苹果霉心病是近年来苹果果实上发生的一种重要病害。苹果霉心病又称苹果霉腐病、苹果心腐病，是苹果果实生长前期、采收前、贮藏期的主要病害之一，该病一般发生在果心部位，严重时可造成心室周围果肉腐烂，甚至烂到果皮下，严重影响了果农的经济收入。苹果霉心病主要是花期侵染。病菌在苹果枝干、芽体等多个部位存活，也可在树体上及土壤等处的病僵果或坏组织上存活，第二年春季开始传染。病菌随着花朵开放，首先在柱头上定殖，落花后，病菌从花柱开始向萼心间组织扩展，然后进入心室，导致果实发病。果实一般在贮藏期表现出来。在苹果霉心病防治上因群众不能够掌握住关键的防治适期，即花前、谢花后半月内的药剂防治，造成病菌的大量传播侵染，造成苹果霉心病发生重。为了更好地掌握苹果霉心病防治技术，从2005年开始，本站对苹果霉心病防治进行了系统的研究，具体研究如下：2005年，在陈村乡鱼池村进行了花期喷药防治红富士品种苹果试验。药剂主要有70%甲基托布津500倍液、80%大生300倍液、50%菌毒清300倍液、50%多菌灵300倍液、50%甲霜铝铜300倍液、50%扑海因1000倍液、12.5%特谱唑1000倍液、70%百菌清300倍液，对照喷清水，共9个处理，每个处理喷5株树。喷药日期为花期4月20日和4月25日2次。仔细喷洒花朵，尽可能不漏喷。果实9月10日采收，土窑洞贮藏95天，2005年12月15日各处理剖果600个，调查各处理心腐果率。试验设在陈村乡南庄村，共设6个试验处理，即70%甲基托布津、大生M-45、菌毒清、扑海因、特谱唑及喷清水对照药液浓度同花期用药，品种为红富士。2006年为5月3日终花期喷药，9月20日采收，土窑洞贮藏100天，于2006年12月30日剖果，各处理均剖果600个，调查心腐果烂果率。共设6个试验处理，即70%甲基托布津500倍液、80%大生300倍液、50%菌毒清300倍液、50%扑海因1000倍液、12.5%特谱唑1000倍液及喷清水对照，品种为红富士。喷药时间为4月22日花期和5月5日终药期共两次喷药。9月20日采收，土窑洞贮藏100天，于2006年12月30日剖果，各处理均剖果600个，调查心腐果烂果率。2005年花期喷甲基托布津为1.5%，大生为0.33%，菌毒清为1.83%，多菌灵为1.5%，甲霜铝铜为1.33%，扑海因为0.83%，特谱唑为0.5%，百菌清为0.67%，清水对照为6.83%。表明花期喷上述药液2次，对防治果实心腐烂果均有较好效果，以80%大生300倍液防效最好。2006年终花期喷药甲基托布津500倍液为3.17%，大生300倍液为2.17%，百菌毒清300倍液为1.67%，扑海因1000倍液为1.83%，特谱唑1000 倍液为1.5%，喷清水对照为7.17%。试验与2005年花期防效相比，终花期防效稍低于花期防效。在6种试验药剂中以80%大生300倍液和百菌毒清300倍液的防效最好。2006年花期加终花期两次喷药，甲基托布津500倍液为0.83%，大生300倍液为0.0%，百菌毒清300倍液为0.33%，扑海因1000倍液为0.5%，特谱唑1000 倍液为0.5%，喷清水对照为6.33%。在6种试验药中以80%大生300倍液和百菌毒清300倍液的防效最好。序号试验处理剖果（个）病果数病果率（%）备注170%甲基托布津500倍液60091.5280%大生300倍液60020.33350%菌毒清300倍液600111.83450%多菌灵300倍液60091.5550%甲霜铝铜300倍液60081.33650%扑海因1000倍液60050.83712.5%特谱唑1000倍液60030.5870%百菌清300倍液60040.679喷清水对照（CK）600416.83表1 2005年花期喷药防治苹果霉心病效果序号试验处理剖果（个）病果数病果率（%）花期+终花期终花期花期+终花期终花期1甲基托布津300倍液6005190.833.172大生300倍液60001302.173百菌清300倍液6002100.331.674扑海因1000倍液6003110.51.835特谱唑1000倍液600390.51.56清水对照（CK）60038436.337.17表2 2006年花期+终花期和终花期喷药防治苹果霉心病效果通过多年的防治试验示范，我们认为采用以下的综合防治措施，可收到较好的防治效果。3.1.1 清除病原 苹果采摘后清除果园内的病果、病叶、病枝、丛生的杂草，刮除树体病皮，并带出果园集中处理。3.1.2 科学管理 增施有机肥料，增强树势，提高植株抗病性；合理灌水，及时排涝，保持适宜的土壤含量，防止地面长期潮湿；科学修剪，建造合理的树体结构，保持果园通风透光良好，可有效地控制或减少霉心病的发生。采收时对田间发病较重的果实，应单存单贮。采收后24h内放入贮藏窖中，窖温最好保持在1～2℃。一般10℃以下，发病明显减轻。花前和谢花后7～10天是防治苹果霉心病的两个关键时期，有效药剂为80%大生、扑海因、多抗霉素等。3.2.1 芽前用药 苹果发芽前或花芽萌动期用3～5波美度石硫合剂+0.3%五氯酚钠，40%福美砷100倍防治。3.2.2 花前加谢花后7～10天用药，提高防治效果 药剂为：80%大生、70%甲基托布津300倍液、50%扑海因可湿性粉剂1500倍、50%退菌特可湿性粉剂600倍、70%代森锰锌可湿性粉剂500倍，可以有效防治霉心病，还能兼治轮纹斑、斑点落叶病。苹果霉心病是由霉心和心腐2种症状构成，其中霉心症状为果心发霉，但果肉不腐烂，不影响果实食用价值和商品价值，心腐症状不仅果心发霉，靠近果心的果肉也由里向外腐烂，影响食用甚至无食用价值，这种症状严重影响果品的经济效益。通过以上试验，可以看出，以花期加终花期喷药防治苹果霉心病效果最好，其次为花期两次喷药，终花期喷药防效相对差一些。但是3种防治方法对苹果霉心病均有较好防效。

柴胡（Bupleurum chinense DC.），别名北柴胡、竹叶柴胡，为伞形科多年生草本植物。野生资源主要分布于我国的华北、西北和东北，主产于陕西、山西、河南、吉林、辽宁、黑龙江等地[1]。柴胡过去多为野生，病害零星发生，随着人工抚育及栽培面积的逐年扩大，柴胡根腐病害的发生和为害程度不断增加。目前，国内外尚未见有关柴胡根腐病的系统报道，对其发生、流行规律，病原菌种类及病原菌生物学特性尚不清楚，因此生产过程中缺乏有针对性的防治手段。为了尽快明确上述问题，本研究在对柴胡根腐病病原菌进行分离鉴定的基础上，就病原菌的生物学特征进行了较为系统的研究，这为进一步开展柴胡根腐病害的防治奠定了理论基础。从北京市延庆县永宁镇和本所柴胡试验基地采集病害标样。病原菌的分离采用常规的组织分离法，具体操作参照方中达[2]编著的《植病研究方法》。观察柴胡根腐病对柴胡根部的为害症状；菌落的形状、色泽；在显微镜下观察大、小分生孢子的形状及多少，测量其大小，观察有无隔膜及隔膜的数目，观察产孢细胞的类型，厚垣孢子的有无以及着生部位和子实体类型等。1.3.1 室内离体根组织接种 选取健康无病的柴胡根组织，用无菌水清洗干净，采用针刺法接种，保湿培养。1.3.2 室内活体植株接种 将取自田间的柴胡植株移栽于室内花盆，将配好的孢子悬浮液用微孔注射器注入柴胡根部，定期观察柴胡发病情况。1.4.1 温度对菌丝生长的影响 将病原菌接种PDA培养基，分别于5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃和35℃恒温培养箱中培养，6天后测量菌落直径，每个处理重复3次。1.4.2 培养基pH值对菌丝生长的影响 培养基灭菌后，分别调节pH4、6、8、10、12，接种后于25℃恒温培养箱中培养，6天后测量菌落直径。每个处理重复3次。1.4.3 分生孢子萌发 孢子萌发试验采用载玻片孢子悬滴萌发法。每1h计数孢子萌发数量，计算孢子萌发率。1.4.4 温度对分生孢子萌发的影响 共设5℃、10℃、20℃、25℃、30℃和35℃共6个温度梯度，24h镜检记录孢子萌发数，计算萌发率。每个处理重复3次。1.4.5 pH值对分生孢子萌发的影响 用pH值分别为2、4、6、8、10、12的水溶液配制孢子悬浮液，于25℃恒温培养箱中培养，24h后测定孢子萌发率。每个处理3次重复。1.4.6 湿度对分生孢子萌发的影响 在密闭容器中分别配制（NH4）2SO4、ZnSO4、NH4H2PO4和CaSO4饱和溶液，使其相对湿度（RH，Relative Humidity）分别维持在81%、90%、93%和98%，以清水（RH=100%）作对照，于25℃下培养，24h后测定孢子萌发率。每个处理3次重复。1.4.7 不同培养基对病原菌产孢的影响 分别配制PDA和小麦汁培养基，25℃恒温箱中培养，8天后观察分生孢子的产生情况。每个处理3次重复。