自2009年开始对景区、公园、街头绿地、居民庭院绿地中的10 000余株黑松调查，发现导致黑松生长势衰弱的因子主要有病虫害、土壤生态环境、林分密度。对前海一线黑松的病虫害进行普查，发现常见的黑松病虫害有11种，进一步研究它们的症状、发生规律。黑松落针病病原为松针散斑壳菌（Lophodermium pinastri），属于子囊菌亚门盘菌纲星裂盘菌目斑痣盘菌科散斑壳属。【症状】此病侵染2年生针叶，初期产生黄色斑点或段斑，后病斑颜色加深呈红褐色，至晚秋全叶黄褐脱落。翌年春季在凋落的针叶上产生典型的特征症状，即先在落针上出现纤细的黑色横线，将针叶分割成若干小段，在两横线间产生椭圆形黑色子实体即分生孢子器，以后再形成带光泽漆黑或灰黑色米粒状小点，中央纵裂成一道窄缝，即为病菌成熟的子囊盘（图11～图12 黑松落针病症状）。图11～图12 黑松落针病症状【发生规律】病原菌以子囊盘和菌丝在感病落叶上越冬。3～4月林间湿度大，子囊孢子借雨水和气流传播。当孢子接触松针叶，萌生芽管从气孔侵入组织内吸取养分。病菌的潜育期较长，一般约50天。病害的发生发展与寄主生长状况和林间温湿度关系密切。在土地瘠薄，林地干旱，卫生状况差，林木生长衰弱，针叶的细胞膨压降低时最易感病。混交林比纯林感病轻。黑松瘤锈病病原菌为松栎柱锈菌（Cronartium quercuum），属于担子菌亚门冬孢菌纲锈菌目栅锈菌科柱锈菌属。【症状】病瘤发生在侧枝或主干上，大小不一，近圆形，直径5～60cm，多年生。每年2月，从病瘤裂皮层缝处溢出黄色蜜状性孢子。至4月在皮下产生黄色疱状锈孢子器，散出黄粉状锈孢子。至5月，锈孢子随风传播，侵染转主栎属树木，在栎叶背面，产生黄色小点状夏孢子堆，并重复侵染至7月，在夏孢子堆处产生毛发状褐色冬孢子柱，延续到9月，可使栎叶变黄枯状（图13 黑松瘤锈病症状）。图13 黑松瘤锈病症状【发病规律】栎叶上的冬孢子在秋季成熟后，产生担孢子，传到松针上，萌发自气孔侵入，以菌丝状态越冬，以后延伸入枝、干皮层中，经2～3年形成病瘤，并在春季产生性孢子和锈孢子，病瘤逐年增大。病害多在海拔较高的阴凉潮湿松林内发生较重，栎林以郁闭潮湿处发病较重。日本松干蚧[Matsucoccusmatsumurae（Kuwana）]，属于同翅目蛛蚧科。【形态特征】雌成虫体长约3mm，卵圆形，橙红或棕红色；体扁，体节不明显，头部较狭，腹部较宽，腹末有“∧”形凹陷；触角9节，念珠状，口器退化，单眼1对，胸足3对，胸气门2对，腹气门7对。雄成虫体长1.3～1.5mm，胸部特别发达，黑色；前翅发达，半透明，有明显的羽状纹，后翅退化成平衡棍；腹部第七、第九节背面各有1隆起，其上有管状腺10多根，分泌白色蜡丝，腹末有一个钩状的交尾器。卵椭圆形，初产时黄色，后变为暗黄色。初孵若虫体长约0.3mm，长椭圆形，橙黄色；触角6节，单眼1对，口器发达，喙圆锥状，口针极长，卷于腹内；胸足3对，腹末有长短尾毛各1对。预蛹与雌若虫相似，胸背隆起，形成翅芽。蛹体裸蛹，头、胸部淡褐色，眼紫褐色，跗肢灰白色，腹部9节，末端呈圆锥形。茧椭圆形，疏松，白色（图14～图17 日本松干蚧）。图14 日本松干蚧雌虫图15 日本松干蚧雌虫产卵图16 日本松干蚧初孵雄成虫图17 日本松干蚧茧【发生规律】一年发生2代，以1龄寄生若虫潜于树皮裂缝内越冬或越夏。成虫第一次集中出现在5月上旬至6月中旬，第二次集中出现在7月下旬至10月中旬。若虫显露期是4月中旬至6月上旬，8月下旬至10月上旬。主要寄生在3～4年生枝条的轮枝处、10年生以下主干阴暗面以及开裂的球果内，造成针叶枯黄、树皮翘裂、枝条弯曲下垂，进而整株枯死。松白粉蚧[Crisicoccus pini（Kuwana）]，属于同翅目粉蚧科。【形态特征】雌成虫体长约1.8mm，椭圆形，红褐色或紫红色，体表薄被白色蜡粉；触角8节，喙3节；刺孔群7对，均分布在腹部，肛环具孔和6根肛环刺毛；爪无小齿。雄成虫具单眼，复眼大而发达，深红色；触角丝状，10节；翅1对，膜质，翅脉二叉状；腹部末端生有两根几乎与体等长的白色蜡丝；足发达，善爬行。若虫体扁呈长圆形，淡黄色至橙黄色。卵长椭圆形，淡橙黄色（图18～图20 松白粉蚧）。【发生规律】1年发生2代，以若虫在针叶基部和粘连在一起的松针间、树皮缝中越冬。越冬若虫于翌年4月中下旬开始出蛰，5月初始见第一代卵，产卵盛期在5月中下旬。若虫孵化后沿树干向上爬行，寻找当年生松针、松枝固定取食。7月底，大部分若虫转移至松针间、嫩的松梢处固定为害，分泌白蜡粉，诱发煤污病。成虫第二次产卵盛期在9月中旬至10月初，10月中旬若虫活动频繁，为害到11月上旬，此后开始越冬。此虫为害严重时，新梢不萌发，松针落光，树势衰弱，甚至死亡。图18 松白粉蚧雌虫图19 松白粉蚧卵图20 松白粉蚧为害状居松长足大蚜[Cinara pinihabitans（Mordvilko）]，属于同翅目大蚜科。【形态特征】无翅孤雌胎生蚜体褐色，被白蜡粉，腹部散生黑色颗粒状物，至少前几节背毛有毛基斑，中胸腹瘤存在，触角6节，第3节最长。有翅孤雌胎生蚜体黑褐色，刚毛黑色，腹末稍尖；翅透明，前缘黑褐色。卵黑色，长椭圆形。若蚜体淡棕褐色（图21 居松长足大蚜）。图21 居松长足大蚜【发生规律】一年发生数代，以卵在松针上越冬。翌年4月上旬卵开始孵化，4月下旬出现干母，每头干母繁殖30余头雌蚜，6月初出现有翅侨蚜进行扩散，10月末出现性蚜，交尾后产卵越冬。若虫4龄，历期约20天。松牡蛎盾蚧[Mytilaspis pini（Maskell）]，属于同翅目盾蚧科。【形态特征】雌成虫介壳长1.7～3.1mm，牡蛎形，棕褐、深褐至褐色，边缘和后端灰白色，前端狭，向后略宽，背面隆起，光滑而有光泽，后端部分有横纹；壳点2个，位于前端，橙黄色，椭圆形；腹壳白色，沿中线纵裂，在近后端处裂成“∧”形。雌成虫体长约0.9mm，纺锤形，黄白色，后半扩大，体中部突出；臀板后端平截，中叶小，与第二叶平齐，端圆，两侧各有明显凹切1个。雄成虫介壳长约0.9mm，形状、色泽、质地同雌介壳；壳点1个，位于前端，橙黄色（图22～图23 松牡蛎盾蚧）。【发生规律】一年发生2代，以受精雌成虫在介壳内越冬。4月中下旬越冬雌虫开始产卵，每雌虫产卵11～23粒，5月中旬卵开始孵化，6月末孵化基本结束。初孵若虫在针叶上爬行1～2天后就在叶基幼嫩、背光部位固定，分泌白色蜡丝覆盖虫体，形成介壳。6月下旬第一代雄虫预蛹，8月开始孵出第二代若虫，8月中旬第二代雄虫开始化蛹，8月下旬出现成虫，雌雄交尾后雄虫开始化蛹，8月下旬出现成虫，雌雄交尾后雄虫死去，以雌虫越冬。图22 松牡蛎盾蚧雌成虫图23 松牡蛎盾蚧雌成虫介壳赤松毛虫（Dendrolimus spectabilis Butler），属于鳞翅目枯叶蛾科。【形态特征】成虫体长22～35mm，翅展46～87mm，体色有灰白色、灰褐色；前翅中横线与外横线白色，亚外缘斑列黑色，呈三角形；雌蛾亚外缘斑列内侧和雄蛾亚外缘斑列外侧有白斑，雌蛾前翅狭长，外缘较倾斜，横线条纹排列较稀。卵绿色，球形。老熟幼虫体长80～90mm,9龄，深黑褐色，密布灰白色长毒毛，额区中央有狭长深褐色斑；中后胸毒毛带明显，体侧贯穿1条纵带，每节前方由纵带向下有斜纹伸向腹面。蛹纺锤形，暗红褐色。茧灰白色，其上有毒毛，长椭圆形（图24～图27 赤松毛虫）。【发生规律】一年发生1代，以3～5龄幼虫在翘皮下、落叶丛中或石块下越冬。翌年日平均气温约10℃时上树为害，取食2年生针叶。7月中旬幼虫老熟，在针叶间化蛹。成虫夜间羽化，趋光性强，交尾产卵块于针叶，每雌产卵300余粒。8月上、中旬幼虫陆续孵化，1～2龄幼虫群集为害，啃食叶缘，为害至10月中、下旬，3～5龄时即下树越冬。图24 赤松毛虫雌虫图25 赤松毛虫雄虫图26 赤松毛虫幼虫图27 赤松毛虫茧松树皮象（Hylobius haroldi Faust），属于鞘翅目象虫科。【形态特征】成虫体长6.3～9.5mm，体壁褐至黑褐色，略发光；前胸前狭而有刻点及金黄色圆点4个；鞘翅深棕色，上有近长方形虚线状排列的刻点和金黄色鳞片构成的花纹，形成横带3条或构成“X”形条纹。卵椭圆形，白色微黄，透明。幼虫老熟体长10～15mm，白色，无足，微弯；头部红褐色或黄褐色，两边近平行，后部圆形，上颚强大。蛹体白色，遍布对称排列的刺，腹端有大刺1对（图28～图29 松树皮象）。图28 松树皮象幼虫图29 松树皮象为害状【发生规律】一年发生1代，以成虫越冬。