一个健康的企业需要一个适宜的企业制度支撑。建立现代企业制度，企业应当按照现代组织理论的要求对企业组织制度实行改革，其基本原则就是专业分工与协作的原则。分工是现代化大生产的重要标志，但是分工并不是生产的专利，企业的管理工作也需要实施分工。生产分工越细越专一，越专一效率越高，这样给企业创造的效益也就越大。对管理工作实行专业分工，可以把各项专业管理工作搞得更加有声有色、更加深入细致，从而有利于提高管理效率，同时也有利于培养专业管理人才等。企业职能机构，作为企业管理职能的载体，是实现企业发展战略的基石，通常又称为企业组织体制或组织结构。按照部门的职能大小和机构的数量多少不同，企业职能机构设置一般分为“小部制”和“大部制”两种类型。小部制的特征是部门设置机构数量大、管理领域窄小、专业分工细、职能交叉多。目前，我国大部分国有企业实行的是小部门体制，在国有企业尤为盛行，由此引起了人员臃肿，部门间沟通不畅，令行不止等诸多诟病。相比而言，大部制是一种现代企业综合管理组织体制，其特征是在管理过程中各部门职能综合性强、管理范围宽，部门与部门之间扯皮少，政令通畅，工作效率极高。党的十七大的召开后，国家职能部委间开始推行大部制改革，企业职能部门的大部制也随即推上了改革日程，这对接下来的企业管理体制改革的发展方向是具有深远意义的。以某国有大型制造业企业为例，该企业目前职能机构的设置就是典型的小部制体制，各种管理职能机构达30个之多。部门与部门之间存在严重的职能交叉、权责脱节的问题。而实行大部制后，企业可以在信息技术基础的配合下，以系统化的管理思想，为企业决策层、执行层、监督层和员工之间提供管理运行手段，这样对企业可以合理调配资源，完善企业运行机制，履行企业管理职能，以达到最大化地创造企业财富的目的，同时也能通过此方式达到裁减冗员的目的，最终实现企业在市场经济中博弈胜出的有利局面。小部制的实施，很多是企业多年沉淀下来的弊病，由此引发职能的分散和管理层的臃肿现象，既不利于集中统一管理，加强企业应有权威，也不利于落实“问责制”和建设责任到人企业。而大部制则强调的是在分工细化基础上的一种有机统一的全局管理机制，这样能够较好地协调职能机构统一和管理分工的关系，对于协调部门关系、强化企业权威和落实责任追究制具有重要意义。如果企业能将职能部门数量控制在10个以内，则有利于政策指令上通下达，便于管理的衔接和延续。一要实现整合机构，减少管理的层次和环节，优化管理结构。二要实现整合职能，有机合并相近职能，实现一个问题由一个部门全程解决的目的，避免职能交叉。三要实现整合权责，健全企业的权责体系，形成部门间的合理权责构成，达到出现问题能找到责任人的目的，能更好的落实“问责制”。四要实现整合机制，使大部门内部的运行机制能平稳执行，降低协调成本，提高企业管理效能。一要总体统筹职能设置，构建行为监管、经济调节、政策落实和运营管理错落有致的职能构架，使得每一个部门设置都有存在的价值、都能在某一领域独当一面的管理框架。二要总体统筹权力配置，增强企业高层领导团队对下属各职能机构的统筹能力，同时划清他们之间的工作权限。三要总体统筹各种关系，统筹企业人力资源、资产财务、生产制造、设计研发、市场营销等各方面的关系，以及明确相互之间的利益关系，做到一切从企业利益出发的决策指导。一要回应市场经济发展的需要，及时收集市场环境信息，根据阶段政策调整企业发展策略，加强企业发展规划，弱化微观管理，促进在大环境下企业健康有序的快速发展。二要回应行业发展的需要，根据行业市场需求充分发挥部门间的自主策略，做到每一项决策都是有据可依，每一项工作都是有理可靠，保障企业基本管理的良好进行。三要回应技术发展的需要，给研发部门充分的发展空间，减少技术管理层面上的多层领导，实行独立发展策略。四要回应利益多元的需要，充分考虑职工利益与企业利益、企业利益与集团利益、集团利益与社会利益的平衡，有效的防止追逐违法利益的现象发生。一是要进行改革的总体设计，形成包括近期规划和远期改革的整体方案，这样能使企业一直在正确的轨道上运营，而不至于被突发事件搞得措手不及。二是要实行分层要求，对各部门的改革既要明确共同性，又要有不同针对性。改革是长远的，不能是一蹴而就的，需要循序渐进，出现不同的情况要有不同的处理方式。三是要实行分步实施，既要考虑改革目标的实现，又要考虑改革的现实可操作性，尽可能减少改革所带来的负面效应和消极成本。实行企业职能机构大部制改革，应更新理念，运用现代化的组织理论来指导企业组织机构改革，避免传统组织理论的束缚。同时，按管理综合化、精细化的原则，从立项到研发，从生产到销售都要做到连续一贯，把职能相关性强的部门归并到一起。其实施可以归并总结为以下五种形式：在制造业企业中，我们可以将原材料采购、辅助材料采购、设备及相关配件采购、基础建设用料采购，以及办公用品等物资采购归并一起，设立大物资采购部。避免现在的兵分几路、层层审批，多个部门负责不同项目采购的现象。对于企业产品的发送运输可以归并给负责产品生产的生产制造部，这样企业就将所有的生产计划以及物流计划都作为一个整体盘算，便于产品生产和运输的有机整合。同时，可以将检验部门也归生产制造部统一管理，对于在生产过程中的产品质量检验都能顺利穿插进行，并都可以在生产计划中统筹安排。设立具有管理和辅助作业双重职能的部门。对于制造业企业，有很多的加工设备需要维护、保养、维修，我们可以把企业所有的设备（包括生产车间的重型加工设备和办公室的计算机等小型设备）维护都归拢给设备动力部统一负责。除此以外，凡涉及设备动力问题的，我们都可以将类似动力源的生产和管理一并交给设备动力部管辖。传统组织理论要求执行机构同监督机构分开设置。也就是所谓的立法部门必须同执法部门分开设置，这样有利于相互制约，是进行有效控制和管理的重要条件。现代组织理论则认为，执行和监督分设总的来讲是正确和必要的，但同样也会导致机构增多、程序复杂、效率下降等弊病。企业不必国家，相比而言，我们可以尝试在一定条件下，可以对这一原则加以突破，以保证效率原则的贯彻。机械制造业企业与别的企业不同的地方，很大一部分在研发方面。基本所有的机械制造业企业都需要一个庞大的研发机构和技术部门体系，所以在技术先行的前提下，技术方面的机构是有“特权”的。在大部制结构体制下，应该设立一个技术开发中心，其中包括研发、设计、工艺、试验、网络等多个部分。这种良好环境的创造，有利于企业在技术方面的综合发展，对保证企业技术先进和留住技术人才都有至关重要的作用。目前大部分小部制企业的决策职能、执行职能和监督职能不分，监督流于形式，使得决策部门普遍受到执行利益的干扰，导致“问责制”的实施更加困难，企业利益部门化。要解决这个问题，就是要探索建立决策、执行、监督既相互协调又适度分离的运行机制，实现决策科学、执行顺畅、监督有力。这样三者间就能形成一个相互制约、共同发展的良好局面，从而达到事半功倍的效果，这样也就从根本上完善了企业决策执行监管体制。目前，多数企业的综合管理职能与专业管理职能配置不科学。综合管理部门权力过于集中，以致专业管理部门类似项目立项、资金支配等事项都要经过综合管理部门的层层审批，统筹协调困难。因此，必须进一步理顺综合管理部门与专业管理部门的关系，做到各负其责、相互协作。一是综合管理部门要明确定位，主要负责研究制定企业战略、重大规划、协调解决生产过程中的重大问题。二是适当拓宽专业管理部门的权责范围，在条件允许的情况下，给专业管理部门开足绿灯，让其根据自身情况，在不违反企业大规划的前提下，调整自身发展策略，良好运作。企业大部制改革作为企业管理体制改革的关键环节，一定会涉及各部门领导之间复杂的利益关系，所以说这是一项系统工程，必须要有完整的改革规划，坚持整体改革的原则，使大部制改革与其他改革同时进行，并相互协调、彼此促进。由此，要借鉴发达国家的相关经验，首先改革财务管理体制，从源头上控制和降低管理成本，充分发挥财务管理改革对巩固改革成果的约束作用。事实上，很多企业的改革往往是迫于种种外界压力，临时应付，一般只是表面上部门数量的减少，并未触及深层的职能机构优化，缺乏指导改革实践的较为系统和理性的、前瞻性的理论阐释。也就是说，这类企业的大部制改革理论滞后于实践。当前，在新形势下加快企业现代管理体制改革和推行企业职能机构大部制的实施，应从价值选择的角度讨论企业改革。要重视实证研究，调查和总结企业职能结构设置和改革的经验，提炼出具有规律性的通行做法，寻找一条适合自身企业发展的有效的职能机构大部制改革方案。