1.4.8 分生孢子致死温度测定 将孢子悬浮液装在200μl离心管中，在PCR仪上以温度35～70℃（温度间隔为5℃）处理10min后，于25℃恒温箱中培养24h，观察孢子萌发情况。得到分生孢子致死的大致温度范围后，再以1℃为温度间隔求得精准致死温度。2.1.1 病害症状 该病主要为害柴胡的主根，亦可为害侧根。发病初期，自根茎交界处产生黑褐色斑点，后逐渐扩大呈圆形、近圆形或不规则病斑。发病后期，根部表皮自顶端向下产生纵向干裂，裂口变褐或发黑并逐渐加宽、加深。裂口多为竖条形，椭圆形或菱形。发病初期地上部分与健株无明显区别。发病后期裂口遍及根部整个外周，病部稍膨大、变硬、变脆，裂口深及木质部并造成水分、营养运输中断，最终导致整个植株萎蔫死亡。一年生柴胡当年秋季地上部枯萎后至结冻前即有发生，来年5～8月份为病害盛发期。2.1.2 柴胡根腐病菌培养性状 自柴胡根部病组织分离的病原菌在PDA培养基培养，菌落呈乳白色，气生菌丝发达，菌落底部呈浅褐色；在麦汁培养基上培养后菌落颜色呈灰白色，气生菌丝稀少。显微镜观察发现，麦汁培养基上培养的菌丝有分生孢子梗，分生孢子大量簇生，且菌丝上直接长有大量厚垣孢子。PDA培养基上培养的菌丝中间有隔，上面无分生孢子梗，也未发现分生孢子及厚垣孢子。图1 柴胡根腐病田间发病症状Figure 1 The symptom of root-rot disease in Bupleurum chinense DC.图2 柴胡根腐病菌的菌落形态Figure 2 The appearance of Fusarium solani isolated from Bupleurum chinense DC.2.1.3 病原菌鉴定 室内镜检发现大量分生孢子梗和大、小分生孢子。分生孢子梗一般簇生、直立，分隔。小分生孢子数量多，卵形、长椭圆形或短棒状，无隔膜；大分生孢子镰刀形或细长椭圆形，1～3个隔膜（3个隔膜者占到总数的96%以上）。厚垣孢子近圆形，在菌丝顶端单生。参考真菌分类相关文献，确认柴胡根腐病的病原菌为茄镰孢菌（Fusarium solani）。2.1.4 致病性测定 接种一定时期后，接种部位开始表现症状，且与田间发病症状类似。在接种病株上再次分离病原菌，经PDA培养基培养数天后，显微镜观察发现再次分离到的病原菌与接种的病原菌为同一病原菌。图3 柴胡根腐病菌孢子形态Figure 3 Fusarium solani Conidia isolated from Bupleurum chinense DC.2.2.1 温度对菌丝生长的影响 温度对病原菌菌丝的生长具有显著影响，菌丝在10～30℃范围内均能生长，25～30℃是菌丝生长的最佳温度范围。环境温度≤5℃或≥35℃均对菌丝的生长产生明显的抑制作用。2.2.2 培养基pH值对菌丝生长的影响 柴胡根腐病菌菌丝在pH值4～12的PDA培养基上均能够生长。在pH值4培养基上菌丝的生长速度较其他培养基上的菌丝慢，且菌落的背面呈红褐色，其他培养基上的菌落背面呈暗白色。2.2.3 分生孢子萌发 在20℃条件下培养，分生孢子萌发速度较快。4h萌发率达到14%，6h萌发率为46%，9h萌发率达到98%，10h后分生孢子全部萌发。图4 柴胡根腐病菌分生孢子在20℃下的萌发率Figure 4 Germinating ratio of Fusarium solani Conidia isolated from Bupleurum chinense DC.at 20℃2.2.4 温度对分生孢子萌发的影响 温度对分生孢子的萌发十分关键。由表1可以看出，20～25℃是最适宜的产孢温度，温度低于10℃，孢子不能萌发，温度高于30℃，孢子萌发率显著降低。温度（℃）Temperature（℃）分生孢子Conidia萌发率（%）Germinationrate（%）重复1Repeat1重复2Repeat2重复3Repeat3平均值Mean51020253035Ma0000Mi0000Ma0000Mi0000Ma100969898Mi80848684Ma95969395Mi90949292Ma80838181Mi40454644Ma60646262Mi10868表1 温度对镰刀菌分生孢子萌发的影响Table 1 The effect of temperature to germination of Fusarium solani conidia isolated from Bupleurum chinense DC.2.2.5 pH值对分生孢子萌发的影响 pH值对分生孢子存在显著影响，且大、小分生孢子对pH值的敏感程度也明显不同。从表2可以看出，大分生孢子在pH值2～10的范围内均能维持较高的萌发率（＞90%），pH值大于12值萌发率显著降低；而小分生孢子在pH值4～6的范围内能够维持较高的孢子萌发率（大于或接近90%），pH值小于2或大于6时，孢子萌发率均显著降低。pH值pH分生孢子Conidia萌发率（%）Germinationrate（%）重复1Repeat1重复2Repeat2重复3Repeat3平均值Mean24681012Ma90949091Mi40353737Ma100989999Mi95979495Ma100969898Mi90869289Ma100949697Mi40453639Ma90928990Mi20182421Ma60566259Mi10121011表2 pH值对镰刀菌分生孢子萌发的影响Table 2 The effect of pH to germination of Fusarium solani conidia isolated from Bupleurum chinense DC.2.2.6 湿度对分生孢子萌发的影响 研究发现，病原菌分生孢子在相对湿度≥90%的环境下均能够萌发，萌发率与相对湿度呈线性正相关，分生孢子的最适相对湿度为100%；相对湿度低于90%，分生孢子不能萌发。2.2.7 不同培养基对病原菌产孢的影响 分别用PDA和麦汁培养基培养柴胡根腐病菌。培养8天后，PDA培养基上的病菌气生菌丝发达，颜色纯白，挑取少量菌丝在显微镜下观察，未发现分生孢子；麦汁培养基上培养的病菌气生菌丝稀少，颜色发暗，挑取少量菌丝在显微镜下观察，可见大量的大、小分生孢子。2.2.8 分生孢子致死温度测定 研究发现，柴胡根腐病菌分生孢子在35～50℃之间均能够萌发，而在55～70℃均不能正常萌发。进一步研究发现，51℃为柴胡根腐病菌分生孢子的致死温度（表3）。处理时间（min）Treattime（min）温度（℃）Temperature（℃）35404550515253545560657010++++--------表3 柴胡镰刀菌分生孢子的致死温度测定Table 3 Lethal temperature of Fusarium solani conidia isolated from Bupleurum chinense DC.本研究通过对柴胡根腐病病原菌的分离鉴定、致病性测定以及病原菌的生物学特征的初步研究，得出如下结论：3.1 根据病原菌的形态特征和致病性测定结果，确认柴胡根腐病病原为镰刀菌（Fusarium solani）。3.2 实验结果表明，柴胡根腐病菌菌丝生长的最适温度为25～30℃，在pH值6～12条件下均能正常生长；分生孢子萌发的最适温度为20～25℃，最适相对湿度为100%，最适pH值为4～6。分生孢子的致死温度为51℃。3.3 柴胡根腐病早有发现，但因以前多为野生，病害只是零星发生。近年来，随着柴胡需求量的逐年提高，柴胡的人工栽培面积不断扩大，这为柴胡根腐病的发生和发展提供了便利条件，柴胡根腐病的发生逐年加重。目前，尚未见有关柴胡根腐病的发生、流行及防治策略的研究报道，开展柴胡根腐病害的侵染、流行及综合防治领域的研究工作势在必行。

狗牙根草是一种重要的草坪牧草。普遍用于城市的绿化。2007年5月从湖北华中农业大学校园的草坪上，采集到狗牙根草（Cynogon dactylon）黑粉病的病株标本，发病症状是花序的小穗变为线状的粉末状黑褐色的孢子堆，除小穗的中轴外完全被破坏，黑粉易脱落（图1-A）。用稀释分离法自发病植株的黑粉部位分离获得该病原菌，并对其进行了形态学鉴定和rDNA-ITS序列分析等研究。结果表明：狗牙根草黑粉菌在PDA培养基上，菌落初期形态为乳白色，呈酵母式增殖，多为短棒状的担孢子。后期逐渐变为暗黄色，有不均匀的皱褶隆起，菌落边缘有少量菌丝产生。冬孢子黑色或黑褐色，圆形至椭圆形，表面有轮纹，大小为（10.3～6.2）μm×（10.9～5.5）μm，见图1-B。对病原菌进行了rDNA-ITS序列分析结果表明：该病菌5.8S rDNA及两侧的ITS区序列与狗牙根黑粉菌U.cynodontis AY740168的同源性达到99%。将同一株狗牙根草的小孽分别取样，用CTAB法自各样本组织的总DNA，并对其进行ITS-PCR的扩增。结果表明：取自同一株狗牙根草的不同小孽，无论有症状还是没有症状均含有狗牙根黑粉菌的特异性条带，这说明该病菌对狗牙根草是系统性侵染为害的。这是国内首次报道相关狗牙根草黑粉病病害。图1 狗芽根黑粉病状（A）及其冬孢子形态（B）（标尺：10μm）Figure 1 The symptom（A）of Bermudan grass（Cynogon dactylon）smut and teliospore （B），bar=10μm