越冬成虫在地表交尾，产卵于新伐根皮层上或泥土中，单雌产卵60～120粒，孵化后取食伐根皮层与木质部浅层，幼虫5龄，其发育进度与温、湿度和营养质量相关，9月末大部分幼虫老熟并作椭圆形蛹室越冬。主要以成虫为害，咬食树干的韧皮部，造成块状疤痕，并流出大量树脂。如疤痕很多，将树干围成一环时，梢头即枯死。夏梢小卷蛾[Rhyacionia duplana（Hübner）]，属于鳞翅目卷蛾科。【形态特征】成虫翅展16～19mm，头部淡褐色，胸、腹部黑褐色；前翅灰褐色，近外缘锈褐色，中部有白色纵条斑，前缘有白色钩状纹；后翅淡灰色，缘毛长。卵扁椭圆形，初产时淡黄色，近孵化时红色。老熟幼虫体长约8mm，橙黄色。蛹体长约6mm，红褐色，腹末端有钩状臀棘8根（图30～图32 夏梢小卷蛾）。【发生规律】一年发生1代，以蛹在枝基部等处的茧内越冬。翌年4月羽化为成虫飞出，交尾后产卵于新叶内侧基部，一般2～25粒排成1列，卵期约26天。5月开始孵出幼虫，新梢抽出后取食并蛀入木质部，造成新梢弯曲，上部枯萎。幼虫蛀入新梢为害期，常在蛀入孔附近吐丝粘连松脂等作成薄膜以掩护身体，6月中、下旬幼虫近老熟时爬至轮枝基部或树干基部取食树皮，7月上旬开始化蛹，10月中下旬以蛹越冬。图30 夏梢小卷蛾幼虫图31 夏梢小卷蛾蛹图32 夏梢小卷蛾为害状微红梢斑螟（Dioryctria rubella Hampson），属于鞘翅目螟蛾科。【形态特征】成虫体长10～16mm，翅展约24mm，全体灰褐色；前胸两侧及肩片有赤褐色鳞片；前翅灰褐色，有3条灰白色波状横带，中室端有明显的肾形大斑1个；后翅灰白色，无斑纹。卵椭圆形，有光泽，黄白色，将孵化时变为樱红色。幼虫老熟体长约25mm，淡褐色，头及前胸背板褐色，中、后胸及腹部各节有4对褐色毛片，背面的2对较小，呈梯形排列，侧面的2对较大。蛹黄褐色，腹末有波状钝齿，其上生有钩状臀棘3对（图33～图35 微红梢斑螟）。【发生规律】一年发生2代，以幼虫在被害梢内越冬。翌年4月初越冬幼虫开始活动，5月中下旬开始化蛹，6月上旬羽化成虫。成虫羽化时，穿破堵塞在蛹室上端的薄网而出，蛹壳仍留在蛹室内，不外露。成虫有趋光性，雌蛾产卵量平均50粒左右。卵散产在叶鞘基部、枯黄针叶基部、球果、树皮伤口处，卵期5～8天。初龄幼虫在嫩梢表面和韧皮部之间取食，3龄以后蛀入木质部髓心，有转移为害的习性。8月上旬第一代成虫羽化，9月第二代幼虫孵化为害。图33 微红梢斑螟幼虫图34 微红梢斑螟成虫图35 微红梢斑螟蛀孔松果梢斑螟（Dioryctria pryeri Ragonot），属于鞘翅目螟蛾科。【形态特征】成虫体长10～13mm，翅展26～30mm，体灰色或灰白色；前翅赤褐色，近翅基有1条灰色短横线，内、外横线灰色，波状，中室端部有一块不明显的新月形小白斑；后翅灰褐色。卵椭圆形，初为乳白色，后变为赤褐色。老熟幼虫体长15～22mm，体漆黑色，具明亮光泽，头、前胸背板及臀板黄褐色。蛹赤褐色，尾端有6根臀刺，成弧形排列（图36～图37 松果梢斑螟）。图36 松果梢斑螟幼虫图37 松果梢斑螟蛹【发生规律】一年发生1代，以初龄幼虫在受害球果内或当年生嫩梢内拉网越冬。翌年4月越冬幼虫继续取食为害，4月下旬开始转移食害雄花序，而后进入嫩梢和2年生球果为害。被害球果的基部有大而圆的蛀孔，并常附有以丝粘连松脂的覆盖物，球果内虫道呈“S”形。5月开始化蛹。6月中旬出现成虫。成虫取食花蜜补充营养、交配，单产卵于嫩梢叶鞘的基部、针叶凹面、球果鳞片、树皮或皮缝里，单雌产卵22～201粒。7月上旬卵孵化，初孵幼虫蛀入球果或当年生嫩梢，但取食甚微，于11月上旬开始越冬。土壤为立根之本，土壤生态环境恶劣，黑松生长衰弱，只有创造良好的土壤生态环境，让黑松根系发挥正常的功能，树势才能恢复强健。游客的逐年增加（图38 青岛海滨风景区年游客量图），大量踩踏导致公共绿地土壤容重加大（1.6 g/cm3），土壤透气差，土壤板结，排水不良，黑松的生态环境受到破坏，黑松毛细吸收根明显减少，土壤中的外生菌根和益生菌大量死亡，黑松生长势逐年减弱。图38 青岛海滨风景区年游客量图青岛市区坐落于花岗岩地质之上，前海一线土层薄，表土腐殖质几乎没有，土壤肥力低，土壤黏重，养护管理中忽视对树木生存土壤的改良。表土就是自然土壤表面富有腐殖质的优质土壤，这是由植被的枯枝落叶和土壤微生物经历长期的相互作用而形成的，是宝贵的土壤资源。研究证明，一般情况下落叶自然分解也需要2～4年，且大自然留下的优质土壤是不可再生的资源。东北农业大学资源与环境学院副院长周连仁曾说：北大荒的黑土400年才形成1cm；如果任其流失，黑土区将变成第二个黄土高原。近些年城市园林多从美观、卫生、病虫害防治、安全等诸多方面考虑，往往将公共绿地产生的落叶、修剪枝或叶、断枯枝等园林绿化废弃物及时清理清运至垃圾场，本应由园林绿化废弃物供给土壤的各种营养元素没了来源，导致绿地土壤贫瘠、板结、土壤中有益的微生物生长繁殖越来越差。经测定，大部分的绿地土壤都不符合《园林种植土质量要求》（DB 3702/T 088—2006），表土腐殖层几乎没有，必须加以更换或改良才能满足植物的健康生长要求（图39～图44 土壤测定）。详见表1。图39 土样与基质图40 土壤测定图41 pH值电极测定图42 用于测定的比色皿图43 比色皿放入土壤测定仪图44 读取数据表1 黑松土壤改良前测定结果要解决这个供需矛盾，只能通过利用园林绿化废弃物（即通过沤制、调配、熟化等过程）生产的人工土壤来满足，即落叶归根。目前，园林养护单位的园林绿化废弃物被垃圾场提出各种理由进行拒绝，一些养护单位打出 “生产各类落叶，量大质优，自提免费，欢迎惠顾” 广告，还有些单位想尽办法将被垃圾场拒收的园林绿化废弃物送走或自行处理。园林绿化废弃物难处理的问题越来越严重，故利用园林绿化废弃物的人造土壤势在必行，人工土壤的生产将是一个有巨大前景的产业（图45～图56 人工土壤：修剪树枝再加工和落叶发酵）。图45 干树叶粉碎机图46 干树叶粉碎效果图47 新鲜枝叶粉碎装袋 （江灏 摄）图48 新鲜枝叶粉碎效果 （江灏 摄）图49 粉碎后堆放发酵图50 落叶浇水保持湿度图51 撒施有机羊粪图52 撒施发酵菌剂图53 落叶分层堆放开始发酵图54 发酵过程中翻抛图55 发酵结束图56 发酵完的叶片布满有益菌种一方面，土壤中的微生物产生抗氧化物质，清除腐败，抑制病原菌，形成适于植物生长的良好环境；另一方面，产生大量易为植物吸收的有益物质，促进健康生长。土壤生态环境恶劣，土壤微生物生长、繁殖困难，轻者会引起植物养分的缺乏，生长势衰弱，重者会引起植物的中毒、死亡。其中菌根是土壤菌根真菌与高等植物营养根系形成的一种共生组织。乔木类植物的菌根类型主要是外生菌根，其特点是真菌菌丝在植物根部形成菌丝套，菌丝体深入植物根部皮层细胞间形成哈蒂氏网。一方面，真菌通过庞大的根外菌丝，从土壤中吸取氮素、磷素和矿物质，供给植物，从而加强了植物根吸取矿物质养料的能力；另一方面，真菌又可以从植物根中吸取碳水化合物和其他有机物或根系的分泌物，故菌根具有“生物肥料”的美称。植物大都具有菌根，尤其松树对菌根的依赖性较强，但在自然条件下生长时间较长、土壤生态环境恶劣时菌根容易死亡，影响松树对养分的吸收，树势衰弱。地势低洼或生长季节频繁地浇水（前些年青岛常绿草坪被大量推广，种植在常绿草坪中的黑松），黑松根系长时间处在土壤水分过饱和状态下，与不耐水涝的生长习性相悖，导致黑松根系长期透气性差，生长不良，进而导致黑松植株生长衰弱。种植在陡峭坡地的黑松，水土流失严重，土壤中的养分蓄积不足导致黑松生长衰弱，黑松枝枯病发病率达90%以上，较下坡重（图57～图58 青岛山陡坡黑松长势）。图57 青岛山陡坡黑松长势图58 青岛山陡坡衰落的黑松栽植过密，种群间植株竞争大，导致光照、通风透气性、土壤中的养分都不能满足黑松健康生长，也是导致黑松生长衰弱的因子。2012年青岛八大峡广场大量高密度栽植树木，林分密度加大，导致2013年黑松枝枯病的暴发，165株黑松和赤松全部染病，发病率达100%，导致新栽的胸径15～18cm的黑松死亡37株，死亡率高达22%。一株胸径15cm黑松市场单价4 000元左右，加上种植、养护，一株胸径15cm黑松综合单价为5 024元，37株全部按胸径15cm计算，直接经济损失不少于18.59万元（图59～图60 八大峡黑松栽植过密致病）。图59～图60 八大峡黑松栽植过密致病