传统零售业经过上百年的发展，随着人类进入21世纪，互联网快速发展，网上购物成为当下购物时尚，并逐步冲击着传统零售企业。网上购物的出现，使人们享受到了足不出户就能购买商品的便利，也为商家带来了新的赢利手段。据有关研究报告显示，2007年中国网购市场规模达514.42亿，较2006年增长74%。其中C2C网上零售市场交易规模达468.01亿元，较2006年增长81.2%。中国C2C网上零售市场经过数年发展，2007年已占网上零售市场91%的市场份额，成为网上零售市场中的最主要组成部分，推动中国网上零售市场的用户使用习惯的形成和网上零售产业环境的逐步完善；C2C网上零售市场发展迅速，其增长主要来源于用户量以及用户平均消费金额的双重快速增长，尤以淘宝网更为明显。网上零售已渐渐显示出它的优势和生命力，但网上零售行业在与传统零售业相比显示其优势的同时，也表现出了它的不足。在商场，顾客是通过看、听、闻、摸等多种感觉来对产品进行判断与选择的。而网络购物只提供了二种可能——看和听。这势必对消费者的刺激大大减弱。对于相当一部分人而言，身临其境的购物是一种社会实践，是一种接触社会的机会，是一种享受。网上购物失去了上街闲逛的乐趣，对那种热烈的现场气氛的感受大大减少，购物过程的乐趣大大折扣。而在我国，上街购物仍然是许多居民一种主要的休闲方式。传统的店面销售所营造出的友好和谐的购物环境，良好的销售人员形象的塑造，对于消费者购买心理产生的影响、刺激作用也因为网络购物的虚拟性而不复存在。因此，人际化沟通与切身感受的缺乏是网上购物的不足之处。在传统的购物过程中，由于人群关系的影响，人们喜欢在服饰、化装等方面展示自我的个性和生活的状况，享受别人的欣赏与羡慕。出入高档商店、在高档的商品柜台前享受售货员细致入微的服务，看着人们羡慕的眼光，都会给人们的心理带来极大的满足感。而在网络购物方式下，这种购物心理上的满足感是无法达到的。虽然从理论上讲任何产品都可以进行网上交易，但在实际的操作过程中，仍有许多产品不适合网络销售，这涉及产品的物理属性与特点。目前在线销售最成熟的实物产品要数计算机硬件、音像制品、家用电器以及书籍销售了。因为这些产品的物理性质决定了方便配送以及在配送过程中不易耗损和破坏。网购作为一种消费行为，毕竟是一件耗时耗费的事，互联网上提供的精彩内容与便捷服务常使得网民的购买注意力下降，网民容易沉溺于网络之中。尽管互联网给人们带来了休闲、轻松的体验，人们仍需要承受一定的精神压力和代价，网民长时间沉溺于网络之中还易患“上网综合症”，严重的还会损害健康，相对于“逛”商场的惬意、休闲，这也是不容小视的。当然，与网上购物蓬勃发展之势相比，这些瑕疵只是发展中的缺憾。艾瑞咨询提供的数据显示，2008～2011年的四年时间里，中国B2C电子商务的市场规模将会以年均75%以上的速度增长，也就是说每隔两年时间，网络购物的市场规模就会扩大两倍以上。上网购物已经从一种时尚行为转变为众多网民的生活习惯，而他们当中相当部分人群正成为中国现在和未来消费市场领域的中坚力量。可以预见，中国网购市场将会有更快速发展。当数年前人们还质疑网上购物的种种局限时，网上购物销售规模却在飞快递增、迅速发展，与中国零售业市场发展相比，大有后来居上的势头。互联网的产生与发展，是信息革命中具有里程碑意义，网络购物是世界也是中国发展的必然趋势，网络购物的迅速发展，在改变着世界，改变着消费者，消费者的购物习惯也在悄然发生转变，面对不可逆转的发展潮流，传统零售业也不甘示弱，纷纷挤上网上购物这列快车成为必然。北京西单友谊集团（爱购网）、王府井百货集团（劲购网）、当代商城等传统零售企业的网上购物商城雨后春笋般开设。相对于年销售额在10亿元的商场，其商品品种相当丰富，可达5万种以上之多，而网购的商品品种却只近万种，而若以销售品种与销售额比例比较，可以想见网上购物的魅力、潜力、生命力之强。据统计，目前在美国开展B2C网络营销的企业中，70%来自于传统零售企业。而据中国连锁业经营协会公布的2004年中国连锁百强企业中，70%的企业建立了网站，通过互联网宣传企业形象、招商引资、提供客户服务，其中有26%的企业开展了不同程度的B2C网络营销，实现网上购物。在中国，数据显示分析，传统零售企业的网上购物商城业务并不像商场那样红火。与国外网上零售迅速发展以及众多传统零售企业涉足网上零售并有可观收益不同，国内的零售网站还在艰难起步，而由传统零售企业建立的零售网站更是生存乏力。北京的零售企业的网购销售情况也大致相似，以某一知名零售企业为例，2007年商场零售总额为13亿，网购销售额3700万，2008年1～9月网购销售已经完成去年全年销售指标，但预计销售份额也不会超过商场零售总额的5%。目前，通过网上交易导致的年销售成本和采购成本降低幅度均在5%以下。一个年销售额12亿元的大型成熟商场，其网上购物销售额还不到商场销售额的5%。调查显示，一般消费者认为，虽然在商场可以放心购物，但是网上购物已经成为80后的生活习惯、时尚，相对于拥堵的道路，生活、学习、工作的压力，他们更喜欢在淘宝、易趣、卓越等电子商城“挑选”、购买商品。传统商业开网店的做法，与当下流行的淘宝、易趣等网络开店有所不同，采用的是线上、线下相结合的方式，被业界称作“鼠标+水泥”；而后者完全依靠网络上的虚拟店铺，没有实体店铺展示。中国互联网协会营销工作委员会认为，“鼠标+水泥”模式既能够发挥传统门店集中展示、集中销售的特点，也能够为习惯网络购物的用户提供便利。传统零售企业开展网上购物商城业务已成为共识和发展趋势。尽管网上零售业具有传统零售业不具备的一些优势，但是由于自身条件的制约，从目前来看不可能取代传统零售业态，网上零售业应该是传统零售业的一种有效的补充形式。随着网上零售环境的逐渐成熟，将会对传统零售业的许多方面造成很大的冲击，传统零售业也要不断调整其经营的范围和方式，积极参与竞争，取长补短，尽快扭转目前传统零售企业开展网上购物的被动局面。传统零售企业的发展，关键在打造企业核心竞争力，同样，传统零售企业网上购物，也要锻造其网上购物商城核心竞争力。企业需要丰富产品的目录、产品介绍，以及其他顾客使用产品的亲身感受，要在网络上营造一种生活和文化氛围，一个精神世界，这样可以帮助顾客找出潜在的心理需求，激发顾客的购买欲望，有了愉快的网上购物经历，顾客会把企业当成身边不可缺少的好朋友，保持对企业的忠诚。不断推出、革新、改良各种网上零售特色服务，包括网页页面、色彩、检索速度、相关联商品检索，利用网页的安排和设计技巧，使顾客很容易的了解产品的信息并产生互动，激发购买欲望。对于一些复杂的产品就可以采用交叉式的促销策略，针对不同的客户群采用不同的服务方式，甚至开发出商品图像与解说伴音，培养浏览商品兴趣，提高网站的顾客忠诚度、美誉度、知名度，其中包括：向顾客推荐商品、提供免费礼品、开设特色商品页面、设置畅销商品排行榜等，以方便消费者对商品的选择、比较、购物。网络营销要追求更广阔的市场空间，甚至把自己定位于有别于传统业务的细分市场。清晰的市场定位、明确的细分市场，网络营销需要结合自身的特点，占领更多的市场，甚至面对有别于传统门店的客户群，吸引更广大的线上、线下消费人群。通过网络营销来弥补门店数量上的不足、降低经营成本、增强企业的赢利能力，提高自身与国外零售巨头对垒的实力。但是，在可以预见的未来，具有强大竞争力和经营活力的大型零售企业一定是传统业务与电子商务紧密结合、线下与线上资源优势互补的业态形式。网络营销部门在零售企业中应当作为一个部门存在，或者是其全资控股企业，纳入零售企业的总体组织架构之中，由高层管理人员直接负责。这样网上网下拥有共同的战略目标，实现统一管理，也有助于解决网上零售所涉及的安全、诚信诸问题。统一的管理团队可以更好地协调网上网下部门的市场推广策略，共同扩大市场份额。而品牌、业务的结合更需要紧密地协调一致，管理团队的相对独立可以有效地提高效率，降低成本，共享知识和信息。在保持相对独立性方面，西单电子商务网站（Igo5.com）可以借鉴，在品牌上突出西单商场的同时也注意突出Igo5的形象。他们把家用通信产品、摄影器材、小家电、化妆品作为主要经营品种，这与西单商场以服装、百货为主的经营方向有很大不同。西单电子商务网站建立了独立的价格、采购、物流仓储和客服体系。相对独立性让西单电子商务网站拥有了更灵活的业务和更多的网民消费群体。零售业的电子商务并不仅仅只是局限于在网上开展销售业务，更主要的是应用信息网络技术，对企业的业务活动进行管理。传统零售、零售业电子商务与网络营销的整合，即在实体商店的基础上开展网络营销，这样既可以适应消费者的购物习惯，充分利用企业原有的资源，同时又能发挥计算机信息网络的技术优势，提高企业营销活动的效率和市场竞争力。电子商务的发展促使企业充分意识到：要增强企业竞争力，就要充分利用信息技术，提高经营管理水平。比如采用电子商务方式进行集中的采购管理，这样必然会提高采购环节的透明度，降低采购成本；利用统一的财务管理软件，直接控制收入和费用支出，这必然会降低企业的经营分险，提高经济效益。信息技术在企业经营管理活动中的应用水平，很大程度上反映了这个企业的市场适应能力和竞争能力。客户关系管理的目的是通过网络和计算机的应用使客户关系回报最大化，使企业和客户共同得益。客户关系管理在零售业的全面应用，将会对零售企业的决策支持和智能分析提供重要的依据，可以有效分析企业市场活动的回报，挖掘企业产品的市场卖点，确定企业的主打产品，进一步明确客户需求，并为他们提供更多更好的个性化服务，最大限度地提高他们对企业的忠诚度。电子商务对中国零售企业来说既紧迫又艰难，但是市场竞争、市场潮流不可阻挡，中国零售企业只能通过应用新的信息技术来快速提升自己的市场竞争力，从而推动新的商业模式在中国的快速形成。目前，在遭受金融危机的重创之后，传统的零售商为了增强竞争力，吸引更多的顾客，提高销售额的需要，正不断加强网上销售业务。这也是零售业在面对世界经济发展进程中的机遇与挑战。