肾叶打碗花[Calystegia soldanella（Linn.）R.Br.]为多年生匍匐性草本植物，地下茎较粗长，地上茎光滑，平卧，不缠绕，叶互生，肾形至近圆形，基部凹缺，边缘波状，具长柄。在我国分布于吉林、辽宁、河北、山东、江苏、浙江、福建、台湾省等沿海省区的砾石海滩上，是我国沿海地带盐性砾土的指示植物，在世界各海滩也均有分布。它总是作为沙质、沙砾质、砾石质草场优势种或伴生种出现在海滨，具有很高的护滩抗风性能。由于其茎秆脆嫩、纤维素含量少，叶片肥厚，气味纯正，为多种家畜所喜食，所以是一种近海沙滩地上的好盐牧草。肾叶打碗花还具有一定的再生能力，花前期放牧或刈割，其再生草量可达第一次收草量的75%以上，这在土壤条件比较差的盐性海涂沙地上，确系一种高产牧草，因而具有很高的利用和饲用价值[1]。2006年在黄岛进行植物采样中发现肾叶打碗花上发生一种由旋花柄锈菌（Puccinia convolvuli Castagne）引起的锈病。该锈病严重的降低了肾叶打碗花的产量和饲用价值，因而本文将从该病的症状、病原菌、发病规律入手，详细报道该病的发生情况，为该病的防治提供依据。肾叶打碗花锈病标本于2006～2007年采集于山东省青岛市黄岛海滩和仰口海滩。从病叶片的正反两面用挑或刮的方法将病原菌制片，进行初步观察。为进一步观察病原菌在寄主体上的着生状况，可进行冷冻切片的制作，即将病斑从叶片上切下，约4mm×4mm大小，然后用石蜡冷冻切片机进行冷冻切片，把切好的组织用细毛刷挑在载玻片上摆放整齐，然后在体视镜下观察，将切得较好的组织用细挑针挑于另一载玻片上，在显微镜下观察、测量、描述形态特征并进行拍照。5月初至5月中旬开始发病，初期在叶片正面形成红褐色圆形病斑（图1），边缘色稍淡，性孢子器米黄色或红褐色，单生或聚生。5月中下旬在病斑背面对应性孢子器处产生淡黄色突起，后突破寄主表皮形成杯状锈孢子器（图2），淡黄色至米黄色，边缘白色。6月初至6月中旬，在叶片病斑两面产生淡褐色的疱状斑，后破裂露出褐色的粉状物，为病原菌的夏孢子（图3）。10～11月在夏孢子堆上产生肉桂褐色冬孢子堆（图4），散生或聚生，隆起，后期破裂，在叶片上及茎蔓上均可产生。图1 叶片正面的性孢子器；图2 叶片背面的杯状锈孢子器； 图3 叶片上的夏孢子堆； 图4 叶片上的冬孢子堆；图5 性孢子器（白箭头）及锈孢子器（黑箭头）； 图6 锈孢子；图7 夏孢子；图8～9 冬孢子堆；图10 冬孢子性孢子器黑色，球形，80～100μm（图5）；锈孢子器杯状，336～432μm×250～384μm（图5），锈孢子无色，但内部具黄色的内容物，因而稍显淡黄色，双壁，不光滑，具细刺，圆形至不规则形，17.5～20μm×12.5～5μm（图6）；夏孢子褐色，圆形或卵圆形，双层壁，较厚，壁光滑或有细刺，25.0～30.0μm×22.5～27.5μm（图7）；冬孢子双胞，具柄，淡黄色至黄褐色，25～42.5μm×15.3～25μm（图8～图10）。经查阅资料并进行鉴定，肾叶打碗花锈病的病原菌为旋花柄锈菌（P.convolvuli Castagne）。经过观察和鉴定，肾叶打碗花锈病的病原菌是柄锈菌属旋花柄锈菌（P.convolvuli Castagne）。通过对病原菌在寄主上的生长状况的观察，发现其为单主寄生全锈型锈菌，在叶片正面产生性孢子器，背面产生杯状的锈孢子器，在叶片两面产生夏孢子堆和冬孢子堆[2]，对于担孢子未进行冬孢子的萌发观察。旋花柄锈菌（P.convolvuli Castagne）仅在我国旋花科6属9种植物上引起锈病[3～6]，如头花银背藤[Argyreia capitata（Vah.）Arn.ex Choisy]，打碗花（Calystegia hederacea Wall.ex Roxb.）、鼓子花[C.sepium auct.non（L.）R.Br.]、肾叶打碗花[C.soldanella（Linn.）R.Br.]、田旋花（Convolvulus arvensis L.）、圆叶牵牛[Pharbitis purpurea（L.）Voigt]、牵牛花[P.nil（L.）Choisy]、甘薯（Ipomoea sp.）、鳞蕊藤[Lepistemon binectariferum（Wall.ex Roxb.）O.Kuntze]。肾叶打碗花锈病仅在山东烟台地区报道过[3]，而在我国其他地区未见报道。此次为该病在青岛地区的首次报道。致谢：感谢青岛农业大学孙丽娟老师和植保专业2003级学生韩建强帮助采集肾叶打碗花病害标本。

培育和种植抗病品种是防控植物病害的重要途径之一。研究苹果对炭疽菌叶枯病的抗性遗传规律，对筛选与炭疽菌叶枯病抗性基因连锁的分子标记，利用分子标记辅助育种有着极其重要的意义。作者采用两个高抗苹果炭疽菌叶枯病品种 （系） ‘富士’和‘QF-2’ （‘秦冠’ב富士’ 杂交后代中的高抗品系）；两个高感病品种 ‘金冠’ 和 ‘嘎拉’ 为亲本配制了4个杂交群体，采用室内人工离体接种的方法对4个杂交组合的F1 单株进行了苹果炭疽菌叶枯病的抗性鉴定，以期揭示苹果炭疽菌叶枯病的抗性遗传规律，为发掘与抗性基因紧密连锁的分子标记，开展苹果抗炭疽菌叶枯病分子育种奠定基础。选择青岛农业大学苹果试验基地 （山东省胶州市） 2009—2014年种植的4个杂交组合的F1 群体及4个亲本作为室内人工接种鉴定的试验材料。4个群体分别是：‘金冠’ב富士’ F1 代 207 株、‘富士’ב金冠’ F1 代95 株、‘嘎拉’ב富士’ F1 代 262 株、‘富士’בQF-2’ F1 代198株。取样期间不喷施农药，其他管理正常。室内人工离体接种采用的病菌取自山东省莱西市南墅镇上庄村的‘嘎拉’ 苹果炭疽菌叶枯病病叶。经鉴定病原为围小丛壳 G. cingulata （Wang et al.，2012）。将收集到的 ‘嘎拉’ 苹果炭疽菌叶枯病病叶在25℃室内保湿培养3 d，从病叶上产生的分生孢子中，挑取单孢，在PDA培养基中培养，获得纯培养菌株，并在5℃冰箱中保存。接种前将保存的菌种转接到PDA培养基中，25℃活化，待菌落长满培养皿的2/3时，用接种环刮除气生菌丝，25℃继续培养2～3 d，直至培养基中长出橘黄色分生孢子角。用接种环挑取适量分生孢子角，放入盛有无菌蒸馏水的烧杯中摇匀，用血球计数板检测孢子悬浮液浓度，调至104 个/ml备用。孢子悬浮液现配现用，放置时间不超过1h。在洁净的单凹载玻片上滴一滴苹果炭疽病菌孢子悬浮液，然后盖上盖玻片，放入底面盛有少许水的培养皿中，盖上皿盖，放入 25℃培养箱中培养12 h。显微镜下观察孢子的萌发力。孢子平均萌发力在20%以上均为可用。从供试苹果树上剪取一年生健壮的新梢，每个材料取 4 个枝条（2个用于接种鉴定，2 个用作对照），剪除枝条两端，保留顶部4 个完全展开的叶片。用0.6%的次氯酸钠对叶片表面消毒，然后用无菌水冲洗，沥干，用小型喷雾器将摇匀后的分生孢子悬浮液均匀喷洒到叶片正反两面，至叶片刚刚开始流水为止。将接种及喷有无菌蒸馏水的枝条 （对照）均匀分插到两个孔穴盘上，置于装有适量蒸馏水的泡沫箱内，加盖密封保湿，置于25℃恒温培养箱内暗培养。4d 后进行抗性鉴定和数据记录，将叶片上无病斑的定为 “抗病”，记为 （R），把有病斑的定为“感病”，记为 （S）。卡方检验采用SPSS13.0软件进行分析。鉴于该病尚无有效防治措施，为防止病原传播，作者未进行田间接种鉴定。通过室内人工接种对4个杂交组合中的4 个亲本及1 个相关品种进行抗性鉴定 （表2-1）。‘富士’ 和 ‘QF-2’ 的叶片无病斑，表现为对炭疽菌叶枯病的高度抗性；‘金冠’ ‘嘎拉’ 和 ‘秦冠’ 的叶片均出现病斑，且病斑数均在20 个以上，表现出对炭疽菌叶枯病易感染性。亲本叶片平均病斑数抗病性富士0抗病（R）QF-20抗病（R）金冠21.1感病（S）秦冠22.8感病（S）嘎拉22.4感病（S）表2-1 不同苹果品种 （系） 对炭疽菌叶枯病抗性的室内接种鉴定离体接种鉴定结果 （附图 2-1） 表明，不同品种和 F1 杂交后代单株对炭疽菌叶枯病抗感表现差异明显。