柑橘优质栽培品种主要集中在宽皮柑橘、甜橙、柚及柠檬、金柑中。柑橘栽培品种有鲜食与鲜食加工兼用两大类，用途不同，其特性要求也有一些不同。其共性要求是:较好的适应性、丰产性、品质优且抗性强。品质优包括果实的品质、外观等较受消费者欢迎，耐贮运也是构成优良品种品质的一个重要属性。随着柑橘产业比较效益下降、劳动力的缺乏，耐粗放管理的品种也较受生产者喜爱。耐粗放管理与品种抗性有一定相关性。适应性主要是与环境的和谐包括气候、土壤环境等。抗性强是对冷、热、旱、涝、瘠、病和虫有一定的耐受力或免疫，易栽、易管，其优点是人力与物力投人少，且适应性强。丰产性包括产量高且稳产。特性是:鲜食品种对果实外观、内质及耐贮运性均有较有较高要求。果实的外观主要是果实的大小、形状、果皮的色泽、厚薄、果面光滑等。如脐橙果实横径在80mm、果皮橙红、圆球形或长椭圆形较受消费者喜爱；而温州蜜柑扁圆形、果实横径在50mm左右畅销。果实内质包括风味、香气和营养成分。柑橘鲜食品种理想的风味是甜酸可口、有香气。柑橘果肉要求细嫩化渣，可食率高，果汁率高，囊壁薄，易化渣。除此之外无核也是重要性状。而加工品种对果实外观要求没有鲜食品种高，但对其内质与栽培性能要求较高，要求易栽培、易达到早结果且丰产稳产、优质，少核或无核，高糖、含酸量适中，作为橙汁加工品种需出汁率高，果汁色泽鲜艳，具芳香，风味浓郁，无苦涩等异味和混浊度稳定等性状；作为橘瓣罐头加工品种要求果中大，皮薄易剥皮、囊瓣整齐易分离，汁胞结合紧密、颜色鲜艳、嫩而不软。在我国由于加工业不是很发达，加工品种一般为鲜食与加工兼用型。优良品种具有时间性与地域性。时间性是指随社会经济的发展，消费者对鲜食或加工品种的要求也在不断提高，品种需要周期性更新。地域性是指不同的产地气候、土壤环境条件不同，适宜种植的品种在一些生物学特性或/和农艺性状上可能要求不同。砂糖橘，又名十月橘，俗称沙滩橘。原产于广宁、四会一带，主产地有四会、广宁、云浮、清远、德庆、南盛、英德、清新、佛冈、郁南，是当地柑橘主栽品种之一。该橘味甜如砂糖，故名，又因其甘甜犹如在沙滩喝到甘露一样，故俗称“沙滩橘”。砂糖橘尤以四会市黄田镇出产的为正宗，唯其鲜美而极甜，无渣，口感细腻，清甜。本地早原产于浙江黄岩，又名天台山蜜橘。浙江黄岩、临海栽培较多，湖南、广东、四川、福建等省也有少量栽培。该品种树势强健，树冠高大，呈圆头形或半圆头形，且整齐，分枝多而密，枝细软；果实扁圆形，单果重约80g，色泽橙黄，皮薄；果实可食率77.1%，果汁率55%以上，可溶性固形物12.5%，糖含量9.38g/100ml，酸含量0.72mg/100ml，维生素C含量29.3mg/100ml，质地柔软，囊衣薄，化渣，品质上乘。果实种子2～3粒，10月下旬至11月上旬成熟；抗寒、抗湿，丰产、稳产，成年树每亩产量超过2500kg。果实不耐储藏。本地早可鲜食，也可加工糖水橘瓣罐头。加工罐头尤以黄岩少核本地早和福建龙岩黄斜3号本地早为宜。温州蜜柑树冠呈不整齐的圆头形，较矮小开张，枝梢长软披垂，无刺。叶较大长椭圆形或菱形，主侧脉较明显，叶柄较长，叶翼狭长。花大，达3.5cm，白色，花瓣反卷，花单生或丛生，花粉不育，单性结实。果实扁圆形，果实大小因品系而差异较大，橙黄至橙红色，油胞粗大。囊瓣8～13，易分离，囊壁较厚韧，果心空。汁胞橙黄至橙红色，排列紧密整齐，柔软多汁，风味酸甜，品质优良，9月下旬至12月下旬成熟。无核，多胚，适应性强，可耐-9℃，耐旱耐瘠，抗溃疡病性较强。生长快，结果早，产量较高。品质好，较耐贮运。适于中亚热带以北橘区栽培。除鲜食外，还是制糖水罐头的良好品种。主要产地有我国广东、福建、广西、台湾等省区。该品种树势中等，树冠圆头形，枝条细而密生。叶片狭小，长椭圆形，两端尖，叶脉不明显，翼叶小。果实高扁圆形或圆球形，重100～130g，果皮橙黄至橙红色，厚而粗糙，易剥离；果心小而充实，果肉柔软多汁，味甜，品质上等；种子极少。12月下旬至翌年1月成熟，耐贮运。该品种进入结果期早，丰产，但抗逆性较差，需肥水较多，采摘后如管理不当容易衰退。又名乳橘，我国古老品种，品系多，如黄岩乳橘、南丰蜜橘、温州土橘、日本纪州蜜橘等。其中，以南丰蜜橘浓甜而香，无核，品质最优，为推广品系。树冠中等大，半圆头形，树势强健，枝叶稠密，枝条细长开张，偶有短刺。叶小，卵状椭圆形，先端较尖，色浓绿，着生较直立。花小。果小似金钱，重25～50g，扁圆形，果蒂部核状突起，果顶部多有脐。皮薄，橙黄色，油胞小而密，平生或微凸。囊瓣7～10瓣，近肾形，囊衣薄。果心小。汁胞橙黄色，排列较紧密，柔软多汁，风味浓甜，有香气，化渣，无核或仅1～2粒，单胚，品质优良。可溶性固形物11%～14%，酸0.3%～0.4%。11月上中旬成熟。对丘陵山地适应性较强，耐寒力近似温州蜜柑。结果较早，果小，有大叶、小叶和高蒂3个品系，以大叶系为佳，易大小年结果。近年来，从南丰蜜橘中选出一系列品种如柳城蜜橘、无核南丰蜜橘及杨小等。原产于四川江津，栽培比较广泛，现选出了很多优系，国内各橘区均有栽培。该品种树势强健，树冠圆头形，枝梢开展，具短刺；叶片长卵形，先端尖长；果实长椭圆形，似鹅蛋，重150～200g，果顶平或微凹，蒂部微凹，果皮橙红色。薄而光滑，果心半充实，囊瓣半圆形或长肾形，8～13瓣。果肉橙黄色，柔软多汁，甜酸适度，风味浓，有香气，品质极上，种子数依品种不同0～8粒不等。11月下旬至12月上旬成熟，果可贮至翌年5月。该品种适于在冬春温暖湿润的地区栽培，在偏北的橘区常表现色泽不鲜艳，果皮增厚，风味变差，且易染流胶病和溃疡病，鄂甜橙1号、铜水72-1、梨橙等是综合性状较好的锦橙系品种。柳橙主要产于广东新会，福建、广西也有引种栽培。该品种树势强健，树冠半圆形，较开张，枝密细长；叶长椭圆形，边缘多呈波状，叶色浓绿；果实圆球形，果皮橙黄色，果顶有的有印环，故又名印子柑。果面自蒂部起有10余条放射沟纹，果心充实、囊瓣长梳形，10～12瓣。果肉橙黄色，脆嫩汁少，风味浓甜，品质上等，种子6～10粒，11月中旬至12月上旬成熟，耐储藏。该品种品质优良、丰产、耐储藏，适应性强。其品系有明柳、半柳、暗柳3个。果面沟纹自蒂部延伸至顶部的称明柳，只伸至果面一半的称半柳，沟纹不明显的称暗柳。以暗柳品质最好，汁多味甜，产量高，栽培较普遍。原产于地中海地区。我国四川、广东、广西和湖南等地均有栽培。该品种树势强健，树冠圆头形或半圆头形，树姿半开张。枝条细而硬，针刺极小而少；果实近圆球形或略扁，单果重135g左右，果皮鲜橙红色或紫红色，间或出现深红色相嵌纵向宽条纹，果皮较厚，略粗，脆，剥离较难，果心较小而充实，囊瓣肾形，10～14瓣，整齐。汁胞披针形成长纺锤形，呈丝状或块状血红色，脆嫩。酸甜味较浓，汁多。有香气，品质上等，种子1～3粒，果实于翌年2月成熟，丰产。果实耐储藏，贮后风味更佳。优良品种塔洛科血橙、摩洛血橙等。果实顶端有脐，果肉有重囊，一般无核。系巴西Selecta甜橙芽变的新品系，1870年输入美国定名为华盛顿脐橙(Washington Navel)，为柑橘著名品种，其他脐橙品种的来源均与华盛顿脐橙有关。华盛顿脐橙树冠半圆形，较矮而披垂。新梢短小而密，无刺或少刺。萌芽、开花期较一般甜橙稍早。叶大，广椭圆形，两端钝尖，叶厚，暗浓绿色，叶脉明显下陷，叶翼中等大，花粉极少。果实长圆形或广倒卵形，果大，重170～250g。果顶有脐，闭合或裸露。果皮橙黄至橙红色，顶部皮薄，萼部皮厚。果肉橙黄色，汁胞细长紧密，脆嫩多汁，味浓甜富香气，品质优良。可溶性固形物11%～12%，酸0.9%～1.0%，耐寒力比一般甜橙强。11月至12月上旬成熟，不耐储藏，单性结实，性喜夏干气候。华盛顿脐橙芽变频率较高，芽变系包括成熟期、果肉颜色及叶色等诸多方面。根据成熟期，华盛顿脐橙的芽变有早熟类型(即在11月前成熟)，如清家脐橙等、中熟类型(11月初至12月底前成熟)，如罗伯逊脐橙、朋娜脐橙、纽荷尔脐橙、Na-velina、Frost、Thomson和Summerfiedl脐橙等及晚熟类型(翌年成熟)，如Lanelate、Summergold、Cheslett脐橙等。Cara Cara是红肉芽变。我国从引进的脐橙中选出了很多优良芽变类型，如罗脐35号、奉节72-1及华红脐橙等，脐橙类品种为优良鲜食品种。湖南麻阳一带选出的良种。树势较弱，树冠较矮小，枝条开张披垂。叶较窄小，叶背主脉粗大，凸起明显。果近圆形，深橙黄色，光滑。果皮近萼处稍厚，近果顶部甚薄，难剥离，海绵层带黄色。果重100～150g。汁胞细长，橙黄色，排列紧密，质地脆。可溶性固形物14.5%，酸0.6%。