布在距地面2m的土层以上，但吸收根主要集中表土20cm以下距地面1m的土层内。水平分布较广，水平根系可达10m以上。核桃芽分叶芽、雌花芽、雄花芽和休眠芽四种。叶芽着生于枝条各节和顶端。雌花芽为混合芽，多着生于枝条先端1～3节。雄花芽为裸芽，多着生于顶芽以下2～10节。休眠芽位于枝条中下部，刺激后抽枝。潜伏芽着生于大枝皮层下，寿命长，更新能力强。生长枝。位于树冠外围，只抽枝长叶，长10～40cm。徒长枝。位于内膛骨干枝上，直立，长50cm以上。结果母枝。着生混合芽翌年抽结果枝的枝条，长5～40cm。雄花序着生于结果枝中下部或雄花枝上。雄花为风媒花，传粉距离100m以内。雌雄异熟性，一般雄花先开，1～5d后雌花开放。受精后，果实开始发育，通常经历两个时期:（1）果实迅速生长期。40～60d。（2）硬核期。60d左右落果。花后10～15d开始，幼果1～2cm，落果严重。进入硬核期后停止。核桃是喜温果树。普通核桃适宜生长的年平均温度为9～16℃。休眠期温度低于-20℃时幼树即有冻害，低于-26℃时大树部分花芽、叶芽受冻，低于-29℃枝条产生冻害。铁核桃只适应亚热带气候，耐湿热，不耐寒冷。一般年降水量为600～800mm且分布均匀的地区基本可满足核桃生长发育的需要。核桃对空气湿度适应性强，但对土壤水分较敏感。一般土壤含水量为田间最大持水量的60%～80%时比较适合于核桃的生长发育，当土壤含水量低于田间持水量的60%时(或土壤绝对含水量低于8%～12%)核桃的生长发育就会受到影响，造成落花落果，叶片枯萎。核桃属喜光树种。最适宜光照度为60000lx，结果期要求全年日照在2000h以上，低于1000h则核壳核仁发育不良。特别是雌花开花期，光照条件良好，可明显提高坐果率，若遇低雨低温天气，极易造成大量落花落果。核桃要求土质疏松、土层深厚、排水良好的土壤。在含钙的微碱性土壤上生长良好，适宜pH值为6.5～7.5，土壤含盐量应在0.25%以下，稍微超过即会影响生长结实。萌芽前15～20d，疏除树上90%～95%的雄花芽，以减少养分和水分消耗，提高坐果率。开花期去雄花，人工辅助授粉。去雄花最佳时期在雄花芽开始膨大时。疏除雄花序之后，雌花序与雄花数之比在1∶ （30～60）。但雄花芽很少的植株和刚结果的幼树，最好不疏雄花。人工辅助授粉花粉采集在雄花序即将散粉时（基部小花刚开始散粉） 进行。授粉最佳时期是雌花柱头开裂并呈八字形，柱头分泌大量黏液且有光泽时最好。具体方法是先用淀粉或滑石粉将花粉稀释成10～15倍，然后置于双层纱布袋内，封严袋口并拴在竹竿上，在树冠上方轻轻抖动即可。或将花粉与面粉以1∶10的比例配制后用喷雾器授粉或配成5000倍液后喷洒。具体时间以无露水的晴天最好，一般 9∶ 00—11∶ 00 时，15∶00—17∶00时效果最好。进入盛花期喷0.4%硼砂或30mg/L赤霉素，可显著提高坐果率。为提高果实品质，坐果后可进行疏果。核桃应在果皮由绿变黄绿或浅黄色，部分青皮顶部出现裂纹，青果皮容易剥离，有以上现象的果实已显成熟时采收。采收方法分人工采收和机械采收两种。人工采收是在核桃成熟时，用长杆击落果实。采收时应由上而下、由内而外顺枝进行。此法适合于零星栽植。发达国家多采用机械采收。具体做法是在采摘前10～20d，向树上喷洒500～2000mg/kg的乙烯利催熟，然后用机械振落果实，一次采收完毕。此法省工、效率高，但易早期落叶而削弱树势。果实从树上采下后，应尽快放在阴凉通风处，不应在阳光下暴晒。采收后要及时进行脱青皮、漂白处理。脱青皮多采用堆积法，将采收的核桃果实堆积在阴凉处或室内，厚50cm左右，上面盖上湿麻袋或厚10cm的干草、树叶，保持堆内温湿度、促进后熟。一般经过3～5d青皮即可离壳，切忌堆积时间过长。为加快脱皮进程也可先用3000～5000mg/kg乙烯利溶液浸蘸30s再堆积。脱皮后的坚果表面常残存有烂皮等杂物，应及时用清水冲洗3～5次，使之干净。为提高坚果外观品质，可进行漂白。常用漂白剂是:漂白粉1kg+水(6～8)kg或次氯酸钠1kg+水30kg。时间10min左右，当核壳由青红色转黄白色时，立即捞出用清水冲洗两次即可晾晒。

芽孢杆菌属（Bacillus spp.）是一类好氧或兼性厌氧、产生抗逆性内生孢子的杆状细菌，许多为腐生菌，主要分布于土壤、植物体表面及水体中，其在工业、农业、医学、军事和科学研究中有广泛的应用价值。在《Bergey氏鉴定细菌学手册》第8、第9版中，蜡样芽孢杆菌的分类地位为芽孢杆菌属的第I群，该群有22个种。根据营养型菌细胞的宽度分为两类，蜡样芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、炭疽芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌属“大细孢菌种”。蜡样芽胞杆菌是一种杆状、产内生芽孢的革兰氏阳性细菌，由于蜡样芽孢杆菌自然界分布甚广，常存在于土壤、灰尘、腐草和空气中，极易在食品加工、运输、贮存、销售过程中，通过苍蝇、蟑螂等昆虫和不卫生的用具和手污染，通常被认为是一种条件致病菌，在临床上可导致脓肿、脑膜炎、骨髓炎、心内膜炎等报道，但最常见的是导致两种不同类型的食物中毒：腹泻型和呕吐型。关于B.c.引起非肠道感染及食物中毒的例子很多，从1898年起，就有B.c.造成泌尿系统感染及肠胃炎的记载，有些感染的病例甚至很严重，以致造成死亡。在微生物发展的早期，好氧芽孢杆菌就被怀疑可造成食物中毒，Lubenau1906年描述了发生在一家医院的严重的食物中毒事件，300名医务人员及病人用餐后出现急性肠胃炎，对剩余的食物进行检测，发现含有大量的好氧芽孢杆菌，该污染菌为B.c.。Seitz 1913 年从一例患肠炎与腹泻的病人分离出B.c.。Brekenfeld 分别于1926年及1959年报道了两起B.c.造成的食物中毒事件。1936～1942年，瑞典卫生部对367例食物中毒事件综合分析，证实117例是由B.c.引起，并且认识到被B.c.污染的食物，储藏温度不当时，可能会造成食物中毒，在1973年Bulyba等人报道了污染蜡样芽孢杆菌的乳制品引起食物中毒。由于Smith、Gorden 及其同事在芽孢杆菌分类学上的进展，Hauge 经过对4起食物中毒事件的调查，于1995年首次确认B.c.是一种引起食物中毒的致病菌。目前大部分国家对各类食品中的蜡样芽孢杆菌数量有所限定，多数情况下，引起食物中毒的食品中蜡样芽孢杆菌的数量在105～108 CFU/g，常因食用肉类、海鲜、乳品和蔬菜等食物引起，潜伏期一般为6～15h，一般持续24h；而致呕吐的毒素是该菌在食物中预先产生的，该毒素非常稳定，进入人体后在胃中与其受体5-HT3 结合，导致呕吐。呕吐型食物中毒的潜伏期一般为0.5～6h，一般限于富含淀粉质的食品，特别是炒饭和米饭。主要症状为恶心、呕吐，有时有腹泻、头晕、发烧和四肢无力等症状，引起这两种食物中毒的食品通常都是经过热加工处理的，但蜡样芽孢杆菌具有耐热的芽孢，能在食品加工及烹饪后残留下来，热处理诱发芽孢的萌发，在没有其他微生物与之竞争的条件下，大量生长繁殖，产生毒素并引起食品的腐败。