近年来发生的巴林银行倒闭案、安然事件、世通公司等财务欺诈案以及我国一些企业控制失灵事件，使重视企业内部控制与风险管理成为全球化趋势。内部审计，作为公司治理结构中形成权力制衡机制并促使其有效运行的重要手段，随着现代企业审计制度的建立和完善，其职能早已超越了传统的财务收支审计，而涉及对各项工作的经济性、效率性和效果性的核查。这使得内部审计部门不仅仅是现实资产的守护者、财务报表的复核者、会计核算的勾稽者，更成为了强化管理的促进者、提高效能的推动者和价值增值的促导者。内部审计在企业中的作用与地位日益提高，这也需要审计工作的方式方法与时俱进。在近年来全球信息化浪潮的影响下，信息技术的应用已渗透到国民经济和社会经济发展的各个领域和各个层面。随着中国国内会计电算化的迅速普及，以及内部审计在企业管理层面承担的新任务，现代审计理论和审计实务面临着许多前所未有的问题和挑战。对审计环境的影响：现在，已有80%以上的基层单位基本实现了会计电算化（财政部1994年5月4日《关于大力发展我国会计电算化事业的意见》目标要求），许多大型企业还实施了ERP系统，信息化使企业的经济环境、组织结构、经营方式、业务重心和管理模式等都发生了重大变化。业务执行的各种细节在信息系统中转化为海量数据，这要求审计部门必须有能力在信息化的业务流程和海量数据的背景下开展有效的审计工作。而无形的电子数据及处理数据的信息系统，用户权限和系统安全都更加严格，这也使得审计环境变得更加复杂。对审计线索的影响：在传统的手工会计系统中，审计线索非常清楚，从原始凭证到记账凭证，由过账到财务报表的编制，整个财务处理过程由不同职责分工的人员来共同完成，每一步都有文字记录和经手人签字，这些书面资料为审计提供了清晰的线索，审计人员在对会计报表进行审计时就可以根据需要对这些审计线索进行顺查或逆查、详查或抽查。而在会计电算化系统中，传统的账簿没有了，取而代之的是磁介质，这些磁介质上所存储的会计资料不能为肉眼所直接识别，修改不留痕迹。同时，由于数据处理过程的自动化，业务数据进入计算机系统之后，即所有会计处理均由计算机按程序指令自动生成，传统的审计线索在这里中断了、消失了。传统的查账方法，对电算化的会计个体已不完全适用。对审计内容的影响：在手工条件下，审计内容主要是对人的审查，采用的方法主要是对纸面信息进行核对和检查。责任容易确定，结果也较直观。在计算机审计的条件下，审计人员应该在查核财务会计报表及账簿记录的真实性和正确性的基础上，把重点放到被审计单位所用信息系统是否合法、合规和第一次输出的信息是否真实、正确，以及当运行环境发生变化，或经过系统维护后，输出信息的真实性、正确性上。对审计技术的影响：在手工会计处理的条件下，审计可根据具体情况进行顺查、逆查或抽查。审查一般采用审阅、核对、分析、比较、调查和证实等方法。所有审查工作都是由人工完成的。在会计电算化条件下，会计的特点决定了审计技术的改变。对电算化会计信息系统的审计，如果仍然采用常规的手工系统的那一套审计技术，就不可能达到审计的目的。对审计风险的影响：在信息化环境下，由于企业运行环境的改变，审计线索和审计证据的可靠性主要取决于信息系统的相关控制是否健全、有效。而企业信息系统的开放性和共享性、外部环境的不安全性，都会使计算机病毒和黑客对信息的真实性和可靠性产生威胁，并且其破坏性巨大，这些都加大了信息化环境下企业风险管理审计的风险。对审计人员素质的影响：开展信息化环境下的审计管理，要求审计人员必须具备计算机软硬件知识，对计算机网络和信息系统的安全性具有特殊的敏感意识，对财务会计和企业内部控制具有深刻的理解，既是审计专家，又是信息系统专家，并以对计算机信息系统软硬件的技术性审计来保证计算机审计质量的可靠性。自20世纪90年代，随着信息技术的发展和会计电算化的普及，使审计工作由手工审计转向计算机审计，由此而诞生了计算机审计软件，此阶段属于审计软件的初级阶段——“财务收支审计作业软件包时代”。随着经济的发展和社会的进步，审计的职能早已超越了查账的范畴，涉及对各项工作的经济性、效率性和效果性的查核。这就需要与之相配套的审计信息化产品不再局限于财务收支审计，而应拓展到对各类业务数据的审核。审计信息化产品的应用也将从“财务收支作业软件包时代”进入了一个全新的时代——ARP（Audit Resource Planning，审计资源计划）时代。ARP是指在先进的管理思想的基础上，应用信息通信技术，以加强企业/政府内部控制、提高风险防范能力为目标的审计信息系统，全面解决新形势下内部控制、风险管理与审计监督的难题。这就需要审计信息化产品能够科学的处理和利用审计信息，帮助政府与企业实现对各类业务的全面监测与自动预警，反应出企业财务经营状况，查找经营管理中存在的问题和疑点，评价经营管理和风险程度，注重把查处问题与促进改革、完善制度结合起来，从标本兼治的角度有针对性地提出审计建议，进一步提升审计的质量和水平，为领导科学决策提供依据。第一，实现审计管理信息化是适应现代企业制度要求、改变传统审计模式、紧跟现代审计发展步伐的必然要求。企业内部审计应突破传统的审计思路，逐步向管理审计转移，强化企业内部约束机制，促使企业建立严密的、完善的控制系统，严格的、科学的管理制度，有效的、畅通的运行机制。重点通过内部控制审计、经济效益审计和管理过程审计，优化人力、物力、财力资源配置，改善经营管理，挖掘生产与工作中的潜力，全面分析、评价企业综合效益，增强企业的市场竞争力，以管理创新为基础，促进企业提高经济效益。现代企业制度下，内部审计作为企业管理的一个职能部门，不仅具有监督职能，而且具有服务的职能，可以说是一种寓服务于监督之中的职能。其监督的目的是维护企业整体的合法经济利益不受侵害，实现企业活动最优化，经济效益最大化。因此，要适应现代企业制度，由监督导向型向服务导向型转变，实现财务收支审计向管理审计延伸是必由之路。随着内部审计由财务领域向经营管理领域的扩展，原来旧的审计方法显然不适应现状，审计人员应力求在审计方法上有所创新。交易电子化、自动化是当今经济业务运转的发展趋势和潮流，内部审计要继续发挥监督、评价和服务的职能，就必须紧随审计环境的变化，建立适应信息化的审计管理信息系统，利用信息技术真正改变和提升审计工作的业务方式、业务能力。第二，实现审计管理信息化是科学管理审计工作，规范审计流程，提高审计工作效率的必然要求。在审计监督面临的业务量上看，不断发展的经济规模要求审计监督的规模相应增长。被审计单位财政财务管理、业务运营的技术手段已经逐步从传统的人工处理方式，转向全面依赖信息系统支持的阶段。一方面业务执行的各种细节在信息系统中转化为海量数据，另一方面业务执行在信息化的支持下发生了流程重组。发生变革的被审计业务执行过程，需要审计监督的技术手段做出信息化调整。审计部门必须有能力在信息化的业务流程和海量数据的背景下开展有效的审计工作。从审计工作质量的要求上看，企业、上级主管部门、社会各界等外部主体对审计监督的质量要求连年提升。预算执行审计、固定资产投资审计、经济责任审计等专业审计工作在行政职能中发挥的作用和意义越来越大。按照现代企业内部审计的要求，结合计算机技术特点，兼顾审计业务发展需要，从实际出发，实现审计管理信息化需要开发能满足实际审计工作的应用软件，该软件应以审计质量为核心，审计多样性为根本，审计独立性为先导，审计问题为出发点，审计程序为主线，审计工具为标准，审计文档管理为依托，具备以下功能特点：一是能够分析海量业务数据，准确发现疑点。系统应能够智能的采集财务软件、大型ERP中的各类财务、业务数据，采集方式多样，如：直连采集、备份采集，U盘采集，定量采集、定时采集等。系统应具有强大、灵活的分析工具，能够对财务、业务数据进行各种综合分析，也可以预置各种方法、模型，在项目中调用，便于经验共享和规范工作。系统应具有动态的、实时的数据分析、预警平台，可以对海量的数据进行实时的分析、预警，为制定审计计划提供依据，为审计项目提供疑点。二是审计质量的有效控制。系统应具备完善的审计项目管理功能，辅助审计项目质量控制，完成审计准备、审计实施、审计报告、后续审计四个阶段全过程管理，并具有项目台账、项目成本、成员管理、预备归档等管理功能，并提供与审计现场作业软件接口，方便及时地记录现场审计环节的重要信息，为领导决策支持、全面掌控审计项目的进度提供保障。三是全面的审计工作客观评价体系。构建考核主体、考核周期、考核流程、考核对象、考核指标、基准分数、评价等级等考核体系，对审计项目、审计部门、审计人员进行量化评价。通过对业务流程的各个环节投入、产出进行审核评价，从而获得员工的绩效考核分析，为工作安排、奖金计算、人员调整等提供决策依据。四是完善的决策支持，实现审计成果的高级综合应用。可以对各级审计部门的人员、计划、项目、档案、台账、绩效考核、审计预算等进行多条件、精确到模糊、简单到复杂的高级综合查询。按照管理要求快速生成审计报表和统计报表，能够以多种格式输出。同时可以构建指标分析体系，辅以图表的生动展现，为领导决策提供有力支持。五是集团化多组织的计划管控。系统应能够支持多级（集团公司和下属公司）、多组织独立的计划管理。能够对审计计划的填报、审核、审批、分配、调整、结转，到计划执行进度进行全过程的管理和监控。随着审计管理信息系统的建立，审计工作将逐步实施“实时跟踪+联网核查”审计模式，逐步实现审计监督的三个“转变”：从单一的事后审计转变为事后审计与事中审计相结合；从单一的静态审计转变为静态审计与动态审计相结合；从单一的现场审计转变为现场审计与远程审计相结合，使内部审计的监督职能的实现得到革命性的提升。ARP时代的审计管理信息系统，依托先进的审计理念和强大的信息科学技术，能帮助企业对业务流程的执行效率，资源利用效率进行实时监控，适时提供改进建议，防范风险于未然，促进企业又好又快发展，为有中国特色的社会主义建设保驾护航。

我国城市交通技术政策规定：以公共交通为主，在大城市建立轨道交通为骨干的综合运输体系。城市轨道交通管理系统是一个包括多学科、跨专业的系统工程。在管理方面表现为自动化、信息化，并体现出“与时俱进、以人为本”的理念。信息技术在地铁运营中的应用，突破了人们习以为常的时空障碍，在更大范围内将企业与企业、企业与销售商、企业与政府管理机构以及消费者等都连结起来，构成了一个巨大的虚拟信息空间。信息技术的使用使得企业的基本思考方式和运营方式正在发生变化，这就要求企业管理者必须懂得信息技术如何与企业管理相结合，以及在信息社会中企业的基本特征。信息基础设施是企业信息化的基础。信息基础设施需要大量投资，也需要不断地更新和发展。信息基础设施包括6层技术平台：硬件层、网络层、系统软件层、数据管理层、平台开发层及应用系统层。计算机是信息系统重要的组成部分。微型计算机是最为普及、同时性能价格比提高最快的计算机。网络计算机的功能更为简化，成本低廉，这种机型主要用在局域网上，终端机的功能相对较弱，运行的是网络服务器上的软件，大多数信息处理及存储功能等也是在服务器中进行，从而降低了整体计算机系统的成本，也使得维护成本大大降低。在地铁运营业务中，根据不同业务用途，这两种计算机均适用。服务器泛指在客户机/服务器结构中提供资源的计算机，其作用是存放大量共享数据或公用程序，是构筑管理信息系统最重要的核心计算机设备。工作站型计算机的处理能力通常高于微机，具有多任务、多用户的功能，易于与外界的各种计算机网络互联，容易得到外部的数据，在存取远程计算机站点上的信息、图像等方面，表现出很好的性能，在网络中需要各个结点具有较强的处理功能时，使用工作站比较适合，工作站也可以作为服务器使用。在进行计算机选型时，需要从整体的角度来考虑系统的效益。一个企业的信息系统一般由若干台服务器作主机，用大量微机作为用户终端，所以应在企业整体的IT发展规划下考虑和选择具有合理性能/价格比的机型（表1）部件应考虑的主要事项处理器和主板处理器型号和主频率，是否具备并行处理功能，最大处理器数量内部存储器内存容量，可扩充的最大容量硬磁盘硬盘容量，硬盘数，数据接口类型显示器屏幕尺寸，分辨率，精细度，扫描方式扩张插槽数目，网络接口卡速率多媒体光驱速度，读写格式，声卡，图像解压方式移动计算是否具备移动计算功能安全功能防病毒设备，电源锁、指纹识别或其他安全防范措施售后服务免费维修的时间、部件、技术支持方面的承诺表1 微机选型的考察事项信息系统规划是信息系统实践中的主要问题，它之所以重要，首先在于现在信息系统的应用已越来越为企业战略服务，其次在于现在企业用于信息系统的投资越来越大。信息系统规划的范围，一要分析地铁公司业务发展及其对信息化的需求，分析公司的战略目标、经营方针、发展策略、及主要业务活动、模式、流程，分析地铁公司的组织架构、部门的目标、功能，借鉴以往经验及参照行业最佳方法，并结合本地需求，初步定义每个环节对信息化的需求及其用途、重要性、优先次序、对业务的价值等，形成对信息化需求的整体、高层的需求大纲。