风味浓甜清香，品质优。种子0～5粒。11月中旬成熟。汁液稍少，果大小不一，本品种不宜用枳作砧木。近年选出了很多优系，如大果型、无核类等。柚类为柑橘属中果实最大的一类，果皮厚，难剥离。由于具有单胚特性，类型较多。沙田柚原产于广西容县。广西各地区都有栽培，广东、湖南、四川、浙江、江西等地也先后引种栽培。该品种树形高大，果实呈梨形或葫芦形，果顶有金钱印，果皮油胞细小，金黄色，果肉晶莹透明、脆嫩化渣、清甜爽口、香味浓。经测定，可食部分达47.7%以上，可溶性固形物高达13.7%，含糖量12.4%，含酸量0.36%，100g果汁含维生素C 111.7mg，含氨基酸739.4mg。果肉白色，汁多味甜微酸，种子多，10—11月成熟。琯溪蜜柚原产于福建平和县。主产地为福建南部和广东。四川、广西、湖南、重庆等地也有引种栽培，发展很快，是栽培柚类的名品。该品种树势强，枝叶茂密。果大，1.5～2kg，长卵形或梨形；果面淡黄色、光滑，皮较薄；果心大而空，囊瓣14～16瓣；果肉质地柔软，汁多化渣，酸甜适中，种子少或无，品质上等。果汁含可溶性固形物11%、糖9%～9.8%、酸0.8%～1.0%，可食率60%～70%。9月下旬至10月上旬成熟。丰产，幼树3～4年挂果，4年生树株产68个果。易裂果裂瓣。近几年福建又从中选育出红肉、黄肉、红皮红肉芽变，品质更优。优良品种有红玉、汤普森、邓肯葡萄柚等。自20世纪80年代以后，美国推出了“Oroblanco”和“Melogold”两个二倍体优良葡萄柚品种，在欧洲市场极受欢迎。星路比(Star Ruby)也是外形美观、果肉深红色、无核、品质上等的优良葡萄柚品种。火焰山葡萄柚(Flame)是Henderson实生优系，内膛结果能力强，果皮有暗红色条纹，果肉深红色，但酸度高。鸡尾葡萄柚(Cocktail)果大，肉白色，酸度低，有香味，比较适合东方消费者群体。与柚类品种近似，在生产上有一定推广面积的新优品种如下。(1)金柚。俗称胡柚。原产和主产浙江常山，是柚与宽皮橘天然杂种。(2)HB柚。系柚与葡萄柚的杂种，由华中农业大学从美国引进的株系中选出。美国原产。树冠圆头形，披散，枝条零乱粗壮，少针刺。叶大，深绿色，叶缘具宽疏浅齿。早结丰产，有树冠外围结果和结果球的倾向。果实椭圆或倒卵形，先端有乳突，表面粗糙，熟时黄色，油胞凹入。囊瓣9～10个。果肉淡黄色，汁多，酸味强，含酸6%～7%，香气浓，品质优。种子0～7粒。多次开花，以2—3月开花结果最多。花后6～8个月即可采果催色，9—11月是主产期。耐贮，可制汁或外销。不耐寒。现已选出了Eureka Variegated (杂色花叶)柠檬和Variegated Pink Flesh Eureka (杂色花叶粉红果肉)柠檬等类型。抗霜、抗热、抗风性和适应性均比尤力克强。树势强盛，枝叶茂密、多刺。始果期稍迟，但丰产。树冠内部结果多。果顶端乳突基部有不规则的环沟，往往一侧较深。汁多，清澄，酸强，香气浓，品质优。种子数粒或无。现已选出了无籽等类型。著名柠檬品种:意大利的Femminello、Villafranca；西班牙的Vema、Mesero及Volckamer等。别名金柑，是圆金柑和金枣的杂种，是金柑属中果实品质最好、产量较高、果形较大、经济价值较高、栽培最广泛的一个品种，较耐寒。树冠圆头形，灌木，叶阔披针形，稍厚。枝梢密生，少刺或无刺。果纵径约3.5cm，横径2.7cm，倒卵形或倒卵状椭圆形，果皮厚光滑，金黄色，囊瓣5～7，少数8瓣，果肉及果皮均甜，有香气，种子4～9粒，11—12月成熟。优良品种有宁波金弹、融安金柑、蓝山金柑和遂川金柑等。树直立，枝叶稠密，叶似橘，叶缘有波状锯齿，翼叶狭小。果橙色或浓橙色，有小凹点。果形扁圆或圆，常偏斜不正，果顶常有小印圈，油胞密，平生或凸出瓣，酸，不堪生食，可代绿檬用，有观赏价值。种子多胚，胚绿色。

旋心异跗萤叶甲（Apophylia flavovirensFairmaire），又名旋心虫、黄米虫、钻心虫等，属鞘翅目（Coleoptera），叶甲科（Chrysomelidae）。在我国，分布北起吉林，南抵台湾、海南、广东、广西，西至沿河北、山西西斜，到达四川、西藏的墨脱地区。1975年在辽宁省西丰县发现该虫为害高粱幼苗。近年来，在辽宁省、吉林省局部地区发现有为害玉米，但在高粱上尚未见有造成明显经济损失的报道。旋心异跗萤叶甲以幼虫为害为主，从高粱幼苗近地面处的茎基部钻入，螺旋状蛀食幼苗心叶，其蛀孔不外露，须剥开茎基部才见到褐色蛀孔，故易漏检和误诊。被害后的高粱苗茎基部略变粗，植株矮化，重者造成枯心苗，轻者高粱的叶片出现白黄色纵条纹，该条纹与幼虫蛀食部位密切相关。由于生长锥被蛀食，随高粱生长发育，从基部又发出多个幼芽，形成分蘖丛生的畸形株，高粱植株不抽穗，造成绝收。剖开被害株基部，可见黑褐色虫道，偶有虫粪，被害部位初不腐烂。发生严重地块常连片缺苗断垄，甚至毁种。图3-52 旋心异跗萤叶甲为害状、钻蛀茎秆（右）旋心异跗萤叶甲主要为害玉米、高粱、谷子、薄荷和紫苏等多种作物。图3-53 旋心异跗萤叶甲（左：成虫；右：幼虫）（张治良摄）成虫体长5～6mm，宽2.5～3.5mm，密被黄褐色细毛；头黑褐色，复眼黑色；触角11节丝状，基部4节黄褐色，其余黑褐色；前胸背板倒梯形，前后缘微凹入，盘区具细刻点，两侧有凹陷；鞘翅翠绿色，具光泽，两侧平行；足暗黄色。卵椭圆形，初产时乳黄色，渐变枯黄色至褐色。老熟幼虫体长8～11mm，头褐色，腹部姜黄色，前胸背板红褐色；中胸至腹部末端每节均有红褐色毛片，中、后胸两侧各有4个，腹部1～8节两侧各有5个；臀节臀板呈半椭圆形，背面中部凹下，腹面也有毛片凸起。裸蛹长6mm，黄色。旋心异跗萤叶甲在辽宁和山西地区1年发生1代，以卵在土中越冬，6月卵孵化。当苗高10cm左右，幼虫从近地面茎部或地下茎基部钻入，白天多在植株内为害。幼虫有转株为害习性。7月上中旬幼虫为害最盛。7月中旬后幼虫不再转株，多在同一株内为害，一般每株有虫1～6条，7月中下旬幼虫老熟，在土中1～2m处做土茧化蛹。7月下旬至8月上中旬成虫陆续羽化，以后产卵越冬。每头雌虫产卵20余粒，卵散产于作物田疏松土中或植物根部，成团状，多者达10余粒。成虫白天活动，有假死性，不为害作物，喜食某些唇形科、菊科的植物叶片。1.农业措施防治 合理轮作倒茬，避免连作，与非禾谷类作物轮作，可明显减轻为害。秋翻整地，破坏其越冬场所。结合间苗、定苗，拔除被蛀苗株，清理出田外，集中处理，可降低为害。2.化学防治 为害初期可用40%甲基异柳磷乳油，每300ml对细沙土15kg的毒土围苗撒施处理，也可用50%辛硫磷乳油或40%乐果乳油灌根。

大地老虎（Trachea tokionisButler），别名黑虫、地蚕、土蚕、切根虫、截虫，属鳞翅目（Lepidoptera），夜蛾科（Noctuidae）。我国各地均有分布。在日本和俄罗斯等国也有发生报道。参见小地老虎的为害状。图3-47 大地老虎成虫（左：雄成虫；右：雌成虫）（张治良摄）成虫体长20～22mm，翅展52～62mm，暗褐色。雌蛾触角丝状；雄蛾触角双栉齿状，分枝较长，向端部渐短小，几达末端。前翅褐色，前缘自基部至2/3处黑褐色；肾纹、环纹、剑纹明显，周缘各围以黑褐色边，肾纹外方有1个黑色条斑；亚基线、外横线均为双条曲线，但有时不明显，外缘具1列黑点，内侧至亚缘线间为暗褐色。后翅淡褐色，外缘具很宽的黑褐色边。卵半球形，大小 1.8mm×1.5mm，初浅黄色，渐变褐色，孵化前灰褐色。老熟幼虫体长41～61mm，头部黄褐色，额区在颅顶相会处呈双峰毗连；体黄褐色，体表多皱纹，微小颗粒不显；前胸盾片褐色；臀板除末端两根刚毛附近为黄褐色外，几乎全部为一整块深色斑，并满布龟裂状皱纹；腹部第1～8节背面的4个毛片，前2个等于或略小于后2个。蛹长23～29mm，腹部第3～5节明显较中胸及腹部第1～2节粗，腹端具1对臀棘。图3-48 大地老虎幼虫大地老虎在我国各地均为1年发生1代。以低龄幼虫在田埂杂草丛及绿肥田中表土层越冬。3～5月份以越冬幼虫为主要为害虫态，5～6月份进入为害盛期，温度达20℃以上时，以老熟幼虫滞育越夏，滞育期长达100天左右，9～10月羽化为成虫。卵多产于土表或幼嫩杂草茎叶上，每头雌虫可产卵约1000粒。幼虫孵化后取食一段时间即以2～4龄幼虫越冬。参见小地老虎防治。