蜡样芽孢杆菌产生的呕吐毒素（cereulide，1.2kD）是一种小的十二边形的热稳定性环状毒素，分子式为（D-O-Leu-D-Ala-L-O-Val-L-Val）3。其结构、性质和毒理与缬氨霉素很相似，是特异性的钾离子载体，能将K 转入线粒体内，破坏线粒体的氧化还原能力。该毒素非常稳定，目前的各种食品加工方法，包括灭菌，均无法使其失活（能耐受126℃ 90min），而且还耐强酸（pH 2.0）、耐蛋白酶水解。N.Agata等对多种食品中呕吐毒素的产量进行了检测，发现对B.cereus NC7401来说，在煮熟后的米饭中其产毒量很高，在富含淀粉质的食物中的产毒量也足以引起食物中毒；而在肉类、蛋品和密封的液体食品如牛奶和豆奶中虽可以检测到该毒素，但其含量较低。还发现在与醋、蛋黄酱及酱类一起煮的食物中，该菌株的生长和产毒都受到抑制，推测这可能是醋导致pH 降低的缘故。在12～15℃时该毒素的产量却明显高于30℃时的产量，而且该毒素的产生与芽孢的产生没有相关性。还有报道称该毒素只有在有氧条件下才能产生，所以缺氧条件如：充氮包装和真空包装能有效地防止该毒素的产生和积累。因为该毒素的分子量很小，无抗原性，这使其检测比较难，到目前为止尚缺乏一种快速可靠的检测方法。最常用是采用HEp-2 细胞进行细胞培养分析。近年来用分子生物学手段检测产毒菌株的报道也较多，如P F Horwood 等人根据NRPS基因的两个可变区的序列，针对产呕吐毒素的菌株设计了特异性的引物，进行PCR 以检测蜡样芽孢杆菌是否产毒，取得了良好的效果，该法灵敏度高，而且检测速度快。在呕吐食物中毒事件中分离的蜡样芽孢杆菌均产生呕吐毒素，而且有着共同的独特表型特征，对其基因进行分析发现它们同源性很高。B.c.所造成的腹泻型食物中毒的致病因子是肠毒素，目前至少已经发现4 种不同的肠毒素，包括2 个三联体肠毒素：溶血素BL和非溶血素Nhe；2个单一亚基肠毒素：细胞毒素K（cytK）、肠毒素T（bceT）。2.2.1 溶血素BL（HBL）Beecher1991年从B.c.菌株中分离提纯了一种具有活性的三亚基肠毒素，命名为溶血素BL（hemolysinBL），能够引起家兔肠段的液体积累，可以改变豚鼠皮肤血管的通透性，具有对vero细胞的溶细胞毒性。其由一个结合亚基B（37.5kD）、两个溶血亚基L1（38.2kD）及L2（43.5kD）组成，编码3个亚基的基因hblA、hblD、hblC经克隆、测序与分析，表明其在同一个mRNA中受一个操众子调控转录如图1。这些组分的物理化学性质非常相似，等电点（pI）为5.34，5.33和5.33。其中hblA编码结合亚基B，hblD、hblC分别编码溶血亚基L1及L2，hblB编码B’蛋白，hblC和hblD仅隔37bp个碱基，B、L1、L2蛋白分别有31、30、32个氨基酸的信号肽，hblD和hblA之间最少有100bp碱基，hblA和 hblB有381 bp的碱基隔开，B’蛋白与B蛋白开始的158个氨基酸非常相似，但其功能尚未清楚。Douglas J.Beecher等人利用等电聚焦电泳技术和快速蛋白液相层析技术证明单独成分的溶血素亚基并不会在血平板上产生溶血环，只有当3个亚基结合后，才会产生溶血环。图1 芽孢杆菌溶血素BL操纵子图谱2.2.2 非溶血素肠毒素（Nhe）非溶血素肠毒素（Nhe）由45、39和105kD的蛋白组成，其蛋白成分已被分离出来。1999年Granum等给出了nhe操纵子的序列，该操纵子有3个开放式阅读框，相应的3个基因分别是：nheA、nheB和nheC。前两个基因的产物分别为45kD和39kD 蛋白，而nheC 的产物尚未纯化出来，其功能未知。Nhe与Vero细胞相互作用的研究表明105kD蛋白是复合物的结合部位，而其他两个组分是无法单独结合到细胞上去。该105kD 蛋白是一种金属蛋白，具有分解明胶和胶原的活力。与hbl 基因不同，编码该毒素的基因位于质粒上。图2 芽孢杆菌非溶血素Nhe操纵子图谱溶血素BL（HBL）与非溶血素肠毒素（Nhe）同时受到PlcR的调控。2.2.3 肠毒素T（entertoxin T）肠毒素T为单一亚基的蛋白质，由 bceT基因编码，日本学者Agata对其基因克隆、测序和分析表明其由336个氨基酸组成。并认为其有细胞毒性，可导致家兔肠段的液体积累，可以改变豚鼠皮肤血管的通透性，具有对vero细胞的溶细胞毒性。其产物属于肠毒素蛋白。该毒素同溶血素BL无同源性，而且认为肠毒素T 不会导致食物中毒。2.2.4 细胞毒素K 早期在法国报道过食物中毒，其氨基酸序列显示它属于β-桶孔形成毒素，能在磷脂双分子层中形成直径至少为7A°的孔，该孔具有微弱的离子选择性，已证实它对人类肠道Caco-2上皮细胞具有毒性。PlcR是条件性人类病原菌B.cereus和共生病原菌B.thuringiensis细胞外毒性因子的一个多效调节子，它在细胞进入稳定期时诱导生长。受到PlcR调节的基因有：plcA编码一个专一性磷脂酰肌醇磷脂酶C（PI-PLC），Plc编码一个改良的磷脂酰胆碱磷脂酶 C（PC-PLC），nhe编码一个无溶血性的肠毒素，hbl编码一个溶血性的肠毒素 BL（HBL）；以及推定为S-层类似表面蛋白的基因，以及一个推定为细胞外RNA酶。通过分析37.1kb的hbl，plcA和plcR周围的DNA序列，推定存在28个ORF。3条新基因推定受到PlcR 的调节并编码一个中性蛋白酶，subtilase家族丝氨酸蛋白酶（Sfp）以及一个推定的细胞壁水解酶（Cwh）得到确认。相应的sfp和cwh 基因定位于plcA的上游调节区域，能同时受到位于逆转录基因之间的PlcR结合位点的调控。Sylvie Salamitou等构建plcR基因缺失的突变菌株，该基因编码一个多效细胞外因子的调节子。幼虫期同时取食亲本菌株产生的106孢子亚致死浓度的Cry1C毒性导致70%死亡率，如果使用plcR突变体的孢子，则只有7%的死亡率。小鼠鼻腔灌入108的孢子，亲本菌株导致了100%的死亡率，而灌入相同数量的突变体孢子，死亡率大大降低，甚至没有死亡。应用营养体细胞代替孢子也可以达到相同的效果。导致死亡的原因未知，不可能是由于小鼠内细菌的实际增长所导致。由于受B.thuringiensis 过量突变体感染的小鼠产生的病变，说明溶血素参与其中，发生了作用。B.thuringiensis和B.cereus具细胞溶解毒性的特性。这种细胞溶解毒性的水平在plcR基因缺失的菌株中剧烈下降。表明 B.thuringiensis407菌株和B.cereusATCC14579的致病性受到PlcR的调控。由于蜡样芽孢杆菌及其芽孢广泛存在于周围的环境中，它极易污染食物而引起食物中毒，因此需要发展一种快速的检测方法来实现对致病性蜡样芽孢杆菌的检测，目前对该类蜡样芽孢杆菌的检测主要采用生化检测方法是一项费时费力的方法，需要长时间的选择性培养过程。现在有两种试剂盒可供选择，但由于价格昂贵且不太灵敏，有些致病菌不能够检测。王利国等人对实验室14株芽孢杆菌溶血素BL的检测结果表明，8株蜡样芽孢杆菌全部检测到溶血素BL的基因且产生溶血环，而其他的蜡样芽孢杆菌只检测到hblA基因以外的基因且不产生溶血环，表明只要检测到hblA基因，证明其为致病性菌株，所以通过设计hblA基因特异引物用PCR或通过血平板培养的方法是既经济又快速的检测方法。对其他毒素的检测目前主要是通过设计特异性引物来检测。所以对蜡样芽孢杆菌毒素的检测还需要进一步对其研究，确定最佳的检测方法。