二要制定应用系统构架，根据地铁公司的整体业务需求，制定用以描述企业整体的应用系统如何配合业务的信息化需求，并用于对信息化建设的决定作为指导。三要制定技术架构，为配合整体信息技术策略和信息化建设方向，有需要制定技术架构从而订立一套选购及建立信息基础设施的守则及标准，以满足企业的业务需求及支持信息化建设。四要对目标应用系统架构中系统的主要模块、主要模块功能描述、主要的集成要求、主要的技术要求、主要的业务流程及其信息化需求、主要的信息数据需求进行逐一的简述。经过以上四个步骤后，确立信息化建设的短期、中期及长远目标，短期目标为完善信息化建设的整体规划，完成建设阶段所有需要的重点信息技术设备及系统，建立本地化的团队及信息技术部门组织架构，完成重要信息系统建设。中期目标为完成运营初期急切需要的信息技术设备及系统，包括完善办公自动化设备与功能、实施财务管理系统、实施维修管理系统、实施采购管理及库存管理系统、建设信息技术数据中心、信息技术服务台等，以有效支持地铁公司各项主要业务和管理工作。长期目标为继续优化已建立的信息技术系统及服务，探讨其他信息化建设（图1）。企业的信息系统开发涉及许多方面：企业通常决定如何与开发商合作，由谁来主导开发；开发过程可能涉及企业的组织结构和业务流程的变更，也涉及对企业员工的培训。在许多情况下，信息化还涉及企业的战略问题，必须由企业的高层领导作出相应的决策。企业建设信息系统时，应首先建立信息化组织结构（图2）。图1 信息系统规划战略图2 系统开发信息指导委员会的职责是推进企业的战略，审议企业信息化的发展战略，听取项目小组对信息化工作的报告，同时对信息化中的重大问题进行决策。工程项目组可以由开发商为主构成，或者由企业内技术人员与开发人员混合构成，负责整个系统的开发。系统管理组负责信息系统的运行和维护，信息资源的管理，对用户的使用提供技术支持。在这些小组中，如果牵涉到各个部门的业务活动，最好由各部门的代表参与。在委托外部开发商进行开发的情况下，企业项目组可能是以开发商为主构成的。从技术角度来说，项目开发应当是从提高开发商人员的工作效率以及合理调配资源为出发点，这时企业人员应当积极地参与到项目小组中，配合开发商的要求，提供有关的业务流程资料和信息需求，同时还必须注意工期进度和对质量等方面的要求。开发工程项目小组由项目经理、系统分析师、系统设计师、程序员等角色组成。项目经理是开发队伍中该项目的领导者，一般具有丰富的开发经验，同时又具有与用户决策人物对话的资格，在重要问题上能协调与用户的关系。项目经理负责信息化项目的计划和推进，协调开发中的各种工作的顺利进行。信息管理系统包括编制作业计划、供应链管理、库存管理、设备维护和可靠性、运营数据管理、人力资源管理、运营信息的发布、危害登记、办公自动化等，该系统的建成与投入使用，减少了人力、物力的投入数量，并保证信息及时传递、记录、保存。在编制作业计划时，登录预先建设好的运营维护系统，将作业类别、工时、人数、使用的工具等信息数据输入计算机，维护系统会根据预先设定好的路经，与供应链、库存、维护数据、成本控制中心接口通讯，制定出合乎成本效益的工作时间表，并以电邮方式向维护人员发出工作单，维护人员接到工单后，按其所发布的内容准备工作，库存部门准备物料，为维修部门提供备品备件的供应商及时向库存部门提供不足的货品。运营员工可在任意一台公用计算机上凭本人ID号码登录人力资源管理系统，查看本人各种信息，包括物品领用记录、培训时间及成绩、工作地点等，节省了时间和信息不畅的问题。安全质量专业人员可登录危害登记系统，输入、消除、查看设备的隐患情况，并及时地制定相应的措施。各部门通过办公自动化系统及时传送、接收各种表报，发布运营信息等。所有的应用信息系统模块以模块群的方式组成（图3），各部门根据需求，经授权后登录网络系统，存取所需信息，编辑制定自己的工作内容，及时了解与本部门相关的信息。图3 信息管理系统构成所有子系统搭载在地铁通信网络系统骨干网上，连接地铁所有车站，实现远程信息交换，运营效率大大提高。决策支持系统是为决策者提供数据、信息和分析工具的信息系统。根据决策者在组织中的地位和决策的性质，可以将各种决策活动分为战略性决策、管理性决策及作业性决策三种。战略性决策是指将对组织的整体活动产生较大影响的决策，例如企业购并。作业性决策是指对组织常规业务问题的决策，例如日常的会计业务处理、订单处理、维修车间中的派工等这类决策活动。管理性决策是处于二者之间，其中一部分属于作业性层面上，而大多数活动属于战略性决策层面上，例如企业中管理会计的预算问题。我们把管理决策系统定义为交互式的计算机系统，可以帮助决策者使用数据及模型来解决不太确定的问题。作为一种软件系统，其核心在于各个主要成分以及它们相互之间的关系（图4）。图4 决策系统的核心成分数据管理子系统的主要组成包括数据库、数据字典和数据库管理系统。数据库基于某种统一的数据模型式组织和存在问题的领域中的数据，数据字典对于数据的数据内容、记录形式、格式和约束条件等进行记录。数据库管理系统则提供各种数据管理功能。数据库中的数据通常可分为：事物数据，内部数据，外部数据和个人数据。事物数据记录企业日常发生的活动，内部数据大部分都是事物数据，而外部数据来源于企业外部的经营环境，对于企业的各层次的经营决策具有参考价值。个人数据是为特定的决策者收集和设用的数据，例如仅提供给财务总监的企业财务报表。模型管理子系统包括模型库、模型库管理系统与其他子系统的接口等。模型库中一般应包含在特定的领域中解决问题所需要的常用数学模型，这些数学模型决定了系统可提供的分析能力。模型库管理系统是该子系统的核心部分，所有的模型库中的模型都受模型库管理系统的控制。模型库管理系统也提供与用户会话的渠道，用户通过模型库管理系统可以方便地操作模型。高层主管经过过滤、处理、组织起来的信息，使他们能更为迅速、更为有效地得到一些“关键的”信息，诸如表明企业运作状态的关键绩效指标，与公司的关键成功因素相关的情报，有关重要的竞争对手的活动情况等。这些信息有助于高层主管及时发现企业当前问题所在，找到新的发展机会以及预测未来的发展趋势。

5S起源于日本，是指在生产现场中对人、机、料、法、环等生产要素进行有效的管理，这是最初日本企业独特的一种管理方法。第二次世界大战后，在丰田公司的倡导推行下，5S对于塑造企业的形象、降低成本、准时交货、安全生产、高度的标准化、创造令人心旷神怡的工作场所、现场改善等方面发挥了巨大作用，逐渐被世界各国的管理界所认识，同时也被各国所效仿、学习、引进、推广。随着世界经济的发展，5S已经成为工厂管理的一股新潮流。“5S”是指整理（Seiri）、整顿（Seiton）、清扫（Seiso）、清洁（Seiketsu）和素养（Soyoy），简称为“5S”。企业开展以整理、整顿、清扫、清洁和素养为内容的活动，称为“5S”活动。整理就是把要与不要的事、物分开，再将不需要的事、物加以处理，工作的重点在于坚决把现场不需要的东西清理掉。整理的目的是：改善和增加作业面积；现场无杂物，行道通畅，提高工作效率；减少磕碰的机会，保障安全，提高质量；消除管理上的混放、混料等差错事故；有利于减少库存量，节约资金。整顿就是把需要的事、物加以定量、定位。通过前一步整理后，对生产现场需要留下的物品进行科学合理的布置和摆放，以便用最快的速度取得所需之物。整顿活动的要点是：物品摆放要有固定的地点和区域，以便于寻找，消除因混放而造成的差错；物品摆放地点要科学合理。物品摆放目视化，标识要清晰，摆放不同物品的区域采用不同的色彩和标记加以区别。清扫就是把工作场所打扫干净，设备异常时马上修理，使之恢复正常。清扫活动的要点是：自己使用的物品，如设备、工具等，要自己清扫。对设备的清扫，着眼于对设备的维护保养。清扫也是为了改善。当清扫地面发现有飞屑和油水泄漏时，要查明原因，并采取措施加以改进。清洁就是整理、整顿、清扫之后要认真维护，使现场保持完美和最佳状态。清洁，就是对前三项活动的坚持与深入。清洁活动的要点是：车间环境不仅要整齐，而且要做到清洁卫生，提高工人劳动热情；工人不仅要做到仪表、仪容上的清洁，而且要做到精神上的“清洁”，待人要讲礼貌、要尊重别人；要使环境不受污染，进一步消除混浊的空气、粉尘、噪音和污染源。素养即素质，努力提高人员的素质，养成严格遵守规章制度的习惯和作风，这是“5S”活动的核心。推行5S的作用就是要提高企业形象；提高生产效率；提高库存周转率；减少故障，提高质量；加强安全，减少安全隐患；养成节约的习惯，降低生产成本；缩短生产周期，保证交期；改善企业精神面貌，形成良好企业文化。通过规范现场、现物，营造一目了然的工作环境，培养员工良好的工作习惯，其最终目的是提高每位员工的素质。整理的实施要领：自己的工作场所（范围）全面检查，包括看得到和看不到的；制定“要”和“不要”的判别基准；将不要物品清除出工作场所；对需要的物品调查使用频度，决定日常用量及放置位置；制定废弃物处理方法；每日由领导和大家自己检查。整顿的实施要领：前一步骤整理的工作要落实；流程布置，确定放置场所；规定放置方法、明确数量；划线定位；场所、物品标识。整顿的“3要素”：场所、方法、标识。物品的放置场所原则上要100%设定，物品的保管要定点、定容、定量，生产线附近只能放真正需要的物品；放置物品应易取、不超出所规定的范围、在放置方法上多下工夫；在标识方法上，放置场所和物品原则上一对一表示，现物的表示和放置场所的表示，某些表示方法全公司要统一。整顿的“3定”原则：定点（放在哪里合适）、定容（用什么容器、颜色）、定量（规定合适的数量）。清扫的实施要领：建立清扫责任区（室内、外），执行例行扫除，清理脏污，调查污染源，予以杜绝或隔离，把清扫基准作为规范。清洁的实施要领：保持前面3S工作，建立考评方法、奖惩制度，加强执行，主管经常带头巡查，以表重视。素养的实施要领：服装、仪容、识别证标准，共同遵守的有关规则、规定，遵守礼仪守则，训练新进人员强化5S教育、实践，各种精神提升活动（晨会、礼貌活动等）。步骤1：成立推行组织。建议由企业高层领导出任5S活动推行委员会主任职务，以视对此活动之支持，主要包括成立推行委员会或办公室，确定组织职能，委员的主要工作，编组及责任区划分。步骤2：拟定推行方针及目标。推动5S管理时，制定方针是导入的指导原则，要结合企业具体情况，要有号召力。方针一旦制定，要广为宣传。步骤3：拟定工作计划及实施方法。步骤4：教育。每个部门对全员进行教育，说明5S现场管理法的内容及目的、5S现场管理法的实施方法、5S现场管理法的评比方法及新进员工的5S现场管理法训练。步骤5：活动前的宣传造势。5S活动要全员重视、参与才能取得良好的效果。步骤6：实施。主要包括作业准备、“洗澡”运动（全体上下彻底大扫除）、地面划线及物品标识标准、“3定”、“3要素”展开、拍照、“5S日常确认表”的实施与实战。步骤7：检查。包括例行检查、问题点质疑与解答、各种活动及比赛（如征文活动等）。步骤8：评比及奖惩。依5S活动竞赛办法进行评比，公布成绩），实施奖惩。步骤9：总结与修正。各责任部门依缺点项目进行改善，不断提高。在5S活动中，适当地导入QC手法、IE手法是很有必要的，能使5S活动推行得更加顺利、更有成效。步骤10：纳入定期管理活动中。5S是现场管理的基础，是TPM（全员参与的生产性维护）的前提，是TQM（全面品质管理）的第一步，也是ISO9000有效推行的保证。5S现场管理法能够营造一种“人人积极参与，事事遵守标准”的良好氛围。有了这种氛围，推行ISO、TQM及TPM就更容易获得员工的支持和配合，有利于调动员工的积极性，形成强大的推动力。实施ISO、TQM、TPM等活动的效果是隐蔽的、长期性的，一时难以看到显著的效果，而5S活动的效果是立竿见影。如果在推行ISO、TQM、TPM等活动的过程中导入5S，可以通过在短期内获得显著效果来增强企业员工的信心。一般来说，5S水平的高低，代表着管理者对现场管理认识的高低，这又决定了现场管理水平的高低，而现场管理水平的高低，直接制约着ISO、TPM、TQM活动能否顺利、有效地推行。通过5S活动，从现场管理着手改进企业“体质”，则能起到事半功倍的效果。对于那些中小企业来说，一般是重经营而轻管理，在推行5S活动时，决策者不能光追求形式一定要追求效果，按照科学的办法和原则，下定决心稳步的进行，长期坚持下去的话一定会取得很好的效益。