辣椒病毒病又名辣椒花叶病，是辣椒生产的主要病害之一，近年来在三门峡地区发生日趋严重。发病田块一般减产10%～30%。花叶型初现明脉轻微褪绿或现浓、淡绿相间的斑驳，全株叶片褪绿，继续发展则叶面皱缩畸形，或形成线形叶，果实变小，植株严重矮化；黄化症状呈上升趋势，表现为叶色均匀黄化或黄色斑驳，植株矮化或矮化不明显；坏死型主要表现为枯顶症状，病株部分组织变褐坏死，植株生长点呈水渍状枯死，叶片黄化，随后叶片逐渐脱落，在叶片上，产生黄绿相间的斑驳或大型黄褐色环斑；畸形丛枝型的植株节间缩短，幼叶狭窄或呈线状，叶面皱缩，植株上部叶丛生，呈丛簇状，重病果面有深绿、浅绿相间的花斑和疣状凸起，果面凸凹不平，病果易脱落；易导致落叶、落花、落果，病株严重矮化，叶小而少，株小。果实常出现黄绿相间的花斑或黄色环斑、畸形，易腐生其他杂菌而烂果，严重影响辣椒的产量和品质。主要为前两种。在辣椒上，烟草花叶病毒和马铃薯X病毒引起系统花叶症状，烟草花叶病毒的不同株系分别引起系统花叶、系统环斑和条斑症状。黄瓜花叶病毒寄主范围非常广泛，毒源植物十分普遍。在田间主要靠蚜虫飞迁传毒，主要种类有桃蚜、萝卜蚜和瓜蚜等。种子和土壤中的病残体不能传播，摩擦传毒也不重要。烟草花叶病毒的主要初侵染源是土壤中的病残体，而带毒种子和卷烟或旱烟不是主要的初侵染源。在田间主要通过田间操作接触传播。马铃薯X病毒主要毒源是马铃薯，主要靠摩擦传播，不能通过蚜虫传毒，种子和土壤中的病残体也不能传播。辣椒病毒病发生及轻重与病毒类型、环境条件、栽培技术、品种抗病性有密切关系。栽植适龄壮苗，合理密植，早期防蚜等综合防治措施可以有效地减轻辣椒病毒病。在早春采用薄膜覆盖等提高地温和保湿防风的措施，秧苗健壮，抗病力增强，可使辣椒不发病或发病轻。而不覆盖的辣椒病毒病较重。定植健壮、适龄的幼苗比弱苗、老龄苗生长好，病毒病轻。重茬地发病重，轮作发病轻。辣椒病毒病的发生还与邻茬有关，辣椒地块的邻茬为番茄则发病重。植株生长茂密、徒长、通风不良的田块发病亦重；辣椒与茄科作物连作、移栽偏晚、地势低洼、土壤贫瘠、缺肥的田块，均可加重病毒病的发生。肥水充足，管理水平高，辣椒生长旺盛，病毒病发生较轻；反之发生较重。黄瓜花叶病毒、马铃薯Y病毒与蚜虫的发生情况关系密切，冬季高温干旱时，蚜虫等传毒介体发生多，扩展速度快，花叶和畸形等类型辣椒病毒病发生早，病害扩展速度快，为害严重。但枯顶型病毒病往往在田间湿度大时发生较多，传播较快；烟草花叶病毒和其他多种植物病毒可以经接触及伤口传播，通过整枝打杈等农事操作传染。新育成的品种如农大21号、农大22号、中椒5号、津椒3号均是抗病的优良品种。3.2.1 种子消毒 用10%硫酸三钠溶液浸种20～30min，洗净后催芽，可防治烟草花叶病毒感染。3.2.2 从无病株上采种，携带烟草花叶病毒的种子可用10%磷酸三钠溶液浸种30min，清水洗净后播种 育苗地要疏松肥沃，清除病残体，并适当早播和适当稀播。在满足幼苗对营养和水分等要求的前提下，实行昼促夜控的苗床温度管理，培育茎秆粗壮，具12～14片叶和50%以上植株现蕾的壮苗，并注意及时防治蚜虫。这样的适龄壮苗定植后一周即可转青，而且封垄早，生长健壮，抗病力强。3.2.3 营养钵育苗在育苗期间，采用塑料钵育苗 把调配好的营养土装入钵内，每钵播种3粒种子。保证成活两株幼苗，然后带钵土定植。这种方法一可减少分苗假植程序，节省用工；二可自种子出土后，就有充足的营养面积，保证幼苗粗壮；三可防止造成根部伤口，减少病毒入侵机会。3.2.4 苗龄不宜过长，应控制在70～80天。定植苗株高与植株横径相近，控制在10～15cm，具5～6片真叶。株高10～15cm时，茎基部直径应达0.5～0.6cm。叶片宽、厚、平、绿，茎尖嫩壮。幼小根系发达白嫩。为防止病毒病或减轻病毒病发生，将单株栽培习惯改为在分苗时就进行双株分苗假植，尔后双株定植，每亩栽种3000～3500墩。双株法是减轻病毒病的有效措施。采用大小垄密植栽培，一般大垄宽为50～53cm，小垄宽22～33cm，每亩4500～5000穴，每穴栽2株。春季气温低，垄作和小水灌溉比平畦和大水漫灌地温高，并且土壤疏松利于发根，提早封垄，雨季利于排水。夏季高温炎热，密植能够较早地遮严地面，降低地温和保持土壤水分，有利于植株生长，不利于病毒病发展。3.4.1 采用配方施肥技术，施足基肥。3.4.2 覆盖地膜，适当提早定植 要求秧苗株型矮而壮实，在第一分杈具有花蕾时定植为宜。3.4.3 与玉米、菜豆等高秆作物间作，避免强光高温，可有效防止病毒病。注意轮作换茬，精细整地，施足基肥，增施磷、钾肥。露地栽培可在定植时铺地膜或加盖小拱棚，并适度蹲苗，促进发根。生长前期避免大水漫灌，浇水后及时中耕，力争做到早定植，早生根，早结果，在发病盛期到来之前已花果满枝。结果期不能缺水缺肥，以防早衰。搞好田园卫生，及时清除田间路边杂草，如酸浆、反枝苋、刺儿菜及藜等，以减少病毒来源。3.5.1 苗期及生长期要及时喷药治蚜 可用2.5%溴氰菊酯乳剂2000～3000倍液，或20%速灭杀丁乳剂2000～3000倍液，或2.5%天王星乳油3000倍液，喷洒注意喷嘴对准叶背，将药液尽可能喷射到蚜虫体上。药剂有50%辟蚜雾可湿性粉剂或2.5%溴氰菊酯乳油2000～3000倍液等。3.5.2 应用弱毒性病毒进行人工免疫可减轻病毒病害，如烟草花叶病毒弱株系N14防烟草花叶病毒，烟草花叶病毒卫星核糖核酸制剂S52和S54防烟草花叶病毒，但必须在辣椒感染自然界强株系之前接种上弱毒性病毒。接种方法主要有两种：一种是人工摩擦或高压喷枪接种，苗龄在1～3叶期为宜；另一种是浸根接种，当幼苗2叶期进行第一次假植时，将幼苗拔出洗净根部后立即浸入疫苗液中5～10min。疫苗液的浓度一般为100倍液（S52和S54）和1000倍液（N14），详见产品说明。另外，也可喷洒NS-83增抗剂100倍液，定植前后各喷1次，还可在定植前、缓苗后及盛果期各喷1次0.1%硫酸锌溶液，都有一定的防病作用。3.5.3 发病始期喷施病毒A800倍液+高锰酸钾1000倍液+0.3%硫酸锌，或用叶康或小叶敌300倍液。注意用药时每隔7天喷1次，连喷3次，才能收到良好效果。3.5.4 设置生物屏障在进行定植的时候，有计划地栽种4行辣椒间种1行玉米，使玉米成为高温季节对辣椒进行遮光降温的生物屏障，降低病毒病的发生，并从栽培玉米中得到一定效益。3.5.5 钝化剂和微肥的应用 用500倍的AV-2或100倍的豆浆释液或100倍的豆制品浆水，从4叶期开始每隔10～15天叶面喷布1次，共喷3～5次，可有效的减轻病毒病的为害。锌对控制TMV侵染有明显效果，常规用量为1‰的硫酸锌水溶液，每亩用75～100kg稀释液喷布叶面，喷2～3次。

开封市为河南省重要的沿黄稻区，由于品质优经济效益高，种植面积逐年扩大。近年来，由于多种因素的影响，水稻条纹叶枯病在沿黄稻区发生普遍，为害逐年加重。一般发生田，病丛率在10%～30%，严重地块高达80%以上，造成水稻秧苗的“假枯心”或大片的“黄化枯死”，发生后期的“假白穗”，严重挫伤了稻农的种植积极性。为了从根本上探明水稻条纹叶枯病连年偏重发生的原因，确定最佳的防治时机及防治方法，有效指导群众开展科学防治，近年来，我们从水稻的苗床期开始开展了系统观察和防治对比试验，收到了显著的防治效果。据调查，近年来，开封市麦田一代灰飞虱发生数量较往年有明显上升，且带毒率高，是造成苗床秧苗“假枯心”主要根源，而大田分蘖期的感病以灰飞虱第1代成虫第2代若虫传毒为主，表现症状为“黄化枯死”。而穗期出现的“假白穗”是本地第3、第4代灰飞虱传毒所致，但以秧苗期、分蘖期发病最重，产量损失大。一般说来，第一代灰飞虱发生数量越大，传毒率高，条纹叶枯病的发病范围越广，发病程度越重，发病一定重，否则，较轻。从近几年开封市几种主要水稻品种发病情况调查对比看，不同的种植品种间病情有明显差异。主栽品种豫粳6号系列为高感病品种，其次为黄金晴。津稻1007、豫粳7号、郑稻18、原稻1号较抗条纹叶枯病。糯稻系列特别是米粒较长的糯稻品种一般不发病或很少发病。发病初期特别是秧苗期的发病没有引起群众的重视，即使个别群众及早用药，由于大面积用药偏晚而造成相互传毒危害，防治效果差。据系统观察，水稻从发芽到分蘖均为条纹叶枯病的易感病期。一般苗龄越小越易感病。近年来由于种种原因开封市黄河放水拖后，造成群众抢水播种，导致大部分地块的易感期与灰飞虱成虫转移高峰期相遇，大大增加了传毒感病的机会。从以上影响水稻条纹叶枯病的发生因素综合分析，制定了开封市的最佳防治时机：一是秧苗期即开封市的5月底至6月上旬，二是移栽后1周，即开封市的7月上中旬。