板栗根深叶茂，适应性强，较耐干旱和瘠薄，栽培容易，管理方便，适宜在山区发展。对山区经济的振兴和生态环境的改善效果非常显著。板栗多为高大乔木，寿命较长，但结果较晚，实生树一般5～8年开始结果，15～20年进入盛果期，50～60年生结实最多，盛果期可延续百年以上。嫁接树2～3年即能结果。板栗为深根性果树，主根可深达4m,但大多数根系分布在20～80cm的土层内，根系分布深浅受土层厚薄的影响。大树根系的水平分布可达1.5m以上，水平根扩展范围可为冠径的3～5倍，强大的根系是板栗抗旱耐瘠薄的重要因素。侧根细根发达，须根前端常有白色菌丝呈分枝状，为板栗的共生菌根，对板栗的生长和结果有显著的促进作用，同时也是板栗适应性强的重要原因。板栗根系受伤后再生能力弱，需经较长时间才能萌发新根，在栽植时要少伤根，特别是大根。板栗的芽按性质可分为叶芽、完全混合芽、不完全混合芽和副芽(休眠芽)四种。幼旺树叶芽着生在旺盛枝条的顶部和其中下部。进入结果期的树，多着生在各类枝条的中下部。芽体瘦小，芽顶尖，茸毛较多。多数品种不经短截不萌发或萌发形成弱枝。完全混合花芽着生于结果枝顶端及其以下数节，芽体肥大，发育充实、饱满，芽形钝圆，茸毛较少，外层鳞片较大，部分品种在枝条的中下部也能形成完全混合花芽。完全混合花芽翌春萌芽后抽生的结果枝既有雄花序也有雌花序。不完全混合花芽一般着生于完全混合花芽的下部或较弱枝的顶端及下部，芽体比完全混合花芽略小，萌发后抽生带花序的雄花枝。副芽又称休眠芽或饮芽，着生在各类枝条的基部短缩的位节上，芽体极小，一般不萌发，呈休眠状态，寿命长。遇刺激或前部枝条衰老时，萌发抽生徒长枝。板栗的枝条分为营养枝、结果枝、结果母枝和雄花枝四种。①营养枝由叶芽或副芽萌发而成，不着生雌花和雄花。根据枝条生长势不同，可将其分为徒长枝、营养枝和细弱枝三种。徒长枝由枝干上的副芽萌发而成，年生长量50～100cm,生长旺，节间长，组织不充实是老树更新和缺枝补空的主要枝条，一般30cm以上的徒长枝通过合理修剪，3～4年后也可开花结果；营养枝又称发育枝，由叶芽萌发而成，年生长量20～40cm,生长健壮，无混合芽，是扩大树冠和形成结果母枝的主要枝条，生长充实、健壮的枝可转化为结果母枝，来年抽梢开花结果；细弱枝由枝条基部叶芽抽生，生长较弱，长度在10cm以下，不能形成混合芽,翌年生长很少或枯死。②结果枝是结果母枝上完全混合花芽萌发抽生的、具有雌雄花序能开花结果的新梢。从结果枝基部第2～4节起，直到第8～10节止，每个叶腋间着生柔荑雄花序。在近顶端的1～4节雄花基部，着生球状雌花簇。③结果母枝是指着生完全混合芽的1年生枝条。大部分的结果母枝是由去年的结果枝转化而来。此外，雄花枝和营养枝也有形成结果母枝的，结果母枝顶端一至数芽为混合芽，抽生结果枝，下边的芽较弱，只能形成雄花枝和细弱营养枝。④雄花序由分化较差的混合芽形成，大多比较细弱，枝条上只有雄花序和叶片，不结果。一般情况下，当年也不能形成结果母枝。北方板栗适于冷凉干燥气候，南方板栗适于温暖湿润气候。板栗要求年平均气温为10～15℃,生长期(4—10月)平均气温16～20℃;冬季不低于-25℃;开花期为17～27℃。一般情况下北方板栗产量高，品质好。板栗为喜光树种。当内膛着光量占外围光照量的1/4时枝条生长势弱，无结果部位。光照不足6h的沟谷地带，树冠直立，枝条徒长，叶薄枝细，老干易光秃，株产低，坚果品质差。在板栗花期，光照不足则会引起生理落果。建园时，应选择日照充足的阳坡或开阔的沟谷地较为理想。板栗树虽较抗旱，但在生长期对水分仍有一定要求。新梢和果实生长期供应适量水分，可促进枝梢健壮和增大果实。一般年降水量500～1000mm的地方最适于板栗树生长。板栗树对土壤适应性广泛，以土层深厚、有机质多、保水排水良好的砾质壤土最适宜板栗树生长。其适宜的土壤含水量相当于田间持水量的30%～40%。超过60%，易烂根，低于12%,树体衰弱，降至9%时，树可枯死。板栗对pH值的适应范围是4.6～7.0，以pH值5.5～6.5最为适宜；pH值超过7.6则生长不良。板栗正常生长，要求含盐量在0.2%以下，且板栗是高锰作物。pH值增高，土壤中锰呈不溶状态，影响其对锰的吸收，树体发育不良，叶片发黄。板栗自然分布区地势差别较大，海拔50～2800m均可生长板栗。我国南北纬度跨度较大，但在海拔1000m以上的高山地带，板栗仍可正常生长结果。处于温带地区的河北、山东、河南等地，板栗经济栽培区要求海拔在500 m以下，海拔800 m以上的山地出现生长结果不良现象。在山地建园对坡地要求不太严格，可在15°以下的缓坡建园，15°～25°坡地建园要修建水土保持工程。30°以上陡坡，可作为生态经济林和绿化树来经营。花期微风对板栗树授粉有利，但板栗不抗大风，不耐烟害，空气中氯和氟等含量稍高，栗树易受害。板栗园地应选择土层深厚、排水良好、地下水位不高的沙壤土、沙土或砾质土及退耕地等。土壤宜微酸性，要求光照充足，空气干爽。在山坡地造林应选择南坡、东南坡或西南坡为宜。整地一般在板栗栽植前的3个月进行。整地方法常采用水平梯地整地和鱼鳞坑整地。水平梯地整地就是沿等高线修水平梯地。以等高线为中轴线，在中轴线上侧取土填到下侧，保持地面水平，然后在地上挖坑栽树。该法适用于坡度在20°以下的山地。在坡度较陡或地形复杂的栗园，则可采用鱼鳞坑整地。其方法是：按照需要栽植的株行距，以栽植点为中心。由上部取土修成外高里低、形似鱼鳞状的小台田。无论哪种整地方法，挖穴时要将生土和熟土分开堆放，然后施入农家肥或秸秆、杂草、油渣等，再将熟土回填。造林宜采用1～2年生大苗，苗高不低于1m，地径不小于0.8～1cm,根系发达完整，生长健壮，无病虫害，无机械损伤。板栗栽植密度要根据地形、土质条件及品种特性而定。一般栽植密度以3m×4m为宜。挖苗时应尽可能少损伤侧根和须根，已经损伤的根应剪平伤口，主根过长时可以截短一些。如果挖出的栗苗不能马上定植或需远距离运输时，应进行泥浆蘸根，然后再假植或包装运输。栽植穴宽80cm,深80cm。每穴施入充分腐熟的有机肥料30～50 kg,将肥料和熟土混合均匀、踏实即可。栽植在秋季落叶到春季萌发前均可进行。除寒冷地区外，以秋季栽植为好。栽植要求是树要栽端，土要踏实，根要舒展，树苗埋土一半时，将树苗向上轻轻提一下，可使根系舒展。栽植的深度，保持原来的入土深度，栽好后踏实树干基部周围的覆土，并及时进行浇水，以提高栽植成活率。选用2种以上优良品种混合栽植，一般主栽品种与授粉品种比例是(4～8)∶1。休眠期进行耕翻，萌芽前每667m2施纯氮12kg,以促进花的发育，施肥后灌水。枝条基部叶刚展开由黄变绿时，根外喷施0.3%尿素+0.1%磷酸二氢钾+0.1%硼砂混合液，新梢生长期喷50mg/kg赤霉素，以促进雌花发育形成。开花前追肥，每667m2追施纯氮6kg,纯磷8kg，纯钾5kg,追肥后浇水；清耕栗园进行除草松土，行间适时播种矮秆1年生作物或绿肥。