传统零售业经过上百年的发展，随着人类进入21世纪，互联网快速发展，网上购物成为当下购物时尚，并逐步冲击着传统零售企业。网上购物的出现，使人们享受到了足不出户就能购买商品的便利，也为商家带来了新的赢利手段。据有关研究报告显示，2007年中国网购市场规模达514.42亿，较2006年增长74%。其中C2C网上零售市场交易规模达468.01亿元，较2006年增长81.2%。中国C2C网上零售市场经过数年发展，2007年已占网上零售市场91%的市场份额，成为网上零售市场中的最主要组成部分，推动中国网上零售市场的用户使用习惯的形成和网上零售产业环境的逐步完善；C2C网上零售市场发展迅速，其增长主要来源于用户量以及用户平均消费金额的双重快速增长，尤以淘宝网更为明显。网上零售已渐渐显示出它的优势和生命力，但网上零售行业在与传统零售业相比显示其优势的同时，也表现出了它的不足。在商场，顾客是通过看、听、闻、摸等多种感觉来对产品进行判断与选择的。而网络购物只提供了二种可能——看和听。这势必对消费者的刺激大大减弱。对于相当一部分人而言，身临其境的购物是一种社会实践，是一种接触社会的机会，是一种享受。网上购物失去了上街闲逛的乐趣，对那种热烈的现场气氛的感受大大减少，购物过程的乐趣大大折扣。而在我国，上街购物仍然是许多居民一种主要的休闲方式。传统的店面销售所营造出的友好和谐的购物环境，良好的销售人员形象的塑造，对于消费者购买心理产生的影响、刺激作用也因为网络购物的虚拟性而不复存在。因此，人际化沟通与切身感受的缺乏是网上购物的不足之处。在传统的购物过程中，由于人群关系的影响，人们喜欢在服饰、化装等方面展示自我的个性和生活的状况，享受别人的欣赏与羡慕。出入高档商店、在高档的商品柜台前享受售货员细致入微的服务，看着人们羡慕的眼光，都会给人们的心理带来极大的满足感。而在网络购物方式下，这种购物心理上的满足感是无法达到的。虽然从理论上讲任何产品都可以进行网上交易，但在实际的操作过程中，仍有许多产品不适合网络销售，这涉及产品的物理属性与特点。目前在线销售最成熟的实物产品要数计算机硬件、音像制品、家用电器以及书籍销售了。因为这些产品的物理性质决定了方便配送以及在配送过程中不易耗损和破坏。网购作为一种消费行为，毕竟是一件耗时耗费的事，互联网上提供的精彩内容与便捷服务常使得网民的购买注意力下降，网民容易沉溺于网络之中。尽管互联网给人们带来了休闲、轻松的体验，人们仍需要承受一定的精神压力和代价，网民长时间沉溺于网络之中还易患“上网综合症”，严重的还会损害健康，相对于“逛”商场的惬意、休闲，这也是不容小视的。当然，与网上购物蓬勃发展之势相比，这些瑕疵只是发展中的缺憾。艾瑞咨询提供的数据显示，2008～2011年的四年时间里，中国B2C电子商务的市场规模将会以年均75%以上的速度增长，也就是说每隔两年时间，网络购物的市场规模就会扩大两倍以上。上网购物已经从一种时尚行为转变为众多网民的生活习惯，而他们当中相当部分人群正成为中国现在和未来消费市场领域的中坚力量。可以预见，中国网购市场将会有更快速发展。当数年前人们还质疑网上购物的种种局限时，网上购物销售规模却在飞快递增、迅速发展，与中国零售业市场发展相比，大有后来居上的势头。互联网的产生与发展，是信息革命中具有里程碑意义，网络购物是世界也是中国发展的必然趋势，网络购物的迅速发展，在改变着世界，改变着消费者，消费者的购物习惯也在悄然发生转变，面对不可逆转的发展潮流，传统零售业也不甘示弱，纷纷挤上网上购物这列快车成为必然。北京西单友谊集团（爱购网）、王府井百货集团（劲购网）、当代商城等传统零售企业的网上购物商城雨后春笋般开设。相对于年销售额在10亿元的商场，其商品品种相当丰富，可达5万种以上之多，而网购的商品品种却只近万种，而若以销售品种与销售额比例比较，可以想见网上购物的魅力、潜力、生命力之强。据统计，目前在美国开展B2C网络营销的企业中，70%来自于传统零售企业。而据中国连锁业经营协会公布的2004年中国连锁百强企业中，70%的企业建立了网站，通过互联网宣传企业形象、招商引资、提供客户服务，其中有26%的企业开展了不同程度的B2C网络营销，实现网上购物。在中国，数据显示分析，传统零售企业的网上购物商城业务并不像商场那样红火。与国外网上零售迅速发展以及众多传统零售企业涉足网上零售并有可观收益不同，国内的零售网站还在艰难起步，而由传统零售企业建立的零售网站更是生存乏力。北京的零售企业的网购销售情况也大致相似，以某一知名零售企业为例，2007年商场零售总额为13亿，网购销售额3700万，2008年1～9月网购销售已经完成去年全年销售指标，但预计销售份额也不会超过商场零售总额的5%。目前，通过网上交易导致的年销售成本和采购成本降低幅度均在5%以下。一个年销售额12亿元的大型成熟商场，其网上购物销售额还不到商场销售额的5%。调查显示，一般消费者认为，虽然在商场可以放心购物，但是网上购物已经成为80后的生活习惯、时尚，相对于拥堵的道路，生活、学习、工作的压力，他们更喜欢在淘宝、易趣、卓越等电子商城“挑选”、购买商品。传统商业开网店的做法，与当下流行的淘宝、易趣等网络开店有所不同，采用的是线上、线下相结合的方式，被业界称作“鼠标+水泥”；而后者完全依靠网络上的虚拟店铺，没有实体店铺展示。中国互联网协会营销工作委员会认为，“鼠标+水泥”模式既能够发挥传统门店集中展示、集中销售的特点，也能够为习惯网络购物的用户提供便利。传统零售企业开展网上购物商城业务已成为共识和发展趋势。尽管网上零售业具有传统零售业不具备的一些优势，但是由于自身条件的制约，从目前来看不可能取代传统零售业态，网上零售业应该是传统零售业的一种有效的补充形式。随着网上零售环境的逐渐成熟，将会对传统零售业的许多方面造成很大的冲击，传统零售业也要不断调整其经营的范围和方式，积极参与竞争，取长补短，尽快扭转目前传统零售企业开展网上购物的被动局面。传统零售企业的发展，关键在打造企业核心竞争力，同样，传统零售企业网上购物，也要锻造其网上购物商城核心竞争力。企业需要丰富产品的目录、产品介绍，以及其他顾客使用产品的亲身感受，要在网络上营造一种生活和文化氛围，一个精神世界，这样可以帮助顾客找出潜在的心理需求，激发顾客的购买欲望，有了愉快的网上购物经历，顾客会把企业当成身边不可缺少的好朋友，保持对企业的忠诚。不断推出、革新、改良各种网上零售特色服务，包括网页页面、色彩、检索速度、相关联商品检索，利用网页的安排和设计技巧，使顾客很容易的了解产品的信息并产生互动，激发购买欲望。对于一些复杂的产品就可以采用交叉式的促销策略，针对不同的客户群采用不同的服务方式，甚至开发出商品图像与解说伴音，培养浏览商品兴趣，提高网站的顾客忠诚度、美誉度、知名度，其中包括：向顾客推荐商品、提供免费礼品、开设特色商品页面、设置畅销商品排行榜等，以方便消费者对商品的选择、比较、购物。网络营销要追求更广阔的市场空间，甚至把自己定位于有别于传统业务的细分市场。清晰的市场定位、明确的细分市场，网络营销需要结合自身的特点，占领更多的市场，甚至面对有别于传统门店的客户群，吸引更广大的线上、线下消费人群。通过网络营销来弥补门店数量上的不足、降低经营成本、增强企业的赢利能力，提高自身与国外零售巨头对垒的实力。但是，在可以预见的未来，具有强大竞争力和经营活力的大型零售企业一定是传统业务与电子商务紧密结合、线下与线上资源优势互补的业态形式。网络营销部门在零售企业中应当作为一个部门存在，或者是其全资控股企业，纳入零售企业的总体组织架构之中，由高层管理人员直接负责。这样网上网下拥有共同的战略目标，实现统一管理，也有助于解决网上零售所涉及的安全、诚信诸问题。统一的管理团队可以更好地协调网上网下部门的市场推广策略，共同扩大市场份额。而品牌、业务的结合更需要紧密地协调一致，管理团队的相对独立可以有效地提高效率，降低成本，共享知识和信息。在保持相对独立性方面，西单电子商务网站（Igo5.com）可以借鉴，在品牌上突出西单商场的同时也注意突出Igo5的形象。他们把家用通信产品、摄影器材、小家电、化妆品作为主要经营品种，这与西单商场以服装、百货为主的经营方向有很大不同。西单电子商务网站建立了独立的价格、采购、物流仓储和客服体系。相对独立性让西单电子商务网站拥有了更灵活的业务和更多的网民消费群体。零售业的电子商务并不仅仅只是局限于在网上开展销售业务，更主要的是应用信息网络技术，对企业的业务活动进行管理。传统零售、零售业电子商务与网络营销的整合，即在实体商店的基础上开展网络营销，这样既可以适应消费者的购物习惯，充分利用企业原有的资源，同时又能发挥计算机信息网络的技术优势，提高企业营销活动的效率和市场竞争力。电子商务的发展促使企业充分意识到：要增强企业竞争力，就要充分利用信息技术，提高经营管理水平。比如采用电子商务方式进行集中的采购管理，这样必然会提高采购环节的透明度，降低采购成本；利用统一的财务管理软件，直接控制收入和费用支出，这必然会降低企业的经营分险，提高经济效益。信息技术在企业经营管理活动中的应用水平，很大程度上反映了这个企业的市场适应能力和竞争能力。客户关系管理的目的是通过网络和计算机的应用使客户关系回报最大化，使企业和客户共同得益。客户关系管理在零售业的全面应用，将会对零售企业的决策支持和智能分析提供重要的依据，可以有效分析企业市场活动的回报，挖掘企业产品的市场卖点，确定企业的主打产品，进一步明确客户需求，并为他们提供更多更好的个性化服务，最大限度地提高他们对企业的忠诚度。电子商务对中国零售企业来说既紧迫又艰难，但是市场竞争、市场潮流不可阻挡，中国零售企业只能通过应用新的信息技术来快速提升自己的市场竞争力，从而推动新的商业模式在中国的快速形成。目前，在遭受金融危机的重创之后，传统的零售商为了增强竞争力，吸引更多的顾客，提高销售额的需要，正不断加强网上销售业务。这也是零售业在面对世界经济发展进程中的机遇与挑战。

当今，物流业促进了经济的发展，同时也会给城市环境带来负面的影响，如运输工具的噪声、污染气体排放、交通阻塞，以及生产和生活中废弃物的不当处理所造成的对环境的影响。为此，21世纪对物流提出了新的要求——绿色物流。据世界经济合作与发展组织统计，目前世界绿色消费总量已达到3000亿美元，以后还会大幅度增长。绿色物流（Environmental logistics）是指在物流过程中抑制物流对环境造成危害的同时，实现对物流环境的净化，使物流资源得到最充分利用。它是建立在现代物流进一步发展的基础上，是物流操作和管理全程的绿色化。其目标是将环境管理导入物流业的各个系统，加强物流业中保管、运输、包装、装卸搬运、流通加工等各个作业环节环境管理的监督，有效遏止物流业发展造成的污染和能源浪费。绿色物流是一个多层次的概念，它既包括企业的绿色物流活动，又包括社会对绿色物流活动的管理、规范和控制。从环保物流活动的范围来看，它既包括各个单项的绿色物流作业（如绿色运输、绿色包装、绿色流通加工等），还包括为实现资源再利用而进行的废弃物循环物流，是物流操作和管理全程的绿色化。绿色物流最本质的内容是集约资源，它也是发展物流的主要指导思想之一。通过整合现有资源，优化资源配置，提高资源利用率，减少资源消耗和浪费。它强调了全局和长远的利益，强调了全方位对环境的关注，体现了企业绿色形象，是一种全新的物流形态。它的目标不仅仅是为了实现经济主体的盈利、满足顾客需求、扩大市场占有率等经济利益，它还追求节约资源、保护环境的目标。我国自1979年引入物流概念以来，物流行业已经得到了很大的发展，但是物流活动也对环境造成了极大的负面影响。目前，我国绿色物流的发展主要存在的问题是：目前我国物流行业还是一个比较稚嫩的行业，物流基础设施的配套性、兼容性还比较差，物流技术装备水平低，主要表现在：运输方式之间、不同地区运输系统之间相互衔接的枢纽设施方面缺乏投入。水运、民航运输的潜在优势没有充分发挥，运输系统缺乏周密科学的设计，对环境的重要影响因子（如引起地球变暖的二氧化碳，严重污染环境和危害人体健康的含氮氧化物等）没有引起足够的重视。仓储设施落后，库容体积小而分散，各种综合性货运枢纽、物流基地、物流中心的建设发展缓慢。物流中心的经济效益不高，存在着严重的资源和人力的浪费，违背了绿色物流节约资源的原则。机械化、自动化水平不高，严重影响物流效率。技术水平和信息化水平不高。绿色物流是循环型物流，要使物流材料得到再降解利用和重复利用，必须有先进的技术，可是目前我国物流材料的再降解利用和重复利用技术都不过硬。高水平的信息化水平是绿色物流发展的必备条件，我国一些物流企业开发的软件，性能比较低，即使有些软件比较适用，但有时又与客户系统不相容。另外，许多新兴的信息技术没有得到很好的利用。管理体制上存在着巨大的障碍，政府的引导作用不是很强。