防治水稻条纹叶枯病应采取“治虫防病”的防治策略，防治方法以农业防治为基础，以化学防治为主的“一看，二早，三连片”的防治方法，即系统观察、早防治、组织群众开展大面积连片统防，把灰飞虱消灭在产卵、传毒之前。3.1.1 种植抗（耐）病品种，以降低为害程度。3.1.2 由于稻飞虱有趋向狗尾草等杂草上取食产卵的习性。因此，及时铲除路边、田间杂草，可有效减少虫源，降低传毒机会。同时大田底肥要充足，特别是要增施磷钾肥，水要能灌能排，秧苗要合理密植，每墩最多3～4株，以确保秧苗的健壮生长，增强抗病能力。3.2.1 秧苗田 以治虫为主，选择用药为25%扑虱灵60g/667m2（噻嗪酮）或40%毒死蜱100ml/667m2或5%的锐劲特30～40ml/667m2，加入2%宁南霉素（菌克毒克）50～100g/667m2，分别在5月底至6月初、移栽前2～3天，各喷打一次，有显著的治秧苗、保本田的防治效果。3.2.2 大田防治 水稻移栽后7～10天，即水稻进入返苗后的分蘖期，一旦发现病叶要立即用上述药剂，同时加入促根、壮苗的植物生长调节剂如用天丰素、复硝酚钠等，以增强水稻的抗病虫能力。要每隔5～7天连防2～3次，可达到理想的防治效果。2006～2007年调查，系统防治田比群众自防田防效提高87.3%，病株率下降94.8%。

为了减少化学杀菌剂对环境的污染和在农产品中的残留，对环境友好的生防微生物制剂受到普遍重视。在已经研究的生防菌中，木霉属下的若干种因适应能力强、抗病谱广、拮抗机制多样化而被广泛用于防治植物病害。研究发现木霉对病原菌的作用机制是多种多样的，主要包括抗菌、溶解、竞争、重寄生等，目前还发现木霉制剂除具有直接抑菌功能外，还具有一定的诱导作物产生抗性的作用，这对提高木霉防病的持效性和稳定性具有重要意义。我们从土壤中筛选分离出一株具有很强生长势的木霉，经鉴定为绿色木霉Trichoderma viride，通过体外拮抗试验，证明该菌具有极明显的竞争优势，能快速地占据生长空间、获取营养，对灰葡萄孢霉、立枯丝核菌、瓜果腐霉、茄链格孢等均有强烈的抑制效应，盆栽接种和温室防治试验试验表明对立枯丝核菌所致茄子立枯病和灰葡萄孢霉所致番茄灰霉病均具有明显的防治效果。因此，有可能发展成为一种纯生物的植物病害防治剂。作为一类重要的自然资源，木霉已引起国内外研究者的广泛关注。因此，木霉的培养及发酵条件是工业化大批量生产木霉菌制剂的前提。本文主要对我们筛选出的生防有效菌绿色木霉的放大发酵培养条件进行了研究，其结果对于绿色木霉和多功能生物制剂的工业化生产具有一定的指导意义。绿色木霉Tr9701（Trichoderma viride），由天津植保所病害室筛选、鉴定、保存菌株。1.2.1 不同培养基与绿色木霉生长和孢子形成、萌发的关系 将绿色木霉菌丝块（直径5mm）分别置于MA培养基、小麦粉培养基、豆粉浸出液培养基、PDA培养基、PSA培养基、土壤浸液琼脂培养基、水琼脂培养基、CA培养基等上，在25℃下培养，每处理重复4皿，24h、48h、72h、96h、7天后测量菌落直径，观察菌落生长和孢子着生情况。将木霉菌孢子在1%葡萄糖营养液、1%蔗糖营养液、10%土壤浸出液和蒸馏水中，25℃培养，0h、4h、6h、24h后调查孢子萌发情况。1.2.2 温度与绿色木霉菌丝生长及孢子形成的关系 将菌块移入PSA平板培养基上（定量为12ml），置于10～35℃共6个温度梯度内培养，分别于培养24h、48h、72h、96h、7天后测量菌落直径，比较不同温度下菌丝生长差异，并观察各处理中产孢情况。同时将试管斜面上培养4天的木霉菌分别放入温度为35℃、45℃、55℃、65℃的水浴锅内，每温度放4个试管，分别在5min、10min、15min、20min各取1管，在无菌条件下将菌丝挑入PSA平板上，于25℃温箱内培养，观察木霉菌生长情况，明确持续高温对绿色木霉菌丝伸长、孢子着生的影响。1.2.3 pH值与绿色木霉菌丝生长及孢子形成的关系 将灭菌后的PSA培养基，用HCl和NaOH调节其pH值分别为1、2、3、4、6、7、8、9、10、11、12、13，在不同pH值培养基上接种菌块，25℃恒温培养，24h、48h、72h、96h、7天后观察pH值对绿色木霉菌丝伸长、孢子着生的影响。1.3.1 固体发酵基质原料的确定及培养基的优化 试验设计的培养基配方由固定成分和附加成分组成，固定成分以小麦全麦为主，附加部分黄豆粉、糖类和酵母浸膏（具体见表7）。利用设计的配方培养绿色木霉（接种浓度5×106个孢子/ml，基质：菌液=10：1），观察不同配方培养下绿色木霉菌丝和产孢量的情况，确定利于绿色木霉培养的固体发酵基质配方。1.3.2 固体发酵基质中含水量的确定 由筛选获得的固体发酵基质配方中，加入不同比例的水分。含水量试验设计为麦粒：水比例1：0.6、1：0.8、1：1、1：1.2、1：1.4，利用设计的不同含水量配方培养绿色木霉（接种浓度5×106个孢子/ml，基质：菌液=10：1），观察不同含水量下培养绿色木霉菌丝和产孢量的情况，确定利于绿色木霉培养的固体基质中含水量。1.3.3 培养时间对绿色木霉产孢的影响 以筛选获得的固体基质配方作为木霉菌发酵基质培养绿色木霉（接种浓度5×106个孢子/ml，基质：菌液=10：1），观察发酵过程中木霉菌在培养基质中的种群密度变化，定时取样，以血球计数板计数培养物中绿色木霉孢子着生量。1.3.4 利用食用菌废料的固体发酵基质原料的确定及添加成分、比例的优化 首先通过可行性试验明确食用菌废料是否能够提供木霉菌繁殖的基本营养。配方筛选试验设计的培养基配方由固定成分和随机成分组成，固定成分以食用菌废弃培养料（自然风干）为主，附加部分麦麸和无机营养元素；随机成分有酱油渣、玉米芯、黄豆渣、锯木屑、稻杆等（自然风干）废弃物。以食用菌废料、麦麸、无机盐为固定成分分别与其他废弃物按照一定的比例称量350g，料：水为1：1，放在广口玻璃瓶中，灭菌后接种木霉孢子悬浮液（接种浓度5×106个孢子/ml，35ml/瓶），设4次重复，25℃恒温培养，6天后调查结果。用不同培养基25℃培养绿色木霉，生长速度测定结果见表1。由结果可知，绿色木霉菌在供试的几种培养基上均能生长。从生长速度上看，以小麦粉和豆粉浸出液培养基上生长速度最快，是其生长的最适培养基，菌丝培养72h即长满全皿，且菌丝浓密；PDA、PSA、CA培养基相对次之，三者之间生长速度无明显差异；绿色木霉在水琼脂培养基上7天可以长满全皿，但菌落极为稀疏；以MA培养基、土壤浸出液培养基上生长速度最慢，25℃培养7天菌落直径分别为26.00mm和26.25mm。培养基菌落直径（mm）24h48h72h96h7天MA培养基5.258.1310.5013.7526.00小麦粉培养基14.2558.50满豆粉浸出液15.2550.50满PDA10.5041.7579.25满PSA11.0037.7568.50满土壤浸出液5.007.3811.3815.5026.25水琼脂5.5022.5040.2557.50满CA培养基13.0041.0068.75满表1 绿色木霉不同营养条件下菌落生长速度用不同培养基培养观察其孢子着生情况（结果见表2）。由结果可知，该菌在几种培养基上均能产生孢子，从孢子形成的速度和数量上看，以小麦粉和PDA培养基孢子生成的速度最快，产生的孢子数量最多；其次是豆粉浸出液、PSA和CA培养基；以MA培养基、土壤浸出液和水琼脂3种培养基上孢子生成速度最慢，产生量最低。培养基孢子分布直径（mm）24h48h72h96h7天附注MA培养基005.885.886.00+小麦粉培养基0034.25满++++豆粉浸出液0022.2561.00满+++PDA014.6330.25满+++PSA07.0023.7565.00满+++土壤浸出液00008.5+水琼脂0000满+CA培养基07.2519.0061.00满++表2 绿色木霉不同营养条件下培养孢子着生情况由绿色木霉分生孢子在不同营养液中萌发试验可知（结果见表3），其分生孢子在几种营养液中均可萌发，但以1%葡萄糖溶液中萌发效果最好，24h萌发率为30%，48h萌发率为95.5%；10%土壤浸出液中萌发效果最差，24h萌发率为1.5%，48h萌发率为45%；其他几种液体中孢子萌发率24h为4.00%～5.67%之间，48h为76.0%～78.2%。