7月下旬至8月初，果实迅速膨大期施增重肥，每667m2施纯氮5kg,纯磷6kg,纯钾20kg,根据土壤含水量浇增重水。种植绿肥的果园翻压肥田或刈割覆盖树盘。采收前1个月或半个月间隔10～15d喷2次0.1%磷酸二氢钾。果实采收后叶面喷布0.3%的尿素液。10月施基肥，每667m2施充分腐熟的土杂肥3000kg+纯氮5kg。对空苞严重的果园同时土施硼肥，方法是沿树冠外围每隔2m挖深25cm,长、宽各40cm的坑，大树施0.75kg,将硼砂均匀施入穴内，与表土搅拌，浇入少量水溶解，然后施入有机肥，再覆土灌水。雄花序长到1～2cm时，保留新梢最顶端4～5个雄花序，其余全部疏除。一般保留全树雄花序的5%～10%。采用化学疏雄的方法是在混合花序2cm时喷1次板栗疏雄醇。雄花序长到5cm时喷施0.2%尿素+0.2%硼砂混合液，空苞严重的栗园可连续喷3次。当1个花枝上的雄花序或雄花序上大部分花簇的花药刚刚由青变黄时，在5∶00前采集雄花序制备花粉。当一个总苞中的3个雌花的多裂性柱头完全伸出到反卷变黄时，用毛笔或带橡皮头的铅笔，蘸花粉点在反卷的柱头上。也可采用纱布袋抖撒法或喷粉法进行授粉；夏季修剪并疏栗蓬，及早疏除病虫、过密、瘦小的幼蓬，一般每个节上只保留1个蓬，30cm的结果枝可保留2～3个蓬，20cm的结果枝可保留1～2个蓬。

猕猴桃果实细嫩多汁，清香鲜美，酸甜宜人，营养极为丰富。它的维生素C含量高达100～420mg/100g，比柑橘、苹果等水果高几倍甚至几十倍，同时还含大量的糖、蛋白质、氨基酸等多种有机物和人体必需的多种矿物质。(1)根。猕猴桃的根为肉质根，外皮层较厚，老根表层龟裂状剥落。主根不发达，侧根和须根多而密集，须根状根系。根系在土壤中的垂直分布较浅，而水平分布范围广，成年树根系垂直分布在40～80cm的土层中，一般根系的分布范围大约为树冠冠幅的3倍，猕猴桃的根系扩展面大，吸收水分和营养的能力强，植株生长旺盛。(2)枝。猕猴桃的枝属蔓性，在生长的前期，蔓具有直立性，先端并不攀援；在生长的后期，其顶端具有逆时针旋转的缠绕性，能自动缠绕在他物或自身上。枝蔓中心有髓，髓部大，圆形；木质部组织疏松，导管大而多。新梢以黄绿色或褐色为主，密生绒毛，老枝灰褐色，无毛。当年萌发的新蔓，根据其性质不同，分为生长枝和结果枝。生长枝：根据生长势的强弱可分为徒长枝(多从主蔓上或枝条基部潜伏芽上萌发而来，生长势强，长达3～5m,间长，牙较小，组织不充实)和营养枝(主要从幼龄树和强壮枝中部萌发，长势中等，可成为翌年的结果母枝)。结果枝：雌株上能开花结果的枝条叫结果枝。雄株的枝只开花不结果，称为花枝。结果枝一般着生在1年生枝的中、上部和短缩枝的上部。根据枝条的发育程度，结果枝又分为：徒长枝结果枝，长度为1.5cm以上；长果枝，长度为1.0m;中果枝，长度为0.3～0.5m;短果枝，长度为0.1～0.3m。(3)叶。叶为单叶互生，叶形有圆形、卵形、椭圆形、扇形、披针形等。叶长5～10cm,宽6～18cm,叶片大而较薄。基部呈楔形、圆形或心脏形。叶面颜色深，叶背颜色浅，且有绒毛。(4)芽。芽分为叶芽和花芽。芽为鳞芽，鳞片为黄褐色毛状；复芽，且有主副之分，1～3芽的叶腋，中间较大的芽为主芽，两侧为副芽，呈潜伏状；主芽易萌发成为新梢，副芽在主芽受伤或枝条被修剪时才能萌发。猕猴桃萌发率较低，一般为47%～54%。(5)花。猕猴桃为雌雄异株植物，雌花、雄花分别在雌株、雄株上。雌花、雄花在形态上都是两性花，但在功能上雄花的雌蕊败育，因此都是单性花。雌性植株的花多数为单生，雄性植株的花多呈聚伞花序，每一花序中花朵的数量在种间及品种间均有差异。(6)果实。为圆形至长圆柱形，是中轴胎座多心皮浆果，可食部分为中果皮和胎座。果皮黄色、棕色、黄绿色等，果皮较薄，果点多数明显，果面无毛或被绒毛、硬刺毛。果肉多为黄色或翠绿色，也有红色的，呈放射状。果实大小差异大，一般为20～50g,果实最大的是中华猕猴桃和美味猕猴桃，大的可达200g以上。中华猕猴桃的初花期多在4月下旬。从现蕾到开花需要25～40d。每个花枝开放的时间，雄花5～8d,雌花3～5d。全株开放时间，雄株7～12d，雌株5～7d。雄花的花粉可通过昆虫、风等自然媒介传到雌花的柱头上进行授粉，也可人工授粉。猕猴桃花芽容易形成，坐果率高，落果率低，所以丰产性好。中华猕猴桃、美味猕猴桃主要以短缩果枝、短果枝结果为主。结果母枝一般可萌发3～4个结果枝，发育良好的可抽8～9个。结果母枝可连续结果3～4年。结果枝通常能坐果2～5个，因品种而有差异。猕猴桃从终花期到果实成熟，需120～140d,在此期间，果实经过迅速生长期、缓慢生长期和果实成熟期3个阶段。土壤以深厚、排水良好、湿润中等的黑色腐质沙质壤土，pH值为5.5～7的微酸性土壤为佳。年平均温度11.3～16.9℃，极端最高温度不超过42.6℃，极端最低温不低于-15.8℃,≥10℃有效积温4500～5200℃，无霜期160～240d，年日照时数1300～2600h。年降水量1000mm左右；相对湿度70%以上。目前，猕猴桃属在全世界共发现66个种，其中，62个种原产于我国。分布在北纬23°～34°的暖温带与亚热带山地，其中，栽培最广泛的2个种中华猕猴桃、美味猕猴桃都以长江流域为分布中心。供鲜食和加工的主要有5个种。分布最广，集中于秦岭和淮河流域以南。其果实近球形或圆柱形，果面光滑无毛，果皮黄褐色至棕褐色，果20～120g。主要品种有：园艺16A、魁蜜、红阳、庐山香、金丰、早鲜等优良品种。目前，为我国栽培面积最大、产量最高的种类。分布于黄河以南地区。果皮绿色至棕色，果重30～200g,果肉绿色，汁多味浓，具清香。主要品种：海沃德、布鲁诺、徐香、金魁等优良品种。分布于长江以南各地，其代表品种有福建的沙农18号，中国科学院武汉植物研究所以种间杂交(中华×毛花)培育出的重瓣、满天星、江山娇等观赏新品种。果实重约30g，果肉翠绿色，多汁微酸。如浙江的华特。主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、河北、山西等地，黄河以南也有分布。其代表种有吉林选育的魁绿。该种类是我国耐寒性强、适应性广、综合利用价值较高的猕猴桃种类。主要分布于我国广西壮族自治区（全书简称广西）、广东、云南、贵州、湖南、四川、湖北、江西、浙江、安徽、台湾等地，果实以富含维生素C而闻名于世，维生素C最高含量可达2140mg/100g。猕猴桃的繁殖方法，常用播种、扦插、嫁接等方式。(1)播种。采集优良母株上充分成熟的果实，自然存放，变软后立即洗种，阴干。播种前进行层积处理，以提高种子发芽率，沙藏时间为40～60d。主要培养实生苗。(2)扦插。猕猴桃扦插因产生大量愈伤组织，消耗过多养分，并在愈伤组织表面形成木栓层，影响插条对养分和水分的吸收，使生根更加困难。实践证明，利用当年生新梢即嫩枝扦插生根比较容易。插穗准备：绿枝蔓插穗选用生长健壮、组织较充实、叶色浓绿厚实、无病虫害的木质化或半木质化新梢蔓。绿枝蔓插穗不贮藏，随用随采。为了促进早生根，可用生长素类处理下部剪口。