砂糖橘、春甜橘、金柑、明柳甜橘、茂谷柑、W·默科特结果早，投产快，产量高，特别是砂糖橘、春甜橘，种后第5年每667平方米产量可达3000～5000千克。要获得高产优质，除了高标准建园、加强病虫害防治以外，种植后的田间管理措施特别是树冠管理技术是否科学、合理、及时、到位，就成为柑橘能否持续获得高产高效的极其重要的因素。因此，必须加强对结果树树冠的管理，通过科学的整形修剪、合理的肥水管理，培养通风透光良好、结果母枝多而健壮的丰产树形，通过保花保果技术的应用达到多结果、年年结果的目的，最终实现丰产、稳产、优质、高效的目的。砂糖橘、春甜橘、明柳甜橘、W·默科特主要以秋梢为结果母枝(图4-1),金柑、滑皮金柑则以春梢和少部分夏秋梢为结果母枝(图4-2)。因此，如何培养数量充足、充实健壮的秋梢或春梢作为结果母枝就十分关键，其数量和质量关系到翌年的产量和质量。要根据树龄、树势、挂果量培养好结果树各个阶段量足质优的结果母枝。一般要求青年结果树培养100～200条、长度20～30厘米；成年结果树和老年结果树培养200～300条、长度15～25厘米，叶片浓绿、健壮充实、无病虫害的结果母枝。图4-1 砂糖橘的秋梢结果母枝图4-2 金柑的春梢结果母枝放秋梢时间要根据树龄、树势、结果量、立地条件和气候条件来决定。砂糖橘、春甜橘以秋梢为结果母枝，如放梢太迟，秋梢不充实，影响花芽分化与结果；放秋梢过早，容易促发冬梢，影响翌年的花量。所以，对砂糖橘、春甜橘、明柳甜橘、茂谷柑、W·默科特来说，结果多、树势弱的缺水的山地果园，适宜在大暑至立秋前放秋梢；对结果少、树势旺盛、水田栽培或灌溉条件好的果园，则可在立秋后至处暑前放秋梢。金柑、滑皮金柑则以重点培养充实的春梢为结果母枝，在春梢萌芽前及时完成修剪、施肥、淋水等工作。图4-3 短剪徒长枝第一，在放梢前15～20天，对树冠中上部丛状密生枝、旺长枝、徒长枝、落花落果枝、弱枝进行短剪或疏剪(图4-3至图4-5)，促发更多健壮秋梢抽出。对结果多的树，应疏去部分皮厚、粗糙、过大、品质低劣和畸形的果实。同时，剪除病虫枝、枯枝，减少养分消耗，促发秋梢。第二，在金柑、滑皮金柑采果后要及时进行修剪，重点对树冠中上部的结果枝、落果枝、徒长枝、弱枝进行适当的短截，促发健壮的春梢，确保当年结果母枝的数量和质量。图4-4 砂糖橘丛状枝枝条多而密图4-5 短剪后的丛状枝砂糖橘、春甜橘、明柳甜橘、W ·默科特、金柑、滑皮金柑结果早，产量高，对肥水的要求较高，如果肥水管理跟不上，就容易造成树体营养失调，树势衰退，产量下降，砂糖橘、春甜橘、明柳甜橘、W·默科特还容易出现大小年现象。因此，应因地制宜，合理施肥。土壤施肥要根据品种、树龄、树势、产量、肥料、季节、天气、土壤等不同情况进行，才能最大限度地发挥肥料的效用，确保丰产、稳产、优质。原则上采取追肥、化肥浅施，基肥、有机肥深施。(1)深翻改土，增施有机肥。每年冬季的12月至翌年1月采果后或夏季的6—7月，沿树冠滴水线下挖长80～100厘米，宽、深各40～50厘米的长方形坑，施肥量约为全年的40%左右，肥料以有机肥为主，配合商品肥。以株结果50千克的产量计算，每株施入绿肥、杂草、腐熟农家肥等有机肥20～30千克，复合肥1～1.5千克，磷肥1千克，饼肥1～2千克，熟石灰1～1.5千克，肥料与土要尽量拌匀施下，避免肥料过于集中造成伤根。深施重肥的位置需逐年轮换，保证土壤疏松肥沃，树体有足够的养分，为丰产、稳产、优质打下基础。(2)萌芽促花肥。柑橘生长、开花结果周期长，生长量大，消耗养分多，而土壤养分有限，所以应及时通过追施肥料补充营养。可在春梢萌芽前10～15天，在树冠滴水线附近开深10～15厘米的环状沟，每株施入0.3～0.75千克尿素、0.5～1千克复合肥，加腐熟的麸水或沼气液30～40千克，施后回土。(3)稳果肥。春梢生长、开花坐果与幼果发育使树体养分大量消耗，而且新梢生长与花果之间还相互争夺养分，导致落花落果。因此，要及时施稳果肥以减少落花落果，促进新梢转绿，提高坐果率。可在谢花2/3左右时，开浅沟每株施入尿素0.3千克、复合肥0.5千克、硫酸钾0.2千克，加施腐熟猪牛栏粪水或沼液30千克。(4)壮果促梢肥。在秋梢抽发前10～15天，沿树冠滴水线附近挖10～15厘米深的浅沟，每株施入尿素0.3千克、复合肥0.5～1千克、腐熟花生麸2～3千克。此次施肥最好同时加腐熟花生麸水30～40千克。目的是保证树体有足够养分，促进果实膨大和秋梢抽发，为翌年开花结果创造条件。(5)采果肥。施采果肥的目的是恢复树势，为翌年开花结果做准备。一般在采果前后进行，树冠盖膜后往往不方便施肥，因此，为了既方便又能及时将肥料施下，可将采果肥提前至11月份、树冠盖膜前施完。肥料以农家肥和有机肥为主，结合商品肥料，按株产50千克计算，每株施农家肥20～30千克、饼肥2～3千克、复合肥1～1.5千克、石灰0.5～1千克。各次追肥的具体施肥种类与施肥量，需根据品种、树龄、树势、产量、土质、气候等情况灵活掌握。大部分叶面肥可与农药结合使用，从而减少劳力、节约开支，但使用时要注意农药及叶面肥使用的注意事项，以免降低药效和肥效。叶面肥最适宜在新梢期和幼果期使用，阴天或下午3时以后喷洒效果更好，具体的叶面肥种类、使用时期与浓度详见本章第四节。水分是柑橘生长发育不可缺少的重要条件。俗话说:收多收少在于肥，有收无收在于水。缺水会使植株萎蔫枯死，而土壤水分过多或湿度过大，则会造成烂根或发病落叶，导致植株衰退甚至死亡。因此，加强水分管理，对柑橘早结、丰产、稳产、优质具有重要的意义。在生产上，如果阴天叶片出现轻微萎蔫症状，或在高温干旱天气条件下卷曲的叶片在傍晚不能及时恢复正常，就要及时淋水，保证树体对水分的需要。柑橘在春梢萌动期及开花期(2—4月)、果实膨大期(5—10月)对土壤含水量十分敏感。当土壤含水量沙土<5%、壤土<15%、黏土<20%时，就要及时淋水。一般砂糖橘、春甜橘裂果期在9月上旬至11月上旬，这个时期如遇到连续干旱，那么每隔15天左右应淋水1次，保持土壤水分均衡，防止因缺水而影响果实膨大，并防止久旱下大雨导致裂果。同时，在秋冬季节利用果园生草，树盘覆盖，保持土壤湿润。一般柑橘在秋、冬季及秋梢老熟后要适当控水:一是防止水分过多，不利于花芽分化；二是抑制抽发晚秋梢和冬梢，使树体更好地积累养分；三是为了提高果实的含糖量，增进果实的风味，同时提高果实耐贮性，在果实采收前1个月内也要适当控制水分，保持土壤适当干旱。果实采收前的10～15天需完全停止灌水，以降低土壤含水量，提高果实品质。长期干旱会使土壤水分大量减少，导致柑橘植株缺水，叶片褪绿、卷缩，果实生长发育停止，严重时引起落叶、落果，枝叶干枯等，甚至出现植株死亡现象。反之，柑橘受涝时间过长或果园低洼长期浸水，植株容易发生根系腐烂、叶片黄化、枯枝等。因此，旱季要注意防旱，雨季注意防涝。主要措施有:第一，建园时搞好果园供水、排水系统，做到能灌能排；第二，改良土壤，每年通过深翻压绿肥，增加土壤肥力，改善土壤团粒结构，提高抗旱性，使土壤水分能排能蓄；第三，在干旱前和大雨过后，及时中耕松土，使空气进入土壤孔隙，可降低土温，减少水分蒸发；第四，在树盘覆盖稻草、杂草或反光薄膜(图4-6)，减少水分蒸发，降低土壤温度；第五，果园生草栽培(图4-7)，除树盘杂草要铲除外，株间、行间非恶性杂草宜保留，或人工种植白花草等。图4-6 树盘覆盖稻草图4-7 果园生草栽培影响柑橘落花落果的原因很多，如长期低温阴雨、缺乏光照、高温、栽培管理不当、树势衰弱、养分供应不足、树势生长过旺、砧木不当、新梢过多与花果争夺养分、病虫害严重等都会导致落花落果。因此，如何把保花保果各项技术措施及时做好非常重要。主要的保花保果技术如下。主要作用是壮蕾、壮花及提高花的质量，提高坐果率，柑橘从花芽分化开始到新梢萌芽至开花结果，树体消耗了大量的营养。特别是采用避雨避寒栽培技术后，砂糖橘、明柳甜橘、W ·默科特、夏橙、春甜橘、金柑留树挂果时间长，更要及时补充足够的养分，才能保证树体正常生长和开花结果。因此，在春梢萌芽前15天左右，沿树冠滴水线附近开环沟施1次花前肥。特别是对衰弱树，要加强肥水管理，增强树势。在现蕾期和谢花后，人工抹芽控梢，把部分营养春梢和谢花后无果的营养枝抹去，可减少落蕾落花。同时，在6月中下旬前，对结果树萌发的早夏梢全部抹除，以减少大量的养分消耗，防止大量落果。在花蕾期、谢花期和幼果期分别进行根外追肥，能及时补充养分，减少落花落果。在花蕾期喷施0.2%～0.3%尿素液+0.2%磷酸二氢钾+0.1%硼砂或速乐硼1000倍液，每隔10～15天1次，连喷2次。谢花后可喷1次0.3%～0.4%复合肥液加含微量元素的叶面肥。也可在花蕾期、生理落果期喷施600倍果叶康3～4次。春季雨水多，开花后花瓣和花丝容易黏附在子房和花托上，造成小果腐烂而落果。因此，可在开花期间每隔5～7天定期摇花，把凋谢的花瓣摇落。人工抹梢成本高，采用药物控梢见效快、效果好。在夏梢期喷杀梢素、控梢素能有效杀死已萌发的夏梢，抑制夏梢生长。但在使用时要严格控制浓度，切忌浓度过高，同时不能与叶面肥、农药混合使用，以免产生药害。在柑橘开花、生理落果期，根据品种的不同，特别是对无核的品种，适当喷施植物生长调节剂，能有效减少落花落果，提高坐果率。出现异常天气时，更要注重生长调节剂的应用。(1)植物生长调节剂的种类。生产上应用较多的主要是赤霉素(920)、芸苔素内酯、细胞分裂素、复硝酚钠(爱多收)、防落素(B9)、2，4-D等。(2)植物生长调节剂的使用。在使用前必须了解植物生长调节剂的有效成分和使用方法，然后根据落花落果和天气等情况使用。如春季低温阴雨，天气异常，为提高花的质量和壮蕾壮花，在现蕾期至谢花期间，宜用芸苔素内酯、细胞分裂素、复硝酚钠等；谢花后至第二次生理落果期落果最为严重，此时应喷施赤霉素、防落素、2,4-D,效果明显，喷时要对果面、果梗、蜜盘均匀喷洒。赤霉素有粉剂和水剂2种，粉剂为无色结晶粉末、不溶于水，要先用少许酒精或高度白酒溶解后使用，水剂则按指定浓度使用即可。(3)植物生长调节剂使用浓度及次数。使用植物生长调节剂要严格控制浓度和次数，不能随意增加或减少，当浓度超过100毫克/升时，易产生药害。生产上有的果农滥用药物，把4、5种植物生长调节剂加入几种叶面肥混合喷施，有的则从现蕾开始至幼果膨大期间，每10～15天喷1次，持续2～3个月喷植物生长调节剂加叶面肥，多达5～6次，这种做法既浪费，又达不到应有的效果。如用赤霉素每克加水10～15升或2,4-D每克加水50～80升，连续使用多次。多种植物生长调节剂加叶面肥混合使用，容易刺激果皮变粗、变厚。正确的使用方法是:赤霉素每克加水30～50升、2,4-D每克加水200～300升，5%芸苔素内酯与细胞分裂素用1000倍液，复硝酚钠用3000倍液，使用2～3次为宜。植物生长调节剂最多同时用2种，不能超出3种，叶面肥加1～2种即可。

苗木是果树生产的基础。苗木的质量直接影响果树的结果时期、果实的品质及产量、果树的适应性及抵抗病虫害的能力，影响经济收益。凡用种子繁殖的苗木都称为实生苗。实生苗繁殖简单、繁殖系数高，多数是用于培育嫁接苗的砧木，是果树嫁接育苗的基础。1.苹果(1)海棠果。抗旱、抗寒、抗涝，耐盐碱，嫁接亲和力强。（2）山丁子。抗寒、抗旱，耐瘠薄，但不耐盐碱，抗旱力不如海棠果。（3）楸子。抗旱、抗寒、抗涝，耐盐碱，对苹果绵蚜和根头癌病有抵抗能力。（4）新疆野苹果。抗旱、抗寒，耐盐碱，生长迅速，树体高大。2.常用矮化砧木（1）红花（沙果）。类型较多，结果早。（2）GM256。矮化中间砧木，抗寒，结果早。（3）M26。从英国引进的矮化砧木，固堤性好，抗白粉病、抗寒、抗旱性差，结果早，果个大。（4）MM106。从英国引进的半矮化砧木，抗根绵蚜、固堤性好，耐瘠薄，抗寒，可以进行硬枝扦插，结果早。3.梨（1）杜梨。平原地区梨的主要砧木，根系发达，耐旱，耐盐碱，嫁接亲和力强，结果早，丰产，寿命长。适应辽宁、内蒙古、河北、山东等地。（2）秋子梨。东北、华北地区的主要砧木，抗寒性极强，抗腐烂病，不抗盐碱，丰产，寿命长。（3）麻梨。西北地区常用砧木，抗寒、抗旱，抗盐碱，生长势强。4.葡萄（1）山葡萄。极具抗寒力，嫁接亲和力好，扦插较难生根。（2）贝达。抗寒，结果早，嫁接亲和力好，扦插易生根。5.桃（1）山桃。适于较干旱的山地，如东北、华北、西北。抗寒、抗旱，抗盐碱，较耐贫瘠，嫁接亲和力强。（2）毛桃。应用广泛的砧木。比较抗旱、耐寒，耐盐碱，嫁接亲和力强，生长快，结果早。（3）毛樱桃。抗寒力强、抗旱，嫁接亲和力较强，有矮化作用，结果早。6.李（1）山桃。耐盐碱、耐瘠薄，抗旱、抗寒，与中国李嫁接亲和力强。（2）毛樱桃。抗寒、抗旱，结果早，有矮化作用。7.杏杏与中国李嫁接容易成活，有的品种不完全亲和，结果早，但抗涝性差。（1）山杏。适应东北、华北、西北地区，主要是抗寒、抗旱，耐瘠薄，嫁接亲和力好。（2）山桃。较抗寒、抗旱，与杏嫁接亲和力好。8.樱桃（1）山樱桃。较抗寒，生长旺盛，嫁接亲和力好。（2）中国樱桃。包括毛樱桃、莱阳矮樱桃和毛把酸3个类型。适应性较广，抗寒，耐旱能力弱，结果早，嫁接亲和力强。9.柿柿的主要砧木为君迁子。适应性强，较抗寒，抗旱，耐盐碱，与柿嫁接亲和力好。1.种子的采集一般在母本园内，也可在野生母林中选择品种纯正、无病虫害、充分成熟、籽粒饱满、无混杂的种子进行采集。采收后要根据果实特点取种，果肉无利用价值的，多采用堆沤取种；果肉有利用价值的，结合加工过程取种。但需要注意的是，堆沤取种的堆温应保持25～30℃，加工过程取种防止高温(45℃以上)、强酸、强碱或机械损伤，破坏种子生命力。2.种子的储藏方法（1）干藏法。分为普通干藏法和密封干藏法两种。生产用种子采用干藏法。普通干藏法是指将经过干燥处理的种子，如苹果、梨、桃、山楂、枣、柿等装入麻袋、布袋等，然后放入通风、干燥、经过消毒的室内储藏。密封干藏法用于保护一些珍贵种子，是指将种子干燥到安全含水量以后，装入容器并放入适量吸湿剂，密封，在低温条件下储藏。