而且这一结果与田间抗性调查结果相符 （附图2-2）。在安徽砀山发病区，‘嘎拉’ （附图2-2 左图） 和 ‘秦冠’ （附图2-2右图） 苹果树干上嫁接 ‘富士’ 枝条，染病后，‘嘎拉’ 和 ‘秦冠’ 的叶片已经全部脱落，‘嘎拉’ 仅剩下光秃的枝干，‘秦冠’ 仅剩下果实，与 ‘富士’ 枝条上翠绿的叶片形成鲜明的对照。这充分显示不同品种 （系） 对苹果炭疽菌叶枯病的抗性差异明显，遗传性对苹果炭疽菌叶枯病的抗性起着主导作用，同时也证实了上述品种 （系） 可以作为苹果炭疽叶枯病遗传规律研究的典型材料。在 ‘金冠’ב富士’ 组合的F1 代群体中，共调查了207株，其中抗病株为 93 株，感病株为 114 株，经适合性检验， x20.05=1.07 （ P＞0.05）；在 ‘富士’ב金冠’ 组合的 F1 代群体共调查 95 株，其中抗病株为 40 株，感病株为 55 株， x20.05=1.20 （ P＞0.05） （表2-2）。二者卡方值均小于 x20.05=3.84， P 值均大于0.05，说明样本的抗病与感病的表型比值符合1∶1的理论分离比，初步判断该试验组合中苹果对炭疽菌叶枯病的抗性由单基因控制。计算 ‘金冠’ב富士’ 组合正反交之间抗感差异得卡方值0.21 （小于 x20.05=3.84），二者没有显著性差异，说明苹果抗炭疽菌叶枯病为细胞核遗传，不受胞质遗传物质影响，即不存在母性遗传效应。杂交组合株数总株数抗病感病抗感比抗感比期望值x2P金冠×富士207931140.82∶11∶11.070.30富士×金冠9540550.73∶11∶11.200.27嘎拉×富士26242580.02∶10∶1—0.12富士×QF-2198195365∶11∶0—0.25表2-2 杂交F1 代植株对苹果炭疽菌叶枯病的抗性表现在 ‘嘎拉’ב富士’ 杂交后代群体中，共调查了262 株，出现了4株抗病单株，经适合性检验， P值为0.12，大于0.05，无显著性差异，符合0∶1 的理论比值，表明该杂交后代抗病对感病呈隐性单基因遗传；‘富士’בQF-2’ 杂交后代群体中共调查了198 株，出现3株感病植株， P值为0.25，符合1∶0的理论比值 （表 2-2），说明该杂交后代抗病性受单基因控制。综合上述研究结果，可以确定苹果对炭疽菌叶枯病的抗性由隐性单基因控制。综合不同杂交组合的亲本及后代对苹果炭疽菌叶枯病抗性的表型性状分析结果，可以假设本试验群体中，对苹果炭疽菌叶枯病表现为抗病的植株基因型为rr，感病植株为 RR或 Rr，并由此推测出供试亲本品种 （系） ‘富士’ ‘金冠’ ‘嘎拉’ ‘QF-2’ 的基因型分别为 rr、Rr、RR和rr，‘秦冠’ 为Rr （附图2-3）。病害的发生是寄主与病原菌在一定环境条件下相互作用的结果。所以接种条件和病原菌的致病性对寄主的抗性鉴定结果有着重要的影响。根据Wang等 （2015） 的试验结果，25℃是苹果炭疽菌叶枯侵染的最适温度，自由水或高湿条件是分生孢子萌发的必要条件，接种后第4d病斑数达到最大值，特征最明显。本试验所采用的接种方法和试验条件是根据Wang等 （2015） 所得出的试验结论进行的，采用适宜的孢子浓度、温度、湿度和最佳病斑计数时间，使寄主与病原菌的互作关系得到充分体现。所用的病原菌是从 ‘嘎拉’ 感病叶片上采集、分离、纯化的，对 ‘嘎拉’ ‘金冠’ ‘秦冠’ 等具有强致病性，保证了鉴定结果的可靠性。目前对于苹果炭疽菌叶枯病的一些报道还仅限于对引起病害的相关因素、病原菌的生理学、致病机制、寄主响应及防治措施等方面的研究 （González，2006；Wang et al.，2012；Velho et al.，2014；Araujol and Stadnik，2013；Wang et al.，2015；王薇等，2015），对于抗性遗传规律、分子标记定位等研究少有报道。作者利用4个杂交群体的后代个体对炭疽菌叶枯病抗性表现进行了综合分析，得出苹果杂交后代中抗炭疽菌叶枯病受隐性单基因控制的结论，这与Dantas等 （2009） 研究认为 ‘嘎拉’ ‘富士’ 等苹果品种对炭疽菌叶枯病的抗性是由一对隐性基因控制的结果相一致。作者认为抗病基因型为rr，感病基因型为 RR或 Rr，由此推测供试杂交群体的亲本品种 （系） ‘富士’ ‘金冠’ ‘嘎拉’ ‘QF-2’ 的基因型分别为rr、Rr、RR和rr，‘秦冠’ 的基因型为Rr。由于苹果在遗传构成上高度杂合，又是自交不亲和植物，杂种树童期较长，对苹果树抗病遗传规律的研究很难采用和借鉴其他作物的遗传群体创建方法，如通过自交，回交，侧交等手段获得 F2、BC 等分离群体。本试验采用 4个不同的杂交群体后代对炭疽菌叶枯病的抗性进行表型鉴定，这一方法可以为类似的果树抗病性遗传研究提供参考。

蛴螬是鞘翅目金龟甲总科幼虫的总称。金龟甲按其食性可分为植食性、粪食性、腐食性3类，植食性种类中以鳃金龟科和丽金龟科的一些种类发生普遍，为害最重。蛴螬分布于全国各地。植食性蛴螬大多食性很杂，同一种蛴螬常可为害双子叶和单子叶粮食作物、多种瓜类和蔬菜、油料、芋、棉、牧草以及花卉和果、林等播下的种子及幼苗。幼虫终生栖居土中，喜食刚刚播下的种子、根、块根、块茎以及幼苗等，造成缺苗断垄。成虫则喜食害瓜菜、果树、林木的叶和花器。蛴螬是一类分布广、为害重的害虫。蛴螬体肥大弯曲近C形，体大多白色（图4-1）。体壁较柔软，多皱体表疏生细毛。头大而圆，多为黄褐色，或红褐色，生有左右对称的刚毛，刚毛数量多少常为分种的特征。胸足3对，一般后足较长。腹部10节，第十节称为臀节，其上生有刺毛，其数目和排列也是分种的重要特征。图4-1 蛴螬蛴螬年生代数因种、因地而异。这是一类生活史较长的昆虫，一般1年发生1代，或2～3年发生1代，长者5～6年发生1代。如大黑鳃金龟2年发生1代，暗黑鳃金龟、铜绿丽金龟1年发生1代，小云斑鳃金龟在青海4年发生1代，长者5～6年发生1代，大栗鳃金龟在四川省甘孜地区则需5～6年发生1代。蛴螬共3龄。1～2龄期较短，3龄期最长。蛴螬终生栖居土中，其活动主要与土壤的理化特性和温湿度等有关。在一年中活动最适的土温平均为13～18℃，高于23℃，逐渐向深土层转移，至秋季土温下降到其活动适宜范围时，再移向土壤上层。因此，蛴螬在春、秋季两季为害最重。大面积秋、春耕，并随犁拾虫；避免施用未腐熟的厩肥，减少成虫产卵。（1）用50%辛硫磷乳油每667m2 200～250g，加水10倍，喷于25～30kg细土上拌匀制成毒土，顺垄条施，随即浅锄，或以同样用量的毒土撒于种沟或地面，随即耕翻，或混入厩肥中施用，或结合灌水施入。（2）用2%甲基异柳磷粉每667m2 2～3kg拌细土25～30kg制成毒土，或用3%甲基异柳磷颗粒剂，3%呋喃丹颗粒剂，5%辛硫磷颗粒剂，5%地亚农颗粒剂，每667m2 2.5～3kg处理土壤，都能收到良好效果，并兼治金针虫和蝼蛄。（3）每667m2用2%对硫磷或辛硫磷胶囊剂150～200g拌谷子等饵料5kg左右，或50%对硫磷或辛硫磷乳油50～100g拌饵料3～4kg，撒于种沟中，兼治蝼蛄、金针虫等地下害虫。蚜虫又称腻虫，是瓜类常见的害虫，应坚持早防、预防的原则，否则，严重影响瓜苗的生长。瓜蚜大多为棉蚜，也称桃蚜，分布广，为害普遍。蚜虫为害多集中在瓜秧嫩叶及生长点和叶片背面，造成生长缓慢和叶片反卷，影响植株生长。因蚜虫为害严重时造成叶片卷曲，不仅给药剂防治带来困难，也不利于天敌发挥作用。甚至老叶也可能受害，老叶被害后不发生或很少发生卷叶，受害叶片汁液被吸吮后很快丧失功能而提早枯死，降低西瓜的产量。蚜虫（图4-2）体长1.5～4.9mm，多数约2mm。有时被蜡粉，但缺蜡片。触角6节，少数5节，罕见4节，感觉圆圈形，罕见椭圆形，末节端部常长于基部。眼大，多小眼面，常有突出的3小眼面眼瘤。喙末节短钝至长尖。腹部大于头部与胸部之和。前胸与腹部各节常有缘瘤。腹管通常管状，长常大于宽，基部粗，向端部渐细，中部或端部有时膨大，顶端常有缘突，表面光滑或有瓦纹或端部有网纹，罕见生有或少或多的毛，罕见腹管环状或缺。尾片圆锥形、指形、剑形、三角形、五角形、盔形至半月形。尾板末端圆。表皮光滑、有网纹或皱纹或由微刺或颗粒组成的斑纹。体毛尖锐或顶端膨大为头状或扇状。有翅蚜触角通常6节，第3节或3～4节或3～5节有次生感觉圈。前翅中脉通常分为3支，少数分为2支。后翅通常有肘脉2支，罕见后翅变小，翅脉退化。翅脉有时镶黑边。身体半透明，大部分是绿色或是白色。图4-2 蚜虫蚜虫的食性杂，繁殖速度快，通常完成一个世代只需5～6天，而且以5—7月干旱季节虫量较大，为害也最重。温度高，湿度大则蚜虫量大减，不利蚜虫的繁殖，在气温16～22℃时最适宜蚜虫的生长繁殖，超过27℃则受到抑制，有时降水可造成蚜虫不同程度的死亡。发现蚜虫应及时喷药防治，喷药后5～6天后再检查1次叶片背面，若有未死蚜虫再补喷1次。