常用药剂及处理浓度有：吲哚丁酸(IBA)100～500mg/L处理0.5～3h,或3～5g/L速蘸；萘乙酸(NAA)200～500mg/L,处理3h，ABT生根粉蘸下剪口等。绿枝扦插方法：为了减少水分散失，可将叶片剪去1/2～2/3,弥雾的次数及时间间隔以苗床表土不干为度，弥雾的量以叶面湿而不滚水即可。过干会因根系尚未形成，吸不上水而枯死，过湿会导致各种细菌和真菌病害发生蔓延。绿枝蔓扦插的喷药次数较多，大约1周1次。多种杀菌剂交替使用，以防病种的多发性，确保嫩枝蔓正常生长。在建立猕猴桃生产基地时，应选择水源、交通较方便的地方。猕猴桃园宜建立在海拔较高的山区，但不宜超过海拔1000m。丘陵地土层深厚、排水良好，是猕猴桃较适宜的栽培区。但一定要有水源，以防夏秋高温干旱。山地生态条件非常适宜，但要注意坡度、坡向与坡位的选择。一般尽量选择15°以下的缓坡地或较平坦地段。宜选择南向或东南向的向阳避风坡，忌选北向。不宜选择山顶或其他风口(特别是生长季节的风向)处建园。猕猴桃土壤要求土层深厚、疏松肥沃、排水性能良好，又有适当保水能力的微酸性土壤。避免在黏重土壤中栽植。猕猴桃抗风力差，春季大风常折断新梢，损伤叶片及花蕾；夏季干热风降低空气湿度，引起土壤水分大量蒸发而干旱，叶片焦枯，生长受阻；秋季大风，擦伤果实，影响商品价值。因此，建园前就要建造防风林。防风林树种应选择女贞、杉木、湿地松、柳杉、水杉、杨树、樟树、枇杷、冬青、枳壳等，实行常绿与落叶、乔木与灌木相配合，并以常绿树种为主，以预防4—5月的风害。(1)整形。依据不同品种和不同树龄植株生长发育规律，将各种枝蔓合理地分布于架上，协调植株生长和结果之间的平衡，以达到高产、高效的生产目的。篱架的整形：苗木定植后，留3～5个饱满芽短截，春季可萌发2～3个壮梢，冬季修剪时留下健壮的枝条作为主蔓，并在50～60cm处短截。“T”形架的整形：在主干高达1.7m左右，新梢超过架面10cm时，对主干进行摘心，摘心后主干顶端能抽发3～4条新梢，选择2条健壮枝梢作主蔓培养，其余的疏除。平顶棚架的整形：主干高达1.7cm左右，新梢生长至架面10～15cm时，对主干进行摘心或短截，使其促发2～4个大枝，作永久性主蔓。(2)冬季修剪。冬剪最佳时期是冬季落叶后两周至春季伤流发生前两周。过迟修剪容易引起伤流，影响树体。冬季修剪的重点是在整形的基础上，对营养枝、结果枝、结果母枝进行合理的修剪。具体方法是：对生长健壮的普通营养枝，剪去全长的1/3～1/2，促其转化为翌年的结果母枝；徒长形枝对其进行轻剪，促进枝条的充实，以便成为结果母枝；其他的枝条如细弱枝、枯枝，病虫枝、交叉枝、重叠枝、下垂枝均应从基部剪除。对结果母枝的修剪应根据品种特点进行，如金魁的结果母枝抽生结果枝的节位比较高，在第11～13节尚能抽发结果枝，故对粗壮结果母枝可采用长梢轻剪，中等健壮的可留7～8节短截。(3)病虫害防治。树盘表土深翻15cm左右，消灭越冬象甲、金龟子和草履蚧卵块。结合冬剪，清洁果园。及时喷施5波美度的石硫合剂。(1)整形修剪。及时抹除砧木的萌蘖，主干、主蔓上长出的过密芽，直立向上徒长的芽，结果母枝或枝组上密生的、位置不当的、细弱的芽，双生、三生芽(只留1个)，然后确定结果枝留量，新梢长到30～40cm长时开始绑枝，开花前10d进行摘心，徒长枝如作预备枝留4～6叶摘心，可促发二次枝；发育枝可留14～15叶摘心；结果枝常从开花部位以上留7～8片叶摘心。摘心后的新梢先端所萌发的二次梢一般只留1个，待出现2～3片叶后反复摘心，或在枝条突然变细、叶片变小、梢头弯曲处摘心。(2)肥水管理。叶片展开时，喷施1～2次0.3%的尿素，花前灌一次水。(3)病虫害防治。黑光灯、糖醋液等诱杀金龟子等害虫。防治花腐病、干枯病、溃疡病、褐斑病等病害，防治介壳虫、白粉虱、小叶蝉等害虫。(1)疏花蕾。侧花蕾分离后2周开始疏蕾，强壮长果枝留5～6个花蕾，中庸果枝留3～4个花蕾，短果枝留1个花蕾。疏除时应保主花疏侧花。(2)花期放蜂。人工授粉，15%以上雌花开放时，每667m2可设置蜂箱1～2个。(3)肥水管理。开花期喷施0.5%硼砂加0.5%磷酸二氢钾。(4)病虫害防治。防治金龟子、白粉虱、小叶蝉等害虫；防治花腐病、黑星病、褐斑病等病害。(1)疏果。坐果后1～2周内完成。一般短缩果枝上的果均应疏去，中、长果枝留4～5个。使叶果比达到(5～6)∶1。(2)整形修剪。5—6月对结果枝和生长中庸健壮的营养枝摘心，生长瘦弱的营养蔓和向下萌发的枝、芽应及时抹除。7月上、中旬对二次梢再次摘心，同时疏除荫蔽枝、纤细枝、过密枝，并结合修剪进行绑蔓。8月中、上旬对三次枝梢摘心。(3)肥水管理。在落花后20～30d施硫酸钾每667m2 30～40kg,9月中、上旬追施纯钾肥或磷钾复合肥每667m2 30kg，施肥后灌水。果实膨大期每3d喷0.3%～0.5%磷酸二氢钾1～2次。(1)采收。采用树体喷布50mg/L的乙烯利催熟。可溶性固形物含量在12%～18%时采收，用于及时出售；9%～12%时采收，可用作短期贮藏；6.1%～7.5%时采收，用于贮藏。(2)催熟。采后用400倍液的乙烯利喷布果实，或贮藏前用500倍液乙烯利浸果数分钟，晾干后贮存。(3)肥水管理。采果后结合深翻改土施入有机肥，根据果园土壤养分情况可配合施入磷、钾肥，每株幼树施有机肥50kg,加过磷酸钙和氯化钾各0.25kg;成年树进入盛果期，每株施厩肥50～75kg,加过磷酸钙1kg和氯化钾0.5kg。施肥时，离主干50cm处开20cm深沟，施后覆土，并及时灌水。

由RSV引起的水稻条纹叶枯病最早于1897年在日本关东发现，后在朝鲜、乌克兰均有发生。1962年我国在江苏、浙江首先发现RSV。目前该病已经在全国16个省、市、自治区发生，在云南、辽宁、北京、河南、山东、江苏、上海十分常见，特别是云南的保山、楚雄、昆明，北京的双桥，河南原阳，山东济宁及江苏北部的姜堰、洪泽等地，发生更为普遍严重。RSV由介体灰飞虱（Laodelphax striatellus Fallen）传播，灰飞虱的带毒虫量是水稻条纹叶枯病发生流行的主要影响因子。因此，建立一种快速灵敏检测灰飞虱带毒率的方法对于预测水稻条纹叶枯病的流行及病害防治十分必要。目前国内外用于检测灰飞虱带毒率的方法主要有ELISA、RT-PCR和Northern杂交等。但RT-PCR和Northern杂交成本高，不适于大批量检测样品。用斑点免疫结合（DIBA）法检测快速灵敏，简单易行，适用于大批量检测，并且适合于基层工作人员直接检测灰飞虱携带的病毒，从而为病害的流行预测提供依据。为此，我们利用斑点免疫结合（DIBA）检测RSV的方法对浙江部分市县的灰飞虱进行了水稻条纹叶枯病毒带毒率测定，并与采用生物法测定的灰飞虱传毒率进行了比较。现将研究结果报道如下：1.1.1 供试虫源、水稻品种 2006年供试虫源为采自浙江长兴和嘉兴两地的灰飞虱虫源，2007年供试虫源为浙江湖州和嘉兴海盐、桐乡、秀洲等县区提供的灰飞虱。供试水稻植株为苗龄15天的嘉991和秀水110两个水稻品种，由嘉兴市农业科学院提供。1.1.2 供试抗体 RSV抗体由江苏省农业科学院植物保护研究所和浙江大学共同研制，效价为1：5000～10000；酶标二抗为辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG，由Sigma公司生产（PN为A4416），效价为1：5000～10000。