容器一般是已消毒的玻璃瓶、铅桶或铁桶等。（2）湿藏法。是指将种子，如板栗、柑橘、樱桃等储藏在室温环境条件下，在储藏期间使种子保持湿润状态。此方法常与层积处理同时进行。1.种子质量检验种子净度是指被检测样品中完整无缺、形状发育正常的种子重量占被测样品总重量的百分比。净度是测定种子播种质量的重要指标之一，是科学确定播种量的主要依据。种子净度越高，说明种子质量越高，其公式为种子总重量包括纯净种子、废种子和其他杂物。2.种子生活力测定（1）染色法。常用染色剂有靛蓝胭脂红、氯化三苯基四氮唑、5%红墨水等。将一定数量的种子浸入清水中12～24h,种皮变柔软后，剥去种皮，置于靛蓝染色剂或红墨水中1～2h，最后用清水漂洗。子叶和种胚不着色者或稍有浅斑者为好种子，着色者则为失去生活力的种子。若用氯化三苯基四氮唑染色，结果则正好相反。（2）发芽法。将一定数量的种子置于衬有滤纸、湿纱布或清洁河沙的容器中，于20～25℃下催芽3～5d。依据发芽的数量鉴别种子的质量。层积处理是解除种子休眠的一种方法，即将种子埋在湿沙中，温度为1～10℃，经过1～3个月的低温处理就能有效地解除种子休眠。种子层积、主要果树砧木种子层积日数及播种量分别见图2-1和表2-1。图2-1 种子层积处理过程名称采收时间层积天数（天）每千克粒数（万粒）播种量（kg/hm2）山丁子9—10月30～9015.00～22.0015.0～22.5海棠果9—10月40～554.00～6.0015.0～22.5楸子9—10月40～604.00～6.0015.0～22.5沙果7—8月60～804.4815.0～34.0杜梨9—10月60～802.80～7.0015～37.5山桃、毛桃7—8月80～100（0.04～0.06）/（0.02～0.04）450～750杏6—7月90～1000.03～0.04400～600枣9月60～1000.2～0.26112.5～150山楂8—11月200～3001.3～1.8112.5～225山葡萄8月90～1102.6～3.022.5～37.5板栗9—10月100～1600.01～0.031500～2625表2-1 主要果树砧木种子层积日数及播种量一般要进行土地平整，捡除植物残体，作畦，施肥。土壤要求富含熟化的有机质，禁用盐碱土和生土。每亩(1亩≈667m2，15亩=1公顷，全书同)施用腐熟有机肥4500kg左右，然后进行翻耕、浇水。还要进行土壤消毒，主要目的是消灭土壤中残存的病菌，常用的药剂有硫酸亚铁(黑矾)、五氯硝基苯混合剂。土壤灭虫的常用药剂有西维因和辛硫磷。根据种子特性和当地的土壤、气候条件决定采用春播还是秋播。我国北部地区多为春播，春播时期一般为3月中旬至4月中旬。秋播时期一般为10月下旬至11月中旬，在土壤结冻前完成。播种方法有撒播、条播和点播三种。山桃、桃等大颗粒种子一般采用点播。如播种后覆盖地膜苗木生长健壮、整齐，田间管理方便。山丁子、海棠、杜梨等小颗粒种子一般用条播。为了确保出苗，播种后应覆盖地膜，出苗后进行间苗移栽，保障行内苗木的株距一致。这种播种方式的用种量较大。将植株的一段枝或芽接到另一植株的枝干或根上，使之愈合形成一个新植株的过程称为嫁接，这样得到的苗木称为嫁接苗。嫁接原理是嫁接后砧穗紧密结合，形成层部分形成愈伤组织，使二者生长在一起成为一个有机统一体。嫁接亲和力，嫁接技术，温湿度、光照、空气等环境条件，嫁接时间，嫁接方法及砧木和接穗的质量都直接影响嫁接苗的成活。春、夏、秋季均可进行室外嫁接，冬季一般在室内嫁接。落叶果树的枝接一般以春季(3—4月)嫁接为主，芽接主要在夏季(5—6月)、秋季(8—9月)进行。生产上用的嫁接方法主要为芽接和枝接。芽接是用一个芽片做接穗的嫁接方法，枝接是将带有一个或数个芽的枝条做接穗的嫁接方法。芽接适于在生长季节进行，具有操作简单、速度快、容易愈合、成活率高的特点。这里介绍两种常用芽接方法，即“T”字芽接和嵌芽接。1.“T”字芽接“T”字芽接(图2-2)是果树孕育苗中应用最多的一种方法，要求砧木和接穗皮层均易剥离，只能在离皮期进行。图2-2　“T”字芽接先削接芽，在芽的上方0.5cm处横向环切，深达木质部，然后从芽的下方1.5cm处向上斜削一刀，与芽上横刀口相交，掰下芽片(不带木质)。然后，在砧木距地5cm处选取光滑部位，切一个“T”字形口，插入接芽，用塑料条绑紧。此方法适用于苹果、梨、桃、山楂等树种。2.嵌芽接嵌芽接(图2-3)是果树育苗中普遍采用的方法，特别是对皮层较薄的树种较为适用。先在接穗芽的下方，距芽0.5cm左右向下斜削一刀，深达接穗直径的1/3左右，再从芽上1.5cm左右向下斜削一刀，与芽下切口相接，取下一盾形带木质芽片。在砧木上选择一个光滑位置，削一个与接芽同样形状、稍长于或等于芽片的切口。此方法适用于柿、樱桃、板栗、李、杏等树种。图2-3 嵌芽接除上述两种常用芽接方法以外，还有套管芽接和方块形芽接等方法。枝接可分为硬枝嫁接和绿枝嫁接。硬枝嫁接多在春季旺盛生长前进行，绿枝嫁接在生长季进行。下面介绍枝接常用的三种方法，即劈接、切接和腹接。1.劈接劈接(图2-4)适用于砧木较粗或与接穗等粗的枝接。先将接穗削成楔形，两个削面长度为3cm左右，保留一两个好芽，砧木在距地面5～8cm处剪断。削面一定要平直、光滑，横断面要平滑。图2-4 劈接2.切接切接(图2-5)适用于砧木较粗的嫁接，与劈接相似。图2-5 切接3.腹接腹接(图2-6)一般用于春季苗圃补接。图2-6 腹芽接嫁接方法是先把穗削成楔形，切口一面较长，长约3.5cm,嫁接时靠里侧。另一面切口较短，长约3cm,嫁接时靠外侧。插入接穗，将砧木和接穗的形成层对齐，且将接穗大削面上部稍微露出砧木横切口。将果树部分营养器官插入土壤(基质)中，使其生根、萌芽、抽枝，成为新的植株的方法称为扦插。用这种方法繁殖的苗木叫扦插苗。扦插可在露地进行，也可在保护地进行。扦插根据材料不同可分为枝插和根插。枝插根据生长季节分为硬枝扦插和嫩枝扦插，见图2-7。图2-7 枝插硬枝扦插是指用充分木质化的一年生枝条作插条的扦插方法。生产中常用此方法的季节以春季为主，以葡萄应用最为广泛。（1）在晚秋或初冬结合冬剪进行插条的采集。（2）插条要求芽饱满、无病虫害。（3）插条采回后剪成50cm左右的枝段，每50～100枝为一捆，标明品种，进行沟藏或窖藏，见图2-8。（4）第二年春插时将插条剪成15cm左右的枝段（含2～3个饱满芽）。（5）当土温稳定在10℃以上时即可扦插。图2-8 插条储藏嫩枝扦插又名绿枝扦插，是指利用带叶的当年生半木质化的新梢在生长期进行扦插的方法。（1）嫩枝扦插主要在生长季进行，过晚影响新梢成熟。（2）扦插成活与空气和土壤湿度有关，把采后的插条剪成15cm左右的枝段，保留新梢上部1～2片叶。根插是指用根段进行扦插的方法。根段以0.3～1.5cm为宜，剪成5～10cm,上口平剪，下口斜剪。可冬藏春插，也可春季随剪随插。压条繁殖是指在枝蔓不与母株分离的情况下，将枝蔓压入土中，使其压入部分生根，再与母株分离形成独立植株。常用的压条方法有水平压条、直立压条、空中压条、曲枝压条。1.水平压条水平压条(图2-9)又称连续压条，是指将要繁殖的枝条截去过长部分，春季时在树旁挖掘约5cm浅沟，将枝条水平压入浅沟内，用枝杈固定，使其生根和发梢，随着新梢的伸长加深覆土，及时抹去枝条基部强旺萌蘖，秋后剪离分植。葡萄、苹果矮化砧、紫藤、蔓越橘、蔓性蔷薇等常用此法繁殖。图2-9 水平压条2.直立压条直立压条(图2-10)是指早春萌芽前，对母株进行平茬或截干，促其萌发多个新梢，待新梢长到30cm以上时，进行一次培土，随着新梢的增高再进行第二次培土。两次总高度为30cm。一段时间后新梢基部产生不定根。由此可以采用新梢基部环剥或者环割方法，促其生根，于休眠期切离母体。图2-10 直立压条3.空中压条空中压条(图2-11)是指选择健壮的1～3年生枝条，在其基部5～6cm处纵刻伤或环剥，伤口处涂抹生根调节剂或生根粉，再用塑料薄膜卷成筒状或者用竹筒套在刻伤部位，将塑料袋的下端绑紧，把疏松、肥沃的土壤或者苔藓蛭石等保鲜材料装入袋中，适量浇水，将上端绑紧。以后进行检查、浇水，一般2～3个月即可长出大量新根。图2-11 空中压条4.曲枝压条曲枝压条(图2-12)又称低压法。凡枝条柔软的花木，如葡萄、无花果、山莓、夹竹桃、桂花、迎春、茉莉等可采用曲枝压条。它是指将植株基部的枝条弯成弧形，将圆弧部分埋入土中，再将土压实或埋土上压一块砖头或石块，以免枝条生根前弹出土外。埋入土中的部分也要刻伤或作环状剥皮，充分生根后剪离母株。图2-12 曲枝压条分株繁殖是指利用植株的营养器官进行分离或分割成若干个独立生存植株的方法。常用分株方法有根蘖分株、匍匐茎分株、根状茎分株。1.根蘖分株根蘖分株是指利用树种易发生根蘖的特性，于成龄果园，春季或秋季在树冠外围挖沟断根，将树体部分1～2cm的根水平切断后填回土壤，切离母体的水平根即可萌生新梢。秋后将新的根蘖苗刨出，进行集中培养，即可培育出合格的果苗或砧木苗。北方果树中的枣、山楂、山丁子、海棠、杜梨等易发生根蘖。2.匍匐茎分株匍匍茎分株是指当前草莓生产中的主要方法之一，可建立专一的良种繁育苗圃。苗种栽植按株距15～20cm、行距30～60cm定植。疏掉母株所有花序，促进匍匐茎生成。苗圃地要及时松土、浇水，匍匐茎生根之后及时压土。一般母株年龄不宜超过3年，3年后进行更新，另换地重建母本园。3.根状茎分株草莓浆果采收后，当地上部有新叶抽出、地下部分有新根生长时，整株挖出，将1～2年生的根状茎分枝逐个分离成为单株，即可定植。组织培养是指通过无菌操作，将植物体的器官、组织或细胞接种于人工配制的培养基上，在一定的温度和光照条件下，使之生长发育为完整植株的方法。组织培养的材料包括器官、愈伤组织、细胞、原生质体或胚胎。果树上主要利用组织培养繁殖无病毒苗。确切地说，“无病毒”只防治了一些对果树生长结果为害较大的主要病毒病，并非绝对的无病毒，习惯上称这样的苗木为无病毒苗。对苗木生产基地进行功能分区，其目的在于合理利用圃地面积，便于生产管理和作业实施，提高生产效益。首先要进行实地测量，将生产用地和辅助用地按一定比例描绘在图纸上，要标明各育苗区的所用设施的平面轮廓。同时要注明生产用地中各种植区的面积、培育的果树苗木种类及数量等，同时要考虑苗木的移栽、检验、假植、包装、贮藏和运输等相关环节的安排。首先要做好调研工作，准确把握苗木生产基地自身的栽培技术水平、种源、设备、人力、物力、财力、自身的产品质量、在市场中的地位等背景资料；要依据当地的土壤状况、气候变化规律和农业经济发展水平等条件，因地制宜地发展适销对路的果树苗木，并确定适宜的生产方式。其次要根据资金周转、土地状况及当地果树发展需求、种类、数量等进行统筹规划，合理安排。1.制订合理的生产计划包括生产进度安排、时间安排以及一系列技术规范与要求等，并要考虑主要的生产程序和生产过程中可能存在的不利因素等。2.生产计划的执行和实施生产计划制订后，关键是执行和组织实施。要把计划和任务层层落实，同时要求苗木生产基地各基层单位要做好各个环节的作业计划，并要掌握计划执行的进度，确保苗木生产各个环节的顺利进行，按时、按质、按量完成苗木生产任务，提高苗圃的生产经营水平和经济效益。3.做好生产记录苗木生产过程中应有专人负责作生产记录，要及时准确记录各个环节和主要生产过程，有助于积累经验，为下周期生产奠定良好基础。记录主要包括如下内容。(1)栽培过程记录。包括各项操作过程记录和环境因素记录。①操作过程记录。主要记录如种子处理、播种、间苗、移栽、嫁接、接后管理等各个环节的具体时间、操作要点、生产效果、劳动力预算等。②环境因素记录。包括生产地点的温度、光照、水分、土壤、基质、病虫害发生等情况，特别是保护地设施育苗中环境因素如何调节等。(2)产品成长记录。主要记录果树苗木的生长表现和物候特征，如苗高、胸径、萌芽、抽枝等生长状况记录。至少每周或半月评估一次苗木生长发育情况，并做好详细记录。(3)产出和投入记录。指投入和产出(收入)的记录。通过产投记录分析，可发现、评估并纠正生产中的失误，并可严格实施苗圃经营的程序。营销策划是指巧妙的设计和策略。其基本思路是将企业现有的经营要素按新的思路重新组合，实现新的经营目标的营销活动。营销策划的构成要素主要有如下内容。1.明确目标企业或苗木生产单位要设定战略性、明确性或方向性目标。2.丰富信息要有丰富的信息资源，可通过网络、广告、展会等形式，收集和积累相关的信息资料。尽量做到别人不知我们知、别人无法利用我们可利用、别人没有意识到我们却有超前意识。3.创意和理念创意和理念是营销策划的灵魂，创意的水平决定着企业策划的质量和营销的前景。要始终体现发展企业的思想和核心理念。4.控制意识在落实企业的创意和理念过程中，要客观分析企业当前所面临的困难和条件，控制好苗木从生产到销售的各个环节，保证企业的创意和效益能如期实现。销售渠道是指果树苗木产品从生产到消费者手中所经过的渠道。1.直接销售直接销售是从苗圃将自己生产的果树苗木直接出售给生产用户，其间不经过任何中间商，实行产销合一的经营方式。2.间接销售是在销售渠道中有中间商参与，商品所有权至少要转移两次或两次以上。其优点是有利于开拓市场，且苗木生产基地不从事产品经销，能集中人力、物力和财力组织好产品生产。其缺点是销售渠道较长，商品流转时间长，对果树苗木来说，势必要增加流通费用，提高苗木价格，易造成产销脱节。促销是指苗木生产基地通过各种手段或方法，向消费者宣传本单位果树苗木产品的种类、品种、价格、服务等，有助于树立良好的企业形象和文化，促使消费者产生购买的动机和行为。苗木促销的方法主要有：参加各地举办的苗木展览会、苗木信息研讨会等；利用网络或电话等做好广告宣传；优化售前、售中和售后服务。苗木产品的定价，有其科学性和艺术性。合理的定价方法和合适的价格是苗木生产单位在激烈的市场竞争中立于不败之地的关键之一。