物流的运作跨越不同的行业和地区，管理上又属于不同的政府职能部门，各职能部门对现代物流缺乏统一协调的战略思想，目前还没有形成专门的物流部门来规划物流的发展，造成物流资源的分散和浪费。政府对物流的发展前景没有前瞻性的思考，在一定程度上还存在着放任自流的现象。环境教育的力度不强，消费者对绿色物流没有深刻的了解。消费者追求的是绿色消费、绿色享用和绿色保障，而对其中的绿色通道——物流环节不够关心。企业缺乏复合型人才。由于我国绿色物流的理念形成不久，许多物流企业还没有完全建立发展绿色物流的意识，没有真正具有超前意识去承担社会责任，只是象征性地适应时代环境的需要，这在一定程度上是由于物流企业管理人员和业务人员的综合素质不高所致。目前许多企业还没有既具有环境知识又具有物流知识的复合型人才。绿色物流的研究理论与应用实践脱节。由于我国提出绿色物流的概念没有几年，对它的研究也是刚刚起步，研究的内容对现实的指导意义不是很强，存在理论与应用实践的脱节。随着经济的全球化，我国企业的物流绿色化将成为参与全球竞争的重要基础。因此，建立和完善我国物流绿色化的政策和理论体系，对物流系统目标、物流设施设备和物流活动组织等进行改进与调整，大力发展绿色物流技术，实现物流系统经济效益和生态效益的整体最优化，将有利于我国物流管理水平的提高，对于循环经济发展具有重大意义。我国绿色物流的发展任重而道远，绿色物流作为一种良好的环保理念，要得到社会的认可与支持，必须从发展其“硬件”和“软件”两方面着手。要发展绿色物流，首先应树立绿色物流的观念。环境保护是人类社会经济可持续发展规律的客观要求，绿色物流是当今经济可持续发展的一个重要组成部分。政府管理者和企业管理者加强对环境保护工作的重视，是成功实施绿色物流的关键。当前，世界各国都在尽力把绿色物流的推广作为物流业发展的重点，积极开展绿色环保物流的专项技术研究，并积极出台相应的绿色物流政策和法规，努力为物流的绿色化和可持续发展奠定基础。可以看到我国为推进绿色物流也做出了很大的努力。政府应从建设资源节约型、环境友好型社会的理念出发，严格实施《环境保护法》、《固体废物污染环境防治法》，以及噪声污染防治条例等现有法律法规，并加强绿色物流相关法规的制定，如通过立法控制物流污染发生源、限制交通量、控制交通流。企业绿色物流流程再造包括运输装卸方面的及时安全性、保管加工方面的保质保鲜性、包装信息处理方面的健康环保性以及以上任何一环的无损毁。一是开展共同配送，就是以城市一定区域内的配送需求为对象，人为地进行有目的、集约化的配送。共同配送由于实行统一集货、统一送货，所以有利于提高配送服务水平，降低企业库存，甚至实现“零”库存，大大降低物流成本，可以最大限度地提高人员、物资、资金、时间等资源的利用效率，取得最大化的经济效益。二是采取一贯制运输策略。一贯制运输是指以单元装载系统为媒介，巧妙地组合各种运输工具，从发货方到收货方始终保持单元货物状态而进行的系统化运输方式。这种运输方式解决了传统运输方式的废气排放、噪音污染和交通阻塞等问题，通过运输方式的转换，可消减汽车总行车量；通过有效利用车辆，可以降低车辆运行量、提高配送效率。三是提倡绿色经营策略。物流企业应积极加强企业各个环节的绿色化建设，使用绿色包装，开展绿色流通加工，全面开展物流企业的科学技术改造，通过第三方物流的建立和对物流流程、环节以及各设施器械的技术创新、技术引进和技术改造，提高企业的营运能力和技术水平，最大限度地降低物流的能耗和货损，增强环保能力防止二次污染。四是大力发展第三方物流。发展第三方物流，由这些专门从事物流业务的企业为供方或需方提供物流服务，可以从更高的角度、更广泛地考虑物流合理化问题，简化配送环节，进行合理运输，有利于在更广泛的范围内对物流资源进行合理利用和配置，可以避免自有物流带来的资金占用、运输效率低、配送环节繁琐、企业负担加重、城市污染加剧等问题。当一些大城市的车辆配送大为饱和时，专业物流企业的出现使得在大城市的运输车量减少，从而缓解了物流对城市环境污染的压力。绿色包装是指采用节约资源、保护环境的包装。绿色包装的途径主要有：促进生产部门采用尽量简化的、以及由可降解材料制成的包装；在流通过程中，应采取措施实现包装的合理化与现代化。绿色流通加工主要包括两个方面措施：一是变消费者加工为专业集中加工，以规模作业方式提高资源利用效率，减少环境污染；二是集中处理消费品加工中产生的边角废料，以减少消费者分散加工所造成废弃物的污染。废弃物物流指将经济活动中失去原有使用价值的物品，根据实际需要进行收集、分类、加工、包装、搬运、储存，并分送到专门处理场所时形成的物品实体流动。废弃物物流的作用是，无视对象物的价值或对象物没有再利用价值，仅从环境保护出发，将其焚化化学处理或运到特定地点堆放、掩埋。降低废弃物物流，需要实现资源的再使用（回收处理后再使用）、再利用（处理后转化为新的原材料使用），为此应建立一个包括生产、流通、消费的废弃物回收利用系统。要达到上述目标，企业就不能只考虑自身的物流效率化，而是需要从整个产供销供应链的视野来组织物流，而且随着这种供应链管理的进一步发展还必须考虑废弃物的循环物流。即管理型物流追求与交易对手共同实现效益化；供应链型物流追求从生产到消费流通全体的效益化；循环型物流应追求从生产到废弃物全过程效率化，这是21世纪绿色物流管理亟待解决的重大课题。绿色物流的关键所在，不仅依赖绿色物流观念的树立、绿色物流经营的推行，更离不开绿色物流技术的开发和应用。没有先进绿色物流技术的发展，就没有绿色物流的立身之地。而我们的物流技术与绿色要求有较大的差距，要提高自主创新能力，大力开发新型能源、新型材料、新型物流信息技术等绿色物流技术，加快物流技术创新。绿色物流作为新生事物，对营运筹划人员和各专业人员的素质要求较高，因此，要实现绿色物流的目标，培养和造就一批熟悉绿色理论和实务的物流人才是当务之急。各相关大专院校和科研机构应有针对性地开展绿色物流人才的培养和训练计划，努力为绿色物流业输送更多合格人才；还可以通过调动企业、大学以及科研机构相互合作的积极性，促进产学研的结合，使大学与科研机构的研究成果能转化为指导实践的基础，提升企业物流从业人员的理论业务水平。在我国，绿色物流的研究还处在起步阶段，与发达国家在绿色物流的理念、政策以及技术上均存在较大的差距。随着经济全球化的发展，一些传统的关税和非关税壁垒逐步淡化，绿色壁垒正逐步兴起，尤其是WTO五年保护期后，国外物流企业将大批进入我国市场，势必给国内物流企业带来巨大冲击。因此，我国企业必须重新审视绿色物流的价值，它不但可压缩物流成本，还可带来新的商机，将成为新的经济增长点。绿色物流研究具有很强的实践性，研究的最终目的在于引导和促进企业顺应经济可持续发展和物流发展的要求，实施环境友好的绿色物流战略，企业实施绿色物流战略，既有明显的社会价值，又具有巨大的经济价值。

杨树是杨柳科（Salicaceae）杨属（Populus L.）植物的统称。为落叶乔木，是世界上分布最广、适应性最强的树种之一，分布于北温带。近年随着我国农业产业结构调整，杨树已成为平原重要的经济林木，优良的用材和绿化树种，但同时也造成了其病虫害的严重流行与发生，其中杨树溃疡病已成为为害其生长的重要病害之一。杨树溃疡病又称水疱型溃疡病，是为害杨树枝干的一种常见病害，通常以水渍状病斑为主，圆形或椭圆形，手压病斑有褐色水流出。初为圆形，极小，后水疱变大，直径0.5～2.0cm，疱内充满淡褐色液体，随后水疱破裂，流出淡褐色液体，遇空气变成黑褐色，同时把病斑周围染成黑褐色，最后病斑干缩下陷，中央有一纵裂小缝。该病几乎遍及我国各杨树种植区，其中以华北、西北和东北地区最为普遍、严重，近年来随着全国范围内“杨树热”的不断升温，各类品种层出不穷及种植面积的急剧膨胀，同时由于受经济利益的驱使，试验较少或不加试验，便盲目引进一些抗病性较差或不抗病的品种，加之气候异常，致使该病暴发流行，严重制约了杨树产业的发展。为了有效地防治杨树溃疡病，一方面可以筛选抗病的杨树品种；另一方面可一改善防治方法，加强防治力度。传统的杨树溃疡病防治方法多采用化学药剂（如福美胂、多菌灵）防治，但随着一些高毒药剂（如福美胂）的禁用，以及病原菌产生抗药性，需要不断研发高效、低毒、环境相容型的农药新品种。本文对河北省景县农林复合系统中的杨树溃疡病病原进行了分离和鉴定，同时采用植物提取物对杨树溃疡病菌进行室内活性筛选和室外病害防治的试验，研究结果如下。杨树溃疡病病原为真菌，菌丝在PDA培养基上生长较好，初期菌落白色，有发达的气生菌丝，呈绒毛状至棉絮状。3天后菌落逐渐变为灰白色，最后为黑色，菌落初期有明显的灰黑色轮纹。分生孢子器暗色、球形，生于寄主表皮下，后外露，单生或集生，分生孢子梗短，不分支；分生孢子卵形、纺锤状或梭形，单孢，无色，有隔或无隔，具云纹。通过真菌的ITS序列与GenBank中其他真菌种类的ITS序列进行比对，综合形态和分子检测结果，病原鉴定为茶麃子葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea），属于子囊菌亚门的真菌。分别制备杨树（Populus×euramericana）叶提取物、皂荚（Gleditsia sinensis）刺提取物、黄芩（Scutellaria baicalensis）根状茎提取物、博落回（Macleaya cordata）果实提取物、虎杖（Polygonum cuspidatum）根提取物，采用带毒平板—菌丝生长抑制法，测定了上述5种植物提取物的抗菌活性，其中，黄芩、博落回和虎杖提取物对杨树溃疡病菌均具有很好的抑制活性。当培养基中提取物浓度为2mg/ml时，黄芩、博落回和虎杖提取物对杨树溃疡病菌菌丝生长的抑制率分别为52.94%、78.10%和57.19%。皂荚（刺）提取物和杨树（叶）提取物在浓度为2mg/ml时对杨树溃疡病菌菌丝生长的抑制率分别为37.91%和35.13%。进一步测定了黄芩、博落回和虎杖提取物对杨树溃疡病菌菌丝生长的半抑制浓度（IC50）分别为0.9675mg/ml、0.3125mg/ml和1.0219mg/ml。在5种植物提取物对杨树溃疡病的防治试验中，经两次（前后相隔15天）喷药后，博落回提取物的防治效果最好，浓度为0.40%时的防效为85.92%。虎杖提取物、黄芩提取物和皂荚提取物在浓度为0.40%时，防效分别为84.52%、74.18%和71.74%。杨树提取物在浓度为0.40%时，反而能促进杨树溃疡病病情的发展。以上研究结果将有利于杨树溃疡病的防治，促进杨树产业的快速发展，同时也为用于杨树溃疡病防治的新型杀菌剂研制提供了依据，为植物源农药资源的开发与利用提供线索。

番茄早疫病菌（Alternaria solani）是保护地和露地番茄生产的重要病害之一，为真菌性病害，为害植株后出现慢性枯萎，植株矮小，果实膨大等，可大幅度降低番茄的产量和品质。我国自20世纪80年代开始发生以来，已经成为番茄设施栽培的限制性障碍[1]。在防治上由于长期大量的化学农药使用，使病菌产生了抗药性，防效逐年降低，同时造成了一定的农药污染[2]。随着环境保护呼声的日益高涨，高毒农药的负面影响已引起世界范围的广泛关注，以高效，低毒农药逐步替代传统的高毒农药是农药发展的必然趋势。植物源农药可在环境中迅速分解，对环境无任何影响，是符合环境保护，农业持续发展方向的[3]。细辛（Asarum siebotdii）是多年生草本植物，据中华临床中药学（上卷）记载，根能入药，具有祛风，散寒，风湿弊痛，抗炎等功效，在中药学上有广泛的用途[4]。本实验用中药细辛的根提取物对番茄早疫病菌的菌丝生长及分生孢子萌发的抑制作用进行了室内活性测定，旨在为开发出一种经济、安全、有效的新型杀菌剂提供理论依据。1.1.1 供试样品 试验所用细辛采自山西省历山自然保护区，将采集的植物材料洗净后在室内阴干（约25℃），放入恒温箱内（40～45℃）烘干，磨碎，过60目筛，备用。1.1.2 供试菌种 番茄早疫菌（Alternaria solani），由山西农业大学农学院植物病理实验室提供。1.2.1 细辛提取物的制备 准确取3份细辛根粉50g，分别装入500ml小烧杯内，加入干粉5倍量的有机溶剂甲醇、氯仿、石油醚。室温下（30±2）℃浸泡3～5天后，过滤并浓缩至稠膏状，称取一定量的提取物，加2～3滴吐温80做乳化剂，并依次配成实验所需的浓度，4℃下保存。1.2.2 细辛提取物对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用 采用生长速率法[5]，用打孔器取6mm菌落边缘生长旺盛的菌种，放在加药的PDA平板上培养，以培养基内加等量无菌水作对照，每次重复3次，置25℃下培养。