Konjac glucomannan(KGM),derived from the tuber of Amorphophallus konjac C.koch,has traditionally been consumed as rubbery jelly,noodles,and other food products in Asia for centuries.It is also used as food additives in Western countries.Clinical studies have indicated KGM supplement normalizes the mouth-to-cecum transit time and relieves constipation for children and adults[1].In order to meet the increasing demand for konjac,more area is employed to plant A.konjac C.koch.With the increase of plant area,some diseases have appeared,and soft rot is the severest one.Huang et al.[2] showed that konjac soft rot was caused by Erwinia carotovora subsp.carotovora.E.carotovora subsp.carotovora is a plant pathogen responsible for producing soft rots in many vegetable and floricultural crops,and responsible for significant economic losses to the konjac industry each year for the causal agent of tuber soft rot[3].Tuber contamination can occur in field and in storage.Infection may occur at any stage of post-harvest handling including washing,grading and packing.Symptoms may develop slowly during cold storage;as temperature increases and conditions become favorable for disease development,thepathogen proliferates,resulting in rapid tissue breakdown.Contaminated tubers that are used as seed,may cause disease problems in field[4].Bacterial soft rot caused by E.carotovora subsp.carotovora occurs worldwide and is one of the most destructive diseases of plant's tubers(e.g.,potato,konjac).Many researchers have demonstrated the potential of control of soft rot of potato etc.Several salt compounds were tested in vitro as inhibitors of E.carotovora subsp.Carotovora[4].Acidified Oxine was demonstrated to be potentially effective in preventing potato spoilage(caused by E.carotovora)without any significant risks of chemical residual or change of skin color[5].Harris[6] found a chemical compound of 5-nitro-8-hydroxyquinoline was the most effective in control of potato soft rot.Biological control is an alternative[7].Cladera-Olivera et al.[8] showed that the soft rot bacterium E.carotovora from potato was inhibited by a novel bacteriocin-like substance produced by Bacillus licheniformis P40.Biological control offers an environmentally friendly alternative to the use of pesticides for controlling plant diseases.Unfortunately,growers continue to use chemical control over biological agents,and lack of knowledge often contributes to the downfall of a biocontrol agent.Knowledge of the biological environment in which the agent will be used and of how to produce a stable formulation are both critical to successful biocontrol[9]. And also,biological products may not consistently provide a high level of disease control[10].Therefore agricultural disease is controlled mainly with pesticides.Numerous pesticides have been tested for efficacy against soft rot E.carotovora on potatoes[11,12],but little was done on the soft rot of konjac tubers.Current control strategies aim to reduce soft rot of konjac tubers in field and storage by employing pesticides.In China,a wide range of pesticides is registered for control of bacterial soft rot of crops.However,there is no special pesticide for konjac soft rot,and most pesticides didn't control konjac soft rot effectively.Therefore,growers were driven to use pesticides blindly.Unreasonable use of pesticides has not only given rise to serious environmental problems,but also caused great waste of resources.The aim of this research was to evaluate seven pesticides and their effect on inhibition of soft-rotting bacterium from Konjac.Strains of E.carotovora subsp.carotovora were provided by Hubei Key Laboratory of Natural Product Research and Development,China Three Gorges University,Hubei Province,China.Pesticides were bought from a pesticide market in Yichang city,Hubei Province,China.The active constituent of each pesticide was Streptomycin,Carbendazim,Kasugamycin,Thiophanate+methyl,Oxadixyl+Mancozeb,Mancozeb or Phosethyl-Al+Mancozeb.Pesticides were prepared according to their instructions using sterile pure water to obtain the maximum concentrations.The in vitro screening trial of antimicrobial activity of seven pesticides was carried out by disk diffusion test[13] using 100μl of suspension containing 108 CFU/ml of bacterium spread on nutrient agar.Small filter disks were generated using a standard 6mm hole puncher andsterilized by autoclaving,and then dried at 80℃.Paper disks were dipped into each solution