通常苗木的价格是根据其生产成本和预先设定的目标利润及税率等因素决定的，计算公式为：果树苗木的销售价格一般采用市场价，买卖双方可以自由协商制定，同时还受到市场供需情况、买卖双方的心理、苗木质量、购买能力等因素的影响，所以苗木生产或经营单位在市场营销活动中，可灵活运用价格策略，合理制定自身产品的价格，以取得较大的经济利益。技术管理是指对苗木生产、包装、贮存等各项技术的科学组织与管理。加强技术管理有利于建立良好的生产秩序，提高本单位或行业的技术水平，扩大苗木种类和品种，提高苗木产量和品质，节约能耗，降低产品成本等。1.建立健全技术管理体系技术管理体系包括技术规范和技术规程，这是进行技术管理、安全管理和质量管理的依据和基础，是标准化生产的重要内容。(1)技术规范。是对各类苗木的质量、规格及其检验方法等作出的技术规定，是企业单位和个人在生产经营活动中行动统一的技术准则，可分为国家标准、地区标准、部门标准及企业标准。(2)制定技术规程的目的。技术规程是为了保证达到技术规范，对生产过程、操作方法以及工具设备的使用、维修、技术安全等方面所做的技术规定，苗圃可以根据自身的具体条件，自行制定和执行。2.注意事项制定技术规范和技术规程应注意以下三方面。(1)要以国家对果树苗木生产的规定和政策、技术标准为依据，同时要因地制宜地结合当地特点和地区操作方法、操作习惯等。(2)要对国内外先进技术的成就和经验结合自身和现有条件加以合理利用，防止盲目拔高或降低标准。(3)要广泛征求多方意见，并结合生产实践多次试行、总结修改后方可批准执行。在执行过程中应随着技术经济的发展及时进行修订，使之不断完善，确保技术规范、规程既严格又可操作性强。生产实践中果树苗木行业的质量管理主要有以下方面。(1)要依据国家标准和行业标准执行果树苗木产品质量检验，进行质量调查分析评价，建立质量保证体系。其次要建立并执行各项质量管理制度。企业或生产单位要实行质量责任制，要设专人负责质量管理工作。(2)要进行全面质量教育，帮助企业领导、技术人员和员工树立质量意识，要开展技术培训、技术考核、技术竞赛等各种有利于提高企业效益和长久发展的活动，鼓励职工钻研技术，提高技术水平。(3)要实行综合质量管理，把好各个生产阶段和每一个环节的技术质量关。做好质量信息反馈工作，积极听取消费者意见，及时反馈市场信息，改进和完善企业质量管理制度。1.科技情报工作的主要内容及时搜集、整理、检索、储存国内外本行业或相关行业的科技资料、信息，为生产、科研、技术改革提供有价值的资料及信息。2.果树苗圃技术档案工作是对苗圃生产和经营活动真实记录的整理与保管。目的是通过不断地记录、整理分析苗圃的使用、苗木生长发育、育苗技术措施的实施情况和人力、物力、财力的投入及综合效果等，掌握苗木生产规律，总结苗木生产技术经验，不断探索苗圃经营管理的合理可行的科学方法，不断提高苗圃的生产经营和管理水平。

何淑青（太原市植保植检站 山西太原 030027）摘要：“太原市农作物病虫发生防治预报”节目2007年7月至今在太原市电视台“新闻频道”固定栏目、固定时间、固定模式、固定结构、图文并茂、多次播放。三年来，此项工作受到有关领导重视和有关部门配合，成为太原植保精品栏目，产生可佳效果。关键词：农作物病虫；电视预报；太原农作物病虫电视预报是指应用电视技术、计算机技术等现代信息技术，将农作物病虫发生趋势预报、防治技术等信息制作成电视节目，以电视媒体向社会发布，简称为病虫电视预报。具有图文并茂、声像俱备、形象生动、直观性好、时效性强、信息量大、农民乐意接受，收视率高的明显优势。电视预报已成为病虫预报信息大量向社会发布的一种主要形式。2007年7月23日至今，太原市农作物病虫电视预报除法定节假日和休息日外，每日固定栏目、固定时间在太原市电视台新闻频道播出，产生了巨大效果，深受农民朋友欢迎。3年来，笔者一直从事农作物病虫电视预报节目，经历了其中的起起落落，积累了宝贵的经验教训，收获了成功的喜悦与希望，得到了有益的启发和思考。1 节目形式与内容节目形式与内容大致概括为7点：一是栏目固定。栏目固定在太原电视台新闻频道（太视一台），栏目名称是“太原市农作物病虫发生防治预报”。二是时间固定。节目固定在太原市电视台新闻频道新闻联播之后的黄金时段播出，时间固定为首播在当日太原新闻之后，重播在当日新闻重播和次日中午新闻重播之后，每次播出时间30秒。三是模式固定。为解决电视预报每天播放，需要大量的预报内容；每次播放时间短，难以说清所报内容；病虫发生季节性强，预报内容多少不均等问题，本站将电视预报模式固定为病虫发生趋势预报、病虫绿色防治技术和植保知识宣传三种。在病虫发生旺季播放发生趋势和防治预报，淡季宣传有关政策、法规、病虫绿色防治技术和植保小知识等内容，且穿插播放。四是结构固定。本站逐步探索确立电视预报的合理结构，即由“植保口号”、“片头”、“预报内容”、“防治建议”和“片尾”五部分组成。其中“植保口号”是“推广绿色植保技术，保护农业生产安全”和“严禁使用高毒农药，保护农民经济利益”，两条口号轮换闪动，涵盖了植保工作的目标与方向；“片头”代表整个病虫预报的形象，定为“太原市农作物病虫发生防治预报”；“预报内容”是预报的主体部分，反映病害发生症状、虫害形态特征、病虫发生时期、发生区域、发生程度、发生面积、防治时期等内容；“防治建议”是技术性强的、操作容易的、效果显著的病虫绿色防治技术；“片尾”固定，是发布、制作单位名称和播放时间。五是图文并茂。为保证播出效果，采取电视画面、字幕与配音相结合的方式，将农作物病虫特征、为害症状、发生趋势和防治技术等形象生动地展现在观众眼前，便于理解、记忆、掌握、运用。节目要求图片清晰，语言精炼，达到图文并茂，声像俱备，形象生动之效。六是多次播放。节目每天播放3次，并且同一节目根据需要重复播放。一般播放3～5天。为防止节目重复、单调，本站基本上每一阶段制作2～5期轮番播放。七是内容丰富。借鉴天气预报、空气质量预报的信息发布形式和成功经验，每期病虫电视预报的制作与播放，都针对太原市当前农业生产和病虫发生实际，紧密结合当时气象条件，使农民朋友能够及时收看，及时应用。一般每年要成功播放200余天、40余期、600余次，内容涵盖全年当年农作物主要病虫发生趋势和绿色防治技术，对领导指挥生产和农民有效防治起到参谋和指导作用。2 主要做法与措施2.1 领导重视，部门配合，保障电视预报工作顺利开展太原市的农作物病虫电视预报工作起步于2002年，几年来，本站做了大量的工作，取得了一定的成效，积累了一定的经验，同时也深感工作的难度。电视预报是病虫预报的一种发布形式，因其社会公益性及合作部门的特殊性，必须有政府领导全方位的支持，电视台的通力合作。2007年，为取得领导支持，为使节目从不固定走向固定，从不定时走向定时，从内容单一走向内容丰富，从一次播放走向重复播放的深刻转变，太原市农业局多次向市有关领导宣传汇报，将电视预报的公益性、社会意义进行了广泛宣传，使领导有比较全面的理解，并给予大力支持。2007年6月25日市农业局向太原市政府做了《关于播放农作物病虫害发生趋势可视预报的请示》，得到市政府的重视和支持，当时分管农业副市长很快在报告上签了字，表示“这是服务“三农”的重要举措，请市电视台给予支持”。电视台是电视预报环节中至关重要的环节，市电视台有关领导迅速安排节目播放时间和播出要求。市财政每年拨出一定专款用于电视预报制作播放工作。由于病虫发生与气象条件有着密切的关系，太原市气象局给予了大力帮助，及时提供气象服务，由于本站人力、物力、技术有限，没有条件独立制作节目，市气象局有制作发布天气预报的成功经验，至今病虫电视预报节目全部由市气象局气象科技服务中心制作，并且合作良好，有力地推动了电视预报工作的顺利开展。2.2 精心组织，各负其责，保证电视节目制作有序开展为了尽快开展此项工作，本站成立了以分管领导为组长、植保站站长为副组长、分管副站长为技术组长、病虫测报人员和市气象局气象科技服务中心人员为小组成员的“太原市农作物病虫电视预报系统领导组”。组长负责宣传领导及与电视台等有关部门协调，副组长负责总体策划，审定和制作方案，技术组长负责电视预报稿件的编写，微机操作员、播音员按方案要求制作节目。大家既有分工，又有合作，密切配合，工作有序开展。为制作高水平的病虫预报节目，在制作之前，本站要充分准备，对整个预报过程进行通盘设计需要哪些素材，每一个镜头大约多长时间，解说词的撰写，各种病虫形态、农作物长势、作物受害及发病症状、防治病虫图片与电视动画等。2.3 认真开展病虫监测，为病虫电视预报的开展奠定基础病虫电视预报是病虫预报的一种表达形式，其准确率、时效性、科学性和可视性取决于病虫监测资料的准确性和所提供的防治技术的科学性。因其大量工作在电视预报制作的前期，为此，本站狠抓了四个方面工作：一是加强测报队伍建设。病虫测报人员如同农业战线上侦察兵，不论严寒酷暑，风里来，雨里去，长年奋战在农业第一线。但多年来，由于测报工作压力大、条件差、环境苦、待遇低，致使太原市许多经验丰富的测报人员流失，某些地方网破、人散、线断。为解决这一问题，本站重新组建了全市病虫测报网络，加强测报队伍的建设，聘请一批乡级农技员充实到测报队伍中来，加大了测报工作力度，保证了测报工作的顺利开展，为病虫预报的准确发布奠定良好基础。二是认真做好田间调查。为确保预报的准确性，提高时效性，必须认真开展田间调查，及时掌握病虫发生规律，准确分析病虫发生趋势。几年来，本站按照测报工作规定，坚持逐月逐旬逐日的病虫观测记载制度，在取得系统测报对象和监测对象在太原地区发生消长的原始数据基础上，结合气象条件、生态条件和历史资料等因素综合分析，预测病虫在太原市的发生程度、发生时间、发生面积、发生范围等内容，同时制定病虫防治技术，及时、准确地编发《植物病虫情报》。三是及时采集病虫素材。制作农作物病虫电视预报节目，需要积累大量的农作物生长发育状况，病害的病症病状、侵染循环过程，虫害的各种形态特征、生活习性，作物受病虫为害的表现症状，防治技术，电影动画等视频素材，建立一个完整的视频素材数据库。在病虫发生期，本站及时组织植保技术人员深入田间采集病虫形态、为害症状等视频素材。为提高电视预报的准确性、可视性积累资料，力争电视预报节目生动活泼，丰富多彩。四是组装绿色防治技术。为提高电视预报的科学性，本站进行了大量的防治技术试验示范，提出了太原市粮食、蔬菜作物主要病虫防治例，并针对每种病虫制定一套切实可行的绿色防治技术，明确提出在太原市的应用技术要点，使农民朋友易懂、易学、易会、易用。3 产生效能与成效太原市农作物病虫电视预报固定栏目、固定时间播放，大大提高了信息传递速度，扩大了信息的覆盖面，增强了直观指导效果，取得了一定的成效，深受广大农民欢迎。3.1 加快信息传递速度，扩大信息覆盖面积目前太原市农村电视普及率在90%以上，具有广泛的收视群体，病虫预报一经电视播出，即可传遍全市，群众在家中通过电视屏幕就可把病虫形态特征、发生症状、发生规律、防治关键技术等知识学到手，起到同步学习之目的，大大提高了植保信息覆盖面积，充分发挥了信息的时效性及利用价值。有力地推动了植保技术的推广和应用。3.2 增加直观指导效果，提高信息利用效率自病虫电视预报固定栏目、固定时间开播后，本站进行了大量宣传，收看电视预报已成为有关领导、有关部门和许多农民的自觉行动。针对某些农民对病虫为害症状、发生特点和防治技术知识相对缺乏，特别是一些暴发性、突发性和外来有害生物了解较少，要准确把握防治适期和关键技术具有难度现状，电视预报贴近实际，图文并茂地将病虫为害症状、发生特点和防治技术传授给农民，农民通过收看，及时了解到田间病虫发生情况和科学的防治方法，改变了以往防治上的盲目性。3.3 宣传绿色防治技术，普及绿色植保知识多年来，太原市部分群众在病虫防治中，存在着综合防治意识淡薄，农药使用品种不对路、用药次数多、用药量偏大等问题，致使病虫抗药性增强，防治效果不理想。本站将电视预报作为宣传病虫绿色防治技术，普及绿色植保知识的窗口，着重宣传农业防治、物理防治、生物防治技术和高效、低毒、低残留农药的科学使用技术，针对每一种病虫，推荐一套简明扼要的综合防治技术，使群众好学好用，一定程度上达到了减少用药次数，降低虫口密度，延缓害虫抗药性，提高农产品产量和质量，保护生态环境目的。3.4 确立公共植保地位，树立植保部门形象植物保护工作是一项服务于农业、服务于农民的公益性事业，是典型的“保驾护航”行为，是实现农业绿色转型的技术性支撑体系。通过电视预报，宣传了植保公益性的作用，普及了农作物病虫绿色控制技术，提高了植保工作在农业生产中的重要性，树立了植保部门在病虫防治工作中的权威性，提高了太原市植保植检站的影响力，确立了公共植保地位，树立了植保人形象，使各级领导和有关部门对植保工作更加重视，将植保工作排在了农业生产中重要位置，促进太原植保事业蓬勃发展。4 存在问题与建议几年来，太原市电视预报工作在各级领导高度重视和有关部门的大力配合下，取得了可喜成绩，也存在着经费有限、仪器短缺、人才匮乏、素材不足和县级工作开展不平衡等难题，制约着这一工作的可持续开展。呼吁国家对电视预报的社会职能定位，给予政策支持和资金保障，以保证人员稳定、知识培训、设备购置、节目播出所需的各项开支。