由于蚜虫繁殖代数多、繁殖率高，速度快。所以，在大量发生期间应连续用药，一般每隔5～6天喷1次，连续喷药3～4次即可得到控制。喷药时须对叶背面仔细喷洒，以提高用药质量和防治效果。通常苗期用40%乐果乳油1000～1500倍液，随着植株生长逐渐加大浓度到800～1000倍，还可使用50%敌敌畏乳剂1200～1500倍液，或80%敌敌畏乳油2500倍液，或2.5%溴氰菊酯，或20%速灭杀丁乳油3000倍液防效更佳。抗蚜威及氧化乐果等也具有很好的防治效果。蝼蛄又称拉拉蛄、土狗等，属直翅目蝼蛄科。蝼蛄成虫和若虫喜食种子和幼根、幼苗，造成缺苗断垄。咬食西瓜根部和幼茎，呈现乱麻丝一样的被害状。此外，该虫在表土层穿行，形成很多隧道，使幼苗与土壤分离，失水而干枯。蝼蛄（图4-3）的触角短于体长，前足宽阔粗壮，适于挖掘，属开掘式足前足胫节末端形同掌状，具4齿，跄节3节。前足胫节基部内侧有裂缝状的听器。中足无变化，为一般的步行式后足脚节不发达。覆翅短小，后翅膜质，扇形，广而柔。尾须长。雌虫产卵器不外露，在土中挖穴产卵，卵数可达200～400粒，产卵后雌虫有保护卵的习性。刚孵出的若虫，由母虫抚育，至1龄后始离母虫远去。图4-3 蝼蛄成虫蝼蛄多在春季危害瓜类的幼苗和种子，也咬食幼根、嫩茎，造成缺苗断垄。华北蝼蛄3年左右1代，非洲蝼蛄则2年左右1代，均以成虫或若虫在土壤中越冬。土壤湿度对蝼蛄的活动影响很大，土壤干旱则蝼蛄活动差。久旱不雨，下雨后则蝼蛄的活动最盛。一般10～20cm表土温度接近或超过20℃时蝼蛄活动猖獗，小于15℃时活动较差。因此，低湿地块发生较重。非洲蝼蛄比华北蝼蛄更喜潮湿。深耕细耙，轮作倒茬，结合中耕除草，合理施肥，能消灭土中部分蝼蛄，减轻为害。在3—4月蝼蛄开始上升地表活动而未迁移前，铲除表土找出洞口，挖出洞中害虫消灭。夏季结合中耕，在蝼蛄产卵盛期挖出卵粒或雌蛄。在日均气温达到15℃以上时，利用成虫趋向马粪的习性，在瓜田挖坑并投上新鲜马粪诱集，并与次日清晨将诱集到的蝼蛄收集杀死。也可利用90%敌百虫拌成毒铒撒于瓜田诱杀，还可以利用黑光灯于瓜田附近诱捕灭虫。在发生严重的地块或苗床，除可用毒铒外，还可以用50%敌敌畏100倍液灌洞，其效果也比较好。以成虫和若虫锉吸西瓜心叶、嫩芽、嫩梢、幼瓜的汁液。嫩梢、嫩叶被害后不能正常伸展，生长点萎缩、变黑、锈褐色，新叶展开时出现条状斑点，茸毛变黑而出现丛生现象。幼瓜受害时质地变硬，毛茸变黑，出现畸形，易脱落。成瓜受害后瓜皮粗糙，有黄褐色斑纹或瓜皮长满锈皮，使瓜的外观，品质受损，商品性下降。蓟马种类很多，其中，为害两瓜的蓟马主要有2种，分别是棕榈蓟马和烟蓟马。棕榈蓟马，别名瓜蓟马、棕黄蓟马，节瓜蓟马。成虫（图4-4）体长1mm左右，全体黄色，前胸后缘有缘鬃6根。中胸腹板内叉骨有长刺，后胸无刺。复眼稍突出，单眼3只、红色、三角形排列，单眼间鬃位于单眼三角形连线的外缘，触角7节。翅狭长，透明，周缘具长缘毛，前翅上脉基鬃7条，中部至端部3条，第八腹节后缘栉毛完整。图4-4 棕榈蓟马烟蓟马，别名棉蓟马、葱蓟马。雌虫（图4-5）体长1.2mm，淡棕色，体光滑，复眼红色。触角7节，淡黄褐色，每节基部色浅。特别是第三节基部细长如柄。前胸背板宽为长的1.6倍，整个前胸背板上有稀疏的细毛，后缘接近后角各有2根粗而长的刚毛。翅淡黄，前翅前缘有一排细鬃毛与缘纲混生，前脉上有10～13根细鬃毛，后脉有14～17根细鬃毛。腹部第2～8节背片前缘有1黑色横纹。卵肾形后为卵圆形。若虫初为白色透明，后为浅黄色至深黄色。前蛹和蛹与若虫相似，但翅芽明显。图4-5 烟蓟马在浙江省及长江中下游1年发生10～12代，广州市20代以上，世代重叠严重。多以成虫在茄科，豆科蔬菜、杂草或在土缝下、枯枝落叶中越冬，少数以若虫越冬。成虫具有较强趋蓝性、趋嫩绿性，善飞，怕光，多在阴天或早晚为害。以7—9月为害最重。1年发生3～20代，东北3～4代，长江流域以南10代以上，以成虫和若虫在土块下、土缝内或枯枝落叶中越冬。在华南地区无越冬现象。对蓝色光有强烈趋性。干早年份5月中下旬至7月上旬为害严重。温度25℃，相对湿度60%以下，有利于烟蓟马发生，暴风雨可降低虫口密度。清除瓜田杂草，加强水肥管理，使植株生长旺盛，可减轻为害。于成虫盛发期，在田间设置蓝色诱虫黏胶板，诱杀成虫。瓜苗2～3片真叶期到成株期要经常检查，当植株心叶始见3～5头蓟马时应用药防治，开始隔5天喷药1次，连喷2次以压低虫口数量，以后视虫情隔7～10日喷药2～3次。可选用10%多杀霉索（菜喜）1000倍液，70%吡虫啉（艾美乐）水分散剂10000倍液，25%噻虫嗪（阿克泰）水分散粒剂6000～8000倍液、5%氟虫腈（锐劲特）胶悬剂1500～2500倍液喷雾。黄守瓜的成虫和幼虫都能造成为害。成虫多为害瓜叶，以身体为半径转咬食一周，然后取食叶肉，使叶片残留若干环形食痕或圆形孔洞。果实被害轻者果面残留疤痕或腐烂。幼虫黄守瓜的成虫和幼虫都能造成为害。成虫多为害瓜叶（图4-6），以身体为半径转咬食1周，然后为害远大于成虫造成的为害。图4-6 黄守瓜为害瓜叶黄守瓜（图4-7）体长卵形，后部略膨大。体长6～8mm。成虫体橙黄或橙红色，有时较深。上唇或多或少栗黑色。腹面后胸和腹部黑色，尾节大部分橙黄色。有时中足和后足的颜色较深，从褐黑色到黑色，有时前足胫节和跗节也是深色。头部光滑几无刻点，额宽，两眼不甚高大，触角间隆起似脊。触角丝状，伸达鞘翅中部，基节较粗壮，棒状，第2节短小，以后各节较长。前胸背板宽约为长的2倍，中央具一条较深而弯曲的横沟，其两端伸达边缘。盘区刻点不明显，两旁前部有稍大刻点。鞘翅在中部之后略膨阔，翅面刻点细密。雄虫触角基节极膨大，如锥形。前胸背板横沟中央弯曲部分极端深刻，弯度也大。鞘翅肩部和肩下一小区域内被有竖毛。尾节腹片三叶状，中叶长方形，表面为一大深洼。雌虫尾节臀板向后延伸，呈三角形突出；尾节腹片呈三角形凹缺。图4-7 黄守瓜成虫黄守瓜是瓜类作物的重要害虫，在中国北方1年发生1代，南方1～3代，中国台湾南部3～4代。以成虫在背风向阳的杂草、落叶和土缝间越冬。黄守瓜喜温好湿，成虫多在温暖晴天活动，夜间潜伏，阴雨天不活动，上午10：00至15：00时成虫为害最烈。为害程度与温度关系密切，成虫在0℃时休眠不活动，当土温升至6℃时开始活动，10℃时由潜伏处钻出开始为害，其中，以22～28℃取食为害最盛。成虫有假死现象。黄守瓜成虫迁飞能力强，为了保护秧苗不受危害，应以防止成虫产卵和防治幼虫危害为主。趁早晨露水未干时，根据被害叶片症状，在瓜叶下捕杀成虫。药剂杀虫可用90%晶体敌百虫800～1000倍液喷洒防治，也可用2.5%敌百虫粉喷施，每666.7m2用药1.5～2.0kg。幼虫严重为害时，可用敌敌畏乳油1000倍液或鱼藤精500倍液以及90%敌百虫晶体配成800倍液进行灌根灭虫。也可在成虫产卵期当清晨露水未干时，在瓜根附近土面及瓜叶上撒草木灰、锯末屑等防止其产卵。红蜘蛛主要以成、若、幼螨群聚叶背吸取汁液，为害初期叶面出现零星褪绿斑点，严重时白色小点布满叶片（图4-8），使叶面变为灰白色，最后造成叶片干枯脱落，影响生长，缩短结果期，造成减产。图4-8 白色小点布满叶片红蜘蛛别名红叶螨，全爪螨、瓜叶螨。有朱砂叶螨、二斑叶螨和截形叶螨，在我国为害西瓜的种类以朱砂叶螨为主，属蛛形纲蜱螨目叶螨科。分布广泛，食性杂，可为害110多种植物，以茄科、葫芦科、豆科蔬菜为主。成螨（图4-9）体长0.42～0.52mm，锈红色或淡黄色，椭网形，有4对足，腹背两侧各有1个暗色斑纹，体背毛排成4列。卵圆球形，光滑，无色至深黄色带红。幼螨近圆形，有3对足，暗绿色，眼红色。若螨椭圆形，红色，有4对足，体侧有明显的块状色素。图4-9 成螨浙江省及长江中下游地区1年发生20代以上。越冬虫态随地区不同而异，多以雌成螨、幼螨和卵在土缝、树皮和杂草根部过冬。翌年早春2—3月开始活动，4月中下旬至5月初陆续向作物上转移为害。每头雌成螨平均可产卵百余粒，成螨和若螨靠爬行或吐丝下垂在植株间蔓延危害。红蜘蛛喜温暖、干燥，少雨、干旱的夏季发生严重，以6—8月为害最甚。秋耕秋灌，恶化越冬螨的生态环境；清除棚边杂草，消灭越冬虫源。天气干旱时，进行灌水，增加瓜田湿度，造成不利叶螨生育繁殖的条件。可选用1.8%阿维菌素4000倍液，或20%速螨酮（果螨特）、5%噻螨酮1500～2000倍液，或24%螺螨酯（螨危）3000倍液。每5～7天喷施1次，连续喷2～3次。重点喷洒植株上部的嫩叶背面、嫩茎及幼果等部位，并注意农药交替使用。瓜绢螟又名瓜螟、瓜野螟，属鳞翅目螟蛾科。瓜绢螟主要为害西瓜、黄瓜、丝瓜、苦瓜、甜瓜、茄子、马铃薯等多种作物。以幼虫为害叶片，1～2龄幼虫在叶背啃食叶肉，仅留透明表皮，呈灰白斑；3龄后吐丝将叶或嫩梢缀合，匿居其中取食，致使叶片穿孔或缺刻，严重时仅剩叶脉。