for 1min in order to assure that paper disks had been saturated with a pesticide solution,whereas those of the controls were dipped into sterile pure water.The inoculated plates with E.carotovora subsp.carotovora were incubated at 27℃ for 24h.The diameter of the clear zone around the disk was measured and expressed in millimeters as its antibacterial activity.The net zone of inhibition was displayed by subtracting the disk diameter(6mm)from the total zone of inhibition around the disk.Five disk per plate and three plates were used,and each test was run in triplicate[14].The MIC and MBC were determined by a modification of the broth microdilution method as previously described by Fazeli et al.[15].And there were five dose points(by two-fold serial dilutions from maximum concentrations according to the instructions)tested in this study.Pesticide was prepared in sterile Nutrient broth to reach a series of two-fold dilutions.Bacterial cultures were diluted in Nutrient broth from the stock of 108 CFU/ml before they were added to the pesticide preparations.Final concentration of bacteria in individual tubes was 1~5×105 CFU/ml.Control tubes contained no pesticide.After 24h incubation at 28℃ the test tubes were examined for possible growth and MIC of each pesticide were determined as the lowest concentration that ended with no growth.Tubes containing pesticide concentrations above the MIC were streaked onto nutrient agar plates to achieve MBC of pesticide against the tested strain.Each experiment was performed in triplicate.The data were statistically analysed by using the one-way ANOVA(SPSS 12.0 for Windows),and were expressed as mean±standard deviation(SD).The differences between treatments were also compared.A P value of less than 0.05 was considered statistically significant.According to the results(Table 1),both Oxadixyl-Mancozeb and Mancozeb showed antibacterial activities at the maximum concentrations within the applied concentration range according to the instructions.The growth of E.carotovora subsp.carotovora was inhibited by Oxadixyl+Mancozeb at concentration of 1μg/ml,and the inhibition zone reached(5.33±0.71)mm.At the concentration of 1μg/ml,Mancozeb inhibited the growth of tested bacteria,and the inhibition zone diameter was(4.22±0.83)mm.Streptomycin,Carbendazim,Kasugamycin,Thiophanate+methyl and Phosethyl-Al+Mancozeb didn't expressed antibacterial activity against E.carotovora subsp.carotovora.MIC and MBC of Oxadixyl+Mancozeb and Mancozeb were determined.Oxadixyl+Mancozeb and Mancozeb were found to have the same MICs and the same MBCs.The MICs of both pesticides were 0.25μg/ml,and MBCs were 1μg/ml(Table 2).ActiveconstituentsoftestedpesticidesInhibitionzone(mm)Streptomycin(0.18μg/mla)0bCarbendazim(0.8μg/ml)0Kasugamycin(0.4μg/ml)0Thiophanate+methyl(0.5μg/ml)0Oxadixyl+Mancozeb(1μg/ml)5.33±0.71cMancozeb(1μg/ml)4.22±0.83Phosethyl-Al+Mancozeb(0.4μg/ml)0Table 1 Antibacterial activities of seven pesticides agaist E.carotovora subsp.carotovoraAccording to the results(Table 2),both Oxadixyl-Mancozeb and Mancozeb showed strong bactericidal activity with the MBC at 1μg/ml.E.carotovora subsp.carotovora was sensitive to both Oxadixyl+Mancozeb and Mancozeb.ActiveconstituentsofpesticideMIC(μg/ml)MBC(μg/ml)Oxadixyl+Mancozeb0.251Mancozeb0.251Table 2 MIC and MBC of Oxadixyl-Mancozeb and Mancozeb against tested bacteriumMany studies showed that Streptomycin,Carbendazim,Kasugamycin,Thiophanate+methyl,Oxadixyl+Mancozeb,Mancozeb and Phosethyl-Al+Mancozeb could control konjac soft rot caused by E.carotovora subsp.Carotovora[16~19].But,the bacterial soft rot is still a major problem encountered in konjac during postharvest storage and in field.The soft rot bacterium Erwinia carotovora was not inhibited by some pesticides used by people.This problem could be attributed to unreasable use of pesticides,so it is necessary to assess effect of each pesticide before application.Seven pesticides were screened against the soft rot pathogens of konjac tubers.Oxadixyl+Mancozeb and Mancozeb were the only pesticides which