导致棉花枯萎病的病原菌为尖孢镰刀菌萎蔫专化型 [Fusarium oxysporumSchlectend：Fr.f.sp.vasinfectum（Atk.）W.C.Snyder&.H.N.Hans.]。在相当长的一段时期内，镰刀菌的分类是很混乱的，各研究者曾把该属划分为1000种以上的种、变种和型（俞大绂，1977；张素轩，1991；Bilai等，1955；Tousson等，1975）。1935年Wollenweber等把镰刀菌归纳为16组、143种、变种和型，奠定了镰刀菌分类的基础。在其以后，Suyder等（1968）、Joffe（1974）、Gordon（1952）、Bilai（1955）等对镰刀菌分类都进行了大量的研究，并提出各自的分类概念和系统（Amstrong等，1977；Nelson等，1983）。但所有这些都是以Wollenweber Reinking的专著《镰刀菌属》（Die Fusarien，1935）为基础的。Booth（1971）根据Gordon的分类体系，以大形分生孢子形态作为鉴别镰刀菌种的主要特征，重视标准培养条件、分生孢子梗形状和分生孢子的产生方式，把分生孢子形态、大小、菌落颜色、产孢细胞和厚垣孢子有无及着生位置、生长速度以及基质特性等作为区分组、种、变种的重要依据。中国一些研究者在分离棉花枯萎镰刀菌研究中，注意到有不同类型大分生孢子，除典型的Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum（尖孢镰刀菌萎蔫专化型）外，还分离到在孢子形态、菌落色泽、培养性状和致病性方面不同于前者的菌株，对此提出质疑，认为我国棉花枯萎镰刀菌可能还有F.redolens Wr.（芬芳镰刀菌）或者F.oxysporum var.redolens（Wr.）Gordon（尖孢镰刀菌芬芳变种）。澄清我国棉花枯萎镰刀菌的种、型，查明其在分类上的归属是一项十分必要的基础工作，对指导棉花抗病育种与品种合理布局具有重要意义。为此，陈其英和孙文姬（1992）从全国15个植棉省、自治区采集棉花枯萎病株，经分离纯化，获得273个单孢菌株，并对其中13个单孢菌株进行系统研究，断定我国棉花枯萎镰刀菌是尖孢镰刀萎蔫专化型。隶属的分类体系是：半知菌亚门（Deuteromycotina）、丝孢目（Moniliales）、瘤座孢科（Tuberculariaceae），镰孢属（Fusarium Lind），美丽组（Eleganswu.），尖孢种（Oxyporumschl.）。棉花枯萎病菌为尖孢镰刀菌萎蔫专化型，其培养性状，在PDA（马铃薯葡萄糖琼脂）培养基上，菌丝为白色，若培养时间稍长培养基经常出现紫色，菌丝体透明，有分离。具有3种类型孢子，分别为大型分生孢子、小孢子和厚垣孢子（图2-1）。镜检时，重点检查有无镰刀状大型分生孢子和厚膜孢子。大型分生孢子呈镰刀形，略弯曲，两头稍尖，足孢明显，无色，大多具3个分隔，少数为2个，偶见有4～5个分隔，大小为（22～23）μm×（3～5）μm（以3个隔膜的大型分生孢子长度和宽度作标准）。小分生孢子呈卵圆形或纺锤形，无色透明，大多数为单胞，少数有一个分隔，大小为（5～6）μm×（2～3.5）μm。厚膜孢子近圆形，顶生或间生1～3个，但也有数个相连的，卵黄色，直径5～15μm，厚膜孢子是抵抗不良环境的繁殖体。图2-1 棉花枯萎病菌自Alkinson 1892年首先提出引起棉花枯萎病菌是侵染导管萎蔫镰刀菌（Fusarium vasinfectumAtk）后，认为棉花枯萎病菌的寄生性很强，寄主范围很窄。但Butler（1926）、Kulharm（1934）、Armstrong（1940）、Armstrong和Bennoett（1942）、Ebbeds等（1975），前后报道枯萎病菌的寄主多达40余种，计有大豆、烟草、花椰菜、卷心菜、辣椒、牛角椒、木豆、决明、咖啡、印度麻、黄瓜、龙爪稷、三叶胶、秋葵、番茄、苜蓿、类香蒲、狼尾草、绿豆、豌豆、豇豆、蓖麻、茄子、高粱、肿柄菊、大麦、铁荸荠、小花锦葵、大花苘麻、几内亚茴麻、毛里塔尼亚苘麻、束黄麻、酸木槿、柠檬黄木槿、洋麻、裂叶木槿、类酸浆木槿、葡萄叶木槿、尖刺黄花稔和印度蛇婆子等。许如琛等（1964）用人工接菌盆栽试验，甘薯、玉米、薄荷、黄麻、烟草、荞麦、小麦、大麦、黑麦、燕麦、大豆、豌豆、蚕豆、四季豆、胡萝卜、黄瓜、萝卜、莴苣、油菜、菠菜、青菜和婆婆纳等共47种植物因均不发病，故没有作为枯萎病菌的寄主植物。顾本康等（1979）将生长在枯萎病菌人工接菌土内的供测作物植株、采用组织捣碎稀释分离的方法，能够分离出枯萎病病原菌，将它回接到棉花上能够表现枯萎症状，再从菌落形态及孢子大小，都证明是棉花枯萎病病原菌，因此认为，玉米、牛角椒、大麦、元麦、小麦、番茄、乌豇豆、茄子、大豆、柽麻、芝麻、花生、山芋、赤豆和扁豆等作物虽然没有明显症状，而确是棉花枯萎病菌的带菌植物。棉花枯萎病菌在很多植物上只能停留于植物的根表皮，但不能深入导管系统，所以，往往出现隐症状态。因此认为，除已被证明的许多作物或杂草是棉花枯萎病菌的寄主植物外，实际上还有更多植物是棉花枯萎病菌的不表现症状的带菌体；这就是在枯萎病区推行与旱作物轮作对防治枯萎病无效的道理。李君彦等（1990）对小麦、大麦、玉米、高粱、甘薯、大豆、豌豆、红麻、向日葵、烟草、番茄、茄子、辣椒、黄瓜和笋瓜15种植物作棉花枯萎病致病或带菌的研究，其结果表明，15种作物都可带菌，只是带菌的部位有差异，将病菌在棉花上回接，只有小麦、玉米、高粱和向日葵回接不成功。植物病原菌在不同环境、营养条件和寄主植物影响等外界因素作用下，再加上自身的遗传变异，致病力不断地变化。但在长期演变过程中逐渐形成了一些比较稳定的类型，这就是在种和变种以下所区分的转化型、生理型或小种。专化型是一个群体，据不同鉴别寄主的致病反应，可以进一步化分为若干生理小种。鉴定棉花枯萎病生理小种，以及生理小种在不同地区的分布，对培育棉花抗病品种，以及优良品种在不同种植区的分布有指导意义。棉花枯萎病菌具有较强的专化性，不同地区的枯萎病菌尽管形态相似，但致病力不一定相同。Elbeles（1975）根据枯萎病菌对陆地棉、海岛棉、亚洲棉及某些作物的侵染能力的差异，划分为5个生理小种：小种1号和2号，来源于美国，严重感染陆地棉，轻度感染海岛棉，不感染亚洲棉，但小种2号尚能感染烟草及Yel-redo大豆；小种3号为来自埃及的枯萎病菌，感染海岛棉和亚洲棉，不感染陆地棉；小种4号为印度的枯萎病菌，只感染亚洲棉，不感染海岛棉和陆地棉；小种5号为苏丹的枯萎病菌，感染亚洲棉，不感染海岛棉及陆地棉。Armstrong等（1978）描述并提出了巴西的棉花枯萎病菌小种6号。至此，全世界报道的棉花枯萎病生理小种共6个。1972～1973年全国棉花枯萎病、黄萎病综合防治研究协作组收集了我国主要枯萎病区（冀、豫、晋、陕、鲁、皖、苏、浙、鄂、川等省的县）有代表性的菌株76个，在海岛棉、陆地棉和中棉3个棉种的9个鉴别寄主棉花品种上测定其致病力。结果菌株被划分为3个致病型（表2-1）：Ⅰ型侵染海岛棉、陆地棉和中棉，包括南方棉区的22个菌株，北方棉区的26个菌株；Ⅱ型侵染海岛棉和陆地棉，但不侵染中棉，包括南方棉区的17个菌株和北方棉区的16个菌株，为害陆地棉严重；Ⅲ型只侵染海岛棉，不侵染陆地棉和中棉。鉴别品种致病型Ⅰ致病型Ⅱ致病型Ⅲ海岛棉SSS陆地棉SSR中棉SRR表2-1 全国各地棉花枯萎病菌在鉴别寄主上的接菌反应陈其煐等（1985）于1982年用国际通用的一套鉴别寄主对中国各地采集的144菌系筛选出有代表性的17个菌系进行全面的研究，发现我国的棉花枯萎病菌致病力与当时国际上已报道的6个小种有区别。为此，将我国的棉花枯萎病菌分为3个小种，即3号、7号和8号，其中7号、8号小种是首次报道，并认定棉花枯萎病Ⅲ型即为国际3号小种，而Ⅰ型、Ⅱ型被定为新小种，即7号和8号。7号小种是我国的优势小种，广泛分布于国内的各主产棉区，对鉴别寄主中的海岛棉、陆地棉和亚洲棉均表现出高度侵染，不感染或轻度感染5个非棉属寄主；而8号小种则不感染或轻度感染3个棉种的7个品种，轻度感染非棉属的秋葵、金元烟和大豆，严重感染紫苜蓿和白肋烟，仅在我国湖北省的新洲县和麻城县及江苏省的南京发现；3号小种严重感染海岛棉的Coastland、Sakel和亚洲棉的Ronzi，不感染海岛棉的Ashmouni和陆地棉，不感染非棉属寄主的秋葵、金元烟、白肋烟和大豆，极轻度感染紫苜蓿（表2-2）。鉴别寄主小种及分布3新疆麦盖提和吐鲁番7全国各地8湖北麻城及江苏南京海岛棉AshmouniRSW-RCoastlandSSWSakelSSW表2-2 我国不同小种对鉴别寄主植物的侵染力（陈其煐等，1985）鉴别寄主小种及分布3新疆麦盖提和吐鲁番7全国各地8湖北麻城及江苏南京陆地棉AcalaRSWRowdenRSWStonevileRSW亚洲棉RoziSSW秋葵ClemsonspinelaesRW-RW紫苜蓿GrimmRW-RS烟草Burley5RW-RSGolddolarRRW大豆YelredoRW-RW-R表2-2 我国不同小种对鉴别寄主植物的侵染力（陈其煐等，1985）（续）-1致病性是病原、寄主和环境条件相互作用的结果。棉枯萎菌致病性变异的原因比较复杂，可能有：镰刀菌发生突变、异核现象和准性生殖而发生变异；棉花种和品种的更换，造成寄主基因型对病原菌群体遗传结构的影响而发生变异；随土壤中微生物群落变化而发生变异及棉枯萎菌靠寄主种子远距离传播，导致外来致病菌的传入或为新小种提供亲本等。为此，孙文姬等（1999）采用国际通用的鉴别寄主（简称通用寄主）包括棉属寄主海岛棉的SaKel、Coastland、Ashmouni；陆地棉的Rowden等4个；非棉属寄主紫苜蓿（Grimm）、白肋烟（Berley5）、金元烟（Gold dollar）3个，以及鉴于国际通用的鉴别寄主中的所有棉属寄主均被7号小种菌系高度感染，不能明显区分广泛分布于我国各棉区7号小种不同菌系间的致病力强弱，于是在1996～1997年试验中，增加了抗病性不同的辅助棉属鉴别寄主（简称辅助寄主），包括海岛棉的8763依（感病）、K102（抗性敏感）；陆地棉的鄂荆1号（感病）、86-1号（抗病）等4个品种，对1986～1997年在我国河北、河南、山东、山西、安徽、湖北、江苏、陕西、辽宁和新疆10个主要产棉省（自治区）采集的84个棉枯萎镰刀菌代表菌系进行了生理小种变异监测研究。结果表明：与陈其煐等（1985）报道的基本相同，仍为第3号、7号、8号3个小种，其中，7号小种占83.3%，是我国毒力强的优势小种，广泛分布于我国各大棉区；3号和8号小种分别局限于新疆吐鲁番地区和湖北新洲地区。同时，发现局部地区有些菌系出现了变异，特别是1991～1994年采集的3号小种5个菌系出现了对鉴别寄主Sakel的致病力明显减弱的变异型。分布于黄河、长江流域及新疆广大棉区，对非棉属寄主表现为“R”（发病株率为0）或“W”型（发病株率为50%以下），在棉属寄主上以“S”型（病指为20.1以上）为主。1996～1997年28个代表菌系在8个棉属寄主上测定结果，除2个菌系对Sakel致病力为“W”型（病指为20.0以下）外，其余26个菌系对Ashmoumi、SaKel、Coastland、Rowden、8763依、鄂荆1号等6个棉属寄主致病力均为“S”型；28个菌系在有一定抗性的K102寄主上，13个为“W”型，15个表现为“S”型；在抗病品种86-1寄主上，24个为“W”型，4个为“S”型。按各菌系在8个棉属鉴别寄主上平均病指划分为强、中、弱3个类群，4个菌系为强致病类型，17个菌系为中等致病类型，7个菌系为弱致病类型。1998年发现湖北新洲的1个菌系和山西太原菌系对抗病品种86-1的致病力接近“S”型。1988年分离的3号小种2个菌系和1991～1994年分离的3号小种变异型5个菌系均分布于3号小种的原发生地新疆吐鲁番地区。对非棉属寄主均为“R”或“W”型；对陆地棉Rowden均为“R”型（病指为0），对海岛棉Coastland均为“S”型。2个3号小种与5个3号小种变异型的差异表现在对Ashmouni和SaKel的致病力上，前者在Ashmouni和Sakel上分别为“R”和“S”型；后者对Ashmoum的致病力增强了，除l个为“R”型外，2个为“W”型，2个为“S”型，而对SaKel的致病力减弱了，均为“W”型。另外，1995～1998年从该地区采集的海岛棉病株上一直未分离到3号小种。1988～1995年分离的8号小种5个菌系均分布于其原发地区的湖北新洲地区，在非棉属鉴别寄主紫苜蓿和白肋烟上均表现为“S”型，4个在棉属鉴别寄主上表现为“R”或“W”型，其中，1995年分离的Ag136菌系对抗病品种86-1表现为“S”型（病指25.0）。另外，1998年从该地区采集的病株上分离出8号小种6个菌系。2007年，马存等把目前世界上已报道的棉花枯萎病菌8个小种归纳成如表2-3所示。寄主植物小种编号12345678分布地区世界各地美国埃及印度苏丹巴西中国中国亚洲棉（G.arboreumcv.Ronzi）RRSSSRSR海岛棉阿西莫尼（G.barbadebsecv.Ashmouni）SSRRSSSR海岛棉萨克耳（G.barbadebsecv.Sakel）SSSRSSSR陆地棉阿卡拉44（G.hirsutumcv.Acala44）SSRRRSSR金元烟（Nicotianatabacumcv.GoldDolar）RSRR—RRR大豆（Glycinemaxcv.Yelredo）RS——RRR羽扁豆苜蓿（Lupinusluteuscv.Weiko）SS——R表2-3 世界各国不同小种对不同寄主植物的侵染力新疆棉区棉花枯萎病生理小种，自徐怡心（1994）鉴定认为国际7号小种之后，李国英等（1998）、缪卫国等（2000）、王雪薇等（2001）、吴彩兰等（2004）和张莉等（2005）采用目前国际上通用的一套棉属鉴别寄主及当地的辅助鉴别寄主对从不同产棉县（市、团场）采集的枯萎病菌株样本鉴定后认为，目前，7号生理小种仍为新疆棉花枯萎病菌优势生理小种，主要分布在新疆南疆（和田、喀什、阿克苏）、北疆（石河子、昌吉、乌苏）、东疆（吐鲁番）主要棉区。从各供试菌系对9个品种的发病始期及发病程度看，新疆棉花枯萎病菌菌系强致病型主要分布在南、北疆主要棉区，部分菌系属中等致病型，枯萎病菌为害时期较早，棉株出苗后10～12天，造成棉苗子叶青枯萎蔫或叶脉黄化网纹；新疆棉花枯萎病菌菌系弱致病型主要分布在东疆棉区，枯萎病菌为害时期均较晚，较南、北疆棉区发病始期晚5～7天，即棉花出苗后15～20天才出现子叶青枯萎蔫或叶脉黄化网纹症状。营养体亲和性（Vegetative Compatibility，简称VC）是指缺乏有性生殖真菌，通过不同菌系间的菌丝融合交流物质，进而形成异核体的能力，其实质就是异核体亲和性，会导致病原菌形态和致病性的变异。