营养液孢子萌发率（%）0h4h6h24h48h1%葡萄糖00030.0095.51%蔗糖0004.0076.010%土壤浸出液0001.5045.0蒸馏水0005.6778.2表3 绿色木霉不同营养液中孢子萌发情况绿色木霉于不同温度下培养，测量其生长速度结果见表4。由结果可知，绿色木霉在10～35℃均能生长，25℃时72h内就能长满培养皿，20℃、30℃时需要96h，15℃时则需要7天，10℃、35℃时第7天仍未长满全皿。20～30℃为绿色木霉的生长适温，25℃为生长最适温度。培养温度（℃）菌落直径（mm）24h48h72h96h7天106.256.317.759.6338.35158.7510.0627.1344.50满2013.5045.3879.83满2519.6358.50满3018.8855.1377.67满3511.3112.2512.5013.7516.5表4 绿色木霉不同温度下菌落生长速度将绿色木霉于不同温度下培养，观察其孢子着生情况、测量其孢子蔓延速度，结果见表5。从结果显示，绿色木霉在15～30℃均能形成分生孢子，其中适宜适温为20～30℃，温度在20℃以下和30℃以上能产生分生孢子但速度减慢，如25℃时96h内产生的分生孢子就能布满培养皿，20℃、30℃时需要7天，15℃时第7天分生孢子仍未布满全皿。因此，25℃为绿色木霉的分生孢子形成的最适温度。培养温度（℃）孢子分布直径（mm）24h48h72h96h7天100000015000066.50200017.7576.5满2506.543.00满300047.2584.5满3500000表5 绿色木霉不同温度下孢子着生情况绿色木霉在不同pH条件下培养，结果见表6。由结果可明显看出，pH值在5～9环境下培养，绿色木霉可以生长，其中pH在5.5～6间生长最适，pH值在8以上生长较为缓慢，由此可见绿色木霉喜好在中等偏酸性条件下生长。绿色木霉孢子着生也表现相似规律，pH值在5～8环境下孢子均可着生，以pH在5.5～6间最适。pH菌落直径（mm）孢子分布直径（mm）24h48h72h7天24h48h72h7天100000000200000000300000000400000000512.0036.0063.38满0015.560.05.52163.38满0033.5满621.6366.38满06.242.0满79.5030.5054.00满0028.2满807.7515.5045.75005.549.25907.008.0022.0000001000000000110000000012000000001300000000表6 pH值对生防木霉菌菌丝伸长、孢子着生的影响不同固体发酵基质原料培养绿色木霉效果见表7。由结果可以看出，在以小麦粒为主的固定成分中加入糖类和酵母浸膏，菌丝量和产孢量最高，如果在发酵过程多次搅拌，可保证整个基质内、外表充满黄绿色孢子。在加入其他成分的配方中菌丝、产孢量均不及前者多，因此通过试验获得的绿色木霉固体发酵基质原料配方为：小麦粒+葡萄糖+酵母浸膏。配方菌丝生长量孢子产生量说明全麦粉+黄豆粉+葡萄糖+酵母浸膏++仅表面分布黄绿色孢子通气性较差全麦粉+葡萄糖+酵母浸膏+仅表面分布黄绿色孢子通气性较差全麦粉+黄豆粉++仅表面分布黄绿色孢子通气性较差小麦粒+黄豆粉+葡萄糖+酵母浸膏++麦粒表面密生黄绿孢子麦粒和豆粉附着性稍差小麦粒+葡萄糖+酵母浸膏+++麦粒表面密生黄绿孢子适宜木霉菌生长小麦粒+黄豆粉++麦粒表面密生黄绿孢子麦粒、豆粉附着性稍差表7 绿色木霉孢子发酵配方筛选试验将固体发酵基质中加入不同比例水培养绿色木霉效果见表8。由结果可以看出，在以小麦粒为主的固定成分中加入不同水量，其对绿色木霉的菌丝量和产孢量影响较大，以固麦粒和水比例为1：0.8～1：1.0的菌丝、产孢量最多，如果在发酵过程多次搅拌，可保证整个基质内、外表充满黄绿色孢子。处理含水比例菌丝生长量孢子产生量说明麦粒：水1∶0.6++菌丝着生处生长黄绿色孢子含水量过低菌丝少麦粒：水1∶0.8+++整个料体着生黄绿色孢子适宜木霉菌生长麦粒：水1∶1+++整个料体着生黄绿色孢子适宜木霉菌生长麦粒：水1∶1.2++孢子主要在上半层分布基料下层含水量较高麦粒：水1∶1.4+孢子着生较少含水量过高表8 绿色木霉固体发酵基质中含水量试验以筛选获得的固体发酵基质配方作为木霉菌发酵基质培养绿色木霉，发酵过程中木霉菌在培养基质中的种群密度变化结果见表9，接种48h后，内部有菌落产生，第3～4天，整个基质全部被白色菌丝覆盖，随后，料体表面有黄绿色孢子大量产生，随着时间的推移，绿色木霉的孢子量增长迅速，到第6天培养料中孢子量达332.4×106个/g，以后孢子量增长缓慢。因此为了缩短发酵时间，降低发酵成本，发酵6天就能达到预期的要求。重复孢子密度计数（×106个孢子/g）2天3天4天6天8天平均8.3351.798.9332.4357.4表9 不同时期绿色木霉孢子种群密度变化为进一步降低生产成本，本试验设计以食用菌废弃培养料为主，附加部分麦麸和无机营养元素；随机成分有5种废弃物。配方设计及其培养木霉孢子效果见表10。由结果可以看出，在以食用菌废料为主的固定成分中加入黄豆渣，菌丝量和产孢量最高，整个基质外表充满黄绿色孢子，内部由于光照不充足产孢量较少，如果在发酵过程搅拌1～2次，可以促进产孢。在加入其他成分的配方中菌丝、产孢量均不及前者多，因此通过试验获得的最佳配方为：食用菌废料+麦麸+黄豆渣+无机营养元素。配方菌丝生长量孢子产生量食用菌废料+麦麸+无机营养元素+酱油渣++上表面零星分布黄绿色孢子食用菌废料+麦麸+无机营养元素+玉米芯++上表面零星分布黄绿色孢子食用菌废料+麦麸+无机营养元素+黄豆渣+++料体整个表面有黄绿色孢子食用菌废料+麦麸+无机营养元素+锯木屑+几乎没有黄绿色孢子产生食用菌废料+麦麸+无机营养元素+稻杆++上表面零星分布黄绿色孢子表10 木霉菌利用食用菌废料等的发酵配方筛选以筛选获得的食用菌废料培养基作为木霉菌发酵基质培养木霉菌，发酵过程中木霉菌在培养基质中的种群密度变化结果见表11，接种48h后，内部有菌落产生，第3～4天，整个基质全部被白色菌丝覆盖，随后，料体表面有黄绿色孢子大量产生，随着时间的推移，绿色木霉的孢子量增长迅速，到第6天培养料中孢子量达248×106个孢子/g，以后孢子量增长缓慢。因此为了缩短发酵时间，降低发酵成本，发酵6天就能达到预期的要求。重复孢子密度计数（×106个孢子/g）2天3天4天6天8天平均7.153.899.8248.7259.3表11 不同时期绿色木霉孢子种群密度变化迄今为止，利用木霉菌防治植物病害的研究已有近60年的历史，并且研究工作大多集中于木霉菌资源的筛选和作用机理方面，在木霉菌人工发酵方面的报道较少。我们通过对生防木霉菌培养条件的研究，进一步获得了其以麦粒为主及食用菌废料为主的固体发酵技术，可以用于绿色木霉的人工发酵，这将为绿色木霉菌产品的制剂化的生产提供技术支持。

植原体（Phytoplasma），原称 Mycoplasma-like Organism（MLO），是一类无细胞壁、不能人工培养、存在于植物筛管内的专性寄生菌。植原体主要依靠叶蝉等从韧皮部取食的半翅目昆虫传播，也可由菟丝子和嫁接等传播，能够引起植物丛枝、黄化、簇生、矮化、顶枯等症状[1]。我国已报道的植原体病害约有70多种，造成了巨大的经济损失[2]。传统上，主要是根据寄主的种类及其症状等生物学性状和介体昆虫的特性对植原体进行鉴定和命名。但该方法非常复杂和费力，难以鉴定多种植原体复合侵染引起的病害，经常导致片面甚至错误的结论[3]。近年来，随着分子生物学的迅速发展，核酸杂交、RFLP、PCR等技术的广泛应用极大推动了植原体分子鉴定等方面的研究。Lee等[4]根据植原体的16S rRNA基因的RFLP分析将植原体34个典型的株系划分为14个组32个亚组，其中翠菊黄化组（16SrⅠ）变异最大、分布最广。Schneider等[5]对翠菊黄化组、stolbur组和X-disease组的tuf基因进行RFLP分析，认为tuf基因可以作为划分植原体的依据，并且对植原体的检测可以达到单拷贝基因的水平。Marcone等[6]将翠菊黄化组划分为6个亚组。2004年，国际比较菌原体学研究计划署（IRPCM）将植原体划分为17个组，24个种，至少40个亚组，并制定了相应的分类标准[7]。本研究利用巢式PCR对表现丛枝症状的绣线菊和玫瑰进行植原体分子检测，并将克隆到的16S rRNA基因、延伸因子tuf基因及核糖体蛋白基因序列与已知植原体16Sr各组中植原体序列进行同源性比较分析，初步明确了两分离物的分类地位。