幼虫还啃食西瓜表皮，留下疤痕，并常蛀入瓜内为害，严重影响瓜果产量和质量。成虫（图4-10）体长约11mm，翅展25mm左右，头、胸部黑色，前后翅白色半透明状，略带紫光，前翅前缘和外缘及后翅外缘均为黑褐色，腹部除第一、第七、第八体节黑褐色外，均为白色。停留不飞行时，前后翅伸开，翅面与腹部有第2～6节的白色组成一个等边在角形，腹末向上翘起，并不停摆动，末端有一丛黄色或黄褐色相间茸毛。卵扁平椭圆形，淡黄色，表面有网状纹。幼虫共5龄，老熟幼虫（图4-11）体长23～26mm，头部前胸背板淡褐色，胸腹部草绿色，亚背线呈两条较宽的乳白色纵带，气门黑色。蛹长约14mm，体色由淡绿色渐变为浓绿色或深褐色，头部光整尖瘦，翅端达第六腹节，外被薄茧。图4-10 成虫图4-11 幼虫浙江省及长江中下游1年发生4～6代，广东省6代，以老熟幼虫或蛹在寄生的枯卷叶内或土表越冬。其中，第三、第四代为害最重，世代重叠。在广州地区各代成虫发生期如下；第一代4月下旬至5月上旬，第二代6月上、中旬，第三代7月中、下旬，第四代8月下旬至9月上旬，第五代10月上、中旬，第六代11月下旬至12月上旬。成虫夜间活动，趋光性弱，白天潜伏于隐蔽场所或叶丛中。幼虫较活泼，遇惊即吐丝下垂转移他处为害，5月开始为害，7—9月为盛发期。采收完毕后，将枯藤落叶收集中沤肥或烧毁，减少田间虫口密度或越冬基数。灯光诱杀成虫。在幼虫发生初期，人工摘除卷叶，捏杀部分幼虫和蛹。在低龄幼虫高峰期（未卷叶前）用药防治，药剂可选10%三氟吡醚（速美效）乳油1000倍液、5%虱螨脲（美除）乳油1000倍液、5%氟虫腈（锐劲特）悬浮剂1500～2000倍液、15%茚虫戚（安打）3000倍液、5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（甲维盐） 4000倍液、10%溴虫腈（除尽）1000倍液。地老虎又名土蚕、切根虫等，是我国各类农作物苗期的重要地下害虫。我国记载的地老虎有170余种，已知为害农作物的大约有20种左右。其中，小地老虎、黄地老虎、大地老虎、白边地老虎和警纹地老虎等为害比较严重。地老虎以幼虫为害西瓜主要在苗期。幼虫3龄前，多聚集在嫩叶或嫩茎上咬食，3龄以后转入土中，有昼伏夜出的习性，常将幼苗咬断（图4-12）并拖入土穴内咬食，造成瓜田缺苗断垄，或咬蔓尖及叶柄，阻碍植株生长。图4-12 幼苗被咬断状成虫（图4-13）体长16～23mm，翅展42～54mm，深褐色，前翅有明显的肾状斑，环形纹。棒状纹和2个黑色剑状纹，后翅灰色无斑纹。幼虫（图4-14）体长37～47mm，灰黑色，体表布满大小不等的颗粒，臀板黄褐色，具有3条深褐色纵带。图4-13 成虫图4-14 幼虫成虫夜间活动交配产卵。卵产在5cm以下矮小杂草上，尤其在贴近地面杂草的叶背或嫩茎上较多。幼虫共6龄，3龄前在地面、杂草或寄主的幼嫩部位取食。3龄以后白天潜伏在表土中，夜间出来为害。小地老虎喜欢温暖潮湿的条件，最适发育温区为13～25℃。在河流、湖泊地区或低洼内涝、雨水充足及常年灌溉区，土质疏松，团粒结构好，保水性强的壤土、黏壤土、沙壤土均适于发生。（1）利用成虫的趋光性及趋化性诱杀。设置糖酒醋诱蛾器诱杀，或用黑光灯诱杀。（2）药剂防治幼虫。小地老虎幼虫1～3龄时抗药性弱，且暴露在寄主植物或地面上，是药剂防治的最佳时期。可用灭杀毙（21%增效氰·马乳油）800倍液；25%溴氰菊酯或20%戊氰菊酯3000倍液，90%敌百虫800倍液或50辛硫磷800倍液喷雾防治。也可将玉米面、麦麸子1kg炒熟，出香味后拌敌百虫0.1kg，在每天傍晚，即太阳落山前1个小时，撒在距西瓜10～15cm的地膜上，诱杀幼虫，效果较好。温室白粉虱对作物及花卉蔬菜的为害。主要如下。（1）直接为害，连续吸吮使植物生长缺乏碳水化合物，产量降低。（2）注射毒素，吸食汁液时把毒素注入植物中。（3）引发真菌，其分泌的蜜露适于真菌生长，污染叶片与果实。（4）影响产品质量，真菌导致一般果实变黑。（5）传播病毒病，白粉虱是各种作物病毒病的介体。白粉虱成虫排泄物不仅影响植株的呼吸，也能引起煤烟病等病害的发生。白粉虱在植株叶背大量分泌蜜露，引起真菌大量繁殖，影响到植物正常呼吸与光合作用，从而降低蔬菜果实质量，影响其商品价值。卵：椭圆形，具柄，开始浅绿色，逐渐由顶部扩展到基部为褐色，最后变为紫黑色。1龄：身体为长椭圆形，较细长；有发达的胸足，能就近爬行，后期静止下来，触角发达、腹部末端有1对发达的尾须，相当体长的1/3。2龄：胸足显著变短，无步行机能，定居下来，身体显著加宽，椭圆形；尾须显著缩短。3龄：体形与2龄若虫相似，略大；足与触角残存；体背面的蜡腺开始向背面分泌蜡丝；显著看出体背有3个白点：即胸部两侧的胸褶及腹部末端的瓶形孔。蛹：早期，身体显著比3龄加长加宽，但尚未显著加厚，背面蜡丝发达四射，体色为半透明的淡绿色，附肢残存；尾须更加缩短。中期，身体显著加长加厚，体色逐渐变为淡黄色，背面有蜡丝，侧面有刺。末期，比中期更长更厚，成匣状，复眼显著变红，体色变为黄色，成虫在蛹壳内逐渐发育起来。成虫（图4-15）：雌虫，个体比雄大，经常雌雄成对在一起，大小对比显著。腹部末端有产卵瓣3对，（背瓣，腹瓣，内瓣），初羽化时向上折，以后展开。腹侧下方有两个弯曲的黄褐色曲纹，是蜡板边缘的一部分。两对蜡板位于第二、第三腹节两侧。雄虫，和雌虫在一起时常常颤动翅膀。腹部末端有一对钳状的阳茎侧突，中央有弯曲的阳茎。腹部侧下方有四个弯曲的黄褐色曲纹，是蜡板边缘的一部分。四对蜡板位于第二、第三、第四、第五腹节上。图4-15 白粉虱成虫白粉虱、烟粉虱在北方温室和大棚栽培条件下，1年可发生10余代，繁殖快，代次多，世代重叠明显。以各虫态在温室作物上越冬并继续为害。冬天，室外不能越冬，华中以南以卵在露地越冬。成虫喜幼嫩的植物，聚集于叶背为害，趋黄色，卵散产或排列呈环状，多产在植株中部嫩叶上。初孵若虫可短距离爬行寻找取食场所，2龄之后固定在叶背为害，开始营固定生活。春末夏初是露地粉虱种群数量上升时期，在夏季种群数量有所下降，但秋季又迅速上升达到高峰，至10月中下旬由于气温下降虫口数量逐渐减少。秋末至春天为其发生盛期，暖冬发生尤为严重。暴风雨能抑制其大发生，非灌溉区或浇水次数少的作物受害重。（1）培育栽植无虫苗。育苗前清除杂草和残株，通风口设尼龙纱网，防止外来虫源。收获后，立即清除温室内残留若虫的枝叶，集中烧毁或深埋，并清除田间及温室四周杂草。（2）轮作。避免黄瓜、西瓜、番茄、菜豆等混栽或轮作，与十字花科蔬菜进行轮作，以减轻发生。（3）熏药灭虫。保护地栽培育苗前，先灭虫后育苗。每667m2可用80%敌敌畏乳油0.4～0.5kg，与锯末或其他燃烧物混合，点燃熏烟杀虫。（4）在温室、大棚门窗或通风口，悬挂白色或银灰色塑料薄膜条，驱避成虫侵入。（5）在粉虱发生初期，利用烟粉虱趋黄性，可在温室内设置黄板诱杀成虫，黄板底部与植株顶端平齐或略高于植株顶端，每隔2～3m挂1块。鉴于粉虱繁殖迅速和易于分散，为提高总体防效，应提倡一个地区范围内联防联治，并注意治早、治少。抓住虫体发生初期，虫口密度较低时施药。药剂可选2.5%囔虫嗪（阿克泰）水分散粒剂6000～8000倍液、20%啶虫脒乳油3000～4000倍液、10%烯啶虫胺1000～1500倍液、25%吡虫啉（允美）3000～4000倍液、25%噻嗪酮（扑虱灵）可湿性粉剂1000倍液、2.5%氯氟氰菊酯（功夫）乳油5000倍液、2.5%联苯菊酯（天王星）乳油3000倍液；如果虫量较高，可将25%噻嗪酬（扑虱灵）可湿性粉剂1000倍液和99%机油乳剂（绿颖）400倍液混用，连喷1～2次。每7～10天防治1次，连续防治2～3次，注意交替用药和合理混配。美洲斑潜蝇别名画图虫、蛇形斑潜蝇、甘蓝斑潜蝇等，原产于巴西，属双翅目、潜叶蝇科、植潜蝇亚科、斑潜蝇属，是全国植物检疫对象。为害西瓜、黄瓜、番茄、茄子、豇豆、蚕豆、大豆、菜豆、甜瓜，丝瓜、西葫芦、大白菜等22科110多种植物。成虫、幼虫均可为害，雌成虫刺伤植物叶片，进行取食和产卵，幼虫潜入叶片和叶柄为害，形成先细后宽的蛇形弯曲或蛇形盘绕虫道（图4-16）；其内有交替排列整齐的黑色虫粪，老虫道后期呈棕色的干斑块区，一般1虫1道。叶绿素被破坏，影响光合作用，受害重的叶片脱落（图4-17），造成花芽、果实被伤，严重的造成毁苗。斑潜蝇造成的伤口为其他病菌提供了侵入途径及孳生场所，而其本身还可传带多种病毒，加重对西瓜的为害。图4-16 初期为害状图4-17 后期为害状成虫（图4-18）体长1.3～2.3mm，浅灰黑色，额、颊、颜和触角金亮黄色，眼后缘黑色，中胸背板亮黑色，中侧片黄色，下缘带黑色斑，腹侧片有1个三角形大黑斑。体腹面黄色，雌虫个体比雄虫大。卵米色，半透明。