由若干具有营养体亲和性的菌系构成的群，称为营养体亲和群（Vegetative Compatibility Group，简称VCG）。做致病性测定存在着费时、费力、结果易受外界因素影响及不能反映不同菌株间的遗传关系等公认的问题（Hart等，1981；Kraft等，1978；Pound等，1953），所以，有必要探索和寻找鉴别小种更为简便有效的途径。Puhalla（19850）首先确立的用不能还原硝酸盐作唯一氮源生长的突变体（nit突变体）作营养体亲和性试验的方法，为此提供了一条有效的途径。此法通过观察不同菌株的nit突变体之间能否互补而形成异核体把它们分成不同的营养体亲和群。根据他的理论，亲和与否反映出不同菌株在遗传进化过程中的亲缘性远近，国内外不少报道都认为营养体亲和性是鉴别镰刀菌不同专化型及小种间菌株的有效方法。1985年Puhalla首次将VCG技术应用到尖孢镰刀菌专化型的研究，结果认为专化型与VCG之间有一定的对应关系，即同一VCG的菌系属于同一专化型，而不同专化型的菌系属于不同VCG。随后，大量的不同专化型的菌系证明了Puhalla的观点（Ploetz，1990）。鲍建荣等（1992）对尖孢镰刀菌的6个专化型的20个菌系进行了营养体亲和性研究，结果显示，不同专化型菌系的nit株之间无互补反应，而同一专化型的不同菌系上分离的nit株之间可产生亲和反应，也证明了nit突变株的营养体亲和群与菌系的专化型有相关性。在棉花专化型内，研究证明，生理小种与VCG有一定的相关性，来自同一生理小种的菌系，甚至是不同地理来源的菌系，都可划为同一VCG。Katan等（1988）测定来自以色列全国不同地区的同为3号生理小种的12株棉花枯萎病菌菌系，结果均属于同一VCG。丁之金等（1992）采用不能还原利用硝酸盐作唯一氮源生长的突变体（nit突变体），对中国棉枯萎镰刀菌的3号、7号、8号小种的61个菌株做了营养体亲和性研究。结果表明，第3号小种7个菌株和第7号小种42个菌株各属一个不同的营养体亲和群，第8号小种的8个菌株则属6个不同亲和群，不同小种的菌株间没有亲和性。营养体亲和性试验结果与致病性测定结果吻合，能从遗传学角度区分棉枯萎菌不同小种，用它作为鉴定手段，结果更能反映出不同菌系间的本质联系，并可克服致病力测定工作中费时、费力及结果不稳定等缺点。王克荣等（1996）利用氯酸钾毒性，诱变棉花枯萎病菌产生硝酸盐利用缺陷型突变体（nit）。通过对nit突变体在亚硝酸盐和次黄嘌呤为唯一N源的MM营养基上的生长鉴定，获得了4种生理表现型的nit突变体。在485个nit突变体中，nit A为357个（73.6%），nit B 59个（12.3%），nit C 65个（13.4%），nit D 4个（0.8%）。4种类型的突变体产生的频率差别很大，nit A类型最易产生，nit D突变类型则很难得到。Nit A类型的突变体也很容易回变成野生型。不同菌株产生突变类型的比例也有差异。菌株258产生的11个突变体均为nit A型，而菌株262产生的8个突变体都是nit B型，菌株207和328则产生4种生理表现型的突变体。产生nit突变体的107个菌株经互补类型配对测定的结果见表2-4。由此看出，我国的棉花枯萎病菌中，以VCG1为优势群体，分布广泛。有8个菌株分属另外3个VCGS，这些群体是否属于尖孢镰孢萎蔫转化型（Fusarium oxysporumf.sp.vasinfectum），可能需要进行分子遗传学比较才能明确。营养体亲和群（VCG）菌株数菌株来源营养体亲和群（VCG）菌株数菌株来源VCG15江苏丹徒VCG26江苏丹徒（303，315，316，319，328，329）江苏江浦江苏启东江苏淮海农场VCG31江苏丹徒（234）新疆四川浙江VCG41江苏南京（402）江西表2-4 棉花枯萎病菌的营养体亲和群及其来源除了属于4个VCGs的103个菌株，另有4个菌株（菌株号219，226，227，302）只产生一种表观型的突变体（nit A），这些突变体与其他菌株的互补型突变体配对不能形成亲和性反应。这些实验结果表明，我国的部分地区，包括新疆、四川、浙江、江西和江苏的棉花枯萎病菌多属于同一个营养体亲和群。在表现症状的棉花上部茎叶中也分离到其他营养体亲和群的菌株，这些菌株经测定，对陆地棉的棉花品种具有寄生能力和一定的致病力。王雪薇等（1996）报道，新疆棉花枯萎病株或病田土中分离得到的尖孢镰刀菌具有明显的营养体亲和性。将分离自新疆5个不同地点的棉病株或棉田土的7个菌株经单孢分离得到18个单孢株，经鉴定均为尖孢镰孢。7个菌株的18个单孢株分别在KPS培养基上诱得数量不等的nit突变体，将它们分别与两个采自老病区莎车的棉枯萎病菌株进行营养体配对试验，结果显示，7个菌株分别归属2个营养体亲和群（VCGs），其中，与莎车菌株明显亲和，属V1的6个菌株与莎车菌株应同属于尖孢镰孢萎蔫专化型。研究结果还表明，不同菌株产生的亲和带的形态特征不同，如MK菌株的各nit突变株间产生的亲和带均表现为水平扩展，迅速呈纺锤形，但气生菌丝不发达，亲和带仅表现为菌丝层比突变体菌丝层厚，随着亲和带的发展可在两突变株间连成片，暂称扩展型亲和带；而MK7-1菌株的各nit突变株间产生气生菌丝茂密，且扩展宽度均匀的线形亲和带，亲和带朝更浓密方向发展，仅加宽，但不易成片，暂称线型亲和带。所有亲和菌株（或单孢株）与MK形成的亲和带均属扩展型亲和带，而与MK7-1形成的均属线型亲和带。依据不能利用硝酸盐的突变体（nit）间营养体亲和性划分出的棉花枯萎病菌营养体亲和群（VCGs）与其生理小种间高度相关，即不同生理小种间营养体不亲和，而同一生理小种归属于一个或少数几个VCGs。张莉等（1998）从新疆各植棉区采集棉花枯萎病病株，经分离纯化获49个单孢菌株。经营养体亲和性测定结果表明，供测49个菌株分为4个亲和群，其中，VCG1包括46个菌株，占供测菌株的93.9%，均与标准菌株中的7号小种Ag84亲和，另外3个（吐-2、昌-4、石-2）分属不同的亲和群，它们与标准菌株中的7号、8号和3号小种的Ag84、Ag16、Ag2菌株的突变体均不亲和。20世纪90年代后期以来，随着新疆植棉面积的不断扩大及从各地大量调运棉种，其病原种群是否有所变化，不少植棉单位存在一定疑问。为此，张莉等（2005）采用营养体亲和性技术，对新疆棉花枯萎病菌的生理小种类型及其病原种群进行了变异监测研究。结果表明，28个供试菌系高度侵染海岛棉、陆地棉及K102（辅助鉴别寄主），属典型的7号生理小种，其余12个菌系在鉴别寄主上的反应与7号生理小种略有差异；供试菌系属于一个营养亲合群，且与7号生理小种的标准菌系相亲和，与3号、8号小种的标准菌系不相亲和；新疆棉花枯萎病菌依旧以7号生理小种为主。与以往的研究结果相比，新疆棉花枯萎病菌的群体组成基本没有发生变化。此外，王雪薇等（2000）的研究结果也表明，52个待测菌株与7号小种的4个标准菌株间存在着不同程度的营养体亲和性，而与3号小种和8号小种的标准菌株均不亲和。因此，它们属于7号小种营养体亲和群—VCG701。在棉花枯萎病菌的生理小种及其遗传进化关系的研究中，通过突变体的诱发而进行的营养体亲和群判别方法是行之有效的重要研究方法之一，但在突变体的诱发与鉴定上存在较大的难度，方法不一，试验的稳定性较差。为此，白剑宇等（2007）对棉花枯萎病菌突变体的诱发与鉴定做进一步的方法验证与技术探讨。从32个供试棉花枯萎病菌菌株中共诱得288个nit突变体，根据其在不同氮源培养基上的生长划分出4种突变体类型：nit 1、nit 3、nit M和nit 8。对各菌株的突变体诱发与鉴定结果表明诱得突变体的难易程度主要因菌株的不同有很大差异，有些菌株（FKLMYN-23，FKTN-11，FSYN-Z6）很容易诱得各类型突变体，有些菌株不易诱得某种突变体类型，有个别菌株（FMYN-02，FYL2N-07）在KClO3含量10～60g/ml的各浓度梯度中都未能诱发出任何突变体。不同KClO3浓度梯度的KPS培养基上的突变体诱发情况比较表明，在KClO3浓度为25g/ml时诱得突变体的比例最高，约76%的菌株在此浓度下诱得突变体。85.0%的供试菌株上诱发到的突变体类型不全，只有15.0%的菌株能诱发到4种类型的突变体。在诱得的288个突变体中，各突变体类型所占比率高低依次为nit 1＞nit 3＞nit 8＞nit M。在这4种突变体中，nit 1型突变体的诱得比例最高（76.7%），且在绝大多数菌株（93.7%）中易诱得，此结果与王雪薇等（1996）和李国英等（1998）的报道基本一致。但nit M型突变体较难诱发到，供试的32个菌株中，只有13个菌株诱发到了nit M突变体，其比率为40.0%，在所有诱发到的288个突变体中，nit M所占比例仅为4.9%，该结果与王雪薇等（1996）和李国英等（1998）的报道有所差异。这些结果对建立稳定和准确的实验方法体系，为进一步查明棉花枯萎病菌的营养体亲和群分化情况，营养体亲和群与生理小种的对应关系，生理小种的种类及其分布，病原菌的分化，遗传进化关系提供了有科学价值的依据。异核现象是半知菌普遍具有的特性，也是病原菌变异的主要原因。史大刚等（1991）结合新疆吐鲁番地区，原只发现枯萎菌生理Ⅲ型，后又发现了生理Ⅱ型的现象，研究了异核现象与枯萎菌变异的关系认为，异核现象是导致生理Ⅲ型菌系致病力增强产生生理Ⅱ型的重要因素。棉花枯萎病菌在遗传上都是十分复杂的种群，遗传的多变性可以由多种因子引起，例如，转座因子、染色体突变、基因漂移、准性生殖等。这种种群上遗传多变性决定了必须依靠更为客观的研究方法来研究它。VCG是依靠真菌自身遗传特征来划分的，不仅能反映菌系之间的遗传相似性，而且有助于真菌繁殖方式及其群体遗传结构的分析。但目前，棉花枯萎病菌营养体亲和性研究菌系来源十分有限，而且棉花枯萎病菌主要集中在专化型内，这样不能更为确切地了解种群的发育与变异。因此，今后应进一步扩大棉花枯萎病菌的研究种群，并结合更多的研究技术，包括分子技术，对日益复杂化的棉花枯萎病菌的种群进行更深入的研究。生物体内的同工酶是基因与生物外部形态性状的连接物，同工酶酶谱是生物内部生物化学特性的反映，许多学者认为，病菌不同的致病类型与酯酶同工酶有较密切的关系。吕金殿等（1982）用聚丙烯酰胺凝胶电泳对42个采自我国各省（自治区）的棉花枯萎病菌的酯酶同工酶进行了比较研究，根据主酶带的情况可将42个菌系分为3个类型，分别为类型Ⅰ，包括4条主酶带，含有31个菌系，来自13个省（直辖市）；类型Ⅱ，包括3条主酶带，含有6个菌系，来自6个省；类型Ⅲ，包括2条主酶带，含有1个菌系，来自新疆。张莉等（2000）用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定新疆棉花枯萎病菌酯酶同工酶，同时结合以往研究分析其酶谱类型与生理小种的关系。结果表明：（1）新疆棉花枯萎病菌有4种酶谱类型，供试的30个菌株中有25个菌株的酶谱属于类型Ⅰ据以往研究，这25个菌株中，有24个菌株属于7号生理小种，它们与标准的7号生理小种的酯酶同工酶酶谱基本一致。这说明，可利用酯酶同工酶作为研究棉花枯萎病菌致病力分化的一种辅助方法。同时，从生化的方面再次证明7号生理小种是新疆棉花枯萎病菌的优势小种。（2）主酶带的多少与致病力的强弱成正相关类型Ⅰ中的菌株有5条主酶带，次酶带也最多，在供试菌株中属致病力最强的类型；类型Ⅱ中的菌株有2条主酶带，次酶带较少，属供试菌株中致病力较弱的类型。（3）试验证明，酶谱类型与生理小种的类型并不完全一致如塔2菌株的酶谱类型属于类型Ⅳ，它与本次试验提供的3个标准菌株酶谱均不相似，但在利用鉴别寄主的鉴定中属7号小种；还有石-15菌株酶谱类型与标准3号小种相一致，但其小种也属于7号。这些现象有待进一步研究。曹君等（2005）通过聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了各供试枯萎病菌酯酶同工酶，并结合同工酶谱的聚类分析研究其酶谱类型与菌株致病力及生理分化的关系。结果表明，在棉花枯萎病菌中酯酶含量较高，电泳酶谱稳定，重复性好。14个供试菌株与标准菌株J-1的枯萎病菌酯酶酶谱基本一致，既反映了棉花枯萎病菌在专化型水平上的遗传一致性，又能在专化型下区分出不同的致病类型。根据酯酶酶谱和聚类分析结果（图2-2）将供试菌株分为4种类型。类型Ⅰ的菌株有5条主酶带，次酶带也最多，在供试菌株中属致病力强的类型；类型Ⅱ中的菌株的致病力属于中等水平，类型Ⅲ、类型Ⅳ的菌株分别有3条、2条主酶带，次酶带较少，属供试菌株中致病力较弱的类型，表明主酶带的多少与致病力的强弱有关。因此，酯酶同工酶酶谱类型和致病类型有较密切的相关性，利用酯酶同工酶分析能够准确且快速地鉴别出棉花枯萎病菌的不同致病类型，克服了传统棉花枯萎病菌致病性鉴定方法的一些弊端，且该方法简单、方便、准确，重复性好，可以成为鉴定棉花枯萎病菌不同致病类型的重要方法之一。图2-2 同工酶酶谱聚类分析树状图棉花枯萎病菌各生理小种间，不论是酯酶同工酶、过氧化物同工酶，还是可溶性蛋白质，经电泳后或多或少都可出现特征性条带，差异比较明显，易于区分。吴彩兰等（2004）对棉花枯萎病菌的3号、8号和7号3个生理小种的标准菌株和新疆所采31个供试菌株采用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行了酯酶同工酶谱、过氧化物同工酶谱和可溶性蛋白质谱分析。结果表明：①菌体酯酶同工酶电泳：所有供试菌株的酯酶同工酶酶谱多态性丰富，谱带数目一般为3～8条，清晰可辨。棉花枯萎病菌不同生理小种的酯酶同工酶谱存在明显差异，3号生理小种有6条谱带，8号生理小种有3条谱带，7号生理小种有8条谱带，其中，Rf值为0.1和0.35的两条带为7号生理小种的特征性条带。供试菌株谱带数为4～8条，其谱带虽具有多型性，但都与7号生理小种标准菌株的特征性条带中的一条或两条一致。