1.2.1 生物法测定灰飞虱传毒率 选用长度15cm、直径2cm、两端开口的玻璃管，首先用纱布罩住管口一端。将事先育好的供试水稻秧苗置于其中，每管一株，然后接入一头供试灰飞虱，再用纱布罩上玻璃管的另一端。将玻璃管竖直放入盛有清水的育苗盘中，保证秧苗根部朝下刚好浸入水中。对每个玻璃管做好标记，记录灰飞虱采集地，并对每株秧苗进行编号。2006年供试水稻秧苗数量和灰飞虱虫量均为257，其中长兴虫源104头供试虫全部接在嘉991品种上，嘉兴市新丰虫源中73头供试虫接于嘉991品种上，80头供试虫接于秀水110品种上。2007年测定了湖州和嘉兴市海盐、桐乡、秀洲共4个不同地区的灰飞虱传毒率。其中湖州和桐乡供试虫口为123头和132头，均接于嘉991秧苗上取食；海盐和秀洲供试虫口分别为159和167头，接于秀水110秧苗上取食。待该批灰飞虱在供试秧苗上取食24h后，将活的灰飞虱按编号回收冷冻备用。同时将已被取食的供试秧苗按编号移栽到观测圃中，观察并记录回收活虫对应的植株发病情况。1.2.2 斑点免疫结合（DIBA）法测定灰飞虱带毒率 将生物测定法中收回的供试灰飞虱单头置于100μl碳酸盐包被缓冲液（0.05mol/L，pH值9.6）中，用木质牙签捣碎，5000r/min离心3min后取上清液作为待测样品备用。在NC膜方格上，每格加入3μl待测样品后在室温下晾干；将干燥的膜正面朝上浸入5%封闭液中，置于37℃水浴锅中30min后，用PBST洗涤3次，浸入用封闭液稀释1000倍的单抗液中置于37℃水浴锅中1.5h；用PBST洗涤3次后，将膜浸入用封闭液稀释5000倍的辣根过氧化物酶标记的二抗中，置于37℃水浴锅中1.5h，洗涤后加入固体显色底物液，置于37℃水浴锅中30min（参见马占鸿等的方法）。随后晾干，统计NC膜上显色格的数量，计算所检测灰飞虱的带毒率。在生物法测定灰飞虱传毒率的试验中，被取食供试苗最早于接虫后13天初见发病症状，首先从水稻叶脉附近出现褪绿的斑点，并且斑点排成和叶脉平行的直线，随后病斑逐渐增多，连成互相平行的多条病斑，最后整个叶片发黄直至卷曲。35天后供试苗不再出现新的发病植株。2006年利用生物法测定传毒率时观察秧苗发病率发现，供试的257株秧苗中有11株发病，发病率为4.28%，其中长兴虫源取食的104株供试苗中有7株发病，即有7头灰飞虱传播病毒，传毒率为6.73%；嘉兴新丰虫源在嘉991和秀水110上取食后的发病植株分别为2株，灰飞虱在嘉991和秀水110上的传毒率分别为2.74%和2.50%。各地平均传毒率为3.99%。2007年利用生物法测定传毒率观察秧苗发病率时发现，所测4个地区供试的581株秧苗中共有25株发病，发病率为4.30%，其中湖州虫源的传毒率最高，为6.50%；海盐、桐乡和秀洲3个地区的灰飞虱传毒率差异不大，分别为3.77%、3.79%和3.59%，各地平均传毒率为4.41%。利用在生物测定法中回收的供试虫源样本，在实验室采用斑点免疫结合（DIBA）法测定灰飞虱带毒率，试验发现采用斑点免疫结合（DIBA）法测定的灰飞虱带毒率要高于在生物测定法中的传毒率（秧苗发病率）。2006年采用斑点免疫结合（DIBA）法测定的供试样本平均带毒率为6.15%，其中取自长兴的104头灰飞虱中，检测发现其中11头呈阳性反应，带毒率为10.58%。采自嘉兴的虫源在取食嘉991和秀水110两个品种中分别回收活虫73头和80头，各有3头在检测中发生呈阳性反应，带毒率分别为4.11%和3.75%。对生物学和快速检测法检测结果比较发现，采用斑点免疫结合（DIBA）法检测的带毒率高于生物法测定的传毒率，两者之比平均为1：0.65，幅度为1：0.64～0.67，见表1。虫源地带毒率测定（DIBA测定）发病率观察（生物法测定）供试虫数反应点带毒率（%）对应检测株反应株传毒率（%）传毒率/带毒率长兴（秀水110）1041110.5810476.730.64嘉兴（嘉991）7334.117322.740.67嘉兴（秀水110）8033.758022.500.67各地平均6.153.990.65表1 2006年生物法测定结果与DIBA法测定结果比较2007年采用斑点免疫结合（DIBA）法测定的供试样本平均带毒率为8.68%，其中湖州和嘉兴秀洲虫源的带毒率最高，分别达到了13.01%和11.38%；海盐和桐乡带毒率也较高，分别为5.03%和5.30%。对生物法和快速检测法测定结果比较发现，采用斑点免疫结合（DIBA）法检测的带毒率高于生物法测定的传毒率，两者之比平均为1：0.57，幅度为1：0.32～0.75，见表2。虫源地带毒率测定（DIBA测定）发病率观察（生物法测定）供试虫数反应点带毒率（%）对应检测株反应株传毒率（%）传毒率/带毒率湖州（嘉991）1231613.0112386.500.50海盐（秀水110）15985.0315963.770.75桐乡（嘉991）13275.3013253.790.72秀洲（秀水110）1671911.3816763.590.32各地平均8.684.410.57表2 2007年生物法测定结果与DIBA法测定结果比较通过对不同地区虫源在两个不同水稻品种上的试验发现，在浙江嘉兴和湖州采集的灰飞虱供试虫源中均有一定数量的灰飞虱携带病毒并有传毒能力。通过2006年、2007年两年利用斑点免疫结合法和生物法对灰飞虱带毒率和传毒率检测试验表明，灰飞虱带毒率高于传毒率，而且传毒率与带毒率之比相对较为稳定，两年平均为0.61，其中2006年灰飞虱传毒率与带毒率之比为0.65，2007年灰飞虱传毒率与带毒率的比值为0.51。以上结论初步明确了浙江嘉兴、湖州两地越冬代灰飞虱体内水稻条纹叶枯病带毒率与传毒率之间的关系，为两种检测方法数值转换和病害预测提供科学依据，但其他世代灰飞虱带毒率与传毒率之比是否与此一致尚有待进一步研究。

猕猴桃的根为肉质根，皮厚；最初为白色，后转为黄色或黄褐色，嫩脆，受伤后会流出液体，即伤流；老根外表灰褐色到黑褐色，有纵向裂纹；主根在幼苗期即停止生长，骨架根主要为侧根；侧根和细根很密集，共同组成发达的根系。幼根和须根再生能力很强，既能发新根，又能产生不定芽；老根发新根的能力很弱，伤断后较难再生。猕猴桃优良品种根系在土壤温度为8℃时开始活动；25℃时进入生长高峰期，随后生长开始下降；当土壤温度为30℃时，新根生长基本停止。生长在坚硬土层内的根系分布较浅；生长在疏松土壤内的根系分布较深 （图1-1）。图1-1 猕猴桃的根系常规栽培种类的猕猴桃叶大、较薄、脆，容易被风刮烂。早春萌芽后约20天开始展叶，其后迅速生长一个月，当其大小接近总面积的90%左右时，转入缓慢生长至定型。通风透光条件下，定型后的叶片到落叶前的几个月里，光合作用最强，制造和向其他器官输送的养分最多。叶具有光合和呼吸功能，当其光合作用产物大于呼吸作用所消耗的物质时，养分积累并输出供给树体及果实生长发育所需；当呼吸所消耗的物质大于光合产物时，消耗营养。具有营养积累功能的叶叫有效叶，不具有营养积累功能的叶叫无效叶。