用十字交叉法测每个菌落的直径，以其平均值代表菌落的直径，以下式求出抑制菌丝生长率：抑制菌丝生长率%=（对照菌落直径-处理菌落直径）/（对照菌落直径-0.6）×100%1.2.3 细辛提取物对孢子萌发的抑制作用 分别将3种有机溶剂的细辛提取物制成最终浓度为1mg/ml的细辛提取液的PDA培养基。待培养基冷却后，取预先配置好的孢子悬浮液10μl，接种到直径为9cm的培养皿中央，用涂布器涂抹均匀，在25℃培养箱中培养48h，观查记录孢子萌发数量。每处理设5个重复，取平均值。计算孢子萌发率和抑制率。孢子萌发率（%）=已萌发孢子数/镜检孢子总数×100%抑制率（%）=（对照萌发率-处理萌发率）/对照萌发率×100%1.2.4 细辛氯仿提取物对番茄早疫病菌菌丝抑制中浓度（MIC）的测试 将细辛氯仿提取物稀释成5个浓度（4mg/ml，2mg/ml，1mg/ml，0.5mg/ml，0.25mg/ml），测试不同浓度的提取物对番茄早疫病的病原菌菌丝生长的抑制作用，计算毒力回归方程及抑制中浓度（MIC）。细辛提取物对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用实验结果如表1。在48h时，石油醚提取物的抑菌率为28%，氯仿提取物的抑菌率为66.67%，而甲醇提取物的抑菌率达到了50%。并且随着时间的推移，3种溶剂提取物的抑菌率都有所下降。同时与对照相比，处理的菌丝在培养皿中出现气生菌丝减少，变粗，向上生长现象。这一结果说明，3种不同溶剂的细辛提取物在浓度为2mg/ml时对番茄早疫病的病原菌均有不同程度的抑制作用。溶剂menstruum菌落直径（mm）与抑制率（%）ColonyRadiusandInhabitingrate48h抑制率Inhabitingrate96h抑制率Inhabitingrate144h抑制率Inhabitingrate甲醇methanol1.8550.002.9051.584.5748.82氯仿chloroform1.4366.672.5060.002.7359.57石油醚Petroleumether2.428.004.2024.216.918.71CK3.10—5.35—8.35—表1 细辛提取物对番茄早疫病菌丝生长的抑制作用Table 1 Inhibitory effect of Asarum siebotdii extract against mycelia Growth of Alternaria solani细辛提取物对番茄早疫病菌孢子萌发的影响见表2。48h后，石油醚和氯仿提取物表现出了显著的抑制率，对分生孢子萌发抑制率分别为91.48%和88.79%，甲醇提取物表现出了较强的抑菌率，达到53.81%。实验过程中发现，对照皿在接种后32～48h即开始陆续萌发，而提取物各处理均不同程度地表现出萌发推迟的现象。溶剂menstruum孢子萌发率（%）Rateofgerminationofconidia萌发抑制率（%）Percentageofinhibition甲醇methanol42.8253.81氯仿chloroform10.4288.79石油醚Petroleumether7.9291.48CK92.92—表2 细辛提取物对番茄早疫病菌孢子萌发的抑制作用Table 2 Inhabiting effect of the different menstruum of Asarum siebotdii extract against conidiao production of Alternaria solani由表1可见，3种不同溶剂的提取物中氯仿提取物的抑菌效果最好，为了进一步确定其生物活性，求出MIC，将细辛氯仿提取物稀释成5个不同浓度，对病原菌进行测定。结果见表3、表4，6天后，浓度在4mg/ml时，氯仿提取物表现出了显著的抑菌率，达到77.14%，而浓度为0.25mg/ml时，抑菌率显著下降，只有9.5%。这一结果说明，细辛氯仿提取物对番茄早疫病菌菌丝的抑制作用与浓度成正相关，随着浓度的下降，抑菌效果也随之下降。同时在96h时求得毒力方程和氯仿提取物的抑制中浓度（MIC）为1.57mg/ml。病原菌Pathogen浓度（mg/ml）concentration菌落直径（mm）与抑制率（%）ColonyRadiusandInhabitingrate48h抑制率Inhabitingrate96h抑制率Inhabitingrate144h抑制率Inhabitingrate番茄早疫病菌Botrytiscinerea4.00001001.9573.622.2577.142.0001.2364.682.9354.404.1251.271.0001.6243.303.4344.634.7342.730.5001.8530.304.2329.045.7229.130.2502.0419.505.307.507.139.50CK2.39—5.72—7.82—表3 不同浓度的细辛提取物对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用Table 3 Inhibitory effect of the different concentration of Asarum siebotdii extract against mycelia Growth of Alternaria solani处理Treatment毒力方程?RegressiveequationMIC??相关系数r番茄早疫病菌AlternariasolaniY=2.0910+1.6950x1.570.9707表4 细辛提取物对番茄早疫病的毒力Table 4 Virulence of the extracts of Asarum siebotdii seeds against Alternaria solani植物源农药活性物质主要来源于植物体内产生的次生代谢产物，据Swain于1977年报道，次生代谢产物已超过400000种，如有机酸、萜烯类、生物碱、类黄酮、甾体、酚类、蛋白质、单宁和多糖等[6]。据文献报道，苦参中含有苦参碱（Matrine）和氧化苦参碱（Oxymat-rine）等17种化学结构相似生物碱，其中以苦参碱为其最主要的活性成分，对病原菌有较强抑制作用[7]。另外，毛蒿植物中的毛蒿素，南欧丹参中的硬尾醇，苜蓿根部的苜蓿酸以及海红豆中的紫檀素，黄连体内的小孽碱等均具有很强的抗真菌作用[8]。本实验研究表明，3种溶剂的细辛提取物对番茄早疫病菌菌丝和分生孢子萌发都有不同程度的抑制作用，但它们之间的抑制作用存在差异，在抑制菌丝生长方面，氯仿提取物效果最好，甲醇提取物次之，石油醚提取物效果最差。在抑制分生孢子萌发方面，石油醚提取物效果最好，氯仿提取物次之，甲醇提取物效果较差。由于3种溶剂的极性不同，从以上实验结果初步推断细辛体内抑制番茄早疫病菌的活性物质不止一种，而且极性大小在石油醚和氯仿之间。今后的研究方向是探索分离细辛提取物中的活性成分，为进一步产品开发奠定基础。至于细辛提取物是否对其他病菌有抑制作用，有待在以后的实验中证明。

Plant and fungal cells are surrounded by a cell wall rich in diverse polysaccharides and proteins.It has become apparent in recent years that the carbohydrates in the cell wall function not only to maintain cell shape and integrity,but also may serve as signals in plants(Mohnen et al.,1993).Oligogalacturonic acid(OGA),a well studied elicitor,is derived from plant cell walls(Nothnagel et al.,1983).When added to cultured plant cells,it induces an oxidative burst within minutes,releasing ROS via a pathway that involves receptor binding,activation of a G-protein,influx of Ca2+,stimulation of phospholipase C,and induction of a number of kinases(Apostol et al.,1989;Horn et al.,1989;Legendre et al.,1992;Chandra et al.,1995;Legendre et al.,1993).Purified OGAs 13 to at least 26 residues long stimulate pp34 thiophosphorylation in vitro(Philippe et al.,1995).OGAs are also involved in the induction of the jasmonate pathway during plant defense response to E.carotovora subsp.Carotovora attack(Cecilia et al.,1999).The first response observed after the addition of OGAs that is clearly involved in plant defense is the production of active oxygen species,including H2O2,and O2-.This response,termed the oxidative burst,occurs within a few minutes after the addition of OGAs to suspension-cultured soybean,tobacco,and tomato cells.Reactive oxygen species are thought to have direct(through cytotoxicity)and indirect(through signaling)roles in the plant cell death required for the HR.Reactive oxygen species induce the expression of defense related genes,and are implicated as second messengers that elicit other defense responses,including systemic acquired resistance(SAR)and the HR(Brent etal.,2001).Different elicitors are thought to activate different sets of second messengers.The two signaling events that appear to participate in the OGAs inducing plant defense include the oxidative burst and NO accumulation.Inhibitors of mammalian nitric oxide synthase reduced both OGA-induced NO ac-cumulation and NOS activity,suggesting that OGA-induced NO production occurs via a NOS-like enzyme(Hu et al.,2003). Nitric oxide(NO)is a highly reactive molecule that rapidly diffuses and permeates cell membranes.During the last few years NO has a significant role in plant resist-ance to pathogens by triggering resistance-associated cell death and by contributing to the local