31个供试菌株经可溶性蛋白质谱分析，它们与7号生理小种的标准菌株的特征性条带中的一条或两条一致，说明新疆棉花枯萎病菌仍以7号生理小种为主要的优势小种，这与多次用鉴别寄主法测定的结果一致。在同工酶电泳实验中，过氧化物同工酶因其为单位结构，故谱带少，多态性差，有的菌株谱带不清；酯酶同工酶谱和可溶性蛋白质谱不仅谱带数目多，而且具有清晰易辨的特点，效果好，在实验中拟优先选用。②过氧化物同工酶电泳：所有供试菌株的过氧化物同工酶谱带数目为1～4条，多态性差，且有的菌株谱带不清。但不同生理小种间仍存在差异，其中，Rf值为0.42和0.56，为3号生理小种的特征性条带，Rf值为0.52为8号小种的特征性带，Rf值为0.4为7号小种的特征性条带。31个供试菌株谱带数都少，但它们基本都与7号小种的特征性条带一致。③可溶性蛋白质谱。棉花枯萎病菌不同生理小种的可溶性蛋白质谱存在明显的差异，3号和7号生理小种均有6条谱带，8号生理小种标准菌株只有4条谱带。谱带Rf=0.1、Rf=0.3和Rf=0.52为该3个生理小种所共有，8号生理小种Rf=0.4的谱带又与7号生理小种所共有，即8号生理小种的4条谱带均与7号生理小种共有；谱带Rf=0.2、Rf=0.38和Rf=0.45是3号生理小种所独有的特征性带；谱带Rf=0.08和Rf=0.42是7号生理小种所独有的特征性带。31个供试菌株可溶性蛋白质谱虽有差异，但差异不大；它们绝大部分谱带都具有7号生理小种的特征性谱带1条或2条，而不具有其他小种的特征性带。吴彩兰等（2004）采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，对2002～2003年，从新疆各主要植棉区采集到的31个棉花枯萎病菌菌株及3号、7号和8号生理小种的标准菌株进行了可溶性蛋白质谱分析。结果表明，棉花枯萎病菌不同生理小种的谱带存在明显差异，易于区分，并且3号和7号标准菌株都有自己的特征性谱带；同一生理小种不同菌株谱带的一致性较高，差异不大，供试菌株与7号生理小种的特征性谱带中的1条或2条一致。从电泳图谱聚类分析可将其分为3类：3号和8号标准菌株各为1类，供测大部分菌株的电泳图谱与7号生理小种标准菌株的相似性水平高，亲缘关系近，与3号生理小种的相似性水平低，亲缘关系最远（图2-3）。这与鉴别寄主法进行生理小种测定的结果基本一致，说明采用可溶性蛋白凝胶电泳对棉花枯萎病菌生理小种的鉴定具有重要的参考价值，可作为常规鉴别寄主法和营养体亲和群鉴定法的一种重要辅助手段。图2-3 棉花枯萎病菌供试菌株电泳图谱聚类分析树状图由于传统的生理小种划分主要以病菌对特定寄主的致病力强弱作为依据，病菌自身的变异及环境因子的复杂变化也可造成致病力变异，仅依靠传统的形态学和致病力差异来划分病菌生理小种已难以得出令人信服的结论。因此，需要借助于诸如遗传学、生物化学、分子生物学的手段加以验证，如血清学、营养体亲和性、凝胶电泳以及近年来发展迅速的RFLP及RAPD等技术，已逐步应用于病原菌的鉴定。而采用分子生物学手段，可将致病力在分类中的作用从遗传学的角度加以重新评价。随着分子生物学技术的发展，利用分子特征进行真菌分类鉴定已逐步被人们所采纳。在对病菌遗传背景了解甚少的情况下，采用随机引物扩增多态性DNA分子标记对尖孢镰刀菌专化型以下的小种进行多态性分析是行之有效的。RAPD（Random Amplified Podymorphic DNA）技术是20世纪90年代由William等在PCR基础上创立起来的一种利用随机引物扩增DNA的分子标记方法。该技术一出现，就以其快速而便于检测大量样品，所需DNA量少、不需要生物的特殊基因文库作探针以及操作安全、所需费用较低等突出优点，迅速应用于生物学研究的各个领域。冯洁等（1999）对来自中国11个省（自治区）的棉花枯萎病菌不同生理小种菌株的基因组DNA进行随机扩增，筛选出10个扩增多态性好且稳定的随机引物，不同引物的条带数为9～19条，扩增片段的DNA分子量为300～3000bp，10个引物扩增得到的140个DNA条带中，有123个多态性条带，占总条带的87.8%。根据供试菌株RAPD-PCR扩增条带的有无，以1.0记数，统计稳定、清晰出现的条带，采用Statistics统计软件对数据进行类平均法系统聚类分析，建立树状图（图2-4）。以连锁距离为5.0划分时，供试的29个菌株可划分为6个RAPD组。Ⅰ组为所有的3号小种菌株（1～5）及国外3号小种对照（29）；Ⅱ组为所有的7号小种共16个菌株（11～26）；Ⅲ组为8号小种的3个菌株（6～8）；Ⅳ组为8号小种的另外2个菌株（9、10）；V、Ⅵ组分别为国外的1号小种（27）及6号小种（28），它们各独自为一类。通过亲缘关系树状图可以看出，我国的3号小种与国外的3号小种对照亲缘关系十分密切，同属于一个RAPD组Ⅰ，这个RAPD组与其他5个组的菌株在亲缘关系上相距较远，独为一类；我国特有的7号小种自成一类；而我国的8号小种遗传背景较为复杂，分属于2个不同的RAPD组，其中，归为第Ⅳ的菌株（9、10）与7号小种的亲缘关系较近，归为第Ⅲ组的菌株（6～8）与7号小种的亲缘关系较远。国外的1号、6号小种（27、28）与我国的7号、8号小种在亲缘关系上相距较远。从亲缘关系树状图中还可以看出，我国的3号、7号小种都分别属于两个独立的RAPD组，8号小种分属于两个不同的RAPD组，这与传统的以致病力差异为依据的鉴别寄主划分生理小种的结果基本一致。从分子水平上证实了中国生理小种划分的正确性，并证明中国除3号小种与国外相同外，7号、8号小种是不同于国外其他小种的独立小种。8号小种在我国的分布只局限在湖北新洲和南京江浦，是遗传背景最为复杂的一个小种，今后在这一群体中可能会划分出新的小种。图2-4 供试棉花枯萎病菌菌株的RAPD聚类分析树状图新疆是我国最大的棉花生产基地，但植棉面积迅速扩大、连作年限延长、引种频繁，导致棉花枯萎病迅速扩展，为害严重。为了有效控制棉花枯萎病菌，有必要对新疆不同植棉区枯萎病菌的生理小种及遗传多样性进行分析，为新疆棉花抗病育种、植物检疫及病害防治提供科学依据。王雪薇等（2001）和田新莉等（2002）利用RAPD技术比较新疆棉花枯萎病菌不同菌株间在分子水平上的共性与差异。RAPD分析结果显示出这37个供试菌株与7号小种各对照菌株间基因组DNA的指纹图谱高度相似，属同一遗传相似组，而与3号和8号小种的对照菌株间遗传差异较大，亲缘关系较远，即7号生理小种是组成目前新疆棉花枯萎病菌群体的优势小种。仅发现一株可能属于3号小种的菌株，未发现属于8号小种的菌株。此外，从分子水平上证明新疆棉花枯萎病菌存在明显的遗传分化，即使在7号小种内也存在遗传上的差异，从而导致致病性强弱的不同。冯洁等（2000）采用10个随机引物对我国3个棉花枯萎病小种的26个菌株PCR扩增结果表明，不同小种在扩增的DNA条带之间差异明显，并分别筛选到了3号、2号和8号小种的特征带。3号小种特征条带2以OPF-10为引物扩增，3号小种的5个菌株（编号l～5）均在分子量为513bp处出现OPF-10513特征条带，而其他小种菌株均未扩增出此带。7号小种特征条带以OPF-08为引物，所有的7号小种菌株（编号11～26）均扩增出了分子量为371bp的特征条带OPF-08371。8号小种特征条带以OPF-12为引物，供试的5个8号小种菌株均在703bp处扩增出了特征条带OPF-12703。采用ABI 377全自动测序位，以T7方向进行序列测定，3个插入片段均可一次通读全部序列，3号小种的特异性探针OPF-10511含有513个碱基，内含5个内切酶位点（Hind Ⅲ、BamH Ⅰ、Xba Ⅰ、BstⅪ、EeorⅤ），G+C含量为45.4%；7号小种特异性探针OPP-08371含有371个碱基，内含7个内切酶位点（Ecor V、Bsp 106、Nci I、Dra Ⅱ、Xho I、Sac I、Ecor V），G+C含量为43.4%；8号小种特异性探针OPF-12703含有703个碱基，内含7个内切酶位点（Kpn Ⅰ、Bsp 106、Hind Ⅲ、Aat Ⅱ、Ecor V、Bsp106、Kpn Ⅰ），G+C含量为42.1%。利用随机引物对棉花枯萎病菌不同生理小种的菌株进行PCR扩增，获得了大量的RAPD标记，并分别筛选到可将不同小种扩增出不同特征带的引物，为以致病力差异为基础的鉴别寄主划分生理小种的传统方法提供了分子水平的证据，说明我国棉花枯萎菌不同生理小种间在分子水平上存在较大差异，并且这种差异导致了病菌致病力的不同，不同小种之间特征性条带的存在也正是基因序列改变的真实体现。在棉花枯萎病菌小种间寻找到特异性DNA扩增片段，目前在国内外尚属首例。AFLP（Amplified Fragmentlength Polymorphism）分子标记技术是在基因序列未知的情况下，利用少数几对引物对相关物种基因组多态性进行有效检测。AFLP、RAPD及RFLP 3种分子标记多态性的检出效率的大小顺序依次为：AFLP>RAPD>RFLP。由于AFLP综合了RAPD和RFLP的技术优点，因而在植物病原真菌的遗传多样性分析、构建遗传图谱、标定基因、辅助育种的研究中得到了广泛应用。王兰等（2008）应用AFLP分子标记技术，选用9对EcorⅠ和MseⅠ引物组合，对新疆南疆地区不同团场的枯萎病菌12个菌系进行AFLP扩增，结果显示，每对引物均扩增出多态性的位点，说明供试菌系之间在DNA分子水平上存在丰富的遗传变异。9对引物共产生条带总数263条，其中，多态性条带205条，占总数的77.9%。参照琼脂糖凝胶电泳图谱，利用DPS数据处理软件中类平均法聚类分析，建立树状图谱（图2-5）。由图2-5可知，供试的12个菌系在0.52的水平上可分为4类，第Ⅰ类包括6个菌系，分别为F05、F06、F07、F011、F016和F043；第Ⅱ类为3个菌系，分别为F01、F012和F015；第Ⅲ类为2个菌系，分别为F09、F013；第Ⅳ类为1个菌系F03。（......）而与其同属于相同生态环境条件的菌系却属于另一个AFLP组。这说明同一生态环境下的棉花枯萎病菌株在遗传上可能不一致。图2-5 12个不同菌株AFLP聚类的树状图张莉等（2009）研究结果显示，新疆棉花枯萎病菌的AFLP多态性较高，这充分反映了枯萎病菌7号生理小种的群体内存在着一定的遗传多样性。出现这种情况的原因可能有两个：一是棉花枯萎病主要靠种子带菌传播，新疆大量从内地调运棉花种子，外来的棉花枯萎病菌传入新疆，这也暗示着新疆棉花枯萎病菌最初可能不是共同的来源；二是随着抗病品种的应用以及气候条件的变化，当地菌株发生突变，形成了适应新品种和当地自然条件的新菌株。研究的结果还表明，新疆棉花枯萎病菌AFLP多态性与菌株的地理来源有一定的相关性，但基于AFLP标记划分的AFLP类群与基于寄主病指划分的致病力类群间关系不一致。出现这种结果的原因可能有：①所用引物数目相对较少，揭示的可用于区分菌株的多态性不丰富；②所用菌株材料均仅根据致病力的不同而选定，忽视其他遗传差异的存在，加之选用菌株数目较多，干扰了分析结果；③AFLP分子标记所揭示的遗传变异反映了整个基因组水平的变异，而生理小种、致病性等表型变异仅反映一个或几个基因的变异程度。AFLP技术包含多个实验环节，要想获得理想的实验结果，需要对每个实验环节进行优化。在DNA酶切、连接试验过程中，需要制备高质量的DNA：一方面，DNA的纯度影响着酶切的效果；另一方面，DNA的完整性影响着实验结果的稳定性和重复性。单纯固体或液体培养基中含有糖和琼脂等营养物质，培养过程中使棉花枯萎病菌细胞中富含多糖、蛋白质等杂质，不利于DNA的纯化。限制性内切酶的选择对AFLP分析的准确度具有关键性作用，一般采用双酶切，其组合由1个高频内切酶和1个低频内切酶组成。目前国内外大多采用EcoRⅠ/MseⅠ和PstⅠ酶切组合，但Gomez等利用HaeⅢ/PstⅠ酶切组合和EcoR I/Mse I酶切组合对黑莓锈病病菌（Phragmidium violaceum）进行遗传多样性研究，结果显示HaeⅢ/PstⅠ酶切组合的AFLP分析虽然获得的扩增条带较少，但多态性位点较多，更利于条带的统计分析。王晓光等（2011）采用玻璃纸PDA培养基来收集棉花枯萎病菌菌丝体，采用改良CTAB法提取、纯化棉花枯萎病菌基因组DNA，最终得到了纯度高、适合AFLP分析的基因组DNA，而后利用HaeⅢ/PstⅠ酶切组合对棉花枯萎病菌进行了AFLP分析，结果显示，利用3对引物组合共获得301条带，其中，多态性条带164条，表明利用该酶切组合对棉花枯萎病菌进行AFLP分析能够得到较为丰富的多态性条带，能够用于棉花枯萎病菌遗传多态性的分析。通过对酶切时间、预扩增模板浓度、选择性扩增模板浓度进行梯度优化试验，建立了适合棉花枯萎病菌的AFLP分析体系，即酶切反应：250ng DNA经HaeⅢ/PstⅠ 37℃酶切2h后，加入1μl PstⅠ再进行酶切2h；连接反应：酶切产物25℃连接过夜（≥16h）；PCR反应中，以连接产物稀释10倍（P10）作为预扩增模板，预扩增产物稀释50倍（P10S50）作为选择性扩增模板。利用优化的AFLP反应体系对棉花枯萎病菌标准菌株进行分析，发现能够完全区分3号、7号和8号生理小种，证明了其有效性，可从整个基因组水平反映不同棉花枯萎病菌生理小种之间的遗传差异。对20个棉花枯萎病菌代表菌株进行AFLP分析，聚类分析结果表明，它们均与7号生理小种具有较高的遗传相似性，印证了7号生理小种是我国棉花枯萎病菌的优势小种，但同一生理小种内不同供试菌株之间也存在一定的差异性。棉花枯萎病菌的生长及其产孢量是病原菌生命活动和自身遗传的反应，同时也受到温度、pH值、碳源和氮源等因素的影响。李生才等（1998）认为，病菌生长温度范围为10～33℃，最适温度为27～30℃。曹君等（2005）研究结果表明（图2-6），供试棉花枯萎病菌菌株在10～35℃下均能生长，最适温度为25℃。