completely prevented infection at concentration of 1μg/ml according to their instructions.Nevertheless,Streptomycin,Carbendazim,Kasugamycin,Thiophanate+methyl and Phosethyl-Al+Mancozeb didn't exhibit antibacterial activities against soft-rot causing strain at their higher applied concentrations.Therefore when growers faced severe problems with soft rot,they employed a lot of pesticides to protect konjac tuber,but the disease couldn't be controlled effectively.Oxadixyl+Mancozeb and Mancozeb inhibited soft rot bacterium at 0.25μg/ml,but did not give complete protection against infection for longer time.In order to control konjac soft rot,these pesticides could not be used at a concentration lower than 1μg/ml.According to these observations,we can speculate that Oxadixyl+Mancozeb and Mancozeb could be used to control konjac soft rot in field and storage conditions.Even though Mancozeb had the same MIC and MBC as Oxadixyl+Mancozeb,its diameter of the net zone of inhibition was significant differences from that of Oxadixyl+Mancozeb at 1μg/ml(P<0.05).Oxadixyl+Mancozeb expressed strongerbactericidal activity against E.carotovora subsp.carotovora.Mixtures of certain pesticides may act synergistically to augment the inhibition of disease development[4].Study of the antibacterial activity of compounds in vitro may have application in protecting plant from developing disease[20~22].Pesticides that showed no inhibition of soft rot bacterium in the present study included Streptomycin,Carbendazim,Kasugamycin,Thiophanate+methyl and Phosethyl-Al+Mancozeb.Therefore,although all of these pesticides were always employed to prevent and cure soft rot disease,the loss of soft rot is still severe.When used at the manufacturer's recommended concentration,Oxadixyl+Mancozeb and Mancozeb all displayed antibacterial activities against soft-rot causing bacterium.There is no special pesticide for konjac soft rot in China,and the database(a list of marketing companies is available on the database)does not give details of what problems each pesticide controls from the company that produces the pesticide,in vitro study maybe give the growers suggestions about choosing pesticides.Before growers buy or use any pesticide,ask themselves whether it is really necessary to control the disease that they want to get rid of.Therefore protection of konjac with suitable pesticides becomes a necessity.Chemical pesticides play a great role in eliminating agricultual pathogens,but because pesticides are used blindly and not scientifically,environment are polluted seriously.This paper approached ways of selecting pesticides to control konjac soft rot,using scientifically and effectively chemical pesticides,for the purpose of reducing environmental pollution,and protecting environment.Although the current study indicates that there is potential for the use of several pesticides as chemical agents to control disease caused by E.carotovora subsp.carotovora,further studies are needed to examine possible inhibitory effects in vivo.More research is also needed on the delivery methods for effective use strategies including spray application during post-harvest handling,application timing at growth stage or application as preservatives in storage facilities[4].In summary,our data demonstrate that pesticides of Oxadixyl+Mancozeb and Mancozeb inhibited the activity of konjac soft-rot causing bacterium.This disease could be controlled with chemicals such as Oxadixyl+Mancozeb and Mancozeb.Moreover,Oxadixyl+Mancozeb expressed stronger antibacterial activity than Mancozeb.Even though pesticides of various kinds(e.g.,Streptomycin,Carbendazim,Kasugamycin,Thiophanate+methyl,Phosethyl-Al+Mancozeb)have been used on a large scale in China to protect crops from damages inflicted by diseases,none of them were inhibitors of the soft rot pathogen at their recommended concentrations.This work was supported by the Scientific Research Foundation of China Three Gorges University(No.0620060113)and Hubei Provincial Department of Education(No.Q200713002).