and systemic induction of defense genes.NO stimulates signal transduction pathways through protein ki-nases,cytosolic Ca2+mobilization and protein modification(María et al.,2004). Most of the ex-perimental data available on NO detection during plant-pathogen interactions come from studies of infections by biotrophic pathogens(María et al.,2004). Additionally,an increase in NOS activity correlated with the pathogen resistance response has been observed in resistant tobacco during TMV infection( Durner et al.,1998;Chandok et al.,2003).Here we report that OGAs induced a range of defense responses in tobacco,including oxidative burst,NO accumulation and stimulation of superoxide dismutase(SOD)activity and catalase(CAT)activity.Furthermore,we show that tobacco plant sprayed with OGAs developed a resistance against infection by tobacco mosaic virus.We also provide evidence that the defense response induced by OGAs was connected with H2O2 and NO pathway.Plants of tobacco(Nicotiana tabacum var.sam sun NN)were grown from seeds in a greenhouse and were used at the 4~6-leaf stage after 2 months in culture.The plants were kept in a growth chamber at(23±1)℃ with a photoperiod of 16 h and 70%~80%relative humidity for several days before treatments.Diphenylene iodonium(DPI),2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid(MES),Sodium nitroprusside(SNP),catalase(CAT,from bovine liver),NG-nitro-L-arginine-methyl eater(L-NAME)and 4,5-diaminofluorescein diacetate(DAF-2 DA)were obtained from Sigma.2′,7′-dichlorofluorescin diacetate(H2DCF-DA)from Biotium.All other reagents were from Shanghai Chemical Reagent CO.,LTD,Tianjin Kermel Chemical Development Centre,or Beijing Chemical Plant.OGAs was prepared from enzymatic hydrolysis of pectin and separated with membrane according to the report(H Zhang et al.,1999).An aliquot of OGAs was dissolved in water and analyzed with a matrix-assisted laser desorption-ionization time-of-flight mass spectrometer(MALID-TOF-MS,Bruker,Germany).Tobacco mosaic virus(TMV)that came from our collection was multiplied in N.tabacum.TMV was extracted from systemic infected plants by homogenization of infected leaves in 0.05mol/LH3PO4 buffer(0.05mol/L KH2PO4,0.05 M Na2HPO4 pH 6.8)with subsequent clarification of the extract by centrifugation at 2000g for 6 min.The supernatant extract was used for mechanical inoculation.All leaves of plant were sprayed with 50μg/ml of OGAs,the control plants were sprayed with water.24h~25d after OGAs application,plants were inoculated mechanically with TMV.The lesion caused by TMV was investigated at 7d after inoculation.Results were analyzed using Duncan's multiple range test at P= 0.05.For measurements of SOD and CAT activities,tobacco leaves treated with OGAs were kept in liquid nitrogen.The enzymes in the frozen powders were extracted by adding 0.05g polyvinylpyrrolidone and 5ml 0.05mol/L sodium borate buffer at pH 8.8 and homogenized at 4℃.SOD activities were measured as described by Zhu Guanglian(Zhu Guanglian et al.,1990).CAT activity was determined using the method of Beers&Sizers(Beer et al.,1952).NO and H2O2 measurement was performed using their fluorescent indicator dye DAF-2 DA and H2DCF-DA as described previously by H.Kojima(H.Kojima et al.,1998)with slight modifications.The epidermis was peeled carefully from abaxial surface of the leaves and cut into 5-mm length.Epidermal strips were placed into Tris/KCl buffer(Tris 10 mmol/L and KCl 50mmol/L,pH 7.2)containing DAF-2 DA at a final concentration of 10μmol/L for 30min,or H2DCF-DA at 50μmol/L for 10min,at 26℃ in the dark.The epidermal sections were removed and transferred to a dish of fresh Tris/KCl buffer(without probe)to wash off excess fluorophore apart from light.Then the epidermal strips were placed in Tris/KCl buffer containing OGAs and inhibitors.Examination of peels was performed using laser scanning confocal microscopy(Leica,TCS SP2)with exciting wavelength 488 nm,emitting wavelength 505~530nm.Plants were sprayed with 0.01 and 0.1 mmol/L of sodium nitroprusside(SNP),50μg/ml of OGAs,1 mmol/L,10mmol/L and 100 mmol/L H2O2,H2O2 scavenger catalase(CAT,100unit/ml)and OGAs cotreatment,H2O2 scavenger ascorbic acid(0.1mmol/L)and OGAs cotreatment and NOS inhibitor L-NAME(1mmol/L)for 30min before OGAs respectively.The control plants were sprayed with water.In all cases,24h after OGAs and other materials applications,plants were inoculated with TMV.The lesion caused by TMV was investigated at 7d after inoculation.The effect of OGAs,SNP and H2O2 on local infection was calculated from the ratio of the number of local lesion produced on the treated leaves to that on the control leaves treated with water.The TOF-MS profiles of OGAs sample were showed in Figure 1.The mass spectrum indicated that peaks corresponding to the mass numbers of( M+ Na)+of trimer to enneamer were detected.So the sample was composed mainly of OGAs having degree of polymerization( DP)2-8.Figure 1 TOF-MS of oligochitosan sampleThe results of control effects on TMV with OGAs at different concentration(50～100μg/ml)showed that the best concentration was 50 μg/ml(data not shown).The effects of application of OGAs at different time were summarized in Table 1.It was found that tobacco leaves treated with OGAs were protected against TMV infection.When the inoculation occurred