棉花枯萎病菌生长温度因菌株不同而有差异已经得到证实。Raillo（1958）指出，尖孢镰刀菌生长适宜温度15～25℃，最高温度为35℃；陈其煐等（1992）报道，棉花枯萎病菌最适生长温度为25℃，最高温度大多为35℃，但有2个菌株能在37℃下生长；缪卫国等（2000）的研究结果与陈其煐等（1992）报道相似，但同时发现新疆吐鲁番棉枯萎病菌菌株HAI-17较耐高温，能在40℃下生长。不同研究结果所显示的棉花枯萎病菌生长温度的差异可能主要与供试菌株个体差异性有关，后者又与遗传和环境等因子有关。李生才等（1998）报道，棉花枯萎病菌在pH值2.5～7.0均可生长，pH值3.5～5.3为最适。曹君等（2008）研究结果指出（图2-7），棉花枯萎病菌在pH值4～10范围的PDA培养基上均能生长，最适pH值6～7。pH值6与pH值7差异不大，生长量几乎是其他各处理的2倍。这种不同研究结果的差异可能主要与供试菌株个体差异性有关，后者又与遗传和环境等因素有关。图2-6 不同温度对棉花枯萎病菌菌丝生长的影响图2-7 不同pH值对棉花枯萎病菌菌丝生长的影响在供试的4种碳源中，供试菌株在以蔗糖、乳糖、可溶性淀粉为碳源的培养基上菌丝生长较快，3种碳源之间在0.05水平上无明显差异。在以甘油为碳源的培养基上生长相对较慢，无碳源（对照）的生长与可溶性淀粉相似，但其菌丝不产生色素，而且气生菌丝稀疏、贴附生长。液体培养的菌丝干重与平板培养的菌丝干重之间有一定的变化：蔗糖作为碳源时，菌丝在平板上生长最快，但菌丝干重略低于可溶性淀粉；甘油作为碳源时菌丝在平板上生长略低于乳糖，而液体培养时却略好于乳糖。平板培养与液体培养之间有一定的联系，但结果不一定完全相同。蔗糖作为碳源时产孢量最大，可溶性淀粉其次，乳糖和甘油较差，清水（对照）最差（表2-5）。因此，做产孢实验时宜用蔗糖作为碳源。碳源生长速率（mm/天）菌丝干重（g）产孢量（个/ml）CK（清水）—0.0732.80×106蔗糖12.611.94845.93×107可溶性淀粉12.362.21854.76×107乳糖12.080.29211.20×108甘油11.210.33512.50×107表2-5 碳源对棉花枯萎病菌生长、产孢的影响（曹君等，2008）在供试的5种氮源中，供试菌株在以脲、硝酸钠为氮源的培养基上菌丝生长较快，两氮源在0.01水平上无明显差异。硝酸铵其次，在0.05水平上与前两种氮源以及磷酸氢二铵、硫酸铵差异明显。磷酸氢二铵、硫酸铵两氮源对菌丝生长影响较小。在供试氮源中，对菌丝干重而言，硝酸铵最好，磷酸氢二铵其次，脲、硝酸钠菌丝干重的差异不明显，硫酸铵较差，无氮处理（CK）的菌丝干重很少，说明氮是该菌生长的必需元素，对该菌的生长必不可少。对于产孢量而言，在供试氮源中以硝酸铵最好，脲、硝酸钠、磷酸氢二铵以及无氮对照其次，硫酸铵的产孢量较少（表2-6）。碳源生长速率（mm/天）菌丝干重（g）产孢量（个/ml）CK（无氮）—0.06483.21×107脲12.560.20624.28×107硝酸钠12.500.20683.32×107硝酸铵10.670.27301.40×108磷酸氢二铵5.610.22782.24×107硫酸铵3.200.17373.80×106表2-6 氮源对棉花枯萎病菌生长、产孢的影响（曹君等，2008）

大地老虎（Trachea tokilnisButler），属鳞翅目Lepidoptera，夜蛾科Noctuidae。分布于全国各地。在日本、俄罗斯等国有发生报道。参见小地老虎的为害状。成虫体长20～22mm，翅展52～62mm，暗褐色。雌蛾触角丝状；雄蛾触角双栉齿状，分支较长，向端部渐短小，几达末端。前翅褐色，前缘自基部至2/3处黑褐色；肾纹、环纹明显，周缘围以黑褐色边，肾纹、环纹、剑纹明显，周缘各围以黑褐色边，肾纹外方有1黑色条斑；亚基线，外横线均为双条曲线，但有时不明显；外缘具1列黑点，内侧至亚缘线间为暗褐色。后翅淡褐色，外缘具很宽的黑褐色边。卵半球形，大小1.8mm×1.5mm，初浅黄色，渐变褐色，孵化前灰褐色。老熟幼虫体长41～61mm，头部黄褐色，额区在颅顶相会处呈双峰毗连。体黄褐色。体表多皱纹，微小颗粒不显。前胸盾褐色。臀板除末端两根刚毛附近为黄褐色外，几乎全部为1整块深色斑，并满布龟裂状皱纹。腹部第1～8节背面的4个毛片前2个等于或略小于后2个。蛹长23～29mm，腹部第3～5节明显较中胸及腹部第1～2节粗。腹端具1对臀棘。图3-37 大地老虎成虫（左♂；右♀）（张治良摄）图3-38 大地老虎幼虫大地老虎在我国各地均为1年发生1代。以低龄幼虫越冬。3～5月越冬后幼虫为主要为害虫态；5～6月温度达20℃以上时，以老熟幼虫滞育越夏，滞育期长达100余天，9～10月羽化为成虫。卵多产于土表或幼嫩杂草茎叶上。参见小地老虎防治。

网目拟地甲（Opatrum subaratumFaldermann），别名沙潜，属鞘翅目，拟步甲科。分布于我国东北、华北、西北等地。国外俄罗斯、蒙古等国有发生。成虫和幼虫为害幼苗，取食嫩茎、嫩根，影响出苗，幼虫还能钻入根茎、块根和块茎内食害，造成幼苗枯萎死亡；成虫可咬食叶片，造成缺刻和孔洞。图3-40 为害叶片咬食穿孔虫体黑色略带褐色，一般鞘翅上附有泥土，故外观呈灰色，椭圆形。雌成虫体长7.2～8.6mm，宽3.8～4.6mm；雄成虫体长6.4～8.7mm，宽3.3～4.8mm。头部较扁，背面似铲状，复眼黑色在头部下方。触角棍棒状11节，第1～3节较长，其余各节呈球形。前胸发达，前缘呈半月形，其上密生点刻如细沙状。鞘翅近长方形，其前缘向下弯曲将腹部包住，不能飞翔，鞘翅上有7条隆起的纵线，每条纵线两侧有突起5～8个，形成网格状。前、中、后足各有距2个，足上生有黄色细毛。卵椭圆形，乳白色，表面光滑，大小为1.2～1.5mm×0.7～0.9mm。初孵幼虫乳白色，体长2.8～3.6mm，老熟幼虫15～18.3mm，体细长与金针虫相似，深灰黄色，背板色深。前足发达，为中、后足长度的1.3倍。腹部末节小，纺缍形，背板前部稍突起成一横沟，前部有褐色钩形纹1对，末端中央有隆起的褐色部分，边缘共有刚毛12根，末端中央有4根，两侧各排列4根。蛹为裸蛹，乳白色并略带灰白，羽化前深黄褐色，大小为6.8～8.7mm×3.1～4mm。腹部末端有2钩刺。图3-41 网目拟地甲网目拟地甲在东北、华北地区1年发生1代。以成虫在土中、土缝、洞穴和枯枝落叶下越冬。翌春3月下旬杂草发芽时，成虫大量出土，取食蒲公英、野蓟等杂草的嫩芽，并随即在大田作物和菜地为害幼苗。成虫在3～4月活动期间交配产卵，卵产于1～4cm表土中。幼虫孵化后即在表土层取食幼苗嫩茎、嫩根，幼虫6～7龄，历期25～40天，具假死习性。6～7月份幼虫老熟后，在5～8cm深处做土室化蛹，蛹期7～11天。成虫羽化后多在作物和杂草根部越夏，秋季向外转移，为害秋苗。沙潜性喜干燥，一般发生在旱地或较黏性土壤中。成虫只能爬行，假死性特强，寿命长，最长的能跨越4个年度，连续3年都能产卵，且孤雌后代的成虫仍能进行孤雌生殖。1.农业防治 秋收后深翻土地，改良土壤，铲除杂草，精耕细作等，以改变害虫发生条件，减轻为害。提早播种或定植，错开沙潜发生期。2.化学防治 在沙潜为害严重地区，播种前用3%氯唑磷颗粒剂，2～6kg/667m2，混细干土50kg，均匀地撒在地表，深耙20cm；或用50%辛硫磷乳油1：20比例拌潮湿细沙土，傍晚撒于幼苗根部四周；用50%辛硫磷乳油1：10比例拌切碎的叶菜或杂草等，傍晚撒于幼苗根部四周，每3～5天更换1次毒饵。

黑绒金龟（Maladera orientalisMotschulsky），属鞘翅目Coleoptera，金龟科Scarabaeidae。我国除西藏、新疆无报道外，各省（区）均有发生。国外在日本、朝鲜半岛、俄罗斯（西伯利亚）有发生报道。成虫和幼虫均可为害。幼虫取食腐殖质及植物地下部分，为害性不大。成虫取食多种农、林植物芽、叶、茎。玉米幼苗茎及叶片被害，造成叶片缺刻、孔洞，严重的全株被啃光，仅留秃桩。图3-24 啃食幼苗造成缺刻成虫卵圆形，前狭后宽，大小为6.2～9.0mm×3.5～5.2mm，黑色或黑褐色，有丝绒般闪光。唇基黑色，光泽强，前缘与侧缘微翘起，中间纵隆。触角9节，鳃片3节。前胸背板横宽，两侧中段外扩，密布细刻点，侧缘列生褐色刺毛。鞘翅侧缘微弧形，边缘具稀短细毛，纵肋明显。前足胫节具2外齿，爪具齿。臀板三角形，密布粗大刻点。卵长1.2mm，椭圆形，乳白色，光滑。老熟幼虫体长14～16mm，头宽2.5～2.6mm，两侧颊区触角基部上方具1圆形暗斑（伪单眼）。肛腹片后部覆毛区布满顶端尖弯的刺毛，前缘双峰状，中间裸区楔状，楔尖朝向尾部，将覆毛区一分为二。刺毛列位于覆毛区后缘，由16～22根锥刺毛组成，呈横弧状排列，其中间隔宽些。离蛹，蛹体长8～9mm，宽3.5～4.5mm。腹部第1～6节背板中间具横峰状锐脊。尾节近方形，后缘中间凹入，两尾角较长。雄蛹臀节腹面可见隆起的外生殖器；雌蛹臀节腹面平坦，生殖孔位于基缘中部。图3-25 黑绒金龟（左：成虫；右：卵）图3-26 黑绒金龟幼虫（右：初孵幼虫）黑绒金龟在我国长江以北地区1年发生1代。以成虫越冬。4～6月为成虫活动期，连续5天平均气温10℃以上，尤其是降雨后开始大量出土，晴朗风小的午后14～17时，是成虫活动高峰。6～8月为幼虫生长发育期。参见东北大黑鳃金龟防治。

据《中国农业年鉴》统计，截止到1999年，我国苹果总面积为243.89万公顷，比面积最多时的1996年的298.69万公顷减少了18.35%。苹果面积连续几年虽有所减少，但总产量一直呈增长趋势。到1999年，全国苹果总产量为2080.1万吨，占世界总产量的34.55%。目前我国苹果的总面积和总产量仍居世界第一位。就苹果品种发展变化趋势而言，1980年以前，苹果的栽培品种主要以国光、金冠、元帅系普通型品种、青香蕉、大国光、青祝、红玉等为主，新品种引进推广的速度较为缓慢。进入20世纪80年代以来，随着着色系富士苹果的引入，我国苹果品种的更新换代进入了一个新的历史阶段。特别是自20世纪80年代中期至90年代，随着我国苹果生产的迅猛发展，苹果品种结构亦发生了重要变化，一批老品种如国光、青香蕉、元帅系普通型、红玉等逐步被淘汰，品种更新换代的步伐进一步加快，新优品种得以迅速发展。据统计，近20年来，我国从国外引进和自己选育的品种（品系）有200多个。引进和选育的品种（系）尽管数量很多，但目前真正用在生产实际中的品种（系）仅有10多个，主要有富士系、元帅系短枝型品种、乔纳金、嘎拉系、秦冠、华冠、藤牧1号、美国8号、千秋等。在引进和自选品种中，发展最快、栽培面积最大的品种为富士系。据1998年统计，全国富士系栽培面积近133万公顷，占全国苹果总面积的50%以上。苹果生产大省富士系栽培面积的比例更大，例如陕西约为60%，山东为60.1%，山东烟台则高达73.9%。由此可见，我国目前无疑已成为世界第一富士苹果生产大国。其次是以新红星为主的元帅系短枝型品种，占总面积的15%左右。秦冠是我国自育品种中栽培面积最大的品种，陕西栽培面积最大，曾占陕西苹果面积和产量的50%左右。近年来秦冠栽培面积逐年下降，但目前仍占陕西省苹果总面积的20%左右。另外，山西、湖南、甘肃等省亦有较大的栽培面积。近年来嘎拉系在全国各主要产区发展势头较好，已初步形成了一定的生产规模，其中以山东和陕西发展速度较快。其他引进新品种如藤牧1号、美国8号、珊夏等在生产中虽有栽培，但目前尚未形成规模。根据上述苹果品种发展现状分析，虽然我国苹果品种更新换代和调整的步伐在逐步加快，新优品种得到了较快发展，但目前仍存在着许多不容忽视的问题，主要表现有以下几个方面。20世纪90年代初期，受苹果“比较效益高”的利益驱动，我国一些苹果非优生区也在大面积盲目地发展苹果，从而导致全国苹果面积迅猛增长。据统计，从1990～1995年，全国苹果面积由163.1万公顷增长到269万公顷，增长了64.9%。这些地区由于自然生态条件差，所产苹果质量差，效益低下。特别是在苹果产销形势发生变化、市场竞争日趋激烈的情况下，这些产区的产销矛盾更加突出，销售难度进一步加大，效益愈来愈差甚至入不敷出。虽然经过90年代后期的大幅调减，但目前非优生区仍有一定的栽培面积，因而影响了苹果的总体质量和效益。例如，陕西省现有苹果总面积为42万公顷，其中优生区面积30.7万公顷，占全省苹果面积的73%，适宜区面积6.2万公顷，占全省苹果面积的15%，非适宜区和次适宜区仍有苹果面积5万公顷，占全省苹果面积的12%。针对这个问题，急需加快调整提高，使其向优生区集中。在20世纪80年代末至90年代初苹果大发展过程中，全国各产区几乎都青一色栽种晚熟品种，且晚熟品种中都是单一的红富士，中熟品种发展相对较慢，并且是单一的元帅系短枝型品种，早熟品种则发展极少，从而导致苹果品种结构比例失调，形成了“早熟极缺，中熟单一，晚熟过多”的畸形结构。例如，山东省苹果主产区早、中、晚熟品种比例为0.72：19.12：80.16，陕西省早、中、晚熟品种比例为3：13：84。以前由于对苗木繁育及市场经营缺乏有效地监督管理，苗圃业主、种苗中间商没有资质标准，无论有无基本的专业知识，人人均可以育苗和销售苗木。国家虽有果树苗木质量标准，但基本无法执行。因而，苹果品种“以假充真，以劣充优”的现象十分严重，造成品种（系）混杂，良莠不齐。例如，新红星、首红等元帅系短枝型品种在大发展时期，品种、苗木以假充真现象时有发生，有些果农在市场上购买的是短枝型品种，但栽植几年后却发现是乔化普通型品种。有些虽是短枝型品种，但结果后却发现果实难以正常着色，果实品质下降，影响了销售收入。再如目前栽培面积最大的红富士，也存在着品种（系）混杂的问题。同一品种的同一批苗木，栽植后的表现却五花八门，有的果实大小参差不齐，有的果形高（高桩）矮（低桩）不一，有的则着色不良，严重影响了果实商品的一致性。有些果农在选择品种时求新求异和盲从心理较为严重，往往把新品种与好品种等同起来，凡是新品种就认为一定好，越是没听说过的就越感兴趣。