表现丛枝、黄化、小叶和顶枯症状的绣线菊样品采自山东省青州市；表现叶片畸形、丛枝、顶枯症状的玫瑰样品采自山东省平阴县玫瑰研究所；克隆载体pMD18-T、PCR产物回收试剂盒、限制性内切酶及其他酶类等分子生物学试剂产品均购自TaKaRa公司。以有病害症状的玫瑰为接穗，通过芽接的方法嫁接到5株无症状的玫瑰上。嫁接后放置于无虫温室中，5～7周后观察症状。取表现典型症状的玫瑰韧皮部组织（2mm×2mm），放入3%戊二醛、1%四氧化锇中双重固定，乙醇（10%～70%）、丙酮（0～100%）系列脱水，Epon 812包埋，超薄切片后醋酸铀和柠檬酸铝双染色，在JEM-1200 X型透射电镜下观察。提取方法按参照文献[8]的方法进行，总DNA于-20℃保存备用。参照文献[9，10]所报道的植原体16S rRNA基因通用引物R16mF2/R16mR1进行PCR扩增，然后以此扩增产物为模板用R16F2/R16R1进行巢式PCR（表1）。以提取的玫瑰丛枝植原体的总DNA为模板，参照Schneider等[11]和Lim等[12]报道的延伸因子tuf基因、核糖体蛋白基因的引物对进行PCR扩增（表1）。引物名称Primername引物序列Primersequence退火温度TmR16mF25′-CATGCAAGTCGAACGGA-3′60R16mR15′-CTTAACCCCAATCATCGAC-3′60R16F25′-ACGACTGCTAAGACTGG-3′55R16R15′-TGACGGGCGGTGTGTACAAACCCCG-3′55fTufu5′-CCTGAAGAAAGAGAACGTGG-3′50rTufu5′-CGGAAATAGAATTGAGGACG-3′50rpF15′-GGACATAAGTTAGGTGAATTT-3′55rpR15′-ACGATATTTAGTTCTTTTTGG-3′55Table 1 Primers used in this research to amplify 16S rRNA gene tuf gene and rp genePCR产物回收后与pMD18-T连接，连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，挑取筛选平板上的白色菌落培养，提取质粒，经PCR和酶切鉴定为阳性的重组质粒送上海英骏生物技术有限公司测序。将所得DNA 序列输入GenBank进行Blast检索，采用DNASTAR和MEGA3.1软件对所得到的核苷酸序列与GenBank中收录的相应基因的核苷酸序列进行比较和分析，并构建系统进化树。感病绣线菊植株表现为节间短缩，部分枝条丛生，叶片黄化、变小畸形、顶部嫩梢枯死，植株矮化。感病玫瑰植株表现典型丛枝症状，叶片变小畸形、顶部嫩梢枯死（图1）Figure 1 Symptoms of spiraea witches' broom and rose witches' broom将健康玫瑰嫁接到表现病害症状的玫瑰上，5～7周后，接穗新长出的嫩枝表现黄化、丛枝、畸形等症状。对玫瑰丛枝植原体进行电镜超微结构观察，在嫩茎韧皮部筛管中观察到典型的植原体。其主要形态为圆形和椭圆形，有明显的单位膜结构，直径为300～600nm，胞内可见核糖体蛋白体颗粒和DNA细链。以表现丛枝、叶片黄化等症状的绣线菊总DNA为模板，用巢式PCR扩增其16S rRNA基因，得到长度约为1.2kb的片段。以玫瑰丛枝植原体的总DNA为模板，用PCR扩增16S rRNA基因、tuf基因和核糖体蛋白基因，分别得到了约1.5kb、830bp和1.3kb的目的片断，与预期大小一致，表明植株中存在植原体。将此植原体分离物分别暂命名为绣线菊丛枝植原体（spiraea witches'broom，SWB）、玫瑰丛枝植原体（rose witches'broom，RWB）。通过测定2个PCR克隆到的片段的序列，确定了SWB的16S rRNA基因含有1236个核苷酸，G+C的含量为47.09%；RWB的16S rRNA基因含有1432个核苷酸。GenBank登录号分别为EF176608、EF199938。将两分离物与GenBank中17个植原体分离物的核苷酸序列进行比对和系统进化分析。从系统进化树中可以看出，两个分离物全部聚类到16SrⅠ组中，与16SrⅠ-B亚组的西方翠菊黄化植原体、马里兰翠菊黄化植原体及16SrⅠ-D亚组的泡桐丛枝植原体聚集为一簇。两个分离物与植原体16SrⅠ组中各亚组的分离物核苷酸同源性均达到99%以上，其中SWB与16SrⅠ-B亚组中的西方翠菊黄化植原体（SAY）同源性高达99.6%，与本研究的另外两个分离物RWB、PaWB的同源性为99.7%和99.8%。而RWB分离物与PaWB的同源性最高为99.9%，与植原体僵顶病组（Stolbur group）（16Sr Ⅻ）的草莓花瓣变绿症（Strawberry virescence，AY377868）植原体核苷酸的同源性为95.8%，与其他各组的核苷酸同源性为89.5%～92.8%。说明SWB、RWB分离物属于西方翠菊黄化植原体（图2）。Figure 2 Phylogenetic tree based on 16S rRNA nucleotide sequence with maximum-likelihood method in MEGA3.1 software package经序列测定，确定玫瑰丛枝植原体的延伸因子（EF-Tu）tuf基因序列长度为810个核苷酸，G+C的含量为37.5%，核糖体蛋白基因含有1174个核苷酸，G+C的含量为35.4%。将玫瑰丛枝植原体分离物与GenBank中17个植原体分离物的延伸因子（EF-Tu）tuf基因进行比对，结果表明：玫瑰丛枝植原体与植原体各个组的核苷酸同源性为70.4%～99.6%，该分离物与16SrⅠ组中各亚组的分离物核苷酸同源性为96.3%～99.6%，其中与16SrⅠ-D亚组中的泡桐丛枝（PaWB）同源性高达99.6%，该分离物与植原体其他组中的僵顶病组（Stolbur group）（16Sr Ⅻ）核苷酸同源性最高为88.6%，与其他各组的核苷酸同源性为70.4%～88.6%。将玫瑰丛枝植原体分离物与GenBank中21个植原体分离物的rp基因进行比对，结果表明：玫瑰丛枝植原体与植原体16SrⅠ组中各亚组的核苷酸同源性为96.7%～99.4%，其中与16SrⅠ-D亚组中的泡桐丛枝（PaWB）同源性最高为99.4%，从而表明该分离物属于Candidatus Phytoplasma asteris。本研究利用巢式PCR从表现丛枝症状的绣线菊中扩增到了1236bp的片段。序列测定和比较的结果表明，与这两种病害相关的植原体均为西方翠菊黄化植原体。前人对植原体侵染绣线菊研究较少，国外仅报道由植原体‘Ca.Phytoplasma pruni'引起的绣线菊矮化病[13]。我们采集了表现丛枝、顶枯症状的玫瑰和表现丛枝症状的泡桐，经PCR检测表明其病原为植原体。序列分析表明，两分离物的16S rRNA基因、延伸因子（EF-Tu）tuf基因和核糖体蛋白基因核苷酸同源性都在99.9%以上，从而确定玫瑰丛枝植原体与泡桐丛枝植原体属同一病原物，属于西方翠菊黄化植原体。尽管翠菊黄化组植原体的报道多在欧洲和美国，但本文是第一次中国关于植原体侵染玫瑰的报道。与2001年和2003年Kaminska M等[14，15]感病玫瑰表现畸形和顶枯不同的是，在本研究中的感病玫瑰表现出丛枝和顶枯的症状。有趣的是，在本研究中的玫瑰、泡桐分离物是在同一玫瑰园内得到，两者之间仅相隔数米，而在同一玫瑰园的其他地方也发现植原体侵染的玫瑰。在调查中发现感病植株多出现在新嫁接的玫瑰上，长势强的玫瑰发病较少，与表现丛枝症状泡桐较近的地块发病严重，其他地块发病较轻。在根据16S rRNA基因进行序列比对及构建系统进化树时发现，两个分离物与16SrⅠ-B亚组的西方翠菊黄化植原体、马里兰翠菊黄化植原体及16SrⅠ-D亚组的泡桐丛枝植原体在构建的系统进化树中聚集成一簇。Lee等[16]认为在基于16S rRNA基因进行序列比对时，16SrⅠ-D亚组的泡桐丛枝植原体会聚集到16SrⅠ-B亚组中，本研究结果与此相符。根据国际比较菌原体学研究计划署（2004）的建议，泡桐丛枝植原体、SAY植原体等都属于同一个种，‘Candidatus Phytoplasma asteris'。