at 19d after spraying 50μg/ml OGAs on tobacco plants,the relative control effect was 53.42%.We concluded that the resistance induced by OGAs became better with the inducing time until 19d.The resistance was reduced after 19d.Dayof50μg/mlgalacturonideappliedNumberoflesioncausedbyTMVRelativecontroleffect(%)vcdsaw1d125±5814.40a?4d116±3920.55a?7d120±4217.81a10d84±3742.47ab13d97±4433.56ab16d90±3238.36ab19d68±3453.42b22d71±3451.37b25d89±3739.04bck146±51—Table 1We examined the effects of OGAs on the activity of plant resistance correlated enzymes.The results(Figure 2 and Figure 3.)indicated that OGAs increased activity of SOD and CAT compared with the H2O-treated ones.There are no distinct differences on the activity of POD and PPO of tobacco leaves treated with OGAs or water(data not shown).SOD and CAT are concerned with eliminating oxygen free radical.Within one hour,activities of CAT and SOD were induced to maximum.Figure 2 Time course of SOD activity in tobacco leaves treated by 50μg/ml OGAs or H2O as CKFigure 3 Time course of CAT activity in tobacco leaves treated by 50μg/ml OGAs or H2O as CKBecause of activity of SOD and CAT induced by OGAs and the two enzymes correlative with oxygen free radical,we examined the production of H2O2 induced by OGAs.To study the effects of OGAs on the production of H2O2 in tobacco cells,the H2O2-sensitive fluorophore H2DCF-DA were used.The results of production of H2O2 in epidermal cells of tobacco leaves induced by OGAs were shown in Figure 4.It was found that OGAs caused an increase of intracellular H2DCF-DA fluorescence in epidermal cells and guard cells of tobacco leaves,indicating the production of H2O2.Fluorescence became visible along the plasma membrane and in organelles in the epidermal cells of tobacco leaves treated with OGAs(Figure 4C),but the fluorescence was very faint in the epidermal cells only loaded with H2DCF-DA(Figure 4A).The Figure 4E and G showed that CAT and DPI could inhibit the level of H2DCF-DA fluorescence in the cells of tobacco leaves treated with OGAs.The results revealed that CAT and DPI could suppress the production of H2O2.Figure 4 Laser scanning confocal microscopy of OGA-induced production of H2O2 in epidermal cells of tobacco leaves. (A) The cells loaded with H2DCF-DA. (B) Bright field image of the cells loaded with H2DCF-DA. (C) The cells loaded with H2DCF-DA before treatment with OGA. (D)Bright field image of the cells loaded with H2DCF-DA before treatment with OGA. (E) The cells loaded with H2DCF-DA and elicited by OGA in the presence of the CAT. (F) Bright field image of the cells loaded with H2DCF-DA and elicited by OGA in the presence of the CAT. (G) The cells loaded with H2DCF-DA and elicited by OGA in the presence of the DPI. (H) Bright field image of the cells loaded with H2DCF-DA and elicited by OGA in the presence of the DPI.The NO-sensitive fluorophore DAF-2DA was used to observe NO accumulation.The observed LSCM results of OGAs-induced production of NO in epidermal cells of tobacco leaves were shown in Figure 5.It was found that OGAs could enhance the level of intracellular DAF-2DA fluorescence in epidermal cells of tobacco leaves,indicating massive production of NO.Production of NO and/or accumulation was observed in organelles and along the plasma membrane in the epidermal cells of tobacco leaves treated with OGAs(Figure 5C).However,the DAF-2DA fluorescence indicating production of NO was not observed in the epidermal cells only loaded with DAF-2DA(Figure 5A).The results also indicated that CPTIO and L-NAME could inhibit the level of H2DCF-DA fluorescence in the cells of tobacco leaves treated with OGAs(Figure 5E and G).The results representedthat CPTIO and L-NAME could suppress the production of NO.Figure 5 Laser scanning confocal microscopy of OGA-induced production of NO in epidermal cells of tobacco leaves. (A) The cells loaded with DAF-2 DA. (B) Bright field image of the cells loaded with DAF-2 DA. (C) The cells loaded with DAF-2 DA before treatment with OGA. (D) Bright field image of the cells loaded with DAF-2 DA before treatment with OGA. (E) The cells loaded with DAF-2DA and elicited by OGA in the presence of the CPTIO. (F) Bright field image of the cells loaded with DAF-2DA and elicited by OGA in the presence of the CPTIO. (G) The cells loaded with DAF-2DA and elicited by OGA in the presence of the L-NAME. (H) Bright field image of the cells loaded with DAF-2DA and elicited by OGA in the presence of the L-NAME.As H2O2 and NO appear to be a key factor associated with plant induced defense disease,it was interesting to test the effect of exogenous NO and H2O2.The effect of OGAs,NO donor SNP and H2O2 at different concentrations and some scavengers are summarized in Figure 6.It was found that treatment with OGAs,SNP and H2O2 protected tobacco leaves against TMV local infection.The least lesion was observed at the treatment of 50μg/ml OGAs among the all treatments.The inhibition effect of H2O2 showed dependence on the amount of H2O2.The lesion of co-treatment of OGAs and the H2O2 scavenger CAT or ascorbic acid on TMV infection was as high as CK.We also observed SNP inducing resistance was dose-dependent.When the tobacco plants were treated with L-NAME before OGAs,the induced resistance was depressed.Therefore,we can presume NO and H2O2 are important