只要是新品种，特别是国外新品种，一经引入，未进行试验观察，就盲目发展。再加之有些果农受某些不切实际的宣传诱导，不结合当地实际便引进发展，结果造成了严重的损失。例如，20世纪80年代引进的北斗和90年代引进的北海道9号，在一些地区未经过区试就盲目发展，栽植几年后才发现品种本身有难以克服的缺点，于是不得不砍树或改接，走了许多弯路。贝拉 系美国品种。果实于6月下旬至7月上旬成熟，圆形，平均单果重150克。果实底色淡绿黄色，果面紫红色，有果粉，颇美观。果肉乳白色，风味浓甜酸，具香气。幼树生长旺盛。结果早，丰产。藤牧一号 系美国品种。果实于7月上中旬成熟，圆形，平均单果重190克。成熟时果面有鲜红色条纹和彩霞，艳丽，光洁。果肉黄白色，松脆多汁，风味酸甜，有香气。幼树生长较旺。早果，丰产。珊夏 系日本与新西兰合作选育的品种。果实于7月中下旬成熟，扁圆形，平均单果重190克。成熟时果面鲜红色至浓红色。果肉白色，硬度较大，风味酸甜，有香气。树势中等开张。早果、丰产。秦阳 系西北农林科技大学园艺学院果树研究所从皇家嘎拉实生苗中选育的品种。果实于7月下旬成熟，近圆形，平均单果重190克。果实底色黄绿，条纹红，色泽鲜艳（图2-1）。果肉黄白色，肉质细脆，风味酸甜，有香气。树势中庸，易成花。美国八号 又名华夏，系美国品种。果实于8月上中旬成熟，圆锥形，平均单果重240克。成熟时果面浓红，光洁无锈。果肉黄白色，甜酸适口，有香气。树势中等。对修剪不敏感。易成花，丰产。图2-1 秦阳苹果嘎拉 系新西兰品种。果实于8月上中旬成熟，圆锥形，平均单果重180克。成熟时果皮底色黄色，果面鲜红色，有深红色条纹。果肉乳黄色，肉质脆，汁中多，酸甜味香，品质为极上等。树势中等。结果早，丰产。优系嘎拉有皇家嘎拉（图2-2）、丽嘎拉和太平洋嘎拉（图2-3）等品种。图2-2 皇家嘎拉结果状图2-3 太平洋嘎拉苹果红津轻 系日本品种。果实于8月上中旬成熟，圆形，平均单果重200克。成熟时果皮底色黄绿，果面鲜红色，有深红条纹。果肉乳黄色，肉质松脆，甜中微酸，风味浓厚。树势强健，丰产。红王将 系日本品种。早生富士的芽变优系。果实于9月中下旬成熟，短圆形，单果重300～400克。成熟时果面鲜红色，光洁艳丽（图2-4）。果肉乳黄色，细脆多汁，甜味浓，品质优。栽培特性与富士相同。玉华早富 由陕西省果树良种苗木繁育中心从弘前富士的芽变选育而成。果实于9月中下旬成熟，圆形，单果重350～450克。果面呈条纹浓红，光洁艳丽（图2-5）。果肉淡黄色，细脆多汁，味甜微酸，品质优良。属红富士系苹果类。图2-4 红王将苹果图2-5 玉华早富苹果金冠 系美国品种。果实于9月中下旬成熟，圆锥形，单果重200克左右。成熟时果面黄绿色，贮藏后全面变为金黄色。果肉甚细，味甜带酸，清香味浓，品质极上等。树势生长中庸，结果早，丰产。金冠受药害易产生果锈。金冠的芽变品系金矮生（也称无锈金冠）以及王林等果面光洁。新世界 系日本品种。果实于9月下旬至10月上旬成熟。果实近圆形，单果重250～350克。底色黄绿，果面光洁，着浓红条纹，可全红，外观艳丽。果肉淡黄色，松脆稍韧，风味甜，有芳香。树热健旺，属半短枝类型。易成花，结果早，丰产（图2-6，图2-7）。千秋 系日本品种。果实于9月上中旬成熟。果实圆形或长圆形，单果重200～300克。底色绿黄，果面鲜红，有明显红条纹。果肉黄白色，肉质细脆，汁液多，酸甜爽口，品质上等。树势中庸，树姿开张，丰产稳产（图2-8，图2-9）。图2-6 新世界苹果图2-7 新世界结果状图2-8 千秋苹果图2-9 千秋结果状华冠 由中国农业科学院郑州果树研究所选育而成。果实于9月中下旬成熟。果实近圆锥形，果个中大，单果重180～200克。底色金黄，略带绿色，果面鲜红，有断续红条纹（图2-10）。果肉黄色，肉质致密，脆而多汁，酸甜可口，品质上乘。树势中庸，结果早，丰产性强。红富士 系日本品种。果实于10月下旬至11月初成熟，短圆形，单果重200～250克。成熟时果皮底色绿黄色，果面有条红和片红两种着色系（图2-11，图2-12）。套袋后果色更加艳丽。果肉淡黄色，细脆汁多，味甜带酸，具香气，品质极上等。树势生长中等。要求有较好的管理技术。丰产。图2-10 华冠苹果图2-11 富士苹果图2-12 弘前富士苹果优系红富士有长富2号、岩富10号、2001富士和短枝富士等。短枝富士有宫崎短富和礼泉短富（图2-13）等品种。粉红女士 系澳大利亚品种。果实于11月上中旬成熟，圆形，单果重160～200克。成熟时果皮底色为黄色，果面鲜红色，外观艳丽（图2-14）。果肉白色，肉质较硬，味甜酸。稍加存放，果味更佳。果实耐贮运。树势中等。早果，丰产。澳洲青苹 系澳大利亚品种。果实于10月中下旬成熟，圆锥形，平均单果重200克。成熟时果皮翠绿色，光洁无锈，皮厚（图2-15）。果肉绿白色，肉质脆密，汁液较多，风味酸，宜加工果汁。树势强健，树姿直立。丰产。图2-13 礼泉短富苹果图2-14 粉红女士结果状图2-15 澳洲青苹果高接换头是指将接穗嫁接在砧木树干上端或各级枝条上的一种农艺措施，是苹果品种更新改造的重要途径。它的主要特点是嫁接后能保持接穗品种的优良性状，能充分利用现有果树资源，树冠恢复快。与新建果园相比，结果早，易丰产，早受益。因此，目前已被广泛应用于苹果品种结构调整中。准备工作主要是选择、采集和贮藏好接穗。确定高接品种，应根据当地品种区域化的要求，选择适合于当前和未来市场需求的优良品种。可参照前述的品种和优良品种介绍选定高接品种。春季高接所用接穗，应在冬季修剪时结合修剪采集。采集接穗应选择健壮、无病虫害，特别是无病毒病的正常结果期树作为采穗母树，最好以无毒树作为母树。在母树上采取生长健壮、芽子充实饱满的1年生枝条，一般不宜采用幼树的枝条或徒长枝。接穗采好后，每50～100根捆成1捆，拴上标签，标明品种名称。成捆的接穗在果窖、菜窖或地沟中贮存，埋藏于湿沙中，以防止枝条失水。在贮藏期间，保持0～7℃的低温和一定的湿度，并要定期（20～30天）检查，勿使沙子过干或过湿，以防接穗发霉或干缩。翌春树液流动时取出嫁接，嫁接前最好将接穗下端在清水中浸泡1昼夜，使其吸足水分并促进形成层活动，以提高嫁接成活率。秋季嫁接所需接穗可随采随接。此外，高接前要准备好包扎用的塑料条和嫁接刀、剪枝剪、手锯等嫁接工具，并对嫁接工具进行消毒处理。消毒的简易方法是用酒精擦洗工具或将工具在3～5倍的浓碱水中浸泡6～12小时。嫁接方法很多，在高接中常用的方法主要有以下几种。此法适于在砧木或接穗不离皮时或接穗紧缺时采用（图2-16）。削接芽 先从芽的上方1.5～2厘米处向下斜削1刀，由浅入深切入木质部，长2.5～3厘米，芽体厚度2～3毫米。然后在芽下方1厘米处以30°～45°角斜切入木质部至第一切口底部，取下芽片。削砧木切口 砧木切口削法与接芽削取方法相同，但长度应稍长于芽片。图2-16 带木质嵌芽接嵌芽片 把接芽嵌入砧木的切口，与形成层对准，插入时最好使芽片和切口正好吻合，或使接芽上方周围露出一圈砧木皮层。绑扎将接芽和砧木切口用塑料条扎紧包严。秋季高接时，不露芽子，不解绑，翌春萌芽时再解绑。春季高接时要露出芽子。是枝接中应用最广泛的一种方法，嫁接技术简单，容易掌握，操作方便，成活率高，适用于各类枝的嫁接，但必须在砧木离皮的情况下进行（图2-17）。嫁接成活后，应对嫁接枝进行保护，否则，易被风吹折。削接穗先在接穗下端削一长度为3～4厘米的斜面，斜面要求平、长、薄。再在长削面背面削一长度为0.5～0.6厘米的小斜面。切接口从砧木剪（锯）口开始，选皮光滑的地方，从上向下竖切皮层，深达木质部，长2～3厘米。插接穗 用刀尖左右轻挑开切口皮层，将接穗大斜面向里，小斜面向外，插入砧木切口。要注意使接穗大斜面上端“露白”2～3毫米，以利愈合。图2-17 皮下接绑缚 将接口和砧木剪（锯）口断面处用塑料条包严绑紧，使接穗和砧木密接，以利成活。是一种应用较为广泛的枝接方法，适用于各类枝的嫁接，在砧木离皮前后均可进行（图2-18）。此法较皮下接难掌握，效率较低。但成活后枝条比较抗风，不易劈枝，牢固性较强。图2-18 劈接削接穗将接穗的下端削成楔形斜面，即削成两侧相等的双斜面，但要使其形成外厚内薄而呈楔形，斜面长度3～4厘米。切接口 在砧木横断面的中间，由上至下垂直劈1刀，切口长度3～4厘米。砧木断面要求用快刀削平滑。插接穗撬开砧木切口，将接穗轻轻插入砧木，厚侧面向外，薄侧面在里，对准形成层，并注意使接穗削面在砧木外“露白”2～3毫米，以利分生组织形成和愈合。绑缚与皮下接相同。是在砧木腹部进行的一种枝接方法。嫁接时不必剪断砧木，砧木与接穗接触面大，成活率高。此法多用于高接树内膛插枝补空或补接授粉花枝，但须在砧木离皮时方可嫁接（图2-19）。图2-19 皮下腹接削接 穗接穗的削法与皮下接相同，但最好选下端有弯度的枝条作接穗，并将大削面削在弓背一侧，以便嫁接后接穗与砧木间的夹角增大。切接口 在砧木的嫁接中位切一“T”形切口，深达木质部，竖口方向与枝干成45°，在横切口处挖去一块半圆形韧皮部。插接穗 将接穗大斜面向里插入砧木切口内。绑缚 用塑料条包严绑实。高接换头的方式很多，无论采取哪种方式，都要以“提质增效”为目标。为了实现这一目标，在高接时务必与树形改造相结合，即对原树进行高接换头时，根据树龄和密度大小确定改接成什么树形，并根据确定的树形整理骨架，选择高接方法，以达到早成形和规范树形的要求。1.整理骨架一般每亩栽植83株以上的密植园可按细长纺锤形整理骨架。嫁接部位包括中心主枝和主枝共二级结构，可嫁接15～20个头。按照此标准，疏除多余枝条，保留枝条从基部留5～10厘米短桩锯断，将断面用快刀削平。最高嫁接部位（即中心主枝延长头的嫁接位点）距地面以2米左右为宜。2.高接技术要点高接方法可采用带木质嵌芽接及皮下接或劈接（图2-20）。图2-20 按细长纺锤形高接带木质嵌芽接一般适于树龄为5年生以下的幼树，每头仅接1个单芽，成活后易形成单轴延伸的小主枝，整成细长纺锤形比较容易，管理方便。一般春季和秋季均可嫁接，但以秋季（8月中下旬至9月上旬）嫁接较为适宜。皮下接或劈接法一般适于5年生以上的结果树，每头可接1～2个接穗，砧木较细时接1个接穗，较粗时可接2个接穗，以保证成活和促进伤口愈合。接穗长度为8～110厘米的短接穗，其上有2～3个饱满芽。每头嫁接2个接穗时，可采取长短接穗配合，长接穗一般长度为15～20厘米，其上有6～10个饱满芽。在内膛缺枝部位，可采用皮下腹接法补空。上述皮下接、劈接及皮下腹接的适宜时间是春季树液流动后的萌芽前后。1.整理骨架一般每亩栽植83株以下的果园可按小冠纺锤形整理骨架。嫁接部位包括中心主枝、基层主枝及中上部小主枝，全树可嫁接20～30个头。以此为标准，在树冠基层选留3～5个小主枝，每个小主枝上留1～2个枝作为辅养枝，将主枝头距有分枝处10厘米锯断，将其上分枝距基部5～10厘米处锯断。在基层主枝以上的中心干上，选留8～10个枝条作为中上部小主枝，在距中干基部5～10厘米处锯断，并将断面削平。将其余枝条从基部疏除。最高嫁接部位（即中心主枝延长头的嫁接位点）距地面2米左右。2.高接技术要点高接方法采用皮下接或劈接，内膛缺枝部位可采用皮下腹接补空（图2-21）。其余高接技术要点可参照“按细长纺锤形高接”部分。大抹头高接是一种古老的嫁接方法，多年来弃之不用，近年来经改造后又被使用。原来的大抹头留干较高，在其上嫁接4～5个接穗。经改造后留砧桩较低，一般在距地面5～10厘米处锯断，改接较为彻底。采用皮下接或劈接法嫁接2个接穗，即1个长接穗（长度为1米左右），再配1个短接穗（长度为40～50厘米），再将两个接穗靠接，以便于接口愈合及增加牢固性（图2-22）。接好后包扎严紧并用湿土堆埋，以利成活。此法适用于各种树龄，在春季萌芽前后嫁接。原树为元帅系品种最好采用此种方法高接。另外，乔化砧树改矮化砧时，此法效果最佳，即在砧台上嫁接一复合接穗（接穗下端为长20～25厘米的矮化砧，上端为品种接芽或接穗），便可将原乔化树改换为矮化中间砧树。图2-21 按小冠纺锤形高接已初步查明高接病主要有两种：一种是生理性原因，即嫁接所用砧木与接穗品种不亲和或亲和力差。如在红玉品种树上高接元帅或富士系，有的嫁接枝、芽根本就不成活，有的枝、芽在嫁接成活后生长逐渐衰弱，直至全部死亡。另一种是病毒所致，即由褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒和苹果茎痘病毒3种潜隐性病毒中两种以上复合感染引起的。图2-22 大抹头蹲接+靠接患潜隐性病毒病的高接树地上部一般表现两种症状：一是急性症状，即“苹果衰退病”。高接病树表现为叶片小而硬，色黄，秋季落叶早；新梢总数减少30%～40%，总生长量减少25%～50%；花芽数量多，坐果数增多，果个变小，产量降低20%～60%；果实着色早，品质下降。发病后树体3～4年衰退死亡。解剖病根观察，有些高接树根木质部表面有凹陷斑。二是慢性症状，病树表现为生长不整齐，新梢数量、生长量都明显下降，树势衰弱，结果较晚，一般高接后3～4年才见产量。果实裂果严重，着色差，糖度下降，品质降低，不耐贮藏，树体需肥量增多，其中氮肥施用量要增加30%～45%，才能保证正常的生长结果。为预防高接病的发生和发展，在高接时和高接后应采取以下预防措施。其一，避免高接不亲和或亲和力差的品种。其二，杜绝对带毒砧树和用带毒接穗高接。应用无毒接穗高接。无毒接穗应采自无毒母树园，尽量不用高接树上繁育的接穗。其三，发现由病毒引发高接病树已明显衰弱者，应及时挖除，以免传染。其四，对初发病树可采用脚接技术防止树体很快衰枯、死亡。发现高接树新枝生长变弱，细根有枯死时，在树下根周栽植3～5株健壮的无病毒圆叶海棠或金冠、国光等品种的实生苗，等成活后采用脚接法嫁接于原来的树干上，这样可保持树体在接后的几年里正常生长结果。其五，对高接更新的果园，要加强以增施有机肥为主的地下管理措施，增强树势，提高抗病能力。