番茄早疫病菌（Alternaria solani）是保护地和露地番茄生产的重要病害之一，为真菌性病害，为害植株后出现慢性枯萎，植株矮小，果实膨大等，可大幅度降低番茄的产量和品质。我国自20世纪80年代开始发生以来，已经成为番茄设施栽培的限制性障碍[1]。在防治上由于长期大量的化学农药使用，使病菌产生了抗药性，防效逐年降低，同时造成了一定的农药污染[2]。随着环境保护呼声的日益高涨，高毒农药的负面影响已引起世界范围的广泛关注，以高效，低毒农药逐步替代传统的高毒农药是农药发展的必然趋势。植物源农药可在环境中迅速分解，对环境无任何影响，是符合环境保护，农业持续发展方向的[3]。细辛（Asarum siebotdii）是多年生草本植物，据中华临床中药学（上卷）记载，根能入药，具有祛风，散寒，风湿弊痛，抗炎等功效，在中药学上有广泛的用途[4]。本实验用中药细辛的根提取物对番茄早疫病菌的菌丝生长及分生孢子萌发的抑制作用进行了室内活性测定，旨在为开发出一种经济、安全、有效的新型杀菌剂提供理论依据。1.1.1 供试样品 试验所用细辛采自山西省历山自然保护区，将采集的植物材料洗净后在室内阴干（约25℃），放入恒温箱内（40～45℃）烘干，磨碎，过60目筛，备用。1.1.2 供试菌种 番茄早疫菌（Alternaria solani），由山西农业大学农学院植物病理实验室提供。1.2.1 细辛提取物的制备 准确取3份细辛根粉50g，分别装入500ml小烧杯内，加入干粉5倍量的有机溶剂甲醇、氯仿、石油醚。室温下（30±2）℃浸泡3～5天后，过滤并浓缩至稠膏状，称取一定量的提取物，加2～3滴吐温80做乳化剂，并依次配成实验所需的浓度，4℃下保存。1.2.2 细辛提取物对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用 采用生长速率法[5]，用打孔器取6mm菌落边缘生长旺盛的菌种，放在加药的PDA平板上培养，以培养基内加等量无菌水作对照，每次重复3次，置25℃下培养。用十字交叉法测每个菌落的直径，以其平均值代表菌落的直径，以下式求出抑制菌丝生长率：抑制菌丝生长率%=（对照菌落直径-处理菌落直径）/（对照菌落直径-0.6）×100%1.2.3 细辛提取物对孢子萌发的抑制作用 分别将3种有机溶剂的细辛提取物制成最终浓度为1mg/ml的细辛提取液的PDA培养基。待培养基冷却后，取预先配置好的孢子悬浮液10μl，接种到直径为9cm的培养皿中央，用涂布器涂抹均匀，在25℃培养箱中培养48h，观查记录孢子萌发数量。每处理设5个重复，取平均值。计算孢子萌发率和抑制率。孢子萌发率（%）=已萌发孢子数/镜检孢子总数×100%抑制率（%）=（对照萌发率-处理萌发率）/对照萌发率×100%1.2.4 细辛氯仿提取物对番茄早疫病菌菌丝抑制中浓度（MIC）的测试 将细辛氯仿提取物稀释成5个浓度（4mg/ml，2mg/ml，1mg/ml，0.5mg/ml，0.25mg/ml），测试不同浓度的提取物对番茄早疫病的病原菌菌丝生长的抑制作用，计算毒力回归方程及抑制中浓度（MIC）。细辛提取物对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用实验结果如表1。在48h时，石油醚提取物的抑菌率为28%，氯仿提取物的抑菌率为66.67%，而甲醇提取物的抑菌率达到了50%。并且随着时间的推移，3种溶剂提取物的抑菌率都有所下降。同时与对照相比，处理的菌丝在培养皿中出现气生菌丝减少，变粗，向上生长现象。这一结果说明，3种不同溶剂的细辛提取物在浓度为2mg/ml时对番茄早疫病的病原菌均有不同程度的抑制作用。溶剂menstruum菌落直径（mm）与抑制率（%）ColonyRadiusandInhabitingrate48h抑制率Inhabitingrate96h抑制率Inhabitingrate144h抑制率Inhabitingrate甲醇methanol1.8550.002.9051.584.5748.82氯仿chloroform1.4366.672.5060.002.7359.57石油醚Petroleumether2.428.004.2024.216.918.71CK3.10—5.35—8.35—表1 细辛提取物对番茄早疫病菌丝生长的抑制作用Table 1 Inhibitory effect of Asarum siebotdii extract against mycelia Growth of Alternaria solani细辛提取物对番茄早疫病菌孢子萌发的影响见表2。48h后，石油醚和氯仿提取物表现出了显著的抑制率，对分生孢子萌发抑制率分别为91.48%和88.79%，甲醇提取物表现出了较强的抑菌率，达到53.81%。实验过程中发现，对照皿在接种后32～48h即开始陆续萌发，而提取物各处理均不同程度地表现出萌发推迟的现象。溶剂menstruum孢子萌发率（%）Rateofgerminationofconidia萌发抑制率（%）Percentageofinhibition甲醇methanol42.8253.81氯仿chloroform10.4288.79石油醚Petroleumether7.9291.48CK92.92—表2 细辛提取物对番茄早疫病菌孢子萌发的抑制作用Table 2 Inhabiting effect of the different menstruum of Asarum siebotdii extract against conidiao production of Alternaria solani由表1可见，3种不同溶剂的提取物中氯仿提取物的抑菌效果最好，为了进一步确定其生物活性，求出MIC，将细辛氯仿提取物稀释成5个不同浓度，对病原菌进行测定。结果见表3、表4，6天后，浓度在4mg/ml时，氯仿提取物表现出了显著的抑菌率，达到77.14%，而浓度为0.25mg/ml时，抑菌率显著下降，只有9.5%。这一结果说明，细辛氯仿提取物对番茄早疫病菌菌丝的抑制作用与浓度成正相关，随着浓度的下降，抑菌效果也随之下降。同时在96h时求得毒力方程和氯仿提取物的抑制中浓度（MIC）为1.57mg/ml。病原菌Pathogen浓度（mg/ml）concentration菌落直径（mm）与抑制率（%）ColonyRadiusandInhabitingrate48h抑制率Inhabitingrate96h抑制率Inhabitingrate144h抑制率Inhabitingrate番茄早疫病菌Botrytiscinerea4.00001001.9573.622.2577.142.0001.2364.682.9354.404.1251.271.0001.6243.303.4344.634.7342.730.5001.8530.304.2329.045.7229.130.2502.0419.505.307.507.139.50CK2.39—5.72—7.82—表3 不同浓度的细辛提取物对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用Table 3 Inhibitory effect of the different concentration of Asarum siebotdii extract against mycelia Growth of Alternaria solani处理Treatment毒力方程?RegressiveequationMIC??相关系数r番茄早疫病菌AlternariasolaniY=2.0910+1.6950x1.570.9707表4 细辛提取物对番茄早疫病的毒力Table 4 Virulence of the extracts of Asarum siebotdii seeds against Alternaria solani植物源农药活性物质主要来源于植物体内产生的次生代谢产物，据Swain于1977年报道，次生代谢产物已超过400000种，如有机酸、萜烯类、生物碱、类黄酮、甾体、酚类、蛋白质、单宁和多糖等[6]。据文献报道，苦参中含有苦参碱（Matrine）和氧化苦参碱（Oxymat-rine）等17种化学结构相似生物碱，其中以苦参碱为其最主要的活性成分，对病原菌有较强抑制作用[7]。另外，毛蒿植物中的毛蒿素，南欧丹参中的硬尾醇，苜蓿根部的苜蓿酸以及海红豆中的紫檀素，黄连体内的小孽碱等均具有很强的抗真菌作用[8]。本实验研究表明，3种溶剂的细辛提取物对番茄早疫病菌菌丝和分生孢子萌发都有不同程度的抑制作用，但它们之间的抑制作用存在差异，在抑制菌丝生长方面，氯仿提取物效果最好，甲醇提取物次之，石油醚提取物效果最差。在抑制分生孢子萌发方面，石油醚提取物效果最好，氯仿提取物次之，甲醇提取物效果较差。由于3种溶剂的极性不同，从以上实验结果初步推断细辛体内抑制番茄早疫病菌的活性物质不止一种，而且极性大小在石油醚和氯仿之间。今后的研究方向是探索分离细辛提取物中的活性成分，为进一步产品开发奠定基础。至于细辛提取物是否对其他病菌有抑制作用，有待在以后的实验中证明。