factors participating in OGAs inducing resistance to TMV.Figure 6 Effect of OGAs and exogenous NO and H2O2 on disease symptomPectic oligosaccharides,produced by microbial enzymes,are well-known oligosaccharins,eliciting defence responses in diseased plants(Dumville et al.,2000).A broad spectrum of OG-induced pathogenesis-related defense responses has been reported(M.T.Esquerré-Tugayé et al.,2000).Most defense and developmental responses are induced by OGAs with a degree of polymerization(DP)between 10 and 15 galacturonic acid residues.OGAs with a DP less than 8 can also trigger defense responses in plants:they induce accumulation of protease inhibitors(T.Moloshok et al.,1992),ethylene production(S.D.Simpson et al.,1998)and elicitation of genes involved in jasmonic acid metabolism in tomato(C.Norman et al.,1999).In this report,we observed the OGAs with a DP between 2~8 could induce tobacco resistance to TMV.The concentration of OGAs used was also discussed.OGAs-induced plant growth has been reported(LoSchiavo et al.,1991;Filippini et al.,1992),and the maximal effect to growth was about 10-4 M(Stephen et al.,1993).To elicit plant defense responses,OGAs concentration higher than those usually required for control developmental process.In our experiments,50μg/ml was the best concentration to induce resistance within 100μg/ml(data not shown).It showed the efficiency of the OGAs in inhibition of virus infection was not depended on the dose of OGAs.But the inhibition effect was dependent on the treatment time.We observed the inducing effect of resistance to TMV was gradually elevated before 19d,but the mechanism of this needed further study.Research showed that lag period of the induced resistance of glucohexaose was about 7days and the protection period was about 28 days(Li Hongxia et al.,2005).Furthermore,tobacco plants treated by sulfated fucan or linear β-1,3 glucan showed resistance to TMV or bacterium E.carotovora after 5 days(Olivier Klarzynski et al.,2003;2000).So far no oligosaccharides were reported to have so long time inducing effect.Therefore,OGAs have more predominance to be applied in agriculture.Experimental results also showed that NO and H2O2 played important roles in OGAs inducing tobacco resistance to TMV.NO and H2O2 as important signaling active molecules in pathogen defense reaction has been extensively studied(Levine et al.,1994;Mehdy et al.,1996;Baker et al.,1995;Jabs et al.,1996;Delledonne et al.,1998;Rout-Mayer et al.,1997?;Binet et al.,1998).First,we examine the activity of plant resistance correlated enzymes.Because the activity of PAL has been confirmed elevated by many reports(Messiaen et al.,1994;Lapous et al.,1998;Dixon et al.,1989;Tepper et al.,1990),we just mensurated the PPO,POD,SOD and CAT.This includes the activity of SOD and CAT elevated,so we estimated the extra H2O2 production.To evaluate the stimulatory effect of OGAs on tobacco cells,we measured the production of H2O2 and NO in tobacco cells.The data indicated that OGAs induced the production of H2O2 and NO in epidermal cells of tobacco within a short time.These results were in agreement with the reports by Xiangyang Hu,who claimed OGAs stimulated NO accumulation in the growth medium of ginseng suspension cultures(Hu et al.,2003).Rout-Mayer and Binet discovered respectively H2O2 production within a few minutes after the addition of OGAs to suspension-cultured tobacco cells(Rout-Mayer et al.,1997;Binet et al.,1998).Many reports show H2O2 and NO exist are correlated to plant defense.H2O2 is involved in the induction and/or execution of hypersensitive reaction(C.S.Bestwick et al.,1997).H2O2 is required for the cross-linking of plant cell wall components as a part of the structural defense response(C.Lamb et al.,1997).The production of H2O2 may also lead to the development of an antimicrobial environment within the apoplast(M.Peng et al.,1992).In many cases,H2O2 collaborate with NO to execute invading pathogens.H2O2 and NO production were induced almost at the same time by cryptogein,a fungal elicitor(Foissner et al.,2000).NOS inhibitors compromise the hypersensitive resistance response in Arabidposis and tobacco(Delledonne et al.,1998?;Huang et al.,1998).TMV infection could elevate NOS(nitric oxide synthase)activity,and NO could induce PR-1 expression(Durner et al.,1998).NO,as well as other ROS,have been shown to stimulate the accumulation of SA(Durner et al.,1999),which play a critical signaling role in the activation of plant defense responses after pathogen attack.Furthermore,to test whether OGAs functions on inducing resistance in tobacco via NO and H2O2 pathway,we examined the effects of OGAs,exogenous NO donor SNP and H2O2 on inducing resistance to TMV.It was found that all of these treatments reduced lesion caused by TMV.But co-treatment with OGAs and H2O2 scavenger CAT or ascorbic acid blocked the inducing resistance.The tobacco plants inhibited NOS activity by L-NAME were not induced resistance by OGAs.So the defense response induced by OGAs was connected with NO and H2O2 pathway.The study reported herein reveals that OGAs can induce the production of H2O2 and NO,and induce the defense response against TMV.Our understanding of OGAs induced resistance is sketchy.The mechanisms of OGAs eliciting defense responses of tobacco need further investigation.