幼虫（图4-19）蛆状，初无色，后变为浅橙黄色至橙黄色，长3mm，后气门突呈圆锥状突起，末端三分叉。蛹长椭圆形，橙黄色，分节明显。图4-18 美洲斑潜蝇成虫图4-19 美洲斑潜蝇幼虫1年发生14～16代，在海南、福州等南方各地周年发生，无越冬现象，世代重叠明显。在北方各地以蛹在土壤中越冬，第二年春季羽化。美洲斑潜蝇世代短，繁殖能力强，每世代夏季2～4周，冬季6～8周。成虫具有较强的趋光性，趋黄性，有一定飞翔能力，在田间仅能进行短距离扩散，主要随寄主植物的叶片、茎蔓、甚至鲜切花的调运而传播。高温、干旱对其发生有利，能导致猖獗为害。（1）把斑潜蝇嗜好的瓜类、茄果类、豆类与其不为害的作物进行套种或轮作。（2）把被斑潜蝇为害的作物残体集中深埋、沤肥或烧毁，收获后及时清洁田园。（3）利用插黄牌、挂黄条诱杀成虫。用长方形木板、塑料板正反面部涂上黄色油漆，再涂上一层机油或黏虫胶，用木棍支撑插在瓜田里或用铁丝绳索挂于田间架材或棚架上。（4）在成虫始盛期至盛末期，每667m2置15个诱杀点，每个点放置1张诱蝇纸诱杀成虫，3～4天更换1次。也可用斑潜蝇诱杀卡，使用时把诱杀卡揭开挂在斑潜蝇多的地方，室外使用时15天换1次。可在成虫高峰期或见产卵痕，取食孔时，即开始喷药，掌握在幼虫2龄前（虫道很小时），于8：00～11：00时露水干后幼虫开始到叶面活动或者老熟幼虫多从虫道中钻出时开始喷洒75%灭蝇胺（潜克）可湿性粉剂5000～7000倍液、1.8%阿维菌素3000～5000倍液。黄曲条跳甲主要为害十字花科蔬菜，也为害瓜类、番茄、豆类。成虫、幼虫均可为害，以成虫为害较大。成虫食叶，以幼苗期为害严重，刚出土的幼苗子叶被吃光后整株死亡，造成缺苗断垄。成虫咬食过的叶片有许多小椭圆形孔洞（图4-20），还可为害瓜果、果梗和嫩梢。幼虫生活在土中，只为害根，剥食根皮或蛀入根内形成许多隧道，使植株凋萎枯死。图4-20 叶片有许多小椭圆形孔洞黄曲条跳甲属鞘翅目叶甲科。成虫（图4-21）体长2mm，长椭圆形，黑色有光泽，前胸背板及鞘翅上有许多刻点，排成纵行。鞘翅中央有一黄色曲条，两端大，中部狭而弯曲。后足腿节膨大。卵椭圆形，初产时淡黄色，后变乳白色。幼虫长约4mm，稍呈长圆筒形，头部淡褐色，胸腹部淡黄白色，尾部稍细，腹部各节有不显著的肉瘤。蛹椭圆形，乳白色，头部隐于前胸下面，腹末有1对叉状突起。图4-21 黄曲条跳甲成虫黄条跳甲1年4～6代，以成虫在残株落叶、杂草及土缝中越冬。翌春温度10℃以上开始取食，20℃以上时为害最盛。成虫善跳跃，能飞翔，中午前后活动最盛，成虫有趋光、趋黄、趋绿性，耐饥力很强，夜间隐蔽。在土下化蛹，夏季高温有蛰伏现象。从初春至秋季均可造成为害，以春秋季发生严重，秋季重于春季。（1）选好前茬。因黄曲条跳甲偏食十字花科蔬菜，应避开十字花科蔬菜等前茬作物，最好选谷茬、玉米茬。（2）清除瓜地残株落叶。铲除杂草，消除其越冬场所和食料基地，以减少虫源。（3）秋、冬季深翻，消灭越冬成虫。播前深耕晒土，造成不利于幼虫生活的条件，并消灭部分蛹。要抓住春夏季的发生始盛期和秋冬季的发生盛期2个重要时期，掌握苗期早治，应从幼虫着手抓起，消火成虫是关键的原则。在成虫开始活动，尚未产卵时用药防治。成虫善跳跃，活动性强，应采用包围式喷药，即应从田块四周向中央喷，防止成虫逃走。并在成虫活动盛期（春秋季在中午前后，夏季在早晨和傍晚）用药。药剂可参考黄守瓜。斜纹夜蛾又名莲纹夜蛾、斜纹夜盗蛾，俗称花虫、黑头虫，属鳞翅目夜蛾科，是我国农业生产上的主要害虫种类之一。斜纹夜蛾是一种间歇性发生的暴食性、杂食性害虫，多次造成灾害性为害。主要以幼虫咬食叶、蕾、花及果实。卵产在叶背（图4-22），初孵幼虫集中在叶背为害，残留透明的上表皮，使叶片成纱窗状，3龄后分散为害，开始逐渐四处爬散或吐丝下坠分散转移为害，取食叶片或较嫩部位造成许多小孔；四龄以后随虫龄增加食量骤增。虫口密度高时，叶片被吃光。仅留主脉，呈扫帚状。图4-22 为害状成虫（图4-23）体长14～20mm，翅展30～40mm，深褐色。前翅灰褐色，前翅环纹和肾纹之间有3条白线组成明显的较宽斜纹，故名斜纹夜蛾。自基部向外缘有1条白纹，外缘各脉间有1条黑点。卵馒头状、块产，表面覆盖有棕黄色的疏松绒毛。幼虫体长35～47mm，体色多变，从中胸到第九腹节上有近似三角形的黑斑各1对，其中，第一、第七、第八腹节上的黑斑最大。腹足4对。蛹长约15～20mm，腹背面第4～7节近前缘处有一小刻点，有1对强大的臀刺。图4-23 成虫在长江流域1年发生5～6代，世代重叠。主要发生期在7—9月，黄河流域则多在8—9月。成虫夜间活动，对黑光灯有趋性，还对糖、醋、酒及发酵的胡萝卜、麦芽、豆饼、牛粪等有趋性；卵多产于植株中、下部叶片的反面，多数多层排列，卵块上覆盖棕黄色绒毛。幼虫有假死性及自相残杀现象。日间潜伏于残叶或土粒间或接近土面的叶下，日落前再爬出为害。取食幼苗时，可将幼苗全株吃下。老熟幼虫在土中化蛹。以第二代（8月）对秋豇豆、叶菜秧苗、瓜、茄为害严重。9—10月上旬的第三代幼虫对大白菜、包心菜、花菜为害最重。（1）清除杂草。（2）利用成虫有趋光性和趋糖醋性的特点，可用频振式杀虫灯和糖醋盆等工具诱杀成虫。（3）全面覆盖大棚或大棚顶部覆盖防雨薄膜，大棚四周覆盖防虫网，使害虫无法进入大棚。（4）根据该虫卵多产于叶背叶脉分叉处和初孵幼虫群集取食的特点，在农事操作中摘除卵块和幼虫群集叶，可以大幅度降低虫口密度。在卵孵化高峰至低龄幼虫盛发期，突击用药。由于初孵幼虫聚集在卵块附近活动，3龄后分散，且有昼伏夜出的特性，因此，最好在3龄前，傍晚18：00以后施药。低龄幼虫药剂可选用苜蓿夜蛾核多角体病毒（奥绿一号）600～800倍液、24%甲氧虫酰肼（雷通）2500倍液、5%啶虫隆（抑太保）、5%氟虫脲（卡死克）乳油2000～2500倍液，或10%溴虫腈（除尽）胶悬剂1500倍液、2.5%氯氟氰菊酯（功夫）乳油2000～3000倍液。高龄幼虫可用15%茚虫威（安打）悬浮剂3000倍液、5%甲维盐4000倍液或5%虱螨脲（美除）1000倍液。成贝和幼贝以齿舌刮食叶、茎，造成空洞或缺刻，或咬断幼苗。可为害多种作物。贝壳（图4-24）中等大小，壳质厚、坚实、呈扁球形。头发达，有2对触角，眼在后触角的顶端，口位于头部腹面，足在腹面，适于爬行。体外有一螺壳，呈扁圆球形或马蹄形。壳稍厚而坚固，壳硬，黄褐色或红褐色。卵圆球形，初产时乳白色，有光泽，孵化前为灰黄色。幼贝体形与成贝相似，稍小。图4-24 同型巴蜗牛一年发生1代，以成贝或幼贝在瓜菜田等作物根部、草堆石块下及其他潮湿阴暗处越冬，形成白膜封闭壳口。南方棚室2月、露地3月开始取食为害。4—5月成体交配产卵，7—8月为害秋播作物。在北山春季活动期比南力推迟1个月，进入冬眠提早1个月。蜗牛为雌雄同体，异体受精。适于多雨、潮湿的环境条件。阴雨天可昼夜活动取食，干旱时昼伏夜出。（1）及时清除田边杂草，及时中耕，排出积水，可减轻为害。（2）秋冬翻地可消灭越冬蜗牛，地膜覆盖可抑制蜗牛活动和发生。（3）在田间堆积树叶、杂草、菜叶，夜间诱集害虫，白天可人工捕杀。在田边、沟边撒生石灰带或茶枯粉，可防止蜗牛进入为害。可在田间每667m2撒6%四聚乙醛（密达、灭蜗灵）颗粒剂465～665g混干沙土10～15kg，均匀撒施在田间蜗牛经常出没处；还可用2%甲硫威（灭旱螺）颗粒剂330～400g、45%三苯醋酸（百螺敌）颗粒剂40～80g，宜在傍晚施药。

内生真菌是指那些生活在植物组织内的真菌，用以区分生活在植物表面的真菌。对植物内生真菌的研究可追溯至19世纪末，在100多年的研究中取得了丰硕的成果[1～3，7～9]。内生真菌与植物之间存在密切的互利共生关系，对植物的生理代谢调控和生长发育有较大的影响，目前还未发现不存在内生真菌的植物种类。我国也从大量的植物中报道了内生真菌的存在，寄主种类涉及林木、蔬菜及花卉植物[10～16]，但还有相当数量的植物内生菌没有被研究过，进一步深入开展植物内生菌的研究，对于丰富各类菌物的生物多样性知识和植物内生菌资源的应用开发具有十分重大意义。辣椒是国民经济中重要的蔬菜作物，但发生在辣椒上的病害较多，对辣椒的生产带来了不利的影响，在内生真菌表现巨大生防潜力的前提下，未见到辣椒内生真菌的报道，因而开展辣椒内生真菌的研究，以期从中筛选出有生防价值的内生真菌，必将会促进辣椒的生产并带来不可估量的经济和生态效益。山东省莱阳市莱阳农学院园艺系蔬菜大棚种植干制椒型辣椒。选择生长性良好、无病虫害症状的健康辣椒植株的叶片、茎秆及果实，分别于发芽期、幼苗期、开花坐果期和结果期采样。植株采下后装入无菌塑料袋中，带回实验室立即进行分离。1.2.1 内生真菌的组织分离法 所有的叶片和茎秆样品在蒸馏水冲洗2次，然后浸没在70%酒精1min，3%次氯酸钠4min，然后再在70%酒精中浸没30s，灭菌水中洗3次，每次洗1min。