栽培的目的就是尽可能地提高有效叶总面积，减少无效叶数量。无效叶的种类有幼嫩叶、衰老叶、遮阴叶、病虫害或风等机械伤造成大面积失绿或破损叶。果园管理中增加有效叶面积才能提高果实的产量和品质，进而提高经济效益。优良品种的叶片面积大、叶厚、色深，光合能力强、养分积累多，供给花芽、树体及果实生长发育的养分多，革质强，抗风害能力强。当然，相同品种的叶片大小和形状因树龄和着生位置会略有差异，但是不同种类、不同品种的猕猴桃叶片形状和叶尖端形状均有较大差异 （图1-2）。图1-2 猕猴桃叶片形状常规栽培的猕猴桃芽由数片具有锈色茸毛的鳞片和生长点组成，被深深地包埋在叶腋间海绵状芽座中。每个芽座中有1～3个芽，3个芽中两侧较小的为副芽，中间较大的为主芽。副芽常呈潜伏状，当主芽受伤或枝条短截时，副芽便萌发生长，有时主、副芽同时萌发。按芽的性质分为叶芽和混合芽 （花芽）。叶芽瘦小，萌发后只抽梢长叶；混合芽肥大、饱满，萌发后不仅抽梢长叶，而且可开花结果。需要注意的是混合芽，即花芽 （又称花序芽或花枝芽），因其和葡萄一样，花序是着生在当年萌发的新梢上，所以是栽培猕猴桃时重点培养的对象。混合芽根据枝条上萌发的位置，可分为上位芽、平位芽、下位芽。上位芽背向地面，萌发率高、抽枝旺、结果多；平位芽与地面平行，枝条生长中等、结果较多；下位芽朝地面，萌发率低、抽生枝条衰弱、结果少（图1-3）。图1-3 猕猴桃的芽猕猴桃为木质藤本植物，枝蔓比较柔软，需攀缘支撑物生长，其蔓可伸长生长达10米左右。根据枝蔓是否带有花芽，可将其分为营养枝蔓和结果枝蔓。根据猕猴桃雌株生长的骨干结构，雌株可分为主干、主蔓、结果母枝 （蔓）、结果枝 （蔓）、营养枝 （蔓）。营养枝蔓主要构成树体的骨架结构或用于结果母枝蔓更新，如主干、主枝蔓、侧枝蔓和未形成花芽的一年生枝蔓。具有开花结果能力的当年生枝蔓，叫结果枝蔓。因为猕猴桃的花芽为混合芽，所以着生在结果枝蔓的母枝上，叫结果母枝蔓。一般选长势中庸、组织充实的枝蔓培养成结果母枝蔓。一般结果母枝蔓的中下端第7～10个节位着生的结果枝蔓较多，结果枝蔓于基部1～7节位间开始结果，一个结果枝蔓可以着生3～5个花序，每个花序可以结果1～4个。凡是达到结果年龄的枝条，除基部和蔓上抽生的徒长枝外，几乎所有的新梢都很容易形成花芽，进而形成结果母枝蔓。猕猴桃一年可抽梢3～4次，各蔓抽生的长势和生长量自下而上减弱 （图1-4、 图1-5）。图1-4 猕猴桃的新梢图1-5 猕猴桃的枝蔓中华猕猴桃和美味猕猴桃的结果枝蔓一般按以下长短进行划分：小于 10 厘米叫超短结果枝蔓 （也称丛状结果枝蔓），10～30厘米叫短结果枝蔓，30～50厘米叫中结果枝蔓，50～100厘米叫长结果枝蔓。将软枣猕猴桃天源红的花枝划分为以下五种类型：短缩花枝 （0～5厘米），从基部到顶端均可着花；短花枝 （5～10厘米）；中花枝 （10～30厘米），部分着花可达顶部，一般3～10节；长花枝 （30～50厘米）；徒长性花枝 （50厘米以上），着花于枝条的中下部4～13节。猕猴桃花从结构上来看属于完全花，具有花柄、花萼、花瓣、雄蕊和雌蕊，但是从功能上来看绝大多数品种属于单性花，分为雌花和雄花。雌花子房发育肥大，多为上位扁球形，柱头多个，心室中有多数胚珠，发育正常；雄蕊退化发育，花丝明显矮于雌花柱头，花药干瘪，有些虽然肉眼观察高度接近，但是花药中没有花粉，或即使有少量的花粉，花粉没有活力，在大蕾期套硫酸纸袋完全隔离外界花粉的情况下自身不能坐果。雄花则雄蕊发达，明显高于子房，花药呈现饱满状态，花粉粒大，花粉量充分且活力强；子房退化很小，呈圆锥形，有心室而无胚珠，不能正常发育。猕猴桃的花序有单花、二歧聚伞花序和多歧聚伞花序。中华猕猴桃每花序多为1～3朵 （少数品种较多，如金艳），而美味猕猴桃多为单花序或二歧聚伞花序。开花时间和花期长短因品种、雌雄性别、管理水平和环境条件而变化。中华猕猴桃和美味猕猴桃的花初开呈白色，后渐变成淡黄色或棕黄色；花大、美观，具芳香味；缺乏明显的蜜腺组织。有效授粉期是指开花后在花粉管到达胚珠之前，胚囊保持活力和接受花粉能力的天数。有效授粉期的长短除了与柱头的活力、柱头与花粉的亲和力及花粉活力等亲本性状有关外，也与授粉期的温度、湿度等环境因子有关。花期温度较为平稳，花期持续的时间相对较长，而如果花期温度变化幅度大，则会加速柱头的褐化，使可授粉性降低。雌性品种以中期开的花质量好，所结果实果形端正；雄性品种以早期花质量高，所以选配雄性授粉品种时，以其初花期正对上雌性品种的盛花期为宜。开花前1天至其后第二天，花柱呈现纯白色而且鲜亮，从开花第三天开始柱头逐渐变黄、变干，第五天开始变黄褐、焦枯 （图1-6、 图1-7）。图1-6 猕猴桃的雌花图1-7 猕猴桃的雄花猕猴桃是中轴胎座多心皮浆果，倒生胚珠，寥型胚囊。果实形状不一，有圆形、长椭圆形、椭圆形或扁圆形等；果皮颜色有绿色、黄色、褐色、红色等；表面被毛情况分为有毛、无毛两种类型，有毛类型根据毛的分布可分为稀毛、中毛、多毛，根据生长状态可分为短茸毛、茸毛、硬毛、糙毛等不同类型。内、外层果肉颜色可分为绿色、黄色、橙色、红色等各种类型，目前生产上栽培品种多为选自绿色果肉的美味猕猴桃和黄色或内果皮为红色果肉的中华猕猴桃，也有极少量的全红型或绿肉型的软枣猕猴桃。中华猕猴桃和美味猕猴桃品种在正常的管理和气候条件下较少发生采前落果现象，软枣猕猴桃有少量采前落果现象。同一品种栽培在不同地区和条件下，品质表现有差异，体现出区域适应性，引种时应注意 （图 1-8、 图 1-9、图1-10）。猕猴桃按果实成熟期一般可分为早熟、中熟、晚熟和极晚熟品种。早熟品种指8月达到成熟度而能够上市的品种，中熟品种指9月上市的品种，晚熟品种指10月上市的品种，极晚熟品种指11月上市的品种。目前尚未发现7 月成熟的极早熟品种，也未培育出早熟的美味猕猴桃品种。由于猕猴桃种植地域较大，很难用地方成熟期来衡量，所以只能以达到采收成熟度、能够上市为准。图1-8 黄肉果实猕猴桃图1-9 绿肉果实猕猴桃图1-10 红心及红肉果实猕猴桃猕猴桃的种子较小，形状多为扁长圆形，成熟新鲜的种子多为棕褐色或黑褐色，干燥的种子呈黄褐色或红褐色，表面有网纹 （图1-11）。经相关部门测定，猕猴桃籽粒中含油率平均为28.85%，其中不饱和脂肪酸含量高达90.37%，而亚油酸、亚麻酸含量平均占不饱和脂肪酸的74.83%。图1-11 猕猴桃种子猕猴桃根系的生长随一年气候的变化而变化。根系在土壤温度8℃时开始活动，20℃左右进入生长高峰期，若温度继续升高，生长速率开始下降，30℃左右时新根生长基本停止。在温暖地区，只要温度适宜，根系可常年生长而无明显的休眠期。根系的生长常与新梢生长交替进行，第一次生长高峰期出现在新梢迅速生长后的6月，第二次生长高峰期在果实发育后期的9月。在高温干旱的夏季和寒冷的冬季，根系生长缓慢或停止活动。猕猴桃新梢全年的生长期为170～190天。在北方地区，一般有2个生长阶段，从4月中旬展叶到6月中旬大部分新梢停止生长，为第一个生长期，在4月末到5月中旬形成第一个生长高峰期；7月初大部分停止生长的枝条重新开始生长起到9月初枝条生长逐渐停止为第二个生长期，在8月上中旬形成第二个生长高峰期。