植物的诱导抗病性，又称系统获得性抗性，是植物在一定的诱抗剂刺激下，对随后的病原菌侵染具有抵抗性的特征。植物诱抗剂又名激发子，一般将能够诱导寄主防卫反应的生物来源和非生物来源的物质统称为激发子。这些物质在很低浓度下即可被植物识别为信号物质，诱发植物自身的免疫系统，最终使植物获得抵御病害的能力。寡糖类激发子是人类研究的最早、最为充分的一类激发子，并且由于其具有良好的环境相容性，因此是很有发展潜力的生物农药。壳寡糖已经应用于生产，防治作物病害，但对其进行结构修饰的寡糖，其诱抗活性还不清楚。新的寡糖—褐藻酸钠寡糖诱抗活性也未见报道。本文研究了稀土络合的壳寡糖（壳寡糖-铈配合物）以及褐藻酸钠寡糖诱导烟草抗烟草花叶病毒，为其作为生物农药提供依据。1.1.1 供试药剂 壳寡糖-铈配合物、壳寡糖，由中国科学院大连化学物理研究所研制。褐藻酸钠寡糖，由中国农业科学院饲料所研制。1.1.2 供试植物 枯斑三生烟（Nicotiana tobacum L.SamSun NN）。1.1.3 供试毒源 烟草花叶病毒（TMV），本实验室保存于普通烟上。接种病毒汁液为每克含TMV的烟草病叶，加入5倍体积0.05mol/L的磷酸缓冲液（pH7.0），在研钵中研磨后纱布过滤。1.2.1 试验处理 供试药剂：对照药剂壳寡糖50μg/ml，喷雾。供试药剂壳寡糖-铈配合物浓度分别为1μg/ml，10μg/ml，25μg/ml，50μg/ml，100μg/ml，喷雾；供试药剂褐藻酸钠寡糖浓度为25μg/ml，50μg/ml，100μg/ml，喷雾。1.2.2 试验方法 选取大小一致6～8叶期的烟草植株，叶面喷雾施药。24h后汁液摩擦接种TMV病毒。在病毒汁液中加入少量石英砂，用毛笔蘸取汁液摩接种。枯斑三生烟苗采用半叶法接种，每株接4片叶。接种后每天观察发病情况。待全面发病后，调查病斑数。重复3次。抑制率（%）=[（对照叶片病斑数-处理叶片病斑数）/对照叶片病斑数]×100%最初的试验结果表明（表1），壳寡糖-铈配合物对抑制烟草花叶病毒引起的枯斑有抑制作用。在1～100μg/ml的浓度范围里，25μg/ml的诱抗效果最好，抑制率为55%，但是略低于阳性对照壳寡糖50μg/ml，抑制率63.9%。处理斑点数抑制率（%）壳寡糖-铈配合物1μg/ml43±18c37.025μg/ml31±13b55.050μg/ml38±18cd44.0100μg/ml42±19c37.7壳寡糖50μg/ml24±14b63.9CK68±26a—表1 壳寡糖-铈配合物不同浓度喷施对烟草花叶病毒病的防效 （P由于1μg/ml的壳寡糖-铈配合物依然有诱抗活性，并且25μg/ml的诱抗活性较好，因此将取浓度10μg/ml的壳寡糖-铈配合物，进行诱抗活性的检测试验。结果表明（表2），浓度为10μg/ml的壳寡糖-铈配合物比25μg/ml具有更好的诱抗活性，抑制病毒产生枯斑的抑制率为67.4%。但是与25μg/ml没有显著性差异。因此，10～25μg/ml的壳寡糖-铈配合物具有良好的诱抗活性，说明壳寡糖与稀土的络合物可以在低于壳寡糖的使用浓度时，依然具有较高的诱抗活性。处理斑点数抑制率（%）壳寡糖-铈配合物10μg/ml43±17c67.425μg/ml57±13cd56.750μg/ml73±22d45.0100μg/ml107±27a18.9壳寡糖50μg/ml28±13b78.7CK132±46a—表2 壳寡糖-铈配合物不同浓度喷施对烟草花叶病毒病的防效 （P在褐藻酸钠诱导抗性的试验中，试验结果表明，在25～100μg/ml的浓度范围内，褐藻酸钠具有诱抗活性，可以显著抑制病毒引起的枯斑的产生。其中浓度为50μg/ml诱导抗性效果最好，抑制率为71.8%，25μg/ml的褐藻酸钠也有较高的诱抗活性，抑制率为67.4%，均略高于壳寡糖50μg/ml（抑制率64.1%）。处理斑点数抑制率（%）褐藻酸钠25μg/ml59±27bc67.450μg/ml51±21c71.8100μg/ml74±32b59.1壳寡糖50μg/ml65±26b64.1CK181±32a—表3 褐藻酸钠不同浓度喷施对烟草花叶病毒病的防效（P多糖类化合物在自然界中分布广泛，是生命物质的重要组成成分。它不仅能够控制细胞的分化、分裂，调节细胞的生长和衰老以及维持生命有机体的正常代谢，还能够调节动植物细胞免疫以及其间信息的传递。目前，多糖作为生物激发子用于抗植物病害研究比较多，其中已报道氨基寡糖素、毛头鬼伞多糖、硫酸化的葡聚糖以及脱氧半乳聚糖[1～4]等具有诱导烟草抗烟草花叶病毒的生物活性。褐藻胶是一种来源于褐藻细胞壁的水溶性酸性多糖，主要从海带、巨藻、马尾藻等褐藻中提取得到，具有独特的结构和生物活性。褐藻胶由α-L-古罗糖醛酸和β-D-甘露糖醛酸通过1，4糖苷键连接而成的直链多糖[5]。褐藻胶还有很强的抗病毒活性，如抑制TMV，抑制程度随着褐藻胶浓度的增加而增强，且随着褐藻胶中古罗糖醛酸含量的增加而增强。电镜分析表明，TMV在培养基中呈单一分散悬浮，加入褐藻胶后则形成团聚物。团聚物的形成阻止了TMV在被感染细胞表面的脱衣壳过程，而阻止了TMV的RNA穿过细胞膜，从而防止感染[6]。但由于其凝胶性强，不容易被吸收，在应用方面收到很大的限制，将其水解为寡糖后，水溶性好，利于吸收。因此本文研究褐藻酸钠水解为褐藻酸钠寡糖后的生物活性，以期在生产实践中具有更加广泛的应用。结果发现褐藻酸钠寡糖具有良好的诱抗活性，并且好于阳性对照壳寡糖，但是其具体机理还有待于进一步的研究。近几年研究发现，稀土离子，尤其是Ce，有较广泛的抑菌作用，而且有降解有机磷的能力。壳聚糖-铈配合物对黄瓜中的硫磷农药残留有一定的降解作用，其降解产物是氨基对硫磷，基本解除了毒性[7]。研究已经发现壳寡糖能够诱导烟草抗烟草花叶病毒，本文研究了壳寡糖-铈配合物是否依然保持具有诱导抗性的活性。结果表明，壳寡糖-铈配合物尽管诱抗效果不如壳寡糖明显，但仍然具有较高的诱抗活性，至于是否有降解有机硫磷的作用，需要进一步的研究。经过化学修饰的壳寡糖-铈配合物可以改变壳寡糖的理化特征，产生新的活性，这对于加强寡糖应用的广泛性和多功能性具有重要的价值。

核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）所致的油菜菌核病是毁灭性的。抗病性鉴定方法是抗病材料筛选和育种的关键。本研究探讨了一种有效的田间病害圃鉴定筛选的方法，该方法中维持适中的病害压力是鉴定区别油菜品系抗性的关键。病害圃中每年连作油菜，在播种前每行施两粒菌核。在开花期利用喷雾系统喷雾保湿。于成熟期按0～4级分级调查病害。在两年的试验中，90个品系发病率在3.3%～100%。发病率和病情指数在重复之间显著相关。小区的病情指数和相对抗性指数基本为正态分布。研究结果表明该方法是有效的、有用的和灵敏的。Sclerotinia sclerotiorum causes a highly destructive disease in oilseed rape(Brassica napus).Methods for identification of resistance to S.sclerotiorum are crucial to screening and selection of resistance materials.In the study,we described a field disease nursery method efficient for resistance screening of breeding lines or germplasm of oilseed rape where maintaining of a suitable disease pressure is considered to be most important in order to differentiate levels of resistance existed in different lines.In the disease nursery,S.sclerotiorum inoculum had been maintained by growing oilseed rape consecutively and by placing two sclerotia in each row before sowing in each of the previous four seasons.During the flowering time,all plants were sprayed with water using a spray system.At maturity,disease severity was assessed on a 0~4 scale and disease index was calculated.In tests of two years,percent diseased plants of 90 lines(3 replicates in each year)ranged from 3.3%~100%.The percent of diseased plants and disease indices were significantly correlated between replicates(P<0.05).The frequency distributions of both disease indices(each plot)and relative resistance indices were in a normal form while the frequency distribution of percent diseased plants was negatively skewed.These data indicated that the method is efficient and useful to differentiate resistance of oilseed rape varieties.