经过表面消毒的组织，切成5～7mm的组织块，无菌操作下转移至PDA培养基（pH值6.8，马铃薯200g；葡萄糖20g；琼脂15g；121℃灭菌15min）上，倒平板前加入100μg/ml的土霉素以抑制细菌的生长，取最后一次冲洗组织的灭菌水倒于平板上，以检查表面消毒是否彻底。1.2.2 内生真菌的稀释分离法 组织表面消毒的方法同1.2.1，将经过表面消毒的叶片和茎秆在灭菌的研钵中研碎，加入等体积的灭菌水稀释，然后用移液器吸取1ml组织悬浮液转于PDA培养基（加入100mg/ml的土霉素）上，然后用灭菌玻棒涂平。1.2.3 种子内部真菌的分离 将种子用70%酒精浸泡30s，很快放入无菌水中冲洗3次，然后置于铺有灭菌滤纸的培养皿内，并加入少量灭菌水，加入的量以润湿滤纸为佳，每皿中放入5粒种子。1.2.4 内生真菌的培养、纯化、保藏及计数 为了便于分离生长缓慢的真菌和产孢能力低的真菌的生长，将一半平板放入26℃培养箱中培养，另一半平板放入37℃中培养。每天进行检查，一直到30天后，将长出的真菌及时进行分离、纯化及保藏（4℃，PDA斜面）以便进一步进行鉴定，并记录不同部位分离出的菌株数。1.2.5 内生真菌的鉴定 从培养的菌落上挑取菌丝制成临时玻片进行观察，如果观察的菌丝及分生孢子梗大量聚集在一起，不易看清结构，则应先将菌丝置于滴有1滴70%酒精的载玻片上10s，然后将玻片倾斜倒去酒精，并用吸水纸将酒精彻底吸净后，再在菌丝及分生孢子梗上滴1滴水制成临时玻片放在光学显微镜下观察，拍照，测量孢子大小，并记录形态特征，所有鉴定的菌种均以在PDA培养基上生长的特性为标准，参考有关书籍进行鉴定[4～6]。采用不同的分离方法得到的菌株数不同，稀释分离法得到的菌株数较多，而经组织分离法得到的菌株数少（表1），但稀释分离法得到的菌株不易纯化，而组织分离法得到的菌株易纯化。从种子中分离得到的内生真菌数量较少，仅占到总分离菌株数的7.8%；叶片和茎秆上分离到的菌株数无多大差别。tissuedilutedisolationmethodtissueisolationmethodnumberofisolatesfrequenceofisolationnumberofisolatesfrequenceofisolationleaf4730.03219.1stem4023.83621.4seed——137.8Table 1 The comparison of endophytic fungi isolated by different methods经过对辣椒叶片、茎及种子823份材料中内生真菌的分离，共得到168株菌株，定殖率为20.4%，图1表明了暗色丝孢菌是最常见的分离菌。经鉴定属于14属20种真菌（表2）。其中，弯孢属Curvularia、链格孢属Alternaria、平脐蠕孢属Bipolaris、芽枝孢属Cladosporium、黑附球属Epicoccum、细基格孢属Ulocladium、皮司霉属Pithomyces、拟青霉属Paecilomyces、青霉属Penicillium、曲霉属Aspergillus、枝顶孢属Acremonium、镰刀菌属Fusarium是常见的内生真菌，而黑团孢属Periconia和矛束霉属Doratomyces是首次分离到的内生真菌，从种子中分离获得，对其形态学特征描述见2.3。大多数的菌株在28℃分离培养获得，而在37℃得到的是一些不孕性菌丝。2.3.1 小孢矛束霉（图1～图2）Doratomyces microsporus(Sacc.)F.J.Morton&G.Smith,Mycol.Pap.86:77,1963.KindsSpeciesKindsSpeciesNondemati-aceousgen-eraPaecilomycessinensisQ.D.ChenPenicilliumdigitatum(Pers.)Sacc.PenicilliumexpansumLinkAspergillusnigerTieghAspergillusochraceusG.WilhAspergillusversicolor(Vuill.)TirabAcremoniumroseogriseum(S.B.Saksena)W.GamsFusariumoxysporumvar.liniSnyder&H.N.HansenDematia-ceousgeneraCurvularialunatusR.R.Nelson&HaasisCurvulariaintermediaBoedijnUlocladiumconsortiale(Thüm.)E.G.SimmonsPithomycessacchari(Speg.)M.B.EllisAlternariaalternata(Fr.)KeisslAlternariabrassicicola(Schwein.)WiltshireAlternariatenuissima(Kunze)WiltshireBipolarisaustraliensis(Ellis)Tsuda&UeyamaCladosporiumherbarum(Pers.)LinkPericoniabyssoidesPers.SterilehyphaeEpicoccumnigrumLinkDoratomycesmicrosporus(Sacc.)F.J.MortonTable 2 Kinds of endophytic fungi from hot pepper菌落在CMA上平展，粉状，灰绿色或灰褐色，背面褐色，培养后期明显可见直立的孢梗束。菌丝体表生或大部分埋生，淡褐色或褐色，常形成菌丝束。孢梗束高100～800μm，柄部暗褐色，由紧密压在一起的分生孢子梗组成，头部圆柱形。产孢小梗多个簇生在分生孢子梗中上部。分生孢子卵形，端部多数尖，基部平钝，无色至淡棕色，聚集在一起呈暗褐色，光滑，3.5～5.5μm×2.5～4μm。2.3.2 黑团孢（图7～图8）Periconia byssoides Pers.ex Schweinitz,Persoon,syn.Meth.Fung.(G?ttingen):686,1801.Figure 1～2 Doratomyces microsporus 1.Conidiophore 2.Conidia; Figure 3 Conidia of Fusarium oxysporum var. lini; Figure 4～5 Cuvurlaria lunatus 4.Conidia; 5.Conidiophores and conidia;Figure 6 Conidiophore of Bipolaris australiensis; Figure 7～8 Periconia byssoides 7.Conidiophores; 8.Conidia; Figure 9～10 Epiccocum nigrum 9.Conidia; 10.Conidiomata菌落在CMA上絮状，稀薄，白色。菌丝体表生或埋生，无色。26℃培养1周左右，单根或2～5个簇生、直立、黑色的分生孢子梗从菌落中长出，基部暗橄榄褐色或褐色，光滑或粗糙，不分枝，梗长1.0～1.5mm，宽10～15μm，3～6隔膜，顶端为分生孢子和产孢细胞聚集形成的头部结构。产孢细胞近无色，椭圆形，产生单生或链生的分生孢子。分生孢子球形，初淡黄色，后暗褐色，粗糙，壁厚，直径15～17.5μm。本文首次研究了辣椒内生真菌的种类，共得到15属20种真菌，均属于无性态真菌。其中暗色丝孢菌数量及种类居多，与已报道的植物内生真菌种类及数量较一致[10，13～16]，但又具有一定的差异性，首次报道了黑团孢（P.byssoides）和小孢矛束霉（D.microsporus）是内生真菌，均由种子内分离得到。总结有关内生真菌的文献，发现内生真菌多数为无性态真菌，其次为子囊菌，接合菌居第三，担子菌及鞭毛菌极少存在[10，13～16]，而本次试验分离出的全部是无性态真菌，未见其他类群的真菌，这并不说明辣椒内生真菌中就不存在其他种类的真菌，下一步应改进分离培养方法并采集不同生长时期的组织和部位进行大量分离，以期全面准确地了解辣椒内生真菌的种类，并对内生真菌进行抗活性的筛选工作。组织分离是目前内生真菌分离的主要方法，简单易行，但由于有些真菌在人工基质上不能生长，因而不能得到全部的内生真菌，有很大的局限性。本文首次将组织研碎，采用稀释分离的方法分离内生真菌，获得的菌株种类上与组织分离法无多大差异，但较组织分离法获得的菌株数量多，在没有更好的内生真菌分离方法的情况下，应尝试采用多种分离方法和多种培养基进行分离，掌握合适的分离培养条件，尽可能多的得到内生真菌。