在南方地区，9月上旬到10月中旬还会出现第三个生长期，并在9月中下旬形成第三个生长高峰期，但强度比前两次高峰要小得多。枝蔓生长动态枝条的加粗生长主要集中于前期，5月上中旬至下旬加粗生长形成第一次高峰期，至7月上旬又出现小的增粗高峰，之后便趋于缓慢增粗，直至停止。猕猴桃叶片生长是从芽萌动开始，展叶以后随着枝条生长而生长，当枝条生长最快的时候，叶子生长也最迅速。正常叶从展叶到最终叶面大，需要35～40天。展叶后的第10～25天是叶片迅速生长期，此期的叶面积可达到最终的叶面积90%左右。叶龄小于22天的叶片制造的光合产物不能满足本身生长的需要，要不断从成龄叶输入碳素营养物质；叶龄22～24天时叶片的光合产物输入和输出达到平衡，叶片光合作用已能满足本身需要，但不能进行光合产物净输出。从展叶后25天起，叶片制造的光合产物除满足本身需要外已有剩余，开始大量输出光合产物。猕猴桃在当年夏秋季完成生理分化形成花芽原基后，直到翌年春季形态分化开始前，花器原基只是数量增加，体积变肥大，形态上并不进行分化，从外观上无法与叶芽相区别。猕猴桃的花芽为混合芽，着生在1年生母枝当年抽生出的新梢叶腋间。休眠的越冬芽由1个肥大的叶柄痕包被着，未萌动前顶芽平齐，芽外密被棕褐色茸毛。直到盛花前70天左右才进入形态分化期，而形态分化期时间很短，速度很快，从芽萌动前10天左右开始，到开花前1～2天结束。越冬芽的发育进程为：春季3月上旬猕猴桃的越冬芽开始萌动，芽体上端由平顶变为突起，在叶腋间出现1个微小的突起物。新梢上萌发的混合芽在萌发后可以分化成花枝和营养枝。花芽发生在离冬芽基部较远的叶原基腋间，花芽原基膨大隆起，逐渐发育成包片。花序开始发育的最早标志是腋芽原基的伸长和两侧生包片的显现，产生明显的三裂片结构。花芽萌发4～7天后，苞片腋部出现聚伞状花序原基，两侧产生萼片原基。在较低部位的叶腋内，由于顶花分生组织在发育过程中受到抑制，侧生花与顶花融合，使这些花发生畸变，开花授粉后产生畸形果，有些畸变甚至是3朵花融合而成的，在结果枝基部的第1、第2个果上出现的概率较高。这种现象在开花坐果前从花蕾的形态就大致可以辨别出来，凡呈扁平状或畸形而非近圆形的花蕾将来很可能形成畸形果实 （图1-12）。图1-12 畸形果猕猴桃植株的花量与品种、树龄、生态环境及管理水平有关，生长正常的雌性品种海沃德的成龄植株平均花量有3000朵左右，而秦美、金魁、布鲁诺的花量较海沃德品种高。成龄的雄株的花量显著地高于雌株，可达5000～10000朵。猕猴桃的雌花从显蕾到花瓣开裂需要35～40天，雄花则需要30～35天。雌株花期多为5～7天，雄株则达7～12天，长的可达15天。花初开放时呈白色，后逐渐变为浅黄色至橙黄色。雌花开放后3～6天落瓣，雄花为2～4天落瓣。花期因种类、品种而差异较大，同时受环境的影响也很大。美味猕猴桃品种在陕西关中地区一般于5 月上旬和中旬开花，中华猕猴桃品种一般较美味猕猴桃早7～10天。在22℃下，用10%的蔗糖加0.01%硼酸的培养基上摇床培养3.5小时，以测定花粉的生活力，一般早熟雄株系的花粉发芽率超过80%，中晚熟株系在65%～70%。但在管理不良的果园，如架面郁闭严重、营养不良等时，花粉会萌发产生大量不正常扭曲、盘绕或叉状的花粉管。自然状态下，昆虫及风均可为猕猴桃传花授粉。雌蕊的柱头为辐射状，表面有许多乳头状突起，分泌汁液。受过粉的柱头为黄色，未受粉的为白色。花粉管的适宜伸长温度为 20～25℃，15℃伸长较差，而在30℃时初期伸长良好，2 小时后极端衰弱，4小时后伸长停止。据赤井昭雄在实验室用显微镜观察，10℃下授粉后11小时花粉开始发芽，57小时后花粉管抵达花柱基部，84小时后进入子房。而15℃下授粉后4小时花粉开始发芽，36小时后花粉管通过花柱中部，60小时后进入子房。在20℃下授粉后2小时花粉开始发芽，24小时后花粉管抵达花柱基部，36小时后进入子房。在25℃下授粉后1小时花粉开始发芽，2小时后进入花柱，4小时后花粉管通过花柱中部，24小时后进入子房。雌花受精后的形态表现为：柱头受粉后第3天变色，第4天枯萎，花瓣萎蔫脱落，子房逐渐膨大。人工授粉时，如果将花粉直接放在水里制成悬浮液，会使花粉由于渗透压的剧烈改变而丧失生命力。经过一系列试验，Hopping等发现由Ca（3 ） 2+H3 BO4+纤维素胶 （重量与体积百分比各为 0.01%）+阿拉贝树胶 （重量与体积百分比为0.005%） 组成的悬浮基效果好，但同时还要求水中没有金属离子，花粉的含水量超过10%。花粉在这种悬浮液中可保持生命力3小时，同时可保护落在柱头上的花粉在悬浮液滴干燥过程中免受脱水为害。从授粉后60天双细胞胚开始分裂，到发育成具有2片完整子叶的子叶胚，约需50天。即从开花到胚发育完成约110天。在胚发育完成时，种子内仍有部分胚乳细胞存在。猕猴桃容易早结果。实生苗一般是在2～4年开始开花结果，5～7年进入盛果期。嫁接苗翌年就可开花结果，特别是中华猕猴桃品种，在苗圃即可见到开花结果植株 （图1-13），一般4～5年后进入盛果期，株产15～20千克，亩产 （1亩≈666.7平方米。全书同） 可达1500～2000千克。如能提高管理技术水平，有的嫁接苗亩栽110株，创下了栽后翌年亩产500千克，第六年亩产3277千克的良好成绩。图1-13 苗圃开花结果植株猕猴桃成花容易，坐果率高，一般无落果现象。在山东潍坊地区实生苗定植后翌年开花株率为6.5%，第三年开花株率为52.8%，第四年获得亩产 431 千克的果实。可溶性固形物为13%～21%。如果选用良种嫁接苗，结果年龄会更早，一般2～3年结果，4～6年进入盛果期，株产可达10～20千克，高的可达50千克以上。为了不影响猕猴桃的发育，前三年最好不要挂果。物候期指果树在1年中随着四季气候变化，有节奏地进行各种生命活动的现象，是在长期进化过程中形成的与周围环境相适应的特性。了解猕猴桃的物候期，有助于认识环境条件对猕猴桃的影响，为在生产中采取适宜的栽培管理措施提供依据。温度是影响猕猴桃物候期的主要因素，所以海拔、湿度、光照、坡向等凡能影响温度变化的因素都能间接地影响物候期的变化。由于猕猴桃分布地区很广，各地的自然条件也不一致，因而在不同地区和不同年份猕猴桃的物候期也有差异。猕猴桃的种类不同，物候期差异很大，中华猕猴桃品种的物候期一般比美味猕猴桃早7～10天；在同一种类中，品种之间的物候期差异也很大。美味猕猴桃中，海沃德品种的物候期明显比其他品种晚；同一品种在不同的栽培区域物候期也显著不同。猕猴桃的大多数种类和品种要求亚热带或暖温带湿润和半湿润气候。早春寒冷，晚霜低温，盛夏高温，常常影响猕猴桃生长发育。在年均气温11.3～17.9℃的条件下生长良好。多数猕猴桃种类喜半阴环境。幼苗期喜阴凉，忌阳光直射；成年结果树要求充足的光照。猕猴桃是中等喜光果树，要求日照时数为1300～2600小时，喜漫射光，忌强光直射，光照强度以正常日照的40%～45%为宜。猕猴桃喜凉爽湿润的气候，不耐涝，在渍水或排水不良时常不能生存。在年降水量740～1800毫米的区域比较适宜。猕猴桃喜土层深厚、疏松肥沃、排水良好、腐殖质含量高的沙质土壤，忌黏性重、易渍水及瘠薄的土壤，最适 pH 值5.5～6.5。