中二软占是广东省农业科学院水稻所以粳籼21为母本，长丝占为父本杂交育成的早、晚兼用常规优质稻品种，于2001年通过广东省农作物品种审定。中二软占的丰产性和适应性好，米质良好，但中感稻瘟病。作者等将中二软占品种的种子经密封后送到酒泉卫星发射基地（部分中二软占种子留在地面作为非诱变原种对照），于2003年11月3日随“中国返回式科学试验卫星”升空，经过18天的太空旅行，于11月21日返回地面。2004年早造将中二软占诱变和非诱变原种对照单株种植，采用稻瘟病菌株GD0193接种到3到3片半叶的种苗上，发病7天后调查，792株经过空间诱变的种苗，病级为0～3级的抗病植株有208株，占总数的26.3%；病级为4～5级的植株有368株，占46.5%；病级在6级以上的有216株，占27.3%；80株原种对照种苗的病级均在6级以上。试验结果表明，中二软占的种子经过返回式卫星搭载后，对稻瘟病产生抗性变异，其中抗性明显提高的占26.3%；抗性比原种提高（病级0～5级）的植株数占72.7%。对中二软占空间诱变SP2代材料的抗性分离规律进行研究。从空间诱变中二软占SP1中选取33株抗病和2株感病植株的种子作为SP2的接种材料，原种中二软占作对照，接种稻瘟病菌株采用GD0193菌株。空间诱变中二软占SP1的2个感病植株在SP2抗性没有产生分离，33个抗病植株在SP2抗性产生分离，而且各株系抗感分离的比例也不一样。对33个抗病SP2株系抗感分离的比例进行X2分析，结果表明有21个株系抗感分离比例符合理论比值3：1，说明这21个株系可能受一个位点的抗性基因控制；有8个株系抗感分离比例符合理论比值15：1，说明这8个株系可能受两个位点的抗性基因控制。另外，有4个株系抗感分离比例既不符合3：1也不符合15：1。表明这4个株系的遗传基础比较复杂。由于目前对水稻空间诱变的染色体变异的遗传机理还不是很清楚，诱变除了导致基因的位点突变以外，也可能导致染色体的缺失、重复、倒位、易位等畸变。这些畸变将影响水稻的性状，而且使其在SP2的基因的分离规律变得更复杂。从33个空间诱变中二软占抗病植株的SP3-SP4代株系中连续两造各筛选出5株农艺经济性状较好的单株，考种及抗病性鉴定结果表明，与原种中二软占比较，抗病性有不同程度的提高，而且穗长、总粒数、结实率、粒长、谷粒长宽比、千粒重等性状与原种中二软占的相比，也有不同程度的提高。将33个空间诱变中二软占抗病植株和1个感病植株的SP4代株系进行抗谱测定，采用38个不同致病型代表菌株接种结果，原种中二软占和空间诱变感病株系的抗谱分别为29.0%和34.2%，33个空间诱变抗病株系中，抗谱达到80%以上的诱变株系有32个，其中抗谱在90%以上的诱变株系有24个，抗谱在80%～90%间的诱变株系有8个。中二软占是优质但中感稻瘟病的品种，从其空间诱变后代中有望筛选出对稻瘟病抗性及农艺经济性状比原种好的株系，可为抗稻瘟病育种提供新材料及优良抗源。目前作者等正重点开展有关优质、抗病的中二软占诱变品系的抗性遗传基础分析、抗病基因标记定位、空间诱变抗性变异机理研究等。

正向（经典）遗传学是通过生物的表型来推测其遗传物质的组成、分布和传递规律等，而反向遗传学是在已知基因序列的基础上，利用现代生物理论和技术，通过核苷酸序列的定点突变、缺失和插入等创造突变体并研究突变所造成的表型效应。随着基因组测序技术、侵染性克隆的构建技术、定点突变技术和报告基因的使用等，反向遗传学技术在研究植物病毒基因功能、侵染过程和致病机理等方面的应用越来越广泛。本文报道了该技术在研究马铃薯Y病毒（PVY）HC-Pro和甘薯褪绿矮化病毒（SPCSV）P22功能方面的部分结果。PVY HC-Pro基因由本实验室提供，SPCSV的有关基因由芬兰赫尔辛基大学Valkonen教授提供，PVX201质粒由Baulcombe教授提供。突变试剂盒（Quick Change XL Site-Directed Mutagenesis Kit）购自STRATAGENE公司，大肠杆菌菌株DH5α由本实验室保存，PCR突变引物由赛百盛公司合成。Figure 1 Symptoms of Nicotiana benthamiana plants inoculated with different constructs based on PVX 201将SPCSV P22、P28和RNaseIII等基因克隆到PVX201载体上，根据接种后出现的症状判断哪个基因能增强PVX对本氏烟的致病力。将PVY HC-Pro克隆到PVX201载体上，针对HC-Pro的KITC和IGN等位点设计合适的突变引物，参考突变试剂盒（Quick Change XL Site-Directed Mutagenesis Kit）说明进行突变。通过测序证实所得突变体的准确性。大量提取法提取质粒PVX201、PVXHC或相应的突变体，摩擦法接种本氏烟（Nicotiana benthamiana），观察所致症状的差别。PVX201载体在本氏烟上引起轻微的斑驳和褪绿花叶症状，但不引起植株的死亡。SPCSV P28和RNase III等基因连接到PVX201后对症状无影响，但P22能提高PVX对本氏烟的致病力，导致了接种植株的死亡，说明P22是致病性的增强子。携带P22的PVX（PVX-p22）首先在接种叶上引起坏死斑点。坏死斑点扩展后，沿着叶脉到达茎部，引起上部组织坏死，最终导致本氏烟整株枯死。RNA沉默抑制因子HC-Pro也能提高PVX对本氏烟的致病力。表达HC-Pro的PVX（PVX-HC）在接种后7天出现严重明脉和卷曲，10～14天时首先心叶出现坏死，随后整株萎蔫死亡。但在接种叶上没有坏死斑，看不到明显的扩展迹象。KITC是HC-Pro的一个重要基序，参与病毒的蚜虫传毒、协生和抑制RNA沉默等过程。我们在测定烟草脉带花叶病毒（TVBMV）全基因组序列时发现，TVBMV（YND分离物）HC-Pro KITC基序中的K变成了R，而且也有蚜虫传毒活性。我们把PVY HC-Pro的KITC突变成RITC后，再接种本氏烟，发现该突变仍能引起本氏烟植株的死亡。把K突变为A（突变体1，K52A）后，突变体也能引起本氏烟死亡，说明HC-Pro KITC基序中的K可能不参与和PVX的协生。但把KITC基序中的C缺失后（突变体2，C55Del）就不能引起植株死亡，说明KITC基序中的C对于协生作用是不可缺少的。对于HC-Pro其他突变体的功能分析正在进行中。